金针菇多糖的提取及含量测定
复合酶法提取金针菇多糖及光谱分析
复合酶法提取金针菇多糖及光谱分析摘要：研究了复合酶法提取金针菇（ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓ）多糖的最佳工艺条件，并对金针菇多糖进行了光谱分析。
采用木瓜蛋白酶、纤维素酶复合处理，对加酶质量比、酶解温度、ｐｈ、酶解时间4个因素对多糖提取率的影响进行了正交试验。
确定了复合酶法提取金针菇多糖的最佳工艺条件为酶解温度６０℃，复合酶添加量０．５％，加酶质量比（木瓜蛋白酶∶纤维素酶）２∶１，ｐｈ６．０，酶解时间２ｈ，此条件下多糖提取率可达９．１％。
关键词：金针菇（ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓ）多糖；复合酶法提取；正交试验；光谱分析combined-enzyme extraction and spectral analysis of flammulina velutipes polysaccharidesliang mina,zou dong-huib,guo hong-wenb, li angb（ａ．ｃｏｌｌｅｇｅｏｆｃｈｅｍｉｓｔｒｙａｎｄｃｈｅｍｉｃａｌｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ；ｂ．ｓｃｈｏｏｌｏｆｆｏｏｄａｎｄｂｉｏ－ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，ｑｉｑｉｈａｒ uｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，ｑｉｑｉｈａｒ１６１００６，ｈｅｉｌｏｎｇｊｉａｎｇ，ｃｈｉｎａ）ａｂｓｔｒａｃｔ：ｔｈｅｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｗｅｒｅｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓｂｙｃｏｍｂｉｎｅｄ－ｅｎｚｙｍｅｍｅｔｈｏｄａｎｄｄｅｔｅｃｔｅｄｂｙｓｐｅｃｔｒａｌａｎａｌｙｓｉｓ．ｔｈｅｆａｃｔｏｒｓｉｎｃｌｕｄｉｎｇｄｏｓｅｏｆｃｅｌｌｕｌａｓｅａｎｄｐａｐａｉｎ，ｐｈ，ｄｉｇｅｓｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅａｎｄｔｉｍｅｗere ａｎａｌｙｚｅｄｂｙｏｒｔｈｏｇｏｎａｌtest．ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｏｐｔｉｍｕｍｅｎｚｙｍａｔｉｃｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓｗｅｒｅｅｎｚｙｍａｔｉｃｒｅａｃｔｉｏｎｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ，６０℃； m ａｓｓｒａｔｉｏｏｆｃｏｍｐｏｕｎｄｅｎｚｙｍｅ，０.５％； aｐｐｌｉｃａｔｉｏｎｒａｔｉｏｏｆｐａｐａｉｎｔｏｃｅｌｌｕｌａｓｅ，２∶１；ｐｈ，６．０； rｅａｃｔｉｏｎｔｉｍｅ，２ｈ．ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｙｉｅｌｄｗａｓｕｐｔｏ９．１％ｕｎｄｅｒｔｈｅｓｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ．ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ；ｃｏｍｂｉｎｅｄ－ｅｎｚｙｍｅｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌｔｅｓｔ；ｓｐｅｃｔｒａｌａｎａｌｙｓｉｓ金针菇（ｆｌａｍｍｕｌｉｎａｖｅｌｕｔｉｐｅｓ）又名冬菇、朴菇、构菌、青杠菌、毛柄金钱菌，隶属担子菌亚门（ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔｉｎａ）层菌纲（ｈｙｍｅｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）伞菌目（ａｇａｒｉｃａｌｅｓ）口蘑科（ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｔａｃｅａｅ）金钱菌属（ｆｌａｍｍｕｌｉｎａ）。
微波技术提取金针菇多糖的工业研究
微波技术提取金针菇多糖的工业研究1 引言多糖是天然大分子物质，它几乎存在于所有生物体中，既是提供能量的主要物质(如淀粉、糖原等)，又是生物的结构物质(如纤维素、半纤维素等)。
近几十年来的研究表明，从一些生物体内提取出的多糖物质具有抗肿瘤、抗辐射、抗衰老、增强免疫力等生理功能，具有显著的生物活性[1]，生物多糖的应用越来越受到人们的关注。
金针菇多糖是由D-葡萄糖、D-甘露糖、L-岩藻糖等组成的[2]。
目前提取主针菇多糖的方法多为热水法或碱溶法，提取率较低。
采用超声波协同法提取可使多糖提取率提高，但存在着作用时间长、不利于连续化大生产等缺点。
从已查阅的文献资料看，虽然对金针菇子实体多糖的研究已经有了很大进展。
但是，这些研究基本局限在其组成、结构及生物活性的相关研究上，而对其提取工艺的研究则较少，且研究不够系统和深入，提取技术还有待成熟。
新一代的研究体系主要对金针菇子实体多糖提取方法及其强化工艺进行研究，探讨温度、时间、液料比等因素对提取率的影响，并进行碱法和酶法[3]及微波和超声波强化提取的工艺优化。
也有对物理法与化学溶剂提取法相结合提取和分离多糖的工艺进行研究[4—5]。
研究表明，应用新的提取方法对金针菇子实体多糖进行提取，其多糖的提取率比热水提法明显提高。
应用微波和超声波强化均能提高多糖的提取率，微波和超声波强化处理后再在热水中提取效果会更好。
最佳的微波处理时间为3min，超声波处理时间为8min。
此法较传统的提取方法有很多优点，快速、安全、高效，是对资源的合理开发，实现自然资源再生的绿色工艺。
通过高效利用及无(少)废物生产的接口技术，将系统内各组分衔接成良性循环的整体，加快系统内的物质循环流动和能量的多级传递。
