湿热灭菌柜验证..
湿热灭菌验证与干热灭菌验证的比较
湿热灭菌验证与干热灭菌验证的对比1、概念：（1）湿热灭菌验证:主要是对产品、灭菌设备和装载方式的验证。
验证活动包括：对照灭菌设备设计的灭菌参数来校核灭菌器的性能、建立某产品灭菌程序及装载方式的有效性和重现性、估计灭菌过程中产品可能发生的变化。
（湿热灭菌（118-134℃）——蒸汽、过热水）（2）干热灭菌验证：主要用于内包装用的玻璃容器或金属制品的灭菌和去热源，所使用的灭菌程序应通过验证试验。
(干热灭菌（160-320 ℃）——热空气)2、验证目的：（1）湿热：通过一系列验证试验提供足够的数据和文件依据，从而找到最有效最合理的灭菌参数，并把已经验证过的饱和蒸汽灭菌设备和灭菌工艺参数应用到产品生产的除菌过程中去，以证明用于药品生产过程中的每一台饱和蒸汽灭菌设备过程和灭菌效果具有可靠性和重现性。
主要适用于能耐受高温、高压饱和蒸汽的产品。
（2）干热：间歇式或隧道式热空气灭菌常用来处理可耐受较高温度而不适宜用湿热灭菌法的物品，如玻璃瓶、粉末、油类、玻璃器皿、不锈钢设备等。
3、灭菌原理：（1）湿热灭菌—导致细胞内关键性蛋白质和酶发生热变性或凝固，湿度对该破坏性过程起促进作用。
（2）干热灭菌—使微生物氧化而不是蛋白质变性。
4、灭菌工艺：（1）湿热：采用附加排气系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加真空系统的饱和蒸汽灭菌工艺、采用附加空气加压系统的饱和蒸汽灭菌工艺。
（2）干热：1）残存几率法：该法以灭菌为目的。
通常适用于热不稳定性物质。
灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物残存几率为10-6，即在一百万个已灭菌单元中，染菌单元的数目不得超过 1 个。
2）过度杀灭法：该法也以灭菌为目的。
通常适用于耐热性能较好的物质。
灭菌程序应保证在灭菌后物品的微生物的残存几率小于10 -6， “ 过度杀灭 ” 的灭菌程序所获得干热灭菌值F H 可使耐干热灭菌生物指示剂的总量下降 12 个对数单位。
3）无菌无热原法：该法的目的是达到无菌和无热原。
湿热灭菌柜的验证
Ｂ
Ｃ
颜 色 变 化 ， 色 变 黄 为 阳性 。 颜
３ ３热 穿 透 试 验 ．
试 验 在 最 大 载 荷 条 件 下 ， 上 述 温 度 探 头 将
若对照为阳性 ， 余生物指示剂均为阴性为合格。 其 连续 运 行 三 次 以 检 查其 重 现 性 。 ４ ５去 热 原 检 查 用 标 准 细 菌 内 毒 索 确 认 湿 热 灭 菌 柜 去 热 ．
＾
胨 培 养 基 的 试 管 中 ， 好 塞 ， 成 生 物 指 示 剂 。取 一 支 未 灭 盖 制 菌 的 非 致 病 性 嗜 热 脂 肪 杆 菌 芽 孢 ＡＴ Ｃ ９ ３菌 片 按 照 无 菌 Ｃ ７５ 操 作 接 入 灭 菌 好 的 空 白培 养 基 中 ， 为 阳性 对 照 品 ， 一 编 作 统 号 后 在 恒 温 培 养 箱 中（ ０ ０ 培 养 ４ ｈ 观 察 生 物 指 示 剂 ５ ￣６ ￣ Ｃ） ８，
温差不大于 ２５ ．＂ Ｃ。
靖 ｛ 觅
４ ４无 菌 检 查 ． ４ ４ １按 照 工 艺 条 件 重 新 进 行 验 证 ， 最 高 、 低 温 度 点 和 ．． 在 最
灭 菌 柜 中 部 ， 汽 口处 ， 菌 柜 上 下 前 后 各 放 置 生 物 指 示 剂 排 灭
（ ） ＢＩ 。
标准 。
２ ２灭 菌 ．
灭 菌温 度 １０ ， 持 ４ ｍｉ。 ２℃ 保 ０ ｎ
４ ２ ２负 载 验 证 ： 照 最 大 装载 方 式 ， 入 待 灭 菌 的 物 品 ， ．． 按 装 探 头 放 置 方 式 同 空 载 验 证 ， 录装 载 物 品 的 数 量 、 置 方 式 。 记 放 ４ ３灭 菌 操 作 按 照 工 艺 规 程 进 行 灭 菌 操 作 ， ５ ｎ记 录 ． 每 ｍｉ
湿热灭菌验证报告
文件编号: 版 本 号： 编 制： 审 核： 批 准： 验证时间：
目录
1、湿热灭菌验证方案.................................................................................................................................................1 1.1 概述.................................................................................................................................................................1 1.2 目的.................................................................................................................................................................1 1.3 验证范围.........................................................................................................................................................1 1.4 验证小组及职责.......................................................................................................... 错误！未定义书签。 