血涂片制作
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至25毫升甲醇洗净钵中甘油染液为止，塞紧 瓶塞，充分摇匀，置于55~60℃水浴中或温箱 内24小时或室温内3~5天，多加摇动，即成原 液。吉氏染液是目前较优良的血膜染剂，即
• 取血方法 采血部位一般人为耳垂，指头，通常在耳垂取血（现场 取血建议用大头针采血，一人一针，避免血传疾病）。先用75%酒 精棉球消毒取血部位（冬季用手捻动耳垂使其充血后再行消毒）， 待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方，右手持消毒针迅速 刺入耳垂下端1~2毫米，不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向 挤压出血。
制作血膜的注意事项
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、磨损。制作血 膜的载玻片必须完全清洁而毫无油渍或污垢。制 片时，手指只能持载片的边缘，不能接触玻片表 面，以免油污使薄血膜产生空白区以及厚血膜脱 落。作为推片的玻片边缘一定要平滑，才能使推 出的血膜均匀一致。
制作血膜的注意事项
• 2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜未干前勿使标本盒 倾斜，以免血膜倾向一侧，造成血膜厚薄不均，厚处不易溶血 和着色而影响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍蝇、 蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标本盒并盖严，新的木 制标本盒需敞开放置一段时间，让木醇挥发后才能使用，以免 厚血膜红蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。
•一、血膜制作 •二、染色
血片制作染色
血膜的制作
用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄血 膜；一种是血液涂成圆盘，称厚血膜。薄血膜上的血细胞要求平辅
在玻片上面。
发热病人血片
标本片
血膜的制作（取血时间）
• 取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普查时可不考虑取血时机。但 在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环状体期；发作后数小时， 环状体发育到滋养体期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断的有利时 机；36~48小时，可检出裂殖体；发作一、二次后，配子体出现较多。
• 恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小时内取血，初发患者退热后 常查不到原虫。
血膜的制作（取血操作）
制作血膜的注意事项
• 3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或火烤，干透后才能用甲 醇固定薄血膜。夏天标本尽可能24~48小时内固定染色；冬天也 不能超过72小时。放置时间越久，厚血膜越不易脱血，染色效 果也差。若不能及时染色，膜血膜宜先用甲醇固定（1~3分钟） 然后用过滤清水对厚血膜溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待 以后染色。
涂2个厚血膜1个薄血膜，以
防血膜源自文库落而影响检查；
疟疾调查时，每张玻片
可涂制2~3人血膜。
标标签签
标本片
发热病人血片
血膜的制作
• 血膜编号 血膜制成后，立即用特种蜡笔或水笔于玻 片反面上写上受检者的号码，以防差错，待薄血膜 干后再用铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号和受 检者的个人编号，依次顺序插入标本盒内。
伊红在水溶液内遇到美兰或天青，即可互相化合而产生沈淀从而失去染色力，因此， 吉氏母液绝对不能进水。
血片的染色 （二）吉氏染液母液配置方法
取吉氏粉0.5克置于研钵中，加少量甘油充 分研磨，再加再磨，至25毫升加完为止，倒 入60或100毫升带有玻塞的有色玻瓶中。在研 钵中加少量甲醇，洗去甘油浓液混入瓶内，
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性水溶性盐酸盐，当它们各 自溶化水中时，就离解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸性的 阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、嗜伊红白血球颗粒等即可结 合成不易溶于水的沈淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰离子， 美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸 性蛋白质结合染成兰色。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞的核着色，必须由天青作 为媒介（染媒）才能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又具有染 媒作用，使原虫核和白细胞核等原来只能染上极淡兰色的结构染上显 著的酸性染剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显著的既兰又红 的紫兰色，而较小或菲薄的原虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红 色。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
注意：蛋白质是二性电解质，当其处于较等电点为酸的溶液中时，便呈硷的作用，即与 酸或阴离子结合，这就说明为何在染液偏酸时，伊红的着色力强，使红细胞着色鲜艳 而淋巴细胞和原虫的胞浆着色不著；反之，蛋白质在偏硷的溶液中呈酸的作用而中和 硷基，也就说明为何染液偏硷时，红细胞和嗜伊红白细胞的颗粒等被染成紫兰色。
取血量及涂片法（涂片操作）
• 薄血膜 取洁净的载玻片2张，1张平置 在桌上，以左手拇指，食指夹持载玻片 两端（手指切勿接触玻片表面），用另 一张边缘平滑（最好为磨口边缘）的载 玻片做推片，用推片一端边缘的中点从 取血部分取约1微升的血量（相当于1/4 火柴头大小），使血滴与平置的载玻片 接触，并形成25~30度夹角，待血液向 两侧扩展约2厘米长度时，均匀而迅速 地轻轻向左推出（约2.5厘米长）。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称很多，但都是从罗门诺夫 斯基氏创造的染液变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液两大类， 前者包括罗氏、西氏（Simon)、J.S.B氏染液等，后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染液中的主要染剂都包含美兰、 伊红和由美兰氧化所成的天青，所以称多色性染剂。
（涂片操作）
厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约4微升血量（相当于火柴头大 小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转2~4 圈，涂成直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜，血膜厚薄均匀，过厚易于脱 落，过薄达不到检出率的要求。
血膜的制作（涂片操作）
