葛根芩连汤中7种药效组分分析
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参考文献： ［１］ 国 家 药 典 委 员 会．中 华 人 民 共 和 国 药 典 一 部［Ｓ］．北 京 ： 化 学 工 业
出版社， ２０００：２７３－ ２７４． ［２］ 鄢 长 华，陈 俊 林，赵 海 涛． ＨＰＬＣ 法 对 不 同 栽 培 年 限 及 不 同 产 地
的黄芩中黄芩苷的含量测定分析研究． 内蒙古医学杂志， ２００６，３８（６）：５１５－ ５１６． ［３］ 尹 清． ＨＰＬＣ 测 定 黄 连 中 盐 酸 小 檗 碱 含 量［Ｊ］．上 海 中 医 药 杂 志， ２００３，３７（７）：５３－ ５５． ［４］ 吕 凤 莲，方 彬，张 宇 ， 等．高 效 液 相 色 谱 法 测 定 炙 甘 草 中 甘 草 酸的含量［Ｊ］．现代中药研究与实践，２００４，１８（４）：２５－ ２６． ［５］ 闫永红，王 文 全，杨 娜．ＨＰＬＣ 测 定 栽 培 甘 草 中 甘 草 苷 的 含 量［Ｊ］． 中国中药杂志，２００６，３１（１１）：９２６－ ９２７．
３ 讨论 本实验选择葛根芩连汤为载体， 葛根芩连汤出
自 张 仲 景《 伤 寒 论·太 阳 篇 》， 功 效 解 表 清 里 、升 清 止 利， 其疗效已经过临床反复验证。在供试品的制备 中， 摒弃有机溶剂提取的方法， 完全按照传统的煎药 方法用水煎煮， 使所得供试液与临床所用已被证明 有效的葛根芩连汤成分一致， 确定正确的研究对象。
作者 简 介 ： 崔 向 微（１９８２－ ），女 ， ２００６ 级 博 士 研 究 生 ， 主 要 研 究 方向为中药鉴定方法学和组分中药及中药药效组分质量标 准体系研究。
甘 草 酸 、 甘 草 苷 的 浓 度 分 别 为 ０．７０、０．１６、０．０９、 ０．０３、０．０４２、０．０９、０．１２ ｇ／Ｌ。 ２．３ 供试品溶液的制备 取葛根芩连汤 （ 葛根 ８ ｇ， 黄芩 ３ ｇ，黄连 ３ ｇ，炙甘草 ２ ｇ） ，加 １０ 倍量的水， 浸泡 ３０ ｍｉｎ， 先 煎 葛 根 ， 水 沸 后 煎 煮 ２０ ｍｉｎ，再 和 余 药 共 煎 至 ３０ ｍｉｎ，滤 过 ， 残 渣 加 １０ 倍 量 的 水 ， 水 沸 后 再 煎 ２０ ｍｉｎ，趁热滤过；合并两次滤液，浓缩，冷至常温， 加水调整至含中药浓度为 ０．１ ｋｇ／Ｌ。精密吸取 １．０ ｍＬ 置 １０ ｍＬ 量 瓶 中 ， 用 甲 醇 稀 释 至 刻 度 ， 摇 匀 ， 离 心 （４ ０００ ｒ／ｍｉｎ）１０ ｍｉｎ， 分 出 上 清 液， 得相对中药浓度 １０ ｇ／Ｌ 的溶液， 作为供试品溶液。 ２．４ 标 准 曲 线 绘 制 精 密 吸 取 各 对 照 品 溶 液 进 样 不同体积，按各成分的色谱条件测定峰面积（ＲＳＤ），以 峰 面 积 积 分 值 为 纵 坐 标（Ａ，ｙ），对 照 品 进 样 量（μＬ）为 横坐标（Ｃ，ｘ），进行线性回归，得回归方程：
（ 收稿日期： ２００８－ ０６－ １１）
Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｅｖｅｎ ｄｒ ｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐｕｅｒ ａｒ ｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ Ｃｕｉ Ｘｉａｎｇ"ｗｅｉ， Ｚｈａｎｇ Ｇｕｉ"ｊｕｎ， Ｌｉ Ｈｕｉ
（ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｐｈａｒｍａｃｙ ｏｆ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１０２， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： ［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］ Ｔｏ ａｓｓａｙ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｕｅｒａｒｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ． ［Ｍｅｔｈｏｄｓ］ Ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｐｈａｓｅ ｈｉｇｈ"ｐｅｒｆｏｒ－ ｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＲＰ"ＨＰＬＣ） ｗａｓ ｕｓｅｄ． ［Ｒｅｓｕｌｔｓ］ Ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｒｅ： ｐｕｅｒａｒｉｎ １．６７％； ｂａｉｃａｌｉｎ ０．３６％； ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ ０．０８５％； ｐａｌｍａｔｉｎｅ ０．０３１％： ｊａｔｅｏｒｈｉｚｉｎｅ ０．０４８％； ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃ ａｃｉｄ ０．１２６％； ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎ ０．１７４％． ［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］ Ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｕｅｒａｒｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｓｃｉｅｎｃｅ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ． Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： Ｐｕｅｒａｒｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ； ＲＰ"ＨＰＬＣ； Ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ
本实验采用高效液相色谱方法，选用葛根素、黄 芩 苷 、小 檗 碱 等 指 标 性 成 分 对 葛 根 芩 连 汤 进 行 含 量 测定，从高效液相色谱法（ ＨＰＬＣ） 图可以 看 出 ： 在 各 自所选择的色谱条件下， 这几种成分与其他成分间 有很好的分离度。方法学考察表明： 这些方法在较 大范围内线性关系良好， 葛根芩连汤中葛根素等指 标性成分含量均在线性范围之内； 所选用的各方法 具有较好的精确度、稳定性、重现性和回收率。所得 到的指标性成分百分含量的比例关系， 为控制葛根 芩连汤的内在质量提供了依据， 打破了以一种成分 的含量为质量控制的传统方式。指标性成分的比例 关系制约着中药的疗效， 同时为葛根芩连汤的进一 步研发提供了科学数据。
药 效 组 分 对 照 品 ： 葛 根 素 、黄 芩 苷 、盐 酸 小 檗 碱、盐酸巴马汀、盐酸药根 碱 、甘 草 酸 单 铵 、甘 草 苷 （ 中国药品生物制品检定所） 。
