70种常用培养基配方大全

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各种培养基的配方

各种培养基的配方

各种培养基的配方(全)培养基编号培养基名称培养基组份SICC0009 醋酸菌培养基(Ⅰ) 豆芽汁20%,葡萄糖1%,碳酸钙2%,乙醇2%,琼脂2%。

乙醇:杀菌后加入。

SICC0010 醋酸菌培养基(Ⅱ) 酵母膏0.5%,葡萄糖1%,碳酸钙2%,乙醇2%,琼脂2%。

乙醇:杀菌后加入。

SICC0011 乳酸菌培养基(Ⅰ) 蛋白胨1%,牛肉膏1%,酵母膏0.5%,葡萄糖1%,番茄汁20%,土温-80 0.05%,PH 5.4( 0.4M醋酸钠缓冲液或醋酸调节),琼脂2 %。

SICC0012 乳酸菌培养基(Ⅱ) 牛肉膏0.5%,酵母膏0.5%,蛋白胨1%,葡萄糖1%,乳糖0.5%,氯化钠0.5%,琼脂2%。

SICC0013 乳酸菌培养基(Ⅲ) 100 Bx麦芽汁中加入酵母膏0.5%,无菌碳酸钙0.6%,琼脂1.5~2.0%。

SICC0014 脱脂牛奶培养基12%脱脂奶粉溶液于0.6㎏/cm2灭菌20分钟后,将灭过菌的脱脂牛奶置于30℃保温箱中培养3天,经检查确实无菌即可使用。

培养基编号培养基名称培养基组份SICC0001 60 Bx麦芽汁琼脂暂时无数据SICC0002 100 Bx麦芽汁琼脂暂时无数据SICC0003 120 Bx麦芽汁琼脂暂时无数据SICC0004 100 Bx米曲汁琼脂暂时无数据SICC0005 120 Bx米曲汁琼脂暂时无数据SICC0006 丁二醇培养基牛肉膏1%,葡萄糖1%,氯化钠0.5%,蛋白胨1%,PH7,琼脂1.5~2.0%。

SICC0007 异Vc钠培养基葡萄糖1%,磷酸氢二钾0.6%,磷酸二氢钾0.3%,硫酸镁0.02%,玉米浆0.3%,氯化钠0.05%,蛋白胨0.5%, PH 6.7-7.0, 琼脂2%。

SICC0008 己酸菌培养基醋酸钠0.5%,磷酸氢二钾0.04%,硫酸镁0.02%,硫酸铵0.05%,酵母膏0.5%,乙醇2%,碳酸钙1%,琼脂2%。

乙醇:杀菌后加入。

各种培养基配方

各种培养基配方

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

各种培养基配方

各种培养基配方

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose100mLbengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法

常用培养基配制方法:(1)基础盐培养基(MSM):(NH4)2SO42.0g,MgSO4·7H2O0.2g,CaCl2·2H2O 0.01g,FeSO4·7H2O0.001g,Na2HPO4·12H2O1.5g,KH2PO41.5g,蒸馏水1000 mL。

(2)LB培养基:蛋白胨10g,酵母提取物5g,氯化钠5g,蒸馏水1000 mL,pH7.5。

(3)高氏合成1号培养基:硝酸钾1g,磷酸氢二钾0.5g,硫酸镁0.5g,氯化钠0.5g,硫酸亚铁0.01g,可溶性淀粉20g,蒸馏水1000mL。

(4)查彼氏培养基:硝酸钠2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,蒸馏水1000mL。

(5)马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA):马铃薯200g,葡萄糖20g,琼脂20 g,蒸馏水1000mL。

将无病马铃薯洗净去皮切碎,加蒸馏水1000mL,煮沸0.5 h,纱布过滤,滤液加蒸馏水补足1000mL,再加入葡萄糖,然后分装三角瓶灭菌备用。

(6)铵察氏琼脂培养基:氯化铵2g,氯化钾0.5g,硫酸镁0.5g,磷酸氢二钾1g,硫酸亚铁0.01g,蔗糖30g,蛋白胨0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000 mL。

(7)克氏合成1号琼脂培养基:磷酸氢二钾1g,碳酸镁0.3g,氯化钠0.2 g,硝酸钾1g,硫酸亚铁0.01g,碳酸钙0.5g,葡萄糖20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(8)葡萄糖天门冬素琼脂培养基:葡萄糖10g,天门冬素0.5g,磷酸氢二钾0.5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(9)葡萄糖酵母膏琼脂培养基:葡萄糖10g,酵母膏10g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(10)瓦氏肉汁琼脂培养基:蛋白胨5g,葡萄糖10g,牛肉膏10g,氯化钠5g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

(11)淀粉琼脂培养基:可溶性淀粉10g,碳酸镁1g,磷酸氢二钾0.3g,氯化钠0.5g,硝酸钠1g,琼脂20g,蒸馏水1000mL。

70种常用培养基配方

70种常用培养基配方

70种常用培养基配方培养基是一种在实验室中用于培养和生长微生物的基质。

根据微生物的不同需求,培养基可以分为许多不同类型。

下面列举了70种常用的培养基配方。

1. LB培养基(Luria-Bertani培养基)Tryptone 10 gYeast extract 5 gNaCl10gAgar 15 g加水至1L,调pH至7.0用途:培养大肠杆菌等广泛应用于分子生物学实验。

2. 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(Potato Dextrose Agar)胰蛋白胨4g葡萄糖20g马铃薯提取物200gAgar 15 g加水至1L用途:用于真菌的培养和研究。

3.NIH3T3细胞培养基DMEM培养基 (Dulbecco's Modified Eagle Medium) 500 mL胎牛血清 (Fetal bovine serum) 10%青霉素/链霉素 (Penicillin/Streptomycin) 1%用途:常用于培养和传代小鼠成纤维细胞株。

4. 酵母饼干培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Agar)酵母提取物10g蛋白胨10g葡萄糖20gAgar 15 g加水至1L用途:适用于酵母菌的培养和繁殖。

5. BHIA培养基(Brain Heart Infusion Agar)大脑提取物17.5g胃蛋白胨10g葡萄糖2gAgar 12 gNaCl5g加水至1L用途:常用于培养细菌。

6. M9盐基液(M9 Minimal Medium)Na2HPO46gKH2PO43gNaCl0.5gNH4Cl1g1MMgSO41mL加水至1L用途:适用于大肠杆菌等菌种。

7. SJ培养基(Sabouraud Dextrose Agar)蔗糖40g蛋白胨10gAgar 15 g加水至1L用途:适用于真菌的培养。

8.R2A培养基Dipotassium phosphate 0.3 g Monopotassium phosphate 0.3 gSodium pyruvate 0.3 gSodium glutamate 0.3 gYeast extract 0.5 gPeptone 0.5 gTryptone 0.5 gGlucose 0.5 gAgar 15 g加水至1L用途:适用于环境中的微生物。