• 涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜涂在一张载片上。方法是将 载片分为6等分，第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3格中央， 薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。作为标本的血片每张玻片涂厚、薄 血膜各1个；门诊和发热病人血片每片1人，
• 取血方法 采血部位一般人为耳垂，指头，通常在耳垂取血（现场 取血建议用大头针采血，一人一针，避免血传疾病）。先用75%酒 精棉球消毒取血部位（冬季用手捻动耳垂使其充血后再行消毒）， 待酒精干后，用左手拇指和食指紧捏耳垂上方，右手持消毒针迅速 刺入耳垂下端1~2毫米，不宜过深或过浅。然后用右手中指轻轻向 挤压出血。
制作血膜的注意事项
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、磨损。制作血 膜的载玻片必须完全清洁而毫无油渍或污垢。制 片时，手指只能持载片的边缘，不能接触玻片表 面，以免油污使薄血膜产生空白区以及厚血膜脱 落。作为推片的玻片边缘一定要平滑，才能使推 出的血膜均匀一致。
制作血膜的注意事项
• 2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜未干前勿使标本盒 倾斜，以免血膜倾向一侧，造成血膜厚薄不均，厚处不易溶血 和着色而影响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍蝇、 蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标本盒并盖严，新的木 制标本盒需敞开放置一段时间，让木醇挥发后才能使用，以免 厚血膜红蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。
•一、血膜制作 •二、染色
血片制作染色
血膜的制作
用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂呈薄膜状，称薄血 膜；一种是血液涂成圆盘，称厚血膜。薄血膜上的血细胞要求平辅
在玻片上面。
发热病人血片
标本片
血膜的制作（取血时间）
• 取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普查时可不考虑取血时机。但 在诊断或需要某期疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环状体期；发作后数小时， 环状体发育到滋养体期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断的有利时 机；36~48小时，可检出裂殖体；发作一、二次后，配子体出现较多。
• 恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小时内取血，初发患者退热后 常查不到原虫。
血膜的制作（取血操作）
制作血膜的注意事项
• 3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或火烤，干透后才能用甲 醇固定薄血膜。夏天标本尽可能24~48小时内固定染色；冬天也 不能超过72小时。放置时间越久，厚血膜越不易脱血，染色效 果也差。若不能及时染色，膜血膜宜先用甲醇固定（1~3分钟） 然后用过滤清水对厚血膜溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待 以后染色。
涂2个厚血膜1个薄血膜，以
防血膜源自文库落而影响检查；
疟疾调查时，每张玻片
可涂制2~3人血膜。
标标签签
标本片
发热病人血片
血膜的制作
• 血膜编号 血膜制成后，立即用特种蜡笔或水笔于玻 片反面上写上受检者的号码，以防差错，待薄血膜 干后再用铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号和受 检者的个人编号，依次顺序插入标本盒内。
伊红在水溶液内遇到美兰或天青，即可互相化合而产生沈淀从而失去染色力，因此， 吉氏母液绝对不能进水。
血片的染色 （二）吉氏染液母液配置方法
取吉氏粉0.5克置于研钵中，加少量甘油充 分研磨，再加再磨，至25毫升加完为止，倒 入60或100毫升带有玻塞的有色玻瓶中。在研 钵中加少量甲醇，洗去甘油浓液混入瓶内，
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性水溶性盐酸盐，当它们各 自溶化水中时，就离解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸性的 阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、嗜伊红白血球颗粒等即可结 合成不易溶于水的沈淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰离子， 美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸 性蛋白质结合染成兰色。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞的核着色，必须由天青作 为媒介（染媒）才能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又具有染 媒作用，使原虫核和白细胞核等原来只能染上极淡兰色的结构染上显 著的酸性染剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显著的既兰又红 的紫兰色，而较小或菲薄的原虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红 色。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
注意：蛋白质是二性电解质，当其处于较等电点为酸的溶液中时，便呈硷的作用，即与 酸或阴离子结合，这就说明为何在染液偏酸时，伊红的着色力强，使红细胞着色鲜艳 而淋巴细胞和原虫的胞浆着色不著；反之，蛋白质在偏硷的溶液中呈酸的作用而中和 硷基，也就说明为何染液偏硷时，红细胞和嗜伊红白细胞的颗粒等被染成紫兰色。
取血量及涂片法（涂片操作）
• 薄血膜 取洁净的载玻片2张，1张平置 在桌上，以左手拇指，食指夹持载玻片 两端（手指切勿接触玻片表面），用另 一张边缘平滑（最好为磨口边缘）的载 玻片做推片，用推片一端边缘的中点从 取血部分取约1微升的血量（相当于1/4 火柴头大小），使血滴与平置的载玻片 接触，并形成25~30度夹角，待血液向 两侧扩展约2厘米长度时，均匀而迅速 地轻轻向左推出（约2.5厘米长）。
血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称很多，但都是从罗门诺夫 斯基氏创造的染液变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液两大类， 前者包括罗氏、西氏（Simon)、J.S.B氏染液等，后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染液中的主要染剂都包含美兰、 伊红和由美兰氧化所成的天青，所以称多色性染剂。
（涂片操作）
厚血膜 用推片的一角，从取血部位刮取约4微升血量（相当于火柴头大 小），使血滴与平置的载玻片接触，再由里向外一个方向旋转，转2~4 圈，涂成直径0.8~1厘米大小圆形厚血膜，血膜厚薄均匀，过厚易于脱 落，过薄达不到检出率的要求。
血膜的制作（涂片操作）
• 涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜涂在一张载片上。方法是将 载片分为6等分，第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3格中央， 薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。作为标本的血片每张玻片涂厚、薄 血膜各1个；门诊和发热病人血片每片1人，