实验 分光光度法测定微量铁
实验八 邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验八邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的2. 掌握邻二氮菲的制备方法及其在测定微量铁中的应用。
3. 理解标准曲线的绘制方法及其在实验中的应用。
二、实验原理邻二氮菲是一种具有荧光特性的有机物，其分子结构如图1所示。
图1 邻二氮菲分子结构邻二氮菲能够与铁(Ⅲ)形成荧光化合物，而这种荧光化合物的发射峰位于535nm左右，因此可以通过测量荧光发射强度来确定铁(Ⅲ)的含量。
在实验中，首先要制备邻二氮菲溶液。
制备方法如下：取一定量的邻二氮菲与一定量的苯甲酸，加入适量的氢氧化钠溶液，煮沸并搅拌至邻二氮菲完全溶解，加入足量的水，制成1mmol/L的邻二氮菲溶液。
然后测定铁离子溶液的荧光强度，在一定波长下测定它的荧光强度，得到标准曲线。
最后将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，测定混合溶液荧光强度，并用标准曲线计算出铁离子的含量。
三、实验步骤2. 制备标准曲线。
将一定量的FeCl3溶液加入邻二氮菲溶液中，混合均匀后，在535nm处测定其荧光强度。
重复上述步骤，得到一系列不同浓度的FeCl3溶液荧光强度数据。
3. 测定样品荧光强度。
将待测样品溶液与邻二氮菲溶液混合，混合均匀后，在535nm 处测定其荧光强度。
4. 计算样品中Fe离子的含量。
使用标准曲线计算样品中Fe离子的含量。
四、实验注意事项1. 实验中所用的器皿应干净，避免污染。
2. 制备邻二氮菲溶液时应注意氢氧化钠的浓度和量，以确保邻二氮菲完全溶解。
3. 实验室应尽量保持安静，避免干扰荧光信号。
4. 注意各种溶液的安全操作，如防止接触皮肤和眼睛。
五、实验结果及分析利用邻二氮菲分光光度法测定一系列不同浓度的FeCl3标准溶液，得到的测量结果如下表所示。
所得数据可用图表表示，如下图所示。
根据标准曲线可以得到如下方程：y = 0.2948x + 2.2939，其中y表示荧光强度，x表示FeCl3溶液的浓度。
六、实验总结本实验通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁，熟悉了邻二氮菲荧光原理及其制备方法，掌握了标准曲线的制备方法和其在实验中的应用。
水中微量铁的测定实验报告
水中微量铁的测定实验报告水中微量铁的测定实验报告摘要：本实验旨在通过分光光度法测定水中微量铁的含量。
首先，通过标准曲线法建立了铁离子的吸光度与浓度之间的关系。
然后，通过对未知水样的测定，得出了其铁离子的浓度为0.023 mg/L。
实验结果表明，分光光度法是一种简便、快速、准确的方法，适用于水中微量铁的测定。
引言：水是人类生活中不可或缺的资源，而水中微量金属离子的含量对水的质量有着重要的影响。
其中，铁是一种常见的微量金属离子，其含量的测定对于水质监测和环境保护具有重要意义。
本实验旨在通过分光光度法测定水中微量铁的含量，并探讨该方法的准确性和适用性。
实验方法：1. 准备工作：清洗实验器材，制备一系列不同浓度的标准溶液。
2. 建立标准曲线：将不同浓度的铁标准溶液分别置于分光光度计中，测定其吸光度，并记录下吸光度与浓度的对应关系。
3. 测定未知水样：将未知水样置于分光光度计中，测定其吸光度，并利用标准曲线计算出其铁离子的浓度。
实验结果：通过建立标准曲线，我们得到了铁离子的吸光度与浓度之间的线性关系。
利用该标准曲线，我们测定了未知水样的吸光度为0.345。
根据标准曲线的拟合方程，计算得出该未知水样中铁离子的浓度为0.023 mg/L。
讨论与分析：本实验采用的分光光度法是一种常用的分析方法，其原理是利用物质对特定波长光的吸收来测定其浓度。
通过建立标准曲线，我们可以根据待测样品的吸光度，推算出其浓度。
在实验过程中，我们注意到了一些实验误差的可能来源。
首先，实验中使用的试剂可能存在一定的误差。
其次，实验操作中的人为因素也可能对结果产生影响。
为了减小误差，我们在实验过程中进行了多次重复测定，并取平均值作为最终结果。
此外，本实验的结果还受到了水样的采集和保存条件的影响。
水样的采集应尽量避免污染，并在采集后尽快进行测定，以减小铁离子的损失和变化。
结论：通过本实验的测定，我们成功地利用分光光度法测定了水中微量铁的含量。
实验讲义-分光光度法测定微量铁的含量
实验一分光光度法测定微量铁的含量Ⅰ．实验目的(1)掌握用邻二氮菲显色法测定铁的原理和方法。
(2)了解分光光度计的构造及分光光度计的正确使用。
(3)学会工作曲线的制作和样品的测定。
Ⅱ．实验用品仪器：721型(或其他型号)分光光度计、50mL容量瓶、吸量管。
药品：(NH4)2 Fe(SO4)2·6H2O（分析纯）、邻二氮菲（分析纯）、盐酸羟胺（分析纯）、NaAc（分析纯）、无水乙醇（分析纯）溶液配制：（1）. 10.0 μg·mL-1(即0.01 mg·mL-1)铁标准溶液：准确称取１０．０ｍg(NH4)2 Fe(SO4)2·6H2O于烧杯中，用2 mol·L-1盐酸15 mL溶解，移入１０00 mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
再准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液；（2）. 0.15％邻二氮菲溶液(临时配制)：先用少许乙醇溶解，再用水稀释；（3）. 盐酸羟胺溶液10％(临时配制)；（4）. NaAc溶液1mol·L-1。
Ⅲ．实验原理在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺或抗坏血酸还原Fe3+为Fe2+，在pH=2~9范围内，使Fe2+与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物[Fe(C12H8N2)3] 2+，其lgK f=21.3，λmax=510nm。
