姜黄急性毒性实验方案
食品的测定 实验：急性毒性实验
一,目的与要求
1,学习急性毒性试验的方法,掌握LD50的测定方法. 2,观察马钱子的毒性反应.
二,实验原理
急性毒性试验是指受试动物在一次大剂量给药后所产生的 毒性反应和死亡情况.药物毒性的大小,常用动物的致死 量来表示,因为动物生与死的生理指标较其他指标明显, 客观,容易掌握.致死量的测定也较准确.在测定致死量 的同时,还应仔细观察动物是否出现耸毛,倦卧,耳壳苍 白或充血,突眼,步履蹒跚,肌肉瘫痪,呼吸困难,昏迷, 惊厥,大小便失禁等不良反应.
分组完毕和各组剂量算出后,分组灌服或注射不同剂量的 受试药物.为能得到理想的结果,实验最好从中间剂量开 始,以便从最初几个剂量组动物接受药物后的反应来判断 两端剂量是否合适,便于调整剂量和组数.为了提高实验 的精确度和节省药物,受试药物可按"低比稀释法"配置. 即使每只动物的用药体积相等(0.2ml/10g),而溶质不 等.给药后逐日观察并记录中毒反应,死亡率和死亡情况.
致死量的测定常以半数致死量为标准.半数致死量是指能 够引起试验动物一半死亡的剂量,妈药物致死量对数值, 用符号LD50表示.由于LD50的测定较简便,可靠,而且 稳定,现已成为标志动物急性中毒程度的重要常数. LD50测定的方法有多种,如Bliss法,改进寇氏法,简化 机率单位法,累积插值法,机率单位-加权直线加归法等 等.以上方法虽各有特点,但都有共同的要求: (1)动物:均选用体重17～22克健康小鼠(同次试验体 重相差不得超过4克),或选用体重120～150克(同次试 验体重相差不得超过10克)健康大鼠作实验动物.性别相 同或雌雄各半.
(4)正式试验前,均须先用少量动物进行预试试验,大 致测出受试药物引起0%和100%死亡率的致死量范围,然 后安排正式试验.正式试验组数不得少于三个剂量组,一 般选用4～5个剂量组,每组动物数为10～20只. (5)报告LD50时需注明实验动物的种属及品系,性别, 体重范围,给药途径及每个剂量组动物数等,还需注明受 试药物的配制方法,给药剂量,各组剂量间的比值(一般 以0.65～0.85为宜),给药容积,观察时间及计算方法. 还须标出LD50的95%可信限.
新鲜姜黄的分析实验报告
一、实验目的1. 了解新鲜姜黄的基本成分及其性质。
2. 学习使用化学方法对新鲜姜黄进行定性分析。
3. 掌握实验操作的技能和注意事项。
二、实验原理新鲜姜黄是一种具有浓郁香味的黄色根茎类植物，其主要成分为姜黄素（Curcumin）。
姜黄素是一种多酚类化合物，具有多种生物活性，如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。
本实验通过化学方法对新鲜姜黄进行定性分析，主要检测其中的姜黄素含量。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜姜黄、无水乙醇、氢氧化钠、盐酸、铁氰化钾、硫酸、苯酚、碳酸钠等。
2. 实验仪器：电子天平、研钵、烧杯、试管、移液管、滴定管、试管架、酒精灯、磁力搅拌器、紫外-可见分光光度计等。
四、实验步骤1. 新鲜姜黄的制备（1）将新鲜姜黄洗净，去皮，切成小块。
（2）将姜黄块放入研钵中，加入适量无水乙醇，研磨成匀浆。
（3）将匀浆过滤，收集滤液，备用。
2. 姜黄素的提取（1）取一定量的滤液，加入适量的氢氧化钠溶液，调节pH值为8.5。
（2）加入适量的铁氰化钾溶液，搅拌均匀，室温下放置30分钟。
（3）加入适量的盐酸溶液，调节pH值为4.5。
（4）加入适量的硫酸，搅拌均匀，室温下放置30分钟。
（5）加入适量的碳酸钠溶液，调节pH值为8.5。
（6）将混合液过滤，收集滤液，备用。
3. 姜黄素的定量分析（1）取适量的滤液，用移液管移入比色皿中。
（2）用紫外-可见分光光度计测定滤液在最大吸收波长（约425nm）处的吸光度。
（3）根据标准曲线计算姜黄素的含量。
4. 标准曲线的绘制（1）取不同浓度的姜黄素标准溶液，用移液管移入比色皿中。
（2）用紫外-可见分光光度计测定标准溶液在最大吸收波长（约425nm）处的吸光度。
（3）以吸光度为纵坐标，浓度（mg/mL）为横坐标，绘制标准曲线。
五、实验结果与分析1. 新鲜姜黄的制备实验过程中，新鲜姜黄经过研磨、过滤等步骤，得到较纯净的滤液，为后续实验提供了良好的实验材料。
2. 姜黄素的提取实验中，通过调节pH值、加入铁氰化钾、盐酸、硫酸和碳酸钠等试剂，成功提取了姜黄素。
急性毒性实验(实验课)
SX50= i× [(Σp-Σp2)/(n-1 ) ]½
注：X50
为lgLD50 SX50为lgLD50的标准误差
如动物不死，可减少稀释倍数，按
0.1ml/10g灌胃给予稀释倍数较低的乌头水 提液取；如动物死亡，可增加稀释倍数， 灌胃给予稀释倍数较高的乌头水提取液。 再观察动物的反应。
按上述方法，探索出可致小鼠大多死亡的
最小剂量及大多小鼠不致死亡的最大剂量。
结果
动物号 体重（g） 给药量 反应 备注
1.LD50实验设计
目的：学习LD50 测定方案设计 材料：乌头水提液（浓度：0.5g/ml)、
注射器、灌胃器。 动物：昆明种小鼠18－22g,雌雄各半。
方法：
取小鼠称重，先用1只按0.1－0.2ml/10g灌胃
给予乌头水提液（0.25g/ml),观察动物反应。 如动物死亡，将溶液稀释一定倍数后，按 0.1ml/10g灌胃给予乌头水提液取稀释液，再 观察动物的反应。
3.574 10 0.9
