分子遗传学7 原核基因表达调控

合集下载

分子生物学第七章原核生物基因表达调控

分子生物学第七章原核生物基因表达调控
基因表达调控对于生物体的正常生长、发育、代谢和应激反应等 过程至关重要,是生物体适应环境变化和维持内环境稳态的重要 机制。
原核生物基因表达调控的特点
01
原核生物基因表达调控通常由特 定的转录因子、RNA聚合酶以及 其他调控蛋白介导,通过与DNA 的结合或解离来调节基因转录。
02
原核生物基因表达调控具有快速 响应环境变化的特点,能够在短 时间内调整基因表达模式,以适 应外界刺激和压力。
翻译后加工的调控
翻译后加工的调控
在翻译后加工阶段,新合成的蛋白质经过一系列修饰和加工,最终成为具有生物学活性的蛋白质。原 核生物通过控制翻译后加工酶的合成和活性来调控翻译后加工过程。此外,原核生物还可以通过控制 蛋白质的稳定性来影响其功能和表达水平。
总结
翻译后加工是基因表达调控的重要环节,原核生物通过控制翻译后加工酶的合成和活性,以及蛋白质 的稳定性来精细调控基因表达。
翻译延伸的调控
翻译延伸的调控
在翻译延伸阶段,核糖体沿着mRNA移动,将氨基酸组装成蛋白质。原核生物通过控制翻译延伸因子的合成和活 性,以及核糖体的合成和组装来调控翻译延伸。此外,原核生物还可以通过控制mRNA的结构和稳定性来影响翻 译延伸。
总结
翻译延伸是基因表达调控的重要环节,原核生物通过控制翻译延伸因子的合成和活性,以及核糖体的合成和组装, 以及mRNA的结构和稳定性来精细调控基因表达。
翻译起始的调控
原核生物通过控制翻译起始来调控基因表达。在翻译起始阶段, mRNA与核糖体结合,招募翻译所需的起始因子和其他成分。原 核生物通过控制起始因子的合成和活性,以及mRNA与核糖体的 结合来调控翻译起始。
总结
翻译起始是基因表达调控的重要环节,原核生物通过控制翻译起 始因子的合成和活性,以及mRNA与核糖体的结合来精细调控基 因表达。

第七章原核生物的基因调控

第七章原核生物的基因调控

第七讲原核生物的基因调控科学家把这个从DNA到蛋白质的过程称为基因表达(gene expression),对这个过程的调节就称为基因表达调控(gene regulation或gene control)。

要了解动、植物发展发育的规律、形态布局特征和生物学功能,就必需弄清楚基因表达调控的时间和空间概念,掌握了基因表达调控的奥秘,我们手中就有了一把揭示生物学微妙的金钥匙。

基因表达调控主要暗示在以下几个方面:①转录程度上的调控(transcriptional regulation);②mRNA加工成熟程度上的调控(differential processing of RNAtranscript);③翻译程度上的调控(differential translation of mRNA).原核生物中,营养状况(nutritionalstatus)和环境因素(environmental factor)对基因表达起着举足轻重的影响。

在真核生物尤其是高等真核生物中,激素程度(hormone level)和发育阶段(developmental stage)是基因表达调控的最主要手段,营养和环境因素的影响力大为下降。

二、基因表达调控的底子道理〔一〕基因表达的多级调控基因的布局活化、转录起始、转录后加工及转运、mRNA降解、翻译及翻译后加工及蛋白质降解等均为基因表达调控的控制点。

可见,基因表达调控是在多级程度长进行的复杂事件。

此中转录起始是基因表达的底子控制点。

四个底子的调控点:〔1〕基因布局的活化。

DNA表露碱基后RNA聚合酶才能有效结合。

活化状态的基因暗示为:1.对核酸酶敏感;2.结合有非组蛋白及修饰的组蛋白;3.低甲基化。

〔2〕转录起始。

最有效的调节环节,通过DNA元件与调控蛋白彼此作用来调控基因表达。

〔3〕转录后加工及转运。

RNA编纂、剪接、转运。

〔4〕翻译及翻译后加工。

翻译程度可通过特异的蛋白因子阻断mRNA 翻译翻译后对蛋白的加工、修饰也是底子调控环节。

第六章 原核基因表达调控

第六章 原核基因表达调控

第六章 原核基因表达调控模式
-- 乳糖(+)时, 葡萄糖(+)
二.乳糖操纵子调节机制
i基因
有诱导物时
P
O
Lac Z
Lac Y 转录
lac A
阻遏蛋白 阻遏物 蛋白亚基 无活性的 阻遏蛋白
翻译 转录水平低, 没有乳糖酶的合成 β- 半乳糖苷酶 β- 半乳糖苷通透酶 β- 半乳糖苷乙酰转移酶
mRNA
诱导物
第六章 原核基因表达调控模式
一.
概述
根据细菌酶的合成对环境的反应不同,分为:
组成酶 细菌酶 诱导酶
适Байду номын сангаас酶
阻遏酶
第六章 原核基因表达调控模式
3. 原核基因表达的多级调控
四个基本调控点: 基因活化 转录水平上的调控
最有效的调节环节
一.
概述
转录起始--- DNA元件与调控蛋白相互作用调控 mRNA加工成熟水平的调控 转录后水平上的调控 翻译及翻译后水平的调控
调节基因的产物-阻遏蛋白
负控诱导 负控阻遏 正控诱导
调控机制
负转录调控 (为主) 正转录调控
正控阻遏
调节基因的产物-激活蛋白
第六章 原核基因表达调控模式
负调控 Lac O 正调控 Ara O
一.
概述