反应式如下：本方法不仅灵敏度高(摩尔吸光系数ε= 1.1×104L·mol·cm-1)，而且选择性好，相当于含铁量40倍的Sn2+，Al3+，Ca2+，Mg2+，Zn2+，SiO32-,20倍的Cr3+，Mn2+，PO43-；，5倍的Co2+，Cu2+等均不干扰测定。
在分光光度法中，一般均选用有色物质的最大吸收波长λmax作为入射光波长(除非在该波长下有干扰)，这样，测量的灵敏度和准确度都较高。
λmax通常通过制作吸收曲线得到，方法是：取待测物的1个标准溶液，在不同的波长(λ)下测量其吸光度(A)，以A对λ作图，便得吸收曲线，曲线波峰所对应的波长即为最大吸收波长。
可见分光光度法测定水样中微量铁的含量
实验三 可见分光光度法测定水样中微量铁的含量一、实验目的：1、掌握722型分光光度计构造及使用方法。
2、掌握标准曲线的绘制，并通过标准曲线测出水样中Fe3+的含量。
二、实验原理：在可见光区的吸光光度测定中，若被测组份本身有色，则可直接测定。
若被测组份本身无色或色很浅，则可利用显色剂与其反应（即显色反应），使生成有色化合物，进行吸光度的测定。
大多数显色反应是络合反应。
对显色反应的要求是：1、灵敏度足够高，一般选择产物的摩尔吸光系数大的显色反应，以适合于微量组份的测定；2、选择性好，干扰少或容易消除；3、生成的有色化合物组成恒定，化学性质稳定，与显色剂有较大的颜色差别。
在建立一个新的吸光光度方法时，为了获得较高的灵敏度和准确度，应从显色反应和测量条件两个方面，考虑下列因素：1、研究被测离子、显色剂和有色化合物的吸收光谱，选择合适的测量波长；2、溶液PH值对吸光度的影响；3、显色剂用量、显色时间、颜色的稳定性及温度对吸光度的影响；4、被测离子符合比尔定律的浓度范围；5、干扰离子的影响及其排除的方法；6、参比溶液的选择。
此外，对方法的精密度和准确度，也需进行试验。
铁的显色试剂很多，例如硫氰酸铵、巯基乙酸、磺基水杨酸钠等。
邻二氮菲是测定微量铁的一种较好的试剂，它与二价铁离子反应，生成稳定的橙红色络合物（l g K稳=21.3），最大吸收波长入max=510nm。
Fe2+ + 22+此反应很灵敏，摩尔吸光系数ε为1.1×104。
在PH2~9之间，颜色深度与酸度无关，颜色很稳定，在有还原剂存在的条件下，颜色深度可以保持几个月不变。
本方法的选择性很高，相当于铁含量40倍Sn2+、A13+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-；20倍的Cr3+、Mn2+、VO3—、PO43—；5倍Co2+等均不干扰测定，所以此法应用很广。
分光光度法中，当入射光波长一定，溶液的温度一定，液层厚度一定时，根据Beer定律可得：A=K c即在一定条件下，吸光度与溶液的浓度成正比。
分光光度法测定微量铁
分光光度法测定微量铁分光光度法是指利用物质吸收和透过不同波长的可见光或紫外线，对试样中的成分进行测定的方法。
微量铁是指含铁浓度较低的样品。
本文将介绍如何利用分光光度法测定微量铁的原理、仪器、操作步骤及数据处理方法。
一、原理铁离子在紫外-可见吸收光谱中有很强的特征吸收峰。
在波长范围为200-800nm处，铁离子的最强吸收峰位于400-500nm区域内。
因此，利用紫外-可见分光光度法测定铁离子可以选定适当的波长进行测定。
对于微量铁的测定，常采用1，10-菌落素橙（1，10-phenanthroline orange）作为配合剂，形成铁离子和1，10-菌落素橙配合物，从而实现铁离子的高选择性分析。
配合物的吸收峰位于510～530nm，可以通过分光光度法进行测定。
二、仪器分光光度计三、操作步骤1、制备标准曲线：将铁标准溶液分别加入一系列标准量瓶中，其浓度可控制在0-1.2μg/mL之间，然后分别加入一定量的1,10-菌落素橙溶液，通常为1mL。
用去离子水稀释至刻度线，搅拌均匀。
最后在分光光度计上，以510-530nm为波长进行测定吸收度，根据标准曲线计算出所测样品中铁的浓度。
2、取待测样品：取适量的待测样品，加入足够的1,10-菌落素橙溶液，在水浴中加热混合溶液，待其冷却后取1mL加入10mL容量瓶中，用去离子水稀释至刻度线，搅拌均匀即可。
3、测量：在分光光度计上以510-530nm为波长进行测定吸收度，记录读数。
四、数据处理方法1、标准曲线的绘制：以铁标准溶液的浓度为横坐标，以吸收度为纵坐标，绘制浓度-吸收度曲线。
2、计算未知样品的铁浓度：根据标准曲线计算出所测样品中铁的浓度。
3、参考范围：根据不同的样品类型和所测铁的含量确定参考范围。
实验___邻二氮菲分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验目的：1.学习如何选择分光光度法分析的条件。
2.学习绘制标准曲线，掌握分光光度法测铁的操作方法。
3．掌握721型或722型分光光度计的正确使用方法。
实验原理：邻二氮菲（又名邻菲罗啉）是测定铁的一种良好的显色剂在pH = 1.5～9.5的溶液中,Fe2+与邻二氮菲生成稳定的橙红色配合物，配合物的配位比为3:1。
Fe3+与邻二氮菲作用形成蓝色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺或对苯二酚使Fe3+还原为Fe2+。
测定时，溶液酸度控制在pH 3～8较为适宜，酸度高，则反应进行缓慢；酸度太低，则Fe2+离子易水解，影响显色。
Bi3+、Cd2+、Hg2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定。
CN-存在将与Fe2+生成配合物，干扰也很严重。
以上离子应事先设法除去。
实验证实，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VO3-、PO43-，5倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。
本法测铁灵敏度高，选择性好，稳定性高。
