新冠病毒核酸检测流程图

新型冠状病毒2019-nCoV核酸检测（圣湘试剂）流程

一、试剂配制：

根据待测样本数量+ 2人份（空白对照和阳性对照）配制试剂：（2019-nCoV-PCR反应液26μl/人份+2019-nCoV-PCR-酶混合液4μl/人），充分混匀成PCR混合液，每一反应管分装30μl配制好的PCR混合液。

二、核酸提取：

1、取出样本释放剂，待平衡至室温后，混匀待用；

2、取出样本后混匀→ 取200μl待测样本于1.5ml离心管中→ 3000rpm离心30s → 另取一新的小EP管中加入30μl样本释放液

→ 分别加入离心后的样本上清30μl → 震荡混匀→ 静置10min → 瞬时离心（样本上清备用）

三、加样：

30μl配制好的PCR混合液+ 20μl样本核酸（空白对照、待测样本、阳性对照）

四、PCR扩增：

50℃30min → 95℃1min →（95℃15s ; 60℃30s）x 45个循环→ 25℃10s