在提高生态系统的自我调节与自然能力的同时，形成一个产投比高的开放经济系统。
本文就微波提取法在提取功率、提取时间、料液比和热水浸提时间四个方面对金针菇多糖取得率的影响进行了研究，运用的方法为正交实验法,确定出提取金针菇多糖的最佳工艺为微波功率520W，微波处理时间5min，料液比1:25,，60℃热水浸提时间40min。
蘑菇多糖提取实验报告
一、实验目的1. 学习蘑菇多糖的提取方法；2. 掌握蘑菇多糖的鉴定与检测技术；3. 研究蘑菇多糖的生物活性。
二、实验原理蘑菇多糖是一种生物活性物质，具有多种生物学功能，如抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等。
本实验采用水提醇沉法提取蘑菇多糖，并对其理化性质、结构特征和生物活性进行鉴定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 蘑菇子实体：香菇、金针菇等；- 无水乙醇、丙酮、正己烷等有机溶剂；- 碘液、硫酸铜溶液等试剂；- pH计、紫外分光光度计等仪器。
2. 实验仪器：- 电子天平；- 磁力搅拌器；- 烘箱；- 冷冻离心机；- 超声波清洗器；- 离心管、烧杯等实验器材。
四、实验方法1. 蘑菇子实体的预处理将蘑菇子实体洗净，去除杂质，切碎，用蒸馏水浸泡过夜。
2. 蘑菇多糖的提取将浸泡好的蘑菇子实体加入蒸馏水中，搅拌提取2小时；将提取液过滤，收集滤液；将滤液用无水乙醇沉淀，离心分离；将沉淀物用蒸馏水溶解，重复上述沉淀、离心步骤，直至沉淀物基本溶解；将溶解后的沉淀物用丙酮沉淀，离心分离；将沉淀物用蒸馏水溶解，得蘑菇多糖粗品。
3. 蘑菇多糖的鉴定与检测（1）外观鉴定：蘑菇多糖粗品为白色粉末；（2）溶解性检测：蘑菇多糖粗品可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂；（3）分子量测定：采用凝胶渗透色谱法（GPC）测定蘑菇多糖的分子量；（4）单糖组成分析：采用高效液相色谱法（HPLC）分析蘑菇多糖的单糖组成；（5）生物活性检测：通过体外抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等实验，检测蘑菇多糖的生物活性。
五、实验结果与分析1. 蘑菇多糖粗品的外观为白色粉末，可溶于水、乙醇、丙酮等溶剂。
2. GPC结果显示，蘑菇多糖的分子量在10-100 kDa之间。
3. HPLC分析表明，蘑菇多糖主要由葡萄糖、甘露糖、半乳糖等单糖组成。
4. 生物活性检测结果显示，蘑菇多糖具有抗肿瘤、降血糖、增强免疫力等生物活性。
六、实验结论本实验成功提取了蘑菇多糖，并通过鉴定与检测，证实了蘑菇多糖具有多种生物活性。
金针菇多糖的提取及含量测定
பைடு நூலகம்
ｖｇ ａｄｔｅ ｒｄｎ ｒｃ ｉ ｔ ｂ ｔａｏ Ｑ ａ ｔａｖｌ ｄｔ ｍｉ ｅｐ ｌ ａｃａｉｅ ｏｔ ｔ ｙａｔｒｎ—ｕｆｒ ｃ ａ， ｎ ｈｎｇａｉｇｐｅｉ ｔｅ ｙｅ ｎ １ ｕｎｉｌ ｅ ｅｅ ｎ ｔ ｏ ｓｃｈｒ ｓｃｎｅ ｎｈｏｅ ｓｌ ｉ ａｉ ｐａ ｈ ． ｔｉ ｙ ｒ ｅｈ ｙ ｄ ｎｂ ｕｃ ｄ
糖含量测得的 Ｒ Ｄ小 于 ２２ ％，回收率为 ９ ．％～ ０ ．％。 Ｓ ． ４ ７ ６ １２８
关键词 ：硫酸一蒽酮法 ；金针菇多糖 ；提取 ；含量测定 中图分类号 ：Ｒ ８ ．：０ ２ ， ２ ４２ ６ ９１ ２ 文献标志码 ：Ａ
Ｅｘｒ ｃｉｎ ａ ｄ Ｃｏ ｔｎ ｔｒ ｎ ｔ ｎ ｏ ｏｙ ａ ｃ ａ ｉ ｒ ｍ ｔａ ｔｏ ｎ ｎ ｅ ｔＤｅｅｍｉ ａｉ ｆＰ ｌ ｓ ｃ ｈ ｒｄｅｆｏ ｏ Ｆａ ｌｍｍｕ ｉ ａ Ｖｅｕ ｉｅ ｌｎ ｌ ｔ ｓ ｐ
Ｎｏ９ ．
Ｓ ｐ ｅ．
文章编号 ：１７ — ６ ６（ ０ ７） ９ ０ ７ — ２ ６ １９ ４ ２ ０ ０ — ０ ０ ０
金针菇 多糖 的提取及含 量测定
徐 亚杰 ，宁 波 ，王 磊 ，张锦 玉 ， 逯 家富
１０ ３ ） ３ ０ ３ （ 长春职业技 术学 院， 吉林 长春
摘 要 ：探讨 了用 温度 ７ 热水提取 、ｓｖｇ 除蛋 白、乙醇分级沉淀提取 金针菇多糖 ，以及用硫 酸 一葸酮法测定其 ０ ｅａ 法 含量 的方法 。该 方法测得多糖的总收率为金针菇湿质量的 ０１％，测定 多糖 的线性范 围为 １ １ ｇ Ｌ ．１ ～ ６ ／ ，对金针菇多 ｍ
金针菇液体培养提取菌丝体多糖的工艺
金针菇液体培养提取菌丝体多糖的工艺
金针菇液体培养提取菌丝体多糖的工艺，具体操作流程如下：
1. 选取优良的金针菇菌株，接种到麦芽汁琼脂培养基中，保存于25℃下。
2. 用金针菇菌种接种至液体培养基中（如马铃薯蔗糖培养基），在28℃、180rpm的条件下培养2-3天。
3. 培养结束后，通过高速离心分离菌丝体和培养基，将菌丝体用去离子水洗涤数次。
4. 洗涤干净的菌丝体用去离子水重悬，加入0.1mol/L的NaOH 进行超声破细胞处理。
5. 破细胞后，用去离子水洗涤数次，去除残渣和碎细胞。
6. 用去离子水调整溶液pH至
7.0左右，加入适量的酸进行沉淀，后过滤取沉淀物。
7. 最后，取沉淀物用去离子水重悬，经过凝胶色谱等方法可以得到高纯度的金针菇菌丝体多糖。
以上工艺流程可用于金针菇菌丝体多糖的大规模生产和提取。
金针菇多糖的提取、分离纯化及部分生物活性研究的开题报告
金针菇多糖的提取、分离纯化及部分生物活性研究
的开题报告
一、研究背景
金针菇（Flammulina velutipes）是一种常见的食用菌，具有较高的营养价值和药用价值。
其中的多糖是其重要的活性成分，具有多种生物活性，如抗氧化、抗肿瘤、调节免疫等，因此备受关注。
目前，多糖的提取、分离纯化和活性研究已成为金针菇研究的热点之一。
二、研究目的
本研究旨在提取、分离纯化金针菇多糖，探究其部分生物活性。
三、研究内容
1. 金针菇多糖的提取
采用加热水提取法或超声波提取法，优化提取条件，确定最佳工艺参数。
2. 金针菇多糖的分离纯化
采用离子交换层析、凝胶渗透层析等方法对多糖进行分离纯化，并测定纯化后的多糖含量和分子量。
3. 金针菇多糖的部分生物活性研究
采用体外试验方法，测定多糖的抗氧化和抗肿瘤活性，并探究其作用机制。
四、预期结果