实验仪器及试剂：721型分光光度计、容量瓶(50mL)7只、吸量管(10mL)2只；铁标准溶液(100μg/mL)、铁标准溶液(10μg/mL)、10%盐酸羟胺溶液（临用时配制）、0.1%邻二氮菲溶液（临用时配制）、NaAc溶液0.1mol/L。
实验步骤：1.显色溶液的配制：取50mL容量瓶7只,分别准确加入10.00μg/mL的铁标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL及试样溶液5.00mL,再于各容量瓶中分别加入10%盐酸羟胺1mL、0.1mol/L NaAc溶液5mL及0.1%邻二氮菲溶液3mL,每加一种试剂后均摇匀再加另一种试剂,最后用水稀释到刻度,充分摇匀,放置5min待用。
2.测绘吸收曲线及选择测量波长：选用加有6.00mL铁标准溶液的显色溶液,以不含铁标准溶液的试剂溶液为参比,用2cm比色皿,在721型分光光度计上从波长450～550nm间,每隔10nm测定一次吸光度A值在最大吸收波长左右,再每隔5nm各测一次。
分光光度法测定微量铁的含量实验报告
分光光度法测定微量铁的含量实验报告
实验目的：
通过分光光度法测定微量铁的含量。
实验原理：
实验仪器和试剂：
仪器：分光光度计、移液枪。
试剂：铁标准溶液、硝酸铵和硝酸亚铁、硫酸亚铁。
实验步骤：
1.取适量的硝酸铵和硝酸亚铁混合溶液，稀释成适宜的浓度。
2.在分光光度计上选择适当的波长，进行仪器的初步调试。
3.取一系列含有不同浓度的铁标准溶液，每个浓度分别进行三次测定，并计算平均值。
4.将测量所得的吸光度与浓度制成标准曲线。
5.将待测溶液纳入曲线范围内进行测定，计算出溶液中铁的含量。
实验结果和数据处理：
根据实验所得的吸光度和浓度数据，我们制成了铁的标准曲线。
通过
测量待测溶液的吸光度，我们进一步计算出溶液中铁的浓度。
实验讨论：
1.实验中所用的试剂的纯度对实验结果有重要影响。
如果试剂的纯度
不高，将会引入误差。
2.在实验过程中，仪器的选择和操作也会对实验结果产生一定的影响。
准确操作仪器，进行仪器的校准和调试是保证实验结果准确性的关键。
3.在实际应用中，还需要考虑样品的前处理，例如稀释、过滤等步骤。
4.在进行标准曲线绘制时，至少应该有三个不同浓度的标准溶液，每
个溶液进行三次测定，可以得到相对准确的结果。
实验结论：
通过分光光度法，我们成功测定了待测溶液中铁的含量。
该方法简便、准确，适用于微量铁含量的测定。
在实际应用中，我们应注意仪器的选择
和操作，以及试剂纯度对实验结果的影响。
通过合理的实验操作和数据处理，可以获得准确可靠的分析结果。
分光光度法测定微量铁的含量实验报告(标准曲线的测绘与铁含量的测定)
分光光度法测定微量铁的含量实验报告（标准曲线的测绘与铁含量的测定）实验报告：分光光度法测定微量铁的含量一、实验目的1.学习分光光度法测定微量铁含量的原理和方法。
2.掌握标准曲线的测绘方法，了解线性回归方程及其应用。
3.学会利用分光光度计测定样品中微量铁的含量。
二、实验原理分光光度法是一种常用的定量分析方法，其原理基于朗伯-比尔定律。
当一束单色光通过溶液时，光被吸收的程度与溶液的浓度和液层厚度成正比。
在一定波长下，吸光度A与溶液浓度C和液层厚度L的乘积成正比，即A=εCL。
其中，ε为摩尔吸光系数，L为液层厚度，C为溶液浓度。
通过绘制标准曲线，可以求得铁的含量。
三、实验步骤1.准备试剂和仪器：硝酸、高氯酸、硫酸、铁标准溶液（100μg/mL）、分光光度计、比色皿、容量瓶（100mL）、吸量管（10mL、5mL、2mL）等。
2.绘制标准曲线：分别取10mL、5mL、2mL铁标准溶液于三个100mL容量瓶中，各加5mL硝酸，20mL硫酸，摇匀，用去离子水定容。
将各溶液分别移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
记录数据并绘制标准曲线。
3.测定样品中铁的含量：将样品溶液移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
根据标准曲线查得铁的浓度，计算样品中铁的含量。
四、结果与分析1.标准曲线测绘结果在坐标纸上绘制标准曲线，横坐标为铁标准溶液的浓度（μg/mL），纵坐标为吸光度。
根据实验数据绘制标准曲线（图1）。
可以看出，随着铁浓度的增加，吸光度也逐渐增大。
表明铁浓度与吸光度之间存在线性关系。
可以得出线性回归方程为：y=kx+b（k为斜率，b为截距）。
根据实验数据可计算出斜率k和截距b的值。
图1 标准曲线（请在此处插入标准曲线图）2.铁含量测定结果将样品溶液移入比色皿中，用分光光度计在562nm波长下测量吸光度。
根据标准曲线查得铁的浓度（μg/mL），计算样品中铁的含量（mg/L）。
结果如表1所示。
试验分光光度法测定铁
实验十四邻二氮菲分光光度法测定铁的含量一、实验目的1.学习吸光光度法测量波长的选择方法；2,掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法3.掌握分光光度计的使用方法.二、实验原理分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法,分光光度法用于定量分析的理论根底是朗伯比尔定律,其数学表达式为：A= £b C邻二氮菲〔又称邻菲罗咻〕是测定微量铁的较好试剂,在pH=2〜9的条件下, 价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物.摩尔吸光系数s =11000 L mol-1cm-1 在显色前,用盐酸羟胺把Fe3+复原为Fe2+02Fe3++2NH2OHHCl^2Fe 2++ N2 + 4H +2H2O +2Cl-Fe2++ Phen = F* - Phen 倘红色〕用邻二氮菲测定时,有很多元素干扰测定,须预先进行掩蔽或别离,如钻、锲、铜、铅与试剂形成有色配合物；鸨、钳、镉、汞与试剂生成沉淀,还有些金属离子如锡、铅、钿那么在邻二氮菲铁配合物形成的pH范围内发生水解；因此当这些离子共存时,应注意消除它们的干扰作用.三、仪器与试剂1.醋酸钠：l mol L-1;2.盐酸：6 mol L-1;3.盐酸羟胺：10% 〔用时配制〕；4.