脂类提取法
食品脂质提取
一、如何提取食品中的总脂质？1.脂类的共同特点是在水中的溶解度非常小，能溶于有机溶剂中，因此可以根据相似相溶的原理选取合适的有机溶剂提取食品中的脂质。
常用来提取脂类的有机溶剂有乙醚、石油醚、氯仿-甲醇。
(1)乙醚-应用最多，国标采用。
①优点沸点低；溶解脂肪的能力强于石油醚。
②缺点能被2%水饱和，含水的乙醚抽提能力降低；非脂成分的溶解；易燃(2)石油醚-稳定性好，测定较准确①优点沸点高，不易燃；吸收水分少；没有胶溶现象②缺点溶解脂肪的能力弱于乙醚③适用于已烘干磨碎样品，不适用于潮解结块的样品④只能提取游离态脂肪(3)氯仿-甲醇优点一种有效的溶剂，获得的脂质提取物纯净，不仅能提取游离脂，对脂蛋白、磷脂等结合脂的提取效率较高。
2.下面介绍几种提取脂质的方法：(1)索氏提取法：适用于脂类含量较高，结合态脂类含量少或经水解处理过的，样品应能烘干、磨细、不易吸湿结块。
适用于肉制品、豆制品、坚果制品、谷物油炸制品、糕点等食品中粗脂肪的测定。
(2)酸水解法：酸水解法测定的是食品中的总脂肪, 包括游离脂肪和结合脂肪。
适用于各类、各种状态的食品中脂肪测定，不适于测定含磷脂高含糖高的食品。
(3)氯仿/甲醇法：提取效率高，获得的脂质提取物纯净，不仅能提取游离脂，对结合脂的提取也十分有效。
适用于含结合态脂类，特别是含磷脂多的样品。
(4)碱水解法：本法适用于各种液状乳、各种炼乳、奶粉、奶油及冰淇淋等能在碱性溶液中溶解的乳制品，也适用于豆乳或加水呈乳状的食品。
二、如何提取鸡肉、鱼肉中的总脂质，选用什么提取剂？采用氯仿-甲醇法，提取剂为氯仿-甲醇-水的配比为1∶2∶0.8的氯仿-甲醇提取剂。
具体实验步骤如下：➢样品→组织捣碎机捣碎成浆→取10 g →烧杯→加60 mL 甲醇→搅拌2 min→加氯仿30 mL搅拌（先后分两次）→静置2 min →布氏漏斗抽滤→残渣用氯仿抽提→搅拌后抽滤。
➢收集滤液，转移到分液漏斗中，加35 mLZn(AC)2（0.5％），振荡混合充分，放置24 h。
第8章 脂类化合物的提取分离
常用吸附剂有硅酸、氧化铝、氧化镁和硅酸镁等。
离子交换层析是常用的纯化方法。脂类分非离解的、 两性离子的和酸式离解的三种情况，对每一种情况，可 根据它们的极性和酸性的不同进行分离纯化，如 DEAE纤维素可对各种脂类进行一般分离，TEAE-纤维素则对 分离脂肪酸和胆汁酸等特别有用。
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12
H
OH
H
H
OH H
N
C
N
CH2 N
CH N
OC
C
C
C
C
C HC
CO
H3C C
C CH CH2
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CC
CC
CC
CH3 CH2 CH2 COOH
CH2 CH3 CH2 COOH
CH3 CH2 CH
C、肝脏中。其以乳牛及狗 胆汁中含量最高，猪胆汁次之，牛胆汁更次之，羊、兔 皮禽胆汁多含胆绿素。国内多选用猪胆汁为原料，且新 鲜者质量、收率均高。
3．尿素包合法
尿素通常呈四方晶形，当与某些脂肪簇化合时，会 形成包含一些脂肪族物质的六方晶型，许多直链脂肪酸 及其甲酯均易与尿素形成络合物而达到纯化的目的。
饱和脂肪酸比不饱和脂肪酸易与尿素化合，形成稳 定络合物。在实际操作时，将尿素和混合脂肪酸或其甲 酯混在一起，先溶于热的甲醇（或甲醇乙醇混合液）中， 冷却至室温或0℃以结晶，再将络合物和母液分别与水 混合，再按常规用乙醚或石油醚萃取，即可得成品。
食品中脂肪的测定(索氏提取法)实验报告
欢迎共阅1 目的熟练掌握索氏法的原理、操作步骤、注意事项。
2 原理样品用无水乙醚或石油萃取后，蒸去溶剂所得的物质，在食品分析上称为脂肪或粗脂肪。
因为除脂肪外，还含色素及挥发油、蜡、树脂等脂溶性物质。
索氏抽提法所测得的脂肪为游离脂肪。
3 试剂热，使乙醚或石油醚不断回流提取1~1.5h ，一般在条件允许的情况下提取6~12h .6.3 称量取下收集瓶，回收乙醚或石油醚，待收集瓶内乙醚剩1~2mL 时在水浴上蒸干，再于95~1℃干燥20min ，放干燥器内冷却0.5h 后称量m 总’。