1. 确定金针菇多糖的最佳提取工艺条件。
2. 分离纯化金针菇多糖，得到高纯度的多糖。
3. 研究金针菇多糖的抗氧化和抗肿瘤活性，为其应用于食品和药品等领域提供理论依据。
五、研究意义
本研究可以为金针菇多糖的加工利用提供技术支持，同时也对其生物活性的探究具有重要意义，为金针菇在食品和药品领域开发和利用提供了新思路。
香菇多糖和金针菇多糖的提取及其抑菌活性
菌 和 白色 念 球 菌 的 最 小抑 菌浓 度 分 别 为 ０ ． １ ５ 、 ４ ． ８ 、 ４ ． ８ ｍｇ ／ ｍＩ ； 香菇菌柄多糖 ， 对大肠杆菌 、 金 黄 色 葡 萄 球 菌 和 白色 念 球 菌 的 最 小 抑 菌 浓度 分 别 为 ２ ． ４ 、 ４ ． ８ 、 ４ ． ８ ｍｇ ／ ｍＩ ． 不 同 浓 度 的 香 菇 多糖 对 大 肠 杆 菌 、 金 黄 色 葡 萄 球 菌 和 白球 念 球 菌 的 抑 制 活 性不 同 ； 香 菇 胞 外 多糖 和香 菇 菌 柄 多 糖 对 大 肠 杆 菌 、 金 黄 色 葡 萄 球 菌 和 白球 念 球 菌 的抑 制 活 性 存 在 差 异 ．
近 年来 ， 关 于香 菇 多糖抑 菌 活性 的报 道 较多 ，
（ Ｓｔ ａ ｐ ｈ ｙ ｌ ｏ ｃ ｏ ｃ ｃ ｕ ｓ ａ ｕ ｒ ｅ ｕ ｓ ） ＡＴＣ Ｃ６ ５ ３ ８和 白 色 念 球
菌（ Ｃ ａ ｎ ｄ ｉ ｄ ａ ａ ｌ ｂ ｉ ｃ ａ ｎ ｓ ） ＡＴＣ Ｃ１ ０ ２ ３ １ ， 均 由 本 实 验 室
公 司） 、 振荡器 （ ＶＴＸ ３ ５ ０ ０ ， Ｌ ＭＳ Ｃ Ｏ ． ， Ｉ ＴＤ ． ） 、 离 心机 （ Ｔ Ｇ１ ６ 一 ｗｓ ， 长沙湘 智离 心机仪器 有 限公 司 ） 、 电热 恒 温 鼓 风 干 燥 箱 （ ＤＨＧ 一 ９ ０ ５ ３ Ａ， 上 海 精 宏 实 验设 备有 限公 司） 、 旋转蒸发器 （ Ｒ ２ ０ ｌ ， 郑 州 长 城 科 工贸 有 限 公 司 ） 、 循 环水式 多用 真空泵 （ Ｓ ＨＢ －
香 菇 多糖 和 金针 菇 多糖 的提 取 及 其抑 菌 活性
胡国 元， 李 超影， 陈 默， 张 芊， 张 哲
（ 武汉 工程 大 学化 工 与制 药学 院， 绿 色化 工过程 教 育部 重 点 实验 室 ，
金针菇多糖的提取及其美容功效评价
金针菇多糖的提取及其美容功效评价李守勉1，任清2，李明1，田景花1（1.河北农业大学园艺学院，河北保定071000 2. 北京工商大学植物资源研究开发重点实验室，北京100037 ）摘要：利用热水浸提法从金针菇中提取多糖，通过四因素三水平的正交实验得到金针菇多糖的最佳提取工艺为：料水比为1：5、浸取温度为95℃、浸取时间为5h、pH值为8，最高得率为：1.1254%。
通过抗氧化效果和保湿效果测试证明了金针菇多糖具有较好的保湿能力和一定的抗氧化能力。
关键词：金针菇多糖：提取：抗氧化；保湿Extraction of polysaccharides in Flammulina velutipe and itsfunctions in cosmeticsLI Shou-mian 1; REN Qing 2 ; Li-ming 1; Tian-jinghua 1（1.Department of Horticulture;Hebei Agricultural University;Baoding 071001;China 2. Schoolof Chemical and Environmental Engineering;Beijing Technology and Business University;Beijing 100037;China;）Abstract: Ploysaccarides was extracted from Flammulina velutipes by the method of immerse in hot water. The optimum conditions for the extraction were obtained by using four three levels matrix-experiment. The suitable conditions for the extraction design are as follows: ratio of raw material to water is 1:5, extraction temperature is 95℃, time is 5h, pH 8, the biggest extract-ratio is 1.12545%. By the anti-oxidation test and Moisture test, it was indicated that polysaccharides extracted from Flammulina velutipes have good moisture retaining quality and certain anti-oxidation quality.Keywords:Flammulina velutipes polysaccharide, extract, anti-oxidation, moisturize金针菇（Flammulina velutipes）别名毛柄金钱菇、枸菇、冬菇、朴菇和构菌等0，金针菇属于伞菌目、口蘑科和小火焰菌属0。
DNS法测定金针菇粗多糖含量的研究
DNS法测定金针菇粗多糖含量的研究作者：秦瑞鑫孙玉帅朱奕彤穆秀燕张玉苗来源：《绿色科技》2019年第18期摘要：为测定金针菇中总的粗多糖含量，采用热水提取法提取了金针菇多糖，通过二硝基水杨酸显色法，以葡萄糖为对照，测定了还原糖和总糖的含量，二者差值即为总的粗多糖含量。
结果表明：金针菇中粗多糖含量为0.05mg/mL;DNS法的重复性、稳定性、加样回收均较好，提高了试验的准确度和效率。
DNS法操作简单，所受干扰较少，适合于快速测定金针菇样品中总的粗多糖含量。
中图分类号：R284.2 文献标识码：A 文章编号：1674-9944（2019）18-0173-031引言金针菇（Flammulinavelutiper）又名冬菇，隶属白菇科、金线菌属，是一种食药两用菌，广泛分布于世界各地。
