高效液相色谱法剖析
第2章 高效液相色谱分析法
4. 选择流动相时应注意的几个问题
（a）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质 长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。
（b）避免流动相与固定相发生作用而使柱效下降或损坏 柱子。（如使固定液溶解流失；酸性溶剂破坏氧 化铝固定相等。）
（c）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉 淀并在柱中沉积。
信号采集/转换器
检测器
A泵
B泵
(2) 梯度洗脱装置
•利用两台高压输液泵，将两种 不同极性的溶剂按一定的比例送 入梯度混合室，混合后进入色谱 柱。
•可以根据设定的程序改变溶剂 配比，从而改变流动相的极性。
(3) 进样装置
流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置， 其结构如图所示：
a. 准备状态：样品装入样品环，流动相不进入样品环； b. 进样状态：流动相流进样品环，将样品带入色谱柱。
液-液分配及离子对分离固定相
（1）全多孔型载体 由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体；早期采
用100μm的大颗粒，表面涂渍固定液，性能不佳已不多见； 现采用10μm以下的小颗粒，化学键合制备柱填料。
（2）表面多孔型载体 （薄壳型微珠担体） 30～40μm的玻璃微球，表面附着一层厚度为1 ～ 2μm的
(4) 高效分离柱
柱体为直型不锈钢管，内径1～6 mm，柱长5～40 cm。 发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
分离柱填充物的种类多样，分离机理各不相同，可将高 效液相色谱法分为：液固吸附色谱法，液液分配色谱法，化 学键合色谱法，离子交换色谱法等。（后面详细讲解）
(5) 液相色谱检测器
a. 紫外-可见光检测器 应用最广，有紫外-可见光吸收的有机化合物均可检测。 工作原理类似紫外-可见分光光度计，基于朗伯比尔定率： A=lg(1/T)=kc A -- 吸光度 c -- 样品浓度
高效液相色谱分析法剖析课件
高效液相色谱法的应用领域
药物分析
用于药物的分离、纯化 和含量测定，以及药物
代谢产物的分析。
食品安全
用于食品中农药残留、 添加剂、毒素等的检测。
环境监测
用于水体、土壤、大气 中污染物和痕量有机物
的分析。
生物分析
用于蛋白质、多肽、核 酸等生物大分子的分离
和测定。
高效液相色谱法的优势与局限性
优势
高分离效能、高灵敏度、高选择性、 可在室温下进行分离、可分析复杂样 品等。
通过高效液相色谱法，可以测定食品中的维生素、矿物质等营养成 分的含量。
食品污染物分析
高效液相色谱法能够检测食品中的有害物质，如农药残留、重金属等， 保障食品安全。
环境样品分析
01
水中有机物分析
高效液相色谱法可用于检测水中 的有机污染物，如酚类、苯胺类 等，有助于水质的监测和控制。
02
大气中气态污染物 的分离
样品保存
选择适当的保存方法，确 保样品在分析前不会变质。
样品处理
根据分析目的，对样品进 行适当的预处理，如离心、 过滤、萃取等。
建立色谱条件
选择色谱柱
根据待测物的性质选择合适的色谱柱类型和规格。
确定流动相
根据待测物的性质确定合适的流动相组成，包括溶剂、比例、pH 值等。
设置检测器
根据待测物的性质选择合适的检测器类型，如紫外可见光检测器、 荧光检测器等。
高效液相色分析法剖析
• 高效液相色法概述 • 高效液相色系的成 • 高效液相色操作流程
01
高效液相色法概述
定义与原理
定义
高效液相色谱法（HPLC）是一种分离和分析复杂样品中各组 分的方法，基于不同组分在固定相和流动相之间的分配平衡 原理。
高效液相色谱技术的原理和分析方法
高效液相色谱技术的原理和分析方法高效液相色谱(HPLC)技术是一种广泛应用于化学、生物、环境等领域的分析方法，它以其高效、灵敏、准确的特点被广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。
本文将介绍高效液相色谱技术的原理和分析方法，并对其在不同领域的应用进行探讨。