7 数据记录7.1 原始数据7.2可疑值弃留实验测得数据均符合一般规律，无可疑值。
7.3整理数据m样（g）m瓶（g）m总’（g）2.0000 114.4616114.797912思考题12.1索氏法测脂肪的注意事项？实样品应干燥后研细，装样品的滤纸筒一定要紧密，不能往外漏样品；实验过程中不能接触明火；样品含水量较低时可选用无水乙醚做为溶剂，样品含水量高是只能选择石油醚做溶剂；在干燥器中的冷却时间一般要一致。
12.2如果样品是湿润的应如何处理？为什么？选择石油醚做为溶剂。
因为氧与水能形成氢键使穿透组织能力降低，使乙醚抽提能力下降；石油醚溶解脂肪的能力虽然比乙醚弱些，但吸收水分比乙醚少，使用时允许样品含有微量水分，没有胶溶现象。
另外可选择罗斯-哥特里法、酸分解法等测定脂肪含量的其他方法。
12.3综述脂肪的测定方法常用的测定方法有：索式提取法、巴布科克法、益勒式法、罗斯-哥特里法、酸分解法。
索式提取法是测定多种食品脂类含量的代表性的方法。
巴布科克法、益勃氏法主要用于乳、及乳制品中脂类的测定，都是用来提取乳制品中的脂肪，也叫湿法提取。
因为样品不需要事先烘干，脂肪在牛。
实验三 粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法
实验三粗脂肪的提取和定量测定—索氏提取法一、实验目的1、掌握粗脂肪的提取方法，熟悉索氏提取法的操作。
2、学习如何测定样品的粗脂肪含量。
3、加深对生物大分子的认识，了解脂肪在生物体中的重要性。
二、实验原理1、粗脂肪提取脂肪具有亲油性，可以被有机溶剂提取。
索氏提取法是一种常用的粗脂肪提取方法。
在索氏提取法中，采用乙醚/醋酸乙酯（1：1）的溶液作为提取剂。
样品加入一定量提取剂中，经过适当的震荡、离心、蒸发浓缩和干燥等步骤，得到脂肪提取物。
将脂肪提取物加入硫酸中，经过酸解、加热、冷却和干燥等步骤后，得到脂肪酸甲酯。
通过气相色谱仪测定脂肪酸甲酯的含量，进而计算出样品中粗脂肪的含量。
三、实验操作（1）取适量已干燥样品，称重，记录质量。
（2）将样品放入索氏提取器的提取篮中，加入10mL乙醚/醋酸乙酯（1：1）溶液。
（3）起动提取器，以回流的方式进行提取，搅拌速度要适中，避免溅出溶液。
（4）提取30分钟后关闭提取器，将提取篮取出，用5mL提取液将其冲洗，并将提取篮放置于洗涤瓶上，使其流干。
（5）将提取篮置于已预热至100℃的蒸发皿内，用热风器将乙醚/醋酸乙酯挥发干燥。
（6）将蒸发皿置于70℃恒温箱中干燥至常重，取出，并记录质量。
（2）将粗脂肪提取物转移到20mL玻璃瓶中，加入2mL浓硫酸。
（3）在冷水浴上，加热约2小时，待样品变成棕色液体后取出，冷却。
（4）加入1mL冰醋酸冷却，混匀。
（5）加入0.2g氯化钠，混匀。
（6）转移待测样品到10mL移液管中。
（7）在10mL皮囊中，加入4mL正己烷，混匀。
（8）离心5分钟，取上层正己烷，并转移到气相色谱管中。
（9）气相色谱条件：柱：DB-23；FID检测器；柱温：120℃；检测器温：250℃。
（10）记录脂肪酸甲酯的含量，并计算出样品中粗脂肪的含量。
四、实验注意事项1、进行实验前，将索氏提取器和蒸发皿等器皿用乙醚或甲醇洗涤，并在烘箱中干燥。
2、在进行气相色谱柱装载前，必须将固定相和管柱内壁进行彻底清洗，以免污染样品。
第七章脂类的测定p93第一节概述
称取混匀试样3-5g注入锥形瓶内，加入混合溶剂50ml，摇动使试样溶解， 再加3滴酚肽指示剂，用0.1mol/L碱液滴定至出现微红色，在30s内不消失，记 下消耗的碱液体积（V）。 结果计算：油脂酸价＝（V×c×56.1）/m 式中：V－滴定消耗的氢氧化钾溶液体积，mL；
乳、脱脂乳等）、各种炼乳、奶粉、奶油及冰其淋等能在 碱性溶液中溶解的乳制品，也适用于豆乳或加水呈乳状的 食品。需采用抽脂瓶。
（3）操作方法： 取一定量样品于抽脂瓶中，加入1.25ml氨水，充分混匀，置于60℃水浴中加热
5min，再振摇2min，加入10ml乙醇，充分摇匀，于冷水中冷却后，加入25ml乙醚， 振摇半分钟，加入25ml石油醚，在振摇0.5min，静置30min，待上层液澄清时，读取 醚层体积，放出一定体积的醚层于一个已恒重的烧瓶中，蒸馏回收乙醚和石油醚，挥 发干残余醚后，放入100-105℃烘箱中干燥1.5h，取出放入干燥器中冷取至室温后称重， 重复操作至恒重。
