最新高效液相色谱仪流动相配置操作规程汇编
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程操作说明：1.开机前准备：1.1仪器设备：Agilent 1200LC ● G1322A (在线脱气机)。
● G1311A (四元泵)。
● G1329A（标准型自动进样器）。
● G1316A（柱温箱）。
● G1315A（DAD检测器）。
● 色谱柱 1.2溶剂准备：● 有机相必须是色谱级纯。
● 水相必须是二次蒸馏水或用二级蒸馏水配置的缓冲盐溶液、酸碱溶液。
● 流动相使用前必须过0.45μm的微孔滤膜。
有机相和水相微孔滤膜的选择参考下表。
产品类别代表产品品系产品特点纤维素酯类混合纤维素水相成孔性能好，亲水性好，材料成本低。
膜（CN-CA）可耐稀酸。
不适合于酮类、酯类、强酸、强碱类液体过滤。
尼龙6 通用具有亲水性，较耐碱不耐酸。
在酮、酚、聚酰胺类（PA-6）醚及高分子醇类不被腐蚀。
聚砜（PS）通用良好的化学和热稳定性，耐辐射，机械聚砜类强度高。
有机PDEF耐化学腐蚀，耐氧化，耐高温，疏聚偏氟乙烯/PDEF/PTFE 水性（酒精处理后变清水性），PTFE耐酸聚四氟乙烯膜碱性强。
具有良好的化学稳定性，耐酸碱和各种聚烯烃类聚丙烯膜有机有机溶剂。
价格便宜，但孔径分布宽。
（PP）耐高温，耐有机溶剂、耐生物降解等。
无机材料陶瓷、玻璃通用 BP、金属膜2.基本操作步骤: (一)、开机：1、打开计算机,进入中文Windows XP画面,并运行CAG Bootp Server程序（部分安装程序不需要运行Bootp）。
2、打开 1200 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后，双击“仪器1 联机”图标，化学工作站自动与1200LC通讯，进入的工作站画面如下所示。
4、从“视图”菜单中选择“方法和运行控制”画面, 点击“视图”菜单中的“仪器实际值”，“在线光谱”，“化学工作站状态”，“系统视图”,“样品视图”，使其命令前有“√”标志，来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
Waters_e2695型高效液相色谱仪操作规程
Waters e2695 型高效液相色谱仪操作规程目的：建立Waters e2695高效液相色谱仪标准操作规程，为了使操作者操作高效液相色谱仪更规范，保证实验结果更精确。
范围：适用于Waters e2695高效液相色谱仪操作和维护保养。
职责: 本规程由仪器使用员负责实施，分析室主任负责监督。
1 开机前的准备工作1.1 检查设备电源、流路、信号连接是否完好。
1.2 流动相：配制相应的流动相，经0.22μm微孔滤膜抽真空过滤后，并超声脱气5分钟，必须使用色谱纯的溶剂，水或缓冲盐溶液要用超纯水；盛放溶液和流动相所用的玻璃容器必须用超纯水清洗。
1.3 样品溶液：按方法取样或配制标准样品溶液。
2 仪器的组成及开机平衡系统2.1 仪器组成。
本仪器由waters e2695分离单元、2489紫外可见光检测器、Empower色谱工作站和打印机组成。
2695分离单元包括四元梯度洗脱的溶剂输送系统，四通道在线真空脱气机，可容纳120个样品瓶的自动进样系统，柱温箱，内置的柱塞密封垫清洗系统，溶剂托盘，液晶显示器，键盘用户界面及软盘驱动器。
2.2 开机。
先打开电脑，依次接通2695 分离单元、检测器、计算机和打印机的电源。
接通2695 分离单元后，约20s 仪器开始自检，约4min后，显示主屏幕，此时继续各部件的初始化，待主屏幕上方标题区出现“ Idle ”时，仪器进入待命状态。
2.3 脱气（Degasssger）。
按面板右下方“Menu/Status”键进入“Status（1）”界面，移动光标至“Degasser Mode”，按Enter选择“On”，打开在线脱气。
一般默认是开的。
2.4 设定柱温。
在“Status”界面，光标至“Col Htr Set”，输入目标温度，按Enter。
（可在工作站方法中设置）2.5 灌注柱塞密封清洗泵（Prime Seal Wash）。
在主屏幕下，按“Diag”，显示“Diagnosties”屏幕，按“Prime Seal Wash”,显示“Prime Seal Wash”屏幕，按“Start”,直到清洗溶剂流出泵杆密封圈冲洗废液管，依次按“Halt”、“Close”、“Exit”。
Waters高效液相色谱仪标准操作规程
XXXXXXXXXX部仪器设备标准操作规程1 目的：建立Waters高效液相色谱仪标准操作规程。
2 范围：Waters高效液相色谱仪。
3 责任：化验室操作者。
4 规程：4.1 型号与主要性能指标4.1.1 型号4.1.1.1 主机Waters2695分离单元、Waters2489紫外/可见光检测器。
4.1.1.2 工作站Empower2。