饮片： 葛根， 黄芩， 黄连， 炙甘草（ 购自安国祁新 饮片厂） ，经张贵君教授鉴定依次为豆科植物野葛的 干燥根，唇形科植物黄芩的干燥根，毛茛科植物黄连 的干燥根茎，豆科植物甘草的干燥根及根茎。 ２ 方法与结果 ２．１ 色谱条件 色谱柱： ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８ ＵＧ１２０ （２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ μｍ）； 流动相及检测波长： 葛根 素： 甲醇—水（２５∶７５）， ２５０ ｎｍ［１］； 黄芩苷： 甲醇—水— 磷 酸 （４７∶５３∶０．２）， ２８０ ｎｍ［２］； 盐 酸 小 檗 碱 、盐 酸 巴 马 汀、盐酸药根碱： 乙腈 —０．０２ ｍｏｌ／Ｌ 磷 酸 二 氢 钾（３５∶ ６５）， ３４６ ｎｍ［３］； 甘 草 酸 ： 甲 醇—０．０５ ｍｏｌ／Ｌ 醋 酸 铵 — 冰 醋 酸 （６７ ∶３３ ∶１） ， ２５０ ｎｍ［４］； 甘 草 苷： 乙腈—０．５％冰 醋酸（ １∶４） ， ２７６ ｎｍ［５］。流速： １．０ ｍＬ／ｍｉｎ； 柱 温 ： 室 温 （ ２４ ℃） ； 柱压： ９０￣１００ Ｂａｒ； 理论板数按各对照品峰 计算均大于 ３ ０００。 ２．２ 对照品溶液的制备 分别精密称取葛根素、黄 芩苷、盐酸小檗碱、盐酸巴 马 汀 、盐 酸 药 根 碱 、甘 草 酸 、甘草苷对照品适量，分别置 １０ ｍＬ 量瓶中， 加甲 醇溶解并稀释至刻度， 作为对照品溶液， 其中葛根 素 、黄 芩 苷 、盐 酸 小 檗 碱 、盐 酸 巴 马 汀 、盐 酸 药 根 碱 、
天津中医药
２００８ 年 １０ 月第 ２５ 卷第 ５ 期
４１８
Ｔｉａｎｊｉｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
Ｏｃｔ．２００８，Ｖｏｌ．２５ Ｎｏ．５
品溶液，间隔一定时间（每 ２ ｈ 进样 １ 次， 共测 ５ 次）， 按各成分的色谱条件， 依照标准曲线测定方法测定 峰面积。稳定性 ＲＳＤ 分别为 ０．５８％、０．３７％、０．６６％、 ０．５４％、０．６８％、１．１５％、１．４５％。在测定时间内 ７ 种成 分稳定性良好。 ２．７ 重现性实验 精密吸取上述 ７ 种同一供试品 溶液， 按各成分的色谱条件， 依照标准曲线测定方 法连续测定 ５ 次，以峰面积计算。重现性 ＲＳＤ 分别 为 ０．７４％ 、０．４９％ 、０．５６％ 、０．５２％ 、０．４８％ 、１．３５％ 、 １．６３％。表明本方法重现性良好。 ２．８ 样品含量测定 精密吸取供试品溶液 ５ μＬ 进 样， 按各成分的色谱条件， 依照标准曲线测定方法 测定峰面积，根据标准曲线计算各成分的含量。测得 葛根素、黄芩苷、小檗碱、巴马汀、药 根 碱 、甘 草 酸 、 甘草苷含量分别为： １．６７％、０．３６％、０．０８５％、０．０３１％、 ０．０４８％、０．１２６％、０．１７４％。
表 １ 加样回收率测定结果 Ｔａｂ．１ Ｄｅｔｅｒ ｍｉｎａｔｉｏｎ ｒ ｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｒ ｅｃｏｖｅｒ ｙ ％
平均回
盐酸小 盐酸巴 盐酸药
葛根素 黄芩苷
甘草酸 甘草苷
Hale Waihona Puke Baidu收率
檗碱 马汀 根碱
％ １００．１３ １００．００ ９９．９６ ９９．８７ ９９．８７ ９９．９１ １００．０４ ＲＳＤ ０．５３ ０．１３ ０．１９ ０．３３ ０．４２ ０．２４ ０．１６
摘要： ［目的］ 分析测定葛根芩连汤中 ７ 种药效组分。［方法］ 反相高效液相色谱法（ ＲＰ－ ＨＰＬＣ） 。［结果］ ７ 种药效组
分百分含量分别为： 葛根素 １．６７％， 黄芩苷 ０．３６％， 小檗碱 ０．０８５％， 巴马汀 ０．０３１％， 药根碱 ０．０４８％， 甘草酸 ０．１２６％， 甘
草苷 ０．１７４％。［结论］ 葛根芩连汤中 ７ 种药效组分可作为其质量控制的科学指标。
２００８ 年 １０ 月第 ２５ 卷第 ５ 期 Ｏｃｔ．２００８，Ｖｏｌ．２５ Ｎｏ．５
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４１７
葛根芩连汤中 ７ 种药效组分分析
