人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re的含量分析
人参不同部位中人参皂苷成分的分析
人参不同部位中人参皂苷成分的分析周卫松【摘要】This study was aimed to measure the content of ginsenoside in ginseng extract by UV/HPLC. Through the approximate translation comparison of two different testing results with UV and HPLC in current market, and several typical HPLC peaks ratio analysis on contents of different ginsenoside extracted from the root, stem and leaves of ginseng, in order to establish identification method of ginsenoside from different sources. The results showed that the ratio for Re:Rb1:Rc:Rd in ginseng root extract was approximately 1:2.20:0.94:0.97. And the ratio for Re:Rb1:Rc:Rdin ginseng leave extract was approximately1:(0.05~0.07):(0.10~0.16):(0.32~0.37). Compared with the mixture of ginseng root and ginseng leave extract, the theoretical value ofRe:Rb1:Rc:Rd should between those two ratios. It was concluded that this method was simple, stable and reliable, which can be used as the identification method of ginsenoside from ginseng root, stem and leaves.%目的：建立UV/HPLC法测定人参不同部位中人参皂苷含量。
用RP-HPLC法测定人参茎叶皂苷粉中人参皂苷Re含量
用RP-HPLC法测定人参茎叶皂苷粉中人参皂苷Re含量魏建华;娄子恒;金慧;王明芝;张引;潘晓鹏;于淑莲【期刊名称】《人参研究》【年(卷),期】2002(014)002【摘要】过去对人参茎叶皂苷含量的测定只限于总皂苷的含量测定,对单体皂苷含量测定较少.本文用反相HPLC法测定了人参茎叶皂苷粉中人参皂苷Re的含量.色谱柱为Shim-pack clc-ODS柱(0.15m×6.0mm,φ,5μm).流动相为0.05%磷酸:乙腈(4:1),检测波长203nm,流速1.2ml/min,柱温38℃.测得人参茎叶皂苷粉中人参皂苷Re含量为16.85%.【总页数】2页(P29-30)【作者】魏建华;娄子恒;金慧;王明芝;张引;潘晓鹏;于淑莲【作者单位】吉林人参研究所·通化·134001;吉林人参研究所·通化·134001;吉林人参研究所·通化·134001;吉林人参研究所·通化·134001;吉林人参研究所·通化·134001;吉林人参研究所·通化·134001;吉林人参研究所·通化·134001【正文语种】中文【中图分类】R392【相关文献】1.RP-HPLC法测定阿莫西林、盐酸环丙沙星可溶性粉的含量 [J], 张小华;张龙;李生其;刑晓玲;朱丽霞;冯艺2.RP-HPLC法测定阿莫西林-盐酸环丙沙星可溶性粉的含量 [J], 张小华;张龙;李生其;邢晓玲;朱丽霞;冯艺3.RP-HPLC法测定亚硫酸氢钠甲萘醌粉(水产用)的含量均匀度 [J], 陈向丹;王峻;万珊;董书香;丁阳4.人参茎叶皂苷中人参皂苷Re含量的反相高效液相色谱测定方法的改进 [J], 陈寒梅;赵广才5.RP-HPLC法测定保健品葛根粉中葛根素的含量 [J], 彭欣荣;李璞因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人参、红参、西洋参和人参花的比较
人参、红参、西洋参和人参花的比较人参味甘,微苦,微温,入肺、脾、胃、心肾经。
人参具有大补元气,安神益智,生津固脱,调补五脏,延缓衰老的功效。
人参含有多种有效成分,如:人参皂甙、人参多糖、挥发油等。
人参根皂甙中所含的Rb1,比人参茎叶皂甙的多,Rb1对中枢神经系统主要是抑制作用,而人参茎叶皂甙中所含的Rg1比人参根皂甙的多,Rg1对中枢神经系统有轻微的兴奋作用。
人参Rb组皂苷系从五加科人参属植物人参茎叶及西洋参根提取的总皂苷中分离得到的。
人参皂苷单体Rb1、Rb2、Rb3均具有钙通道阻滞作用,Rb类有中枢镇静作用,Rb1、Rb2、Rc的混合物有安定作用。
人参皂苷Re具有扩张血管改善心肌作用,人参皂甙—Re作为抗心律失常剂已申请日本专利。
人参皂苷,特别是Rb1和Rg1具有明显的提高记忆、抗衰老作用。
人参皂苷Rg1增强免疫力作用。
人参多糖由人参淀粉和人参果胶两部分组成,药理活性部分主要是人参果胶。
人参多糖可明显增强免疫系统的功能并有免疫抗肿瘤和辅助抗肿瘤活性。
另外,人参多糖还有降血糖以及调控血细胞生成的作用。
人参总皂甙可能促进各系造血祖细胞的增殖与分化,这可能是人参“补气生血”和调节免疫功能的细胞与分子生物学机理之一。
高丽红参性偏温,适合气弱阳虚症。
在红参加工全过程中,人参二醇型丙二酸单酰基人参皂苷Rb1(简称M2Rb1)主要被水解转化为20S人参皂苷Rg3和Rb1,其次为人参皂苷Rd和Rh2 。
人参三醇型中的人参皂苷Re水解生成人参皂苷Rg2、Rh1和Rg1。
麦芽糖和精氨酸经加热在酸性条件下产生了精氨酸糖苷,具有增强免疫、扩张血管及抑制小肠麦芽糖酶的活性。
红参中的特征成份为Rh2。
西洋红参、西洋参不含Rf ,而中国红参含有Rf ,这是人参与西洋参区别的特征性成分。
西洋红参与西洋参成分相近,均以人参二醇型皂甙类( Rb1、Rb2、Rc、Rd) 为主,而Re 含量较高为特点。
西洋红参与中国红参化学成分不同,除中国红参含有Rf外,Rg1远远高于西洋红参和西洋参,所以中国红参具有兴奋作用,这是西洋红参与西洋参具有安神镇静作用的区别点。
高效液相色谱法测定人参茎叶总皂苷胶囊中人参皂苷Re的含量
高效液相色谱法测定人参茎叶总皂苷胶囊中人参皂苷Re的含
量
李长新;亓校鹏
【期刊名称】《黑龙江医药》
【年(卷),期】2005(018)004
【摘要】目的:应用高效液相色谱法对人参茎叶总皂苷胶囊中的人参皂苷 Re进行了含量测定.方法:选用HypersilC 18分析柱(250mm×4.6mm,5μm),乙腈-0.05%磷酸溶液(20:80)为流动相,检测波长为203nm,流速为1.0ml/min.结果:线性范围:16～16.0μg(r=0.9999)平均回收率为99.2%,RSD为1.0%.结论:本法简便、灵敏、准确.