2810
2110 1590
？
？ ？
10
10 10
0.7
0.3 0ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ2
5
1190
？
10
0
Xm=3.574 i=Lg1.3345=0.1253 Σp=? Σp2=? n=10
相关公式
LD50=log-1[Xm-i(Σp-0.5)]
LD50的95％可信限 ＝lg-1(X50± 1.96 SX50)
组间剂量比值（低剂量/高剂量）
0.65 0.7 0.75 0.8 4组 6－ 7组 0.85 4－ 5组 0.9 5－ 6组
10
5－ 6组
急性毒性试验设计
急性毒性试验设计
组员：程旺、高思杰、后若兰 高阳、陈刚
一、急性毒性
急性毒性指人或动物一次或24 h 之内多次接触外源化学物后，在短 期内所发生的毒性效应，包括致死 效应。
一次：指瞬间给实验动物染毒，如经 口、经静脉注射染毒。
24 h之内多次：指外源化学物毒性过 低，需给予动物较大剂量。
急性毒性效应出现的快慢和毒性反应的强 度与外源化学物的性质和染毒剂量的大小 有关。
实验动物的标记
染色法
编号方法：小鼠头部为1号，顺时 针编号，用苦味酸编个位数，用 伊红编十位数。
染色法
优点： 简单方便，不痛苦，无损伤。
缺点： 时间较长时，染色剂易褪色； 标记容易模糊不清。
剂量选择及分组
剂量选择
广泛查阅文献资料，估计毒性中值 预试，求出待测化学物0 %~100 %或
左手抓住动物双耳后至背部的皮肤，将动物固定成垂 直体位，腹部面向操作。
右手持注射器，将针头由动物口腔侧插入，避牙齿， 沿咽后壁缓缓滑人食管。若遇阻力，可轻轻上下滑动探索， 一旦感觉阻力消失，即深人至胃部。
如遇动物挣扎，应停止进针或将针拔出，千万不能强 行插入，以免穿破食，甚至误入气管，导致动物 立即死亡。
容量瓶、烧杯、滴管、电子天平、动物 体重秤、外科剪刀、镊子 3、实验试剂 丙烯腈、苦味酸酒精饱和 液、伊红染液
实验方法
1、实验动物的选择 2、剂量设计及随机化分组 3、受试物的配制 4、染毒途径的选择 5、毒性反应的观察与LD50的计算 6、急性毒性的评价
姜黄做实验报告
一、实验目的1. 探究姜黄中有效成分的提取方法；2. 评价姜黄提取物的抗氧化活性；3. 分析姜黄提取物的抗氧化作用机制。
二、实验材料1. 姜黄粉末：购自药材市场；2. 乙醇、甲醇、水等溶剂；3. 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）、维生素C（Vc）、亚硝酸钠等试剂；4. 721型可见分光光度计；5. 电子天平、超声波清洗器、旋转蒸发仪等仪器。
三、实验方法1. 姜黄提取（1）采用超声波辅助提取法：将姜黄粉末加入适量溶剂，置于超声波清洗器中，超声提取30分钟；（2）采用微波辅助提取法：将姜黄粉末加入适量溶剂，置于微波炉中，微波提取10分钟；（3）采用传统回流提取法：将姜黄粉末加入适量溶剂，置于电热套中，回流提取2小时。
2. 姜黄提取物抗氧化活性测定（1）DPPH自由基清除实验：取适量姜黄提取物，加入一定浓度的DPPH溶液，室温下反应30分钟，测定吸光度值；（2）亚硝酸盐还原实验：取适量姜黄提取物，加入一定浓度的亚硝酸钠溶液，室温下反应30分钟，测定吸光度值；（3）超氧阴离子自由基清除实验：取适量姜黄提取物，加入一定浓度的超氧阴离子自由基溶液，室温下反应30分钟，测定吸光度值。
3. 数据处理采用SPSS 22.0软件对实验数据进行统计分析，采用单因素方差分析（One-way ANOVA）和Duncan检验进行差异显著性分析。
四、实验结果1. 姜黄提取方法比较（1）超声波辅助提取法：姜黄提取率为15.2%；（2）微波辅助提取法：姜黄提取率为14.8%；（3）传统回流提取法：姜黄提取率为13.6%。
结果表明，超声波辅助提取法和微波辅助提取法的姜黄提取率高于传统回流提取法。
2. 姜黄提取物抗氧化活性（1）DPPH自由基清除实验：姜黄提取物对DPPH自由基的清除率随浓度的增加而增加，在浓度为100μg/mL时，清除率为70.2%；（2）亚硝酸盐还原实验：姜黄提取物对亚硝酸盐的还原率随浓度的增加而增加，在浓度为100μg/mL时，还原率为48.6%；（3）超氧阴离子自由基清除实验：姜黄提取物对超氧阴离子自由基的清除率随浓度的增加而增加，在浓度为100μg/mL时，清除率为58.2%。
(完整版)急性毒性试验
试验目的：急性毒性试验是在24小时内给药1次或2次（间隔6-8小时），观察动物接受过量的受试药物所产生的急性中毒反应，为多次反复给药的毒性试验设计剂量、分析毒性作用的主要靶器官、分析人体过量时可能出现的毒性反应、I期临床的剂量选择和观察指标的设计提供参考信息等。
一、啮齿类动物单次给药的毒性试验（一）试验条件1.动物品系：常用健康的小鼠、大鼠。
选用其他动物应说明原因。
年龄一般为7-9周龄。
同批试验中，小鼠或大鼠的初始体重不应超过或低于所用动物平均体重的20%.实验前至少驯养观察1周，记录动物的行为活动、饮食、体重及精神状况。
2.饲养管理：动物饲料应符合动物的营养标准。
若用自己配制的饲料，应提供配方及营养成分含量的检测报告；若是购买的饲料，应注明生产单位。
应写明动物饲养室内环境因素的控制情况。
3.受试药物：应注明受试药物的名称、批号、来源、纯度、保存条件及配制方法。
