黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书

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黄曲霉毒素试剂盒说明书

黄曲霉毒素试剂盒说明书

黄曲霉毒素 B1酶联免疫检测试剂盒使用说明书Ⅰ.样品处理方法一、食品1、脂肪含量小的固体样品(如大米、玉米、小米等)称取5.0g样品(已粉碎)于100ml具塞三角瓶中,准确加入25.0ml甲醇水(1+1)溶液,振摇15min,过滤,弃去1/4初滤液,收集试样滤液,根据样品的国家允许量标准,用A试剂将滤液进行稀释(见表1:样品稀释表)。

将样品稀释液进行定量或限量测定。

2、酱油、醋称取5.0g样品于25ml小烧杯中,用5ml蒸馏水将试样转移到125ml分液漏斗中,加入20ml三氯甲烷,加塞轻轻振摇3min,静置分层。

放出下层三氯甲烷层,经盛有约5g预先用三氯甲烷湿润的无水Na2SO4过滤器于100ml蒸发皿中,再加5ml三氯甲烷于分液漏斗中,重复振摇提取,三氯甲烷层一并滤于蒸发皿中,最后用少量三氯甲烷洗涤过滤器,洗液并于蒸发皿中,65℃水浴通风挥干。

挥干冷却后,准确加入25.0ml 甲醇水(1+1),将蒸发皿中的凝结物充分溶解。

根据样品的国家允许量标准,用A试剂将提取液进行稀释(见表1:样品稀释表)。

将样品稀释液进行定量或限量测定。

3、食用油(如菜油、麻油、色拉油、花生油等)称5.0g油样于25ml小烧杯中,用20ml石油醚或正乙烷分次将试样转移至125ml分液漏斗中,准确加入25.0ml甲醇水(1+1)溶液,加塞轻轻振摇5min,静置分层,放出下层甲醇水提取液。

根据样品的国家允许量标准,用A试剂将提取液进行稀释(见表1:样品稀释表)。

将样品稀释液进行定量或限量测定。

4、葡萄酒准备称取5.0g葡萄酒于125ml分液漏斗中,加入20ml三氯甲烷,加塞轻轻振摇3min,静置分层。

放出下层三氯甲烷层,经盛有约5g预先用三氯甲烷湿润的的无水Na2SO4过滤器于100ml蒸发皿中,再加5ml三氯甲烷于分液漏斗中,重复振摇提取,三氯甲烷层一并滤于蒸发皿中,最后用少量三氯甲烷洗涤过滤器,洗液并于蒸发皿中, 65℃水浴通风挥干。

黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书

黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书

苏微黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书【产品用途】黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫亲和柱适合于和AFB1酶免分析试剂盒、HPLC或液质结合使用,定量检测AFB1。

用该免疫亲和柱净化样品,提高了样品的纯度。

纯化后的样品可用不同的分析方法测定。

【适应范围及产品性能】用于定性、定量检测谷物、粮油、饲料等样本中AFB1时的样本前处理。

柱吸附能力:≥50ng/支,≥100ng/支(可根据要求选择相应柱容量);回收率:75%~90%。

柱内凝胶:Protein A琼脂糖凝胶特点:载量大,单抗定向偶联,易洗脱,回收率高。

【测定原理】本产品测定的基础是抗原抗体反应,黄曲霉毒素B1(AFB1)单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的AFB1经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过AFB1免疫亲和柱,在免疫亲和柱内,AFB1与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。

最后采用甲醇洗脱AFB1,然后进行相关分析。

【产品组成】标准品(选配);25支/盒;1mL柱管/支;说明书1份;【所需材料】(不提供)(1)设备及器皿耗材:天平、粉碎机、离心机、高速均质器(18000r/min~22000 r/min);量筒、50mL玻璃漏斗、微量移液器(100μL~1000μL)、定量滤纸、玻璃微纤维滤纸(直径11cm,孔径1.5μm)、20mL玻璃注射器等。

(2)试剂:甲醇(色谱级)、pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)、pH7.0磷酸盐缓冲液(PBS)、吐温-20、蒸馏水或去离子水。

【样品制备及净化】(1)谷物、花生及其制品----准确称取25.0g粉碎的样品,加入5.0g氯化钠,----与125.0mL甲醇-水溶液(7+3)混合,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min,----用定量滤纸过滤,----准确移取15mL滤液并加入30mL水稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。

----准确移取15.0mL混合液进行过亲和柱。

黄曲霉毒素B1酶联免疫定量检测试剂盒 说明书

黄曲霉毒素B1酶联免疫定量检测试剂盒 说明书

1ELISA kit for quantitative detection of aflatoxin B1一、概要黄曲霉毒素主要是两种霉菌黄曲霉及 A.paraticus的二级代谢物。

这些霉菌在湿热的环境和耕作土地上污染的植物产生。

黄曲霉毒素B1(AFB1)属于自然最强烈的致癌物质,它一般产生于花生、玉米、巴西坚果和棉花种子中。

本试剂盒利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对各种谷物、饲料及其他食品中的AFB1含量进行快速、定量检测。

二、原理本试剂盒是利用直接竞争酶联免疫吸附微孔模式进行检测,灵敏度可达0.1 µg/kg(ppb)。

样品或标准品中游离的黄曲霉毒素B1与酶标抗原竞争结合包被在微孔中的抗体上的结合位点,经洗板洗去多余的酶标抗原与黄曲霉毒素B1后加入显色剂与反应底物,其与酶标物作用而成蓝色,加入反应停止液后颜色由蓝色转变为黄色,黄色越深则表明黄曲霉毒素B1越少,用酶标仪在450 nm处测定光吸收值可准确定量检测样品中的黄曲霉毒素B1的污染水平。