1.5 验证条件.........................................................................................................................................................1 1.5.1 样品选择............................................................................................................................................ 1 1.5.2 生产设备............................................................................................................................................ 2 1.5.3 产品包装物料.................................................................................................................................... 2 1.5.4 生物指示物........................................................................................................................................ 2 1.5.5 温度传感器........................................................................................................................................ 2 1.5.6 装载模式............................................................................................................................................ 2 1.5.7 灭菌参数初步确定............................................................................................................................ 2 1.6 验证方法.........................................................................................................................................................3 1.7 验证内容.........................................................................................................................................................4 1.7.1 安装确认（IQ）................................................................................................................................ 4 1.7.2 运行确认（OQ）................................................................................................................................ 5 1.7.3 性能确认（PQ）.............................................................................................................................. 11 1.8 验证依据及标准........................................................................................................................................... 12
湿热灭菌器以及湿热灭菌工艺的验证指南
起草单位
02.03.2019
中国医药设备工程协会
2
编制协会的参考依据
欧盟医药产品管理法规第四卷 欧盟有关人用和兽用医药 产品GMP指南 （2008年3月） 以及： 附录1 无菌药品的生产 附录20 质量风险管理 FDA的CGMP（2004年9月） Validation of Aseptic Pharmaceutical Processes, Frederick J. Carleton & James P. Agalloco 1998 ISO 11134 Sterilization of health care productsRequirements for validation and routine control- Industrial moist heat sterilization ISO 17665 Sterilization of health care products- Moist heat ISO 13408.1Aseptic processing of health care products – Part 1 : General requirements ISO 11138 Sterilization of health care products- Biological indicators 其他相关标准
中国医药设备工程协会 8