4.2 主要技术指标:4.2.1 泵流量设定：0.000和0.010到10.000毫升/分，增量为0.001毫升/分。
流量准确度：±1%或10μL/分，取其中的较大值（0.200到5.000毫升/分），反压为600psi下的脱气甲醇。
４.2.2 检测器：光源：氘灯。
波长范围：190～700nm波长精度：±1nm4.2.3 柱温箱：温度设定范围：20～60℃，间隔：1℃控温精度：±5℃4.2.4 工作站计算机：Dell OPTIPLEX330（操作系统Windows XP）。
4.2.5 打印机：HP LaserJet P1008打印机。
5 操作条件：5.1 电源要求：950VA（最大值）线电压：85到132Vac或180到250Vac频率：47到63Hz5.2 环境条件：温度：4～40℃，相对湿度：20～80%。
5.3 机房内应清洁无尘，无易燃、易爆和腐蚀性气体，室内排风良好。
5.4 仪器应平稳放置在工作台面上，便于操作，周围无强烈的机械震动和电磁干扰，仪器接地应良好。
6 操作前准备:6.1 配制所需流动相。
6.2 配制和制备所需的对照品溶液和供试品溶液。
6.3 将色谱柱连接到色谱仪管路系统上。
7 操作步骤：7.1 打开交流稳压电源开关，稳压电源上电压表指示并稳定至220V。
7.2 将“2695分离单元”电源开关（位于左侧面板的面板顶部）推到（开）I 位置即可启动“2695分离单元”, 启动诊断程序将启动。
启动诊断程序的初始部分成功后，前面板上将显示Main（主）屏幕。
高效液相色谱仪流动相配置操作规程
高效液相色谱仪流动相配制标准操作规程1.目的
明确高效液相色谱法流动相配制过程,保证操作过程的规范性;
2.适用范围
适用于实验室高效液相色谱法流动相配制;
于清洁的带塞量筒中,加入适量纯水,振摇,待固体完全溶解后,再加纯水至规定刻度,盖上塞子,摇匀;
4.2.4若该流动相对PH值有特殊要求,根据流动相配制规定的体积比例,用酸或碱调节PH值,用PH计测定直至规定范围内;
4.3流动相抽滤
4.3.1含水流动相和不含水流动相的抽滤装置应区分,抽滤不含水的有机溶剂类流动相所用装置必须是干燥无水的;
4.3.2抽滤装置准备：将过滤器套在三角烧瓶上,用镊子夹取0.45μm的水系或有机滤膜一张,放在砂芯过滤器上注意：滤膜应将过滤面完全覆盖；再将量杯压在滤膜上,量杯边缘和过滤器的边缘对齐；用配套的夹子将过滤器和量杯接头边缘
4.6流动相配制工具清洁
4.6.1配制含水流动相用器具：先用自来水清洗一次,再用纯化水清洗3次,沥干后封口备用;
4.6.2配制不含水流动相用器具：用纯有机溶剂少量倒入已安装完毕的抽滤装置内,抽滤润洗一次,再将抽滤过的有机溶剂转入量筒内润洗量具,洗液倒入废液桶
后,待用;
4.7填写配制记录
流动相配制后,配制人员及时填写相应的配制记录;
4.8注意事项
4.8.1流动相所用溶剂应选用色谱纯、高纯水或双蒸水;。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程高效液相色谱仪（HPLC）是一种重要的分析仪器，广泛应用于化学、生命科学、环境监测等领域。
为了保证色谱仪的正常运行和准确分析结果，需要遵守以下操作规程：1. 准备工作a. 首先，确保色谱仪及其附件的电源已接通，并确认仪器处于正常工作状态。
b. 检查溶剂桶内的溶剂是否充足并无杂质，并确认管路连接正常。
c. 检查流动相液位是否正常，并调整泵的流速和梯度程序参数。
2. 样品制备和准备a. 样品应充分溶解并过滤净化，以避免样品中的杂质对色谱分离产生干扰。
b. 选择合适的进样方式（自动或手动），并根据进样方式调整进样器的参数。
3. 进样器操作a. 将样品注射器插入进样口，并注意不要损坏色谱柱。
b. 设置进样体积和进样速度等参数，并进行一次空白进样以清洗进样器。
4. 色谱柱准备a. 定期检查色谱柱是否损坏，并根据需要更换。
b. 根据实验需要选择合适的色谱柱，并注意记录色谱柱的批号和使用次数。
5. 柱温控制a. 根据分析需要选择合适的柱温，并使用温度控制系统保持恒定。
b. 注意避免温度突变和波动，以保证分析结果的准确性和重复性。
6. 检测器操作a. 根据需要选择合适的检测器，如紫外-可见光检测器（UV-Vis）、荧光检测器、电导检测器等。
b. 设置检测器的参数，如波长、增益和灵敏度，并进行基线校准。
7. 数据采集与处理a. 启动数据采集系统，并设置采集参数，如采样率、数据类型和运行时间等。
b. 对采集到的数据进行处理和分析，如峰识别、定量分析和峰面积计算。
8. 清洗和维护a. 实验结束后，关闭色谱柱和进样器的阀门，并用溶剂清洗色谱柱和进样器，以防止堵塞和降低杂质残留。
b. 清洗完成后，注意关闭色谱仪的电源，并按照要求对色谱柱和进样器进行维护和保养。
总结：高效液相色谱仪的操作规程包括准备工作、样品制备、进样器操作、色谱柱准备、柱温控制、检测器操作、数据采集与处理以及清洗与维护等。