三、试剂盒构成1、反应板支架……………………………………………………………………………1块2 黄曲霉毒素B1抗体包被反应板……………………………………………………96孔3、黄曲霉毒素B1标准品溶液(0 ppb,0.1 ppb,0.25 ppb,0.5 ppb,1 ppb,2 ppb)…1套4、酶标记物…………………………………………………………………4瓶5、酶稀释液……………………………………………………………………1瓶6、样品稀释液………………………………………………………………1瓶7、显色剂溶液………………………………………………………………………1瓶8、反应底物溶液………………………………………………………………1瓶9、终止液………………………………………………………………………………1瓶10、浓缩洗涤液(20 X)………………………………………………………1瓶四、注意事项1、试剂盒请置放于2-8℃条件下保存,使用过程中不要让微孔干燥,使用后立即将试剂放回至2-8℃条件下冷藏。

黄曲霉素B1检测卡说明书(完整版)

黄曲霉素B1检测卡说明书(完整版)

黄曲霉素B1检测卡说明书(完整版)-CAL-FENGHAI-(2020YEAR-YICAI)_JINGBIAN黄曲霉毒素B1 检测卡说明书【简介】黄曲霉毒素是由黄曲霉和寄生曲霉中产毒菌株所产生的有毒代谢产物,最主要的4种分别为:B1、B2、G1、G2。

黄曲霉毒素具有很强的急性毒性,也有明显的慢性毒性及强致癌性。

黄曲霉毒素主要污染粮、油及其制品,其中受污染最严重的是花生、棉籽、玉米及其制品;其次是稻米、小麦、大麦、高粱、芝麻、茶叶等。

鉴于这些霉菌毒素的毒性,欧盟国家规定,黄曲霉毒素B1的残留限量值为5ppb。

【检测原理】该试剂盒采用免疫竞争法分析原理结合胶体金标记技术进行检测。

【检测范围】花生、玉米、小麦、大米、茶叶、油脂、饲料等;【产品组成】黄曲霉毒素B1免疫胶体金快速检测卡(40份/盒)滴管(40支)干燥剂(40片)一次性手套(5只)【技术指标】检测下限:5μg/kg;【检测步骤】1.取5g以上有代表性的粉碎后的谷物样品(过20目筛),准确称取0.5g均匀粉碎试样,加入到配套的15ml离心管中。

2.向离心管中准确加入纯净水和乙酸乙酯各2mL,将瓶塞盖紧密封,用力振荡5分钟,4000rpm离心1分钟(备注:如实验室没有大离心机设备,可以用小离心管取1.5ml上清液,用小离心机离心)。

3.用吸管取0.6mL上清液到小玻璃杯中,吹干滤液(吹风机或烘箱),然后用0.3ml体积稀释液复溶杯底固体。

此溶解液即为检测液.4.取出试纸,开封后平放在桌面,用滴管向试纸孔缓慢而准确地逐滴加入3滴检测液。

5.5~10分钟判断结果,半小时后的结果判读无效。

【结果判断】1、阴性:测试线(T)与对照线(C)都出现,表明样品中黄曲霉毒素的浓度小于5ug/kg。

2、阳性:只有对照线(C),无测试线(T),表明样品中黄曲霉毒素的浓度大于或等于5μg/kg。

3、无效:对照线(C)和测试线(T)都不出现,或者对照线(C)不出现。

【注意事项】1、本产品在2~30℃密封干燥保存;忌冷冻;检测卡保存期18个月;2、在环境温度15~37℃下操作;检测卡极易受潮,打开小包装后应立即使用;3、乙酸乙酯为易挥发液体,保存为12个月,不用时要盖紧瓶塞;。

MS-Clean黄曲霉毒素B1免疫亲和柱

MS-Clean黄曲霉毒素B1免疫亲和柱

MS-Clean黄曲霉毒素B1免疫亲和柱
概要:
黄曲霉毒素是谷类及其他农作物常见的真菌毒素,是由黄曲霉和寄生曲霉产生的一类低分子化合物,对动物、植物和微生物具有很强的毒性,致癌力最强,还能引起突变和导致畸形。

世界各国对食品及饲料中的黄曲霉毒素都有严格的限量标准。

测定原理:
此免疫亲和柱以抗体-抗原特异性反应为基础,含有和黄曲霉毒素B1抗体结合在一起的凝胶。

上样时,经提取、过滤、稀释后的样品缓慢地通过黄曲霉毒素B1免疫亲和层析柱,在柱内黄曲霉毒素B1与抗体结合,其他物质不会结合而直接流出。

此后洗涤免疫亲和柱,完全除去未结合的其他物质。

最后加入甲醇,将黄曲霉毒素B1释放并洗脱,再注入到分析仪器中进行检测。

适用范围及用途:
黄曲霉毒素B1免疫亲和柱适用于基质复杂、限量要求低的样品中黄曲霉毒素B1检测的净化。

可以进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA等定量分析,适合谷物、食品和饲料等样品。

液相色谱测定条件:
检测器:荧光检测器
激发/发射波长:360 nm/440 nm 流动相:甲醇:水 = 45:55
流速:0.8 mL/min
进样量:20 uL
柱温:30 ℃
反应时间:10 min
用进样器吸取20 uL黄曲霉毒素标准工作溶液注入高效液相色谱
仪,在上述色谱条件下测定标准溶液的响应值(峰高或峰面积),得到黄曲霉毒素标准溶液的高效液相色谱图。