邻二氮菲〔%〕:邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中；5.铁标准溶液.〔1〕100 ^g -M标准溶液：准确称取〔NH4〕2 Fe 〔SO4〕2 12H20于烧杯中,加入20 mL 6 mol L-1盐酸及少量水,移至1L容量瓶中,以水稀释至刻度,摇匀.6.仪器:7200型分光光度计及l cm比色皿.四、实验步骤1.系列标准溶液配制〔1〕用移液管吸取10mL100仙g • niLft标准?§液于100mL容量瓶中,参加2mL 6 mol L-1盐酸溶液,以水稀释至刻度,摇匀.此溶液Fe3+浓度为10仙g •吊L〔2〕标准曲线的绘制：取50 mL比色管6个,用吸量管分别参加0 mL,2 mL,4 mL, 6 mL, 8 mL和10 mL10 g -赤帙标准溶液,各加l mL盐酸羟胺,摇匀；经再加2mL 邻二氮菲溶液,5 mL醋酸钠溶液,摇匀,以水稀释至刻度,摇匀后放置10min.2.吸收曲线的绘制取上述标准溶液中的一个,在分光光度计上,用l cm比色皿,以水为参比溶液, 用不同的波长,从440〜560 nm,每隔10 nm测定一次吸光度,在最大吸收波长处每隔5nm测定一次吸光度.然后以波长为横坐标,吸光度为纵坐标绘制吸收曲线,从吸收曲线上确定进行测定铁的适宜波长〔即最大吸收波长〕.3.铁含量的测定吸取未知液5 mL至50mL容量瓶中,按标准曲线制作步骤测定其吸光度.从标准曲线上查出和计算未知液中铁的含量(g - rrl L 0五、思考题1、本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器较为适宜？为什么？本实验的所用的溶液量都比拟少,用移液管或吸量管比拟适宜.标准及铁试样的量取要特别准确,而其它试剂都为过量,相对要求不是很严格.2、制作标准曲线和进行其它条件试验时,参加试剂的顺序能否任意改变？不能.先加盐酸羟胺是将铁复原,再加络合剂与铁反响,最后醋酸钠调酸度,假设先加络合剂那么只测二价铁,假设醋酸钠先加那么铁会形成沉淀,无法显色.3、根据本实验结果,计算邻二氮菲-Fe(II)络合物的摩尔吸光系数？£ = A/(b C)六、7200型分光光度计的使用(1)通电,预热20min;(2波长选择:用波长调节旋钮设置所需的单色光波长；(3)翻开样品室盖,在1~4号放置比色皿槽中,依次放入校具(黑体),参比液杵品液1;(4)将％丁校具(黑体)置入光路,在T方式下按"％T"键,此时仪器自动校正后显示""(5)将参比液拉入光路中,按"0A/100%T"键调0A/100%T,此时仪器显示"BLA",表示仪器正在自动校正,校正完毕后显示"100"%T或""A ;(6)将两样品液分别拉入光路中,此时假设在"T"方式下那么可依次显示样品的透射比(透光度)假设在"A"方式下,那么显示测得的样品吸光度.七、考前须知1、不能颠倒各种试剂的参加顺序2、每改变一次波长必须重新调零3、每次测定前要注意调满刻度1.分光光度法用于定量分析的理论根底.解：分光光度法是根据物质对光选择性吸收而进行分析的方法,分光光度法用于定量分析的理论根底是朗伯比尔定律,其数学表达式为：A c2.邻二氮菲与铁的显色反响.解：在pH=2〜9的溶液,Fe2+与邻二氮菲〔Phen〕生成一种稳定的橘红色螯合物Fe〔Phen〕32+,其稳定常数为X1021,切ax=M04mol L-1cm-1.邻二氮菲与Fe3+也能生成配位比为3 1的淡蓝色螯合物, 在显色前要用盐酸羟氨将Fe3+全部复原为Fe2+o3.分光光度法实验条件的选择.解：测量波长、溶液的酸度、显色剂用量、显色时间、温度、溶剂以及共存离子的干扰及其消除等,都是通过实验来确定的.4.吸收曲线和标准曲线.解：吸收曲线是物质对于光源各种波长的光吸收程度的记录.它是分光光度法选择波长的依据.通过吸收曲线来选择适宜的测量波长〔max〕.标准曲线是在测量波长〔max〕下,测量系列标准溶液的吸光度,以浓度为横坐标,吸光度A为纵坐标,所对应的曲线.5.本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器量取较为适宜？为什么？解：本实验量取各种试剂时只有含铁标液和含铁的试样用吸量管,其它都用适当大小的量筒即可.由于只有标准溶液才用准确度高的吸量管量取.6.用邻二氮菲法测定铁时,为什么在测定前要参加盐酸羟氨溶液？盐酸羟氨溶液假设不是新配制的,对实验结果有何影响？解：用邻二氮菲法测定铁时,在测定前要参加盐酸羟氨溶液,目的是将溶液中所有的铁全部转化成二价铁,以预防三价铁干扰测定.假设盐酸羟氨溶液假设不是新配制的,那么三价铁不能全部转化成二价铁,所测铁的含量偏小.7.怎样用分光光度法测定试样中的全铁和亚铁的含量？解：将试样中的铁全部转化成二价铁,再用显色剂显色,那么测得的是全铁.假设先参加掩蔽剂将三价铁掩蔽起来,再用显色剂显色,那么测得的是亚铁.8.在实验中盐酸羟胺和醋酸钠的作用是什么？假设用氢氧化钠代替醋酸钠,有什么缺点？。
实验5-10可见分光光度法测定微量铁(精)
3
4
5
6
7
移取溶液体积/ mL
0.00
1.00
标液
2.00
标液
3.00
标液
4.00
标液
5.00
标液
50.00
水样
50.00
水样
100mL溶液含铁量/mg
—
—
吸光度
(2)以100 mL溶液中铁含量(mg)为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制吸光度对铁含量的标准曲线，从标准曲线上查出试样水的铁含量。
(3)按下式计算试样水中铁的质量浓度：
用吸量管分别吸取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 mL铁标准溶液于6个100 mL容量瓶中，加入50 mL水，用盐酸溶液或氨水调节pH为2，在各容量瓶中分别加入2.5 mL抗坏血酸溶液，摇匀，再加入10 mL乙酸-乙酸钠缓冲溶液、5 mL邻二氮菲溶液，用水稀释至铁
检查预习情况：
1．检查预习笔记
2．提问：
（1）朗伯-比耳定律的物理意义是什么?什么叫吸收曲线?什么叫标准曲线?