遵守这些规程可以确保色谱仪的正常运行和准确分析结果，提高实验效率。
高效液相色谱仪的操作规程
高效液相色谱仪的操作规程
说明：高效液相色谱仪应安装在有强力通风的实验室中，实验室的高处和低处应设置两个通风口，以利于低沸点和高沸点有机溶剂蒸汽的排放，以保证实验室工作
人员的安全。
一．目的：提供通用的高效液相色谱仪的操作规程
二．范围：适用于侨昌化学有限公司高效液相色谱仪的操作
三．操作规程
1.准备好用作流动相的各种溶剂，经过滤（通过≤0.5um的滤膜）、脱气后，按比例配好
置于储液罐中。
梯度洗脱时，每种溶剂置于一个储液罐中，将溶剂过滤器插入储液罐底部，
2.将选用的高效液相色谱柱安装在流路中，拧紧连接的柱接头。
3.检查并连接好电路，将检测器输出信号线与数据处理系统连接好。
4.打开高压输液泵电源开关，调节色谱流动相流量 1.0ml/min。
（对内径 4.6mm、柱长
10—25cm色谱柱，填充5—10um填料，柱前压约6—15MPa）。
5.PURGE,冲洗泵头3-5MIN
6.开泵，平衡色谱柱系统。
7.打开可变波长紫外吸收检测器电源，调节好检测波长，排除吸收池中的气泡，待检测器
输出的基线稳定后，就可进行分析。
8.检测
9.若使用折光指数检测器，打开电源后，首先确定检测器温度，待恒温后，再选定待测的
折光指数间隔，待基线稳定后可进行分析。
10.如欲进行梯度洗脱，可由梯度控制单元设定欲进行的梯度洗脱程
序，进样后就可按梯度洗脱程序进行分析。
11.分析结束后，继续用流动相清洗进样阀和检测器约10—20min。
12.依次关闭检测器、梯度洗脱装置，高压输液泵的电源。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1．开关机顺序●开机顺序：打开LC各单元电源－控制器电源－电脑－LC-Solution工作站，开机后能听到“哔”声。
●关机顺序：与开机顺序相反，即先关闭LC-Solution工作站－控制器－LC各单元电源2．流动相及样品的准备●流动相配制所用的有机相必须是色谱级的，所用的水必须是双重蒸馏水。
流动相必须经0.45um 的微孔滤膜过滤后方能进入LC系统。
水和有机相所用的微孔滤膜不同，有机相（如甲醇）的过滤用F膜，水用水膜。
●样品溶液亦必须用0.45um 的微孔滤膜过滤后才能进样。
3．工作站的进入及系统的开启●双击桌面上的“labsolution”图标，选择“operation”项并单击，在弹出窗口后按OK进入工作站。
●首先打开A、B泵上的排空阀（open方向旋转180度）。
然后按二泵面板上的“purge”键开始自动清洗A、B流路3分钟，然后在分析参数设置页中设置流速1ml/min，BCONC 0％，并设置合适的检测波长，柱温，停止时间。
在完成后点击“Download”将分析参数传输至主机。
●分析方法的保存：选择file－save method file as－取名保存文件●系统的启动：点击“instrument on/off”键开启系统（此时泵开始工作。
4．进样准备●观察基线及柱压，待基线平直（－5～80mv），压力稳定（0.5Mpa内）时方可进样。
5. 进样●点击助手栏中的“single start”键，弹出对话框，在对话框中输入“sample name”“method”“data file”等。
●填完后点击“start”，出现触发窗口，进样，仪器开始自动采样分析。
6. 数据文件的调用及查看●点击助手栏中的“Postrun analysis”键，打开数据处理窗口。
●打开文件搜索器，定位至数据文件所在文件夹，选择文件的类型，双击文件名即可打开数据文件（此时可以查看峰面积、保留时间等参数）。
高效液相色谱仪使用与操作规程
4 、检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正
常。
第二步、开 机
接通电源，依次开启不间断电源、四 元泵、自动进样器、柱温箱、检测器，待 泵和检测器自检结束后，打开电脑显示器、
主机，最后打开色谱工作站。
一）参数设定
1、 波长设定： 2 、流速设定： 3 、流动相规定的流动相冲洗系统，一般最少需6倍柱体积
的流动相。
检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。
观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1MPa。如
超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按检查管路后再操
作。
观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mV/min，噪声
二、样品
1、采用过滤或离心方法处理样品，