产品参数及规格:。

黄曲霉毒素试剂盒 说明书

黄曲霉毒素试剂盒 说明书

RIDASCREEN® Aflatoxin Total 酶联免疫法定量检测黄曲霉毒素总量(R4701)酶标免疫分析定量检测黄曲霉毒素总量。

德国R-Biopharm公司制造(中文翻译件仅供参考,以试剂盒内附的英文原件为准)简介RIDASCREEN®Aflatoxin Total(订货号:R4701)黄曲霉毒素总量检测试剂盒,采用竞争性酶联免疫法定量测定谷物和饲料中的黄曲霉毒素的总含量。

试剂盒中含有酶联免疫检测所需的所有试剂,包括标准品。

试剂盒足够进行96次检测(包括标准测定)。

定量分析需要使用微孔板酶标仪。

样品处理:谷物和饲料样品:提取、过滤和稀释检测时间:样品制备(以10个样品为例)谷物和饲料样品:.............................约30分钟检测过程(孵育时间)...........................45分钟检测限:谷物和饲料样品:....................约1.75 ppb(以标准品为基础测得)回收率:约85 %(以标准品为基础测得)变异系数的中间值为15%特异性:RIDASCREEN® Aflatoxin Total黄曲霉毒素总量检测试剂盒的特异性根据与相关霉菌毒素的交叉反应确定。

黄曲霉毒素B1....................................100 %黄曲霉毒素B2....................................约48 %黄曲霉毒素G1 ...................................约75 %黄曲霉毒素G2...................................约18 %1. 用途RIDASCREEN® Aflatoxin Total(订货号:R4701)黄曲霉毒素总量试剂盒,采用竞争性酶联免疫法定量测定谷物和饲料中的黄曲霉毒素的总量。

黄曲霉毒素AFB1_说明书

黄曲霉毒素AFB1_说明书

6. 浓缩洗涤液 (10×) …………………………… 40ml 7. 样品稀释液(10×) ……………………………… 20ml 8. 操作说明书一份
注意:标准品含有低浓度黄曲霉毒素、终止液含 2M HCl, 需小心取用。勿在有效期外使用本试剂盒。
【需要而未提供的设备及试剂】
设备: ┅┅微孔板酶标仪 450nm/630nm ┅┅振荡器 ┅┅涡旋仪 ┅┅离心机 ┅┅天平:感量 0.01g ┅┅微量移液器:单道 20μl~200μl、200μl~1000μl 多道 250μl ┅┅滤纸
【样本前处理步骤】
(一) 谷物(大、小米,玉米等脂肪含量少的谷物)(稀 释倍数:10)
┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 4.0ml50%甲醇/水溶液混合均 匀;
┅┅强力振荡 3 分钟; ┅┅5000g 离心 10min; ┅┅取400μl 上清液,加入600μl 样品稀释液进行稀释, 充分混匀; ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 (二) 花生(稀释倍数:10)
1
┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 2.0ml 石油醚混合均匀; ┅┅再加入 4ml50%甲醇/水溶液混合均匀; ┅┅强力振荡 3 分钟; ┅┅5000g 离心 10min; ┅┅取 400μl 下层清液,加入 600μl 样品稀释液进行稀 释,充分混匀; ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 (三)食用油(稀释倍数:10) ┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 4.0ml 石油醚混合均匀; ┅┅再加入 4ml50%甲醇水溶液混合,振荡 1min; ┅┅静置 10min; ┅┅取 400μl 下层清液,加入 600μl 样品稀释液进行稀 释,充分混匀; ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 (四)饲料(稀释倍数:5) ┅┅取 1.0g 粉碎的样品与 4.0ml50%甲醇/水溶液混合均 匀; ┅┅强力振荡 3 分钟; ┅┅5000g 离心 10min; ┅┅取上层清液 2.0ml,加入 2.0ml 三氯甲烷用 1.5ml 样 品稀释液进行稀释; ┅┅取 1ml 下层液(三氯甲烷层),60℃氮气吹干; ┅┅加入 500ul 50%甲醇/水(1:1)溶液溶解,并加入 750ul 样品稀释液,充分混匀; ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 (五)面粉(稀释倍数:10) ┅┅取 1g 面粉样品,加入 4ml 50%甲醇/水溶液; ┅┅充分振荡 3min; ┅┅5000g 离心,10min; ┅┅取上层清液 500ul 并加入1ml 三氯甲烷,轻摇三分钟, 静置分层; ┅┅取 500ul 下层液(三氯甲烷层),60℃氮气吹干; ┅┅加入 250ul 50%甲醇/水溶液溶解,并加入 375ul 样 品稀释液,充分混匀; ┅┅取 50μl 稀释后液体待测。 (六)葡萄酒(稀释倍数:5) ┅┅取 1.0ml 葡萄酒样品,加入 4.0ml 三氯甲烷; ┅┅轻摇三分钟,静置分层; ┅┅取 1ml 下层液(三氯甲烷层),60℃氮气吹干; ┅┅加入 500ul50%甲醇/水溶液溶解,再加入 750ul 样品 稀释液,充分混匀;

黄曲霉毒素净化柱使用手册最新

黄曲霉毒素净化柱使用手册最新

黄曲霉毒素B/G免疫亲和净化柱使用手册目录1、AflaCLEAN TM黄曲霉毒素免疫亲和柱说明书2、样品处理方法3、柱后衍生技术4、实验操作注意事项5、主要技术指标和参数6、黄曲霉毒素分析实验室配置7、参考文献8、欧盟相关规定中黄曲霉毒素的限量表9、附件AflaCLEAN TM黄曲霉毒素免疫亲和柱说明书LCTech 公司的AflaCLEAN TM免疫亲和净化柱采用单克隆抗体技术,预先在净化柱壁涂布了黄曲霉毒素B和G的抗体,当提取样品液过净化柱时,黄曲霉毒素就会被吸附保留在柱子上,而其他杂质则被排除,然后再用甲醇将黄曲霉毒素从净化柱上洗脱下来进行黄曲霉毒素检测分析的前处理,适用于食品,饲料以及相关原料中黄曲霉毒素检测时,样品的净化处理,特点是适用范围广,平行性好,回收率高,重新性好,操作简单,性价比高。