02.03.2019
定义
湿热灭菌周期的设计和开发与蒸汽灭菌器的性能 以及被灭菌产品的适用性有关。 空气－蒸汽混合气体（air-steam mixture） 预真空过程 过热水过程 无菌保证水平（Sterility Assurance Level, SAL）
湿热灭菌柜验证方案
一、验证概述1．验证对象本次验证的对象为冻干粉针车间湿热灭菌柜，主要采用自选一灭菌程序对铝盖进行灭菌处理。
工作原理：本设备操作系统采用触摸屏和可编程控制器控制。
对灭菌过程进行自动控制，具有控制准确、操作简便、F0值显示等特点。
密封门采用电机升降，气压密封结构，并设有安全连锁装置，即使电、汽意外中断或其它原因而引发开门命令，密封门也不会打开。
设备配置的温度记录仪可即时显示并记录灭菌温度。
设备主要参数如下：2．验证原因本湿热灭菌柜在2005年购入安装，并于2006年1月通过验证投入使用。
湿热灭菌柜验证周期为一年，已于2009年3月进行了再验证，现距上次验证已有一年，故需对湿热灭菌柜进行再验证。
3．验证目的通过再验证，确认该设备能够稳定、连续生产出合格的产品。
通过再验证，确定操作方法有效及操作参数未发生变化，以保证能够按照验证时的操作方法、操作状态进行生产，并确认操作及维护是否予以优化。
4．验证合格标准方案中规定的所有项目均需完成，对于不合格的项目，应根据评价内容执行下一项工作。
二、验证组织机构和职责1．验证领导小组2．验证实施小组三、验证实施计划1．验证实施前的培训在验证方案审核后组织实施人员进行培训，培训工作应在方案审核后一星期内完成。
2．时间安排验证内容的具体时间计划，以及验证执行后在一星期内完成验证报告和验证文件的归档工作。
2010年月日前，进行验证的相关培训工作；2010年月日前，执行安装检查、运行再确认、性能再确认项目；2010年月日前收集数据，完成验证的评价工作，完成验证结论、验证文件归档及验证结论的下发。
四、验证内容一、安装检查1．设备布局检查目的：确认设备安装是否改变，如有改变则按照原安装确认要求进行确认。
依据：《设备前期管理规程》规定及设备平面布局图。
2．介质连接情况检查目的：确保所有介质管道是根据PID图安装，未发生相关偏移，管道标识张贴到位。
依据：《固定管线的标识管理规程》规定。
湿热灭菌验证难题
湿热灭菌验证难题1、问：湿热灭菌性能确认热穿透考察F0还是温度时间？答：满载热穿透测试重点考察F0值，对热分布的温度没有硬性要求。
2、问：湿热灭菌柜空载热分布验证报告里如果统计了F0值，有没有问题？答：能有啥问题，只不过有点多此一举了，空载热分布统计F0值没啥用，找冷点？冷点是指灭菌阶段温度最低的点，而不是F0值最低的点，这个你可以查看一下2010版药品GMP指南-无菌药品，书中对干热灭菌确认和验证提到“空载热分布测试是为确定设备空载时的温度均勻度及设备“冷点”进行的测试，一般在运行确认时进行。
通过一组经过校正的温度传感器测定灭菌器腔室内各不同部位温度，并根据所测数据绘制温度分布图，以便于发现灭菌腔室内的冷点和热点。
”同理湿热灭菌空载热分布冷点确定原则。
3、问：湿热灭菌柜满载热穿透验证时，只需要考察生物指示剂培养结果和F0值，不需要考察最冷点是否保持了121度30分钟吗？答：2020版中国药典通则四部通则草案把所有灭菌方式的具体参数描述删除了（比如删除了121x15min的描述），因为灭菌工艺是验证出来的，通常采用温度-时间参数或结合F0值综合参考。
4、问：大家用的湿热灭菌柜验证时都能保证柜内的每个点温度不低于121度，不高于124度吗？我们的高温做不到怎么办？答：正常是不会有这种情况的，我们都是在121-123℃之间，根据你的情况，个人认为可能有几个原因：℃灭菌柜温度分布不均；℃药品装载方式不对；℃温度探头的摆放位置不恰当；℃灭菌过程中柜内补压空的时候，对个别温度探头产生影响；℃循环水系统出问题（洁净区的疏水阀被横向装了？这个洁净型疏水阀必须垂直安装）；℃喷淋盘和两次喷淋头存在堵塞或是错位情况。
针对以上原因去排查，不能走形式，希望能帮助到你。
如果问题解决不了，那就用来灭一些不怕高温的不锈钢器具类吧。
5、问：为什么湿热灭菌验证时，要统计升温段和降温段，只统计恒温段，也就是灭菌段行不行？答：首先，只统计灭菌段肯定是不行的，已经出现过被专家落缺陷的情况了，其次，灭菌柜的验证考察灭菌效果是一个方面，更重要的还要考察你灭菌柜的整体性能，如脉动次数、脉动曲线、降温速率曲线、干燥等等，都是要分析的，比如来年再确认时候灭菌30min，但是脉动次数、降温时间、干燥时间等都不一致，能说灭菌柜性能稳定吗？再次，确认是要确认整个灭菌程序的，整个灭菌程序就包括脉动次数、压力、干燥等运行情况的，你的SOP肯定对这些参数也要进行规定。
干热灭菌柜、湿热灭菌柜验证的详细讲解
一、法规要求：1、无菌药品附录第六十一条无菌药品应当尽可能采用加热方式进行最终灭菌，最终灭菌产品中的微生物存活概率（即无菌保证水平，SAL）不得高于 10-6。
采用湿热灭菌方法进行最终灭菌的，通常标准灭菌时间F0 值应当大于 8 分钟，流通蒸汽处理不属于最终灭菌。
对热不稳定的产品，可采用无菌生产操作或过滤除菌的替代方法。
2、无菌药品附录第六十三条任何灭菌工艺在投入使用前，必须采用物理检测手段和生物指示剂，验证其对产品或物品的适用性及所有部位达到了灭菌效果。
3、无菌药品附录第六十四条应当定期对灭菌工艺的有效性进行再验证（每年至少一次）。
设备重大变更后，须进行再验证。
应当保存再验证记录。
4、无菌药品附录第六十五条应当通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。
5、无菌药品附录第六十七条应当按照供应商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照试验确认其质量。
使用生物指示剂时，应当采取严格管理措施，防止由此所致的微生物污染。
6、无菌药品附录第六十九条每一次灭菌操作应当有灭菌记录，并作为产品放行的依据之一。
7、无菌药品附录第七十条热力灭菌通常有湿热灭菌和干热灭菌，应当符合以下要求：（一）在验证和生产过程中，用于监测或记录的温度探头与用于控制的温度探头应当分别设置，设置的位置应当通过验证确定。