（二）试验方法：由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异，毒性也不同，有的很难观察到毒性反应，实验者可根据受试药物的特点，由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。
1.伴随测定半数致死量（LD50）的急性毒性试验方法。
2.最大耐受剂量（MTD）试验方法：最大耐受剂量，是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量。
3.最大受试药物量试验方法：在合理的浓度及合理的容量条件下，用最大的剂量给予实验动物，观察动物的反应。
4.单次口服固定剂量方法（Fixed-dose procedure）。
选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量。
实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受试药物后再禁食3-4小时。
如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。
根据受试药物的有关资料，由上述四个剂量中选择一个作初始剂量，若无有关资料作参考，可用500mg/kg作初始剂量进行预试，如无毒性反应，则用2000mg/kg 进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束预试。
4-2 急性毒性试验程序与急性毒性评价
第二节急性毒性试验程序与急性毒性评价一、急性毒性试验程序(一) 急性试验剂量分组探讨外来化合物急性毒性应首先测定其半数致死剂量或浓度(LD50或LC50)。
对一个未知毒性的外来化合物求其LD50(LC50)，应先做预试验。
做预试验方法很多，这里仅介绍其中一种。
首先了解分析受试化合物的化学结构和其理化性质，确定其所属已知化合物或其衍生物的种类，有何特殊基团及其分子量、熔点、沸点、比重、闪点、挥发度、蒸气压、水溶性和脂溶性等，依此查阅文献，找出与受试化合物化学结构与理化性质近似的化合物的毒性资料，并以其LD50(LC50)值作为受试化合物的预其毒性中值；但应注意，一定是相同动物种系和相同接触途径。
以此预期毒性中值为待测化合物的中间剂量组，再上下各推一到两个剂量组做预试验。
每个剂量组间的组距可以大些，有利于找出受试化合物的致死剂量范围。
初起组距可用剂量间的4倍差，即以log4(log4＝0.6)来划分各组剂量。
求外来化合物LD50时设置几个剂量组较为合适，应依预试验结果而定。
一般设置5~7个剂量组即可，它即符合统计计算要求又可节省人力和财力。
每个剂量组的动物数，小鼠不少于10只、大鼠6~8只、家兔4~6只，若设计采用霍恩氏法计算LD50时，动物数可减少。
每组动物应雌雄各半；如化合物毒性有性别差异，则应分别求雌、雄性动物各自的LD50(LC50)。
(二) 观察持续时间测定外来化合物的LD50(LC50)，一般要求计算实验动物接触化合物之后两周内的总死亡数。
对于一些速死性化合物求其LD50(LC50)也可仅计算24小时的死亡率。
也可仅计算24小时的死亡率，有些速杀性化合物的24小时LD50与两周LD50值往往没有差别。
但应注明是多少时间的LD50值，以便于在进行毒性比较时有共同的基础。
在观察期间应保障实验动物有完全的膳食、充足的饮水及适宜的温湿度环境，以防止动物出现非中毒性死亡。
(三) 症状观察观察实验动物接触外来化合物的中毒症状是了解该化合物急性毒性的十分重要的一环，是补充LD50这个参数不足的重要方面。
(一)四逆汤配伍之佐制实验——急性毒性实验教程
(一)四逆汤配伍之佐制实验——急性毒性实验[课时数]4课时[目的要求]通过拆方及组成方剂时的变化现象，明确佐制药物在方剂配伍中发挥作用的机理，并熟悉方剂半数致死量(LD 50)的测定方法，[实验原理]半数致死量是指能够引起试验动物一半死亡的剂量，为标志动物急性中毒程度的重要常数，四逆汤中附子、干姜相伍为大辛大热之品，且附子生用有毒性，故配入炙甘草，减缓烈性，制药毒性，有佐制之用。
[标本、教具]器材：普通天秤(100g)，1ml 注射器、6号针头、豚鼠框。
动物：小白鼠30-50只，体重18-24g ，雌雄均可。
或大白鼠30-50只，体重180-250g ，雌雄均可，方药：①四逆汤：生附子30g 灸甘草30g 干姜27g 。
②四逆汤去甘草，生附子30g 干姜27g ，方药制备：干姜提取挥发油，生附子、甘草各水煎2h 、1.5h ，合并药液，将药液浓度制备成每毫升含生药1克即得。
四逆汤去甘草制备方法同上。
[实验方法与技巧] 1．探索剂量；取所选小白鼠称重，以3只为1组，分3-4纽，各纽剂量按等比极数列给与(2：1或3：1)，由腹腔或尾静脉分别注射四逆汤原方药液与四逆汤去甘草方药液，观察组动物于给药后24h 内动物死亡时间，死亡率，找出引起100％死亡(LD 50)和0％(LD 50)死亡率剂量所在的范围。
然后按等比级或等差级数插几个中间剂量，按下列公式，求出公比r(r 在0.7—1.4之间之宜)。
r=n-1 2．进行正式实验：把预实验中求出的公比r ，—按等比极数计算出各组间的给药剂量分为a 、ar 、ar2……arn-1，相邻剂量之间呈1：0.8或1：0.7，要求最小剂量组的反应率为0％，最大剂量的反应率为100％，按随机分组法将动物分成几组，每组5或7只动物。