别适宜于水产品、家禽、蛋制品等食品脂肪的提取。 采用乙醚提取脂类时，必须采用无水乙醚作提取剂，且要求样品必须烘干； 对于结合态脂类，必须预先用酸或碱破坏脂类和非脂成分的结合后才能提
取； 用溶剂提取食品中的脂类时，对样品要求一定的预处理，如粉碎、碾磨，
烘干等，目的是为了增加样品的表面积，减少样品含水量，使有机溶剂更有效 的提取出脂类。
（4）结果计算： 脂肪含量%= (m2-m1)/( m×V1/V) ×100
式中：m2——烧瓶和脂肪总质量，g； m1—空烧瓶质量，g； m—样品质量，g V－读取醚层总体积，mL； V1－放出醚层体积，mL
（5）说明与讨论：
3、巴布科克氏和盖勃氏法 （1）原理：
生化分离 藻类细胞中脂类物质的提取
破碎的方法从原理上分为物理、 化学和生物三类。其中物理法主要包 括高压匀浆、珠磨、超声波破碎、喷 雾撞击破碎、研磨、旋刀式匀浆（机 械破碎）、冻融、低渗裂解等；化学 法主要分为酸碱处理、有机溶剂处理、 表面活性剂处理；而生物法主要以酶 法和自溶法为基础。
结论：无论是萃取脂质或类胡萝卜素都是采用完全破 碎的细胞效果较好
微藻生长到指数生长期末期, 微藻密度达 到最高, 根据微藻的特性选择不同的方法和试剂 将其从培养液中分离出来。同时也要考虑到经济 因素,所以一般采用化学絮凝法、离心法和气浮法 3种方法采收微藻。
微藻中含有大量的水分，而活性物质的含量很 小，因此、收获藻体后应立即进行干燥处理。 对分离和提取不同的活性物质，应选择不同的 干燥方法，通常适用于微藻的方法有喷雾干燥、冷 冻干燥、鼓风干燥、自然风干。 对于性质较稳定的活性物质，通常的干燥方法 都适用； 而对于热敏性的不稳定的活性物质，某些干燥 方法如鼓风干燥很难以保持活性，应采取冻干等低 温干燥方法。
微藻的分离、纯化方法主要有以下几 种: (1) 微吸管分离法
(2) 水滴分离法
(3) 稀释分离法 (4) 平板分离法
关键词： 规模放大
目前微藻的大规模培养主要有3种 方式: 传统的敞开式跑道式培养,封闭 式的光生物反应器培养和封闭式的发 酵罐生产。
微藻生物量的采收过程是生产过程的一个限 制因素,因为正常生产中的藻浓度相对较低, 约为 011～110 g/L ,并且藻细胞很小, 很脆弱, 易受到 损伤破裂。因此, 用常规的动力离心、过滤及自 然沉淀法不能有效地收集藻体。
物理压榨法
萃取
有机溶剂提取法
超临界萃取
超高压提取 生物质解法
油脂药品
化妆品
*
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测定食品脂类的几种常用方法
74 食品安全导刊 2013年4月刊TECHNOlOGy THESIS 科技文苑脂类主要是指食品中包含的脂肪（甘油三酸酯）及一些类脂化合物，如脂肪酸、磷脂、糖脂、甾醇、蜡、固醇、脂溶性维生素等。
鉴于类脂的脂溶性，类脂常看成为油脂的伴随物质。
大多数动物性食品及某些植物食品（如种子、果仁、果实）都含有天然脂肪或类脂化合物。
食品中脂肪的存在形式有游离态的，如动物性脂肪及植物性的油脂，也有结合态的，如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白中的脂肪及某些加工食品（如焙烤食品及麦乳精等）。
游离态的脂肪是主要的，结合态脂肪含量较少。
脂肪是食品中重要的营养成份之一，是食品中具有最高能量的营养素，提供的能量比碳水化合物或蛋白质要多一倍以上，能提供必需的脂肪酸，是脂溶性维生素的含有者和传递者，脂肪与蛋白质结合生成的脂蛋白，在调节人体机能和完成体内生化反应方面都起者十分重要的作用，但过量摄入脂肪对人体健康是不利的。
在食品生产过程中，脂类含量对于产品风味、组织结构、品质、外观、口感等都有直接的影响。
故在含脂肪的食品中，其含量都有一定的规定，是食品质量测定食品脂类的几种常用方法□ 陆翠珍 江苏省张家港市产品质量监督检验所 李 英 不二制油（张家港）有限公司江苏摘 要：本文简要介绍了测定食品脂类含量的几种常用方法，对索氏抽提法（索克列特抽提法）、酸水解法、罗紫－哥特里法（碱性乙醚法）和氯仿－甲醇提取法四种方法的操作注意事项进行了说明。