导 阻遏物 阻遏 诱导物 诱导
失活的阻遏物 失活的活性蛋白 阻遏
活化的激活蛋白 诱导物 诱导
Trp O
(1) 葡萄糖(+), 乳糖(–)时,
- 乳糖(–)时, 无别乳糖存在,阻遏蛋白与操纵子上的 O序列结合, 使操纵子处于关闭状态,三个结构基因 不表达。 - 葡萄糖(+)及cAMP浓度低时,CAP 活性低, 无 cAMP- CAP复合物形成。

原核基因表达调控上详解演示文稿

原核基因表达调控上详解演示文稿
Pol.
X Repressor
Repressor
Repressor
This lactose has
bent me
out of shape
Yipee…!
LacY
LacARPNolA.
CAP
cAMP
cAMP
CAP
第三十页,共49页。
The Lac Operon:
When Neither Lactose Nor Glucose Is Present
Hey man, I’m constitutive
Bind to me
Polymerase
Alright, I’m off to the races . . .
Come on, let me through!
Repressor
CAP
Binding
CAP
cAMP
PrRomNoAter Operator
➢阻遏物(repressor):结合于操纵子的操纵基因上阻碍RNA聚合酶 通过操纵基因而关闭操纵子的转录。 ➢激活物(activator):结合于启动子-35区上游,它与结合在启动子 上的RNA聚合酶作用,开启启动子促进操纵子的转录。
第十页,共49页。
3.正调控和负调控
➢基因在负控制的情况下可被阻遏蛋白关闭掉,当阻遏蛋白缺乏或失
HO
H
H
H
H
OH
葡萄糖
H OH
半乳糖
图 16- 乳糖分解的不同产物
第三十四页,共49页。
第三十五页,共49页。
诱导物的加入和去除对 lac mRNA的影响
未诱导:结构基因被阻遏
阻遏物 四聚体
第三十六页,共49页。

第十章原核生物基因表达的调控

第十章原核生物基因表达的调控
1. 在E.coli,不同类型的启动子需要不同类型的σ 因子
表 16-4 E.coliσ 因子识别不同保守序列的启动子 基因 分子量 70KD 32KD 24KD 54KD 28KD 功能 普遍 热休克 热休克 氮饥饿 产生鞭毛 -35 序列 TTGACA CCCTTGAA ? CTGGNA CTAAA 间隔(bp) 16~18 13~15 ? 6 15 -10 序列 TATAAT CCCGATNT ? TTGCA GCCGATAA

基本概念
1.操纵子(operon)
很多功能上相关的结构基因在染色体上串连排列,由 一个共同的控制区来操纵这些基因的转录。包含这些结构 基因和控制区的整个核苷酸序列就称为操纵子(operon)。
一个完整的操纵子主要包括启动子、操纵基因、结构 基因和终止子。
2. 阻遏物和激活物(reperssor and activator)
2. 基因表达的极性效应
•在正常情况下原核基因表达时,其转录出来的mRNA随 即进行翻译,这时整个mRNA都覆盖着核糖体, ρ因子 无法接近mRNA,而RNA聚合酶早已越过前面的基因的 依赖ρ因子的终止子,所以转录实际上并不停止,而是继 续转录后续基因。如果在某一基因的依赖于ρ的终止子之 前发生无义突变,核糖体便从无义密码子上解离下来,翻 译停止,于是ρ就可以自由进入RNA并移动,直到赶上停 留在终止子上的RNA聚合酶,结果使RNA聚合酶释放, 不能再转录下游基因。
第十章 原核生物基因 表达的调控

生物的遗传信息是以基因的形式储藏在细 胞内的DNA(或RNA)分子中的。随着个体 的发育,DNA有序地将遗传信息,通过转 录和翻译的过程转变成蛋白质,执行各种 生理生化功能,完成生命的全过程。从 DNA到蛋白质的过程,叫做基因表达 (gene expression),对这个过程的调节 就称为基因表达调控(gene regulation或 gene control)。