高效液相色谱技术是基于溶液中成分在固定相(常为填充在柱中的颗粒状材料)和流动相共同作用下的分离原理。
在HPLC中，流动相(溶剂)通过高压泵送到色谱柱中，样品溶解于流动相中，通过在固定相上的分配和吸附作用，实现目标物质的分离。
与传统色谱技术相比，HPLC表现出更高的分离效率和灵敏度。
在HPLC中，选择合适的固定相是至关重要的。
常用的固定相有反相色谱柱、离子交换色谱柱等。
反相色谱柱常用于非极性、中极性物质的分离，离子交换色谱柱则常用于带电物质的分离。
根据目标物质的特性和要求，选择合适的固定相能够提高分离效果和分析速度。
在高效液相色谱中，样品的检测通常通过紫外-可见光谱仪进行。
紫外-可见光谱仪通过测量样品在特定波长下的吸光度来获得样品的浓度信息。
除了紫外-可见光谱，还可以使用荧光检测器和质谱检测器等进行检测。
在实际应用中，高效液相色谱常常与其他分离技术结合使用，以提高检测的准确性和灵敏度。
例如，将色谱柱与质谱联用可以更准确地确定目标物质的结构和分子量。
此外，还可以将预处理技术与HPLC联用，例如对样品进行前处理、固相萃取等，以提高样品的净化效果和分析效率。
高效液相色谱技术在不同领域有着广泛的应用。
在药物分析领域，HPLC常常用于制药过程中的质量控制和药物代谢研究。
在环境监测领域，HPLC被用于分析环境中的有机污染物、重金属等。
在食品安全领域，HPLC可以用于检测食品中的添加剂、农药残留等。
总之，高效液相色谱技术因其高效、灵敏、准确的特点，在化学、生物、环境等领域得到了广泛应用。
通过选择合适的固定相、检测方法以及与其他分析技术的结合，可以更好地实现对目标物质的分离和定量分析。
高效液相色谱法讲解
进样针
用于抽取和注射样品，需 保持清洁并避免交叉污染。
进样阀
切换进样状态，使样品进 入色谱柱或废液瓶。
色谱柱及填料选择
色谱柱类型
根据分离需求选择合适的色谱柱，如 反相色谱柱、正相色谱柱、离子交换 柱等。
填料粒径
填料类型
根据分离机制和样品性质选择合适的 填料，如C18、C8、氨基柱等。
影响色谱柱的分离效果和柱压，常用 填料粒径有3μm、5μm、10μm等。
检测系统
检测器
数据处理系统
将色谱柱分离后的组分转化为电信号进行 检测，常用的有紫外可见检测器、荧光检 测器、电化学检测器等。
采集、处理色谱数据，包括峰高、峰面积 、保留时间等，并输出结果。
检测池
光源
用于放置检测器，保持恒温并避免气泡产 生。
为检测器提供稳定的光源，确保检测结果的 准确性和稳定性。
03 高效液相色谱法实验操作
样品前处理与制备
样品提取
根据样品性质选择合适的 溶剂进行提取，确保目标 化合物能够充分溶解。
样品净化
采用固相萃取、液液萃 取等方法去除杂质，提 高目标化合物的纯度。
样品浓缩
通过蒸发、氮吹等方式将 样品浓缩至一定体积，便
于后续进样操作。
制备标准品
根据需要制备不同浓度 的标准品，用于后续定
量分析和质量控制。
质量控制
对实验过程进行质量控制，包括重 复性实验、加标回收实验等，以确
保实验结果的可靠性和准确性。
实验注意事项
01
02
03
04
仪器校准
定期对高效液相色谱仪进行校 准，确保仪器处于最佳工作状
态。
试剂与耗材选择
选择高质量的试剂和耗材，避 免对实验结果产生干扰。
高效液相色谱技术分析
高效液相色谱技术分析一、概述高效液相色谱技术是目前分析化学中非常重要的一种分离、检测方法，其应用范围广泛，可以用于药物研究、食品安全、环境污染、生物化学等多个领域。
本文将对高效液相色谱技术进行详细解析，包括其基本原理、仪器设备、应用实例等方面的内容。
二、高效液相色谱技术的基本原理高效液相色谱技术本质上是一种液相色谱技术，其最大的特点是加入了固定化液相。
在传统的液相色谱技术中，液相是直接涂覆在固定相上的，但在高效液相色谱技术中，为了提高色谱分析的效率，常常采用小粒径、高孔径的固相材料作为载体，然后用一定的方法将液相固定在上面。
这种固相材料具有很好的化学稳定性、较大的表面积，可以大大提高分离的精度和速度。
高效液相色谱技术的基本原理是：将样品（物质混合物）经过预处理后，加入到经过固定化液相的柱子中，然后进行溶剂梯度洗脱。
不同成分会根据吸附力、分配系数等量而移动到固相柱某个位置处，从而完成分离和检测的过程。
三、高效液相色谱技术的主要仪器设备1. 高效液相色谱柱高效液相色谱柱是高效液相色谱仪的核心器件，其主要作用是分离洗脱样品中的组分。