【总页数】2页(P244-245)
【作者】李长新;亓校鹏
【作者单位】黑龙江省天地医药有限责任公司,150001;黑龙江省天地医药有限责任公司,150001
【正文语种】中文
【中图分类】R9
【相关文献】
1.人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re的含量分析 [J], 何厚罗;黄章倍;盛佳钰;岳小强;李敏;辛海量
2.高效液相色谱法测定人参片中人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量 [J], 张雪光;
俄丽丹;孙巍;王海荣;刘奕
3.用RP-HPLC法测定人参茎叶皂苷粉中人参皂苷Re含量 [J], 魏建华;娄子恒;金慧;王明芝;张引;潘晓鹏;于淑莲
4.反相高效液相色谱法测定益气强身胶囊中人参皂苷Re和人参皂苷Rg_1的含量[J], 肖金芳;周建红
5.人参茎叶皂苷中人参皂苷Re含量的反相高效液相色谱测定方法的改进 [J], 陈寒梅;赵广才
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人参皂苷Re的分离提纯
人参皂苷一.人参皂苷的背景及药理作用人参是一味被广泛用于养身治病的传统中药,与貂皮、鹿茸并称为中国东北三宝。
而人参皂苷又是人参的主要有效成分,其药理作用表现多样。
人参皂苷虽然在人参的药理作用上起了关键性的作用，但其含量很少,只约占4 %。
根据皂苷元的不同,人参皂苷被分为原人参二醇类皂苷、原人参三醇类皂苷及齐墩果酸类皂苷。
现在我们对于单个人参皂苷的药理作用研究已非常深入, 像其在神经系统、小肠传送功能、内分泌系统、免疫系统、信号传导、抗衰老、溶血、烧伤创面愈合、抗肿瘤增效、人的精子活力、药物代谢酶、降血糖方面的影响机理都有相关的新研究成果，人参皂苷Re也已被证实具有抑制中枢神经，促进DNA、RNA合成，促进血清蛋白质合成，促进蛋白质分解酵素活性化，促进刺激副肾皮质荷尔蒙分泌等作用。
人参皂苷作为人参的主要有效成分之一,其药效作用表现的多样性在一定程度上揭开了人参具有奇特功效的神秘面纱。
作为皂苷类成分,其口服直接经肠道吸收是比较差的,大多需要经肠道菌群代谢后,其代谢产物才能被较好地吸收入体内。
从这一点来讲,人参皂苷的药效作用与肠菌代谢的关系是密不可分的,因此,今后需进一步加强人参皂苷肠菌代谢这一关键上游环节的研究,这对于进一步认识人参皂苷起效的物质基础及体内过程是相当重要的,而且有利于判断体外实验结果的价值。
但是,对于人参皂苷在成分及剂量上的配伍研究还显得较为薄弱,这需要在今后的研究中予以加强。
再者,人参皂苷具有典型的双向调节作用,如何通过控制相关条件及合理的配伍来达到治疗目的也是今后值得研究的一个方面。
二．人参皂苷的分离提取人参皂苷在人参中的含量很低，在人参的各个组织器官中的含量都有所不同，这无形中又增加了我们对人参皂苷的分离提取的难度。
在实际生产中，我们一方面要保证皂苷的产率，另一方面又要保证它的生物活性。
下面我就以人参皂苷Re的提取为例，通过硅胶柱层析技术从人参叶三醇皂苷中分离制备较纯人参皂苷Re，采用重结晶技术将分离后较纯Re精制并通过HPLC检测其纯度：（一）材料人参皂苷标准品Re、Rg ，精致人参叶三醇皂苷，薄层层析板Silica Gel 6O—F254，AB-8大孔吸附树脂，硅胶G。
人参茎叶总皂苷和人参根总皂苷提取物特征图谱鉴定
人参茎叶总皂苷和人参根总皂苷提取物特征图谱鉴定
陈英红;姜瑞芝;罗浩铭;高阳;徐多多;高其品
【期刊名称】《天然产物研究与开发》
【年(卷),期】2009(021)B10
【摘要】采用高效液相色谱法鉴别人参根总皂苷和人参茎叶总皂苷。
采用色谱柱Hypersil C18（4．6mm×250mm，5μm），流动相：A为乙腈，B为0．1％磷酸水溶液，梯度洗脱0～30min19％A，30～35min19％～24％A，35—
60min24％-40％A。
柱温：35℃，检测波长：203nm，流速：1．3mL/min。
试验结果表明人参根总皂苷和人参茎叶总皂苷的特征图谱有明显区别，为人参皂苷提取物质量控制新模式的建立提供了依据。
【总页数】3页(P353-355)
【作者】陈英红;姜瑞芝;罗浩铭;高阳;徐多多;高其品
【作者单位】吉林省中医药科学院,长春130021;长春中医药大学,长春130117【正文语种】中文
【中图分类】Q946.91
【相关文献】
1.UPLC法测定人参总皂苷提取物中7种人参皂苷的含量 [J], 蔡艳;宋剑;王贵金;贾继明
2.人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re的含量分析 [J], 何厚罗;黄章倍;盛佳钰;岳小强;李敏;辛海量
3.党参内生菌转化人参根总皂苷为稀有人参皂苷 F2和 C-K 的研究 [J], 崔磊;金英
今;尹成日
4.高效液相色谱法测定人参茎叶总皂苷胶囊中人参皂苷Re的含量 [J], 李长新;亓校鹏
5.人参饼干中人参总皂苷、人参单体皂苷Rb1、及Re+Rg1含量测定及人参饼干中人参皂苷的定性鉴别 [J], 魏建华;杨文志;刘强;曹志强
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人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究
人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究人参为五加科属植物人参的根,为我国名贵的中药材。
作为我国东北三宝之一,它与鹿茸、貂皮齐名,具有十分重要的药用活性价值,人参中最重要的药用活性成分为人参皂苷其次为人参多糖。
由于人参价格昂贵、产量有限且人参茎叶中具有人参根部相同的药用活性成分,本实验采用人参茎叶作为原材料提取人参皂苷及人参多糖。
实验内容如下：1.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参皂苷的最佳提取工艺,根据实验结果得到30%醇提80℃C热回流提取2次共4.5小时为人参皂苷最佳提取工艺。
2.利用静态、动态试验筛选若干种大孔吸附树脂选取最佳吸附树脂XDA-7
作为人参皂苷分离材料再从多种不同性能脱色树脂中筛选出人参皂苷最佳脱色树脂D762,得到人参皂苷最佳精制产物。
3.利用树脂多柱法结合硅胶柱层析法用于人参皂苷单体Rgl和Re的精制分离,通过实验确定硅胶柱层析法中洗脱剂计配比为氯仿：甲醇：乙酸乙酯=8.5.1：0.5,可以将人参皂苷单体Rgl和Re实时精确的分离出来。