确保样品中不含固体颗粒； 2、用流动相或比流动相弱（若为反
相柱，则极性比流动相大；若为
正相柱，则极性比流动相小）的 溶剂制备样品溶液，尽量用流动
相制备样品液；
3、手动进样时，进样量尽量小，使 用定量管定量时，进样体积应为 定量管的3～5倍；
第四步、注意事项
人的方法及实验结果；
3、使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒， 洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针
筒3遍以上，并排除针筒中的气泡；
4、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过 滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用 5%稀硝酸溶液浸泡后再洗
四、出现肩峰或分叉
1.样品体积过大
1.用流动相配样,总的样品体积小于第一峰 的15% 2.样品溶剂过强 3.柱塌陷或形成短路通道 4.柱内烧结不锈钢失效 2.采用较弱的样品溶剂 3.更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
高效液相色谱仪操作规程-U3000(已打印)
戴安中国有限公司液相色谱操作规程-U3000一、操作前准备：1.1流动相的配制：1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。
1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜（0.45um）还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。
1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。
1.2对照品供试品处理：1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为0.1~1mg/mL（根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。
1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（0.45um）还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。
1.3色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。
二、开机：2.1打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；2.2打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；2.4选择开始＞程序＞Chromeleon＞Sever Monitor或双击屏幕右下角快捷图标,出现对话界面后点击Ｓtart启动,等Dongle序号出来以后（表示Sever Monitor程序运行正常）可以点击Close来关闭界面。
2.5打开“开始”/“程序”/“Chromel”/“Chromeleon”或双击在桌面上的Chromeleon图标（工作站主程序）打开HPLC软件系统主界面。
2.6 在左窗口中单击根目录，此时会在右边的窗口中出现一个“hplc.pan”文件，双击此文件打开HPLC控制面板程序。
2.7在控制面板“Pump”控制框中选中“connect”选框，Purge流路中气泡，设置总流速为适当的数值（建议要由0.2ml/min逐渐增加到适当的流速）后并按回车键（“Enter”）以示确定。
此时泵自动会以设置的流速进行运行。
高效液相色谱法标准操作规程
一、目的：建立高效液相色谱法标准操作规程，确保检验人员正确操作。
二、适用范围：适用于高效液相色谱法的测定。
三、职责：检验员负责本操作规程的执行。
四、正文：1 定义及概述：1.1 高效液相色谱系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱，对供试品进行分离测定的色谱方法，注入的供试品，由流动相带入色谱柱内，各组分在柱内被分离，并依次进入检测器，由积分仪或数据处理系统和处理色谱信号。
2 仪器与用具：高效液相色谱仪、进样器、电脑、试液瓶（1000ml）。
3 试液与试药：色谱甲醇、超纯水等。
4 对仪器的一般要求和色谱条件。
4.1高效液相色谱仪由高压输液泵、进样器、色谱柱、检测器、积分仪或数据处理系统组成。
色谱柱内径一般为3.9-4.6mm，填充剂粒径为3-10um。
超高效液相色谱仪是适应小粒径（约2um）填充剂的耐超高压、小进样量、低死体积、高灵敏度检测的高效液相色谱仪。