每次灭菌均应记录灭菌过程的时间-温度曲线。
采用自控和监测系统的，应当经过验证，保证符合关键工艺的要求。
自控和监测系统应当能够记录系统以及工艺运行过程中出现的故障，并有操作人员监控。
应当定期将独立的温度显示器的读数与灭菌过程中记录获得的图谱进行对照。
（二）可使用化学或生物指示剂监控灭菌工艺，但不得替代物理测试。
（三）应当监测每种装载方式所需升温时间，且从所有被灭菌产品或物品达到设定的灭菌温度后开始计算灭菌时间。
（四）应当有措施防止已灭菌产品或物品在冷却过程中被污染。
除非能证明生产过程中可剔除任何渗漏的产品或物品，任何与产品或物品相接触的冷却用介质（液体或气体）应当经过灭菌或除菌处理。
湿热灭菌工艺验证指南
湿热灭菌工艺验证指南中国医药设备工程协会 2008年 12月目录一、范围 (3)二、目的 (3)三、术语 (3)四、湿热灭菌基础 ........................................................................................................7 4.1湿热灭菌的机理 ..................................................................................................7 4.2影响芽孢耐热性的因素 ......................................................................................7 4.3湿热灭菌中的能量转移 ......................................................................................8 4.4湿热灭菌中微生物杀灭的数学模式 (9)五、灭菌法选择的基本原则 (11)..............................................................................................................37过热值测试..............................................................................................................39干燥值测试十二、参考文献 (41)一、范围由于蒸汽 -湿热灭菌具备无残留,不污染环境,不破坏产品表面,易于控制和重现性好等优点,被广泛应用于注射剂的除菌过程之中。
湿热灭菌工艺验证方案最新版本
湿热灭菌工艺验证方案山东鑫科生物科技有限公司目录1.引言 (3)2.灭菌设备和公用系统的测试 (3)2.1 灭菌柜特性 (3)2.2 灭菌介质 (4)2.3 容器类别 (4)2.4 设备压力表、安全阀等合格证 (5)2.5 其他合格证见附图 (5)3.空热载和热穿透实验 (6)3.1 灭菌工作程序 (6)3.2 灭菌对象 (6)3.3 验证目的 (6)3.4 实验过程 (6)3.4.1 灭菌柜准备阶段 (6)3.4.2 操作步骤 (7)3.4.3 热载实验 (7)3.4.4 培养液在灭菌柜内的排放 (7)3.4.5 探头在灭菌室内的排放 (8)3.4.6 实验结果 (9)3.5 热穿透试验…………………………………………………………………3.5.1 验证步骤……………………………………………………………3.5.2 合格标准……………………………………………………………3.5.3 实验结果 (10)3.5.4 结果分析……………………………………………………………4.生物指示剂实验4.1 生物指示剂说明…………………………………………………………4.2 生物指示剂实验步骤4.3 实验结果4.4 验证合格标准4.5 结果分析及评价4.6 偏差及评估意见5.附图1. 引言概述本公司采用张家港市环宇制药设备有限公司生产的MQS0.25型灭菌柜，张家港市环宇制药设备有限公司始建于2001年，是国内灭菌柜设计制造领域的佼佼者，公司拥有D1、D2压力容器制造许可证，医疗器械生产企业许可证，通过了ISO9001质量管理体系认证，所生产的各种消毒灭菌设备涵盖了制药、医疗、生物、食品等领域，符合国家GMP验证和特种设备安全监察、卫生防疫等部门的相关要求。
本公司主要对瓶装液体培养基进行消毒，该灭菌柜采用饱和蒸汽的方式进行灭菌，该设备广泛适用于制药、医疗、科研等行业对生物制品、医疗器械、无菌衣物、工器具、器皿、培养基等物品的高温灭菌操作和冷却干燥处理。
湿热灭菌柜验证方案
湿热灭菌柜验证方案引言湿热灭菌柜是一种常用于实验室和医院的设备，用于对实验器皿、培养基、消毒纱布等物品进行有效的灭菌。
为了保证湿热灭菌柜的灭菌效果和安全性，验证是必不可少的环节。
本文将详细介绍湿热灭菌柜验证的目的、方法和步骤。
目的湿热灭菌柜验证的主要目的是确保设备能够达到预期的灭菌效果，并确认其在操作过程中的安全性。
通过验证，可以提高湿热灭菌柜的可靠性和可用性，保证实验和医疗过程的质量和安全。
方法湿热灭菌柜的验证方法主要包括以下几个方面：1.温度验证：通过在不同位置放置温度计，监测和记录湿热灭菌柜内部的温度变化。
验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，在一定的时间范围内，湿热灭菌柜内的温度应该能够保持在设定的温度范围内。
2.湿度验证：湿热灭菌柜在灭菌过程中需要保持一定的湿度，以确保灭菌效果。
湿度验证可以通过在不同位置放置湿度计，监测湿热灭菌柜内部的湿度变化。
验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，在一定的时间范围内，湿热灭菌柜内的湿度应该能够保持在设定的湿度范围内。
3.压力验证：湿热灭菌柜在灭菌过程中还需要维持一定的压力，以防止外界的空气进入灭菌室。
压力验证可以通过在不同位置放置压力计，监测湿热灭菌柜内部的压力变化。