按求出剂量腹腔或尾静脉注射给药后，观察中毒症状的表观(兴奋、惊厥、抑制、昏迷、心跳，呼吸停止等)记录动物出现中毒的症状和死亡时间，用改良寇氏法计算药物的lD60及其平均可信限。
急性毒性试验
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二、试验准备
试验应在符合GLP试验室内进行，试验样品质量和稳定性应符合要求，与药效学及 临床试验一致。
(一)样品液配制
中药材町用浓缩煎剂或浸膏，中药制剂可用不含辅料提取物加水或用o．5％羧基纤 维素钠，0．5％吐温—80，5％阿拉伯胶等混悬剂、增溶剂配成混悬液等，尽可能配成 水溶液，水不溶性成份可用植物汕配成油溶、乳浊液。也有用乙醇、聚乙醇等溶剂配 成样品液者，但溶剂本身急性毒性能干扰试验结果，所以，急性毒性试验汇报中应对 样品液配制方法加以详细说明，必要时设溶剂对照组。
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第二节 急性毒性试验方法
一、LD50测定
最小致死量是使动物刚好致死药品剂量，但因为药品性质，给药方法和个 体差异，每只动物最小致死量确很大差异，试验和统训学原理表明一群动物 最小致死量平均值相当于半数致死量。半数致死量测定方法很多，但试验没 计大同小异，所不一样者为算方法不一样，其试验方法以下：
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(二)安全性评价
(1)依据急性毒性试验结果判断供试药品毒性强弱、类型。我国尚无统—要求。
(2)急性毒性试验结果对临床研究有指导意义，能够为临床研究时探索安全有 效剂量防止出现急性不良反应提供依据。
不过，鉴于人体与各种动物对各类化合物吸收、分布、代谢、排泄以及各类 型毒性反应差异，尚无规律可循，现有化学药品统计数据表明，在进行临床研 究时，仍应依据试验结果参考文件资料报道进行由低到高安全治疗剂量探索。
(二)样品液浓度及给药容量
为了求得最低致死且或半数致死量，需要设不一样剂量组，使个别组反应率在50％ 以上，个别组反应率在50％以下。不一样剂量设定有两种方式，—是浓度一定不一样 给药容量，另—种是容量一定不一样给药浓度，二者各有所长。
姜黄素急性暴露对秀丽隐杆线虫的毒性作用
中图分类号：R151.2;R114;R99文献标识码：A 文章编号：1002-3127( 2021)(M-0015-05• i仑著•姜黄素急性暴露对秀丽隐杆线虫的毒性作用魏洪鑫|’2,郝丽丽K2,张文静•，韩高超K2,李思成K2,高珊1，李国君以，宁钓宇K2(1.北京市疾病预防控制中心/北京市预防医学研究中心，食物中毒诊断溯源技术北京市重点实验室，北京100013; 2.首都医科大学公共卫生学院，北京100069)【摘要】目的研究姜黄素急性暴露对模式生物秀丽隐杆线虫的急性致死效应，并探究其对线虫生长发育、运动行为和过氧化反应的影响。
方法根据姜黄素的急性致死实验结果确定作用剂量（0、2. 5、5、10、20和40 p m〇l/L),对同步化的L4期线虫分别进行处理、测定其体长、体宽、咽泵振动频率、活性氧（R0S)和抗氧化酶的变化。
结果根据L4期 线虫急性暴露模型确定姜黄素LC5。
为50 p m ol/L。
线虫一般指标的结果显示，20和40 p m o l/L的浓度组与对照组相比，体长明显增加（P<0.05);20和40 p m o l/L浓度组身体弯曲频率增加（/"〈O. 01);高浓度组（10、20和40 p m o l/L)咽泵频率减少（P<0.01)。
进一步研究发现，2.5组的姜黄素可降低线虫在热应激状态下体内R O S表达量，并提高超氧化物歧化酶（S O D)、过氧化氢还原酶（C A T)的活性，氧化还原最终产物丙二醛（M D A)的含量也明显增加。
结论秀丽隐杆线虫急性暴露于姜黄素可对其生长发育、咽泵频率产生影响。
并且姜黄素能够有效清除线虫在应激状态下产生的过量活性氧，激活体内抗氧化酶，以抵御机体的氧化损伤。
【关键词】秀丽隐杆线虫；姜黄素；急性毒性效应Toxic effects of acute exposure to curcumin on the nematode C. elegansW E I Hong-xin1 2,H A O Li-l i1 2,Z H A N G W e n-jing1,H A N Gao-chao1'2,LI Si-cheng1 2,G A O Shan1,LI Guo-jun1'2,N I N G Jun-yu1'"(1. Beijing Centers for disease prevention and control/Beijing Research Center for Prevention Medicine^Beijing KeyLaboratory of Diagnostic and Tracebility Technologies for Food Poisoning, Beijing 100013, China；2.Capital Medical University, Beijing 100069, China)【Abstract】Objective To study the toxic effect of curcumin on survival, growth and development, oxidative reaction in C. elegans. Methods Nematodes at L4 stage were exposed to curcumin ( with the concentration of 0, 2. 