4.利用适当的薄层层析色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性分析及高效液相色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性及定量分析。
5.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参多糖的最佳提取工艺,并对最佳工艺提取的多糖进行精制,得到人参多糖精制产物。
人参茎叶皂苷中人参皂苷Re含量的反相高效液相色谱测定方法的改进
人参茎叶皂苷中人参皂苷Re含量的反相高效液相色谱测定方法的改进（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）【摘要】目的改进高效液相色谱法测定人参茎叶皂苷中人参皂苷Re的方法。
方法最佳色谱条件：ODS（150 mm×4.6 mm，5μm）为色谱柱，采用梯度洗脱（乙腈与水），检测波长203 nm，流速1.0 ml/min。
结果人参皂苷Re的回归方程为Y=9 505.448 8X－1 159.607 0，r＝0.999 8，线性范围为1.88 ～60.16 μg/ml，平均回收率为99.35% (RSD=0.49%,n=6)。
结论采用改进的测定方法简单、准确和重现性好，适合人参茎叶皂苷中人参皂苷Re的质量控制。
【关键词】人参茎叶皂苷；人参茎叶皂苷Re；反相高效液相色谱Abstract：ObjectiveTo improve the HPLC method for determination of ginsenosid Re in ginsenosides. MethodsODS column（150 mm×4.6 mm，5 μm）was used. The mobile phase consisted of CH3CN-H2O, the detection wavelength was 203 nm，and the flow rate was 1.0 ml/min.ResultsThe regression equation ofginsenoside Re was Y=9 505.448 8X－1 159.607 0 with a correlation coefficient of 0.999 8，and linear range was within the range of 1.88 ～60.16 μg/ml, the average recovery of ginsenosid Re was 99.35% (RSD=0.49%,n=6). ConclusionThis method is simple, quick, and reproducible and it is suitable for the quality control of Panax ginseng.Key words：Panax ginseng；Ginsenosid Re；RP-HPLC人参茎叶皂苷是从五加科植物人参的干燥茎叶中提取的有效成分经喷雾干燥而得，其中含有各种苷如人参皂苷Re。
人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re的含量分析
人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re的含量分析何厚罗;黄章倍;盛佳钰;岳小强;李敏;辛海量【期刊名称】《药学实践杂志》【年(卷),期】2009(27)4【摘要】目的:分析人参茎叶总皂苷中参皂苷Re的含量,为人参总皂苷的质量控制提供依据.方法:色谱柱:Diamonsil C18(4.6 mm×25 mm,5 μm),保护柱:DIKMA EasyGuard C18(10 mm×4.6 mm),流动相:乙腈-0.5%冰醋酸水溶液,梯度洗脱,流速:1.25 mL/min;ELSD:漂移管温度40℃,载气压力3.5 bar,放大系数为7.结果:标准曲线:C=1.191×10-7A-0.187 6,线性范围:0.038～1.14 mg/mL,r=0.999 3,检出限:20 ng(S/N>3),加样回收率:96.84%～104.21%.结论:该方法前处理简单,分析准确、快速,可作为人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re的含量分析方法.【总页数】3页(P291-293)【作者】何厚罗;黄章倍;盛佳钰;岳小强;李敏;辛海量【作者单位】第二军医大学中医系,上海,200433;第二军医大学中医系,上海,200433;第二军医大学中医系,上海,200433;第二军医大学中医系,上海,200433;第二军医大学海医系军队卫生教研室,上海,200433;第二军医大学中医系,上海,200433;中国人民解放军第546医院,新疆,乌鲁木齐,841700【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.RP-HPLC测定人参果总皂苷中人参皂苷Re和人参皂苷Rd的含量 [J], 曲芯瑶;赵宏峰;弥宏;庞威;郭禹彤;金光洙2.HPLC法测定含三七类保健食品中三七皂苷R1、人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1含量 [J], 张治军;钟名诚;黄秋华3.高效液相色谱法测定人参茎叶总皂苷胶囊中人参皂苷Re的含量 [J], 李长新;亓校鹏4.用RP-HPLC法测定人参茎叶皂苷粉中人参皂苷Re含量 [J], 魏建华;娄子恒;金慧;王明芝;张引;潘晓鹏;于淑莲5.人参茎叶皂苷中人参皂苷Re含量的反相高效液相色谱测定方法的改进 [J], 陈寒梅;赵广才因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
人参茎叶总皂苷的提取方法研究
第1卷第1期2017年3月现代牧业MODERN ANIMAL HUSBANDRYVol.1No.1Mar.2017人参茎叶总皂苷的提取方法研究宋幸辉，郑宝亮，王长林，王秀君，刘永录，马霞，卞陆杰(河南牧业经济学院，河南郑州450046)摘要：以人参皂香Rg1与人参皂香R e的总量及人参茎叶总皂香的含量为依据，筛选人参茎叶提取物的最佳提取方法。
方法：采取水煎及水煎液不同浓度乙醇（30%、60%、80% )分别提取人参茎叶中总皂香，并进行喷雾干燥,统计各提取物得率，采用高效液相法检测人参皂香R g1与R e的总量，采用紫外分光光度法检测人参总皂香含量。