指出在实际食品检验工作中，应根据不同的样品特点选择适当、合理的检验方法，提高油脂含量的检测精度。
关键词：食品 脂类 检测方法管理中的一项重要指标。
测定食品中的脂肪含量，可以用来评价食品的品质，衡量食品的营养价值，而且对实行工艺监督、生产过程中的质量管理、研究食品的贮藏方式是否恰当等方面都有重要意义。
测定食品中脂肪的含量，可以作为鉴别食品品质，评定营养标签成份的一个重要指标。
脂肪含量的测定有很多方法，如索氏抽提法（索克列特抽提法）、酸水解法、罗紫－哥特里法（碱性乙醚法）、氯仿－甲醇提取法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等，它们各有特点，在实际生产应用中主要还是以前4种居多。
粗脂肪提取―索氏(Soxhlet)提取法
粗脂肪提取―索氏（Soxhlet）提取法
原理
本法为重量法，用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量。
该法适用于固体
和液体样品，通常将样品浸于脂肪溶剂，如乙醚或沸点为30-60度的石
油醚，借助于索氏提取管进行循环抽提。
本法提取的脂溶性物质为脂
肪类似物的混合物，其中含有脂肪，游离脂肪酸，磷脂，酯，固醇，
芳香油，某些色素及有机酸等，因此，称为粗脂肪。
用该法测定样品含油量时，通常采用沸点低于60度的有机溶剂，此时，样品中结合状态的脂类（脂蛋白）不能直接提取出来，所以该法又称
为游离脂类定量测定法。
步骤
1. 样品的准备
将花生在80度烘箱内烘去水分，烘干时需避免过热，冷却后准确地称
取1克左右放入研钵中研碎，再用滤纸将样品包裹好放入索氏提取管内。
注意勿使纸包内样品高于提取管的虹吸部分，研磨后的研钵应用滤纸
擦净并将滤纸放入提取管内，用少量溶剂洗涤研钵，将溶剂倒入提取
管中
4. 抽提
1.1 洗净提取瓶于105度烘干至恒重，1.2 记下其重量。
装入石油醚达
提取瓶容积的一半，1.3 连
接提取器各部分，不能漏气（不能用环士林或真空脂）。
2.2 加热提取：使石油醚每小时循环10-20次，约2-2.5小时，用滤纸
粗略判断脂肪是否提取完全。
2.3 蒸去石油醚，烘干至恒重。
4. 称量计算
粗脂肪%=脂肪重&pide;样品重×100%。
索氏抽提法提取粗脂肪适用于什么样品
索氏抽提法提取粗脂肪适用于什么样品索氏抽提法提取粗脂肪适用于脂类含量较高，结合态的脂类含量较少，能烘干磨细，不易吸湿结块的样品。
特点：操作简单，易提取，试验结果简单计算。
索氏抽提法，用于粗脂肪含量的测定。
脂肪广泛存在于很多植物的种子和果实中，测定脂肪的含量，可以作为判别其品质优劣的一个指标。
脂肪含量的测定有很多方法，如抽提法、酸水解法、比重法、折射法、电测和核磁共振法等。
目前国内外普遍采纳抽提法，其中索氏抽提法（Soxhlet extractor method）是的经典方法，也是我国粮油分折的标准方法。
试验原理采纳索氏抽提法中的残余法，即用低沸点有机溶剂（或石油醚）回流抽提，除去样品中的粗脂肪，以样品与残渣重量之差，计算粗脂肪含量。
由于有机溶剂的抽提物中除脂肪外，还或多或少含有游离脂肪酸、甾醇、磷脂、蜡及色素等类脂物质，因而抽提法测定的结果只能是粗脂肪。
试验料子油料作物种子、中速滤纸仪器装置（1）索氏脂肪抽提器或JT—SXT—06型油分测定器（2）干燥器（直径15～18cm，盛变色硅胶）（3）不锈钢镊子（长20cm）（4）培育皿（5）分析天平（感量0.001g）（6）称量瓶（7）恒温水浴（8）烘箱（9）样品筛（60目）试剂无水或低沸点石油醚（A.R.）试验步骤（1）切片将滤纸切成8cm×8cm，叠成一边不封口的纸包，用硬铅笔编写顺序号，按顺序排列在培育皿中。
将盛有滤纸包的培育皿移入1052℃烘箱中干燥2h，取出放入干燥器中，冷却至室温。
按顺序将各滤纸包放人同一称量瓶中称重（记作a）、称量时室内相对湿度低于70%。
（2）包装干燥在上述已称重的滤纸包中装入3g左右研细的样品，封好包口，放入1052℃的烘箱中干燥3h，移至干燥器中冷却至室温。
按顺序号依次放入称量瓶中称重（记作b）。
（3）抽提将装有样品的滤纸包用长镊子放入抽提筒中，注入一次虹吸量的1.67倍的无水，使样品包浸没在中。