4.2 色谱柱4.2.1反相色谱柱以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等；常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
4.2.2正相色谱柱用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱。
常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
氨基键合硅胶和氰基键合硅胶也可用作反相色谱。
4.2.3离子交换色谱柱用离子交换填充剂填充而成的色谱柱。
有阳离子交换色谱柱和阴离子交换色谱柱。
4.2.4手性分离色谱柱用手性填充剂填充而成的色谱柱。
4.2.5色谱柱的内径与长度，填充剂的形状、粒径与粒径分布、孔径、表面积、键合基团的表面覆盖度、载体表面基团残留量，填充的致密及均匀程度等均影响色谱柱的性能，应根据被分离物质的性质来选择合适的色谱柱。
4.2.6温度会影响分离效果，品种正文中未指明色谱柱温度时系指室温，应注意室温变化的影响。
为改善分离效果，可适当提高色谱柱温度，但一般不宜超过60℃。
高效液相色谱仪1流动相的配置及其注意事项
5 抽滤甲醇，水和冲洗液的顺序是超纯水，冲洗液和纯甲醇。因为超纯水过滤完后会有 残留，对冲洗液的影响不大，冲洗液需要用有机系滤膜，甲醇可以继续使用该滤膜。 6 抽滤完毕后用保鲜膜将各瓶封口，放到超声洗涤机里面超声30分钟，赶出液体内的 空气。
7 超声结束后，将各瓶放在高效液相色谱仪上面，记住要对号入座，甲醇瓶放在A处， 超纯水瓶放在B上的编号， 盖住各瓶，切记不要弄错。
8 将一切做完之后，就要清洗过滤装置和使用的仪器，流动相的配置和过滤装置记住不 要用任何洗涤剂进行清洗，只用超纯水进行淋洗，冲洗，还可以浸泡于装超纯水的烧 杯中然后放在超声机中进行清洗。 9 清洗干净后，水滴不能挂壁，放入烘箱中，温度控制在45度烘干。
二 配置过程的注意事项 1 取瓶子的时候要记住要拿稳，由于瓶子很高，脚下要垫台 阶才能取瓶子。 2 瓶子取下后要立即用封口膜封口，防止有灰尘进入瓶中。
3 甲醇有毒，要做好防护措施，戴手套和口罩，打开通风橱。 4 安装抽滤装置的时候要防止抽滤装置摔破。滤膜要放在正 中间，
5 抽滤顺序不能弄混，超纯水，冲洗液，甲醇。甲醇要保证 是色谱级纯甲醇，如果不能保证，就不能用。
6 超声洗涤时要确保瓶子不会倒下来，不要让溶液污染。
7 清洗过滤装置的时候不能用洗涤剂，因为洗涤剂中含有离 子和有机物，不能完全清洗干净，也不能用刷子和自来水， 因为会有颗粒物。 8 清洗后烘干时不能将温度设置过高，防止玻璃仪器高温变 形。 9 色谱瓶放在仪器上面的时候一定要记住对号放置，对号放 入吸液管，不能弄错。
高效液相色谱仪流动相的配 置及其注意事项
以甲醇水流动相为例
一 流动相的配置过程
1 取下色谱瓶，由于没有封盖，需要用保鲜膜迅速封口，拿到通风橱。
高效液相色谱-质谱检测仪操作规程
高效液相色谱-质谱检测器操作规程
仪器名称：高效液相色谱-质谱检测器
仪器型号：WatersACQUity Arc-QDA
操作流程：
一、开机程序
1.首先制备新鲜流动相和清洗液；
2.打开计算机电源，进入Windows7操作系统；
3.依次打开SM-FTN样品管理器、QSM四元溶剂管理器、检测器电源，待各部件通过自检完成；
4.双击桌面Empower图标，输入用户名和密码，进入Empower3QuickStart 界面；
5.打开控制台，QSM泵和SM-FTN样品管理器启动准备操作，灌注清洗溶剂；
6.Empower3软件中创建方法组，调用仪器方法监测基线，待系统压力稳定(一般压力波动小于50psi)，基线稳定后，开始进样进行实验。
二、关机操作
1.如果实验中使用缓冲盐或酸溶液，需用高比例超纯水如90%水溶液清洗色
谱柱及系统，冲洗体积至少为100倍色谱柱体积；
2.待系统中缓冲盐冲洗干净，用适当比例乙膝或甲醇/水溶液如
60/40冲洗系统50倍色谱柱体积(可视情况调节)；
3.用纯有机溶剂(乙腈或甲醇)冲洗系统50倍柱体积(可视情况调节)，若长时间停机如大于7天，用纯甲醇冲洗整个系统10分钟；
4.缓慢降低流速至零，关闭控制台和Empower各应用界面，退出Empower 工作站。
(若长时间停机如大于7天，需将色谱柱从系统中取下用死堵头封好放入色谱柱盒保存)；
5.依次关闭检测器；QSM溶剂管理器和SM-FTN样品管理器电源。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程1 溶剂输送泵操作1.1 安装后的准备1.1.1 在烧杯中装入大约100mL异丙醇，在烧杯中放入吸滤器，将一段SUS 管的一端连接在泵出口，而另一端放入烧杯中。
1.1.2 将排液管的一端连接到排液管接口上，另一端放入废液瓶中。