各种培养基配方

各种培养基配方

2008-09-09 17:081.营养肉汤成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。

制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。

2.营养琼脂培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。

制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。

3.MRS培养基成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。

制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。

4.脱脂乳培养基成分:牛奶,蒸馏水。

制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。

除去上层乳脂即得脱脂乳。

将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。

5.培养基A成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。

制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。

6.PTYG培养基成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。

制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。

盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。

培养基配方

培养基配方

培养基配方1、PDA培养基(用于分离、培养植物内生真菌):马铃薯(去皮)200g , 葡萄糖20g , 蒸馏水1000 ml , 琼脂粉15g。

用于分离内生真菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的氯霉素和硫酸链霉素各50 μ g/ml,用于抑制细菌的生长。

2、NA培养基(用于分离、培养植物内生细菌):牛肉膏3g,蛋白胨5g,葡萄糖2.5g,琼脂粉15g,蒸馏水1000ml,pH 7.0。

用于分离内生细菌时在倒平板之前加入已过滤除菌的放线菌酮50μg/ml,用于抑制真菌生长。

115℃,20min 灭菌。

3、LB培养基:胰蛋白胨10 g,酵母提取物5 g,NaCl 10 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;4、DSM1培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl 5 g,胰蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;5、DSM2培养基:磷酸三钾26.631 g(pH=7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,牛肉膏3 g,NaCl5 g,细菌学蛋白胨10 g,葡萄糖1 g 蒸馏水至1000 mL,pH=7.0;6、Msgg培养基:磷酸钾5 mmoL/L(pH7.0),MOPs 100 mmoL/L(pH7.0),MgCl2 2 mmoL/L,CaCl2 700 mmoL/L,MnCl2 50 μM,FeCl3 50 μM,ZnCl2 1 μM,VB1 2 μM,甘油0.5 %,谷氨酸0.5 %,色氨酸50 μg/mL,苯丙氨酸50 μg/mL,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

7、N%NA培养基:牛肉膏3.0 g,细菌学蛋白胨10 g,NaCl 5 g,琼脂粉N*10 g,8、BGM1培养基:牛肉膏3 g,胰蛋白胨10 g,NaCl 5 g,磷酸三钾26.631 g(pH7.0),二水柠檬酸三钠9.999 g,硫酸镁0.2465 g,硫酸铵19.821 g,葡萄糖1 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0。

各种培养基配方模板

各种培养基配方模板

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红100mL(rose bengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

70种常用培养基配方大全

70种常用培养基配方大全

70种常用培养基配方大全
1、大肠杆菌培养基:
(1)Luria-Bertani(LB)培养基:10.0 g/L 碳源:肉汤粉;营养素:1.0 g/L 磷酸钠,0.5 g/L 硫酸钾,0.5 g/L 硫酸铵,15.0 g/L 缓
冲剂:Tris-HCl;pH值:7.0;抑制性气体:无。

(2)分离培养基:10.0 g/L 碳源:肉汤粉;营养素:1.0 g/L 磷酸钠,0.1 g/L 硫酸钾,0.1 g/L 硫酸铵,1.5 g/L 葡萄糖,15.0 g/L 缓
冲剂:Tris-HCl;pH值:7.0;抑制性气体:无。

2、沙门菌培养基:
(1)LB培养基:10.0 g/L 碳源:肉汤粉;营养素:1.0 g/L 磷酸钠,0.5 g/L 硫酸钾,0.5 g/L 硫酸铵,1.5 g/L 葡萄糖,15.0 g/L 缓
冲剂:Tris-HCl;pH值:7.0;抑制性气体:N2/CO2(9:1)。

(2)选择性培养基:10.0 g/L 碳源:肉汤粉;营养素:1.0 g/L 磷
酸钠,0.5 g/L 硫酸钾,0.1 g/L 硫酸铵,15.0 g/L 缓冲剂:Tris-HCl;pH值:7.0;抑制性气体:N2/CO2(9:1);其他:抗生素:10 μg/ml抗
菌素。

3、链球菌培养基:
(1)Loffler-Kennedy培养基: 10.0 g/L 碳源:肉汤粉;营养素:1.0 g/L 磷酸钠,0.2 g/L 硫酸钾,0.2 g/L 硫酸铵。

实验室常用培养基

实验室常用培养基

实验用培养基配制 >1 .牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)牛肉膏3g ,蛋白胨10g ,NaCl 5g ,水1000mL ,pH7.4 ~7.62. 高氏1 号培养基( 用于放线菌培养)可溶性淀粉20g ,KNO 3 1g ,NaCl 0.5g ,K 2 HPO 4- · 3H 2 O 0.5g ,MgSO4 · 7H 2 O 0.5g, ,FeSO4 · 7H 2 O 0.01g ,水1000mL ,pH7.4 ~7.6 。

配制时注意,可溶性淀粉要先用冷水调匀后再加入到以上培养基中。

3 .马丁氏(Martin )培养基(用于从土壤中分离真菌)K 2 HPO 4 1g ,MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g ,蛋白胨5g ,葡萄糖10g ,1/3000 孟加拉红水溶液100mL, 水900mL ,自然pH ,121 ℃湿热灭菌30min 。

待培养基融化后冷却55 ~60 ℃时加入链霉素( 链霉素含量为30 μ g/mL).4. 马铃薯培养基(PDA)( 用于霉菌或酵母菌培养)马铃薯( 去皮)200g, 蔗糖( 或葡萄糖) 20g, 水1000mL配制方法如下: 将马铃署去皮, 切成约2cm 2 的小块, 放入1500mL 的烧杯中煮沸30min, 注意用玻棒搅拌以防糊底, 然后用双层纱布过滤, 取其滤液加糖, 再补足至1000mL, 自然pH. 霉菌用蔗糖, 酵母菌用葡萄糖.5. 察氏培养基( 蔗糖硝酸钠培养基)( 用于霉菌培养)蔗糖30g, NaNO 3 2g, K 2 HPO 4 1g, MgSO 4 · 7H 2 O 0.5g, KCl 0.5g, FeSO4 · 7H2 O 0.1g, 水1000mL, pH7.0 ~7.26. Hayflik 培养基( 用于支原体培养)牛心消化液( 或浸出液)1000mL, 蛋白胨10g, NaCl 5g, 琼脂15g, pH7.8 ~8.0,分装每瓶70mL, 121 ℃湿热灭菌15min, 待冷却至80 ℃左右, 每70mL 中加入马血清20mL,25% 鲜酵母浸出液10mL, 15 醋酸铊水溶液2.5mL, 青霉素G 钾盐水溶液(20 万单位以上)0.5mL, 以上混合后倾注平板. 注意: 醋酸铊是极毒的药品, 需特别注意安全操作.7 .麦氏(McCLary) 培养基( 醋酸钠培养基)葡萄糖0.1g, KCl 0.18g ,酵母膏0.25g ,醋酸钠0.82g, 琼脂l.5g ,蒸馏水l00mL 。