金针菇味道鲜美，富含蛋白质和多种活性营养物质。
其中，精氨酸和赖氨酸含量较高，有利于促进儿童智力发育，因此金针菇也被称为“益智菇。
金针菇多糖作为其主要活性营养物质之一，具有抗氧化、抗肿瘤、抑菌、抗衰老等多种功效，被广泛应用于医药和食品加工等领域。
目前，广大研究者对于金针菇多糖的研究主要集中在分离纯化、结构探析、相关产品开发等方面。
金针菇粗多糖的提取及快速测定是开展相关研究工作的基础。
目前，常用的金针菇多糖提取方法有单一酶法、超声波法、微波法。
但上述方法对设备要求较高，酶易失活等缺点很难应用到实际食用菌多糖工业生产中。
热水提取法操作简单、成本较低、灵活性强，为解决上述问题提供了途径。
目前，常用于多糖测定的传统方法有苯酚一硫酸法和蒽铜一硫酸法，但上述方法无法排除还原糖对测得结果的影响，且浓硫酸具有强腐蚀性，应用极为不便。
DNS法利用在偏碱性条件下，还原糖和总糖分别与3，5一二硝基水杨酸发生显色反应，从而可以准确、快速测定出还原糖与总糖的含量，二者差值即为多糖含量。
DNS法目前已广泛应用于多糖含量的测定。
但DNS法快速测定金针菇多糖的报道较少，为此，本试验采用热水提取法和DNS法来测定金针菇中多糖含量，为金针菇多糖的相进一步开发利用提供参考。
香菇、金针菇、黑木耳多糖的提取与测定
香菇、金针菇、黑木耳多糖的提取与测定作者：杜娟时文静来源：《江苏农业科学》2016年第08期摘要：以香菇、金针菇及黑木耳3种常见食用菌为主要原料，研究了食用菌多糖的提取条件和测定方法。
采用热水浸提、乙醇沉淀的方法提取多糖，然后运用苯酚-硫酸法测多糖含量。
分别从液料比、浸提温度、浸提时间、乙醇浓度进行了单因素试验，在此基础上，设计L9（34）的正交试验，得出3种食用菌多糖提取的最优组合。
结果表明，影响香菇和金针菇多糖提取的主次因素是一致的，依次为浸提温度、乙醇浓度、液料比；而对于黑木耳，液料比是最显著的影响因素，其次为乙醇浓度、浸提温度。
最终测定的多糖含量香菇最高，为3.51%；其次为黑木耳，为3.50%；最低是金针菇，为2.94%。
关键词：香菇；金针菇；黑木耳；多糖；提取；苯酚-硫酸法中图分类号： R284.2文献标志码：文章编号：1002-1302（2016）08-0347-03食用菌中的多糖类物质是增强免疫活性和抗衰老的有效成分之一，具有抗肿瘤、抗病毒、抗突变、抗辐射和降血压等功能[1]。
从食用菌中提取的多糖可作为配料添加到食药保健品中，不仅没有毒副作用，而且还能提供功效高、质量好的产品。
现代医学研究发现，食用菌中显著增强癌症患者抵抗力的生理活性物质即为食用菌多糖[2]。
香菇、金针菇、黑木耳都是日常生活中常见的食用菌，均含有十分丰富的多糖物质。
香菇多糖是一种天然人体免疫调节剂，具有调节人体免疫系统、抗病毒、抗感染以及延缓衰老等作用；金针菇多糖不仅能有效提高人体免疫力，而且还有抗感染、抗氧化、保肝保湿、辅助改善记忆和缓解体力疲劳等保健作用[3]；木耳多糖同样是一类重要的活性物质，在抗肿瘤、抗凝血、抗病毒等方面均有一定的生物活性。
本研究主要以香菇、金针菇、黑木耳为原料，利用水提醇沉法提取多糖，并对提取条件进行优化，分别从液料比、浸提温度、浸提时间、乙醇浓度进行单因素试验，在此基础上设计正交试验，以确定最佳提取条件。
物理波强化提取金针菇多糖
２２现代化农业２００１年第６期（总第２６３期）物理波强化提取金针菇多糖邓岩，张英华（黑龙江省佳木斯市产品质量监督检验所，佳木斯１５４００２）１试验材料试验用金针菇子实体从广州农科所购得，选用质地优良的干品并粉碎过０．２ｃｍ筛孔；试验用试剂均为分析纯。
２试验方法试验中多糖的计算方法为：多糖一总糖一还原糖。
总糖采用酚一硫酸法测定，以葡萄糖为标准品；还原糖采用３，５一二硝基水杨酸比色法测定。
２．１微波强化提取金针茹子实多糖ａ．微波处理后直接测量准确称取一定量金针茹子实样品加４０倍体积的蒸馏水，取一样品于６６ＤＣ提取１０ｍｉｎ，以其提取液作对照，其余样品在微波炉中用低火（约１２５℃）分别处理０、１、２、３、４、５、６ｍｉｎ，离心、过滤、测量。
测量结果分别为总糖：４．２３％、７．２１％、８．１０％、９．２３％、８．２２％、７．０２％、５．７３％；还原糖：０．４７％、０．６８％、０．７７％、０．８６％、０．７６％、０．６０％、０．４０％；多糖：３．７６％、５．４３％、７．４３％、８．４６％、７．４６％、５．４２％、５．２７％。
从结果看出，微波处理小于３ｍｉｎ的提取液中，总糖、还原糖、多糖的质量百分数随处理时间增加而提高，但当处理时间超过３ｍｉｎ时，随处理时间增加而逐渐减少。
ｂ．微波处理后用热水提取微波处理（同上）后，再在６０℃水浴中提取２ｈ，离心、过滤、测量。
测量结果分别为总糖：１０．３９％、１１．１５％、１４．５２％、２０．３８％、１５．３７％、１４．４０％、１３．７３％；还原糖：０．５１０，４、０．６８％、１．ｏｏ％、１．１０％、１．１５％、１．３８％、２．２１％；多糖：１９．１７％、１９．８８％、２３．１１％、２５．３８％、收稿日期：２００１－０４—２０１９．２８％、１７．３２％、１５．２２％。
从结果看出，微波处理超过３ｍｉｎ时还原糖的质量百分数继续增加，而总糖和多糖则减少，说明在微波处理阶段还原糖虽然一部分已被浸出但还没有完全进入溶液中，在热水提取阶段才进入。
金针菇多糖的研究进展
金针菇多糖的研究进展摘要:金针菇多糖是一种从金针菇中提取出的物质,具有抗癌活性和增强免疫等功能。
本文介绍了金针菇多糖的分离纯化、生理活性等方面的工作。
关键词:金针菇多糖分离纯化研究进展1 金针菇多糖的概述1.1 金针菇及培养据测定,金针菇含有18种氨基酸,尤其含赖氨酸和精氨酸,其含量高于一般菇类。
金针菇的生产有两种方法:一是固体培养,二是通过深层发酵生产。
前者生产周期长,受条件的影响大,不易大规模工业化生产;而后者弥补了上述不足,而且可以通过发酵过程的优化控制来定向生产生物活性物质,使生产工艺更趋合理,因此,深层发酵法是当今金针菇研究和开发的趋势和热点[1]。
研究表明,用于金针菇深层发酵生产最适宜的发酵培养基的组成为:50%玉米粉、3.0%鼓皮、0.1%KH2PO4,0.05%MgSO4·7H20,10μg/100mlVBi,50μg/l00mLVB2。