1.1.3 打开电源ON，显示初始屏幕。
1.1.4 逆时针方向转动排液阀180度，打开排液阀。
按purge键，泵开始运行，指示灯亮。
1.1.5 冲洗完毕后，按一次func键，进入流速设定状态，并且设定流速1mL/min。
1.1.6 将排液阀旋钮顺时针方向旋转到底，关闭排液阀。
1.1.7 按pump键，泵启动，指示灯亮。
大约3--5分钟后，再按pump键，泵停止运行，指示灯灭，完成操作准备。
1.2 运行的检查1.2.1 开始运行前务必确保：储液瓶中装有流动相，并且吸滤器已经放入储液瓶中。
排液管的另一端已经放入废液瓶中。
1.2.2 将排液阀旋钮逆时针方向旋转180度，打开排液阀。
1.2.3 按CE 键返回到初始屏幕。
按pump键，泵大约以1ml/min的流速运行（指示灯亮）。
1.2.4 观察流动相流出排液管大约10秒钟。
在此期间，流动相应连续流出并且无气泡出现。
1.2.5 再按pump或purge键，泵停止运行，指示灯灭。
1.3 上面两步完成后仪器进入工作状态。
2 紫外—可见检测器操作2.1 按下电源开关，打开仪器，将发生如下情况。
2.1.1 显示板上所用光点及指示灯亮。
自动检查内存，瞬间显示控制程序的版本号。
2.1.2 预热大约20sec，仪器的单色器找到其初始位置（大约1分钟）。
2.1.3 （使用氘灯的亮线（656nm）自检波长的准确性（大约10 sec）。
2.1.4 如果没有检查出错误，显示正确信息，几秒钟后，由初始屏幕代替原信息2.1.5 如果自检没有错误，屏幕显示正确，此时可以进行操作。
为初始状态，将显示初始屏幕。
2.2 设定测定波长2.2.1 按CE键。
高效液相的标准操作规程(SOP)
WATERS高效液相的标准操作规程（SOP）1流动相的处理1.1过滤溶剂溶剂在使用前要用过滤器过滤，有机相和纯水相通常可以不过滤，如果使用固体化学试剂（缓冲盐）配制流动相，过滤特别重要，不能让固体微粒污染泵，阻塞进样器和柱头过滤片。
同时一些缓冲盐溶液过夜后易生菌，使用前要抽滤或者重新配制。
实验室应有水溶性和脂溶性两种过滤膜供选择（反光面朝上），过滤水相时，要先用1-2ml 水润湿过滤膜，有助于快速抽滤。
1.2保持储液瓶的清洁用普通溶剂瓶作流动相储液器应不定期废弃瓶子，最后一次应用HPLC级的水或溶剂清洗，不能在清洗过程中留下污迹。
流动相瓶子要保持清洁。
1.3保证溶剂的质量一定要用HPLC级的溶剂，水也应达到HPLC级，同样也要使用高纯度的缓冲盐。
1.4 故障及解决方法1.4.1 流动相脱气不充分流动相受热，或者流动相不同组分混合时会有气体产生，气泡进入泵内引起压力波动，增加噪音，色谱图上出现毛刺。
可试用下列方法解决问题：a、流动相再脱气；b、采用更有效的脱气方法（如抽滤）或两种方法配合使用；c、改系统内混合为系统外预混合。
1.4.2 流动相供给不畅流动相用完，管道中吸入气体引起泵压力不稳。
应经常观察储液器中流动相的量，加足流动相保证所有的样品分析完毕。
输液管道上装滤头沉至瓶底，储液器盖上留一小孔正好夹住进液管，使其不能上下移动。
过滤器阻塞会引起管道和泵腔进气泡，压力不稳。
压力不稳时，如果已经排除流动相混合不均匀的状况，则观察滤头外部是否长毛（一般水相滤头易长毛），去掉过滤器后如果系统运转正常，说明已找出问题，是过滤器被微粒所阻塞或长霉。
解决方法：a、换上新的过滤器（滤头）。
b、将滤头拆下，先用纯水超声15min，再换50%甲醇水溶液超声，再换纯甲醇超声，如果是水相的滤头，在安装前还需要用纯水超声。
如果上述还不能解决问题，则使用10%稀硝酸水溶液超声滤头，可起到除去菌类微生物的作用。
1.4.3 检测器和流动相管路被污染由于污染，噪音越来越大，检测器被污染。
(完整word版)Agilent1260高效液相色谱仪操作规程
四川中安检测有限公司作业指导书Agilent1260高效液相色谱仪操作规程1.目的正确使用仪器，确保化验结果的准确度、精密度，延长仪器使用寿命。
2.范围适用于Agilent1260高效液相色谱仪及色谱数据工作站的操作。
3.职责3.1操作人员：按照本操作规程操作仪器，对仪器进行自检，作使用登记。
3.2负责人：负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行定期自检、仪器综合管理。
4.要求4.1开机4.1.1溶剂准备按要求准备所需流动相，每瓶均超声10min排气，将原来浸泡在甲醇中的滤头取出对应放在各个流动相中（A：二次蒸馏水；D:缓冲溶液；B:色谱纯甲醇C：色谱纯乙腈）。
4.1.2开启工作站4.1.2.1启动计算机打开计算机电源，登陆windows 操作系统。
4.1.2.2启动工作站打开Agilent 1260 各模块电源，待Agilent 1260 各模块自检完成后(各模块右上角指示灯为黄色或者无色)，点击屏幕桌面图标“HPLC -1260（联机）”，则进入工作界面。