培养基配方

培养基配方

培养基配方一、哺乳动物培养基1、DMEM培养基DMEM培养基低糖(干粉) D2902 10X1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L的葡萄糖。

不含酚红和和碳酸氢钠。

50L每升培养基含10.0g干粉。

配制时每升加3.7g碳酸氢钠。

DMEM培养基低糖(干粉)D5523 10×1L 含L-谷氨酰胺和1000 mg/L葡萄糖,不含碳酸氢钠。

2×5L每升培养基含10.0g干粉。

配制时每升加3.7g碳酸氢钠。

5L50L DMEM培养基低糖(干粉)D5030 10×1L 不含L-谷氨酰胺,葡萄糖,酚红,丙酮酸钠和碳酸氢钠。

10L每升培养基含8.3g干粉。

配制时每升加1.0g葡萄糖,0.584g 50L L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。

DMEM培养基低糖(干粉)D5280 10×1L 可以高压消毒。

10L含1000 mg/L的葡萄糖。

不含L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。

50L每升培养基含9.6g干粉。

配制时每升加0.584g L-谷氨酰胺和3.7g碳酸氢钠。

DMEM培养基低糖(液体)D5546 500ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠,不含L-谷氨酰胺。

用盐6×500ML 酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。

使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。

24×500ML 1L6×1L DMEM培养基低糖(液体)D5921 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖和碳酸氢钠,不含L-谷氨酰胺和酚红。

500ML 用盐酸维生素B6代替盐酸吡哆醛。

使用前每升加入0.584g L-谷氨酰胺。

6×500MLDMEM培养基低糖(液体)D6046 100ML 含有1000 mg/L葡萄糖,L-谷氨酰胺和碳酸氢钠。

用盐酸维500ML 生素B6代替盐酸吡哆醛。

6×500ML1LDMEM培养基低糖(液体)D2429 100ML 1×的培养基含有1000 mg/L的葡萄糖。

发酵工业产品培养基配方大全

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发酵工业产品培养基配方大全1.酵母培养基配方:-加糖培养基配方:-酵母提取物10g-葡萄糖20g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml-加酵母提取物培养基配方:-酵母提取物20g-葡萄糖10g-氯化镁1g-磷酸二氢钾2g- H2O 1000ml2.细菌培养基配方:-肉膏蛋白胨加入培养基配方:-肉挫3g-蛋白胨5g-NaCl5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-NaCl10g- Agar 15g- 纯净水 1000ml3.真菌培养基配方:-绵白糖加入培养基配方:-麦芽提取物10g-蔗糖30g-K2HPO41g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-麦芽提取物加入培养基配方:-麦芽提取物20g-FeSO40.1g-K2HPO42g-MgSO41g- 纯净水 1000ml4.菌丝体培养基配方:-淀粉加入培养基配方:-玉米粉20g-淀粉10g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml-牛肉精加入培养基配方:-牛肉精3g-酵母提取物2g-NaCl5g-MgSO40.5g- 纯净水 1000ml5.发酵液培养基配方:-玉米加入培养基配方:-玉米粉100g-蛋白胨10g-NaCl5g-淀粉10g- 纯净水 1000ml-葡萄糖加入培养基配方:-玉米粉10g-蛋白胨5g-葡萄糖20g-淀粉10g- 纯净水 1000ml上述配方仅为其中几种常用的发酵工业产品培养基配方,不同的微生物和发酵过程需要有针对性地选择合适的配方。

在实际应用中,还需要根据具体情况进行调整和优化。

同时,培养基的制备过程中,要注意使用无菌操作,以确保微生物培养的纯净性和成功率。

常用培养基配方及应用

常用培养基配方及应用

常用培养基配方及应用常用培养基配方及应用:1. Luria-Bertani培养基(LB)LB培养基是一种常用的细菌培养基,主要用于培养大肠杆菌等革兰氏阴性菌。

LB培养基的配方如下:- 水:1L- Bacto Tryptone:10g- 酵母浸粉:5g- NaCl:10gLB培养基可用于细菌的生长和传代。

由于配方简单,成本低廉,因此广泛被用于分子生物学实验室中。

2. 当归黄芪培养基当归黄芪培养基是一种用于植物组织培养的培养基,主要用于植物的快速繁殖和植株再生。

其配方如下:- 水:1L- 蔗糖:30g- 白芷酸:3.0mg- 黄芪苷:1.0mg- 当归酮:1.0mg- 植物生长素:添加适量当归黄芪培养基为植物提供了合适的营养物质和生长因子,促进了植物细胞的生长和分化。

3. 液体基底培养基液体基底培养基适用于细胞培养和组织工程等生物医学领域的应用。

其配方如下:- 水:1L- 葡萄糖:25g- 酪蛋白水解物:6g- 酵母浸粉:2g- 天然海藻酸钠:1g- 乳酸钠:0.1g- 枸橼酸钠:0.1g- 氯化钾:0.1g- 氯化钠:0.1g- 磷酸二氢钠:0.5g液体基底培养基提供了细胞生长所需的营养物质和生长因子,促进了细胞的增殖和生长。

4. Sabouraud培养基Sabouraud培养基是一种常用的真菌培养基,用于培养和鉴定真菌。

其配方如下:- 水:1L- 麦芽提取物:4g- 葡萄糖:40g- 氯化钠:5g- 石蜡油:20mLSabouraud培养基提供了真菌生长所需的营养物质和抑制细菌生长的条件,用于分离和培养真菌菌株。

常用培养基的应用范围广泛,可以满足不同类型的生物学研究需求。

例如,LB 培养基可以用于细菌遗传转化、RNA或蛋白质的表达分析等;当归黄芪培养基可以用于植物组织培养和再生;液体基底培养基适用于细胞培养和组织工程等;Sabouraud培养基可以用于分离和培养真菌。

这些培养基除了提供营养物质外,还可根据需要添加不同的生长因子、抗生素等,以满足特定实验需求。

各种培养基的制作方法

各种培养基的制作方法

配方一萨氏(Sabouraud's)培养基蛋白胨10克琼脂20克麦芽糖40克水1000毫升先把蛋白胨、琼脂加水后,加热,不断搅拌,待琼脂溶解后,加入40克麦芽糖(或葡萄糖),搅拌,使它溶解,然后分装,灭菌,备用。

1.营养肉汤培养基牛肉膏 0.3克蛋白胨 1.0克NaCl 0.5克水 100毫升pH 7.0~7.2在烧杯中加水,称取牛肉膏、蛋白胨和NaCl,加热溶化后,调节pH值至7.0~7.2。

分装,加棉塞,高压蒸汽灭菌即成。

常用于培养细菌。

2.营养琼脂培养基在营养肉汤培养基中增加20克琼脂即成。

常用于培养细菌。

3.肉汁蛋白胨液体培养基牛肉 500克蛋白胨 10克NaCl 5克pH 7.1~7.2取新鲜牛肉500克,去净脂肪、筋腱后,绞碎或剁碎,加水1000毫升浸泡,15℃下放置12小时或50℃下放置半小时。