原核生物基因表达调控

原核生物基因表达调控

Repressor
cAMP
CAP
葡萄糖不存在,乳糖存在,阻遏蛋白失活,cAMP+CAP与CAP位点结合结合,促进基因转录
The Lac Operon: III. 葡萄糖和乳糖都存在
Repressor
RNA Pol.
CAP Bindin
g
Promoter
Operator X
LacZ
Repressor负调节与正调节协调合作
• 阻遏蛋白封闭转录时,CAP不发挥作用 • 如没有CAP加强转录,即使阻遏蛋白从操作基因上解聚仍无转录活性
3)正调控和负调控
正调控(positive control)
在没有调节蛋白质存在时基因是关闭的,加入某种调节蛋白后基因活性就被开启,这样的调控为正转录 调控。
调节基因
操纵基因
结构基因
调节蛋白
mRNA 酶蛋白
负调控(negative control)
在没有调节蛋白质存在时基因是表达的,加入这种调节蛋白质后基因表达活性便被关闭,这样的调 控负转录调控。
2)结构基因和调节基因
➢ 组成基因/管家基因(constitutive gene, housekeeping gene)是指不大受环境变动而持 续表达的一类基因。如DNA聚合酶,RNA聚合酶等代谢过程中十分必需的酶或蛋白质的基因 。 ➢调节基因(regulated gene)指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因。如:不同生 长发育时期表达的一些基因。
• 别乳糖是lac操纵子转录的活性诱导物 • 异丙基硫代半乳糖苷(isopropyl thiogalactoside:IPTG)结构上类似于别乳糖,是乳糖操纵
子非常有效的诱导物。可诱导lac操纵子表达,但不能被β-半乳糖苷酶水解。 • 这种能诱导酶合成,但不能被酶分解的分子称为安慰诱导物(gratuitous inducer)。安慰诱导

分子生物学复习7-9

分子生物学复习7-9

第七章基因的表达与调控(上)——原核基因表达调控模式(一)基本概念1.基因表达:细胞在生命过程中,把蕴藏在DNA中的遗传信息经过转录和翻译,转变成为蛋白质或功能RNA分子的过程称为基因表达。

2.基因表达调控:围绕基因表达过程中发生的各种各样的调节方式都统称为基因表达调控。

rRNA或tRNA的基因经转录和转录后加工产生成熟的rRNA或tRNA,也是rRNA或tRNA 的基因表达,因为rRNA或tRNA就具有在蛋白质翻译方面的功能。

3.组成型表达:指不大受环境变动而变化的一类基因表达。

如DNA聚合酶,RNA聚合酶等代谢过程中十分必需的酶或蛋白质的表达。

管家基因:某些基因在一个个体的几乎所有细胞中持续表达,通常被称为管家基因。

管家基因无论表达水平高低,较少受到环境因素的影响。

在基因表达研究中,常作为对照基因适应型表达:指环境的变化容易使其表达水平变动的一类基因表达。

应环境条件变化基因表达水平增高或从无到有的现象称为诱导,这类基因被称为可诱导的基因;相反,随环境条件变化而基因表达水平降低或变为不表达的现象称为阻遏,相应的基因被称为可阻遏的基因。

4.结构基因:编码蛋白质或功能性RNA的任何基因。

所编码的蛋白质主要是组成细胞和组织基本成分的结构蛋白、具有催化活性的酶和调节蛋白等。

原核生物的结构基因一般成簇排列,真核生物独立存在。

结构基因簇由单一启动子共同调控。

调节基因:参与其他基因表达调控的RNA或蛋白质的编码基因。

①调节基因编码的调节物质通过与DNA上的特定位点结合控制转录是调控的关键。

②调节物与DNA特定位点的相互作用能以正调控的方式(启动或增强基因表达活性调节靶基因,也能以负调控的方式(关闭或降低基因表达活性)调节靶基因。

操纵子:由操纵基因以及相邻的若干结构基因所组成的功能单位,其中结构基因的转录受操纵基因的控制。

(二)原核基因调控的分类和主要特点一、原核生物的基因调控特点:(1)基因调控主要发生在转录水平上,形式主要是操纵子调控.(2)有时也从DNA水平对基因表达进行调控,实质是基因重排。

原核生物基因表达调控概述

原核生物基因表达调控概述

原核生物基因表达调控概述基因表达调控是生物体内基因表达调节控制机制,使细胞中基因表达的过程在时间,空间上处于有序状态,并对环境条件的变化做出适当的反应复杂过程。

1.基因表达调控意义在生命活动中并不是所有的基因都同时表达,代谢过程中所需各种酶和蛋白质基因以及构成细胞化学成分的各种编码基因,正常情况下是经常表达的,而与生物发育过程有关的基因则需在特定的时空才表达,还有许多基因被暂时的或永久的关闭而不来表达。

2.原核基因表达调控特点原核生物基因表达调控存在于转录和翻译的起始、延伸和终止的每一步骤中。

这种调控多以操纵子为单位进行,将功能相关的基因组织在一起,同时开启或关闭基因表达即经济又有效,保证其生命活动的需要。

调控主要发生在转录水平,有正、负调控两种机制在转录水平上对基因表达的调控决定于DNA的结构,RNA 聚合酶的功能、蛋白质因子及其他小分子配基的相互作用。

细菌的转录和翻译过程几乎在同一时间内相互偶联。

细胞要控制各种蛋白质在不同时期的表达水平,有两条途径:(1)细胞控制从其DNA模板上转录其特异的mRNA的速度,这是一条经济的途径,可减少从mRNA合成蛋白质的小分子物质消耗,这是生物长期进化过程中自然选择的结果,这种控制称为转录水平调控。