5, 5, 10, 20, 40 |xmol/L respectively based on acute toxicity t e s t)，the survival ra te, body length and width，pharyngeal pump vibration frequency, head thrash and body bend were recorded. The intensity of ROS and activity of enzymes were measured. Results The result of acute toxicity test reveals the LC50of curcumin to C. elegans is 50 (Jimol/L. For nematodes at L4 stage, compared with control, the curcumin exposure with the concentrations of 20 and 40 (imol/L induced the increase of body lengths and head shaking rate. Pump vibration frequency was decreased at the concentrations of 10,20 and 40 |xmol/L( P<0. 01 ). Furthermore, the exposure of 2. 5 fxmol/L curcumin could reduce the intensity of ROS in nematodes under heat stress. Meanwhile, the increased activities of superoxide and catalase were detected as well as the increased content of MDA. Conclusion Acute exposure to curcumin can affect the growth and development of C. elegans as well as its pharyngeal pump vibration frequency. In addition, curcumin can effectively remove excessive reactive oxygen species produced in nematodes under stress state and activate antioxidant enzymes to resist oxidative damage.【Key words】Caenorhabditis Elegans; curcumin；Acute toxic effect姜黄素（Curcumin)相对分子质量较低，是从姜黄 等多种植物根茎中提取出的一种多酚类黄色物质m。
急性毒性实验实验报告
急性毒性实验实验报告引言毒性实验是评估化学物质对人体的危害性的重要手段之一。
急性毒性实验是其中一种常用的实验方法，通过观察和记录实验动物在暴露于高浓度物质后的反应和症状，来评估物质的毒性程度。
本实验旨在研究某种未知化学物质的急性毒性，为了保证实验结果的准确性和可靠性，我们采取了一系列的步骤和措施。
实验材料和设备•未知化学物质样品•实验动物（例如：小鼠）•毒性评估表格•天平•注射器•实验室用具（例如：试管、容器等）实验步骤1.实验前准备–根据实验需求，选择合适的实验动物进行实验。
确保动物的品种纯正、健康，并符合实验要求。
–准备实验动物的舒适住所，提供充足的饲料和水。
–对实验器材进行消毒处理，确保实验环境的清洁。
2.分组与标记–将实验动物分为不同的实验组和对照组，标记清楚以避免混淆。
–对照组不接触未知化学物质，用于对比分析实验组的数据结果。
3.化学物质注射–使用天平准确称取一定剂量的未知化学物质。
–使用注射器将化学物质注射到实验动物体内，注意注射剂量的准确性。
4.观察和记录–在注射化学物质后的不同时间点进行观察，记录实验动物的症状和行为变化。
–包括但不限于：呼吸变化、心跳变化、体温变化、运动能力降低等。
–使用毒性评估表格进行记录，确保数据的完整性和一致性。
5.实验结束与数据处理–实验时间结束后，停止对动物的处理。
–统计和整理实验动物的观察数据，计算各个实验组的平均值和变异程度。
–进行数据分析和结果展示，判断未知化学物质的急性毒性程度。
结果与讨论根据我们的实验数据，我们得到了未知化学物质的急性毒性程度评估结果。
根据观察和记录的症状和行为变化，我们可以得出以下结论：1.实验组动物在注射未知化学物质后出现了明显的生理和行为异常变化，如呼吸困难、心率增加、体温升高等。
2.对照组动物在相同条件下未出现上述异常变化，说明这些变化与未知化学物质的注射有关。
3.根据实验结果，我们可以初步判断未知化学物质具有较高的急性毒性程度。
急性毒性实验实验报告
急性毒性实验实验报告急性毒性实验是我班进行的一项特殊的实验。
我班是一支综合素质较高的学生团队。
我经常组织一些班委和班干部进行活动，还组织一些活动，使同学们的课余生活丰富多彩起来。
如开展“三走进军营”的活动、“我的成长”青年志愿者服务活动、走进孤儿院等活动。