用纱布将肉汁过滤,补足失水。

向肉汁中加入蛋白胨和食盐。

将肉汁加热,放入苏打(碳酸钠)至红色,调整pH值。

分装,高压蒸汽灭菌。

将上述已灭菌的培养基用棉花滤去凝集的蛋白质,制成液体培养基,如需制成固体培养基,可在每100毫升液体中加入2克琼脂,加热溶化后,分装,再次进行高压蒸汽灭菌。

常用于培养细菌。

4.高氏一号培养基(淀粉琼脂培养基)可溶性淀粉 2克K2HPO4 0.05克MgSO4·7H2O 0.05克KNO3 0.1克NaCl 0.05克FeSO4 0.001克琼脂 2克水 100毫升pH 7.2~7.4在烧杯中加水95毫升,加热至沸腾,取可溶性溶粉2克,用5毫升水调成糊状,倒入沸水中和匀。

再称取其它药品,陆续加入烧杯内(待一种药品溶解后,再加入第二种药品)。

待全部药品溶解后,停止加热,补足失水,调pH值至7.2~7.4。

分装后,高压蒸汽灭菌。

本培养基常用于培养放线菌。

5.马铃薯蔗糖培养基马铃薯 200克蔗糖 10克琼脂 20克水 1000毫升自然pH称取200克马铃薯片,加水1000毫升,煮沸半小时,用纱布过滤,补足失水。

各种培养基配方

各种培养基配方

146种培养基配方1、牛肉膏蛋白胨培养基(培养细菌用)牛肉膏3g蛋白胨5g氯化钠10g琼脂15~20gpH 7.0~7.2水1000mL2、2、高氏(Gause)1号培养基(培养放线菌用)可溶性淀粉20g硝酸钾1g氯化钠0.5g磷酸氢二钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g琼脂20g水1000mLpH 7.2~7.4配制时,先用少量冷水将淀粉调成糊状,倒入煮沸的水中,在火上加热,边搅拌边加入其他成分,溶化后,补足水分至1000mL。

121℃灭菌20min。

查氏(Czapek)培养基(培养霉菌用)硝酸钠2g磷酸氢二钾1g氯化钾0.5g硫酸镁0.5g硫酸亚铁0.01g蔗糖30g琼脂15~20g水1000mLpH 自然121℃灭菌20min。

4、马丁氏(Martin)琼脂培养基(分离真菌用)葡萄糖10g蛋白胨5g磷酸二氢钾1g七水合硫酸镁0.5g1/3000孟加拉红(rose100mLbengal,玫瑰红水溶液)琼脂15—20gpH 自然蒸馏水800mL112℃灭菌30min。

临用前加入0.03%链霉素稀释液100mL,使每毫升培养基中含链霉素30μg。

5、马铃薯培养基(简称PDA)(培养真菌用)马铃薯200g蔗糖(或葡萄糖)20g琼脂15—20gpH 自然培养基的配制:马铃薯去皮,切成块煮沸30min,然后用纱布过滤,再加糖及琼脂,熔化后补足水至1000mL。

121℃灭菌30min。

6、麦芽汁琼脂培养基培养基的配制:(1)、取大麦或小麦若干,用水洗净,浸水6—12小时,至15℃阴暗处发芽,上面盖纱布一块,每日早、中、晚淋水一次,麦根伸长至麦粒的两倍时,即停止发芽,摊开晒干或烘干,贮存备用。

(2)、将干麦芽磨碎,一份麦芽加四份水,在65℃水浴中糖化3—4小时,糖化程度可用碘滴定之。

加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

(3)、将糖化液用4—6层纱布过滤,滤液如混浊不清,可用鸡蛋白澄清,方法是将一个鸡蛋白加水约20mL,调匀至生泡沫时为止,然后倒在糖化液中搅拌煮沸后再过滤。

各种培养基的配方

各种培养基的配方

各种培养基的配方培养基是一种用于微生物培养和研究的营养物质。

不同类型的微生物需要特定的培养基来满足其营养需求和生长条件。

下面是一些常见的培养基的配方及其用途。

1. 营养琼脂培养基(Nutrient Agar)- 水:1000ml-细胞营养素(肉膏、豌豆、蛋黄等):5g-NaCl:5g-琼脂:15g用途:通用的培养基,可满足大部分微生物的营养需求。

2. 大肠杆菌培养基(Luria-Bertani Agar)- 水:1000ml-酵母提取物:10g-大肠杆菌提取物:10g-NaCl:5g-琼脂:15g用途:专门用于大肠杆菌的培养。

3. MacConkey琼脂培养基- 水:1000ml-胆盐蓝:20g-肉薄粉:1g-蔗糖:20g-酵母提取物:3g-紫罗兰化合物:0.04g-琼脂:15g用途:用于分离和鉴定肠道革兰氏阴性杆菌。

4. Sabouraud琼脂培养基- 水:1000ml-蔗糖:40g-蛋白胨:10g-硫酸镁:5g-纯净琼脂:20g用途:用于真菌的培养。

5.MRS培养基- 水:1000ml-葡萄糖:10g-柠檬酸:5g-蛋白胨:10g-亚硝酸钠:0.5g-丙酮酸:2g-磷酸二氢钾:2g-琼脂:20g用途:用于乳酸菌的培养。

6. 铺洒琼脂培养基(Spread Plate Agar)- 水:1000ml-蛋白胨:10g-蔗糖:10g-胆盐蓝:0.05g-琼脂:15g用途:用于微生物计数。

7. Tryptic Soy Agar(TSA)- 水:1000ml-维生素B混合物:1g-卵黄酯:1g-蛋白胨:15g-酵母提取物:5g-琼脂:15g用途:通用的培养基,适用于多种微生物的培养。

这些培养基的配方只是一些常见示例,实际上有许多其他种类的培养基可根据不同微生物的需要进行调整和定制。

合理选择和配制培养基是成功进行微生物培养和研究的重要一步。

常用培养基配方

常用培养基配方

常用培养基配方1. Acetobacter Medium (醋酸菌培养基)Glucose (葡萄糖) 100g Yeasst extract (酵母膏) 10gCaCO3 20g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) 1000ml pH 调至 6.8适用范围:恶臭醋酸杆菌混浊变种2. Nutrient Agar (营养肉汁琼脂)Pepton (蛋白胨) 5g Beef extract (牛肉膏) 30gNaCl 5g Agar (琼脂) 15g Distilled water (蒸馏水) pH 调至7.0-7.2适用范围:产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种(青虫菌)、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌(大肠杆菌)、铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌3. Azotobacter Medium (固氮菌培养基)KH2PO40.2g K2HPO4 0.8gMgSO4.7H2O 0.2g CaSO4.2H2O0.1gNa2MoO4.2H2O 微量Yeast axtract(酵母膏) 0.5gMannitol(甘露醇) 20g FeCl3 Tract 微量Distilled water (蒸馏水) 1000ml Agar (琼脂) 15g调pH 至 7.2适用范围:固氮菌、胶质芽孢杆菌4. Corn Meal Medium (玉米粉培养基)Maize flour (玉米粉) 5g Peptone (蛋白胨) 0.1gGlucose (葡萄糖) 1g Tap water (自来水) 1000ml注意:121℃灭菌1小时,分装入18ⅹ18毫米试管,每管深度达6厘米。

