几种类型的小鼠缺氧实验.
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3. 4. 5.
所用广口瓶须密闭不漏气,且各瓶容量应一致。 动物死亡后要立即取血,血液要充分与抗凝剂混合, 量要准(即液滴大小相同),各管血滴数要一致, 否则对比性差。试管应事先编号,以免搞错。 记录时间要准确,以一只表为准。 氰化钾有剧毒,勿沾染皮肤、粘膜,尤其是破损处。 要认真仔细观察小鼠活动情况,呼吸深度和尾、耳、 口颜色的变化。
的原因、机制是什么? (完)
分组讨论题
1. 存活时间,死 5. 年龄差异
6. 美蓝的作用 7. 实验一装置的
亡原因和机制
2. 血液颜色
3. 呼吸变化 4. FiO2变化
原理
(完)
钠石灰瓶小鼠 玻璃珠瓶小鼠
氧浓度(%)
时间 两瓶中氧浓度变化关系(模式图)
CO中毒死因
①结合速率= HB+CO HBCO = 1
KCN中毒
Cyt aa3-Fe3+ + CN- → Cyt aa3-Fe3+-CN-
幼鼠耐受缺氧的原因:
1.
中枢方面:
①
② ③
神经系统发育不完善,对氧需求量少; 脑无氧酵解能力强; ATP利用率为成年的1/10;
2.
3.
4. 5.
心脏方面:心肌糖元含量高,新生 30mg/g组织,成年2~4mg/g组织; 血液方面:RBC多; 细胞方面:线粒体呼吸功能强; 全身:体积小,活动少,耗能少。
什么?
3. 各组的呼吸变化有何不同,为什么?
4. 实验一FiO2变化的原因、机制是什么?
(完)
分组讨论题
1. 各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是
什么?
2. 各组血液颜色生成的原因;美蓝的作用是什么? 3. 各组的呼吸变化有何不同,为什么? 4. 年龄差异对缺氧耐受有何不同,为什么? 5. 实验一缺氧装置的原理是什么?其中 FiO2 变化
HB+O2 HBO2
亚硝酸钠中毒
高铁血红蛋白血症(methemoglobinemia)
HB-Fe2+
- NaNO 2
氧化 + NaNO2 HB-Fe3+ +
正常人MHB含量占HB总量的0.07~0.38%,相 当于0.03g%左右 NaNO2中毒时MHB含量占HB总量的10%以上, 相当于1.5g%以上 还原 3+ HB-Fe + 美蓝 HB-Fe2+
HB+O2 HBO2
10
1 2100
1
解离速率= HBCO HB+CO =
HBO2 HB+O2
亲和力= HB+CO HBCO = 200 ~ 300 ②吸入气钟中CO达0.1%,血中HBCO可达50% ③ HBCO使氧曲线左移,血液向组织释放氧减少 ④抑制RBC糖酵解,2,3-DPG减少,氧离曲线左移
取健康小鼠1只,称重; 腹腔注射0.2%氰化钾(按0.15ml /10g体重注射); 观察指标同实验一的2、4项。
3.
实验五:年龄因素的影响
1.பைடு நூலகம்取成年鼠和新生幼鼠各1只;
2. 新生鼠置入青霉素小瓶中,瓶口盖
棉花;与成年鼠共同置入广口瓶并 密闭。
3. 观察活动、呼吸情况和存活时间。
注意事项
1.
2.
缺
氧
——几种类型的小鼠缺氧实验
实验目的和要求
通过在动物身上复制乏氧性、血 液性和组织中毒性等缺氧模型,观察 缺氧时动物的活动、呼吸、血液和粘
膜颜色等指标的改变以及动物的存活
时间,加深理解各类缺氧的发病原因
和机制。
实验动物
每组取成年小鼠7只,新生小鼠1只。 成年鼠称重、编号。 选出两对体重相等或最相近(误差在1g以
内)的成年小鼠备用。
实验一:乏氧性缺氧
1.
取体重相等或相近的小鼠2只,同时密 闭并计时; 观察小鼠的活动、呼吸和皮肤粘膜颜 色的改变,死亡时记录存活时间。 测死亡时瓶内氧浓度(同时测尚存活 鼠的瓶内氧浓度)。
死后立即开胸取心血,观察血液颜色。
2.
3.
4.
实验二:一氧化碳中毒性缺氧
1.
取小鼠 1 只,放入指定装置,调 节 煤 气 流 量 ( 60 个 左 右 气 泡
/min)吸入CO。
2.
观察指标、方法同实验一的 2 、
4项。
实验三:亚硝酸钠中毒性缺氧
1.
2.
取体重相等或相近的小鼠2只;
腹腔注射给药: 0.15ml/10g体重
鼠1 鼠2 √ √ √ √
5%亚硝酸钠溶液 1%美蓝溶液 生理盐水
3.
观察指标与方法同实验一的2、4项。
实验四:氰化钾中毒
1. 2.
实验结果
几种类型缺氧指标的改变
乏氧性
玻璃珠 钠石灰
血液性 CO
NaNO2 NaNO2 +NS +美蓝
组织
年龄
KCN 成年 新生
存活时间 (min) 血液颜色 呼吸变化 FiO2
(%)
- - - - - - -
- - -
分组讨论题
1. 各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机
制是什么?
2. 各组血液颜色生成的原因;美蓝的作用是