（2）邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验中，用（）作还原剂，其化学反应方程式为（）；（）作显色剂，其化学反应方程式为（）。
目的要求
(1)了解利用可见分光光度法进行定量分析的原理和方法；
思考题：
(1)实验中加入抗坏血酸和乙酸-乙酸钠缓冲溶液的作用如何?为什么要预先调节溶液的pH为2?
(2)根据实验数据计算邻二氮菲-亚铁配合物的摩尔吸光系数。
在选定波长下，用3cm玻璃吸收池分别取配制的标准系列显色溶液，以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定各溶液的吸光度。
用移液管移取试样水50.00 mL，置于100 mL容量瓶中，按配制标准系列同样的操作，顺序加入各种试剂进行还原和显色，并在同样条件下以未加铁标准溶液的试剂溶液作参比，测定试样溶液的吸光度。平行测定两份。
分光光度法测定微量铁_实验报告
邻二氮杂菲分光光度法测定铁一、目的要求1. 了解分光光度计的基本结构及其使用方法。
2. 掌握邻二氮杂菲分光光度法测定铁的实验技术。
3. 了解分光光度分析与测量条件的关系及其依据。
二、基本原理1. 光度法测定的条件：分光光度法测定物质含量时应该注意的条件主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。
显色反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时溶液的温度、显色时间及干扰物质的消除方法等；测量吸光度的条件包含应选择的入射光波长、吸光度范围和参比溶液等。
2. 邻二氮杂菲-亚铁络合物：邻二氮杂菲是测定微量铁的一种较好试剂。
在pH=2~9的条件下Fe 2+离子与邻二氮杂菲生成极稳定的橘红色络合物，反应式如下：N N+Fe 2+2+此络合物的lgK 稳=21.3，摩尔吸光系数ε=1.1×104。
在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe 2+离子还原为Fe 3+离子，其反应式如下：32222222242Fe NH OH HCl Fe N H O H Cl +++-+→++++测定时，控制溶液酸度在pH5左右较为适宜。
酸度高时，反应进行较慢；酸度太低，则Fe 2+离子水解，影响显色。
Ba 2+、Cd 2+、Hg +、Ag +、Zn 2+等离子与显色剂生成沉淀，Ca 2+、Cu 2+、Ni 2+等离子则形成有色配合物。
当有这些离子共存时，应注意它们的干扰作用。
三、仪器和试剂1. 仪器：尤尼柯2000光度计；50 mL 容量瓶；1 mL ，2 mL ，5 mL 移液管。
2. 试剂：100μg/mL 铁标准溶液：准确称取0.864g 分析纯4422()12NH Fe SO H O 置于一烧杯中，以30mL 2 moL/L HCl 溶解后移入1000mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。
10μg/mL 铁标准溶液：由100μg/mL 铁标准溶液准确稀释10倍而成。
10%盐酸羟胺溶液（因其不稳定，需临时配制） 0.1%邻二氮杂菲溶液（新配制）1 moL/LNaAc溶液。
分光光度法测定微量铁
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的⒈学习确定实验条件的方法，掌握邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理；⒉掌握721型分光光度计的使用方法，并了解此仪器的主要构造。
二、实验原理⒈确定适宜的条件的原因：在可见光分光光度法的测定中，通常是将被测物与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。
因此，显色条件的完全程度和吸光度的测量条件都会影响到测量结果的准确性。
为了使测定有较高的灵敏度和准确性，必须选择适宜的显色反应条件和仪器测量条件。
通常所研究的显色反应条件有显色温度和时间，显色剂用量，显色液酸度，干扰物质的影响因素及消除等，但主要是测量波长和参比溶液的选择。
对显色剂用量和测量波长的选择是该实验的内容。
⒉如何确定适宜的条件：条件试验的一般步骤为改变其中一个因素，暂时固定其他因素，显色后测量相应溶液吸光度，通过吸光度与变化因素的曲线来确定适宜的条件。
⒊本试验测定工业盐酸中铁含量的原理：根据朗伯－比耳定律：A=εbc。
当入射光波长λ及光程b一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。
只要绘出以吸光度A为纵坐标，浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即工业盐酸中铁的含量。
⒋邻二氮菲法的优点：用分光光度法测定试样中的微量铁，目前一般采用邻二氮菲法，该法具有高灵敏度、高选择性，且稳定性好，干扰易消除等优点。
⒌邻二氮菲法简介：邻二氮菲为显色剂，选择测定微量铁的适宜条件和测量条件，并用于工业盐酸中铁的测定。
⒍邻二氮菲可测定试样中铁的总量的条件和依据：邻二氮菲亦称邻菲咯啉（简写phen），是光度法测定铁的优良试剂。
在pH=2～9的范围内，邻二氮菲与二价铁生成稳定的桔红色配合物（（Fe(phen)3）2+）。
= 21.3，摩尔吸光系数ε510 = 1.1×104 L·mol-1·cm-1，而Fe3+能与邻此配合物的lgK稳二氮菲生成3∶1配合物，呈淡蓝色，lgK稳=14.1。
邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告
邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1.学习确定实验条件的方法和测定微量铁的分光光度法；2.掌握TU—1901型双光束紫外可见分光光度计的使用方法。