结果显示，以水煎液乙醇终浓度为60%醇沉时所得提取物得率较高，且其中人参皂香Rg1与人参皂香R e的总量和人参总皂香含量相对较高，综合评价最终确定人参茎叶的提取方法为水煎、60%乙醇醇沉。
关键词：人参茎叶；总皂香;提取方法;得率；含量测定中图分类号：R284 文献标识码：A 文章编号:2096 -2975(2017)01 -0030 -03Research on Extraction M ethod of Total Saponins from Ginseng Stem and LeafSong Xinghui,Zheng Baoliang,Wang Changlin,Wang Xiujun,Liu Yonglu,Ma Xia,Bian Lujie (Henan University of Animal Husbandry and Economy , Zhengzhou , Henan 450046 , China) Abstract ：Objective to explore the optimum extraction method of ginseng stem leaf taking the amount of ginsenoside Rg1 , Re and Ginseng stem and leaf saponin (GSLS) as evaluating indicators. Methods GSLS was extracted by water decoction and alcohol sedimentation with different concentrations ethanol (30% , 60% , 80% ). Then recoding the extraction ratios after spray drying. The amounts of ginsenoside Rgland Re were tested by HLPC method , and the total ginseng saponin was determined by UV - spectrophotometry. The result shows that the highest extraction ratio was determined with an ethanol concentration of 60% in alcohol sedimentation. And the amounts of ginsenoside Rgland Re were relatively high. Therefore , the optimum extraction method of ginseng stem leaf was taking alcohol sedimentation with 60% concentration ethanol.Key words ：ginseng stem and l a , total saponin , extraction method , yield , determination人参叶（Ginseng Folium)是五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey)的干燥叶，性味苦、甘，寒，归肺、胃经，具有祛暑、补气、益肺、生津之功能。
RP—HPLC测定人参果总皂苷中人参皂苷Re和人参皂苷Rd的含量
RP—HPLC测定人参果总皂苷中人参皂苷Re和人参皂苷Rd的含量作者：曲芯瑶赵宏峰弥宏庞威郭禹彤金光洙来源：《中国社区医师》2014年第01期doi：10.3969/j.issn.1007-614x.2014.1.1基金项目吉林省科技厅科技成果转化计划重大项目（20115090）摘要目的：建立高效液相色谱法测定人参果总皂苷中人参皂苷Re和人参皂苷Rd含量的方法。
方法：采用Apollo C18色谱柱（250mm×4.6mm，5μm），乙腈-水梯度洗脱，流速1.0ml/分，检测波长203nm，柱温25℃。
结果：人参皂苷Re、人参皂苷Rd在70分钟内达基线分离，线性关系良好（r≥0.9990）。
加样回收率分别为98.5%和97.8%。
结论：该方法简便、快速，可作为人参果总皂苷的质量控制指标。
关键词人参果总皂苷人参皂苷Re 人参皂苷Rd 高效液相色谱法含量测定Abstract Objective：To determine the contents of ginsenosides Re and Rd the total saponins in fruit of Panax ginseng by HPLC.Method：The analysis is carried out at room temperature on a Apollo C18 column（150mm×4.6mm，5μm） eluted with acetonitrile and water as the mobile phases in a gradient elution.The flow-rate was 1.0ml/min，the detection wavelength was 203 nm.The column temperature was 25℃.Result：Ginsenosides Re and Rd were separated at baseline within 70 min with good linearity（r≥0.9990）.The recovery rates were 98.5% and 97.8%.Conclusion：The method was simple，fast and could control the quality of Panax ginseng effectively.Key words Ginseng fruit saponins；Ginsenosides Re；Ginsenoside Rd；High Performance Liquid Chromatography；Determination人参果总皂苷为五加科（Araliaceae）植物人参（Panax ginseng C.A.Mey）的成熟果实经加工制成的总皂苷[1]。
人参皂苷测定及其药理作用的研究概况
人参皂苷测定及其药理作用的研究概况摘要：人参(P anax g inseng C. A. M eyer) 为五加科人参属植物, 具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神等作用〔1〕。