连接好抽提器各部分，接通冷凝水水流，在恒温水浴中进行抽提，调整水温在70～80℃之间，使冷凝下滴的成连珠状（120～150滴/min或回流7次/h以上），抽提至抽取筒内的用滤纸点滴检查无油迹为止（约需6～12h）。
粗脂肪的提取和定量测定--索氏提取法[1]
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四、实验器材
1、托盘天平
2.恒温水浴锅
3.101C-3型电热鼓风干燥箱
4.索氏提取仪
由冷凝管、抽提管和 平底烧瓶三个部件组 成，通过标准磨口相 对接。
提取瓶
提取管
冷凝器
搭建装置：用铁架台、２只十字夹、２只龙爪、 ２根乳胶管和１套索氏提取仪来搭建装置。注 意按照由下而上的顺序来搭建。固定点分别是 平底烧瓶的颈部和提取管的颈部，索氏提取仪 的高度以平底烧瓶的瓶颈略高于恒温水浴锅的 液面为宜。 注意：用龙爪夹玻璃仪器时，要先用手找好感 觉，不能太紧（否则会夹破）也不能太松（否 则会打滑而导致索氏提取仪的标准磨口接口漏 气）。
5.其它器材：
不锈钢镊子、药勺、 滤纸、铁架台、十字 夹、龙爪、手套、乳 胶管。
五、实验试剂
①.花生仁。 ②.石油醚：C.P.，沸程30～60℃。
六、实验操作流程图
①平底烧 瓶质量 ②花生颗 粒质量 称样 折滤纸斗 滤纸斗 高度低 于提取 管上弯 头部 从下至 上安装 搭索氏提取仪装置，并 置于80℃水浴锅中
平底烧 样品质 平底烧 粗脂质 虹吸时 提取 瓶质量 量（g） 瓶+粗 量（g） 间（min） 次数 （g） 脂质量
（ g）
样品中 粗脂的 含量
（%）
75.55
2.6
76.61
1.06Βιβλιοθήκη 91840.77
粗脂的质量 100 % 样品的质量 76 .61 - 75.55 1.06 W 100 % 100 % 40 .77% 2.6 2.6 样品粗脂的含量(%)
索氏抽提法测定脂肪最大的不足是耗时过长，如能将 样品先回流1～2次，然后浸泡在溶剂中过夜；次日再 继续抽提，则可明显提高提取率。
食品中脂类成分的提取与纯化技术
食品中脂类成分的提取与纯化技术食品是人们日常生活中必不可少的一部分，而其中脂类成分在其口感、风味和保健功能中起着重要作用。
然而，脂类成分的提取和纯化一直是个有挑战性的任务。
本文将介绍一些现代化的提取和纯化技术，并探讨其在食品工业中的应用。
一、脂类成分的重要性脂类是食品中重要的营养成分，它们提供能量和脂溶性维生素，同时也参与细胞膜组成、激素合成和脂肪酸的传递等生理功能。
然而，食品中的脂类往往与其他成分混杂在一起，如蛋白质、碳水化合物和水等。
因此，为了有效利用和应用食品中的脂类成分，需要对其进行提取和纯化处理。
二、传统提取技术传统的脂类提取技术主要包括溶剂提取、冷榨和水浸提取等。
溶剂提取是一种常见的方法，通过有机溶剂（如乙醚、氯仿等）与食品样品中的脂类溶解并分离。
虽然这种方法可以得到较高的脂类提取率，但需要大量有机溶剂，对环境造成了一定的负担。
冷榨和水浸提取方法则更加环保，适用于某些特定的食品种类，如橄榄油和豆浆等。
然而，这些传统技术存在着提取时间长、较低的提取效率和较高的成本等问题，需改进。
三、现代化的提取技术随着科学技术的进步，现代化的脂类提取技术应运而生。
其中，超临界流体提取技术被广泛应用于食品工业中的脂类提取。
超临界流体是介于气体和液体之间，具有较高扩散性和溶解性的物质。
利用超临界流体（如二氧化碳）进行提取，可以显著提高提取效率和速度，并减少对环境的负面影响。
该技术可应用于提取各种食品中的脂肪，如油脂、乳制品和肉类等。
另外，固相微萃取（SPME）也是一种快速和高效的提取方法。
SPME是一种将有机物质从样品中吸附到固定相材料上再进行分析的技术。
采用SPME技术，可以在不使用溶剂的情况下，快速提取和富集食品中的脂类成分。
这种技术操作简便、环保，并且能够提供高度准确的分析结果。
四、纯化技术的应用脂类成分的纯化是提取后的重要步骤，用于去除杂质和提高脂类的纯度。
传统的纯化方法包括溶剂萃取、膜分离和结晶等。
脂质的提取及薄层层析
脂质的提取及薄层层析一、实验目的1. 了解薄层层析的原理及操作方法2. 掌握从蛋黄中提取脂类物质的方法，了解其脂类物质的组成成分。