验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，在一定的时间范围内，湿热灭菌柜内的压力应该能够保持在设定的压力范围内。
4.灭菌效果验证：湿热灭菌柜的最重要的验证内容之一是灭菌效果验证。
通过在灭菌柜内放置带有生物指示物的试验培养基或其他物品，进行灭菌操作，然后在相应的条件下孵育生物指示物，观察灭菌效果。
验证的标准一般是根据设备的要求和相关标准制定的，灭菌柜的灭菌效果应该能够达到特定的标准要求。
步骤步骤1：准备验证设备1.温度计：用于测量湿热灭菌柜内部的温度。
2.湿度计：用于测量湿热灭菌柜内部的湿度。
3.压力计：用于测量湿热灭菌柜内部的压力。
4.生物指示物：用于评估湿热灭菌柜的灭菌效果。
湿热灭菌柜的验证方法
湿热灭菌柜灭菌的原理是通过饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌，由于前者潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中常用的灭菌方法。
在使用湿热灭菌柜前，我们首先需要确定自己手头的湿热灭菌柜的质量安全性，这需要我们提前对其进行一次验证检测。
也就是湿热灭菌柜验证检测。
进行一次专业的湿热灭菌柜验证检测，需要准备很多设备。
其中主要的仪器包括了这些：ATI气溶胶光度计和发生器、64路温度验证系统、现场计量炉、臭氧浓度检测仪、大流量粒子计数器、Dragger压缩空气检测仪、TSI风量罩、气流流型检测仪等大中型检测仪器。
其具体的检测方法有这些：1)温度探头比对及探头布置①探头校正试验开始前将测试用湿热探头放到校验炉内进行温度校准，低温探头设置为低点、高点、测量点。
试验结束后，将所有的湿热探头进行“低点”和“高点”温度复核，确认试验后温度仪表的误差不大于0.5℃。
②探头布置将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头均匀地放在腔内各处。
各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。
2）空载热分布试验①布点将经过校验的温度探头编号（一般为16根探头），通过设备的验证接口放入灭菌室内。
加热介质进口处于设备自身温度探头处必须各放一根探头。
将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头其余温度探头均匀地放在腔内各处。
各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。
②程序运行按预定的灭菌程序如℃×min进行灭菌，设定采样间隔，采样时间不小于灭菌柜的工作周期，包括升、灭菌、降温过程，启动灭菌柜，在空载运行状态下进行热分布测定，连续运行3次，以确认灭菌过程中的重现性。
③结果评价“冷点”确定：试验中，标准探头得的温度至低的区域，即灭菌器内“冷点”的位置。
予以特别标注，作为热穿透试验和生物指示剂试验重点监控的位置。
温度均匀度：每次灭菌程序运行过程中，灭菌器腔室内“冷点”及“热点”的温度，与其平均温度之差应≤±1℃（或符合该设备说明书中标注的设计要求）。
灭菌柜温度验证湿热灭菌柜验证安全操作及保养规程
灭菌柜温度验证湿热灭菌柜验证安全操作及保养规程灭菌柜是医院、实验室等场所常用的设备之一，用于对器具、器材等物品进行消毒、灭菌处理，保证对人类健康的保障。
然而，对于这个设备的操作规范，很多人不是非常了解。
下面将介绍灭菌柜的温度验证、湿热灭菌柜验证、安全操作及保养规程。
灭菌柜温度验证灭菌柜在使用前需要对灭菌柜温度进行验证，检查灭菌柜的灭菌效果是否合格。
对于灭菌柜温度的验证，应当按照下列步骤进行：1.在灭菌柜内放置合适的温度计，并将温度计放置于该位置的中央。
其中，温度计的量程应至少符合灭菌柜规格；2.调整灭菌柜的温度，使之符合操作规程，等待10分钟；3.同时校对温度计和灭菌柜控制仪的读数；4.此时应满足以下条件：–以水作为验证标准中因温度而发生的结构、化学和生物学变化的体系，它必须具有下列灭菌时间和温度要求才能证明当制定对该温度和湿度条件进行灭菌处理的指南后，可以在指南中要求的时间内杀灭已知最难杀灭的微生物。
–水的温度应设定在121±1℃；–在同一水垢和相同二氧化硅化比下，pH值应在6.5~7.5范围内；–水的容积、深度和强制对流应至少符合指南要求。
当所有条件都满足时，灭菌柜温度就验证合格了。
湿热灭菌柜验证另外，湿热灭菌柜验证也是非常重要的一个环节。
在验证前，应当先清洗、消毒和干燥灭菌柜。
然后按照下列步骤进行：1.在配制的验证试样中加入菌种，再将试样固定于容器中，并将容器保存在灭菌柜内，约每个容器占据1/3以上的空间；2.调整灭菌柜温度，使之符合操作规程，并保持约20分钟；3.开始灭菌过程，使得灭菌柜内压力增加到工作压力，并保持30分钟；4.灭菌结束后，等待约5分钟，然后清除容器。
当试样的消毒效果合格时，湿热灭菌柜验证就完成了。
安全操作规程灭菌柜在使用过程中，需要注意以下安全事项：1.严格遵守使用规程，按照正常流程进行操作；2.在开启灭菌柜前，确保机械手已经归位，并确保废物回收罐放置正确；3.需要戴手套、口罩等防护用品，防止污染和伤害；4.灭菌柜使用结束后，应当及时清洗、消毒，切断电源。
湿热灭菌柜的验证方法
湿热灭菌柜灭菌的原理是通过饱和水蒸气、沸水或流通蒸汽进行灭菌，由于前者潜热大，穿透力强，容易使蛋白质变性或凝固，所以该法的灭菌效率比干热灭菌法高，是药物制剂生产过程中常用的灭菌方法。
在使用湿热灭菌柜前，我们首先需要确定自己手头的湿热灭菌柜的质量安全性，这需要我们提前对其进行一次验证检测。
也就是湿热灭菌柜验证检测。
进行一次专业的湿热灭菌柜验证检测，需要准备很多设备。
其中主要的仪器包括了这些：ATI气溶胶光度计和发生器、64路温度验证系统、现场计量炉、臭氧浓度检测仪、大流量粒子计数器、Dragger压缩空气检测仪、TSI风量罩、气流流型检测仪等大中型检测仪器。
其具体的检测方法有这些：1)温度探头比对及探头布置①探头校正试验开始前将测试用湿热探头放到校验炉内进行温度校准，低温探头设置为低点、高点、测量点。