(2)在mRNA合成后,控制从mRNA翻译肽链速度,包括一些与翻译有关的酶及其复合体分子缔合的装配速度等过程。

这种蛋白质合成及其基因表达的控制称为翻译水平的调控。

二.原核生物表达调控的概念(1)细菌细胞对营养的适应细菌必须能够广泛适应变化的环境条件。

这些条件包括营养、水分、溶液浓度、温度,pH等。

而这些条件须通过细胞内的各种生化反应途径,为细胞生长的繁荣提供能量和构建细胞组分所需的小分子化合物。

(2)顺式作用元件和反式作用元件基因活性的调节主要通过反式作用因子与顺式作用元件的相互作用而实现。

反式作用因子的编码基因与其识别或结合的靶核苷酸序列在同一个DNA分子上。

RNA聚合酶是典型的反式作用因子。

原核生物基因表达的调控

原核生物基因表达的调控

原核生物基因表达的调控一、名词解释1、Operon操纵子:一个或几个结构基因与一个调节基因和一个操纵基因,加上启动子构成一个操纵单元,这个单元称为操纵子。

在操纵子中,结构基因产生mRNA并作为模板合成蛋白质;而调节基因则产生一种阻遏蛋白与操纵基因相互作用;阻遏蛋白与操纵基因结合从而阻碍了结构基因转录成为mRNA;在诱导过程中,诱导物通过与阻遏蛋白相结合而阻止阻遏蛋白与操纵基因结合。

2. CAP:环腺苷酸(cAMP)受体蛋白CRP(cAMP receptor protein ),cAMP与CRP结合后所形成的复合物称激活蛋白CAP(cAMP activated protein )3.Attenuator弱化子:在操纵区与结构基因之间的一段可以终止转录作用的核苷酸序列。

4. 魔斑:当细菌生长过程中,遇到氨基酸全面缺乏时,细菌将会产生一个应急反应,停止全部基因的表达。

产生这一应急反应的信号是鸟苷四磷酸(ppGpp)和鸟苷五磷酸(pppGpp)。

PpGpp与pppGpp的作用不只是一个或几个操纵子,而是影响一大批,所以称他们是超级调控子或称为魔斑。

5. 上游启动子元件:是指对启动子的活性起到一种调节作用的DNA序列,-10区的TA TA、-35区的TGACA及增强子,弱化子等。

二、填空题1.启动子中的元件通常可以分为两种:()和()。

2. 因表达正调控系统中,加入调节蛋白后,基因表达活性被,这种调节蛋白被称为。

在负调控系统中,加入调节蛋白后,基因表达活性被,这种调节蛋白被称为。

3. 糖对细菌有双重作用;一方面();另一方面()。

所以需要一个不依赖于cAMP—CRP的启动子S2进行本底水平的永久型合成;同时需要一个依赖于cAMP—CRP的启动子S1对高水平合成进行调节。

有G时转录从()开始,无G时转录从()开始。

三、选择题1、如果在没有----- -----存在时基因是表达的,加入这种----- ----后,基因的活性被关闭,这种控制系统叫做负调控系统。

分子生物学原核生物基因表达调控ppt课件

分子生物学原核生物基因表达调控ppt课件
14
一、原核基因表达调控环节
1、转录水平上的调控
(transcriptional regulation)
2、转录后水平上的调控
(post-transcriptional regulation)
① mRNA加工成熟水平上的调控 ② 翻译水平上的调控
15
二、操纵子学说
1、操纵子模型的提出 1961年,Monod和Jacob提出 获1965年诺贝尔生理学和医学奖
54
55
③ 操纵基因是DNA上的一小段序列(仅为26bp), 是阻遏物的结合位点。
56
RNA聚合酶结合部位
阻遏物结合部位
57
操纵位点的回文序列
58
④当阻遏物与操纵基因结合时,lac mRNA的转 录起始受到抑制。
59
未诱导:结构基因被阻遏
阻遏物 四聚体
LacI P O
lacZ
lacY
lacA
32
酶合成的诱导操纵子模型
调节基因
操纵基因
结构基因
阻遏蛋白
调节基因
操纵基因
结构基因
诱导物
如果某种物质能够促使
阻遏蛋白
mRNA
细菌产生酶来分解它,
这种物质就是诱导物。
诱导物
酶蛋白
33
• 可阻遏调节:基因平时是开启的,处在产生蛋白质 或酶的工作过程中,由于一些特殊代谢物或化合物 的积累而将其关闭,阻遏了基因的表达。 例:色氨酸操纵子 合成代谢蛋白的基因
1、根据操纵子对调节蛋白(阻遏蛋白或激活蛋白) 的应答,可分为: 正转录调控 负转录调控
29
调节基因
操纵基因
结构基因
激活蛋白 阻遏蛋白
正转录调控 负转录调控