一、AflaCLEAN TM黄曲霉毒素免疫亲和柱产品组成1、AflaCLEAN TM净化柱25支/盒2、批次证书和使用说明书二、实验准备1、样品处理方法:详见:“样品处理方法”2、试剂配制(1)样品提取溶剂:甲醇/水(4/1,v/v)(2)5mmol磷酸盐缓冲溶液(PBS)(pH7.2)母液配制:1)称取50.14gNa2HPO4.12H2O溶解于700ml水中。

2)称取9.66gNaH2PO4.1H2O溶解于350ml水中。

3)将上述两种溶液进行混合并加入42.5gNaCl,配制成pH7.2 5mmol 磷酸盐缓冲溶液(3)1mmol磷酸盐缓冲溶液(PBS)(pH7.2)工作液配制:取200ml 的5mmol磷酸盐缓冲溶液(pH7.2)稀释于800ml水中。

(4)磷酸盐缓冲溶液(PBS)/吐温(Tween)配制:取8ml吐温-20稀释于92mlpH7.2磷酸盐缓冲溶液中(5)HPLC 流动相配制:水/甲醇/乙腈(60/30/15,v/v)三、实验步骤1、净化柱平衡:将净化柱于室温中放置15min以上,平衡至室温。

(整理)黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书

(整理)黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书

苏微黄曲霉毒素B1免疫亲和柱使用说明书【产品用途】黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫亲和柱适合于和AFB1酶免分析试剂盒、HPLC或液质结合使用,定量检测AFB1。

用该免疫亲和柱净化样品,提高了样品的纯度。

纯化后的样品可用不同的分析方法测定。

【适应范围及产品性能】用于定性、定量检测谷物、粮油、饲料等样本中AFB1时的样本前处理。

柱吸附能力:≥50ng/支,≥100ng/支(可根据要求选择相应柱容量);回收率:75%~90%。

柱内凝胶:Protein A琼脂糖凝胶特点:载量大,单抗定向偶联,易洗脱,回收率高。

【测定原理】本产品测定的基础是抗原抗体反应,黄曲霉毒素B1(AFB1)单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的AFB1经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过AFB1免疫亲和柱,在免疫亲和柱内,AFB1与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。

最后采用甲醇洗脱AFB1,然后进行相关分析。

【产品组成】标准品(选配);25支/盒;1mL柱管/支;说明书1份;【所需材料】(不提供)(1)设备及器皿耗材:天平、粉碎机、离心机、高速均质器(18000r/min~22000 r/min);量筒、50mL玻璃漏斗、微量移液器(100μL~1000μL)、定量滤纸、玻璃微纤维滤纸(直径11cm,孔径1.5μm)、20mL玻璃注射器等。

(2)试剂:甲醇(色谱级)、pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)、pH7.0磷酸盐缓冲液(PBS)、吐温-20、蒸馏水或去离子水。

【样品制备及净化】(1)谷物、花生及其制品----准确称取25.0g粉碎的样品,加入5.0g氯化钠,----与125.0mL甲醇-水溶液(7+3)混合,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min,----用定量滤纸过滤,----准确移取15mL滤液并加入30mL水稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。

----准确移取15.0mL混合液进行过亲和柱。

黄曲霉毒素M1免疫亲和柱操作手册-1

黄曲霉毒素M1免疫亲和柱操作手册-1

黄曲霉毒素M1免疫亲和柱工作手册一、溶剂的配置和准备:1.蒸馏水/去离子水(配合液相使用);2.色谱级甲醇、乙腈;3.磷酸盐缓冲液1L配方pH7.4:磷酸二氢钾(KH2PO4)0.27g,磷酸氢二钠(Na2HPO4)1.42g,氯化钠(NaCl)8g,氯化钾(KCl)0.2g,加去离子水约800mL充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。

4.黄曲霉毒素M1标准品(货号:TSL-143,浓度为0.5 μg/ml)5.氢氧化钠、浓盐酸(用于调节pH)二、其他耗材及设备的准备1.滤纸;2.免疫亲和柱架或固定支座;3.注射器(建议玻璃材质,易于清洗,10 ml)或5 ml或10 ml枪头;4.1升容积的搅拌器;5.离心机;6.量筒,漏斗,移液管,烧杯,带螺盖的瓶子等玻璃器具;三、标准曲线的配制:黄曲霉毒素M1总量液态标准品:500 ng/ml 100%乙腈溶液。

取100μl 500 ng / ml溶液加入甲醇:乙腈:水溶液20:30:50 v/v/v至500μl,得到100ng/ml 的溶液。

绘制一条3点的校准曲线:取50 μl 100 ng / ml溶液加入甲醇:乙腈:水溶液20:30:50 v/v/v至2.5 ml(=2 ng / ml)。

取1 ml 2 ng / ml溶液加入甲醇:乙腈:水溶液20:30:50 v/v/v至2 ml(=1 ng / ml)。

取1 ml 1 ng / ml溶液加入甲醇:乙腈:水溶液20:30:50 v/v/v至2 ml(=0.5 ng / ml)。

每种取100 μl注射进HPLC系统。

四、样品回收率的测定--针对奶粉添加浓度为0.5 ppb的样品:取50 μl浓度为100 ng/ml的标准品溶液,加入到10 g阴性奶粉样品中,(此样品最后上HPLC 的浓度相当于1 ng/ml)--针对奶添加浓度为0.1ppb的样品:取50 μl浓度为100 ng/ml的标准品溶液,加入到50ml阴性奶样品中,(此样品最后上HPLC 的浓度相当于2 ng/ml)五、样品处理A)牛奶-- 加热牛奶至35 - 37 ℃,用Waterman 4号滤纸或者Waterman 113号滤纸过滤或者在4000 rpm下离心15分钟。