现代药物学研究证明: 人参皂苷(ginsenoside) 是人参中重要的活性物质, 因此人参皂苷含量的多少评价人参内在质量的重要指标之一。
迄今为止, 人们已从人参各部位(人参根、芦头、茎叶、花、花蕾及参果) 共分离得到20 多种人参皂苷, 可分为20S2原人参二醇(p rotopanaxadiol) 类、20S2原人参三醇(p rotopanaxatriol) 类和齐墩果酸(oleanolic acid)类三类。
对于人参中人参皂苷的含量测定, 国内外研究的都比较多, 常用的测定方法主要有: 高效液相色谱法、薄层扫描法、分光光度法及重量法等。
本文主要讨论这些方法测定的结果, 即不同采收期和不同年限的人参中人参皂苷的含量变化, 以及人参各部位人参皂苷的含量变化等, 以期为综合利用人参资源, 扩大人参药用部位, 合理进行人工种植和炮制提供一定参考。
关键词：人参皂苷人参总皂苷八种主要皂苷含量测定药理作用1、人参总皂苷的测定1.1 样品的制备取人参粉（40目）1g，置50ml磨口圆底烧瓶中，精密加入甲醇25ml与沸石少许，摇匀，称重，放置过夜后于水浴中保持微沸回流6小时，添加甲醇至原重离心分离，精密吸取上清液5或10ml（视含量而定），挥去甲醇，将提取物残渣仔细移入1ml容量瓶中，容器用少量甲醇洗涤，洗液合并，精密稀释至刻度。
1.2 总皂苷的测定用微量注射器吸取上述样品溶液10至20μl（视皂苷含量而定），在硅胶薄层上点成线状，用氯仿-甲醇-水（70:55:10）展开，依溶剂达到顶端，将板取出，使溶剂然全挥去，置碘蒸气中数秒，待色点刚显出，立即取出，画出斑点位置，用冷风将碘完全吹尽，用小刀将色点刮入10ml磨口带塞试管中，精密加入5%香荚醛-冰醋酸溶液0.2ml与高氯酸0.8ml，混匀，密塞置60℃水浴中加热15分钟，立即冷却，精密加入冰醋酸5ml，摇匀，离心，取上清液在波长560nm处比色测定，同时取与色点同样大小的空白硅胶加显色剂显色，作为空白对照。
人参茎叶皂苷中人参皂苷Re含量的反相高效液相色谱测定方法的改进
人 参茎 叶皂 苷 是从 五加 科 植 物 人 参 的 干 燥 茎 叶 中 提 取 的 有 现 报 道 如 下 。
效成分经喷雾干燥而得 ，其 中含有 各种苷如人 参皂苷 Ｒｅ。关于 １ 仪 器 与 试 药
人参皂苷 中人参皂苷 Ｒｅ的测定方 法已有文献报道 “Ｊ，笔者也 岛津 ＬＣ一２０１０Ａ 高效 液 相 色谱 仪 （ＬＣ一１０ＡＤ泵 ，ＳＰＤ—
ｔｈｅ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １．０ ｍｌ／ｍｉｎ．Ｒ ｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ ｅｑｕａｔｉｏｎ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄｅ Ｒｅ ｗａｓ Ｙ ＝９ ５０５．４ ８ ８Ｘ 一 １ １５９．６０７ ０ ｗｉｔｈ ａ ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ ｃｏｅｆｉ ｃｉｅｎｔ ｏｆ ０．９９９ ８，ａｎｄ ｌｉｎｅａｒ ｒａｎｇｅ ｗａｓ ｗｉｔｈｉｎ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ １．８８ —６Ｏ．１６ ｍｌ，ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｏｆ ｇｉｎｓｅｎ－
ｏｓｉｄ Ｒｅ ｗａｓ ９９．３５％ （ＲＳＤ＝０．４９％ ，ｎ＝６）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｉｓ ｍｅｔｈｏｄ ｉｓ ｓｉｍｐｌｅ，ｑｕｉｃｋ，ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ ａｎｄ ｉｔ ｉｓ ｓｕｉｔａｂｌｅ ｆ ｏｒ
ｔｈｅ ｑｕａｌｉｔｙ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ． Ｋ ｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐａｎａｘ ｇｉｎｓｅｎｇ； Ｇｉｎｓｅｎｏｓｉｄ Ｒｅ； ＲＰ —ＨＰＬＣ
少 咳嗽 次 数 ，对 大 鼠慢 性 炎 症 琼 脂 肉芽 肿 具 有 一 定 的抑 制 作 用 ， ［３］ 陈 奇，邓文龙 ，孙瑞元 ，等．中药药理研究方法学［Ｍ］．北京 ：人民
对 角叉 菜 胶 致 大 鼠 足肿 胀 具 有 一 定 的 抑 制作 用 ，瘰 疬清 胶 囊 能 明 ［４］
医学论文-人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究
人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究【关键词】人参皂苷摘要：目的：建立人参皂苷Rg1、Re的含量测定方法。
方法：采用HPLC 色谱法，流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801)，检测波长为203 nm,Echrom C18柱。
结果：人参皂苷Rg1在0.032～0.192 mg/ml范围内线性良好；人参皂苷Re在0.024～0.144 mg/ml 范围内线性良好。
平均回收率为97.59%，RSD为1.64%。
结论：该方法简便稳定，准确，重现性好，可用于控制人参药材的质量。
关键词：人参；人参皂苷Rg1；人参皂苷Re；高效液相色谱法人参作为贵重药材，含有人参皂苷和多糖等成分。
具有大补元气、复脉固脱、补脾益气，生津，安神的功效。
用于体虚欲脱，肢冷脉微，脾虚食少，肺虚喘咳，津伤口渴，内热消渴，惊悸失眠，阳痿宫冷；心力衰竭，心原性休克等。
本文参考《中国药典》2000年版Ⅰ部人参项下含量测定方法［1］，建立了人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法。
结果表明，本实验所建立的方法含量重现性良好，专属性强，数据比较稳定。
1仪器与试药 1.1仪器Agilent 1100型高效液相色谱仪；色谱柱：Echrom C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)Echrom工作站；AE240型双量程电子分析天平(十万分之一)。
1.2试剂高效液相用试剂为色谱纯，其余均为分析纯。