适宜的摇瓶发酵条件为:培养温度20℃～25℃、培养基起始pH6.0～7.0,摇瓶装量500mL,装100mL～160mL、种子培养时间3天～4天、接种量10%～15%、摇瓶转速120rpm～200rpm,添加消泡油不少于0.1%为宜[2]。
1.2 金针菇多糖初步提取与纯化分析目前,提取粗多糖的方法有水提醇析法、盐析法、超滤法、酶法、复合酶解法、色谱法等,但是,基本提取方法大都采用水提醇析法的模式,酶法提取的效果最好,但成本较高[3]。
金针菇多糖提取的一般工艺流程如下:新鲜金针菇→干燥→机械粉碎→浸提→离心→滤渣复提→并上清液浓缩→醇析→离心分离→收集沉淀→干燥多糖粗品[4]。
1.3 金针菇多糖的研究现状日本学者从20世纪60年代开始就热衷于对金针菇中抗肿瘤物质的研究。
1963年,日本学者K·Nakashi和Y·Watanake报道,他们从金针菇中提取到一种叫朴菇素的物质。
它是一种分子量为23000的碱性蛋白质,含氮量16.6%,且含18种氨基酸。
金针菇水溶性多糖提取与含量测定
金针菇水溶性多糖提取与含量测定生物技术二班组长：韩晓煜组员：吴林林，韩厅，王艺超，陈金，李满成，徐鹏飞，陶道亮金针菇水溶性多糖提取与含量测定实验目的：金针菇学名毛柄金钱菌，又称毛柄小火菇、构菌、朴菇、冬菇、朴菰、冻菌、金菇、智力菇等，英文为："Enoki Mushroom "，拉丁文学名为Flammulina velutiper (Fr.) Sing.。
因其菌柄细长，似金针菜，故称金针菇，属伞菌目白蘑科金针菇属，是一种菌藻地衣类。
金针菇具有很高的药用食疗作用。
本实验采用水提醇沉法提取多糖。
实验原理：利用多糖的水溶性而不溶于乙醇的特性方法提取金针菇中的水溶性多糖，并测定提取出的多糖的含量实验材料：金针菇实验仪器:微波炉、恒温水浴锅、粉碎机、离心机，恒温箱、量筒、烧杯、锥形瓶、玻璃棒、容量瓶、电子天平试剂：蒸馏水、95%乙醇试验步骤：一、粉碎：取新鲜的金针菇若干，放入微波炉中烘干，取烘干后的的金针菇放入清理干净的粉粹机里粉碎5min；二、称量：取出粉碎后的金针菇粉末，精确称量20g三、浸提：按照料液比1:16与蒸馏水混合装进容量瓶，放入微波功率为600w的微波炉中，辐射时间为10min，然后将样品放在90℃的水浴锅内，加热2小时；四、离心：将水浴后的混合液在转速为5000r/min离心机内离心30min，取上清液，弃沉淀；五、 醇沉：加入2倍体积的95%乙醇，轻轻摇动，静置10min ；六、 离心：然后再在转速为5000/min 离心机内离心30min ，弃上清液，取底部沉淀，沉淀为粗制多糖；七、 干燥：将得到的粗制多糖放入恒温烘箱内烘干；八、 称量：用电子天平称量得到的粗制多糖的质量。
实验现象：实验数据：金针菇的质量： 多糖的含量：实验结果：计算多糖的含量）金针菇粉末质量（）总多糖含量（多糖提取率g g实验讨论：。
金针菇多糖提取
金针菇多糖提取试剂：蒸馏水、纤维素酶、无水乙醇、氯仿、正丁醇、氯化钠、三氯乙酸、氢氧化钠仪器设备：烘箱、浓缩装置、离心机、真空干燥机、冰箱、色谱柱、冷冻干燥机工艺流程：原料-预处理--酶解--浸提--浓缩--醇析--脱蛋白--干燥--多糖纯品--精制--多糖精品（1）原料新鲜金针菇（2）预处理新鲜金针菇65°C烘干6h制成干品，将金针菇子实体干品粉碎，粉碎粒度为3--5mm，粉碎后装入容器中加入2倍质量的水，在90-95°C条件下加热处理10-15min，得到金针菇子实体匀浆（3）酶解向匀浆中加入0.15%的纤维素酶以破坏金针菇子实体的细胞壁，使多糖释放出，来，酶解温度40°C ,ph为4,5时间为3h（4）浸提向容器中加入20倍样品质量的水，在100°C，ph6.5的条件下浸提1h，过滤并收集滤液（5）浓缩将滤液在40°C压力0.2MPa条件下浓缩至原体积是我1/3（6）醇析向浓缩液中加入无水乙醇至乙醇含量为70%，可以看到有沉淀析出，静置一段时间至沉淀完全析出，在离心分离，收集沉淀，并烘干得到多糖粗品（7）纯化脱蛋白质将多糖粗品按样品与氯仿-正丁醇（氯仿-正丁醇之比为1:0.2）之比为1:0.25复溶并进行充分震荡，可将游离蛋白变性成为不容性物质，经离心分离去除，此过程通常反复进行5-8次，每次震荡30min，才能很好的去除蛋白质，除蛋白后的多糖溶液进行真空干燥，即可得到纯多糖产品（8）精制粗多糖粉末溶于0.1mol/L的氢氧化钠溶液中，至于5-8°C冰箱冷置12h,离心弃去沉淀、滤液加入40%的三氯乙酸使之达到8%的含量，再置于冰箱中5-8°C冷置12h离心，将沉淀加入0.1mol/L氯化钠溶液洗脱分离，用硫酸-苯酚跟踪检测，收集（收率约为45%）多糖组分的母液，再取母液以0.1mol/L的氢氧化钠溶液中和至ph6.5-7.0，然后将上述洗脱液适当浓缩，蒸馏透析后，在用色谱分离纯化。
金针菇多糖的制备与鉴定
in oven drying in vacuum
methanol washing, dissolved with distilled water
thinlayer chromatography
sample quantity control in 550 ug, wait for drying samples (hair dryer blow dry or natural drying)
Operating procedures
200g flammulina velutipes
Water 1000ml
Filtrate(纱布）
Boiled 60min
Add alcohol until the 4℃ 30min Supernatant layer concentration is 40% Supernatant layer Add alcohol until the 4℃ 60min concentration is 60% centrifugalize 3000rpm10min
Principle
Quantitive determination: After hydrolyzed in concentrated sulfuric acid, polysaccharide is further dehydrated into aldose derivation that can form colored compound with anthrone.