市面上常见的柱子材料主要有C18、C8、C4等不同类型，根据分析需要选择不同类型的柱子可以获得更好的分离效果。
同时，考虑柱子长度、直径等因素也是仪器的主要参数。
2. 色谱系统高效液相色谱系统由进样器、泵、检测器、色谱柱等多个部分组成，其中，泵的作用是将流动相压力输送到柱子中，进样器用于自动或手动进样，检测器用于检测分离的组分及其浓度。
同时，为了避免进样到色谱柱之前的样品混合和体积效应，需加滤器、混合器等附件。
3. 检测器高效液相色谱检测器常见的有UV-Vis分光光度计、荧光检测器、光散射检测器等多种类型，这些检测器可以用于分析化学、生物化学等领域。
四、高效液相色谱技术的应用实例1. 分析药物高效液相色谱技术可以用于药物分析，如对丙磺舒钠等药物分析可采用该技术，可获得极好的分离效果和灵敏度。
分析化学高效液相色谱法
分析化学高效液相色谱法高效液相色谱法（HPLC）是一种分离和测定化学物质的重要分析方法，具有高分离效率、高灵敏度、宽线性范围和广泛的应用范围等优点。
下面将从仪器原理、工作原理和应用等方面对HPLC进行详细分析。
一、仪器原理：HPLC仪器主要由溶剂系统、进样器、柱温箱、液相分离柱、检测器和数据处理系统等组成。
1.溶剂系统：通常采用双头柱泵供应稳定的流动相。
溶剂通过比例调节阀混合形成所需的溶剂混合物。
2.进样器：它将少量的样品溶液注入到流动相中，通常使用自动进样器进行样品进样。
3.柱温箱：控制流动相的温度，以提高分离的效果。
柱温一般在室温到高温之间进行控制。
4.液相分离柱：是HPLC的核心部分，其中填充有液相固定相。
根据不同的分析目标和样品性质，可以选择不同类型的液相柱，如反相色谱柱、离子交换柱等。
5.检测器：常见的检测器有紫外-可见光谱检测器（UV-VIS）、荧光检测器、折射率检测器等。
根据不同化学物质的性质和要求，可以选择不同的检测器。
6.数据处理系统：包括记录和处理仪器所得到的信号。
常见的数据处理系统有计算机数据采集系统，可以进行数据的分析和处理，生成相应的色谱图。
二、工作原理：HPLC通过运用固定相与移动相之间的亲疏水性差异来实现化学物质的分离。
样品在液相中与固定相发生相互作用，不同化合物的相互作用程度不同，因此在液相中呈现出不同的流动速度。
根据样品分离的顺序，不同的化合物在一定时间内通过液相分离柱，进而被检测器检测到。
HPLC中的流动相一般由溶剂和缓冲液组成，并通过色谱柱中的固定相将待测试的物质分离开来。
其中，缓冲液（通常称为背后电解质）可以调节流动相的pH值，改变待测试物质的性质，从而影响其分离。
三、应用：HPLC广泛应用于药物分析、环境监测、食品安全和生化分析等领域。
1.药物分析：HPLC可以用于药物分析中，以检测药物的含量、纯度和杂质成分。
药物的测定可以通过校准曲线来进行分析。
2.环境检测：HPLC可以用于环境监测中，例如水质分析、大气污染物分析等。
高效液相色谱分析(主要分离类型与原理)课件
• 高效液相色谱分析简介 • 高效液相色谱的主要分离类型 • 高效液相色谱的分离原理 • 高效液相色谱分析实验操作与注意事项 • 高效液相色谱分析的应用实例
目录
Part
01
高效液相色谱分析简介
高效液相色谱分析的定义
高效液相色谱分析（HPLC）是一种分离和检测复杂样品中各种组分的方法。它利用不同 物质在固定相和流动相之间的分配平衡来实现分离。
THANKS
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ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Part
03
高效液相色谱的分离原理
高效液相色谱的固定相与流动相
固定相
是色谱柱中的填充物，用于吸附 和固定样品中的组分。常见的固 定相包括硅胶、氧化铝、活性炭 等。
流动相
是携带样品通过色谱柱的液体或 气体，与固定相相互作用，使各 组分得以分离。
高效液相色谱的分离过程
样品在流动相中溶解并被 带入色谱柱。
实验操作前的准备
实验器材与试剂准备
确保所需的色谱柱、检测器、流动相 、样品等都已准备好，并确保试剂的 质量和纯度。
实验条件设定
仪器校准与维护
确保色谱仪器的准确性和稳定性，进 行必要的校准和日常维护。
根据实验需求，设定合适的流动相比 例、流速、检测波长等参数。
实验操作步骤与要点