崔向微 １， 张贵君 ２， 李 慧 ２ （ １．北京中医药大学研究生， 北京 １００１０２； ２．北京中医药大学， 北京 １００１０２）
各成分之间的比例关系为 葛根素： 黄芩苷∶小 檗 碱 ∶巴 马 汀 ∶药 根 碱 ∶甘 草 苷 ∶甘 草 酸 ＝５３．９∶１１．７∶２．６∶ １∶１．５∶４．１∶５．７。 ２．９ 加 样 回 收 实 验 精 密 吸 取 已 知 各 成 分 含 量 的 供试品溶液 ５ 份，精密加入对照品适量，按供试品溶 液制备方法处理， 按各成分的色谱条件， 依照标准 曲线测定方法测定，加样回收率结果见表 １。
葛根素 Ｙ＝３ １１６．９Ｘ－ ３ ９２６．４，Ｒ２＝０．９９９ ７（ｎ＝５）；线 性范围 １．４￣７．０ μｇ； 黄芩苷 Ｙ＝５９２．８６Ｘ＋１０５．６８，Ｒ２＝ ０．９９９ ５ （ｎ＝５）； 线性范围 ０．３２￣１．６ μｇ； 盐酸小檗碱 Ｙ＝ ６２２．７７Ｘ－ ２４５．２，Ｒ２＝０．９９９ １（ｎ＝５）；线性范围 ０．１８￣０．９０ μｇ； 盐酸巴马汀 Ｙ＝３３０．３６Ｘ－ １７１．９１，Ｒ２＝０．９９９ ６（ｎ＝５）；线 性 范 围 ０．０６ ￣０．３ μｇ； 盐 酸 药 根 碱 Ｙ ＝２０５．９６Ｘ － ６８．４１７，Ｒ２＝０．９９９ ６（ｎ＝５）；线 性 范 围 ０．０８４￣０．４２ μｇ； 甘 草 酸 Ｙ＝７５．２１８Ｘ－ ４１．５０９，Ｒ２＝０．９９９９ （ｎ ＝５）； 线 性 范围 ０．１８￣０．９０ μｇ； 甘草苷 Ｙ＝２０５．２８Ｘ＋３０．５１６，Ｒ２＝ ０．９９９ ３（ｎ＝５）；线性范围 ０．１２￣０．６０ μｇ。 ２．５ 精密度实验 分别精密吸取葛根素、黄芩苷、盐 酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱、甘草酸 、甘草 苷对照品溶液，连续进样 ５ 次，按各成分的色谱条件 测 定 峰 面 积 （ ＲＳＤ） 分 别 为 ０．１８％、０．３４％、１．０４％、 １．５４％、１．６８％、１．３５％、０．７５％。 ２．６ 稳定性实验 分别精密吸取上述 ７ 种同一供试
关键词： 葛根芩连汤； 反相高效液相色谱法； ７ 种药效组分
中图分类号： Ｒ２８５．５
文献标识码： Ａ
文章编号： １６７２－ １５１９（ ２００８） ０５－ ０４１７－ ０２
选择传统中药复方葛根芩连汤为载体， 按照传 统方法制备供试品溶液， 对其中常见的 ７ 个水溶性 药效组分进行了测定， 旨在为建立符合临床疗效特 征的质量标准评价方法提供科学依据。 １ 仪器与材料
出版社， ２０００：２７３－ ２７４． ［２］ 鄢 长 华，陈 俊 林，赵 海 涛． ＨＰＬＣ 法 对 不 同 栽 培 年 限 及 不 同 产 地
的黄芩中黄芩苷的含量测定分析研究． 内蒙古医学杂志， ２００６，３８（６）：５１５－ ５１６． ［３］ 尹 清． ＨＰＬＣ 测 定 黄 连 中 盐 酸 小 檗 碱 含 量［Ｊ］．上 海 中 医 药 杂 志， ２００３，３７（７）：５３－ ５５． ［４］ 吕 凤 莲，方 彬，张 宇 ， 等．高 效 液 相 色 谱 法 测 定 炙 甘 草 中 甘 草 酸的含量［Ｊ］．现代中药研究与实践，２００４，１８（４）：２５－ ２６． ［５］ 闫永红，王 文 全，杨 娜．ＨＰＬＣ 测 定 栽 培 甘 草 中 甘 草 苷 的 含 量［Ｊ］． 中国中药杂志，２００６，３１（１１）：９２６－ ９２７．
３ 讨论 本实验选择葛根芩连汤为载体， 葛根芩连汤出
自 张 仲 景《 伤 寒 论·太 阳 篇 》， 功 效 解 表 清 里 、升 清 止 利， 其疗效已经过临床反复验证。在供试品的制备 中， 摒弃有机溶剂提取的方法， 完全按照传统的煎药 方法用水煎煮， 使所得供试液与临床所用已被证明 有效的葛根芩连汤成分一致， 确定正确的研究对象。
作者 简 介 ： 崔 向 微（１９８２－ ），女 ， ２００６ 级 博 士 研 究 生 ， 主 要 研 究 方向为中药鉴定方法学和组分中药及中药药效组分质量标 准体系研究。