黄曲霉毒素 M1M1 免疫层析亲和柱产品说明书 M1M1 免疫层析亲和柱 产品说明书

黄曲霉毒素 M1M1 免疫层析亲和柱产品说明书 M1M1 免疫层析亲和柱 产品说明书

PriboFast IAC 中文说明书产品产品用途用途用途::免疫亲和层析柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素M1,从而对黄曲霉毒素M1样品起到非常针对性的纯化作用,过柱净化后的样品液可直接用于液相进行黄曲霉毒素M1含量的检测。

亲和层析柱与HPLC 配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。

产品产品概述概述概述::黄曲霉毒素(AFT )是一类真菌(如黄曲霉和寄生曲霉)的有毒的代谢产物,它们具有很强的致癌性,是一种毒性极强的剧毒物质.黄曲霉毒素的危害性在于对人及动物肝脏组织有破坏作用,严重时,可导致肝癌甚至死亡, 黄曲霉毒素M1是黄曲霉毒素B1的羟基化代谢产物,也是一种强致癌物质。

牛乳及其制品是易受到黄曲霉毒素M1污染的食品之一。

反应反应原理原理原理::测定的基础是抗原抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、过滤后,缓慢的通过黄曲霉毒素M1免疫亲和层析柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。

用甲醇洗脱黄曲霉毒素M1,然后注入到分析仪器中用于检测。

适用范围及性能 适用于定性、定量检测牛奶,奶粉,发酵乳,干酪,奶油等样品中黄曲霉毒素M1的样品前处理。

柱容量柱容量≥≥200ng 200ng 回收率回收率≥≥90% 产品产品包装组成包装组成包装组成::每一个盒中包括25支/50支黄曲霉毒素M1免疫亲和层析柱及1份说明书。

需要的材料但盒中不提供需要的材料但盒中不提供:: 设备 器皿耗材 试剂 HPLC 泵流操作架 空气泵 天平 匀质器 高速粉碎机 超声波发生器 100ml/10mL 量筒 50ml 漏斗 玻璃针筒 样品瓶 100ml/1L 容量瓶 移液器或移液管 50ml 离心管 定量滤纸 玻璃纤维滤纸 圆孔筛 氯化钠(分析纯) 氢氧化钠浓盐酸(分析纯)色谱甲醇色谱乙腈蒸馏水或去离子水 黄曲霉毒M1标准品 石油醚注意事项注意事项:: ----黄曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。

afb1试盒说明书

afb1试盒说明书

1ELISA kit for quantitative detection of aflatoxin B1一、概要黄曲霉毒素主要是两种霉菌黄曲霉及 A.paraticus的二级代谢物。

这些霉菌在湿热的环境和耕作土地上污染的植物产生。

黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)属于自然界最强烈的致癌物质之一,一般产生于花生、玉米、巴西坚果和棉花种子等中。

本试剂盒利用酶联免疫吸附测定法(ELISA)对各种谷物、饲料及其他食品中的AFB1含量进行快速、定量检测。

二、原理本试剂盒是利用直接竞争酶联免疫吸附微孔模式进行检测,灵敏度可达1µg/kg(ppb)。

样品或标准品中游离的黄曲霉毒素B1与酶标抗原竞争结合包被在微孔中的抗体上的结合位点,经洗板洗去多余的酶标抗原与黄曲霉毒素B1后加入显色剂,其与酶标物作用而成蓝色,加入反应终止液后颜色由蓝色转变为黄色,黄色越深则表明黄曲霉毒素B1越少,用酶标仪在450 nm处测定光吸收值可准确定量检测样品中的黄曲霉毒素B1的污染水平。

三、试剂盒构成1、反应板支架…………………………………………………………………………………1块2、黄曲霉毒素B1抗体包被反应板……………………………………………………96孔3、黄曲霉毒素B1标准品溶液(0 ppb,1 ppb,5 ppb,10 ppb,20 ppb,40 ppb)……………1套4、酶标记物(稀释11X使用)…………………………………………………………………1瓶5、酶稀释液………………………………………………………………………………1瓶6、显色剂……………………………………………………………………………………1瓶7、终止液………………………………………………………………………………………1瓶8、浓缩洗涤液(20 X)…………………………………………………………………1瓶四、注意事项1、试剂盒请置放于2-8℃条件下保存,使用过程中不要让微孔干燥,使用后立即将试剂放回至2-8℃条件下冷藏。

黄曲霉毒素总量免疫亲和柱说明书 (四合一)

黄曲霉毒素总量免疫亲和柱说明书 (四合一)

苏微黄曲霉毒素总量(B1、B2、G1、G2)免疫亲和柱说明书1、用途:免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2, 从而对黄曲霉毒素样品起到特异性的纯化作用, 过柱净化后的样品液可直接用于高效液相色谱进行黄曲霉毒素含量的检测。

亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的, 以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。

2、产品性能柱吸附能力:≥100ng/支;回收率:75%~90%。

3、测定原理:测定的基础是抗原抗体反应,抗体连接在柱体内,样品中的黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉毒素总量免疫亲和柱,免疫亲和柱中抗体与毒素结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。