试验结束后，将所有的湿热探头进行“低点”和“高点”温度复核，确认试验后温度仪表的误差不大于0.5℃。
②探头布置将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头均匀地放在腔内各处。
各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。
2）空载热分布试验①布点将经过校验的温度探头编号（一般为16根探头），通过设备的验证接口放入灭菌室内。
加热介质进口处于设备自身温度探头处必须各放一根探头。
将腔内按三个方向分别切为4个平面，其余温度探头其余温度探头均匀地放在腔内各处。
各温度探头均悬空放置，不与金属表面接触。
②程序运行按预定的灭菌程序如℃× min进行灭菌，设定采样间隔，采样时间不小于灭菌柜的工作周期，包括升、灭菌、降温过程，启动灭菌柜，在空载运行状态下进行热分布测定，连续运行3次，以确认灭菌过程中的重现性。
③结果评价“冷点”确定：试验中，标准探头得的温度至低的区域，即灭菌器内“冷点”的位置。
予以特别标注，作为热穿透试验和生物指示剂试验重点监控的位置。
温度均匀度：每次灭菌程序运行过程中，灭菌器腔室内“冷点”及“热点”的温度，与其平均温度之差应≤±1℃（或符合该设备说明书中标注的设计要求）。
湿热灭菌柜相关验证及日常管理
湿热灭菌是灭菌方法中比较常见和通用的一种灭菌方法，其中常用的湿热灭菌设备就是脉动真空灭菌器。
脉动真空灭菌器其灭菌原理是通过真空泵借助水的流动抽出灭菌柜室内冷空气，使其处于负压状态，然后输入饱和纯蒸气，如此反复，在高温和高压力的作用下使微生物蛋白质变性凝固而灭活达到灭菌要求。
灭菌后，抽真空使灭菌物品迅速干燥。
具有方便、省时、省力、总灭菌时间短、灭菌彻底可靠、物品干燥等特点。
湿热灭菌柜相关法规1、无菌药品附录第六十三条任何灭菌工艺在投入使用前，必须采用物理检测手段和生物指示剂，验证其对产品或物品的适用性及所有部位达到了灭菌效果。
2、无菌药品附录第六十四条应当定期对灭菌工艺的有效性进行再验证（每年至少一次）。
设备重大变更后，须进行再验证。
应当保存再验证记录。
3、无菌药品附录第六十五条应当通过验证确认灭菌设备腔室内待灭菌产品和物品的装载方式。
4、无菌药品附录第六十七条应当按照供应商的要求保存和使用生物指示剂，并通过阳性对照试验确认其质量。
使用生物指示剂时，应当采取严格管理措施，防止由此所致的微生物污染。
《中国药典(20版)》第四部1421：灭菌法灭菌工艺的验证是无菌保证的必要条件。
灭菌工艺经验证后，方可交付正式使用。
验证内容包括：⑴撰写验证方案及制定评估标准。
⑵确认设备的设计与选型。
⑶确认灭菌设备资料齐全、安装正确，并能正常运行。
⑷确认灭菌设备、关键控制和记录系统能在规定的参数范围内正常运行。
(5)采用被灭菌物品或模拟物品按预定灭菌程序进行重复试验，确认各关键工艺参数符合预定标准，确定经灭菌物品的无菌保证水平符合规定。
(6)汇总并完善各种文件和记录，撰写验证报告。
灭菌工艺的日常监控：同时应持续评估灭菌工艺的有效性及被灭菌物品的安全性和稳定性，并建立相应的变更和偏差控制程序，确保灭菌工艺持续处于受控状态。
灭菌工艺应定期进行再验证。
当灭菌设备或程序发生变更(包括灭菌物品装载方式和数量的改变)时，应进行重新验证。
11、湿热灭菌工艺的验证
产品温差可控<± 0.5℃
磁力风扇
板式换热器 蒸汽/ 空气喷口 空气/蒸汽
排放口
程序控制器 压力传感器 流量调节器 保温 板式换 热器
滤网 换热器/腔室排放口
换热器排放 换热器通气
压缩 空气 滤器
压缩空气
纯蒸汽
换热器 冷却水
过滤器与胶塞、
仪表和电器连线 等 工作服 手套 口罩 过滤器 灌装器具
制药过程中湿热灭菌工艺的验证
上海市食品药品包装材料测试所
徐敏凤 2017年11月 苏州
在生产过程中要做到没有活的微生物是不可能的， 因为有：
◦ 人员； ◦ 原辅料 / 包装材料； ◦ 接触产品设备的表面； ◦ 用于清洗/淋洗的液体； ◦ 环境
在革兰氏阴性菌的 细胞壁中脂多糖
革兰氏阴性菌
革兰氏阳性菌
106
105
活微生物以 104
恒定速度
103
/D下降数
102
101
100
10-1
10-2
继续灭菌
以提高无
10-3
菌保证水平 10-4
10-5
10-6
可测试部分
灭菌时间 计算部分
无菌保证水平 达到10-6
全过程强化环境控制
原料的 质量检验
内包装料 的质量检验
SIP
对接触产品表 面消毒并控制
生物负荷 设备消毒
综述了制药行业使用的湿热灭菌工艺验证的方法和途径 ：蒸汽灭菌，重力置换，水浴式，SAM等
前言
1，热力学验证以及重要性 2，蒸汽灭菌工艺验证 3，热力学验证的法规期望-美国 4，欧洲对热力学验证的期望 5，FMEA灭菌方法选择决策树 6，热力学验证试验中精确测量的重要性 7，热力学验证研究现场出现的情况 8，湿热灭菌热力学验证的实践 9，加热和冷却数据的分析 术语
湿热灭菌及其工艺验证
设计方法
工艺研发
装载类型 工艺类型
程序研发
工艺确认
性能确认
持续性控制
用于无菌操作的物品在灭菌后使用前应保持无菌包装状态
• 应在A区下贮存及装配
• 即要保证有足够的蒸汽热穿透，又要确保空气及冷凝水在灭菌后段的去除，提 供一个微生物无法附着的保护屏障， 这一点需要得到平衡。
设计方法
工艺研发
装载类型 工艺类型
Use Annex 1 9 GB 18278 《医疗保健产品灭菌确认和常规控制要求 工业湿热灭菌》 9 British Std. BS EN 285: Sterilization- steam sterilizers-large
sterilizers
湿热灭菌基础
作为灭菌程序的设计、研发及确认的基 础，先要了解基本的技术参数，包括：
• 适用于细小管道，滤器及分装配件，这些内部空气不易排除的物品
• 因为较难保持高真空状态，而这又是有效去除空气的必要条件，所以灭菌柜生产商多会 开发真空脉冲系统，让蒸汽注入与抽真空交替进行
• 一般来说，脉动真空能有效去除空气，并迅速将蒸汽填补到真空位置，热力及潮湿环境 加速残余空气的去除