1.3对照品为中国药品生物制品检定所提供(人参皂苷Rg1，批号0703-200221，供含量测定用；人参皂苷Re，批号110754-200218，供含量测定用)。
1.4药材人参购自安徽亳州市场，经鉴定符合《中国药典》要求。
2方法学考察 2.1色谱条件流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801)，检测波长为203 nm,Echrom C18柱，理论塔板数按人参皂苷Re峰计算不得低于2 500。
2.2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品8.00 mg，人参皂苷Re对照品6.00 mg，置10 ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀；精密量取1 ml，置5 ml量瓶中，加甲醇使溶解，并稀释至刻度，摇匀，即得(每1 ml含人参皂苷Rg1 0.160 mg，人参皂苷Re 0.120 mg)。
高效液相色谱法测定活力源片中人参茎叶总皂苷含量
Ｏ
Ｃ
Ｕ
Ａ ．对 照品溶 液
Ｂ ．阳性 对 照品 溶 液 （ 自配 合人 参 茎叶 总皂 苷的 供试 品 ）
Ｃ ．供 试 品 溶 液 Ｄ ．阴性 对 照 品溶 液 图 １ 高 效 液相 色谱 图
结 果 人 参 皂 苷 Ｒ ， 面 积 平 均值 为 ４ ５ ， Ｓ 为 １７ （ ＝６ ； ｇ峰 ４２ ３ Ｒ Ｄ ．％ ｎ ） 人参皂苷 Ｒ ｅ峰 面积 平 均 值 为 ｌ６ ３ ， Ｓ ３ ０ Ｒ Ｄ为 １１ （ ６ 。 果 ０ ．％ ｎ＝ ）结
２０ ０ ０ ，０ ６ ８ ３ 山西 省 吕梁 中药 厂 ）人 参 皂 苷 Ｒ 人 参 皂 苷 ０６ ８ ２ ２ ００ ０ ， 。 ｇ、
Ｒ 、 参 茎 叶 总 皂 苷 对 照 品 （ 号 分 别 为 ｌ０ ０ —２０ ２ ， ｅ人 批 １７ ３ ０ ３ ２ １０ ５ ２ ０ ２ ， １５ ３— ０ ２ １ 中 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 ）试 １７ ４— ０４ １ １ １５ ２ ０ ０ ． ； 验 用 的 各 味 药 材 分 别 由吉 林 通 化 振 国 药业 有 限 公 司 、 春 英 联 生 长 物 技 术 有 限 公 司提 供 ； 甲醇 、 腈 （ 乙 色谱 纯 ） 水 （ Ｓ ； 用 Ｇ型 超 纯 水 器 制 备 的纯 化 水 ） 。
２ １ 色 谱条 件 与 系统 适 用 性试 验 ．
色 谱 柱 ： ｏ ａ ｘ ｎ Ｉ柱 （５ Ｚ ｒ ｘＥ ｔ ｄＣ ２ ０ｍｍ× ． ｍ， ｍ） 流 动 ｂ ｅ Ｒ ４ ６ｍ ５Ｉ ； ． ｔ
相： 乙腈 一 （８ ８ ）柱 温 ：５℃ ； 水 １ ：２ ； ３ 流速 ：． ／ ｉ； 样 量 ： Ｉ ； ０８ ｍＬ ｍｎ进 ５ｘ Ｌ
人参茎叶总皂苷中人参皂苷Re的含量分析
AB STRACT Ob jec tive: T o determ ine quantitativ ely g insenoside R e in tota l g inseno side from stalk and leaf ofPanax ginseng, and to prov ide expe rim ental ev ident fo r tota l g insenoside quality contro l o fPanax ginseng. M ethods: The m e thod w as deve loped w ith the con d ition as follow s: D iam onsil C18 ( 4. 6 mm 25 mm, 5 m ) and D IKM A EasyGuard C18 ( 10 mm 4. 6 mm ) was used as chrom atograph ic column and guard co lum n respective ly. G rad ient e lution was emp loyed w ith the m obile phase of aceton itrile 0. 5% acetic acid/wa ter at a flow ra te of 1 25 mL /m in. ELSD: tem perature o f the drift tube 40 ; gas pressure: 3 4 bar; ga in: 7. R esu lts: The standard curv e: C = 1 191 10- 7A - 0 187 6; the linear range: 0 038~ 1 14 m g /mL, r= 0 999 3; the lim its of detection: 20 ng ( S /N > 3); recovery rate o f the added samp le: 96. 84% ~ 104. 21% . Con clusion: W ith its accuracy, sens itiv ity, reproduc ib ility as w ell as the sim p licity o f samp le preparation, th is m ethod is feasib le for quality contro l of tota l g insenoside from stalk and leaf o fPanax ginseng. K EY W ORDS P anax g inseng; tota l g insenoside; g insenoside R e; H PLC ELSD
人参茎叶三醇类皂苷的分离与生物转化
人参茎叶三醇类皂苷的分离与生物转化
本文主要研究了人参西洋参茎和叶中皂苷的分布;确立了结晶法和酶转化法制备三醇类皂苷Re、Rg1单体的工艺。
利用甲醇浸提法获取人参、西洋参茎和叶总皂苷,经高效液相色谱(HPLC)检测了皂苷的分布,人参茎皂苷含量为0.660%,
人参叶皂苷含量为12.6%;均以皂苷Rb1、Rb2、Rc、Rd、Re、Rg1、Rf为主。
人参茎和叶总皂苷中三醇类皂苷(Re和Rg1)含量较高,分别为51.5%和48.2%。
西洋参茎皂苷含量为1.24%,西洋参叶皂苷含量为14.4%;均以Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Re、Rg1为主。
西洋参茎和叶中三醇类皂苷(Re和Rg1)含量分别为26.4%和 20.4%。