用乙腈洗脱黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2,然后注入到分析仪器中用于检测。

4、包装组成:标准品(选配);20支/盒,3mL柱管/支说明书1份;5、需要的材料但盒中不提供:5.1设备----HPLC----气控操作架----空气泵----天平----组织匀浆机(或摇床)----粉碎机----分样筛----100mL/10mL量筒----50mL漏斗----针筒----快速定性滤纸----微纤维滤纸(Whatman 934-AH)----样品瓶----转接头(配3ml免疫亲和柱使用)5.2 试剂----甲醇,氯化钠,乙腈,蒸馏或去离子水。

6、注意事项:----黄曲霉毒素可致癌,应戴手套操作。

----使用过的容器及黄曲霉毒素溶液最好用次氯酸钠溶液(5%,V/V)浸泡过夜。

----不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。

----2~8℃储存,不得冻存。

----使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25℃)7、样品处理:方法:适用于玉米、花生或中药等样品----玉米花生或中药等样品粉碎,过2mm分样筛;----25g过筛粉碎的样品加入5g 氯化钠与125mL 60%甲醇-水溶液混匀;----高速匀浆1min(或用摇床剧烈振荡20min),用快速定性滤纸过滤;----用20mL蒸馏水稀释10mL滤液,再用微纤维滤纸过滤;----取15mL上样检测。

总黄曲霉毒素免疫亲和柱

总黄曲霉毒素免疫亲和柱

总黄曲霉毒素免疫亲和柱总黄曲霉毒素(Aflatoxin B1,AFB1)是一种由黄曲霉菌(Aspergillus flavus)和黄曲霉素菌(Aspergillus parasiticus)产生的一种强烈致癌的化合物。

该化合物在人类和动物体内会引起多种癌症,如肝癌、食管癌、胃癌等。

因此,检测和去除环境和食品中的总黄曲霉毒素对于保障人类健康至关重要。

为了检测和去除总黄曲霉毒素,研究人员开发了多种方法,其中之一就是使用总黄曲霉毒素免疫亲和柱。

这种免疫亲和柱是通过利用特异性抗体对总黄曲霉毒素进行捕捉,从而实现检测和去除的目的。

总黄曲霉毒素免疫亲和柱的制备过程通常包括以下步骤:首先,需要获得针对总黄曲霉毒素的特异性抗体。

这可以通过免疫小鼠(如小鼠、兔子等)或体外合成的方法获得。

然后,将抗体与固相材料(如琼脂糖、硅胶等)结合,形成免疫亲和柱。

接下来,将待测样品加入免疫亲和柱中,允许总黄曲霉毒素与抗体结合。

最后,用适当的缓冲液洗脱并收集样品,得到含有总黄曲霉毒素的纯净溶液。

总黄曲霉毒素免疫亲和柱的检测原理是基于特异性抗体与总黄曲霉毒素的亲和作用。

一旦待测样品中存在总黄曲霉毒素,它们会与免疫亲和柱中的抗体结合。

通过洗脱的步骤,可以将结合的总黄曲霉毒素从样品中分离出来,从而完成检测过程。

除了检测相关,总黄曲霉毒素免疫亲和柱还可以用于去除总黄曲霉毒素。

已经结合总黄曲霉毒素的免疫亲和柱可以用于净化食品和饲料,去除其中的毒素。

这是因为抗体与毒素之间的结合力较强,可以有效地捕捉和去除总黄曲霉毒素。

总的来说,总黄曲霉毒素免疫亲和柱是一种有效的工具,可以用于检测和去除环境和食品中的总黄曲霉毒素。

通过结合特异性抗体和固相材料,免疫亲和柱可以捕捉和去除总黄曲霉毒素。

然而,需要注意的是,免疫亲和柱的制备过程较为繁琐且耗时,因此需要进行全面的实验准备和操作。

对于总黄曲霉毒素的免疫亲和柱的研究和应用仍在不断发展中。

随着技术的不断进步,相信将有更多的改进和创新,提高总黄曲霉毒素的检测和去除效果,进一步保障人类的健康安全。

免疫亲和柱 柱容量 afb1

免疫亲和柱 柱容量 afb1

免疫亲和柱柱容量 afb1免疫亲和柱(Immunaffinity Column)是一种常用的柱层析技术,用于富集和纯化特定的分子或化合物。

本文将以AFB1(黄曲霉毒素B1)为例,介绍免疫亲和柱的原理、应用和优势。

AFB1是一种由黄曲霉菌产生的黄曲霉毒素,对人和动物具有较高的毒性。

由于其对人体健康的潜在危害,监测和分析AFB1在食品和环境样品中的含量变得尤为重要。

传统的分析方法包括高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC),但这些方法需要复杂的前处理步骤和昂贵的设备,且分离效果有限。