甘 草 酸 、 甘 草 苷 的 浓 度 分 别 为 ０．７０、０．１６、０．０９、 ０．０３、０．０４２、０．０９、０．１２ ｇ／Ｌ。 ２．３ 供试品溶液的制备 取葛根芩连汤 （ 葛根 ８ ｇ， 黄芩 ３ ｇ，黄连 ３ ｇ，炙甘草 ２ ｇ） ，加 １０ 倍量的水， 浸泡 ３０ ｍｉｎ， 先 煎 葛 根 ， 水 沸 后 煎 煮 ２０ ｍｉｎ，再 和 余 药 共 煎 至 ３０ ｍｉｎ，滤 过 ， 残 渣 加 １０ 倍 量 的 水 ， 水 沸 后 再 煎 ２０ ｍｉｎ，趁热滤过；合并两次滤液，浓缩，冷至常温， 加水调整至含中药浓度为 ０．１ ｋｇ／Ｌ。精密吸取 １．０ ｍＬ 置 １０ ｍＬ 量 瓶 中 ， 用 甲 醇 稀 释 至 刻 度 ， 摇 匀 ， 离 心 （４ ０００ ｒ／ｍｉｎ）１０ ｍｉｎ， 分 出 上 清 液， 得相对中药浓度 １０ ｇ／Ｌ 的溶液， 作为供试品溶液。 ２．４ 标 准 曲 线 绘 制 精 密 吸 取 各 对 照 品 溶 液 进 样 不同体积，按各成分的色谱条件测定峰面积（ＲＳＤ），以 峰 面 积 积 分 值 为 纵 坐 标（Ａ，ｙ），对 照 品 进 样 量（μＬ）为 横坐标（Ｃ，ｘ），进行线性回归，得回归方程：
（ 收稿日期： ２００８－ ０６－ １１）
Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｓｅｖｅｎ ｄｒ ｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｉｎ ｐｕｅｒ ａｒ ｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ Ｃｕｉ Ｘｉａｎｇ"ｗｅｉ， Ｚｈａｎｇ Ｇｕｉ"ｊｕｎ， Ｌｉ Ｈｕｉ
（ Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｐｈａｒｍａｃｙ ｏｆ Ｂｅｉｊｉｎｇ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ， Ｂｅｉｊｉｎｇ １００１０２， Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒ ａｃｔ： ［Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ］ Ｔｏ ａｓｓａｙ ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｕｅｒａｒｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ． ［Ｍｅｔｈｏｄｓ］ Ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｐｈａｓｅ ｈｉｇｈ"ｐｅｒｆｏｒ－ ｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＲＰ"ＨＰＬＣ） ｗａｓ ｕｓｅｄ． ［Ｒｅｓｕｌｔｓ］ Ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ａｒｅ： ｐｕｅｒａｒｉｎ １．６７％； ｂａｉｃａｌｉｎ ０．３６％； ｂｅｒｂｅｒｉｎｅ ０．０８５％； ｐａｌｍａｔｉｎｅ ０．０３１％： ｊａｔｅｏｒｈｉｚｉｎｅ ０．０４８％； ｇｌｙｃｙｒｒｈｉｚｉｃ ａｃｉｄ ０．１２６％； ｌｉｑｕｉｒｉｔｉｎ ０．１７４％． ［Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ］ Ｔｈｅ ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｕｅｒａｒｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｓｃｉｅｎｃｅ ｉｎｄｅｘ ｏｆ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ． Ｋｅｙ ｗｏｒ ｄｓ： Ｐｕｅｒａｒｉａｅ ｄｅｃｏｃｔｉｏｎｓ； ＲＰ"ＨＰＬＣ； Ｓｅｖｅｎ ｄｒｕｇ ａｃｔｉｖｅ ｃｏｍｐｏｓｉｔｉｏｎｓ