原核生物的基因表达调控

原核生物的基因表达调控

经常需要激活蛋白
经常受到阻遏
鼠伤寒沙门氏菌相变的分子机制
在转录水平的调控
转录起始阶段的调控 (1)不同σ因子的选择性使用 (2)操纵子调控模型 (3)几种重要的操纵子
转录终止阶段的调控 (1)抗终止作用 (2)弱化
不同σ因子的选择性使用
原核生物识别启动子序列的是σ因子。不同的σ 因子可识别不同的启动子序列,E. coli主要使 用σ70。在特殊的条件下,其它类型的σ因子被 表达或被激活。这些新的σ因子识别的是其它 类型的启动子,其一致序列不同于σ70所识别的 启动子,从而指导RNA pol启动一些新基因的 表达。这样的调控系统使有机体能够对在特定 条件下需要表达的多个基因进行统一的调控。
大肠杆菌半乳糖操纵子模型
乳糖操纵子三个阻遏蛋白结合位点的结构特征及其作用
乳糖操纵子的正调控
葡萄糖效应——在有葡萄糖存在时,细菌优先利用环 境中的葡萄糖,即使有诱导物乳糖的存在,乳糖操纵 子也处于被抑制的状态,直到葡萄糖被消耗完后才能 解除抑制,这时细菌才开始利用乳糖进行生长。这说 明乳糖的存在仅仅是乳糖操纵子开放的必要条件,但 还不是充要条件。
乳糖苷酶,催化很少一部分乳糖异构化为别乳糖,绝 大多数乳糖水解为半乳糖和葡萄糖;lacY基因编码半 乳糖透过酶,其功能是使环境中的β-半乳糖苷能透过 细胞壁和细胞膜进入细胞内;lacA基因编码转乙酰基 酶右。,转按录lac时Z→,lRacNYA→聚la合cA酶方首向先进与行P转lac录结,合每,次通转过录lac出O来向 的一条mRNA上都带有这3个基因。
乳糖操纵子的负调控 乳糖操纵子的正调控
β-半乳糖苷酶催化的水解和异构化反应
葡萄糖效应和乳糖诱导
乳糖对乳糖代谢酶的诱导
如果供大肠杆菌生长的培养基中没有乳糖,那么细胞 内参与乳糖分解代谢的三种酶,即β-半乳糖苷酶、乳 糖透过酶和巯基半乳糖苷转乙酰酶很少,如每个细胞 的β-半乳糖苷酶的平均含量只有0.5个~5个。可是一旦 在培养基中加入乳糖或某些乳糖的类似物,则在几分 钟内,每个细胞中的β-半乳糖苷酶分子数量骤增,可 高达5 000个,有时甚至可占细菌可溶性蛋白的 5%~ 10%。与此同时,其它两种酶的分子数也迅速提高。 由此可见,新合成的β-半乳糖苷酶、透过酶和乙酰化 酶由底物乳糖或其类似物直接诱导产生,乳糖及其相 关类似物被称为诱导物。

第六章 原核生物基因表达调控

第六章 原核生物基因表达调控

图6-7 乳糖操纵子结构模式图
第二节 原核基因表达的调控
乳糖操纵子的上游有一个独立转录的基因lacI,其编码产物LacI 可以结合在乳糖操纵子的操纵基因(lacO)上,即转录控制区,阻抑 下游结构基因的表达。因此,乳糖操纵子是一个负调控系统(图68)。其中,LacI是具有负调控作用的反式作用因子,LacI作用的靶 DNA序列lacO是顺式作用元件。
trpB(UGA处翻译终止) -UGA -GAA-AUC- UGA-UGG-AA A UG-G AAtrpA(AUG处翻译起始)
第二节 原核基因表达的调控
3.稀有密码子对翻译的影响 DNA复制时,引物酶催化一段RNA引物的合成,引物酶 由dnaG编码。rpsU-dnaG-rpoD组成一个转录单位,产生多 顺反子转录物。细胞内三个基因的终产物的浓度相差却很 大,rpsU产物浓度为4×104个/细胞,dnaG产物50个/细胞, rpoD产物2800个/细胞。菌体通过使用稀有密码子,使转 录为一条mRNA链的三个基因的表达产物量可以有很大差异。
第二节 原核基因表达的调控
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
图6-10 色氨酸操纵子的负调控
第二节 原核基因表达的调控
4.阿拉伯糖操纵子 阿拉伯糖与乳糖一样,可替代葡萄糖作为碳源物质被 菌体利用。大肠杆菌中,阿拉伯糖(Ara)代谢所需酶的 三个基因分别是:核酮糖激酶基因( araB)、L-Ara异构 酶 基 因 ( araA)、L- 核 酮 糖 - 5 - 磷 酸 差 向 异 构 酶 基 因 ( araD),组成一个基因簇,有共同的启动子 PBAD。与其 它操纵子不同的是,操纵序列位于 PBAD 上游,操纵序列左 端有另一方向转录的启动子 PC,负责调节基因araC的转录, 其产物AraC蛋白有两种活性形式,Pr 对 PBAD 的表达起阻遏 作用,Pi对PBAD的表达起激活作用(图6-11)。