而免疫亲和柱作为一种快速、高效的富集和纯化技术,被广泛应用于黄曲霉毒素的检测和分析。

免疫亲和柱的原理是利用特定的抗体与目标分子之间的高度选择性结合。

在免疫亲和柱中,固定化的抗体通过特异性结合与目标分子相互作用,从而将目标分子从复杂的样品基质中富集出来。

免疫亲和柱的填料通常是以高纯度的抗体固定在固定相上,形成高效的亲和层析柱。

使用免疫亲和柱进行AFB1的富集和纯化,通常包括以下步骤:首先,将样品与免疫亲和柱进行接触,使目标分子与柱上的抗体结合。

随后,通过洗脱步骤将非目标分子洗去,使得目标分子得以富集。

最后,从柱上洗脱目标分子,用于进一步的分析和检测。

免疫亲和柱在AFB1的分析中具有许多优势。

首先,免疫亲和柱具有高度的选择性和特异性,可以有效地富集和纯化目标分子,减少样品基质的干扰。

其次,免疫亲和柱具有较高的富集效率和灵敏度,可以在短时间内获得较低浓度的目标分子。

此外,免疫亲和柱操作简便,无需复杂的前处理步骤,适用于不同类型的样品。

然而,免疫亲和柱也存在一些局限性。

首先,柱容量是免疫亲和柱的重要参数之一,它决定了柱富集目标分子的能力。

较低的柱容量可能导致目标分子无法完全富集,影响后续的分析结果。

其次,免疫亲和柱的使用寿命有限,经过多次使用后,抗体的活性和选择性可能会下降,影响分析结果的准确性。

总结而言,免疫亲和柱是一种重要的分离和纯化技术,在AFB1等目标分子的富集和纯化中具有广泛的应用前景。

中检食安:黄曲霉毒素B1B2G1G2M1M2免疫亲和柱

中检食安:黄曲霉毒素B1B2G1G2M1M2免疫亲和柱

黄曲霉毒素B1/B2/G1/G2/M1/M2免疫亲和柱【用途】免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的黄曲霉毒素,从而对样品起到非常针对性的净化作用,过柱净化后的样品液可直接用于HPLC 分析。

亲和柱与HPLC 配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。

本亲和柱可用于样品中黄曲霉毒素(B1、B2、G1、G2、M1、M2)的样品提取、净化。

【原理】测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品中的黄曲霉毒素经过提取、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。

用甲醇洗脱黄曲霉毒素,然后注入到分析仪器中用于检测。

【柱容量及规格】柱容量:AFB1------300ngAFB2------300ngAFG1------300ngAFG2------300ngAFM1------100ngAFM2------100ng规格:1ml------25/50支装3ml------25/50支装【包装组成】每一个盒中包括各种规格黄曲霉毒素免疫亲和柱及1 份说明书。

【设备及耗材】(需要的材料但包装中不提供)----HPLC----衍生装置:如光化学衍生器、电化学衍生器、碘衍生装置----气控操作架----空气泵----天平----高速均质器(最高转速≥10,000r/min)或摇床----粉碎机----高速冷冻离心机(乳品检测用,可设置10℃,7,500r/min)----恒温培养箱或水浴锅(乳品检测用,可设置35℃~37℃)----分样筛:1mm 孔径----量筒:100mL/10mL----漏斗:50mL----注射器:10 mL/20mL----移液器或移液管:1mL----均质杯(或250mL 具塞锥型瓶)----样品瓶----快速定性滤纸----离心管:50ml(乳品检测用)----微纤维滤纸(Whatman 934-AH【贮藏条件及有效期】贮藏条件:2~8℃。

Casco黄曲霉B1免疫亲和柱

Casco黄曲霉B1免疫亲和柱

黄曲霉 B1 亲和柱Casco FastSep AFB1货 :15001简介Casco FastSep AFB1 亲和柱 用于基质复杂、 量要求 的样品中黄曲霉 B1检测的净 。

可 进行TLC、HPLC、GC、LC-MS/MS、EIA的 量分析, 用于谷物, 品,饲料等的样品净 过程。

柱 量 约2稀ng 黄曲霉 B1储存 件2-8℃ 保存,不可 冻1 用途用于实验 净 样品提 物 进行进一 分析2 要黄曲霉 是谷类 其他农作物常见的霉变菌,是由黄曲霉和 生曲霉产生的一类 分子 合物。

污染 、油料作物的 子,其中 生、玉米 易 污染,另 在小麦、 粱、巴 坚果、豆类和大米等重要 中也经常 检 。

黄曲霉 热稳 性 ,一旦产生便难 除 。

对动物、 物和 生物 有 的 性, 力 ,还 起 变和导 畸形。

黄曲霉 作为肝 的三大诱 一,也是胃 ,肠 等 的主要原 ,对人类的健 构成 大 胁。

界各国对 品,饲料中的黄曲霉 都有严格的 量标 。

3 原理测 的基础是 原 体 应, 亲和柱中 有和黄曲霉 B1 体结合在一起的凝胶,样品中的黄曲霉 B1经过提 、过滤、稀释,然后缓慢的通过黄曲霉B1 亲和层析柱,在 亲和柱 黄曲霉 B1 体结合,其他的 关物质不 结合而 通过 亲和柱, 后洗涤 亲和柱 全除 有 结合的其他 关物质。

后加 甲 黄曲霉 B1释 ,然后注 分析仪 中进行进一 的检测。

4 提供的试剂20支/盒 亲和柱,规格:3ml说明书5 操作者应注 事项黄曲霉 B1对人体有 ,应戴手 操作。

使用过的玻 黄曲霉 好用5%浓 的次 钠 浸 过 。

不要使用过了有 日期的 亲和柱。

亲和柱于2-8℃ 保存,不可 冻使用前, 亲和层析柱需回 温(22~25℃)6 操作 程(符合GB/T 18979-2003国标 )粉 好的样品过20目筛并在 样前彻 合,不 分析的样品应 在冰箱中储存。

20g粉 样品 4g 钠,加 100ml 70%甲 /水。

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苏微黄曲霉毒素B1免疫亲和柱
使用说明书
【产品用途】
黄曲霉毒素B1(AFB1)免疫亲和柱适合于和AFB1酶免分析试剂盒、HPLC或液质结合使用,定量检测AFB1。

用该免疫亲和柱净化样品,提高了样品的纯度。

纯化后的样品可用不同的分析方法测定。

【适应范围及产品性能】
用于定性、定量检测谷物、粮油、饲料等样本中AFB1时的样本前处理。

柱吸附能力:≥50ng/支,≥100ng/支(可根据要求选择相应柱容量);
回收率:75%~90%。

柱内凝胶:Protein A琼脂糖凝胶
特点:载量大,单抗定向偶联,易洗脱,回收率高。

【测定原理】
本产品测定的基础是抗原抗体反应,黄曲霉毒素B1(AFB1)单克隆抗体连接在柱内凝胶介质上,样品中的AFB1经过提取、过滤、稀释,然后将样品提取液缓慢通过AFB1免疫亲和柱,在免疫亲和柱内,AFB1与抗体结合,洗涤液通过免疫亲和柱除去未被结合的杂质。