其中组织这些活动最主要也是我最感兴趣的是“三走进军营”活动。
它是一项特殊而且重要的实践活动。
因为它使我的视野更开阔了，思维更敏捷了，情感更丰富了，而且使我和同学们都增长了见识，培养了合作精神，更重要的是使我更加热爱自己的专业了。
它使我对化学基础知识有了进一步地了解和掌握了应用化学方法和技能对化学学习和实践有了较大帮忙和促进作用。
下面我将以急性毒性实验为例作一介绍。
一、实验准备化学实验教学过程中，为了更好地进行实验教学，我们在实验前进行了大量地准备。
首先我们根据实验需要准备了许多化学试剂。
如试剂一：硼砂钠与氯气的混合溶液等；试剂二：试剂三：小苏打水等；试剂四：药品五：注射器一只；小苏打水五：水银滴定管一只；药品六：小苏打二：盐酸与氢氧化钠混合溶液一瓶；药品七：小苏打水三瓶。
二、实验步骤1、操作：实验前准备，要用盐酸、硫酸或其他溶液配制（要严格控制浓度),并用一种特殊的试剂配制成溶液，称取该溶液在一碗中并用小金属勺子舀入一小碗。
2、观察：在试验中主要观察实验对象的行为变化。
包括其外观特性和气味变化。
3、分析：用万用表测试不同浓度物质并记录。
4、观察样品颜色变化并记录，如变黄、变白及变浓等。
5、防护：如被污染物品处置后，应立即用水冲洗伤口和皮肤，用肥皂水进行局部清洗以防止感染，然后再用大量清水冲洗。
6、处理：用无菌水冲洗1小时，并用硫磺粉消毒伤口和皮肤。
7、处理后观察：如硫磺粉消散后，应再次用清水冲洗伤口和皮肤，直至伤口和皮肤无大碍后可继续进行下一步实验流程或休息时间，使其充分恢复至正常呼吸水平才能继续进行下一步实验流程或休息时间，并注意观察皮肤反应。
急性毒性实验
急性毒性实验急性毒性实验是一种基于实验动物进行的可靠、可控的毒性检测方法，主要用于评估一种化学物质在短期接触下对生物体的毒性作用。
以下是急性毒性实验的详细介绍。
一、实验目的1. 评估化学物质的急性毒性作用。
2. 确定一定剂量的化学物质对特定实验动物的最大耐受剂量。
3. 为长期和亚急性毒性实验提供基础数据。
二、实验动物和分组1. 实验动物通常为小鼠、大鼠、兔等。
2. 根据需要确定不同的剂量组，每组一定数量的实验动物。
3. 为了比较不同实验物质的毒性作用，应设置对照组。
三、实验流程1. 预实验：由实验动物的发育期、性别、年龄、体重等因素评估剂量的大小。
2. 实验前麻醉：给实验动物注射一定的麻醉剂，减轻实验操作对实验动物造成的压力与伤害。
3. 实验操作：将事先测定好的化学物质按照设定的剂量进行注射、灌入或其他途径的给药，实验时间尽量控制在24小时内，保持实验环境稳定，记录实验动物对化学物质的反应。
4. 实验后观察：通过观察实验动物的症状、行为、体重、死亡率等指标评估化学物质的毒性作用。
5. 实验结束：根据实验数据计算化学物质的急性毒性指标，判定化学物质是否符合的相应毒性标准。
四、实验准则与安全注意事项1. 操作前应了解细节操作规范及化学物质对实验动物的毒性作用情况。
2. 操作过程中要保持操作环境的清洁整洁，注意安全防护，防止事故的发生。
3. 操作结束后，实验动物应得到合适的处置和善后。
4. 实验需要考虑3R（Reduce, Refine and Replace）原则，减少实验动物数量和痛苦，降低实验道德伦理压力。
五、结论2. 急性毒性实验是毒性检测领域中最常见的实验方法之一，是评估化学物质的毒性作用水平不可或缺的方法。
3. 在实验过程中，实验者应始终注意实验安全，防止事故的发生，以确保实验的科学性和可靠性。
急性毒性试验方法
由于受试药物的化学结构、活性成分的含量、药理、毒理学特点各异，毒性也不同，有的很难观察到毒性反应，实验者可根据受试药物的特点，由下列几种实验方法中选择一种进行急性毒性试验。
1．伴随测定半数致死量（LD50）的急性毒性试验方法。
2．最大耐受剂量（MTD）试验方法：最大耐受剂量，是引起动物出现明显的中毒反应而不产生死亡的剂量。
3．最大受试药物量试验方法：在合理的浓度及合理的容量条件下，用最大的剂量给予实验动物，观察动物的反应。
4．单次口服固定剂量方法（Fixed-dose procedure）。
选择5、50、500和2000mg/kg四个固定剂量。
实验动物首选大鼠，给药前禁食6-12小时，给受试药物后再禁食3-4小时。
如无资料证明雄性动物对受药试物更敏感，首先用雌性动物进行预试。
根据受试药物的有关资料，由上述四个剂量中选择一个作初始剂量，若无有关资料作参考，可用500mg/kg作初始剂量进行预试，如无毒性反应，则用2000mg/kg进行预试，此剂量如无死亡发生即可结束预试。
如初始剂量出现严重的毒性反应，那就用下一个挡次的剂量进行预试，如该动物存活，就在此两个固定剂量之间选择一个中间剂量试验。
每个剂量给一只动物，预试一般不超过5只动物。
每个剂量试验之间至少应间隔24小时。
给受试药物后的观察期至少7天，如动物的毒性反应到第7天仍然存在，尚应继续再观察7天。
在上述预试的基础上进行正式试验。
每个剂量最少用10只动物，雌雄各半。
根据预试的结果，由前面所述的四种剂量中选择出可能产生明显毒性但又不引起死亡的剂量；如预试结果表明，50mg/kg引起死亡，则降低一个剂量档次试验。
急性毒性实验流程
急性毒性实验流程一、实验前的准备。
要做急性毒性实验啦，那可得好好准备一番呢。
首先得确定实验的对象，是小动物呢，还是其他的什么。
要是小动物的话，像小白鼠之类的，就得找个靠谱的来源，确保它们健康得很。