样品处理
根据实验要求，对样品进 1
Part
02
高效液相色谱的主要分离类型
吸附色谱
STEP 01
原理
STEP 02
应用
利用固定相吸附剂对不同 组分的吸附能力差异实现 分离。
STEP 03
特点
固定相的吸附能力可以通 过改变流动相的组成进行 调节。
第四章高效液相色谱分析法
第四章高效液相色谱分析法高效液相色谱（HPLC）是一种现代化的色谱技术，该技术利用高压将溶液推入柱中，然后在固定相上进行分离。
HPLC技术广泛应用于化学、生化、生物医药、环境等领域的分析与研究。
HPLC的分析原理是利用样品中所含化合物与柱填料固定相之间的体积作用力及化学作用力来进行分离。
在HPLC系统中，样品经过样品进样器注入进样回路中，通过高压泵将样品溶液送入柱中，柱中填充有固定相，样品中的成分在固定相表面上进行吸附与解吸，其中一些化合物会更容易与固定相相互作用，因此分离出来。
分离后的化合物通过检测器进行检测和定量。
HPLC技术具有高效、灵敏、精确、稳定等特点。
相比传统色谱技术，HPLC具有较高的分离效率和灵敏度。
其中，分离效率是指单位时间内分离出的化合物的数量，而灵敏度是指仪器能够检测到的最低浓度。
通过调节柱填料、流动相组成和流速，可以实现对复杂样品的高效分离和定量分析。
HPLC技术有多种模式，包括正相色谱法、反相色谱法、离子交换色谱法、分子筛色谱法等。
其中，反相色谱法是最常用的一种模式。
反相色谱法是指固定相是非极性的，而流动相是极性溶剂的情况下进行的色谱分离。
通过调整流动相的溶剂极性和流速，可以实现对不同极性化合物的分离。
除了分离功能外，HPLC还可以与其他技术联用，如质谱、荧光、紫外-可见光谱等。
这种联用技术结合了不同的分析方法，可以提高分析的特异性和灵敏度。
例如，将质谱与HPLC联用可以对化合物的结构进行确认和鉴定，而将荧光和HPLC联用可以对化合物进行特异性的定量分析。
HPLC技术在各个领域有着广泛的应用。
在化学领域，HPLC可以用来分离和分析复杂化合物，如天然产物的提取和纯化，药物的分析和鉴定等。
在生物医药领域，HPLC可以用来分析药物的含量、纯度和杂质，以及药物代谢产物和血液中的生理活性物质。
在环境领域，HPLC可以用来检测水体、土壤和空气中的有害物质，如重金属、有机污染物和农药残留等。
高效液相色谱法
液相色谱法固定相
(三) 离子交换色谱法固定相
1. 薄膜型离子交换树脂: 即以薄壳玻璃珠为担体， 在它的表面涂约 1% 的离子交换树脂而成。
2. 离子交换键合固定相: 用化学反应将离子交换基 团键合在惰性担体表面。
液相色谱法固定相
（四） 亲和色谱固定相
亲和色谱是一种基于分离物与配体间特异
的生物亲合作用来分离生物大分子的技术，它
五 高效液相色谱分离类型的选择
要正确地选择色谱分离方法，首先必须尽可能多的 了解样品
的有关性质，其次必须熟悉各种色谱方法的主要特点及其应
用范围。选择色谱分离方法的主要根据 是样品的相对分子质 量的大小，在水中和有机溶剂中的溶解度，极性和稳定程度
以及化学结构等物理、化学性质。
1、相对分子质量 对于相对分子质量较低（一般在200以下），挥发性比
的作用越来越大，主要应用如下：
多环芳烃、农药、酚类、真菌毒素、异腈酸酯等
等。 特别是有机农药方面的检测。
1. 有机氯农药残留量分析
固定相：薄壳型硅胶(37 ～50m)
流动相：正己烷
流 速：1.5 mL/min 色谱柱：50cm2.5mm(内径)
检测器：差示折光检测器
可对水果、蔬菜中的农药残 留量进行分析。
极性小的组分先出柱，极性大的组分后出柱
适于分离极性组分
反相色谱——固定液极性 < 流动相极性（RLLC）
极性大的组分先出柱，极性小的组分后出柱 适于分离非极性组分
载体又称担体
(1) 全多孔型担体：
a.
HPLC早期使用的担体与GC类似，是颗粒均匀的多孔球 体，如有氧化铝、氧化硅、硅藻土等制成的 Φ 100μ m全多孔型担体。
高效液相色谱法实验报告
高效液相色谱法实验报告高效液相色谱法（HPLC）是一种常用的分离和检测技术，被广泛应用于化学、生物和医药等领域。
以下是高效液相色谱法实验报告的示例：实验名称：高效液相色谱法分离和检测混合物一、实验目的1.学习高效液相色谱法的基本原理和实验操作；2.利用高效液相色谱法分离和检测混合物中的组分；3.分析实验数据，得出结论。