Precipitate 1
centrifugalize Precipitate 2 3000rpm10min
dissolve precipitate add ¼ volume of centrifugalize Shake 20min 1 and 2 with water chloroform-butanol(4:1) 3000rpm10min Add triple amount of alcohol Supernatant layer Centrifugalize3000rpm×10min Wash the precipitate separately with 1v alcohol Precipitate 1 and 2
超声辅助法提取金针菇多糖的工艺优化
２ ０ １ ３ 。 Ｖ ｏ Ｉ ． ３ ０ Ｎ ｏ ． ４ 亿 Ｃ ｈ 亏与耋物 互程
ｅｍ ｉ ｓ ｔ ｒ ｙ ＆ Ｂｉ ｏ ｅ ｎ ｇ ｉ ｎ ｅ ｅ ｒ ｉ ｎ ｇ
超 声 辅 助 法提 取 金 针菇 多糖 的工 艺优化
韩秋菊 ， 魏 宝 海
（ 辽 宁石 油化 工 大学环境 与生物 工程 学院 ， 辽宁 抚顺 １ １ ３ ０ ０ １ ）
针菇 粉 ， 按 一定 比例 加入蒸 馏水 ， 超声处理 ， 热水浸 提 ；
于３ ０ ０ ０ ｒ・ ｍｉ ｎ － １ 离心 １ ０ ｍｉ ｎ ， 取 上 清液 ， 加入 ３ Ｂ Ｖ 无水 乙醇 ； 再于 ５ ０ ０ ０ ｒ・ｍｉ ｎ ． １ 离心 １ ０ ｍｉ ｎ ， 取沉淀，
金针菇（ Ｆ ｌ ａ ｅｍｕ ｒ ｌ ｉ ｎ ａ ｖ ｅ ｌ ｕ ｔ ｉ ｐ ｅ ｓ ） ， 属 于担 子 菌 目
将金针 菇烘 干 ， 粉碎 ， 石油醚 脱脂 。称 取 ２ ． ０ ｇ金
金钱 菌属 ， 是世界 第三 大食 用菌 ， 具有 较高 的营养 价值 和 医疗保健 价值［ １ ］ 。金 针菇 多糖 是金 针菇 主要 的活性 成分 之一 ， 北 方 品种 多糖 含 量 为 ３ ～８ ９ ， ６ 左右 ， 具 有 抗 肿瘤 和免疫调 节 等多种 生理 活性 ［ ２ ］ ， 但 因其提 取率 低 而限制 了应用 。因此 ， 进 一 步 研 究 金 针菇 多糖 的提 取、 纯化方 法 ， 了解 金针 菇 多糖 的 结构 及 药 理 ， 对 金针 菇 资源 的利用 和开 发具有 十 分重要 的意 义 。 近 年来 多种新 的提取 工 艺 ， 如微 波辅 助提 取法 ］ 、 超声波 辅助 提取法 、 超 临 界 流 体萃 取法 等 已 成功 用 于 各种食 用菌 多糖 的提取 ， 相对 于 传统方 法 ， 这 些方 法显 示 出较大 的优势 ， 但 这 些 新 技 术 在 金针 菇 多 糖 提取 中 的研 究仍然 较少Ｌ ６ ］ 。
金针菇加工副产物水溶性多糖提取工艺研究
蛋 白 质 含量 ／ ・ｇ ） （ ｋ ｇ 图 ２ 蛋 白质 含 量 标 准 曲 线
２２ 单 因 素试 验 结 果 与 分 析 ．
２２１ 料 液 比对 多糖 提 取 率 的影 响 取 ４ 金 针 菇 子 实 体 ． ． 份 粉末 ， 分别 以 １ １ 、 ：０ １３ 、 ：０ 入 蒸 馏 水 ， ９ ℃提 取 ：０ １２ 、 ：０ １４ 加 在 ０
Ｒ
０．９ ０． ０ ０ ２ ０ ３ ３ １６ ．０ ０３ ７ ．７
由 图 ５ 知 ， 糖 提 取率 随 时 间 的增 加 而逐 渐 增 加 ， 是 可 多 但 随 着 提 取 时 间 的增 加 超 过 ３ｈ ， 糖 提 取 率 变 化 减 小 ， 虑 后 多 考 到 提取 时 间 过 长 给工 艺 带 来 不 便 ， 此 选 择 ３ 因 宜。 ｈ为 ２ ． 提 取 次 数 对 多糖 提 取 率 的影 响 取 ４ 金 针 菇 子 实 ．４ ２ 份 体 粉 末 ， １ ２ 加 入 蒸 馏 水 ， ９ ￣提 取 温 度 下 浸 提 ２ｈ 分 按 ：Ｏ 在 ０ Ｃ ，
０
溶 性 多 糖 ， 金 针 菇 多 糖 产 品 开 发 提 供 一 定 参 考 意 义 ， 金 为 为 针 菇 加 工 副 产 物 的综 合 利 用 提 供 一 条 切 实 可 行 的 途 径 。
葡 萄 糖 含 量／ｍｇｋ ） （ －ｇ
１ 材 料 与 方 法
１１ 材 料 与 仪 器 ． 金 针 菇 加 工 副 产 物 （ 柄 、 盖 、 形 菇 菌 菌 畸
解 后 采 用 Ｓｖｇ 除 蛋 白 。离 心 取 上 清 液 进 行 浓 缩 后 真空 冷 ｅａ 法 冻 干 燥 ４ ， 金 针 菇 粗 多 糖 。 ８ 得 ｈ １ ． 含 量 测 定 采用 苯 酚 一 酸 法 测 定 多 糖 含 量 ： 用 考 ．２ ３ 硫 采 马斯 亮 蓝 法 测 定 蛋 白质 含 量 Ｉ 。
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２ 实验原理
金针菇多糖在浓硫酸的作用下可脱水生成糖醛衍 生物， 后者再与蒽酮作用形成蓝色化合物［６］， 与同法 处理的标准葡萄糖溶液比色定量。
３ 结果与讨论
３．１ 葡萄糖标准曲线的制作 分 别 吸 取 标 准 葡 萄 糖 溶 液 ０．０５， ０．１０， ０．２０，
０．３０， ０．４０， ０．６０， ０．８０ ｍＬ， 置于具塞比色管中， 用 蒸 馏 水 稀 释 至 １．０ ｍＬ， 摇 匀 。 然 后 分 别 加 入 蒽 酮 试 剂 ４．０ ｍＬ， 迅 速 浸 于 冰 水 浴 中 摇 匀 冷 却 ， 各 管 一 起 浸 入 沸 水 浴 中 １０ ｍｉｎ， 取 出 后 冷 水 冷 却 ， 室 温 放 置 １０ ｍｉｎ， 于波长 ６２０ ｎｍ 测吸光度， 以 １．０ ｍＬ 水按同 样操作作为空白， 以葡萄糖浓度 Ｃ 为横坐标， 吸光 度值 Ａ６２０ 为纵坐标， 制得葡萄糖标准曲线。