人参茎叶中三醇类皂苷的含量明显高于西洋参茎叶,因此,选择人参茎叶为原料制备人
参皂苷Re和Rg1单体。
采用AB-8大孔吸附树脂梯度洗脱分离人参茎叶总皂苷获得三醇类皂苷,得
率为46.6%。
以此为原料采用结晶法制备人参皂苷Re单体,其得率为26.0%,纯度高达93.5%;母液中Re和Rg1含量分别为40.8%和44.4%,传统方法分离Re和Rg1的操作较为繁琐,本文采用生物转化法对Re进行转化生成Rg1,以提高Rg1的含量。
经酶转化后,产物得率为80.6%,其中Re的残留量不足20%,Rg1的纯度在80%以上。
因此,确定了三醇类人参皂苷单体——Re和Rg1的制备工艺:AB-8大孔吸附树脂分离人参茎叶总皂苷获得三醇类皂苷,然后结晶法制备高纯度Re,再用生
物转化法处理结晶母液,可得纯度较高的Rg1产品。
吉林人参根和根茎的化学成分研究
吉林人参根和根茎的化学成分研究摘要采用Amberlite XAD-4大孔吸附树脂和硅胶柱色谱以及高效液相色谱等方法系统性研究人参根和根茎的化学成分；通过谱学数据分析鉴定化合物的结构。
从人参根和根茎的70%乙醇提取物中分离得到28个皂苷类化合物，分别鉴定为高丽人参皂苷R1（1），人参皂苷Rg1（2），人参皂苷Rf（3），三七皂苷R2（4），人参皂苷Rg2（5），三七皂苷Fe（6），吉林人参苷醇（7），人参皂苷Re5（8），三七皂苷N（9），三七皂苷R1（10），人参皂苷Re2（11），人参皂苷Re1（12），人参皂苷Re（13），人参皂苷Rs2（14），人参皂苷Ro甲酯（15），人参皂苷Rd（16），人参皂苷Re3（17），人参皂苷Re4（18），20-葡萄糖基-人参皂苷Rf（19），人参皂苷Ro（20），人参皂苷Rc（21），西洋参皂苷R1（22），人参皂苷Ra2（23），人参皂苷Rb1（24），人参皂苷Ra1（25），人参皂苷Ra3（26），人参皂苷Rb2（27），三七皂苷R4（28）。
所有化合物均系20（S）-原人参二醇型或原人参三醇型皂苷。
化合物1为首次从吉林栽培人参根和根茎中分离得到；化合物6为首次从人参根和根茎中分离得到；并首次对化合物6，14，19的氢谱信号进行了归属。
关键词人参；化学成分；三七皂苷Fe；人参皂苷Rs2；20-葡萄糖基-人参皂苷Rf传统中药人参Ginseng Radix et Rhizoma系五加科人参属植物人参Panax ginseng C. A. Mey. 的干燥根和根茎[1]，始载于我国历史上第一部记载药物的著作《神农本草经》，列为上品，记载其“味甘，微寒，主补五脏，安精神，定魂魄，止惊悸，除邪气，明目，开心益智，久服轻身延年”，亚洲各国广泛应用，为驰名的补益药之一。
人参的特征性化学成分主要为四环三萜达玛烷型人参皂苷（ginsenoside）[2-3]，具有改善记忆障碍、延缓衰老、提高免疫功能、抗氧化、改善心血管系统功能、抗应激、壮阳等作用，一直是国内外医药领域的研究热点[3]。
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图 1 人参皂苷 Re HPLC 色谱图 A 对照组; B 样品
2. 4 线性关系考察 精密称取人参皂苷 Re 对照 品 0 19、0 95、1 90、3 80、5 70 m g, 置 5 mL 容量瓶 中, 加 甲 醇 溶 解, 定 容, 即 得 浓 度 分 别 为 0 038、 0 190、0 380、0 76、1 14 mg /mL 的 系列 对照 品溶 液。吸取各对照品溶液 10 L, 注入液相色谱仪, 测 定。以峰面积积分值自然对数值 ( lnA ) 对对照品浓 度自然对数值 ( lnC )进行线性回归, 回归方程为 lnA = 1 53 lnC + 14 61, r= 0 999 3; 线性范围: 0 038~ 1 14 m g /mL; 检测限 ( S /N> 3) : 20 ng。 2. 5 精密度试验 吸取浓度为 0. 38 mg /mL 的人 参皂苷 Re 对照品溶液 10 L, 按上述色谱条件重复 进样 6次, RSD = 1. 12% , 表明仪器的精密度良好。 2. 6 稳定性试验 取批号 060801供试品溶液, 在 上述色谱条件下, 精密吸取供试品溶液 10 L, 每隔 2 h进样 1次, 共测定 6次, 峰面积的 RSD = 2. 56% , 表明样品在 12 h内稳定。 2. 7 重现性试验 准确称取批号 060801的样品, 共 5份, 按供试品制备方法处理。分别测定人参皂 苷 Re 的 含 量, 结 果 人 参 皂 苷 Re 平 均 含 量 为 17 78% , RSD = 3. 54% 。 2. 8 加样回收率试验 精密称取批号 060801样 品, 共 6份, 含量为 17. 80% , 分别加入人参皂苷 R e 对照品适量, 样品处理和测定同前, 结果见表 1。 2. 9 样品测定 分别准确称取多批人参茎叶总皂 苷样品, 每批 3份, 样品处理和测定同前, 精密吸取
RSD (% ) 5. 30
3 讨论
在流动相的选择过程中, 曾采用甲醇 水多个梯 度条件, 但均不能达到人参皂苷 R e与其保留时间 邻近干扰成分的完全分离, 选择乙腈 0. 5% 醋酸水 溶液梯度洗脱, 既能做到较好分离, 同时由于醋酸沸 点较低, 也不影响 ELSD 的检测。但在此条件下, 保 留时间过长, 可通过适当增加流速, 以达到缩短分析 时间的目的。
用 HPLC UV 法检测人参皂苷 类成分, 效果 并不理 想。 ELSD 检测器是一种通用型检测器, 可部分弥 补 UV法的缺点。本实验尝试采用 H PLC EL SD 方 法分析人参茎叶总皂苷中人参皂苷 Re 的含量, 取得 了满意的结果。
1 仪器与试剂
1. 1 仪器 岛津 LC 20AD 高效液相色谱仪, 配有 四元 梯 度 泵, Sedex 75 型 ELSD 蒸 发 光 检 测 器; XWK 3A 无油空气压缩机。 1. 2 试剂 人参皂苷 R e对照品 ( 供含量测定用, 中国药品生物制品检定所 ) , 乙腈 ( 色谱纯, DIKMA 公司 ) , 水 ( 高纯水, 自制 ) , 甲醇 ( 分析纯, 中国医药 集团上海化学试剂公司 ) , 人参茎叶总皂苷 (吉林宏 久生物科技股份有限公司 )。
Joum a l o f Pharm aceutica l P ractice V o.l 27 2009 N o. 4