二、实验原理1. 薄层层析原理薄层层析是吸附层析的一种，是利用被分离混合物中各组分在两相中吸附能力的大小不同而分离的。
固定相：玻璃薄板上均匀涂抹的吸附剂薄层，通常使用硅胶G。
流动相：展层剂，通常为有机溶剂。
2. 生物组织中脂类物质的提取生物组织中含有多种脂质成分，包括三酰甘油，胆固醇，脑磷脂和卵磷脂等，多与蛋白质合成疏松的复合物，要将这类脂质提取出来并与蛋白质分离，所用抽提液必须包含亲水性成分和具有形成氢键的能力。
氯仿-甲醇混合液，就符合生物组织中脂质提取的要求。
生物组织脂质提取液，经过多次水洗，弃去含蛋白质的水层，留下溶有脂质的氯仿层，所提取的脂类即可以在铺有硅胶G的玻璃板上进行薄层层析。
三、实验试剂1. 硅胶G（200目）、氯仿、甲醇、乙酸钠、无水Na2SO4等2. 展层剂：氯仿：甲醇：乙酸：水=170:30:20:7（v/v）四、实验操作1. 蛋黄中脂质的提取称取煮熟蛋黄2g，在研钵中磨细，另取5倍量的氯仿-甲醇（2：1，v/v）混合溶剂，边研磨，边缓慢加入混合溶剂，提取10分钟。
然后，经滤纸过滤到刻度试管中，于滤液中加入1/2体积的水，振摇后静置，溶剂逐渐分为两层，上层为水层，下层为氯仿层，弃去水层，留下氯仿层，继续水洗三、四次，同样弃去水层，再加少量的无水Na2SO4，吸取残留水分，直至溶液透明澄清，此澄清液即可供脂质薄层层析点样用。
2. 铺板，层析薄板的制备称取3-4g的200目硅胶G，加5~6ml，磨匀，铺板，然后令其自然干燥，再放入烘箱中，在110℃活化30min，保存于干燥器中备用。
3. 点样：在烘干活化的硅胶G板上，于距底部2cm处，用毛细管点上蛋黄提取液，点样直径不要大于3cm，然后用冷风吹干。
4. 展层：展层缸中装展层剂约1cm深，将已点样的硅胶板放入展层缸中，展层，至展层液前沿到达薄层顶端约2cm处时，即可取出硅胶板，记下展层剂前沿线，用热风吹干。
Bligh-Dyer脂类提取法
Extraction of Lipids in Solution by the Method of Bligh & Dyer (Bligh,E.G. and Dyer,W.J. 1959. A rapid method for total lipid extraction and purification.Can.J.Biochem.Physiol. 37:911-917.)Use new (or solvent-cleaned) all-glass tubes:1. For each 1 ml of sample, add 3.75 ml 1:2 (v/v) CHCl3:MeOH and vortex well. If you will be subjecting the lipids to GC analysis, this solvent should include the final amount of internal standard (e.g., 5 µg β-sitosterol).2. Then add 1.25 ml CHCl3 and vortex well.3. Finally add 1.25 ml dH2O and vortex well.4. Centrifuge at 1000 RPM in IEC table-top centrifuge for 5 min at room temperature to give a two-phase system (aqueous top, organic bottom).5. Recover the bottom phase as follows: insert Pasteur pipette through the upper phase with gentle positive-pressure (i.e., gentle bubbling) so that the upper phase does not get into the pipette tip. When pipette tip is at the bottom of the tube, carefully withdraw bottom phase through the pipette, making