高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)教学内容

高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完

整版)

1 斐林试剂检测可溶性还原糖

原理：还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀

注意：斐林试剂的甲液和乙液要等量混合均匀后方可使用,而且是现用现配,条件需要水浴加热.

应用：检验和检测某糖是否为还原糖；不同生物组织中含糖量高低的测定；在医学上进行疾病的诊断,如糖尿病、肾炎.

2 苏丹Ⅲ、苏丹Ⅳ检测脂肪

原理：苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色

注意：脂肪的鉴定需要用显微镜观察.

应用：检测食品中营养成分是否含有脂肪.

3 双缩脲试剂检测蛋白质

原理：蛋白质+双缩脲试剂→紫色

注意：双缩脲试剂在使用时,先加A液再加B液,反应条件为常温（不需要加热）.

应用：鉴定某些消化液中含有蛋白质；用于劣质奶粉的鉴定.

4 碘液检测淀粉

原理：淀粉+碘液→蓝色

注意：这里的碘是单质碘,而不是离子碘.

应用：检测食品中营养成分是否含有淀粉

5 DNA的染色与鉴定

染色原理：DNA+甲基绿→绿色

应用：可以显示DNA在细胞中的分布.

鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色

应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂.

6 吡罗红使RNA呈现红色

原理：RNA+吡罗红→红色

应用：可以显示RNA在细胞中的分布.

注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂,而不是单独染色.

7 台盼蓝使死细胞染成蓝色

原理：正常的活细胞,细胞膜结构完整具有选择透过性能够排斥台盼蓝,使之不能够进入胞内；死细胞或细胞膜不完整的细胞,胞膜的通透性增加,可被台盼蓝染成蓝色.

应用：区分活细胞和死细胞；检测细胞膜的完整性.

8 线粒体的染色

原理：健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而细胞质接近无色.

应用：可以用高倍镜观察细胞中线粒体的存在.

9 酒精的检测

原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应,变成灰绿色. 应用：探究酵母菌细胞呼吸的方式；制作果酒时检验是否产生了酒精；检查司机是否酒后驾驶.

10 CO2的检测

原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊,也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿

在变黄.

应用：根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变黄的时间长短,可以检测酵母菌培养液中CO2的产生情况.

11 染色体（或染色质）的染色

原理：染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液）染成深色.

应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂.

12 吲哚酚试剂与维生素C溶液呈褪色反应

原理：吲哚酚即2,6-二氯酚靛酚钠,其水溶液为蓝紫色,维生素C具有还原性,能将其褪色.

应用：可用于检测食品营养成分中是否含有维生素C.

13 亚硝酸盐的检测出现玫瑰红

原理：在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后,与N-1-萘基乙胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料.

应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较,可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量.

14 脲酶的检测

原理：细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨,氨会使培养基的碱性增强,使PH 升高,从而使酚红指示剂变红.

应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂,培养某种细菌后,看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素.

15 伊红美蓝检测大肠杆菌

原理：在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的代谢产物（有机酸）与伊红美蓝结合使

菌落呈现黑色.

应用：用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量.

16 刚果红检测纤维素分解菌

原理：刚果红是一种染料,它可以与像纤维素这样的多糖物质形成红色复合物,但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应.当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时,刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物.当纤维素被纤维素分解菌分解后,刚果红-纤维素的复合物就无法形成,培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈.

应用：筛选纤维素分解菌.

补充(有部分重复)：

1、斐林试剂

配制：1）甲液质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至100ml

2）乙液质量浓度为0.05g/ml,取5gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml 临用时将甲、乙液等量混合

作用：鉴定还原性糖：C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等.

还原性糖与斐林试剂发生作用,生成砖红色沉淀.如用于鉴定组织液中有否还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等.

2、班氏尿糖定性试剂

配制：称取17.4克无水硫酸铜（CuSO4）溶解于100毫升热蒸馏水中,冷

却后,稀释到150毫升.称取柠檬酸钠173克及无水碳酸钠（Na2CO3）100克,加蒸馏水600毫升,加热使之溶解,冷却后,稀释到850毫升.把硫酸铜溶液倾入柠檬酸钠及碳酸钠溶液中,搅匀后即为班氏尿糖定性试剂.用细口瓶贮存备用（为了防止氢氧化铜沉淀的生成,故加入柠檬酸钠.柠檬酸钠是一种亲水性掩蔽性络合物形成剂,它能与铜离子形成可溶性络盐）.

使用方法同斐林试剂,所不同的是班氏试剂可长期使用.

3、双缩脲试剂

配制：A液：质量浓度为 0.1g/ml,取10gNaOH溶于蒸馏水,稀释至

100ml

B液：质量浓度为0.01g/ml,取1gCuSO4溶于蒸馏水,稀释至100ml

使用时,先加A液,后加B液

作用：鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应.也可用于鉴定多肽.

4、苏丹Ⅲ

配制：取0.1g苏丹Ⅲ,溶解在20ml95%酒精中

作用：鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色（或被苏丹Ⅳ染成红色）.

5、质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）. 作用：用于洋葱根尖的解离,即使组织中的细胞相互分离开来.能杀死细胞固定.

6、质量浓度为0.01g/ml的或0.02g/ml龙胆紫溶液（或醋酸洋红溶液）配制：是将龙胆紫溶解在质量分阶段数为2%的醋酸溶液中配制而成

作用：使细胞核内的染色体着色,便于观察.

7、质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液