最新7原核生物基因表达调控汇总

最新7原核生物基因表达调控汇总

2020/8/13
6
指挥基因调控的信号
– 原核生物:营养状况、环境因素 – 真核生物:激素水平、发育阶段
2020/8/13
7
基因表达调控的时间性和空间性
2020/8/13
8
7.1.1 原核基因调控分类
原核生物的基因调控主要是转录调控,包 括负转录调控和正转录调控。
• 正调控(positive control): 在操纵子中,结构基因本 来不表达,可当调节蛋白(无辅基诱导蛋白)出现时,使 该结构基因进行表达。这样的调控叫正调控。
• 调节蛋白(regulatory protein):调节基因的表达产物, 叫调节蛋白。包括正调节蛋白,又叫激活蛋白 (activator);负调节蛋白,又叫阻遏蛋白(repressor)。
• 由于调节蛋白(RNA)能够自由地与其相应的结合位点 结 合 , 故 又 称 为 反 式 作 用 因 子 ( trans-acting element)。
7原核生物基因表达调控
7.1 原核基因表达调控总论
• 基因表达(gene expression) :指基因经过转 录、翻译,产生具有特异生物学功能的蛋白质分 子或RNA产物的过程。
• 对 这 个 过 程 的 调 节 称 为 基 因 表 达 调 控 ( gene regulation 或 gene control)
2020/8/13
3
调控型基因(regulated genes)
• 又称奢侈基因(luxury genes) 在不同组织 细胞中选择表达的基因。根据细胞生长、 发育的需要或环境因素的改变,其活性受 到调控。
2020/8/13
4
2020/8/13
5
基因表达调控主要表现在以下两个方面: • 转 录 水 平 上 的 调 控 (transcriptional

原核生物基因表达调控

原核生物基因表达调控

20
同位素示踪实验
把大肠杆菌细胞放在加有放射性35S标记的氨基酸,但没 有半乳糖诱导物的培养基中繁殖几代然后再将这些带有 放射活性的细菌转移到不含35S、无放射性的培养基中 随着培养基中诱导物的加入, β-半乳糖苷酶便开始合成。 分离β-半乳糖苷酶, 发现这种酶无35S标记说明酶的合 成不是由前体转化而来的, 而是加入诱导物后新合成的。
• Jacob和Monod认为诱导酶(他们当时称为适应酶)
现象是个基因调控问题, 可以用实验方法进行研究, 因此
选为突破口, 终于通过大量实验及分析, 于1961年建立
了该操纵子的控制模型。
-
21
酶的诱导
-
22
• 酶的诱导现象是生物进化过程中出现的一种合理、 经济地利用有限资源的本能。
• 酶诱导已证明是低等生物的普遍现象。
倒位片段
鼠伤寒沙门菌鞭毛素基- 因的调节
H1鞭毛素
10
鼠伤寒沙门氏菌(S.typhimrium)的相转变(phase variation)
-
11
2.σ 因子对原核生物转录起始的调控
σ因子:原核生物RNA聚合酶的一个亚基,是转录起 始所必需的因子,主要影响RNA聚合酶对转录起始 位点的正确识别,这种σ因子称σ70,此外还有分子量 不同,功能不同的其他σ因子 。
PO
操纵子可视为原核生物的转录单位,它可以逐个
地从原核生物基因组中分离出来,对其结构功
能加以研究。
-
15
3.乳糖操纵子
1) 乳糖操纵子的结构
启动子 操纵基因
调节蛋白
(阻遏蛋白)
-
结构基因
16
3个编码的结构基因
• Z编码β-半乳糖苷酶: 将乳糖水解成葡萄糖和半乳糖,还能 将乳糖转变为异构乳糖

分子生物学:原核基因表达调控模式

分子生物学:原核基因表达调控模式

添加葡萄糖后,细菌所需要的能量便可从葡萄糖得到 满足,葡萄糖是最方便的能源,细菌无需开动一些不 常用的基因去利用这些稀有的糖类。
葡萄糖的存在会抑制细菌的腺苷酸环化酶活性,减少
环腺苷酸(cAMP)的合成,与它相结合的蛋白质,
即 环 腺 苷 酸 受 体 蛋 白 CRP 又 称 分 解 代 谢 物 激 活 蛋 白 CAP,因找不到配体而不能形成复合物。
负控诱导 阻遏蛋白不与效应物(诱导物)结合时,结 构基因不转录;与之结合则转录。
负控阻遏 阻遏蛋白与效应物结合时,结构基因不转录。 阻遏蛋白作用的部位是操纵区。
在正转录调控系统中,调节基因的产物是激活蛋 白(activator)。
正控诱导系统 效应物分子(诱导物)的存在使激活蛋白 处于活性状态;
葡萄糖 cAMP Lac操纵子被抑制
DNA
+ + + + 转录
CAP P O Z Y A
CAP CAP CAP CAP 无葡萄糖,cAMP浓度高时
CAP
有葡萄糖,cAMP浓度低时
协调调节
负性调节与正性调节协调合作
阻遏蛋白封闭转录时,CAP不发挥作用 如没有CAP加强转录,即使阻遏蛋白从P上解聚仍无转录活性
23
• 乳糖操纵子的控制模型,其主要内容如下:
① Z、Y、A基因的产物由同一条多顺反子的mRNA分子所编码。 ② 这个mRNA分子的启动子紧接着O区,而位于I与O之间的启动子区(P), 不能单独起动合成β-半乳糖苷酶和透过酶的生理过程。 ③ 操纵基因是DNA上的一小段序列(仅为26bp),是阻遏物的结合位点。 ④当阻遏物与操纵基因结合时,lac mRNA的转录起始受到抑制。 ⑤诱导物通过与阻遏物结合,改变它的三维构象,使之不能与操纵基因结 合,从而激发lac mRNA的合成。当有诱导物存在时,操纵基因区没有被阻 遏物占据,所以启动子能够顺利起始mRNA的合成。