模块右上角状态灯颜色说明：无色：未开电源或者模块准备就绪；黄色：模块未准备就；绿色：正在进样分析；红色：模块出错；所有模块红色：仪器有漏液工作站图形颜色说明：绿色：模块准备就绪；黄色：模块未准备就绪；蓝色：正在进样分析；红色：出错或者不能联机；灰色：此模块没启用。
将鼠标移至系统或各个模块的状态指示栏，系统会自动显示未就绪或出错的原因。
4.1.3冲洗流动相管路反时针旋开泵模块上的溶液排空阀，右键单击泵视图的空白处，选择“方法”，设置“流速”为5ml/min。
将实验中需要的各个通道分别设置“溶剂”为100%，点击确定开始冲洗，每个通道冲洗3-5分钟，若冲洗通道时压力显示超过10 bar，则可换过滤白头。
4.1.4平衡柱子冲洗完柱子，按要求调整流动相速率及流动相比例，顺时针旋转排空阀，关闭溶液排空阀(确认泵流量为1ml/min)，然后右键点击需用检测器模块视图的空白处，选择“方法”进入检测器的参数设置界面，按要求设置参数（停止时间与泵一致），后点击右键，选择“控制”，在弹出的窗口选择打开，开始平衡柱子，监视信号基线和压力，等待平稳后即可进样（若用缓冲溶液和有机相作为流动相，先用水和有机相平衡30 min，比例与所要求的缓冲溶液和有机相比例一致），待基线平稳后换用所要求的缓冲溶液和有机相按比例混合平衡柱子30 min）。
岛津LC-20AT型高效液相色谱仪操作规程
岛津LC-20AT 型高效液相色谱仪操作规程一．系统配置系统组成：本系统由DGU-20A3 脱气机、2 个LC-20AT溶剂输送泵（分为A，B泵）、7725i手动进样器、色谱柱（2个C18柱，3个手性柱）、SPD-20A紫外-可见检测器、LCSolution（Version.1.2）中文工作站等组成。
二．准备工作1．流动相准备：使用前按待检测样品的检验方法准备所需的流动相（水使用蒸馏水，其他有机溶剂要求色谱纯，无机盐缓冲液浓度一般低于20mmol/L）用合适的0.45μm滤膜过滤（有机相和水相分别选用各自的专用滤膜，水相使用前必须过滤，有机相用肉眼观察有颗粒时必须过滤）。
2．色谱柱准备：根据待检测样品的需要选用合适色谱柱，柱进出口方向应与流动相流向一致（检查柱上“FLOW”流向）。
3．样品溶液配置：配置样品和标准溶液，用合适0.45μm的样品过滤器过滤后待用。
如检测中发现检测峰拖尾严重，可稀释后使用。
严禁使用未经处理的浑浊溶液进样。
4．检查仪器各种部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。
三．开机、参数设定及平衡系统1．开机：接通电源，依次开启B泵、A泵、检测器，待泵和检测器自检结束后打开电脑显示器、主机，启动工作站软件。
2．排气泡或更换流动相的操作方法1）将A/B管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；2）逆时针转动A/B泵的排液阀180o；3）按A/B泵的【purge】键，pump指示灯亮，泵大约以9.9ml/min的流速冲洗，3min（可设定）后自动停止；4）将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。
5）如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。
6）如按以上方法不能排尽气泡，从色谱柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中设流速为5 ml/min冲洗3分钟，停泵后重新接上色谱柱并将流速重新设定为规定值。
3．参数设定1）波长设定：一般设为254nm。
2）流动相设定：流速开始不宜太高应为正常分析流速的50％～80％冲洗一段时间，等待柱压平稳后可调节到正常流速（调节流速时应该每次增减0.1ml/min，不宜调节过快，柱在线时流速一般不超过1ml/min）。
高效液相色谱仪操作规程
高效液相色谱仪操作规程
一、所需流动相经过滤、脱气处理后待用。
安装好色谱柱。
二、检查供电电源是否稳定，各部件连接是否牢固。
三、开启仪器检测器和泵电源，待检测器电源指示灯由黄灯变成绿灯后，开启
仪器工作站，即双击桌面上图标LCwin1.0。
四、点击工作站中控制采集，点击开启，待仪器自检通过后，进入仪器控制采
集界面。
五、依次用甲醇、甲醇：水=2：8、流动相进行冲洗色谱系统，每次更换更换溶
液时，均需拧开放空阀，选择菜单泵下的快速冲洗模式，选定合适的时间进行冲洗，赶走泵内气泡。
确定泵内无气泡后，停止冲洗模式，关闭放空阀。
六、更换换上流动相后，按样品分析条件设置选择合适的流速、波长。
待色谱
设备达到平衡状态（柱压稳定，工作站基线稳定，一般需30-40min）后，即可进样分析。
七、分析完毕后，流动相中存在缓冲盐等溶剂，需先用甲醇：水=2:8，进行冲洗