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常用培养基配方目录01糖发酵管02ONPG培养基03西蒙氏柠檬酸盐培养基04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用) 05克氏柠檬酸盐培养基06丙二酸钠培养基07葡葡糖铵培养基08Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)09马尿酸钠培养基10营养明胶11苯丙氨酸培养基12氨基酸脱羧酶试验培养基13蛋白胨水(靛基质试验用)14硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)15尿素琼脂16氰化钾(KCN)培养基17氧化酶试验18硝酸盐培养基19细胞色素氧化酶试验20过氧化氢酶试验21过氧化物酶试验22磷酸盐缓冲液23明胶磷酸盐缓冲液24乳酸-苯酚溶液25肉浸液肉汤26肉浸液琼脂27牛肉(或牛心)消化汤28血消化汤29豆粉琼脂30血琼脂31营养琼脂32营养肉汤33乳糖胆盐发酵管34乳糖发酵管35EC肉汤36缓冲蛋白胨水(BP)37氯化镁孔雀绿增菌液(MM)38四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)39四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)40亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)41GN增菌液42肠道菌增菌肉汤43亚硫酸铋琼脂(BS)44DHL琼脂45HE琼脂46SS琼脂47WS琼脂48麦康凯琼脂49伊红美蓝琼脂(EMB)50三糖铁琼脂(TSI)51三糖铁琼脂(换用方法)52克氏双糖铁琼脂(KI)53克氏双糖铁琼脂(换用方法)54葡萄糖半固体发酵管555%乳糖发酵管56CAYE培养基57Honda氏产毒肉汤58Elek氏培养基(毒素测定用)59氯化镁孔雀绿羧苄青霉素培养基60胰蛋白胨水61Rustigian氏尿素培养液62氯化钠结晶紫增菌液63氯化钠蔗糖琼脂64嗜盐菌选择性琼脂65 3.5%氯化钠三糖铁琼脂66氯化钠血琼脂67 3.5%氯化钠生化试验培养基68改良磷酸盐缓冲液(小肠结肠炎耶尔森氏菌专用)69CIN-1培养基70嗜盐性试验培养基01糖发酵管成分:牛肉膏5g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000m LpH7.4制法:1葡萄糖发酵管按上述成分配好后,按0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min.2其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶100mL,121℃高压灭菌15min.另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌.将5mL糖溶液加入于100m L培养基内,以无菌操作分装小试管.注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌.试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察2~3d.迟缓反应需观察14~30d.02ONP G培养基成分:邻硝基酚β-D-半乳糖昔(ONPG)60mg(O-Nitroph en yl-β-D-ga lactop yran o side)0.01m ol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5)10m L1%蛋白胨水(PH7.5)30m L制法:将ONP G溶于缓冲液内,加入蛋白胨水,以过滤法除菌,分装于10mm×75mm试管,每管0.5mL,用橡皮塞塞紧.试验方法:自琼脂斜面上挑取培养物1满环接种,于36±1℃培养1~3h和24h观察结果.如果β-半乳糖苷酶产生,则于1~3h变黄色,如无此酶则24h不变色.03西蒙氏柠檬酸盐培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgS O4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g柠檬酸钠5g琼脂20g蒸馏水1000m L0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化.然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:挑取少量琼脂培养物接种,于36±1℃培养4d,每天观察结果.阳性者斜面上有菌落生长,培养基从绿色转为蓝色.04缓冲葡萄糖蛋白胨水(MR和VP试验用)成分:磷酸氢二钾5g多胨7g葡萄糖5g蒸馏水1000m LpH7.0制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL,121℃高压灭菌15min.甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~5d,哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养.滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果.鲜红色为阳性,黄色为阴性.甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20mL蒸馏水.V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养2~4d.哈夫尼亚菌则应在22~25℃培养.加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL和40%氢氧化钾溶液0.2mL,充分振摇试管,观察结果.阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察.05克氏柠檬酸盐培养基成分:柠檬酸钠3g葡萄糖0.2g酵母浸膏0.5g单盐酸半胱氨酸0.1g磷酸二氢钾1g氯化钠5g0.2%酚红溶液6mL琼脂15g蒸馏水1000m L制法:加热溶解,分装试管,121℃高压灭菌15min.放成斜面.试验方法:用琼脂培养物接种整个斜面,在36±1℃培养7d,每天观察结果.阳性者培养基变为红色.06丙二酸钠培养基成分:酵母浸膏1g硫酸铵2g磷酸氢二钾0.6g磷酸二氢钾0.4g氯化钠2g丙二酸钠3g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000m LpH6.8制法:先将酵母浸膏和盐类溶解于水,校正pH后再加入指示剂,分装试管,121℃高压灭菌15min.试验方法:用新鲜的琼脂培养物接种,于36±1℃培养48h,观察结果.阳性者由绿色变为蓝色.07葡葡糖铵培养基成分:氯化钠5g硫酸镁(MgS O4·7H2O)0.2g磷酸二氢铵1g磷酸氢二钾1g葡萄糖2g琼脂20g蒸馏水1000m L0.2%溴麝香草酚蓝溶液40mLpH6.8制法:先将盐类和糖溶解于水内,校正pH,再加琼脂,加热溶化,然后加入指示剂,混合均匀后分装试管,121℃高压灭菌15min,放成斜面.试验方法:用接种针轻轻触及培养物的表面,在盐水管内做成极稀的悬液,肉眼观察不见混浊,以每一接种环内含菌数在20~100之间为宜.将接种环灭菌后挑取菌液接种,同时再以同法接种普通斜面一支作为对照.于36±1℃培养24h.阳性者葡萄糖铵斜面上有正常大小的菌落生长;阴性者不生长,但在对照培养基上生长良好.如在葡萄糖铵斜面生长极微小的菌落可视为阴性结果.注:容器使用前应用清洁液浸泡.再用清水,蒸馏水冲洗干净,并用新棉花做成棉塞,干热灭菌后使用.如果操作时不注意,有杂质污染时,易造成假阳性的结果.08Hugh-Leifson培养基(O/F试验用)成分:蛋白胨2g氯化钠5g磷酸氢二钾0.3g琼脂4g葡萄糖10g0.2%溴麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000m LpH7.2制法:将蛋白胨和盐类加水溶解后,校正pH至7.2.加入葡萄糖,琼脂煮沸,溶化琼脂,然后加入指示剂.混匀后,分装试管,121℃高压灭菌15min,直立凝固备用.试验方法:从斜面上挑取小量培养物作穿刺接种,同时接种两支培养基,其中一支于接种后滴加溶化的1%琼脂液于表面,高度约1cm,于36±1℃培养.09马尿酸钠培养基成分:马尿酸钠1g肉浸液100mL制法:将马尿酸钠溶解于肉浸液内,分装于小试管内,并于管壁画一横线.