然后就是实验场地啦，得打扫得干干净净的，不能有什么脏东西或者干扰因素。
那些实验器材也得检查检查，像喂食管啊，注射器之类的，可不能出岔子。
还有啊，实验用到的药品得准备齐全，并且要清楚地知道它们的性质和用法，可别到时候手忙脚乱的。
二、实验动物的处理。
好啦，动物到手了，咱得好好对待它们呢。
要先给它们编号，就像给它们取个小名字一样，这样才能区分开来。
然后呢，要确定给它们喂药或者注射药物的剂量。
这个剂量可是很有讲究的，要根据不同的实验要求和动物的体重之类的因素来计算。
给动物喂药的时候，要小心一点哦。
如果是口服的药，得想办法让它们乖乖吃下去，可不能强来。
要是注射的话，那技术就得过关啦，可不能让小动物太疼了。
在这个过程中，还得观察动物的反应，看它们有没有什么异常的表现，比如是变得特别兴奋呢，还是无精打采的。
三、观察阶段。
这时候就开始认真观察啦。
观察的时间也是有规定的，不是随便看看就了事的。
要时刻盯着这些小动物，看它们的行为有没有变化。
比如说它们的活动量是不是减少了，或者是它们的饮食有没有受到影响。
还要看看它们的身体外观有没有变化，像毛发是不是变得乱糟糟的，眼睛有没有什么异样。
这个时候可不能马虎哦，哪怕是一点点小变化都可能是很重要的线索呢。
而且观察的频率也要合适，不能隔太长时间才看一次，也不能一直盯着让小动物有压力。
四、数据记录。
在观察的过程中，可别忘了记录数据呀。
这个数据记录就像是写日记一样，把看到的动物的各种表现都写下来。
什么时候开始有变化的，变化的程度是多少，这些都要清清楚楚地记录。
数据记录可不能瞎编哦，一定要实事求是。
要是记录错了，那整个实验可就白做了。
而且记录的时候也要有条理，不要写得乱七八糟的，这样以后分析数据的时候才能一目了然。
七味姜黄方对小鼠急性酒精中毒的干预研究的开题报告
七味姜黄方对小鼠急性酒精中毒的干预研究的开题报告【摘要】本文主要介绍了七味姜黄方对小鼠急性酒精中毒的干预研究的开题报告。
该研究通过体外和体内实验探究了七味姜黄方的抗酒精中毒作用及其机制，研究结果表明七味姜黄方可以有效减轻酒精中毒对小鼠造成的肝损伤，并且能够提高小鼠的抗氧化能力和降低脂质过氧化反应产物的生成，从而保护肝脏。
此研究结果可为七味姜黄方的开发和应用提供基础数据和参考。
【关键词】七味姜黄方；酒精中毒；干预；小鼠；肝损伤一、研究背景酒精中毒是世界范围内的健康问题，对人体健康和社会和谐造成了不良影响。
长期酗酒会导致肝脏损伤，甚至诱发肝硬化和肝癌等疾病，因此，对酒精中毒进行干预研究具有重要的临床意义。
七味姜黄方是一种传统中药方剂，具有活血化瘀、健脾开胃、清热解毒等功效，对肝脏保护作用也有一定的研究报道。
因此，本研究将探讨七味姜黄方在酒精中毒小鼠模型中的干预作用及其机制，为七味姜黄方的开发和应用提供参考。
二、研究内容与方法1. 研究内容（1）体外实验，评估七味姜黄方的抗氧化能力。
（2）体内实验，观察七味姜黄方对酒精中毒小鼠的干预作用。
2. 研究方法（1）体外实验：采用DPPH自由基清除法、铁离子还原能力测定法等方法评估七味姜黄方的抗氧化能力。
（2）体内实验：选用雌性伊扎尔斯小鼠，随机分为正常对照组、模型组、七味姜黄方干预组和维生素E干预组，每组10只。
模型组、干预组和维生素E干预组均给予50%乙醇注射造成急性酒精中毒，正常对照组注射等量蒸馏水。
七味姜黄方组和维生素E干预组分别给予七味姜黄方提取液和维生素E口服预防。
测定小鼠的肝脏指标（AST、ALT、TP、ALB），抗氧化能力（MDA、SOD、GSH、GPx）和细胞凋亡率。
三、预期结果七味姜黄方具有明显的抗酒精中毒肝损伤作用，能够减轻急性酒精中毒小鼠对肝脏造成的损伤，并且能够提高小鼠的抗氧化能力和降低脂质过氧化反应产物的生成，从而保护肝脏。
七味姜黄方的抗氧化作用可能是其保护肝脏的机制之一。
姜黄素长期毒性试验
姜黄素长期毒性试验
沃兴德;洪行球;高承贤
【期刊名称】《浙江中医药大学学报》
【年(卷),期】2000(024)001
【摘要】在确定姜黄素无急性毒性作用的前提下，我们用姜黄素进行长期毒性试验，分高，低２个剂量组，连续给药８０天，部分动物停药后继续观察２周，经一般状况观察，１０项血液系列化指标，８项血液学指标，大体解剖及病理学观察。
结果姜黄素高剂量「５００ｍｇ／（ｋｇ．ｄ），低剂量组「１００ｍｇ／（ｋｇ．ｄ）各项指标与正常对照组比较，均无显著差异，说明姜黄素在上述剂量下连续服用８０天是安全的。
【总页数】1页(P61)
【作者】沃兴德;洪行球;高承贤
【作者单位】浙江中医学院分子医学研究所;浙江中医学院分子医学研究所
【正文语种】中文
【中图分类】R285.1
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不同生姜提取物的急性毒性研究
不同生姜提取物的急性毒性研究
王菲;黄玉艾;沈雪;卢静
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】2009(030)001
【摘要】观察不同生姜提取物的急性毒性并对其进行评价.依据GB15193-
2003(食品安全性毒理学评价程序和方法>进行急性毒性试验,研究生姜食品的急性毒性.生姜水提物和生姜醇提物对两种性别的小鼠经口毒性灌胃达66.67g/kg两周内动物未见明显中毒症状,无动物死亡.取灌胃1 d后与灌胃前的体重差值及灌胃一周后及灌胃前的体重差值做为小鼠长势的数据描述进行分析.经口急性毒性作用试验表明生姜无毒级物质.结论:生姜具有较好的食用安全性.