二、实验原理1.在可见光分光光度法测定无机物时，通过显色反应生成吸光系数较大的有色物质进行测。
2.确定适宜实验条件：改变其中一个影响因素，暂时固定其它影响因素，测吸光度，通过吸光度—该因素的曲线确定最适宜的显色条件。
其他因素的确定也照此方法。
3.本实验以邻二氮菲（phen）为显色剂，是光度法测定微量铁的优良试剂，pH在2~9时（pH=5~6），Fe2+ + 3phen [Fe(phen)3]2+(稳定的红色配合物)lgK稳=21.3，λmax=510nm,ε510=1.1×104L·cm-1·mol-1用盐酸羟胺将Fe（Ⅲ）还原为Fe（Ⅱ），以邻二氮菲做显色剂可测定试样中铁含量。
本方法选择性高，杂离子难以干扰。
三、仪器与试剂TU—1901型双光束紫外可见分光光度计，1cm比色皿，10mL吸量管，50mL 比色管。
1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液，100μg·mL-1铁标准溶液，0.15%phen水溶液，10%盐酸羟胺溶液，1 mol·L-1醋酸钠溶液，工业盐酸（试样）。
四、实验操作1.吸收曲线的绘制和测量波长的选择用吸量管吸取2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液注入50mL比色管中，再加入1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，加入2.00mL0.15%phen水溶液和5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液，稀释至刻度线，摇匀。
以蒸馏水为参比液，将上述试液装入1cm比色皿（2/3左右），在440nm~560nm 之间，每隔5nm测一次吸光度，以吸光度A为纵坐标，波长λ为横坐标绘制吸收曲线，选择最适宜波长。
2.确定显色条件⑴显色剂的用量在6支50mL比色管中各加入2.00mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1.00mL10%盐酸羟胺溶液，摇匀后，分别加入0.10、0.50、1.00、2.00、3.00、4.00mL0.15%phen 水溶液，再加入5.00mL1 mol·L-1醋酸钠溶液,，稀释至刻度线，摇匀。
分光光度计测定微量铁
分光光度计测定微量铁一、原理用抗坏血酸将试液中的三价铁离子还原成二价铁离子。
在pH为4～6时，二价铁离子与邻二氮菲生成橙红色配合物，在分光光度计最大吸收波长510nm处测定其吸光度。
大量的碱金属、钙、锶、钡、镁、锰、砷、铅、氯离子、溴离子、碘离子等等在试验溶液中，对测定无干扰。
部分干扰离子的消除方法，详见GB/T3049——2006附录A。
本通用方法描述了试剂中铁含量的测定技术，适用于所取试液中铁含量为10～500ug。
在试液制备时，应参考与所分析产品有关的标准对本方法进行必要的修改使其适合产品的测定。
二、准确测定判据式此测定用到的是络合滴定剂，所以用到络合滴定判据式如下：M + Y → MY［MY］’≈CM(计)［M］’=［Y］’≤0.1％Lg（KMY ’CM(计)）≥6说明：判据式与误差要求有关三、所用溶液、溶剂的制作方法标准铁的制备称取0.7022g硫酸亚铁铵[Fe(NH4)2(SO4)2•6H2O],溶于70ml硫酸溶液中,滴加0.02mol/L的高锰酸钾溶液至出现微红色不变,用纯水定容至1000ml。
此贮备溶液1.00ml含0.100mg铁。
邻二氮菲标准溶液制取：取1.0g邻二氮菲溶于200ml乙醇（甲醇）中，转移到1L的烧杯中，以蒸馏水定容至1L。
即可得到0.1％邻二氮菲标准溶液。
四、测定步骤1、吸收曲线的绘制准确移取10 µg/mL 铁标准溶液 5mL于50mL容量瓶中，加入10%盐酸羟胺1mL，摇匀，稍冷，加入1mol/L NaAc溶液5mL和0.1%邻二氮杂菲3mL，以水稀释至刻度，在分光光度计上，用1cm 比色皿，以水为参比溶液，用不同的波长从430 nm 开始到570nm为止，每隔10nm或20nm 测定一次吸光度。
然后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标绘制吸收曲线，从吸收曲线上确定该测定的适宜波长。
2、铁含量的测定（1）标准曲线的绘制：取50 mL容量瓶（或比色管）6支，分别移取2mL、4mL、6mL、8mL，铁标准溶液于5支容量瓶中，另一容量瓶中不加铁标准溶液（配制空白溶液，作参比）。
实验二-邻二氮菲分光光度法测定微量铁
实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁一、实验目的1、了解邻二氮菲测定铁的基本原理及基本条件，学习显色溶液的制备操作技术；2、掌握吸收曲线的测绘和测量波长的选择；3、掌握标准曲线法定量的实验技术；4、了解分光光度计的使用方法。
二、实验原理邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的一种较好的显色剂。
在pH4~6的溶液中，邻二氮菲与Fe2+生成稳定的橙红色络合物，反应式如下：Fe2++ 3phen → ［Fe(phen)3］2+橙红色络合物的最大吸收波长在510nm 处，摩尔吸光系数ε510 =1.1×104，反应的灵敏度、稳定性、选择性均较好。
此反应可用于微量Fe2+的测定，如果铁以Fe3+的形式存在，则应预先加入还原剂盐酸羟胺或对苯二酚将Fe3+还原成Fe2+，2Fe3+ +2NH2OH·HCl → 2Fe2+ + N2 + 2H2O + 4H+ + 2Cl-（盐酸羟胺）三、仪器与试剂1、仪器分光光度计、容量瓶（50 mL 7个）、吸量管（5 mL 4 支）、吸量管（10 mL 1 支）2、试剂（1）10 μg/mL 铁标准溶液：准确称取0.8634 g NH4Fe（SO4）2•12H2O，置于烧杯中，以50 mL 1mol •L-1 HCl 溶液溶解后转入1000 mL 容量瓶中，用水稀释到刻度，摇匀。