最后采用甲醇洗脱AFB1,然后进行相关分析。

【产品组成】
标准品(选配);
25支/盒;1mL柱管/支;
说明书1份;
【所需材料】(不提供)
(1)设备及器皿耗材:天平、粉碎机、离心机、高速均质器(18000r/min~22000 r/min);量筒、50mL玻璃漏斗、微量移液器(100μL~1000μL)、定量滤纸、玻璃微纤维滤纸(直径11cm,孔径1.5μm)、20mL玻璃注射器等。

(2)试剂:甲醇(色谱级)、pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)、pH7.0磷酸盐缓冲液(PBS)、吐温-20、蒸馏水或去离子水。

【样品制备及净化】
(1)谷物、花生及其制品
----准确称取25.0g粉碎的样品,加入5.0g氯化钠,----与125.0mL甲醇-水溶液(7+3)混合,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min,
----用定量滤纸过滤,
----准确移取15mL滤液并加入30mL水稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。

----准确移取15.0mL混合液进行过亲和柱。

(2)酱油
----准确称取50.0g样品,加入2.5g氯化钠,
----加入甲醇-水溶液(8+2)至100mL,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min,
----用定量滤纸过滤,
----准确移取10.0mL滤液并加入40.0mL水稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。

----将滤液调至PH为中性。

----准确移取10.0mL混合液进行过亲和柱。

(3)醋
----准确称取5.0g样品,加入1.0g氯化钠,
----用pH7.0的磷酸盐缓冲液稀释至25.0mL,混匀,
----用定量滤纸过滤,
----加10.0mL滤液加入10.0mL pH7.0的磷酸盐缓冲液,混匀,用玻璃微纤维滤纸过滤至滤液澄清,备用。

----将滤液调至PH为中性。

----准确移取10.0mL混合液进行过亲和柱。

(4)植物油脂
----准确称取25.0g样品,加入5.0g氯化钠,
----加入甲醇-水(7+3)至125.0mL,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min,
----用定量滤纸过滤,
----准确移取15.0mL滤液加入30.0mL水稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。

----准确移取15.0mL混合液进行过亲和柱。

(5)草药、香料及茶叶
----准确称取25.0g粉碎的样品,加入5.0g氯化钠,
----与125.0mL甲醇-水溶液(7+3)混合,以均质器高速搅拌提取2min或振荡提取30min,
----用定量滤纸过滤,
----准确移取10.0mL滤液并加入30.0mL水稀释,用玻璃微纤维滤纸过滤,至滤液澄清,备用。

----准确移取20.0mL混合液进行过亲和柱。

【亲和柱净化】
注意:整个纯化过程尽量不要让柱子干燥!
----将柱子上方堵头取出后斜剪断,然后再插回柱子上;
----将20mL注射器连接于免疫亲和柱上部,用5~10mL pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS)或者去离子水平衡柱子,以1滴/秒的速度通过免疫亲和柱,样品提取液必须缓慢地连续地通过柱子(用注射器加以正压或用真空泵施加负压,也可以使用泵流操作架配合免疫亲和柱);
----准确移取混匀提取液注入注射器中,调节针筒压力使其以1滴/2秒的速度缓慢通过免疫亲和柱;
----先用10mL 0.1%的吐温20-PBS溶液清洗,再用10mL 10%甲醇-水清洗,(主要针对酱油、醋、饲料等颜色较深的样品,其他可略去);
----用20mL 水冲洗柱子,弃去流出液,流速2滴/秒,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体;
----准确加入1.0mL色谱级甲醇洗脱,流速1滴/2~3秒,直至2~3mL空气通过柱体,保证柱子内没有残余液体。

收集全部洗脱液待测。

【检测方法】
(1)AFB1酶免试剂盒(苏微)检测
----用试剂盒中的样品稀释液以1:10稀释洗脱液(1份洗脱液+9份样品稀释液),取50μL进行测定。

注意:如果AFB1污染较严重,需要进一步稀释样品,洗脱液最终必须稀释到10%甲醇,详见试剂盒说明书。

(2)HPLC法检测
----可参考GB/T 18979-2003。

【注意事项】
(1)黄曲霉毒素对人体有害,应戴手套操作。

凡接触到标样的玻璃器皿都要用5%次氯酸钠浸泡过夜。

(2)不要使用过有效期的免疫亲和柱。

(3)免疫亲和柱应在2~8℃保存。

不要冷冻。

(5)按以上的提取过程,样品通过柱子的实际体积等于1g 原物质,分析方法的检测限可以通过改变进柱的样品体积而改变。

(6)称取的样品量以及提取液的体积可根据实际情况按比例调整,建议最低不少于5g样。

(7)黄曲霉毒素对光线敏感,因此样品及其提取液应当低温(2~8℃)、避光保存。

【保存期】
有效期为12个月。

生产日期见包装盒。

【缓冲溶液配制】
pH7.4磷酸盐缓冲液(PBS):
3g Na2HPO4.12H2O,0.25g NaH2PO4.2H2O,8.7g NaCl,用水定容至1L。

pH7.0磷酸盐缓冲液(PBS):
25mL 0.2mol/L磷酸二氢钾溶液与29.1mL 0.1 0.2mol/L的氢氧化钠溶液混匀后,用水定容至100mL。

0.1%的吐温20-PBS溶液:
取pH7.4的PBS溶液1L,加入100uL吐温。

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