以标志管内液面高度,121℃高压灭菌20min.试剂:三氯化铁(FeCl3·6H2O)12g,溶于2%盐酸溶液100m L中即成.试验方法:用纯培养物接种,于42℃培养48h,观察培养液是否到达试管壁上记号处,如不足时,用蒸馏水补足至原量.经离心沉淀,吸取上清液0.8mL,加入三氯化铁试剂0.2mL,立即混合均匀,经10~15min,观察结果.结果:出现恒久之沉淀物为阳性.10营养明胶成分:蛋白胨5g牛肉膏3g明胶120g蒸馏水1000m LpH6.8~7.0制法:加热溶解,校正至pH7.4~7.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固.复查最终pH应为6.8~7.0.试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在22~25℃培养,每天观察结果,记录液化时间.或放在36士1℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果.11苯丙氨酸培养基成分:酵母浸膏3gDL-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g)2g磷酸氢二钠1g氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000m L制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面.试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在36±1℃培养4h或18~24h.滴加10%三氯化铁溶液2~3滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色.12氨基酸脱羧酶试验培养基成分:蛋白胨5g酵母浸膏3g葡萄糖1g蒸馏水1000m L1.6%滇甲酚紫-乙醇溶液1mLL-氨基酸或DL-氨基酸0.5或1g/100mLpH6.8制法:除氨基酸以外的成分加热溶解后,分装每瓶100m L,分别加入各种氨基酸:赖氨酸,精氨酸和鸟氨酸.L-氨基酸按0.5%加入,DL-氨基酸按1%加入.再行校正pH至6.8.对照培养基不加氨基酸.分装于灭菌的小试管内,每管0.5mL,上面滴加一层液体石蜡,115℃高压灭菌10min.试验方法:从琼脂斜面上挑取培养物接种,于36±1℃培养18~24h,观察结果.氨基酸脱羧酶阳性者由于产碱,培养基应呈紫色.阴性者无碱性产物,但因葡萄糖产酸而使培养基变为黄色.对照管应为黄色.13蛋白胨水(靛基质试验用)成分:蛋白胨(或胰蛋白胨)20g氯化钠5g蒸馏水1000m LpH7.4制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min.靛基质试剂:柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL 戊醇中.然后缓慢加入浓盐酸25mL.欧-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL 95%乙醇内.然后缓慢加入浓盐酸20mL.试验方法:挑取小量培养物接种,在36±1℃培养1~2d,必要时可培养4~5d.加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色.注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸.每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用.14硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)成分:牛肉膏3g酵母浸膏3g蛋白胨10g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g 氯化钠5g琼脂12g蒸馏水1000m LpH7.4制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固.试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于36±1℃培养1~2d,观察结果.产硫化氢者使培养基变为黑色.注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基.15尿素琼脂成分:蛋白胨1g氯化钠5g葡萄糖1g磷酸二氢钾2g0.4%酚红溶液3mL琼脂20g蒸馏水1000m L20%尿素溶液100m LpH7.2±0.1制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶.121℃高压灭菌15min.冷至50~55℃,加入经除菌过滤的尿素溶液.尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用.试验方法:挑取琼脂培养物接种,在36±1℃培养24h,观察结果.尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色.16氰化钾(KC N)培养基成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸二氢钾0.225g磷酸氢二钠5.64g蒸馏水1000m L0.5%氰化钾溶液20mLpH7.6制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.放在冰箱内使其充分冷却.每100mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为1:10000),分装于12mm×100m m灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月.同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用.17氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液:少量新鲜配制,干冰箱内避光保存.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取白色洁净滤纸沾取菌落.加盐酸二甲基对苯二胺溶液一滴,阳性者呈现粉红色,并逐渐加深;再加α-萘酚溶液一滴,阳性者于半分钟内呈现鲜蓝色.阴性于两分钟内不变色.以毛细吸管吸取试剂,直接滴加于菌落上,其显色反应与以上相同.18硝酸盐培养基成分:硝酸钾0.2g蛋白5g蒸馏水1000m LpH7.4制法:溶解,校正pH,分装试管,每管约5mL,121℃高压灭菌15min.硝酸盐还原试剂:甲液:将对氨基苯磺酸0.8g溶解于2.5mo l/L乙酸溶液100m L中.乙液:将甲萘胺0.5g溶解于2.5mo l/L乙酸溶液100m L 中.试验方法:接种后在36±1℃培养1~4d,加入甲液和乙液各一滴,观察结果.硝酸盐还原为亚硝酸盐时于立刻或数分钟内显红色.注:本试验阴性的原因有三:细菌不能还原硝酸盐;亚硝酸盐继续分解,生成氨和氮;培养基不适于细菌的生长.如欲检查培养基中硝酸盐是否未被分解,可再加入锌粉少许,可使硝酸盐还原为亚硝酸盐而呈现红色.19细胞色素氧化酶试验试剂:1%盐酸二甲基对苯二胺溶液.1%α-萘酚-乙醇溶液.试验方法:取37℃(或低于37℃)培养20h的斜面培养物一支,将两种试剂各2~3滴,从斜面上端滴下,并将斜面略加倾斜,使试剂混合液流经斜面上的培养物.如系平板培养物,则可用试剂混合液滴在菌落上.结果:于2min内呈现蓝色者为阳性.阳性培养物大多数于半分钟内出现强阳性反应,2min以后出现微弱或可疑反应均作为阴性结果.20过氧化氢酶试验试剂:3%过氧化氢溶液:临用时配制.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加3%过氧化氢溶液2mL,观察结果.结果:于半分钟内发生气泡者为阳性,不发生气泡者为阴性.21过氧化物酶试验试剂:2%儿茶酚溶液.3%过氧化氢溶液.试验方法:挑取固体培养基上菌落一接种环,置于洁净试管内,滴加2%儿茶酚溶液1mL及3%过氧化氢溶液1mL.静置于室温(20℃)中30~60min,观察结果.结果:阳性反应,细菌变为黑褐色;阴性反应,细菌不变色.