二、实验原理高效液相色谱法是一种基于色谱分离原理的检测技术。
样品中的组分在流动相和固定相之间的分配平衡，通过不同性质的固定相实现组分的分离。
在分离过程中，组分在色谱柱上的保留时间和洗脱顺序可用于定性分析，而组分的浓度或含量可通过检测器进行定量分析。
三、实验步骤1.准备试剂和仪器：选择合适的流动相、固定相、检测器等，确保仪器正常运行；2.配置样品：将待测混合物溶解于适当的溶剂中，制备成适当浓度的样品溶液；3.连接仪器：将流动相泵、色谱柱、检测器和数据采集系统连接起来，确保密封良好；4.平衡色谱柱：在开始进样之前，让色谱柱通过流动相进行平衡，使固定相达到稳定状态；5.进样分析：将样品溶液注入进样器中，由流动相带入色谱柱进行分离。
记录各个组分的保留时间和洗脱顺序；6.清洗色谱柱：实验结束后，用适量的流动相清洗色谱柱，以除去残留的样品组分；7.数据处理：对实验数据进行处理和分析，包括峰识别、定量和定性分析等。
四、实验结果与数据分析1.记录各个组分的保留时间和洗脱顺序；2.根据实验数据绘制色谱图，标注各个峰对应的组分；3.根据峰面积或峰高计算各个组分的浓度或含量；4.分析实验结果，与标准品进行比较，确定组分的性质。
五、结论根据实验结果和数据分析，得出以下结论：1.利用高效液相色谱法成功分离和检测了混合物中的各个组分；2.通过与标准品比较，确定了各个组分的性质；3.本实验表明高效液相色谱法是一种有效的分离和检测方法，可应用于实际生产和科研中。
高效液相色谱分析
2020/2/10
第三章 高效液相色谱
分析法
high performance liquid chromatograph
§3-3 §3-4 液相色谱的固定相 液相色谱的流动相
stationary phase and mobile phase of HPLC
2020/2/10
HPLC法中分离条件的选择
1. 固定相与装柱方法的选择： 选粒径小的、分布均匀的球形固定相（dp≤10μm） 首选化学键合相，匀浆法装柱
2. 流动相及其流速的选择： 选粘度小、低流速的流动相——甲醇，1ml/min
3. 柱温的选择： 选室温250C左右
2020/2/10
第三章 高效液相色谱
2020/2/10
二、液-固吸附色谱
liquid-solid adsorption chromatography
固定相：固体吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使 用的是5～10μm的硅胶吸附剂；
流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。 基本原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸； 适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有 官能团的化合物和异构体有较高选择性； 缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；
阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对 离子；
反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C-18柱)，含有 对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子X-进入 流动相后，生成疏水性离子对Y+ X -后；在两相间分配。
2020/2/10
五、离子色谱
ion chromatography
离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一项技术，其 与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有极低交换 容量的离子交换树脂作为柱填料，并采用淋洗液抑制技术 和电导检测器，是测定混合阴离子的有效方法。
高效液相色谱法剖析共24页
71、既然我已经踏上这条道路，那么，任何东西都不应妨碍我沿着这条路走下去。——康德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远，吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应，言行相称。——韩非