2. 2 供试品液的制备 准确称取人参茎叶总皂苷 12. 33 m g, 置 10 mL 容量瓶中, 以色谱纯甲醇溶解并 加至刻度, 0. 45 m 微孔滤膜滤过, 取续滤液, 备用。 2. 3 系统适应性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂 , 理论板数 按人参皂 苷 Re峰计算不 低于 5 000, 人参皂苷 Re 与相邻色谱峰分离度大于 1 5, 人参皂苷 Re 色谱峰拖尾因子在 0 95~ 1 05内。色 谱图见图 1。
AB STRACT Ob jec tive: T o determ ine quantitativ ely g insenoside R e in tota l g inseno side from stalk and leaf ofPanax ginseng, and to prov ide expe rim ental ev ident fo r tota l g insenoside quality contro l o fPanax ginseng. M ethods: The m e thod w as deve loped w ith the con d ition as follow s: D iam onsil C18 ( 4. 6 mm 25 mm, 5 m ) and D IKM A EasyGuard C18 ( 10 mm 4. 6 mm ) was used as chrom atograph ic column and guard co lum n respective ly. G rad ient e lution was emp loyed w ith the m obile phase of aceton itrile 0. 5% acetic acid/wa ter at a flow ra te of 1 25 mL /m in. ELSD: tem perature o f the drift tube 40 ; gas pressure: 3 4 bar; ga in: 7. R esu lts: The standard curv e: C = 1 191 10- 7A - 0 187 6; the linear range: 0 038~ 1 14 m g /mL, r= 0 999 3; the lim its of detection: 20 ng ( S /N > 3); recovery rate o f the added samp le: 96. 84% ~ 104. 21% . Con clusion: W ith its accuracy, sens itiv ity, reproduc ib ility as w ell as the sim p licity o f samp le preparation, th is m ethod is feasib le for quality contro l of tota l g insenoside from stalk and leaf o fPanax ginseng. K EY W ORDS P anax g inseng; tota l g insenoside; g insenoside R e; H PLC ELSD
基金项目: 总后 十一五 专项项目 ( N o. 06Z024) , 十一五 军队中医 药研发推广专项课题 ( N o. 2006172002) 作 者 简 介: 何 厚 罗 ( 1987 ) , 男, 第 二 军 医 大 学 本 科 学 员. Te:l 15900414117, E m ai:l hh lqw l1@ 163. com 通讯作者: 辛海量 E m ai:l h ailiangxin@ 163. com
摘要 目的: 分析人参茎叶总皂苷中人参皂苷 Re 的含量, 为人参总皂苷的质量控制提供依据。方法: 色谱
柱: D iam onsil C18 ( 4. 6 mm 25 mm, 5 m ), 保护柱: D IKMA EasyG uard C18 ( 10 mm 4. 6 mm ), 流动相: 乙腈
0. 5% 冰醋酸水溶液, 梯度洗脱, 流速: 1. 25 mL /m in; ELSD: 漂移管温度 40 , 载气压力 3. 5 bar, 放大系数为
29 2
2 方法与结果
2. 1 色 谱条 件 色 谱柱: D IKMA D iam onsil C18 ( 4 6 mm 25 mm, 5 m ), 保 护柱: DIKMA E asy G uard C18 ( 10 mm 4. 6 mm ); 流动相: 乙腈 0. 5% 冰 醋酸水溶液; 梯度洗脱: 0~ 45 m in: 乙腈从 18% 梯度 变化至 23% ; 流速: 1. 25 mL /m in; ELSD: 漂移管温度 40 , 载气压力 3. 5 bar, 放大系数为 7。
人参 Panax ginseng C. A. M ey. 是五加科植物, 其多种提取物均被广 泛应用 [ 1] 。人 参茎叶总皂苷 系从人参茎叶 中提取获 得, 具 有抗休克 [ 2~ 6] 、抗衰 老 [ 7] 等多方面的药理 作用 [ 8] 。人参 茎叶总皂苷富 含多种人参皂 苷类成分, 其中人 参皂苷 R e 含量较 高, 可用于对其进行质量控制。由于人参皂苷类成 分中的呈色基团不活泼, 紫外吸收较差, 仅限于短波 长处的吸收可用于检测。但是在检测工作中, 末端 吸收易受试剂影 响, 存在 背景干扰, 采用梯度洗脱 法, 基线漂移严重, 给分析工作带来困难。因此, 应
HE H ou luo1, HUANG Zhang bei1, SHENG Jia yu1, YU E X iao qiang1, L I M in2, X IN H a i liang1, 3 ( 1 D epartment of T rad itional Chinese
M ed ic ine, Second M ilita ry M ed ica lU niversity, Shangha i 200433, China; 2 D epartm ent ofM ilitary H ea lth, N ava lF acu lty, SecondM il itary M edical U niversity, Shangha i 200433, China; 3 546th H ospita l of PLA, U rum qi 841700, China)
总皂苷中人参皂苷 R e 的含量分析方法。
关键词 总皂苷; 人参皂苷 Re; H PLC ELSD
中图分类号: R917
文献标识码: A
文章编号: 1006- 0111( 2009) 04- 0291- 03