鹿瓜多肽注射液研究及应用进展

鹿瓜多肽注射液研究及应用进展

来源：中华实用医药杂志2010年10卷7期作者：廖晓玲

【关键词】鹿瓜肽注射液应用进展

鹿瓜多肽注射液是复方制剂，其组分：鹿科动物梅花鹿(Cervus Nippon Temmick)的骨骼和葫芦科植物甜瓜(Cucumismelo L.)的干燥成熟种子，经分别提取后制成的灭菌水溶液主要含有骨诱导多肽类生物因子、甜瓜籽提取物多种游离氨基酸和有机钙、磷等成分。具有调节骨代谢，刺激成骨细胞增殖，促进新骨形成;调节钙磷代谢，增加骨钙沉积;防止骨质疏松以及抗炎镇痛抗风湿等作用。本文就其研究及应用进展作一文献复习。

1 研究

1.1 对骨折愈合过程中生长因子表达的影响

骨折愈合是一复杂的组织修复再生的过程，受多种基因和骨生长因子的调节。量细胞因子在不同的骨折修复阶段发挥不同的作用，它们通过调节细胞增殖、分化以及基质的合成、钙化等作用来调控骨折修复。发挥主要作用的骨诱导多肽类生物因子包括骨形态发生蛋白(BMP-2)、转化生长因子-β1 (TGF-β1)、成纤维生长因子(VEGF)等。目的研究发现，BMP能诱导血管周围的间充质细胞转化为不可逆性骨系细胞、软骨细胞和成骨细胞，从而促进软骨及成骨细胞的增殖，促进骨痂形成，诱导新骨形成，促进骨折修复。同时，在BMP诱导新骨的形成过程中，又有TGF-β1和VEGF的共同参与，通过相互协调作用可好地诱导新骨的形成，使骨组织更成熟。近年来随着重组蛋白技术的发展，利用生长因子治疗骨折及骨缺损愈来愈引起人们的重视，由于骨折修复是由多种生长因子协同作用，单纯应用某一种生长因子促进骨折愈合效果并不理想，多种生长因子复合应用促进骨折愈合是治疗骨折的一个重要发展方向。汪茹等[1-4]研究了鹿瓜多肽注射液对骨折愈合过程中BMP-2、TGF-β1和VEGF等多种生物因子表达的影响。采用80只新西兰大白兔制成双侧桡骨中段3mm骨缺损模型，术后随机分为鹿瓜多肽低剂量组、鹿瓜多肽高剂量组、骨肽对照组和生理盐水空白组，分别每日予以肌肉注射0.1、0.2ml/kg鹿瓜多肽注射液。0.2ml/kg骨肽注射液或0.2ml/kg生理盐水。术后1、2、4、6周分批处死动物，取材行X线检查、组织学染色、生物力学测试、免疫组化染色及图像分析。结果：X线示鹿瓜多肽组骨愈合速度快于骨肽组和生理盐水组。术后6周，鹿瓜多肽高剂量组骨折完全愈合，髓腔再通;低剂量组和骨肽组骨折线基本消失，骨折端大量连接性骨痂影，骨痂面积缩小，髓腔未通;生理盐水组骨折间隙模糊。Masson三色染色：术后6周鹿瓜多肽组骨断端由重塑的板状骨连接，髓腔贯通，哈佛氏系统成熟、完整;骨肽组髓腔开始再通，板状骨和编织骨间杂;生理盐水组则以新生的编织骨为主。免疫组化：术后3周始，各组呈强阳性表达，鹿瓜多肽组较骨肽组和