高效液相色谱法剖析
51、没有哪个社会可以制订一部永远 适用的 宪法， 甚至一 条永远 适用的 法律。 ——杰 斐逊 52、法律源于人的自卫本能。——英 格索尔
53、人们通常会发现，法律就是这样 一种的 网，触 犯法律 的人， 小的可 以穿网 而过， 大的可 以破网 而出， 只有中 等的才 会坠入 网中。 ——申 斯通 54、法律就是法律它是一座雄伟的大 夏，庇 护着我 们大家 ；它的 每一块 砖石都 垒在另 一块砖 石上。 ——高 尔斯华 绥 55、今天的法律未必明天仍是法律。 ——罗·伯顿
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高效液相色谱法在药物分析中的 研究进展
汇报人：李巧荣 2016.12.19
主要内容
《现代分离科学》课堂讨论
1.简介
2.高效液相色谱法在药物分析中的应用 3.高效液相色谱法在药物监测中的应用 4.高效液相色谱法在药代动力学中的研究 5.高效液相色谱法未来的发展方向 6. 参考文献
药剂与工艺.2016.47(16):2850-2856.
《现代分离科学》课堂讨论
但由于中药化学成分的复杂性，中药成分分析一直存在着 分离难度大、分析时间长等问题。近年来，（UPLC）超高效 液相色谱分离技术的发展与成熟有效地弥补了传统高效液相 色谱（HPLC）分析中存在的不足，使中药化学成分分析进入 了高效、高通量的阶段。
西北药学杂志，2016.27(15):2138-2140.
《现代分离科学》课堂讨论
2.3 在手性药物分析方面的应用
在生物体内，几乎所有具有重要生理意义的有机生物分子都 有手性，绝大多数都是旋光性物质。两种化学组成、分子式完全 相同的化合物，但因组成化合物的原子在空间取向不同，而成为 镜像的化合物，称为手性化合物。由于对映体的物理、化学性质 相同，实现它们的分离就比较困难，如大多数氨基酸都有右旋体 和左旋体，但往往只能获得右旋体和左旋体的混合物。手性药物 往往呈现一种对映体具有强的生物活性和药效，而另一种却无效， 有时甚至有毒害作用。目前，各种手性分析技术中，高效液相色 谱法对于定量分析和制备分离都是应用最为广泛的一种技术。
7.本综述讨论提纲
《现代分离科学》课堂讨论
1. 简介
高效液相色谱法 （HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速 液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高 效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用 高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合 溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成 分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。 该方法已成为化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领 域中重要的分离分析技术。HPLC在国内和国外的药物分析领域 的应用范围很广，发展速度也很快，尤其在我国，近十几年来 HPLC方法越来越受到重视。尤其在药物分析应用方面，高效液 相色谱法有着不可替代的作用，它对于药物的鉴别、分离、定 量测定都有着较高的准确度，本文对高效液相色谱法在药物分 析的各方面进行了简单的综述。
《现代分离科学》课堂讨论
翟明翚； 苏立强等建立了以羧甲基-β-环糊精（CM-β-CD）作 为手性流动相添加剂,高效液相色谱拆分美索巴莫对映体的方法。 在C18色谱柱上,系统考察了手性添加剂的种类及浓度、有机修饰剂 的种类及含量、流动相pH值和流速等因素对拆分的影响,确定了最 佳色谱分离条件:流动相为甲醇-乙腈-水（体积比为25∶63∶12） ,CM-β-CD浓度为0.6 g·L-1,pH=4.16（用三乙胺-冰乙酸调节）, 流速为0.4m L·min-1,检测波长为220 nm。该方法拆分美索巴莫 对映体,方法简便、经济、重现性好。
新技术与应用.2016.28(3):416-419.