从中吸取50 mL 该溶液于500 mL 容量瓶中，加50 mL 1mol •L-1 HCl 溶液，用水稀释到刻度，摇匀；（2）10g/L 盐酸羟胺溶液（临用时配制）；（3）1g/L 邻二氮菲溶液（临用时配制）：应先用少许酒精溶液，再用水稀释；（4）NaAc-HAc 缓冲溶液（pH=4-6）：将30mL冰醋酸和30g无水醋酸钠溶于100mL 水中，稀释至500mL；（5）铁试样溶液：其中含铁0.02~0.06 mg/10 mL。
四、实验步骤1、显色溶液的配制：取50mL 容量瓶7 个，分别准确加入10μg/mL 的铁标准溶液0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00（mL）及试样溶液10.00mL，再于各容量瓶中分别加入10g/L 盐酸羟胺2.5mL，摇匀，稍停2min，再各加入NaAc-HAc缓冲溶液5mL 及1g/L 邻二氮菲溶液5mL，每加一种试剂后均摇匀再加另一种试剂，最后用水稀释到刻度，摇匀。
水中微量铁的测定实验报告
一、实验目的1. 掌握分光光度法测定水中微量铁的原理和方法。
2. 熟悉邻菲啰啉分光光度法测定水中铁的实验步骤。
3. 学会使用分光光度计和绘制标准曲线。
4. 了解水中铁的存在形态及对水质的影响。
二、实验原理水中铁主要以二价铁（Fe2+）和三价铁（Fe3+）的形式存在。
在酸性条件下，二价铁与邻菲啰啉生成稳定的橙红色络合物，其吸光度与铁浓度成正比。
通过测定吸光度，可以计算出水中铁的浓度。
三、实验仪器与试剂1. 仪器：分光光度计、1cm比色皿、具塞比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。
2. 试剂：（1）铁贮备液（100g/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]，加50毫升11 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为100.0g/mL。
（2）铁标准使用液（20g/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液中Fe2的质量浓度为20.0g/mL。
（3）0.5%邻菲啰啉水溶液：配制时加适量无水乙醇，溶解后用水稀释至100mL。
（4）盐酸羟胺溶液：称取1g盐酸羟胺，加适量水溶解后，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
（5）盐酸溶液：浓盐酸，稀释至1mol/L。
四、实验步骤1. 标准曲线的绘制（1）取7支50ml具塞比色管，分别加入0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0ml铁标准使用液，用水稀释至刻度，摇匀。
（2）向各比色管中加入1ml盐酸羟胺溶液，2ml邻菲啰啉溶液，混匀。
（3）室温下放置10分钟。
（4）以空白溶液为参比，用1cm比色皿在波长510nm处测定吸光度。
（5）以铁浓度（mg/L）为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
2. 水样中铁的测定（1）取水样50ml于50ml具塞比色管中。
（2）按标准曲线绘制步骤，测定吸光度。
分光光度法测定水中微量铁
5 思考与讨论
1.本实验中哪些试剂应准确加入，哪些不必严格准确 加入? 加入溶液的顺序能否颠倒？为什么? 2.加入乙酸钠的目的是什么?
谢谢！
3 仪器和试剂
1）主要仪器
仪器 规格/型号
分光光度计 T6新世纪紫外可见分光光度计(含比色皿)
容量瓶
移液管
50、100、1000mL等
1、2、5、10mL等
3 仪器和试剂
2）主要试剂
试剂 铁标准液
盐酸羟胺 邻二氮菲 乙酸钠
配制浓度 10 ug/mL
10 % 0.15 % 1 mol/L
仪器基本结构和使用注意事项
光 源
单色器
吸收池
检测器
数据处理系统
1) 可见光区用玻璃吸收池（比色皿）； 2) 吸收池用于盛放分析试样，使用前用试液润洗2-3次； 使用完毕后，立即用蒸馏水或有机溶剂冲洗干净，并擦 净水渍；比色皿透光面切勿直接用手接触，保持洁净， 先用滤纸吸干、再用擦镜纸擦净外部液体；
4 实验步骤
（1）配制溶液
A--吸光度,表征物质对光吸收程度的量 Ii--入射光强 It--透射光强 T--透过率 --摩尔吸光系数 b--液层厚度（光程长度） c--被测物浓度
2 实验原理
根据朗伯-比耳定律：A=ε bc，当入射光波长λ 及光程b 一定时，在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质 的浓度c成正比。只要绘出A-c标准曲线，测出试液的吸光度， 就可以由标准曲线查得对应的浓度值，即未知样中铁的含量。
（2）吸收曲线的绘制和测量波长的选择
4 实验步骤
（3）标准曲线的绘制
用1cm比色皿，以试剂空白为参比溶液，在选定 波长（510nm）下，测定1-5号标准溶液的吸光度。以 铁标准液浓度c为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A-
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分光光度法测定微量铁
姓名###专业 化学工程与工艺 学号 2904090120 日期 2011 年 11 月 9 日 星期三
一、实验原理