至少30min，再用甲醇冲洗，待柱压降至正常值（依色谱柱而定，即柱压稳定后），停泵。
柱压降为零后关闭检测器和泵的电源。
八、样品分析应做好原始纪录，内容包括分析样品名称、送样时间、分析时间、
样品编号、检测数据、报告结果、报告时间、送样单位、分析员以便统计和查阅。
九、仪器如出现故障，应及时报告专业维修单位或专职维修人员，未经专业维
修培训或未取得维修资格证书的不能进行维修工作。
十、仪器室内严禁吸烟或进行任何无关明火操作。
仪器室内应配备二氧化碳灭
火器，分析人员应能正确操作使用。
高效液相色谱操作规程
高效液相色谱操作规程
1.开机
打开主机总电源，开启电脑，打开LC—solution工作站。
2.流动相及样品的准备
流动相：80%的甲醇+20%的水；试剂必须为色谱级，水必须为双重蒸馏水。
流动相必须经过微孔膜过滤后才能进入LC系统。
样品溶液也必须用微孔膜过滤后才能进样。
3.工作站的进入和系统的开启
双击桌面的LC—solution图标，选择操作相，按OK进去工作站。
进入工作站后，先进行自动清洗管路，然后清洗自动进样器，总共需要清洗时间0.5h。
设定分析方法，并且保存。
4．进样准备
先将样品放入自动进样器中，待基线平直后，才可以进样。
5.样品分析
点击助手栏的开始键，在弹出的对话框中，填上样品的名称、分析方法、数据文件等等。
然后点击开始键，进行自动进样分析。
6.数据的处理及图谱的报告输出
按设定的时间完成分析后，进行数据的后处理。
按设定的输出报告格式进行图谱的输出。
7.仪器的后处理（清洗）
分析完样品后，应对仪器的管路进行清洗，以便下次实验。
8.关机：关机顺序与开机顺序相反。
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高效液相色谱仪流动相配制标准操作规程1.目的
明确高效液相色谱法流动相配制过程，保证操作过程的规范性。
2.适用范围
适用于实验室高效液相色谱法流动相配制。
3.职责
实验室分析人员负责按本规程进行操作。
4. 内容
4.1流动相批号的编写原则：流动相批号按配制日期编制，如批号20150609，代表2015年06月09日配制。
4.2流动相配制
4.2.1含水流动相和不含水流动相的配制所用量筒应区分开，配制不含水的有机溶剂类流动相所用量筒必须是干燥状态，不得有水。
4.2.2根据样品分析方法所规定的流动相体积比例配制，在清洁的带塞量筒中分别倒入相应的溶剂，若该流动相需加入适量的酸或碱，则戴上一次性手套，用专用注射器吸取规定体积的酸或碱，加入量筒，盖上塞子摇匀，振动过程应主要排气。
4.2.3含盐的缓冲液类流动相的配制应根据规定比例配制，分别秤取规定重量的盐于清洁的带塞量筒中，加入适量纯水，振摇，待固体完全溶解后，再加纯水至规定刻度，盖上塞子，摇匀。
4.2.4若该流动相对PH值有特殊要求，根据流动相配制规定的体积比例，用酸或碱调节PH值，用PH计测定直至规定范围内。
4.3流动相抽滤
4.3.1含水流动相和不含水流动相的抽滤装置应区分，抽滤不含水的有机溶剂类流动相所用装置必须是干燥无水的。
4.3.2抽滤装置准备：将过滤器套在三角烧瓶上，用镊子夹取0.45μm的水系或有机滤膜一张，放在砂芯过滤器上（注意：滤膜应将过滤面完全覆盖）；再将量杯压在滤膜上，量杯边缘和过滤器的边缘对齐；用配套的夹子将过滤器和量杯接头边缘固定（注意夹子位置应避开抽滤嘴）；将抽滤软管套在抽滤嘴上。
4.3.3抽滤：将少量配置好的流动相倒入量杯内，观察是否有漏液现象，若出现漏液须重新固定过滤器和量杯。
如未漏液则继续倒入流动相（注意不要超过量杯最大刻度线），开启真空泵抽滤。
抽滤结束先拔掉与抽滤嘴连接的真空软管，再关闭真空泵。
4.3.4脱气：将抽滤好的流动相转入流动相试剂瓶内（少量润洗一次倒入废液桶内再盛装），盖上瓶盖（瓶盖不得拧紧），常温下超声波超声15至20分钟。
4.4流动相储存及标识
流动相全部转入专用试剂瓶内后拧紧瓶盖，及时填写《流动相标签》贴于试剂瓶身中间位置，备用。
4.5流动相有限期如下：
4.6流动相配制工具清洁
4.6.1配制含水流动相用器具：先用自来水清洗一次，再用纯化水清洗3次，沥干后封口备用。
4.6.2配制不含水流动相用器具：用纯有机溶剂少量倒入已安装完毕的抽滤装置内，抽滤润洗一次，再将抽滤过的有机溶剂转入量筒内润洗量具，洗液倒入废液桶后，待用。
4.7填写配制记录
流动相配制后，配制人员及时填写相应的配制记录。
4.8注意事项
4.8.1流动相所用溶剂应选用色谱纯、高纯水或双蒸水。
4.8.2过滤流动相时应注意区分水系膜和有机滤膜使用范围，防止误用。
4.8.3配制不含水流动相的抽滤器具及存储容器应清洁干燥，不得残留水份。
4.8.4流动相严禁超过储存期限使用，经验证储存期限超过有效期流动相比例未发生变化的，须重新抽滤流动相并进行超声脱气处理后使用。
4.8.5不含有机溶剂的水系流动相每次使用前应进行刷洗，自来水冲洗干净后用纯化水润洗3次以上。