2.4 在药物鉴别方面的应用
《现代分离科学》课堂讨论
在HPLC法中,保留时间与组分的结构和性质有关,是定性的参数, 可用于药物的鉴别.如中国药典收载的药物头孢羟氨苄的鉴别项 下规定:在含量测定项下记录的色谱图中,供试品主峰的保留时 间应与对照品主峰的保留时间一致.头抱拉定,头孢噻酚钠等头 孢类药物以及地西泮注射液,曲安奈德注射液等多种药物均采用 HPLC法进行鉴别。
泻痢固肠片是由甘草、陈皮、肉豆蔻、白芍、党参、茯苓 等9味中药材制成的治疗腹胀腹泻的中药复方制剂，方中陈皮、 白芍具有理气燥湿、益气健脾之功效，并以甘草调和诸药，共 奏健脾温肾，涩肠止泻之功效。齐老师等建立固相萃取-高效 液相色谱法同时测定泻痢固肠片芍药苷、甘草苷、陈皮苷的含 量，该法快速、简便、准确性高，为泻痢固肠片的质量控制提 供重要科学依据。
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2. 高效液相色谱法在药物分析中的应用
2.1 在中药分析方面的应用
中药历史悠久，源远流长。它不仅是我国医药体系中独具 特色的重要组成部分，也是西方医药，特别是植物药、天然药 物的有机组成部分。
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陈静娴，张敏敏等建立分散固相萃取-高效液相色谱(DSPEHPLC)联用技术应用于金银花及其相关中成药连花清瘟胶囊(LQC) 中环烯醚萜苷类成分(马钱酸、莫诺苷、马钱苷、当药苷、断氧 化马钱子苷、开联番木鳖苷二甲基乙缩醛)的快速提取、净化和 测定的方法。方法是分别采用超声提取法对金银花及相关中成 药LQC进行提取,采用不同净化材料进行快速净化,采用HPLC法测 定环烯醚萜苷类成分。结果采用硅藻土作为净化剂,金银花提取 物净化效果较好;采用硅藻土-活性炭(80∶20)的复合净化剂 时,LQC提取物净化效果较好;且该提取方法操作简单、快速、样 品用量少、净化效率高,结合HPLC技术实现了金银花及相关中成 药LQC中环烯醚萜苷类成分的快速提取、净化和测定。结论是拓 展了DSPE技术在复杂基质中药材及中成药中活性成分提取、净 化中的应用,为复杂基质中药材及中成药中活性成分的提取净化 及分析研究提供了方法和数据支持。
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3.高效液相色谱法在药物监测中的应用
3.1 中药材指纹的建立
随着中药的普及，中药材急需国际化、标准化。而中药材的 指纹图谱研究是其标准化的必经之路。中药指纹图谱的建立，应 以系统的化学成分研究和药理学研究为依托，体现系统性、特征 性和稳定性三个基本原则。为此，才能保证指纹图谱的标准化、 规范化、客观化，从而便于推广和应用。利用HPLC技术，建立药 材或中成药特征的色谱或光谱的图谱是一种有效的方法。
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2.2 在复方制剂分析方面的应用
复方制剂、杂质或辅料干扰因素多的品种多采用高效液相 色谱法。重要复方制剂和化学复合制剂通常含有多种有效成分， 各有效成分的含量决定了药物的治疗效果。高效液相色谱法适制剂的分析中得到了广泛的应用。