XXXHPLC分析方法的验证方案(7.5改后)

XXXHPLC分析方法的验证方案(7.5改后)

XXX产品HPLC分析方法

确认方案

XXX制药有限公司

确认方案审批表

确认方案名称: XXX产品HPLC分析方法确认方案确认方案编号：KY-ZL-YZ-FF-00400

目录

1 概述

2 确认目的

3 确认范围

4 确认小组成员与职责

5 确认方案的审核与批准

6 进度计划

7 确认内容

8 变更与偏差

9 确认结果与评价报告

10 确认合格证书

1 概述

我公司产品XXX产品采自《中国药典》2010年版二部，含量及有关物质、A、B、C的检验均使用高效液相色谱仪进行检验，两个检验项目检验参数等条件完全相同，且我公司未对《中国药典》2010年版二部中的方法进行过任何改变，因此按照2010新版GMP要求，需要进行分析方法确认。本确认方案使用LC-2010AH型高效液相色谱仪对XXX产品采用《中国药典》2010年版二部“含量”、“有关物质”及“A、B、C”的检验方法进行确认，证明此方法在本公司实验室的适用性。根据《药品GMP指南（质量控制实验室与物料系统）》分册要求，“含量”、“有关物质”及“A、B、C”项需确认项目如下：

“是”代表该项内容需确认，“否”代表该项内容不需要确认

2确认目的

通过对XXX产品含量及有关物质A、B、C的检验方法的确认，证明此方法在本公司实验室的适用性。

3确认范围

本确认方案适用于XXX产品含量及有关物质A、B、C、的检验方法进行确认。

4确认小组成员与职责

5确认方案的起草与审批

5.1 确认方案的起草与审批：确认方案由检验室起草，确认小组会审，质量负责人批准实施。

5.2 确认方案的培训：确认方案经批准后，实施前由确认方案的起草部门组织确认方案的参与者进行培训。

5.3 确认方案的修改：确认方案如需修改，由质量负责人批准实施，在确认报告中体现。

6 进度计划

整个确认活动实施时间：

确认时间：从_____年___月__日至_____年__ 月__ 日；

起草报告：从_____年___月__日至_____年__ 月__ 日；

7 确认内容

7.1确认前仪器及材料检查

7.1.1确认前，对下列试验用仪器和材料进行检查

7.1.1.1岛津高效液相色谱仪

7.1.1.2 TG-332A型分析天平

7.1.1.3色谱柱：C18（4.6*250㎜）

7.1.1.4对照品和试剂：产品X二醇物对照品、对硝基苯甲醛对照品、产品X对照品、羟苯甲酯对照品、羟苯乙酯对照品、羟苯乙酯对照品、庚烷磺酸钠，乙腈（色谱级），甲醇（色谱级），磷酸二氢钾、三乙胺、磷酸、蒸馏水

7.1.1.5其他一些辅助的玻璃仪器（如量瓶、移液管等）

7.1.2可接受标准：仪器和用具经校验且在效期内；对照品、试液、试剂与试药符合验证要求且在效期内；色谱柱使用状态正常。

7.1.3结果记录：将结果记录在附件1《确认前仪器及材料检查表》中。

7.2确认涉及文件检查

7.2.1确认前，对与此次确认相关的文件进行检查

7.2.1.1XXX产品成品检验操作规程（KY-ZL-SOP-CP-00400）

7.2.1.2 型高效液相色谱系统标准操作及维护保养规程

（KY-SB-SOP-JY-03700）

7.2.1.3 型高效液相色谱系统维护保养及清洁操作规程

（KY-WS-SOP-JY-03700）

7.2.1.4TG-332A型分析天平标准操作规程（KY-SB-SOP-JY-02300）

7.2.1.5TG-332A型分析天平维护保养及清洁标准操作规程（KY-WS-SOP-JY-02300 7.2.1.6高效液相色谱法标准操作规程（KY-ZL-SOP-ZK-03300）

7.2.1.7XXX产品HPLC分析方法的验证方案（KY-YZ-SOP-JY-00400）

7.2.1.8XXX产品生产工艺规程（KY-SC-JB-GY-00400）

7.2.1.9检验方法验证（确认）管理程序（KY-ZL-SMP-05800）

7.2.2可接受标准：所有文件都应为现行版本，且经过批准。

7.2.3结果记录：将结果记录在附件2《确认前文件检查表》中。

7.3人员培训确认

7.3.1检查并确认所有参与执行确认的人员是否已得到培训，并在培训记录上签字。

7.3.2可接受标准：验证小组成员均已经过培训，并在培训记录上签字。

7.3.3确认结果：将确认结果填入附件3《人员培训、参与情况确认记录》中。

7.4 确认项目

7.4.1 “含量”项确认

7.4.1.1重复性/准确度

7.4.1.1.1空白基质的制备：精密称定硼酸：13.125g硼砂：0.6g玻璃酸钠：1g羟苯乙酯：0.5g按照XXX产品生产工艺规程（KY-SC-JB-GY-00400）配制加注射用水至1000ml。

7.4.1.1.2对照液制备：称取产品X对照品用注射用水配制成1ml含2.5mg的溶液，取本品用流动相定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液摇匀，作为对照液备用。对照液平行制备2份，标识为S-1、S-2（浓度为标示量的100%）。

7.4.1.1.3样品制备：称取产品X对照品用空白基质水溶解后定容，摇匀，备用。平行制备浓度梯度为标示量80%、100%、120%的样品各3份，标识为A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9。

7.4.1.1.4照《高效液相色谱仪标准操作规程》测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相A为0.01mol/L庚烷磺酸钠缓冲溶液（取磷酸二氢钾6.8g，用0.01mol/L庚烷磺酸钠溶液溶解并稀释至1000ml，再加三乙胺5ml，混匀，用磷酸调节PH值至2.5），流动相B 为甲醇；检测波长为277nm；按下表进行线性梯度洗脱。另取产品X对照品、产品X 二醇物对照品、对硝基苯甲醛对照品、羟苯甲酯、羟苯乙酯与羟苯丙酯对照品各适量，加甲醇适量（产品X每10mg加甲醇1ml）使溶解，用流动相定量稀释成每1ml中含产品X0.5mg、产品X二醇物40ug与对硝基苯甲醛3ug、羟苯甲酯40ug、羟苯乙酯50ug 和羟苯丙酯20ug的混合溶液。精密吸取该溶液10µl注入色谱仪，作为系统适用性溶液。记录色谱图。各相邻峰间的分离度均应符合要求）（应大于1.5）。

7.4.1.1.5测定：精密量取上述A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液用流动相定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液，摇匀，精密量取10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图。

1）取S-1精密量取10ul，注入液相色谱仪记录色谱图，该溶液连续进样2针。

2）取S-2精密量取10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图，该溶液连续进样1针。

3）分别精密量取稀释后的A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液各10ul，注入液相色谱仪，记录色谱图。

4）计算S-1和S-2的F值，相对标准偏差应≤2.0%，以外标法计算稀释后的A-1、A-2、A-3、A-4、A-5、A-6、A-7、A-8、A-9溶液的含量。