sure to avoid interface or upper face (should only try to recover~90% of bottom phase, not all of it).The table below shows proportions for different volumes of sample:Sample 0.2 ml 0.5 ml 1 ml 1.5 ml 2 ml 3.5 ml 1:2 CHCl3:MeOH 0.750 1.9 3.75 5.7 7.5 13.125 CHCl30.250 0.625 1.25 1.875 2.5 4.375 dH2O 0.250 0.625 1.25 1.875 2.5 4.375 Total volume 1.45 3.65 7.25 10.95 14.50 25.3756. If you need a very clean preparation, you should "wash" the recovered bottom phase with "authentic upper phase" as follows:a. Prepare "authentic upper phase" as follows: in a large glass tube or multiple normal-sized tubes, run multiple tubes of the procedure above using dH2O in place of sample. Collect the upper phase and store in a tube.b. Add your recovered bottom phase from step #5 above to a tube and then add the appropriate amount (sample + dH2O volume) of "authentic upper phase." For example, if you did a 1-ml sample prep, you add ~2.25 ml of "authentic upper phase."c. Vortex well, centrifuge, and collect bottom phase as above.。
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（二） 适用范围与特点
• 适用于脂类含量较高，结合态脂类含量少或经
水解处理过的，（结合态已转变成游离态），
样品应能烘干，磨细，不易吸湿结块。
• 此法经典，对大多数样品的测定结果比较可靠。
但费时长（8—16 h）溶剂用量大，需要专门 的仪器,索氏提取器。
（三） 测定方法
滤纸筒的制备→ 样品制备→ 索氏提取器的准备 → 抽提→ 回收溶剂
§2 脂类的测定方法
一、索氏提取法（索克斯列特抽提法）
（一）原理
将经前处理的、分散且干燥的样品用乙醚或石油
醚等溶剂回流提取，使样品中的脂肪进入溶剂中，
回收溶剂后所得到的残留物，即为粗脂肪。 一般食品用有机溶剂浸提，挥干有机溶剂后得到 的重量主要是游离脂肪，此外，还含有磷脂、色 素、树脂、蜡状物、挥发油、糖脂等物质，所以 用索氏提取法测得的脂肪，也称粗脂肪。
而水果蔬菜棚S肪含量很低。几种食物100 g中脂肪含
量(g)如下：
猪肉(肥) 花生仁 柠檬 牛乳 90.3 39.2 0.9 3 以上 核桃 青菜 苹果 香蕉 66.6 0.2 0.2 0.8
全脂炼乳 8 以上
全脂乳粉 25～30
这些含量是指用乙醚提取的脂类总量。
二、脂类物质的测定意义
脂肪是食品中重要的营养成分之一。脂肪可
1. 滤纸筒的制备
滤纸裁成8cm×15cm大小，以直径位2.0cm的大试 管为模型，将滤纸紧靠试管壁卷成 圆筒型，把底端封口，内放一小片 脱脂棉，用白细线扎好定型，在 100~1050C烘箱中烘至恒量（准确至 0.0002g）。
2. 样品处理