生理盐水组信号强、面积大。表达以骨细胞、软骨细胞和成骨细胞为主，各组间着色不明显。术后6周鹿瓜多肽组BMP和VEGF染色阳性细胞极少，生理盐水组阳性细胞最多。图像分析：在骨折愈合过程中，鹿瓜多肽高剂量组和低剂量组血管内皮生长因子的表达量一直强于骨肽组和空白对照组，其中在1、2、3周时相点上统计学显示有显著性意义，鹿瓜多肽高剂量组和低剂量组血管内皮生长因子的表达高峰提前出现，约出现在第2周左右，较骨肽组和空白对照组早。生物力学测试：鹿瓜多肽高剂量组多力学指标优于其他组，低剂量组与骨肽组无明显差异，但均优于生理盐水组(P<0.05)。实验结果表明：(1)在骨折愈合过程中，鹿瓜多肽注射液促进了血管内皮生长因子的合成分泌高峰提前出现，并保持更高的强度和更长的时间，从而有效地促进了骨修复过程中血管的形成和骨生成，是其促进骨折愈合的重要机制。(2)不同剂量的鹿瓜多肽注射液均能使骨折处的BMP-2、TGF-β1和VEGF表达量在各时间段较生理盐水组明显增高(P<0.05);随着使用剂量的增加，BMP-2、TGF-β1和VEGF的表达量也增加，且表达的高峰期提早。高剂量组动物骨膜反应出现时间明显早于其他组，骨痂形成的面积也最大，术后6周骨折完全愈合，抗折能力也高于其他组。低剂量组与对照组相比差异无显著性，但均优于空白组。(3)不同的细胞因子有着各自的表达顺序和分布规律，BMP-2表达主要在软骨细胞和成骨细胞中，当软骨细胞成熟并转化为骨细胞时它们的表达趋于减少;VEGF的表达主要在细胞代谢活跃的肉芽组织中，在哈佛氏系统的形成过程中它的表达也较强烈。(4)骨肽注射液成分与鹿瓜多肽注射液相似，两种注射液治疗组较生理盐水组BMP-2和VEGF染色阳性细胞出现早、数量多，骨折愈合更快，强度高，表明两种注射液都具有调节骨代谢，刺激成骨细胞增殖，促进新骨形成的作用。但两种注射液各种生长因子的搭配不同，剂量关系也不同。表现在注射同等剂量的情况下，鹿瓜多肽组骨折愈合稍早，抗折强度更高。实验结果表明鹿瓜多肽注射液能调节骨折愈合过程中BMP-2、TGF-β1和VEGF的合成和分泌，进而调节骨原细胞的增殖和成骨细胞、软骨细胞的分化;能改变多种细胞因子的表达时间与表达量，促进骨折端各种生长因子早期大量的表达;除自身含有多种生长因子还具有聚集骨折端的生长因子及诱导骨折端生长因子自分泌的作用，在增加骨折局部生长因子浓度的同时也能刺激动物自体生长因子在骨折局部的分泌，有效促进骨折愈合。但对于鹿瓜多肽注射液是如何具体调控各种生长因子的分布，以及与其他骨生长因子共同作用的机制，还需进一步研究论证。

1.2 对膝骨性关节炎患者关节液一氧化氮(NO)含量的影响

膝骨性关节炎(KOA)是临床上一种慢性、进行性侵犯可活动关节特别是负重关节的常见病和多发病，主要表现为膝关节疼痛、僵硬、功能障碍。KOA是老年人活动障碍的主要原因。近年来开始关注一氧化氮(NO)在该病发展过程中的作用。研究发现NO作为一种多功能的生物信息分子，兼有第二信使的作用，可介导和调节多种生理病理过程。炎性细胞因子可激活软骨母细胞中的iNOS而产生大量的NO，引起软骨损伤，抑制软骨细胞增殖，促进软骨细胞凋亡。骨关节炎(OA)及KOA患者血液中NO和iNOS水平高于正常人，因此认为NO在软骨损伤中可能起重要作用，抑制NO的过量释放能够提高软骨修复组织的质量，寻找有效的iNOS抑制剂将为治疗开辟一条新途径。陈秀玲[5]穴位注射鹿瓜多肽注射液观察对膝骨性关节炎患者关节液中NO含量的影响。将100例符合膝骨性关节炎诊断标准的患者随机分为两组，治疗组5l例，对照组49例。两组均取内、外膝眼和犊鼻穴。治疗组穴位注射鹿瓜多肽注射液1ml;对照组注射透明质酸