生物组织中还原糖.

《生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定》导学提纲

一、还原糖的鉴定

1、什么是还原糖？常见的还原糖有哪些？

还原性糖指含有醛基或酮基的糖，常见的有葡萄糖、果糖、麦芽糖。

2、实验原理是什么？

斐林试剂由质量浓度为0.1g/ml的NaOH溶液和质量浓度为0.05g/ml的CuSO4溶液配制而成的淡蓝色Cu (OH) 2

沉淀的悬浊液，葡萄糖溶液在加入斐林试剂后，在加热条件下还原为砖红色的沉淀，而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反应式为：CH2OH－（CHOH）4－CHO＋2Cu（OH）2 = CH2OH－（CHOH）4－COOH＋Cu2O＋2H2O

3、用斐林试剂鉴定还原糖时，溶液颜色变化过程是怎样的？

浅蓝色、棕色、砖红色沉淀

4、为什么斐林试剂要现配现用，不能放置太久？

时间一长，Cu（OH）2沉淀在溶液底部无法充分发生反应

5、为什么选择白色或接近白色的植物组织？

因为颜色过深的植物组织中的色素会对颜色反应起掩盖作用。

6、研磨小块苹果时，为什么要加少许石英砂？

使研磨更充分，否则还原糖少，颜色不明显。

7、为什么必须将斐林试剂的甲液和乙液混合均匀后再注入苹果组织液中，而不能分别加入？

如分别加入，组织液中的有机酸会与NaOH迅速反应，导致Cu (OH) 2不足。

8、为什么最终的颜色中有时会出现红褐色，甚至黑色？

Cu (OH) 2对热不稳定，易脱水生成黑色氧化铜CuO。

9、还可以用什么方法鉴定还原糖？

班氏试剂（A液：硫酸铜溶液，B液：柠檬酸纳和碳酸溶液）或用银镜反应。

10、如何鉴定淀粉？

滴加碘液，淀粉遇碘变蓝。

二、蛋白质的鉴定

1、实验原理是什么？

将尿素加热，两分子尿素放出一分子氨而缩合成双缩脲。

双缩脲试剂的成分是质量浓度为0.1g／mL的氢氧化钠溶液(A)和质量浓度为0.01g／mL的硫酸铜溶液(B)。在碱性溶液(NaOH)中，双缩脲(H2NOC—NH—CONH2)能与Cu2+作用，形成紫色或紫红色的络合物，这个反应叫做双缩脲反应。由于蛋白质分子中含有很多与双缩脲结构相似的肽键，因此，蛋白质可与双缩脲试剂发生颜色反应。