• 脉冲的次数选定依装载量而定
Use Overkill Design Approach
Section 4.1.1
Porous Section 4.2.1
Air removal
Yes
challenge
No
concerns?
Section 4.4
Load Type?
Liquid Section 4.2.2
Is air
Yes
overpressure
FPhysical Fphy用以描述基于循环中物理参数指标计算而得的F值
湿热灭菌验证方案及报告
蒸汽灭菌确认方案及报告确认编号：LW-VP-03医疗器械有限公司二0一九年九月确认方案签发表文件名称：蒸汽灭菌确认方案适用范围蒸汽灭菌的确认确认编号LW-VP-03预计开始确认2019年09月04 日起草人签名：日期：审核人签名：日期：批准人签名：日期：1、引言我公司蒸汽灭菌所用设备为水浴式灭菌柜，设备型号:JR.SG-0.6，生产厂家:张家港市嘉瑞制药机械有限公司，本设备编号为PD16。
1.1概述，灭菌器所灭菌产品为：被灭菌产品的规格为： ml/瓶灭菌时，须将待灭菌产品放置在专门设计的不锈钢架子里，装载后，放置在不锈钢推车上，推入灭菌柜内。
腔室容量: 0.6m3。
本灭菌器采用过热水(介质)灭菌。
灭菌程序分为注水、升温、灭菌、检漏、清洗结束等几个阶段。
灭菌工艺控制使用可编程控制器(PLC)控制系统。
灭菌程序设定为121℃，保温30min，按灭菌程序自动执行。
温度控制系统使用2个Pt100温度探头。
放置在排水口，灭菌过程的温度用打印机进行记录。
1.2验证目的1.2.1检查并确认灭菌器安装符合设计要求，资料和文件符合GMP的管理要求。
1.2.2调查并确认灭菌器的运行性能，看装载情况下灭菌器不同位置的热分布状况。
1.2.3验证产品预定的灭菌程序121℃保温30min能符合灭菌工艺的要求。
1.3、文件检査所需的各类文件:序号文件名称存放地点1 使用说明生产部2 操作手册生产部3 备件清单生产部4 安装计划生产部5 压力容器检查合格证生产部检査人: 日期:2、职责2.1 验证领导小组2.1.1 负责确认方案的审批。
2.1.2 负责确认的协调工作，以保证本确认方案规定项目的顺利实施。
2.1.3 负责确认数据及结果的审核。
2.1.4 负责确认报告的审批。
2.2 生产部2.2.1负责设备的安装、调试，并做好相应的记录。
2.2.2 负责建立设备档案2.2.3负责起草水浴式灭菌柜操作、清洁、维护保养的标准操作程序。
湿热灭菌工艺验证-孙克刚总工
3、对蒸汽灭菌设备的各项控制内容详细定义：
排水报警； 空气去除； 自动控制器； 生物指示剂 设备腔室的深度、宽度和高度； 灭菌周期的设计、极限挑战周期的确认； 蒸汽供应管路的检查； 门的压力试验； 等效灭菌时间、最小灭菌时间以及双倍最小灭菌时间； 失效的风险以及管理； 参考测点的位置； 压力试验（真空度）、泄漏率； 安装偏差以及处理；
以FDA为例: Guidance for Industry for the
Submission Documentation for Sterilization Process Validation in Applications for Human and Veterinary Drug Products
• 为了研究不同的区域，重新安排热电偶的位置也 许是必要的。每一种热电偶布置的多次试验，一 般为三次，将提供温度场的重现性的置信度。
34
热穿透试验
• 确定灭菌室装载中的“最冷点”，并确认该点在 预定的灭菌程序中获得充分的无菌保证值，即菌 种残余量≤10-6并各检测点温度与灭菌室内平均 温度的差值≤2.5℃＊。
2
一、简要说明湿热灭菌 工艺验证的目的、意义
3
• 1970年~1975年，美国因输液污染所导致 的并发败血症事件有400多起，这在美国国 内引起强烈的反响。FDA从1975年开始进 行了深入、广泛的调查，发现这些事件并 不是出于企业违规生产，而是整个生产体 系中的不稳定因素所致。
• 此后，FDA于1976年首次将验证列入GMP。 承认在无保证系统中，过程控制优于结果 检验。
标准热电偶的分布有几种形式。
31
热电偶的放置：与满载热分布试验规程一致， 将标准热电器偶放在灭菌溶液中心部位进行。 32
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
1概述
2验证目的
3验证组织
4验证进度安排
5. 验证方法的及步骤
5.1安装确认
5.2运行确认
5.3性能确认
5.3.1 明确灭菌操作程序
5.3.2 确定验证项目
5.3.3 确定可接受标准
5.3.4 验证操作
5.3.4.1 准备验证所需仪器和材料5.3.4.2 验证前的检查确认
5.3.4.3空载热分布试验
5.3.4.4满载热分布试验
5.3.4.5 热穿透试验
5.3.4.6 产品的灭菌效果的确认
LZZ-1.2 型湿热灭菌柜验证方案
一、概述：
LZZ-1.2 型湿热灭菌柜主要用于我公司前处理车间中药材的灭菌，属生产关键设备。
该设备采用饱和蒸汽灭菌，灭菌程序分为准备、升温升压、保温保压灭菌、排汽冷却等几个步骤，灭菌过程的温度用温度计显示。
该设备在公司2004年GMPA证时已对其进行验证，验证内容包括预确认、安装确认、运行确认和性能确认，其验证文件保存在公司质量保证部。
该设备于2006 年1 月停止使用至今已有2 年多时间，其间没有进行养护，现恢复生产需要使用其对药材进行灭菌，为保证灭菌效果，有必要对其进行验证。
二、验证目的：通过对设备的热分布试验和热穿透试验，证实该蒸汽灭菌柜的运行能满足规
定要求；并通过对蒸汽灭菌产品的微生物限度检查，证实蒸汽灭菌柜在规定的灭菌条件
（115°C, 45分钟）下，对灭菌产品内活微生物的灭菌效果能达到产品质量要求。
三、验证组织
灭菌柜验证小组组成及职责如下：
组长：彭云负责验证方案、验证报告的编写，组织本方案实施；
成
员：
张福生负责实施验证方案；
唐汉阳负责实施灭菌柜操作，协助取样；
郑玲负责现场监测、取样、检验的协调工作；
徐燕华负责现场监督及取样工作；
梁文梅负责样品的检验工作；