【总页数】3页(P138-140)
【作者】王菲;黄玉艾;沈雪;卢静
【作者单位】吉林大学,军需科技学院食品质量与安全系,吉林,长春,130062;吉林大学,军需科技学院食品质量与安全系,吉林,长春,130062;吉林大学,军需科技学院食品质量与安全系,吉林,长春,130062;吉林大学,军需科技学院食品质量与安全系,吉林,长春,130062
【正文语种】中文
【中图分类】TS2
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急性毒性试验
急性毒性试验是指一次或24小时内多次染毒的试验，是毒性研究的第一步。
要求采用啮齿类或非啮齿类两种动物。
通常为小鼠或大鼠采用经口、吸入或经皮染毒途径。
急性毒性试验主要测定半数致死量（浓度），观察急性中毒表现，经皮肤吸收能力以及对皮肤、粘膜和眼有无局部刺激作用等，以提供受试物质的急性毒性资料，确定毒作用方式、中毒反应，并为亚急性和慢性毒性试验的观察指标及剂量分组提供参考。
一、概念和试验目的
(一)急性毒性概念
急性毒性是指机体(人或实验动物)一次(或24小时内多次)接触外来化合物之后所引起的中毒效应，甚至引起死亡。
但须指出化合物使实验动物发生中毒效应的快慢和剧烈的程度，可因所接触的化合物的质与量不同而异。
有的化合物在实验动物接触致死剂量的几分钟之内，就可发生中毒症状，甚至死亡。
而有的化合物则在几天后才显现中毒症状和死亡，即迟发死亡。
此外，实验动物接触化合物的方式或途径不同，“一次”的含义也有所不同。
凡经口接触和各种方式的注射接触，“一次”是指在瞬间将受试化合物输入实验动物的体内。
而经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化合物的过程，所以“一次”含有时间因素。
(二)实验目的
1.求出受试化合物对一种或几种实验动物的致死剂量(通常以LD50为主要参数)，以初步估计该化合物对人类毒害的危险性。
2.阐明受试化合物急性毒性的剂量－反应关系与中毒特征。
3.利用急性毒性试验方法研究化合物在机体内的生物转运和生物转化过程及其动力学变化。
也可用于研究急救治疗措施。
二、实验动物和染毒方法
(一)实验动物选择
在卫生毒理学领域中，体内试验以实验动物为研究对象，最终是为了阐明受试外来化合物对人的急性危害性质和危害强度。
所以选择实验动物时，要求在其接触化合物之后的毒性反应，应当与人接触该化合物的毒性反应基本一致，虽然利用任何一种或几种实验动物的急性毒性结果向人外推都必须十分慎重，但这一选择实验动物的原则仍非常重要。
1.物种选择以选择哺乳动物为主。
实际应用中以大鼠和小鼠为主，尤以大鼠使用很多。
需指出大鼠并非对外来化合物都最敏丅感。
家兔常用于研究化合物的皮肤毒性，包括对粘膜的刺激。
猫、狗也用于急性毒性试验，但因价贵不易于大量使用。
猪为杂食动物，对一些化合物的生物效应表现与人有相似之处，尤其是皮肤结构与人较近似。
但因体大、价贵，不便大量使用。
归纳起来，在进行化合物急性毒性研究中，选择实验动物的原则是：尽量选择对化合物毒性反应与人近似的动物；易于饲养管理，试验操作方便；易于获得、品系纯化，且价格较低的动物。
为了有利于预测化合物对人的危害，要求选择两种以上的实验动物，最好一种为啮齿类，一种为非啮齿类，分别求出其急性毒性参
数。
一般研究外来化合物急性毒性，需雌雄两性动物同时分别进行，每个剂量组两性动物数相等。
急性毒性使用小鼠体重以18～25g、大鼠180～240g、豚鼠200～250g、家兔2～2.5kg、猫1.5～2.0kg左右为宜。
(二)实验动物喂养环境
实验动物喂养室室温应控制在22±3℃，家兔可控制在20±3℃，相对湿度30%～73%，无对流风。
每笼动物数以不干扰动物个体活动及不影响试验观察为度，必要时需单笼饲养。
饲养室采用人工昼夜为好，早6点至晚6点进行12小时光照，其余12小时黑暗，一般食用常规试验室饲料，自由饮水。
(三)实验动物染毒方法
1.经口(胃肠道)接触目的是研究外来化合物能否经胃肠道吸收及求出经口接触的致死剂量(LD50)等。
由于外来化合物可以污染饮水及食物，因此，此种染毒方式在卫生毒理学中占有重要地位。
(1)灌胃是将液态受试化合物或固态、气态化合物溶于某种溶剂中，配制成一定浓度，装入注射器等定量容器，经过导管注入胃内。
在每一试验系列中，同物种实验动物灌胃体积最好一致，即以单位体重计算所给予的毫升数应一致，即ml/kg或ml/g计。
这是因为成年实验动物的胃容量与体重之间有一定的比例。
按单位体重计算灌胃液的体积，受试化合物的吸收速度相对较为稳定。
小鼠一次灌胃体积在0.2～1.0ml/只或0.1～0.5ml/10g体重较合适，大鼠一次灌胃体积不超过5ml/只(通常用0.5～1.0ml/100g体重)，家兔不超过10ml/2kg体重，狗不超过50ml/10kg体重。
1.实验动物：
SPF级昆明小鼠，雌雄各半，体质量1822g。
雌雄分笼饲养，观察一周。
自然光照，专用饲料，自由饮水。
2.药物：
姜黄
3.最大给药量测定
姜黄浓缩至最大浓度，以小鼠最大耐受体积灌胃，推出如下公式求算小鼠最大给药量及其相当于成人临床用药量的倍数。
小鼠每日最大给药量=最大浓度×最大耐受体积×每日给药次数×小鼠平均体重；相当于成人每日用药量的倍数=(小鼠的最大给药量/小鼠平均体重)×(成人平均体重/成人临床用药量)。
4.预实验：
找到动物100％及０死亡的剂量．
5.正式实验：昆明小鼠适应性饲养１周，雌雄各半，随机分为给药组和对照组，
雌雄分开，每组10只。
各小鼠每１０ｇ的给药量为０．４ｍＬ．实验前禁食不禁水１2ｈ，灌胃给药１次．对照组给予等量的生理盐水．给药后立即观察动物的毒性反应情况，包括外观体征、行为活动、精神状态、食欲、大小便及颜色、皮毛、肤色、呼吸以及鼻、眼、口腔、生殖器等有无异常分泌物．给药后４ｈ内，每小时观察临床体征及死亡情况．以后每天观察１次，每日称量，连续观察１４ｄ，于第14ｄ处死动物．对死亡动物进行系统尸检，称取心、肝、脾、肺、肾等重要脏器，计算脏器系数．观察心、肝、脾、肺、肾等重要脏器有无异常变化，并进行病理组织学检查。