本实验采用高效液相色谱方法，选用葛根素、黄 芩 苷 、小 檗 碱 等 指 标 性 成 分 对 葛 根 芩 连 汤 进 行 含 量 测定，从高效液相色谱法（ ＨＰＬＣ） 图可以 看 出 ： 在 各 自所选择的色谱条件下， 这几种成分与其他成分间 有很好的分离度。方法学考察表明： 这些方法在较 大范围内线性关系良好， 葛根芩连汤中葛根素等指 标性成分含量均在线性范围之内； 所选用的各方法 具有较好的精确度、稳定性、重现性和回收率。所得 到的指标性成分百分含量的比例关系， 为控制葛根 芩连汤的内在质量提供了依据， 打破了以一种成分 的含量为质量控制的传统方式。指标性成分的比例 关系制约着中药的疗效， 同时为葛根芩连汤的进一 步研发提供了科学数据。
药 效 组 分 对 照 品 ： 葛 根 素 、黄 芩 苷 、盐 酸 小 檗 碱、盐酸巴马汀、盐酸药根 碱 、甘 草 酸 单 铵 、甘 草 苷 （ 中国药品生物制品检定所） 。
饮片： 葛根， 黄芩， 黄连， 炙甘草（ 购自安国祁新 饮片厂） ，经张贵君教授鉴定依次为豆科植物野葛的 干燥根，唇形科植物黄芩的干燥根，毛茛科植物黄连 的干燥根茎，豆科植物甘草的干燥根及根茎。 ２ 方法与结果 ２．１ 色谱条件 色谱柱： ＣＡＰＣＥＬＬ ＰＡＫ Ｃ１８ ＵＧ１２０ （２５０ ｍｍ×４．６ ｍｍ，５ μｍ）； 流动相及检测波长： 葛根 素： 甲醇—水（２５∶７５）， ２５０ ｎｍ［１］； 黄芩苷： 甲醇—水— 磷 酸 （４７∶５３∶０．２）， ２８０ ｎｍ［２］； 盐 酸 小 檗 碱 、盐 酸 巴 马 汀、盐酸药根碱： 乙腈 —０．０２ ｍｏｌ／Ｌ 磷 酸 二 氢 钾（３５∶ ６５）， ３４６ ｎｍ［３］； 甘 草 酸 ： 甲 醇—０．０５ ｍｏｌ／Ｌ 醋 酸 铵 — 冰 醋 酸 （６７ ∶３３ ∶１） ， ２５０ ｎｍ［４］； 甘 草 苷： 乙腈—０．５％冰 醋酸（ １∶４） ， ２７６ ｎｍ［５］。流速： １．０ ｍＬ／ｍｉｎ； 柱 温 ： 室 温 （ ２４ ℃） ； 柱压： ９０￣１００ Ｂａｒ； 理论板数按各对照品峰 计算均大于 ３ ０００。 ２．２ 对照品溶液的制备 分别精密称取葛根素、黄 芩苷、盐酸小檗碱、盐酸巴 马 汀 、盐 酸 药 根 碱 、甘 草 酸 、甘草苷对照品适量，分别置 １０ ｍＬ 量瓶中， 加甲 醇溶解并稀释至刻度， 作为对照品溶液， 其中葛根 素 、黄 芩 苷 、盐 酸 小 檗 碱 、盐 酸 巴 马 汀 、盐 酸 药 根 碱 、
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品溶液，间隔一定时间（每 ２ ｈ 进样 １ 次， 共测 ５ 次）， 按各成分的色谱条件， 依照标准曲线测定方法测定 峰面积。稳定性 ＲＳＤ 分别为 ０．５８％、０．３７％、０．６６％、 ０．５４％、０．６８％、１．１５％、１．４５％。在测定时间内 ７ 种成 分稳定性良好。 ２．７ 重现性实验 精密吸取上述 ７ 种同一供试品 溶液， 按各成分的色谱条件， 依照标准曲线测定方 法连续测定 ５ 次，以峰面积计算。重现性 ＲＳＤ 分别 为 ０．７４％ 、０．４９％ 、０．５６％ 、０．５２％ 、０．４８％ 、１．３５％ 、 １．６３％。表明本方法重现性良好。 ２．８ 样品含量测定 精密吸取供试品溶液 ５ μＬ 进 样， 按各成分的色谱条件， 依照标准曲线测定方法 测定峰面积，根据标准曲线计算各成分的含量。测得 葛根素、黄芩苷、小檗碱、巴马汀、药 根 碱 、甘 草 酸 、 甘草苷含量分别为： １．６７％、０．３６％、０．０８５％、０．０３１％、 ０．０４８％、０．１２６％、０．１７４％。