注:过氧化物酶的作用可受氰化钾的抑制.22磷酸盐缓冲液储存液:磷酸二氢钾34g1mol/L氢氧化钠溶液175mL蒸馏水825mLpH7.2制法:先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中,用1mol/L 氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000m L.稀释液:取储存液1.25mL,用蒸馏水稀释至1000m L.分装每瓶100mL或每管10mL,121℃高压灭菌15min.23明胶磷酸盐缓冲液成分:明胶2g磷酸氢二钠4g蒸馏水1000m LpH6.2制法:加热溶解,校正pH,121℃高压灭菌15min.24乳酸-苯酚溶液成分:苯酚10g乳酸(比重1.21)10g甘油20g蒸馏水10mL制法:将苯酚在水中加热溶解,然后加入乳酸及甘油.用途:检验真菌形态时用.25肉浸液肉汤成分:绞碎牛肉500g氯化钠5g蛋白胨10g磷酸氢二钾2g蒸馏水1000m L制法:将绞碎之去筋膜无油脂牛肉500g加蒸馏水1000mL,混合后放冰箱过夜,除去液面之浮油,隔水煮沸半小时,使肉渣完全凝结成块,用绒布过滤,并挤压收集全部滤液,加水补足原量.加入蛋白胨,氯化钠和磷酸盐,溶解后校正pH7.4~7.6煮沸并过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌30min.26肉浸液琼脂成分:肉浸液肉汤(PH7.4)1000m L琼脂17~20g制法:加热溶化琼脂,分装烧瓶或试管,121℃高压灭菌30min.根据需要,倾注平板或放成斜面.27牛肉(或牛心)消化汤成分:绞碎牛肉(或牛心)1000g15%氢氧化钠溶液27mL胰蛋白酶40mL三氯甲烷1mL氯化钠10g蒸馏水2000m L制法:1称取碎牛肉,加蒸馏水,隔水加热到80℃,维持15min.2加氢氧化钠溶液,对pH试纸呈弱碱性,冷至40℃. 3加胰蛋白酶,氯仿,在36±1℃放置4~5h,每小时摇动一二次.44h后,吸取上层液5mL于试管中,加5%硫酸铜溶液0.1mL,4%氢氧化钠溶液5mL,混合之.若呈红色,则不须再消化,可由温箱取出.5加入15%乙酸溶液45mL,对pH试纸呈酸性.6煮沸15min,使胰蛋白酶破坏,冷后,放冰箱内一夜. 7次日吸取上层清液,加氯化钠10g,并加水补足原量,煮沸.8校正pH7.4~7.6(加15%氢氧化钠溶液约10mL),加热,用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.注:①此培养基可作为琼脂培养基的基础,不需加蛋白胨.②胰蛋白酶之配制:称取去脂绞碎的猪胰500g,加入乙醇500mL,蒸馏水1500m L,混合之,装人玻塞瓶内.每日摇匀三次.3d后,用绒布过滤挤出其汁,加盐酸至0.05%,放冰箱内保存备用.28血消化汤成分:绞碎猪胃100g绞碎猪血块100g蒸馏水1000m L浓盐酸10mL制法:1洗涤猪胃,除去油脂,保留胃粘膜,用绞肉机绞碎. 2用绞肉机将猪血块绞碎.3将蒸馏水加热至55℃,加入猪胃,猪血块和盐酸,置55℃水浴中24h,时常加以摇动.4从水浴内取出,加入1mo L/L碳酸钠溶液5mL,煮沸10min,置于冰箱内一夜.5吸取上层清液,加磷酸氢二钾1g,加热至75℃,加入1mol/L碳酸钠溶液45mL,煮沸,校正pH7.2~7.4.6用滤纸过滤,分装烧瓶,121℃高压灭菌20min.29豆粉琼脂成分:牛心消化汤(PH7.4~7.6)1000m L琼脂20g黄豆粉浸液50mL制法:将琼脂加在牛心消化汤内,加热溶解,过滤.加入豌豆粉浸液,分装每瓶100m L,121℃高压灭菌15min.豌豆粉浸液制法:取豌豆粉5g,氯化钠10g,加入蒸馏水100m L.置100℃水浴内加热1h,放于冰箱中过夜.吸取上清液即为豌豆浸液.30血琼脂成分:pH7.4~7.6豆粉琼脂100mL脱纤维羊血(或兔血)5~10mL制法:加热溶化琼脂,冷至50℃,以灭菌手续加入脱纤维羊血,摇匀,倾注平板.亦可分装灭菌试管,置成斜面.亦可用其他营养丰富的基础培养基配制血琼脂.31营养琼脂成分:蛋白胨10g牛肉膏3g氯化钠5g琼脂15~20g蒸馏水1000m L制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH至7.2~7.4.加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化.分装烧瓶,121℃高压灭菌15min.注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面.如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%.32营养肉汤成分:蛋白陈10g牛肉膏3g氯化钠5g蒸馏水1000m LpH7.4制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225mL,121℃高压灭菌15min.33乳糖胆盐发酵管成分:蛋白胨20g猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g乳糖10g0.04%滇甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000m LpH7.4制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.34乳糖发酵管成分:蛋白胨20g乳糖10g0.04%溴甲酚紫水溶液25mL蒸馏水1000m LpH7.4制法:将蛋白胨及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,按检验要求分装30mL,10m L或3mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min.注:①双料乳糖发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍.②30mL和10mL乳糖发酵管专供酱油及酱类检验用,3m L乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用.35EC肉汤成分:胰蛋白胨20g3号胆盐(或混合胆盐)1.5g 乳糖5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g氯化钠5g蒸馏水1000m L制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min,最终pH为6.9±0.2.36缓冲蛋白胨水(BP)成分:蛋白胨10g氯化钠5g磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O)9g磷酸二氢钾1.5g蒸馏水1000m LpH7.2制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min.临用时无菌分装每瓶225mL.注:本培养基供沙门氏菌前增菌用.37氯化镁孔雀绿增菌液(MM)甲液:胰蛋白胨5g氯化钠8g磷酸二氢钾1.6g蒸馏水1000m L乙液:氯化镁(化学纯)40g蒸馏水100mL丙液:0.4%孔雀绿水溶液.制法:分别按上述成分配好后,121℃高压灭菌15min备用.临用时取甲液90mL,乙液9mL,丙液0.9mL,以无菌操作混合即可.注:本培养基亦称Rap pa p o rt10(R10)增菌液.38四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB)基础培养基:多胨或眎胨5g胆盐1g碳酸钙10g硫代硫酸钠30g蒸馏水1000m L碘溶液:碘6g碘化钾5g蒸馏水20mL制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL.分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀.121℃高压灭菌15min备用.临用时每100m L基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL.39四硫磺酸钠煌绿增菌液(换用方法)基础液:蛋白胨10g牛肉膏5g氯化钠3g碳酸钙45g蒸馏水1000m L将各成分加入于蒸馏水中,加热至约70℃溶解,校正pH至7.0±0.1,121℃高压灭菌20min.硫代硫酸钠溶液:硫代硫酸钠(Na2S2O3·5H2O)50g蒸馏水加至100mL碘溶液:碘片20g碘化钾25g蒸馏水加至100mL将碘化钾充分溶解于是少量的蒸馏水中,加入碘片,振摇玻瓶至碘片全部溶解,再加入蒸馏水至规定量.贮于棕色玻瓶内,紧塞瓶盖备用.煌绿水溶液:煌绿0.5g蒸馏水100mL存放暗处,不少于1d,使其自然灭菌.