＊ 为通讯作者： 逯家富 （ １９６１－ ） ， 男， 吉林人， 教授。Ｅ－ ｍａｉｌ： ｌｕｊｉａｆｕ８８８＠１６３．ｃｏｍ。
２００７ 年第 ９ 期
徐亚杰， 等： 金针菇多糖的提取及含量测定
·７１·
温度 ７０ ℃恒温水浴箱中浸提 ４ ｈ， 在转速 ４ ０００ ｒ／ｍｉｎ 下， 离心 ５ ｍｉｎ， 收集上清液。采用 ｓｅｖａｇ 法［５］， 将提 取 液 与 等 体 积 ４∶１ 氯 仿 正 丁 醇 混 合 ， 过 夜 去 蛋 白 ， 然后用旋转蒸发仪减压浓缩至 １００ ｍＬ， 用 １ 倍的体 积 分 数 为 ９５％的 乙 醇 沉 淀 多 糖 ， 离 心 ， 上 清 液 用 ２ 倍的 体 积 分 数 为 ９５％的 乙 醇 沉 淀 多 糖 、 离 心 ， 上 清 液 用 ４ 倍 体 积 的 体 积 分 数 为 ９５％ 的 乙 醇 沉 淀 多 糖 ， 将收集得到的各级组分多糖沉淀溶解、定容于 １ ０００ ｍＬ 的容量瓶中， 备用。
农产品加工·学刊
第 ９ 期（总第 １１２ 期） ２００７ 年 ９ 月
农产品加工·学刊 Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｅｒｉｏｄｉｃａｌ ｏｆ Ｆａｒｍ Ｐｒｏｄｕｃｔｓ Ｐｒｏｃｅｓｓｉｎｇ
文章编号： １６７１－ ９６４６ （ ２００７ ） ０９－ ００７０－ ０２
２００７ 年第 ９ 期
Ｎｏ．９ Ｓｅｐ．
金针菇多糖的提取及含量测定
Ｘｕ Ｙａｊｉｅ， Ｎｉｎｇ Ｂｏ， Ｗａｎｇ Ｌｅｉ， Ｚｈａｎｇ Ｊｉｎｙｕ， ＊Ｌｕ Ｊｉａｆｕ （ Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｃｏｌｌｅｇｅ， Ｃｈａｎｇｃｈｕｎ １３００３３， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｉｓ ｐａｐｅｒ ｒｅｐｏｒｔｓ ｔｈｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｆｒｏｍ ｆｌａｍｍｕｎｌｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ， ｔｈｅ ｐｒｏｃｅｓｓ ｉｓ： ｅｘ－ ｔｒａｃｔ ｔｈｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｆｒｏｍ ｆｌａｍｍｕｎｌｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ ｂｙ ７０ ℃ ｗａｔｅｒ ａｔ ｆｉｒｓｔ， ｔｈｅｎ ｄｅｐｒｏｔｅｉｎｉｚｅ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｏｆ Ｓｅ－ ｖａｇ， ａｎｄ ｔｈｅｎ ｇｒａｄｉｎｇ ｐｒｅｃｉｐｉｔａｔｅ ｂｙ ｅｔｈａｎｏｌ． Ｑｕａｎｔｉｔａｔｉｖｅｌｙ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ ｃｏｎｔｅｎｔ ｂｙ ａｎｔｈｒｏｎｅ－ ｓｕｌｆｕｒｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｏｄ． Ｉｎ ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ， ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｙｉｅｌｄ ｕｐ ｔｏ ０．１１％， ｔｈｅ ｌｉｎｅａｒｌｙ ｒａｎｇｅ ｉｓ １￣１６ μｇ／ｍＬ， ｔｈｅ ＲＳＤ ｉｓ ｎｏｔ ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ２．２４％， ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｉｓ ９７．６￣１０２．８％． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ａｎｔｈｒｏｎｅ－ ｓｕｌｆｕｒｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｏｄ； ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｓ； ｆｌａｍｍｕｎｌｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ； ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ
蒽 酮 （ 质 量 浓 度 为 ２ ｍｇ／ｍＬ） ： 精 确 称 取 蒽 酮 １０．０ ｍｇ， 加 入 适 量 浓 硫 酸 溶 解 后 ， 定 量 转 移 到 １００ ｍＬ 用 黑 纸 包 好 的 棕 色 容 量 瓶 中 ， 定 容 至 刻 度 ， 摇匀， 现用现配。
无水乙醇、氮仿、正丁醇、浓硫酸。以上试剂均 为分析纯。 １．１．２ 仪器
实 验 表 明 ， 在 葡 萄 糖 质 量 浓 度 为 １￣１６ μｇ／ｍＬ 时， 吸光度值与葡萄糖质量浓度呈现良好的线性关 系。 ３．２ 反应时间的选择及稳定性
吸取供试品溶液 １．０ ｍＬ， 加入质量浓度 ２ ｍｇ／ｍＬ 的蒽酮试剂 ４．０ ｍＬ， 按测定标准曲线同样方法操作，