2、使用蛋清作实验材料，为什么要先稀释？

如果不稀释，反应后产生的化合物会吸附在试管壁，导致反应不彻底。

3、样液加入双缩脲试剂A液后，溶液什么颜色？之后加入双缩脲试剂B液，振荡后溶液什么颜色？

加双缩脲试剂A后，溶液仍透明（或白色）；加入B液振荡均匀后，变紫色或紫红色。

4、为什么加入的双缩脲试剂B液不能过量？

会生成大量蓝色Cu (OH) 2，遮蔽产生的紫色。

5、斐林试剂与双缩脲试剂的主要不同点？

（1）溶液浓度不同。斐林试剂中CｕSO4的浓度为0.05g/mL，双缩脲试剂中CｕSO4的浓度为0.01 g/mL。

（2）使用原理不同。斐林试剂实质是新配制的Cu(OH)2溶液，双缩脲试剂实质是碱性条件下的Cu2＋。

（3）使用方法不同。斐林试剂使用时，先把Na0H溶液和CｕSO4溶液混合，而后立即使用。双缩脲试剂使用时，先加入Na0H溶液，然后再加入CｕSO4溶液。

三、脂肪的鉴定

1、实验原理是什么？在制作临时装片的过程中用什么试剂洗去浮色？

2、为什么要取浸泡过的花生种子，而浸泡的时间又不宜过长？

浸泡的种子易切片，而浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。

3、有些橘黄色的小颗粒并不在细胞之内，而在细胞的周围，你认为是什么原因呢？

用刀片切取种子子叶薄片时，切破了细胞，细胞中的脂肪分子游离到细胞之间。

4、切取花生子叶薄片，要求实验技能较高，此步骤如何改进可以更便于操作？

改成刮取花生子叶泥制作临时装片，易做，效果又好。

【及时练】

1、在生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料选择的叙述错误的是：

A、甘蔗茎的薄壁组织、马铃薯的块茎等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行还原糖的鉴定

B、花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料

C、大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料

D、鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的动物材料

2、下列叙述不正确的是：

A、双缩脲试剂A是为反应提供碱性环境

B、在花生子叶薄片上滴加50%酒精是为了溶解组织中的油脂

C、所有的蛋白质均可与双缩脲试剂发生颜色反应

D、苏丹Ⅳ可用来鉴定生物组织中的脂肪

3、鉴定蛋白质时，事先留出一些黄豆组织样液，主要目的是：

A、重复两次，结果准确

B、再用于还原糖的鉴定

C、与加入双缩脲试剂后的颜色作对照

D、失败后还可重做

4、用苏丹Ⅲ染液检验脂肪，脂肪颗粒被染成橘黄色，但要立即观察，否则脂肪颗粒将溶解。能溶解脂肪颗粒的是：

A、染液中的苏丹Ⅲ

B、染色反应中的热量

C、染液中的水分

D、染液中的酒精

5、脂肪鉴定实验中，切片做好后应进行的操作步骤依此是：

A、染色—洗浮色—制片—镜检

B、制片—染色—洗浮色—镜检

C、制片—镜检—染色—洗浮色

D、染色—制片—洗浮色—镜检

6、下列哪组试剂在使用过程中，必须经过加热：

A、苏丹Ⅲ或Ⅳ鉴定脂肪

B、斐林试剂鉴定可溶性还原糖

C、双缩脲试剂鉴定蛋白质

D、碘化钾试剂鉴定淀粉

7、在还原糖、脂肪和蛋白质的鉴定实验中，需要使用显微镜的是：

A、还原糖的鉴定

B、蛋白质的鉴定

C、脂肪的鉴定

D、全都要

8、对斐林试剂和双缩脲试剂的配方，叙述不正确的是：

A、都含有氢氧化钠溶液和硫酸铜溶液

B、斐林试剂的配制是将4～5滴的0.05 g/mL的硫酸铜溶液滴入2 mL 0.1 g/mL的氢氧化钠溶液中即成

C、双缩脲试剂含有两种试剂：0.1 g/mL的氢氧化钠溶液和0.01 g/mL的硫酸铜溶液

D、双缩脲试剂是将3～4滴的0.01 g/mL的硫酸铜溶液滴入2 mL 0.1 g/mL的氢氧化钠溶液中混合而成的

9、下列操作步骤的叙述中，正确的是：

A、用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定

B、脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴

C、鉴定可溶性还原糖时，要加入斐林试剂甲液摇匀后，再加入乙液

D、用于鉴定蛋白质的双缩脲试剂A液与B液要混合均匀后，再加入含样品的试管中，且必须现配现用

10、做生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验时，需要根据实验需要选择不同的实验材料。请根据下表所列各种材料回答问题：

_______。

②小麦种子不如花生种子更适合用来鉴定脂肪，这是因为______，你怎样进行鉴定。

③适合于鉴定蛋白质的是______，理由是______，鉴定所用的试剂是_________。

答案：①梨梨的组织细胞颜色为白色，并且糖含量较高斐林试剂或班氏试剂。②小麦种子的脂肪含量不如花生种子高，也不容易做切片用苏Ⅳ试剂鉴定。③黄豆蛋白质含量高双缩脲试剂。

11、实验设计：通常情况下，正常人的尿液中没有葡萄糖。当一次食用大量糖时，尿液中是否有葡萄糖存在？试运用对照的方法设计实验方案进行鉴定。

原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀，加热。材料：大量食糖者尿液、正常人尿液、葡萄糖溶液。试管、量筒、大烧杯、酒精灯、铁架台、试管夹、石棉网、火柴等。试剂：新配制的斐林试剂。

步骤：①取3支干净的试管分别标号1、2、3；②1号加2ml正常人尿液，2号加2ml葡萄糖溶液，3号加2ml大量食糖者的尿液；③向3支试管分别加入新配制的斐林试剂2ml，振荡试管，混合均匀；④将3支试管放入盛有开水的大烧杯，用酒精灯加热煮沸2min。加热过程观察试管内颜色变化。1号试管不出现砖红色沉淀；2号试管出现砖红色沉淀；3号试管不出现砖红色沉淀，说明不含葡萄糖，若出现砖红色沉淀，则说明该尿液中含有葡萄糖。