表 １ 加样回收率测定结果 Ｔａｂ．１ Ｄｅｔｅｒ ｍｉｎａｔｉｏｎ ｒ ｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｓａｍｐｌｅ ｒ ｅｃｏｖｅｒ ｙ ％
平均回
盐酸小 盐酸巴 盐酸药
葛根素 黄芩苷
甘草酸 甘草苷
Hale Waihona Puke Baidu收率
檗碱 马汀 根碱
％ １００．１３ １００．００ ９９．９６ ９９．８７ ９９．８７ ９９．９１ １００．０４ ＲＳＤ ０．５３ ０．１３ ０．１９ ０．３３ ０．４２ ０．２４ ０．１６
摘要： ［目的］ 分析测定葛根芩连汤中 ７ 种药效组分。［方法］ 反相高效液相色谱法（ ＲＰ－ ＨＰＬＣ） 。［结果］ ７ 种药效组
分百分含量分别为： 葛根素 １．６７％， 黄芩苷 ０．３６％， 小檗碱 ０．０８５％， 巴马汀 ０．０３１％， 药根碱 ０．０４８％， 甘草酸 ０．１２６％， 甘
草苷 ０．１７４％。［结论］ 葛根芩连汤中 ７ 种药效组分可作为其质量控制的科学指标。
２００８ 年 １０ 月第 ２５ 卷第 ５ 期 Ｏｃｔ．２００８，Ｖｏｌ．２５ Ｎｏ．５
天津中医药 Ｔｉａｎｊｉｎ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ
４１７
葛根芩连汤中 ７ 种药效组分分析
崔向微 １， 张贵君 ２， 李 慧 ２ （ １．北京中医药大学研究生， 北京 １００１０２； ２．北京中医药大学， 北京 １００１０２）
各成分之间的比例关系为 葛根素： 黄芩苷∶小 檗 碱 ∶巴 马 汀 ∶药 根 碱 ∶甘 草 苷 ∶甘 草 酸 ＝５３．９∶１１．７∶２．６∶ １∶１．５∶４．１∶５．７。 ２．９ 加 样 回 收 实 验 精 密 吸 取 已 知 各 成 分 含 量 的 供试品溶液 ５ 份，精密加入对照品适量，按供试品溶 液制备方法处理， 按各成分的色谱条件， 依照标准 曲线测定方法测定，加样回收率结果见表 １。
葛根素 Ｙ＝３ １１６．９Ｘ－ ３ ９２６．４，Ｒ２＝０．９９９ ７（ｎ＝５）；线 性范围 １．４￣７．０ μｇ； 黄芩苷 Ｙ＝５９２．８６Ｘ＋１０５．６８，Ｒ２＝ ０．９９９ ５ （ｎ＝５）； 线性范围 ０．３２￣１．６ μｇ； 盐酸小檗碱 Ｙ＝ ６２２．７７Ｘ－ ２４５．２，Ｒ２＝０．９９９ １（ｎ＝５）；线性范围 ０．１８￣０．９０ μｇ； 盐酸巴马汀 Ｙ＝３３０．３６Ｘ－ １７１．９１，Ｒ２＝０．９９９ ６（ｎ＝５）；线 性 范 围 ０．０６ ￣０．３ μｇ； 盐 酸 药 根 碱 Ｙ ＝２０５．９６Ｘ － ６８．４１７，Ｒ２＝０．９９９ ６（ｎ＝５）；线 性 范 围 ０．０８４￣０．４２ μｇ； 甘 草 酸 Ｙ＝７５．２１８Ｘ－ ４１．５０９，Ｒ２＝０．９９９９ （ｎ ＝５）； 线 性 范围 ０．１８￣０．９０ μｇ； 甘草苷 Ｙ＝２０５．２８Ｘ＋３０．５１６，Ｒ２＝ ０．９９９ ３（ｎ＝５）；线性范围 ０．１２￣０．６０ μｇ。 ２．５ 精密度实验 分别精密吸取葛根素、黄芩苷、盐 酸小檗碱、盐酸巴马汀、盐酸药根碱、甘草酸 、甘草 苷对照品溶液，连续进样 ５ 次，按各成分的色谱条件 测 定 峰 面 积 （ ＲＳＤ） 分 别 为 ０．１８％、０．３４％、１．０４％、 １．５４％、１．６８％、１．３５％、０．７５％。 ２．６ 稳定性实验 分别精密吸取上述 ７ 种同一供试
关键词： 葛根芩连汤； 反相高效液相色谱法； ７ 种药效组分
中图分类号： Ｒ２８５．５
文献标识码： Ａ
文章编号： １６７２－ １５１９（ ２００８） ０５－ ０４１７－ ０２
选择传统中药复方葛根芩连汤为载体， 按照传 统方法制备供试品溶液， 对其中常见的 ７ 个水溶性 药效组分进行了测定， 旨在为建立符合临床疗效特 征的质量标准评价方法提供科学依据。 １ 仪器与材料