分子生物学第七章原核生物基因表达调控

分子生物学第七章原核生物基因表达调控
31
(三)、阻遏物 lac I 基因产物及功能
Lac 操纵子阻遏物 mRNA 是由弱启动子控制下组 成型合成的,该阻遏蛋白具有4个相同的亚基,每个亚 基均含347个氨基酸残基。
lacI 基因为组成型,通过启动子的上升突变体可获 得较多的阻遏蛋白;
阻遏物 2022/10/18
β-半乳糖苷酶 透过酶 转乙酰3酶2
2022/10/18
16
调节机理:
细胞中某一氨基酸或嘧啶的浓度发生改变
氨酰 – tRNA的浓度变化
核糖体在转录产物RNA上的结合位置不 同,使得RNA形成特定的二级结构 由RNA的二级结构判断基因能否继续转录
2022/10/18
17
3、降解物对基因活性的调节P252
葡萄糖效应或降解物抑制作用:细菌培养基中在 葡萄糖存在的情况下,即使加入乳糖、半乳糖等 诱导物,与其对应的操纵子也不会启动,这种现 象称为葡萄糖效应或降解物抑制作用。
这是通过阻止乳糖操纵子表达来完成的,这种 效应称为降解物抑制(catabolite repression)。
2022/10/18
35
(五)、cAMP与代谢物激活蛋白
葡萄糖
葡萄糖-6-磷酸
甘油 某些代谢产物抑制活性
腺苷酸环化酶
ATP
cAMP
编码
cAMP-CAP
Crp基因
代谢物激活蛋白 CAP
葡萄糖对其它糖的代谢抑制,是通过对 cAMP的抑制完成的。
2022/10/18
22
一、酶的诱导 ——
lac 体系受调控的证据
两种含硫的乳糖类似物:
异丙基巯基半乳糖苷
(IPTG)
巯甲基半乳糖苷(TMG)
E. coli 在不含乳糖的培养基生 长时,β-半乳糖苷酶含量极低;

分子生物学-13-4-第七章原核基因表达调控-Arb

分子生物学-13-4-第七章原核基因表达调控-Arb

因此只有在没有葡萄糖的时候,同时又有半乳糖的时候,启动子1才是开放的为什么gal 操纵子需要两个转录起始位点?(涉及半乳糖在细胞代谢中的双重功能)半乳糖两个作用: 可以作为唯一碳源供细胞生长; 与之相关的物质--尿苷二磷酸半乳糖(UDPgal )是大肠杆菌细胞壁合成的前体。

而启动子也有两个: galP1起始的转录——无内源葡萄糖、有外源半乳糖时进行,以保证碳源的供应。

galP2起始的转录——有内源葡萄糖、无外源半乳糖时进行,以保证细胞壁的合成需要。

生理功能(可以理解为生物学意义?)无论从必要性和经济性考虑,都要有一个不依赖于cAMP-CAP 的启动子(s2) 进行本底水平的组成型合成,以及一个依赖于cAMP-CAP 的启动子(s1),进行高水平的调节,这样既可以满足细胞最基本的需要(细胞壁),又可以满足在没有葡萄糖而有半乳糖时,细胞能够利用半乳糖进行生长。

进一步解释:gal P2是不依赖于cAMP-CRP 的,相反: cAMP-CRP 对gal P2还起到一种抑制作用,这是因为其与结合位点的结合,会影响到RNA 聚合酶对gal P2的利用。

因此教材上(page257)认为:只有S2活性完全被抑制时,(S1)的调控作用才是有效的。

7.4.2 阿拉伯糖操纵子(arabinose operon)araB 基因、araA 基因和araD, 形成一个基因簇,简写为araBAD三个基因的表达受到ara 操纵子中araC 基因产物AraC 蛋白的调控。