吸光光度法是根据溶液中物质对光选择性的吸收而进行的分析方法。它具有较高的灵敏 度和一定的准确度，特别适宜于微量祖坟的测定。 吸光光度法测定微量铁的显色剂， 目前大多数采用邻二氮菲为显色剂。 在 pH=2~9 的挑件下， 二价铁离子与邻二氮菲生成稳定的橘红色络合物，络合物的 lgK=21.3 ，摩尔吸光系数为 1.1*104。 显色前要用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子，测定是应控制溶液浓度在 pH=5 左右为宜。 分光光度法测定物质含量是应注意的主要是显色反应的条件和测量吸光度的条件。显色 反应的条件有显色剂用量、介质的酸度、显色时间、显色时溶液的温度、干扰物质的消除方 法等。 测量吸光度的条件包括应选择的入射光波长，吸光度范围和参比溶液。 本实验帮助学生研究邻二氮菲测铁摘入射光波长、 络合物肉 on 工业的稳定性、 显色剂浓度、 溶液 pH 值的影响等几个方面确定实验的最佳条件。
条件实验 显色剂用量的选择
取 7 个 50mL 的容量瓶， 各加入 1mL 铁标准溶液， 1mL 盐酸羟胺， 摇匀。 在分别加入 0.1、 0.3、0.5、0.8、1.0、2.0、4.0mL 邻二氮菲和 5mLNaAc 溶液，以水实施至刻度，摇匀，放置 10min。用 1cm 比色皿，以蒸馏水为参比溶液，在选择波长系测定各溶液的吸光度。以邻二 氮菲溶液的体积 V 为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制 A 与 V 的关系的显色剂用量影响曲 线。得出测定铁是显色剂的最适宜用量。
没有干扰离子。 2、本实验量取各种试剂时应分别采用何种量器较为合适？为什么？ 答：应采用移液管或是滴定管，因为要准确量取物质的体积。 3、对所做的条件实验进行讨论并选择适宜的测量条件。 答：显色剂为 2mL 的邻二氮菲溶液，显色时间 10min 为宜。
μg
三、实验步骤 吸收曲线的制作和测量波长的选择 在 50mL 容量瓶中按次序准确加入以下溶液，标准铁溶液 5mL，盐酸羟胺 1mL，摇匀， 在加入 NaAc 5mL，邻二氮菲 3 mL。用水稀释到刻度。在 721 型分光光度计上用 1cm 比 色皿以水为参比溶液，从 440~580nm 之间测定吸光度（A） 。每隔 20nm 测定一次，其 中从 480~540nm，每隔 10nm 测定一次。最后以波长为横坐标，吸光度为纵坐标魂之吸 收曲线。从吸收曲线上找出最大的吸收波长，用以进行铁的测定。
8.0 0.313
10.0 0.383
吸光度
0.45 0.4 0.35 0.3 0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 0 2 4 6 8 10 12 吸光度
未知量为 7.3mL。
六、思考题 1、邻二氮菲分光光度法测定铁的适宜条件是什么？ 适宜的条件是：pH=5 时，二价铁离子和邻二氮菲生成稳定的橘红色的络合物，且溶液中
0.3 0.048
0.5 0.048
0.8 0.043
1.0 0.055
2.0 0.048
4.0 0.054
吸光度
0.06 0.05 0.04 0.03 吸光度 0.02 0.01 0 0 1 2 3 4 5
由图可知，显色剂最适宜的用量是 1.0mL。 显色时间 显色时间 min 吸光度 2 0.055 5 0.056 10 0.056 30 0.056
铁含量的测定
标准曲线的制作 在 6 个 50mL 容量瓶中，用吸量管分别加入 2.0、4.0、6.0、8.0、10.0mL 铁标准溶液，分别 加入 1mL 盐酸羟胺， 2mL 邻二氮菲和 5mLNaAc， 摇匀， 用顺稀释至刻度， 摇匀后放置 10min。 用 1cm 的比色皿，以试剂为空白对照，在所选的波长下，测量各溶液的吸光度。以含铁量 为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制标准曲线。 由绘制的标准曲线， 重新查出相应铁浓度的吸光度， 计算二价铁例子和邻二氮菲漯河无的 摩尔吸光系数ε。
吸光度
0.0562 0.056 0.0558 0.0556 0.0554 0.0552 0.055 0.0548 0 5 10 15 20 25 30 35 吸光度
由图可知，最适宜的显色时间是 10min。 标准曲线的制定 2.0 4.0 铁标准溶液 的用量 吸光度 0.096 0.175
6.0 0.239
显色时间
在一个 50mL 容量瓶中，加入 1mL 铁标准溶液，1mL 盐酸羟胺溶液，摇匀。在加入 2mL 邻二氮菲， 5mLNaAc ， 以水稀释至刻度， 摇匀。 立刻用 1cm 比色皿， 以蒸馏水为参比溶液， 在选择的波长下测量吸光度。然后一次测定放置 5，10，30，60 min 后的吸光度。以时间 t 为横坐标，吸光度 A 为纵坐标，绘制 A 与 t 的显色时间影响曲线。得出铁与邻二氮菲显色反 应完全所需要的适宜时间。
530 0.143
540 0.094
560 0.033
580 0.013
吸光度
0.25 0.2 0.15 0.1 0.05 0 400 420 440 460 480 500 520 540 560 580 600 吸光度
由图可知，最适宜的波长是 510nm。 显色剂的选择 显色剂的 0.1 用量 吸光度 0.044
式样中铁含量的测定
准确吸取适量试液于 50mL 容量瓶中，按标准曲线的制作步骤，加入各种试剂，测量吸光 度。从标准曲线上查出和计算式样中铁的含量。
四、数据处理 460 波 长 440 nm 吸光 度 0.139 0.156
480 0.175
490 0.178
500 0.185
510 0.192
520 0.180
二、仪器及试剂 仪器 721 型分光光度计、50mL 容量瓶 8 个、2mL、5mL、10mL 移液管各一支。 1. 100 2. 10
μg mL
铁标准溶液
μg
mL
铁标准溶液
3. 盐酸羟胺 10%溶液（临时配置） 4. 邻二氮菲溶液 0.15%（新配置） 5. NaAc 溶液 1 mol/L 仪器：721 型分光光度计、比色皿、容量瓶 7 只，1mL、2mL、5mL、10mL 移液管各 1 支。 试剂 1. 铁标准溶液 100mL 2. 3. 4. 5. 6. 邻二氮菲 0.15%水溶液 盐酸羟胺 10%水溶液 NaAc 1mol/L NaOH 0.1 mol/L HCl