四、验证进度安排
验证小组于2008年4月〜9月完成灭菌柜验证工作。
五、验证方法及步骤
（一）、安装确认
1、目的：对设备的档案资料、主机及辅助设施的完整性和供汽进行确认，确保技术资料的完整性，确保设备的完整性。
2、确认方法：
安装确认在设备检修阶段进行。
由机修车间到公司档案室对设备的档案资料进行清理，如资料已遗失，与设备厂家联系尽可能要索要相关技术资料，完善设备档案。
到车间设备安装现场对设备的配置及供汽情况逐一机修确认，将确认的结果按附表 1 进行记录。
（二）、运行确认
1 、目的：确保设备能正常运行，为设备性能确认奠定基础。
2、确认方法：运行确认在设备安装确认完成后进行。
由机修车间人员按灭菌柜操作规程进行空运行操作，操作过程记录于附表2
（三）、性能确认
目的：确认灭菌柜的灭菌效果。
1 、明确灭菌操作程序
装载T升温（排水）7保温T排汽、降压T降温T下载
设计灭菌条件：115C, 0.075Mpa, 45分钟
2、确定验证项目：灭菌柜腔室内各点温度、F o值、产品的灭菌效果。
3、确定可接受标准
3.1热分布试验：最冷点实测平均温度与腔室平均温度之差应w 2.5 C；
3.2热穿透试验：各测点温度的F o值（标准灭菌时间，是相当于121C热压灭菌时，杀灭容
器中全部微生物所需要的时间。
）应》8。
3.3产品的灭菌效果：对灭菌产品内活微生物的灭菌效果能达到产品质量要求。
4、验证操作：
先通过空载、满载热分布试验，确认灭菌器腔室内最冷点实测平均温度与腔室平均温
度之差应w 2.5 C;再通过热穿透试验，确认各测点温度的F o值应》8;最后通过灭菌产品
的检查，确认灭菌器的灭菌效果符合要求。
4.1、准备验证所需仪器和材料
仪器：多路温度记录仪、超净工作台、生化培养箱
材料：灭菌柜规定最大载量的待灭菌药材。
4.2、验证前的检查确认：
4.2.1在设定的蒸汽压力和温度范围内蒸汽、水等无泄漏;
4.2.2门的联锁系统安全可靠；
4.2.3灭菌柜运行操作的各种文件建立或已拟草案；4.3空载热分布试验：
4.3.1将经过校正的多路温度记录仪的九个探头分别放置于灭菌器内的九个分布点，1个位于蒸汽进口处，1个位于冷凝水排放口，其余7个均匀分布在腔室各处（分布位置及分布示
意图如下图）：
蒸汽进汽口
探头号探头位置探头号探头位置探头号探头位置
1 2-C- n 4 3-C- n 7 1-A- I
2 3-A- n 5 2-B- n 8 1-C- in
432按《L Z Z-1.2灭菌柜操作规程》开启灭菌器进行空运行。
用温度数显仪记录各点温度（每分钟一次），达到灭菌温度（115C ）时，确定达到灭菌温度时的时间，再运行监测直至灭菌结束要求时间（45分钟），连续运行3次，以检查其重现性。
5.3.3根据多路温度记录仪各时段及各次的测定温度，确定达到灭菌温度时的时间（升温时间），计算腔室内的平均温度，计算腔室内最低温度与平均温度的差值。
（腔室内的平均温度
=各测试点平均温度之和/测试点数）
4.3.4结果分析与评价：根据空载热分布试验运行的结果，腔室内各处温度的均匀性、较低
温度所处的位置、较低温度与腔室内的平均温度的差值，评价空载热分布试验是否符合验证
标准的规定。
4.4满载热分布试验
5.4.1将规定最大载量（300kg）的待灭菌材料（此处选用生产黄连上清片原料大黄）码放在灭菌器内。
4.4.2将经过校正的多路温度记录仪探头按空载热分布试验的放置方式及位置放于灭菌器内。
（注意不要将探头插入待灭菌材料中，而应在它的周围）
4.4.3按《LZZ-1.2灭菌柜操作规程》开启灭菌器进行负载运行。
用温度数显仪记录各点温
度（每分钟一次），达到灭菌温度（115 C）时，确定达到灭菌温度时的时间，再运行监测直至灭菌结束要求时间（45分钟），连续运行3次，以检查其重现性。
4.4.4根据多路温度记录仪各时段和各次的测定温度，确定达到灭菌温度时的时间（升温时间），计算腔室内的平均温度，计算腔室内最低温度与平均温度的差值。
（腔室内的平均温度
=各测试点平均温度之和/测试点数）
4.4.5根据满载热分布试验运行的结果，腔室内各处温度的均匀性、较低温度所处的位置、较低温度与腔室内的平均温度的差值，评价满载热分布试验是否符合验证标准的规定。
4.5热穿透试验
5.5.1热穿透试验是在热分布试验的基础上，确定装载中的“最冷点”，并肯定该点在灭菌
过程中能获得充分的无菌保证值，即F o A 8。
4.5.2将规定最大载量的待灭菌材料（此处选用生产黄连上清片原料大黄）码放在灭菌器内；
将经过使用前校正的多路温度记录仪探头按下列要求放置：
①.热分布试验确定的冷点位置；（3-4号探头）
⑦.蒸汽入口处或由热分布试验确定的高温点位置；（1-2号探头）
③灭菌柜温度控制探头附近；（5号探头）
④设置一组腔室温度记录探头，此探头不能插入产品中，应设置在温度控制探头附近；（6 号探头）
（①其余探头可不必设置检测点。
4.5.3按《LZZ-1.2灭菌柜操作规程》开启灭菌器，达到灭菌温度（115C ）时，用多路温
度记录仪测定各点温度（每分钟一次）并记录，直至灭菌结束要求时间（45分钟），计算F o
值。
连续运行3次，以检查其重现性。
T2 T J21
F o=A Tv 1O-10-
T1
（△ T为测定温度时间间隙，T1为升温达到1OOC的时间；T2为降温达到1OOC的时间；）
4.5.4根据三次热穿透试验运行的结果，确定各检测点F o值是否大于或等于8,评价热穿透
试验是否符合验证标准的规定。
4.6产品的灭菌效果的确认
4.6.1可接受标准
A、细菌W 1000个/g
B霉菌w 50个/g
C大肠埃希菌：不得检出
D大肠菌群w 50个/g
4.6.2检查确认
取三次热穿透试验的产品在无菌条件下制备样品，进行卫生学限度检查，根据检验结果, 评价产品卫生学限度检查是否符合验证标准的规定。
5.7结果分析与评价：通过以上试验，确认灭菌器的设备性能符合规定要求。
验证小组组长:
偏差说明、建议和结论:
验证小组组长：
年月日
附表4 热分布试验温度记录表
测试人：测试时间：运行状态：□空载□满载运行次数：第次
附表5 测试人：热穿透试验温度记录表
测试时间：运行次数：第次。