C 蛋白有三个结合位点O2、O1和 I 。

I BADCRPO2O1C结构基因调节基因P BADaraC 基因是araBAD 的调节基因L核酮糖激酶L阿拉伯糖异构酶L核酮糖-5-磷酸-4-差相异构酶结合到ara I 的时候,由于araBAD的启动子本身与ara I有部分重叠,另外还可以引起上游序列回折弯曲,使得AraC同时与O2结合,从而使CRP 聚合酶也不能结合到启动子上,araBAD基因不转录。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
诱导(induction):应环境条件变化基因表达水平增高的现 象。可诱导基因(inducible gene);
阻遏(repression):随环境条件变化而基因表达水平降低 的现象。可阻遏基因(repressible gene)。
7
管家基因(housekeeping gene)
某些基因在一个个体的几乎所有细
15
三、原核基因表达调控
基因表达调控主要表现在以下两方面:
1.转录水平上的调控(transcriptional regulation);
RNA转录的开/关 数量 选择性加工
2.转录后水平上的调控(post-transcriptional regulation)
蛋白质翻译速率 数量 加工、降解和分泌…
DNA 5’---ATGAGTA----3’ Non-template (sense strand) 3’----TACTCAT----5’ template (antisense strand)
RNA 5’----AUGAGUA----3’
3
● 某一基因只以一条单链DNA 为模板进行转录(不对称转录)
胞中持续表达。
12
bcl-2
β-actin
8
8
常用的管家基因
中文名称 Beta-肌动蛋白 甘油醛3-磷酸脱氢酶 TATA Box结合蛋白 18s 核糖体核糖核酸 微管蛋白α
英文缩写 β-actin GAPDH TBP 18s rRNA α-Tubulin
9
9
五、基因表达的调控因子: • 蛋白质 ( 特异性 ) • 小分子RNA ( 普遍性)
5
基因表达的时空性
基因组(genome): 是指含有一个生物体生存、发育、 活动和繁殖所需要的全部遗传信息的整套核酸。
组织特异性(tissue specificity):不同组织细胞中不仅 表达的基因数量不相同,而且基因表达的强度和种类也 各不相同.
阶段特异性(stagespecificity): 细胞分化发育的不同时期,基因表达的 情况是不相同的.
原核基因
-35序列
Pribnow box +1 (-10)
……… TTGACA ……… TATAAT …… 转录
δ因子 结合区
RNA聚合酶 识别结合区
真核基因
-110
-70~-80
Pribnow box +1 (-25)
……… GGGCGG ……… CAAT ……… TATAAT …… 转录
双向定位
第七章 原核基因表达调控
一、操纵子的概念及结构、RNA聚合酶的结构功能 二、大肠杆菌乳糖操纵子(lac)的表达调控 三、大肠杆菌色氨酸操纵子(trp)的表达调控
1
2
一、若干基本要点
• 基因表达的第一步:以dsDNA中的一条单链作为转录的模板, 在依赖DNA的RNA聚合酶的作用下按A-U,C-G 配对的原 则,合成RNA分子模板单链。 • DNA的极性方向为3’→5’, 而非模板单链DNA的极性方向与 RNA链相同,均为5’→3’.
16
1、 RNA polymerase in prokaryotes
βα σ
α β’
Core Enzyme for elongation 依靠静电作用力 非专一性与非特异DNA 结合 半衰期;60’
βα
σ
α β’ cover 60bp
Holo Enzyme for initiation 依靠空间结构 专一性与 特异DNA结合
12
原核生物与真核生物基因表达的差异
原核生物: 转录与翻译在同一时空。
转录与翻译相耦联(coupled transcription and translation)。 真核生物:转录产物(primary transcript)只有从核内运转到核外,
才能被核糖体翻译成蛋白质。
13
真核基因与原核基因调控区
6
基因表达适应环境的变化
1、组成性表达(constitutive expression):指不大受环境变 动而变化的一类基因表达。
看家基因(housekeeping gene):在组织细胞中持续表达, 是细胞基本的基因表达。
2、适应性表达(adaptive expression):指环境的变化容易 使其表达水平变动的一类基因表达。
● RNA的转录包括promotion, elongation, termination 三过 程
●从启动子(promoter)到终止子(terminator)称为转录单位
(transcriptional unit)
●原核生物中的转录单位多为 polycistron in operon ●真核生物中的转录单位多为monocistron, No operon ●转录原点记为+1,其上游记为负Fra bibliotek,下游记为正值
10
10
表达调控可以发生在 基因表达的哪些过程? 最主要在哪个过程?
主要发生在转录 水平,转录前、 转录后多水平均 有调控。
11
基因表达适应环境的变化
原核生物: 营养状况(nutritional status) 环境因素(environmental factor)
真核生物(尤其是高等真核生物)中, 激素水平(hormone level) 发育阶段(developmental stage)
半衰期;数小时
17
separation of the subunits of E. coli RNA polymerase by SDS-PAGE
-10 upstream
+1 start point
4
+10 downstream
二、基因的表达
• 基因表达(gene expression) 是指储存遗传信息的基因经 过一系列步骤表现出其生物功能的整个过程。 典型的基因表达是基因经过转录、翻译, 产生有生物活性的蛋白质的过程。 • 基因表达调控(gene regulation或gene control): 对这个过程的调节就称为。
双向定位
RNA聚合酶 识别结合区
14
大肠杆菌乳糖操纵子
Z/Y/A : 结构基因 P(promoter): RNA聚合酶结合部位。 O(operator): 阻遏蛋白的结合部位; 多顺反子mRNA: 当一个mRNA含有编码一个以上蛋白质的编码信息,而且 这些
蛋白质都是以独立的多肽被翻译时,这样的mRNA称之多顺反子mRNA;
相关文档
最新文档