固体样品：精密称取干燥并研细的样品 2～5g（可取测定水分后的样品)，必要 时拌以海砂，无损地移入滤纸筒内。 半固体或液体样品：称取5.0一10.0g于蒸发 皿中，加入海砂约20g于沸水浴上蒸干后， 再于95—105℃烘干、研细，全部移入滤 纸筒内，蒸发皿及粘附有样品的玻璃棒 都用沾有乙醚的脱脂棉擦净，将棉花一 同放进滤纸筒内。
• 脂类的测定：
食品中脂肪存在形式：有游离态的，如 动物性脂肪及植物性油脂；也有结合态 的，如天然存在的磷脂、糖脂、脂蛋白 及某些加工品（如焙烤食品及麦乳精等） 中的脂肪，与蛋白质或碳水化合物形成 结合态。对大多数食品来说，游离态脂 肪是主要的，结合态脂肪含量较少。 脂类的提取：脂类不溶于水，易溶于有 机溶剂。测定脂类大多采用低沸点的有 机溶剂萃取的方法。常用的溶剂有乙醚、 石油醚、氯仿—甲醇混合溶剂等。
样品的予处理
1. 固体样品要粉碎，颗粒大小要合适，注意粉碎 过程中的温度，防止脂肪氧化。 2.样品要干燥 温度低——酶活力高，脂肪易降解。 温度高——脂肪易氧化成结合态。 较理想的方法是冷冻干燥法。 易结块的样品，加入4~6倍的海砂；含水高的 样品加入无水硫酸钠，使样品成粒状。 3. 酸水解 对于乙醚不能渗入内部的或含结合态脂肪。
脂类的共同特点是在水中的溶解度非常小，能溶
于脂肪溶剂中，再根据相似相溶的规律具体选择。
• 常用测定脂类的有机溶剂：
1. 乙醚
（有一定极性，但不如乙醇、甲醇、水等）溶解 脂肪的能力强，应用最多。GB中关于脂肪含 量的测定都采用它作提取剂。 乙醚沸点低（34.6℃），易燃。
乙醚可饱和2%的水。含水乙醚在萃取脂肪 的同时，会抽提出糖分等非脂成分。
第八章 脂类的Biblioteka 定§1 概 述脂肪 （真脂）
一、食品中的脂类 类脂质（脂肪酸、磷 脂、糖脂等）油脂的 伴随物。 大多数动、植物食品都含有天然脂肪或类脂化合物， 但含量各不相同。食品中的脂类：主要包括脂肪 （甘油三酸酯）以及一些类脂，如脂肪酸、磷脂、 糖脂、甾醇、脂溶性维生素、蜡等。 物质和脂肪含量
植物性或动物性油脂中脂肪含量最高，
索氏抽提取器的准备 索氏抽提取器是由回流冷凝管、提 脂管、提脂烧瓶三部分所组成，抽 提脂肪之前应将各部分洗涤干净并 干燥，提脂烧瓶需烘干并称至恒量
3. 抽提
将装有试样的滤纸筒放入带有虹吸管的提脂 管中，由冷凝管上端倒入乙醚或石油醚，使 提脂烧瓶中乙醚量约为烧瓶体积2/3。在恒 温水浴中抽提，控制每分钟滴下乙醚80滴左 右（夏天约控制650C，冬天约控制800C）， 抽提3~4h至抽提完全（视含油量高低，或 8~12h，甚至24h）。可用滤纸或毛玻璃检查， 由提脂管下口滴下的乙醚滴在滤纸或毛玻璃 上，挥发后不留下痕迹。
为人体提供必需脂肪酸；脂肪是一种富含热能营
养素，是人体热能的主要来源，每克脂肪在体内 可提供 37.62 kJ(9 kcal) 热能，比碳水化合物和 蛋白质高一倍以上； 是食物中能量最高的营养素。 但是摄入过量对人体健康不利！ 脂肪 = 甘油（丙三醇） + 脂肪酸
脂肪在食品中的作用： 脂肪是食品中重要的营养成分之一，脂肪 可为人体提供必需脂肪酸； 脂肪是一种富含热能营养素，是人体热能 的主要来源； 脂肪是脂溶性维生素的良好溶剂，有助于 脂溶性维生素的吸收； 脂肪与蛋白质结合生成脂蛋白，在调节人 体生理机能和完成体内生化反应方面都起 着十分重要的作用。
• 所以必须用无水乙醚作提取剂，被测样品也要 事先烘干。
2. 石油醚
石油醚的沸点比乙醚高，不太易燃，溶解脂肪
能力比乙醚弱，吸收水分比乙醚少，允许样品
含微量的水分。
有时也采取乙醚+石油醚共用。 但乙醚、石油醚都只能提取样品中游离态的脂肪。
• 对于结合态的脂类，必须预先用酸或碱及乙醇 破坏脂类与非脂类的结合后，才能提取。 3. 氯仿—甲醇 一种有效的溶剂，对脂蛋白、磷脂提取效率较 高。特别适用于水产品、家禽、蛋制品中脂肪 的提取。
在食品加工生产过程中，原料，半成品， 成品的脂类含量对产品的风味、组织结构、 品质、外观、口感等都有直接影响，所以脂 肪含量是一项重要的控制指标。因此，在含 脂肪的食品中，其含量都有一定的规定，是 食品质量管理中的一项重要指标。测定食品 的脂肪含量，可以用来评价食品的品质，衡 量食品的营养价值，而且对实行工艺监督， 生产过程的质量管理，研究食品的储藏方式 是否恰当等方面都有重要的意义。
？为什么要用水浴加热？能否用明火？ ？如何检验脂肪是否抽提完全？