每隔 ２０ ｍｉｎ 测 １ 次吸光度值。结果表明， 测定液在 ２００ ｍｉｎ 的内吸光度值稳定， ＲＳＤ＝２．６４％ （ ｎ＝１１） 。 ３．３ 精密度试验
徐亚杰， 宁 波， 王 磊， 张锦玉， ＊ 逯家富
（ 长春职业技术学院， 吉林 长春 １３００３３）
摘要： 探讨了用温度 ７０ ℃热水提取、ｓｅｖａｇ 法 除 蛋 白 、 乙 醇 分 级 沉 淀 提 取 金 针 菇 多 糖 ， 以 及 用 硫 酸－ 蒽 酮 法 测 定 其
含量的方法。该方法测得多糖的总收率为金针菇湿质量的 ０．１１％， 测定多糖的线性范围为 １￣１６ μｇ／ｍＬ， 对金针菇多
糖含量测得的 ＲＳＤ 小于 ２．２４％， 回收率为 ９７．６％￣１０２．８％。
关键词： 硫酸－ 蒽酮法； 金针菇多糖； 提取； 含量测定
中图分类号： Ｒ２８４．２； Ｏ６２９．１２
文献标志码： Ａ
Ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｔｅｎｔ Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ ｆｒｏｍ Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａ Ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ
０ 引言
金针菇 （ Ｆｌａｍｍｕｎｌｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ） 为担子菌目金钱 菌属， 是一种药食两用的菌， 其子实体含蛋白 ３１．２％， 脂 肪 ５．８％ ， 以 及 ＶＢ１， ＶＢ２， ＶＣ， ＶＰＰ （ 生 物素） 和 １０ 多种氨基酸。
目前， 金针菇已被广泛应用到食品和调味品行业 中， 在国际市场上的消费量仅次于蘑菇和香菇。金针 菇中主要的有效生物活性成分金针菇多糖， 由于具有 抑 制 肿 瘤 、 抗 癌 和 增 强 机 体 免 疫 力 等 ［１￣３］ 作 用 而 被 广 泛受到重视。
精确称取 １００．００ ｇ 金针菇原料， 用 ３００ ｍＬ 乙酸 乙酯在温度 ８０ ℃回流 ２ ｈ， 去脂， 加入 ３００ ｍＬ 蒸馏 水， 用组织捣碎机捣碎， 再加入 ４００ ｍＬ 蒸馏水， 在
收稿日期： ２００７－ ０６－ ２９ 作者简介： 徐亚杰 （ １９６６－ ） ， 女， 吉林人， 副教授， 研究方向： 食品与发酵工业的科研与教学。
ＵＶ－ ２４０１ 型 紫 外 可 见 分 光 光 度 计 ， 日 本 岛 津 产 品； ３－ １８Ｋ 型高速冷冻高速离心机， 德国 Ｓｉｇｍａ 公司 产品； 组织捣碎机， 常州国华电器有限公司提供； 电 热鼓风干燥箱， 上海实验仪器厂产品； ＧＳＹ－ ＩＩ 型 恒 温水浴箱， 北京市医疗设备厂产品。 １．２ 实验方法
精密吸取 ０．５ ｍＬ 样品液 ６ 份， 分别加入一定量 的 对 照 品 溶 液 ， 使 其 总 体 积 为 １．０ ｍＬ， 按 测 定 标 准 曲线同样方法测其吸光度值， 测得平均回收率为 ９７．６％￣１０２．８％。
回收率实验结果见表 １。
表 １ 回收率实验结果
样品
加量 ｍ／μｇ
产出物 ｍ／μｇ
收率 ／％
［２］ Ｋａｎｇ， Ｊｉｅ， Ｗａｎｇ， Ｈｏｎｇ－ Ｑｉｎｇ， Ｃｈｅｎ， Ｒｕｏ－ Ｙｕｎ． Ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ ｏｆ ｔｈｅ ｍｙｃｅｌｉａ ｐｒｏｄｕｃｅｄ ｆｒｏｍ ｆｅｒｍｅｎｔｅｄ ｃｕｌｔｕｒｅ ｏｆ Ｆｌａｍｍｕｌｉｎａ ｖｅｌｕｔｉｐｅｓ （ Ｗ．Ｃｕｒｔ．： Ｆｒ．） Ｓｉｎｇｅｒ ［ Ｊ］ ． Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｍｕｓｈｒｏｏｍｓ， ２００３， ５ （ ４） ： ３９１－ ３９６．
本实验运用水提醇沉法［４］制得金针菇粗多糖， 并 采用苯酚—硫酸比色法对其多糖含量进行测定， 得到 了较好的结果。实验结果表明， 该方法简单、快速， 灵敏度高， 重现性好。
１ 材料与方法
１．１ 材料与仪器 １．１．１ 材料与试剂
金针菇， 北京冠华农业有限公司产品。
标 准 葡 萄 糖 溶 液 （ 质 量 浓 度 为 １００．０ μｇ／ｍＬ） ： 精 确 称 取 在 温 度 １０５ ℃ 干 燥 至 恒 质 量 的 葡 萄 糖 １０．０ ｍｇ， 加入适量蒸馏水溶解， 定量转移到 １００ ｍＬ 的容量瓶中， 定容至刻度， 摇匀。
［４］ 张惟杰． 糖复合物技术生化研究技术 （ 第二版） ［Ｍ］ ． 杭 州： 浙江大学出版社， ２００３： ３１９．
［５］ Ｓｔａｕｂ Ａ．ｂ．， Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ［ Ｍ］ ． １９６５： ５．
［６］ Ｓｏｍａｎｉ Ｂ．Ｌ．， Ｋｈａｎａｄｅ Ｊ．， Ｓｉｎｈａ Ｒ．． Ａ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ａｎｔｈｒｏｎｅ－ ｓｕｌｆｕｒｉｃ ａｃｉｄ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｆｒｕｃｔｏｓｅ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ｃｅｒｔａｉｎ ｐｒｏｔｅｉｎｓ ［ Ｊ］ ． Ａｎａｌ Ｂｉｏｃｈｅｍ， １９８７， １６７ （ ２） ： ３２７－ ３０．