牛胆盐溶液:干燥的牛胆盐10g蒸馏水100mL煮沸溶解,121℃高压灭菌20min.制备:基础液900mL硫代硫酸钠溶液100mL碘液20mL煌绿溶液2mL牛胆盐溶液50mL临用前,按上列顺序,以无菌操作依次加入于基础液中,每加入一种成分,均应摇匀后再加入另一种成分.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL.40亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC)成分:蛋白胨5g乳糖4g亚硒酸氢钠4g磷酸氢二钠5.5g磷酸二氢钾4.58L-胱氨酸0.01g 蒸馏水1000m L1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g(或DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成.制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900m L蒸馏水中,加热煮沸,俟冷备用.另将亚硒酸氢钠溶解于100m L蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合.再加入1%L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL.分装于灭菌瓶中,每瓶100mL,pH应为7.0±0.1.41GN增菌液成分:胰蛋白胨20g葡萄糖1g甘露醇2g柠檬酸钠5g去氧胆酸钠0.5g磷酸氢二钾4g磷酸二氢钾1.5g氯化钠5g蒸馏水1000m LpH7.0制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶225m L,115℃高压灭菌15min.42肠道菌增菌肉汤成分:蛋白胨110g葡萄糖5g牛胆盐20g磷酸氢二钠8g磷酸二氢钾2g煌绿0.015g蒸馏水1000m LpH7.2制法:按上述成分配好,加热使溶解,校正pH.分装每瓶30mL,115℃高压灭菌15min.43亚硫酸铋琼脂(BS)成分:蛋白胨10g牛肉膏5g葡萄糖5g硫酸亚铁0.3g磷酸氢二钠4g煌绿0.025g柠檬酸铋铵2g亚硫酸钠6g琼脂18~20g蒸馏水1000m LpH7.5制法:1将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中.2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解. 3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃4将以上三液合并,补充蒸馏水至1000m L,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀.冷至50~55℃,倾注平皿.注:此培养基不需高压灭菌.制备过程不宜过分加热.以免降低其选择性.应在临用前一天制备,贮存于室温暗处.超过48h不宜使用.44DHL琼脂成分:蛋白胨20g牛肉膏3g乳糖10g蔗糖10g去氧胆酸钠1g硫代硫酸钠2.3g柠檬酸钠1g柠檬酸铁铵1g中性红0.03g琼脂18~20g蒸馏水1000m LpH7.3制法:将除中性红和琼脂以外的成分溶解于400mL 蒸馏水中,校正pH.再将琼脂于600m L蒸馏水中煮沸溶解,两液合并,并加入0.5%中性红水溶液6mL,待冷至50~55℃,倾注平板.45HE琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g乳糖12g蔗糖12g水杨素2g胆盐20g氯化钠5g琼脂18~20g蒸馏水1000m L0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mLAnd rad e指示剂20mL甲液20mL乙液20mLpH7.5制法:将前面七种成分溶解于400mL蒸馏水内作为基础液;将琼脂加入于600m L蒸馏水内,加热溶解.加入甲液和乙液于基础液内,校正pH.再加入指示剂,并与琼脂液合并,待冷至50~55℃,倾注平板.注:①此培养基不可高压灭菌.②甲液的配制硫代硫酸钠34g柠檬酸铁铵4g蒸馏水100mL②乙液的配制去氧胆酸钠10g蒸馏水100mL②Andrad e指示剂酸性复红0.5g1mol/L氢氧化钠溶液16mL蒸馏水100mL将复红溶解于蒸馏水中,加入氢氧化钠溶液.数小时后如复红褪色不全,再加氢氧化钠溶液1~2mL.46SS琼脂基础培养基:牛肉膏5g眎胨5g三号胆盐3.5g琼脂17g蒸馏水1000m L再将两液混合,121℃高压灭菌15min,保存备用.完全培养基:基础培养基100m L乳糖10g柠檬酸钠8.5g硫代硫酸钠8.5g10%柠檬酸铁溶液10mL1%中性红溶液2.5mL0.1%煌绿溶液0.33m L加热溶化基础培养基,按比例加入上述染料以外之各成分,充分混合均匀,校正至pH7.0,加入中性红和煌绿溶液,倾注平板.注:①制好的培养基宜当日使用,或保存于冰箱内于48h内使用.②煌绿溶液配好后应在10d以内使用.③可以购用SS琼脂的干燥培养基.47WS琼脂成分:脙胨12g牛肉膏3g氯化钠5g乳糖12g蔗糖12g十二烷基硫酸钠2g琼脂15gAnd rad e指示剂20mL0.4%溴麝香草酚蓝溶液16mL甲液20mL蒸馏水1000m LpH7.0制法:除指示剂和甲液外,将其他成分加热溶解,不需消毒,校正pH后加入指示剂和甲液,倾注平板应呈草绿色.注:①供沙门氏菌分离用.②Andrad e指示剂和甲液的配制均见HE琼脂.48麦康凯琼脂成分:蛋白胨17g眎胨3g猪胆盐(或牛,羊胆盐)5g氯化钠5g琼脂17g蒸馏水1000m L乳糖10g0.01%结晶紫水溶液10mL0.5%中性红水溶液5mL制法:1将蛋白胨,眎,胆盐和氯化钠溶解于400mL蒸馏水中,校正pH7.2.将琼脂加入600m L加热溶解.将两液合并,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.2临用时加热溶化琼脂,趁热加入乳糖,冷至50~55℃时,加入结晶紫和中性红水溶液,摇匀后倾注平板.注:结晶紫及中性红水溶液配好后须经高压灭菌.49伊红美蓝琼脂(EMB)成分:蛋白胨10g乳糖10g磷酸氢二钾2g琼脂17g2%伊红Y溶液20mL0.65%美蓝溶液10mL蒸馏水1000m LpH7.1制法:将蛋白胨,磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,校正pH,分装于烧瓶内,121℃高压灭菌15min备用.临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃,加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板.50三糖铁琼脂(TS I)成分:蛋白胨20g牛肉膏5g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁铵〔Fe(NH4)2(SO4)2·6H2O〕0.2g硫代硫酸钠0.2g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000m LpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5m L,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min.放置高层斜面备用.51三糖铁琼脂(换用方法)成分:蛋白胨15g眎胨5g牛肉膏3g酵母膏3g乳糖10g蔗糖10g葡萄糖1g氯化钠5g硫酸亚铁0.2g硫代硫酸钠0.3g琼脂12g酚红0.025g蒸馏水1000m LpH7.4制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH.加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂.加入0.2%酚红水溶液12.5m L,摇匀.分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层.121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用.52克氏双糖铁琼脂(KI)上层培养基成分血消化汤(pH7.6)500mL琼脂6.5g硫代硫酸钠0.1g硫酸亚铁铵0.1g乳糖5g0.2%酚红溶液5mL下层培养基成分血消化汤(pH7.6)500mL。

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