高中生物选修一专题五DNA和蛋白质技术知识点演示教学
人教版高中生物选修一专题五《DNA和蛋白质技术》知识点归纳
专题五DNA和蛋白质技术课题一DNA的粗提取与鉴定一、提取DNA的溶解性原理包括哪些方面?1.DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同;DNA不溶于酒精。
①DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度有何特点?要使DNA溶解,需要使用什么浓度?要使DNA析出,又需要使用什么浓度?在0.14mol/L时溶解度最小;较高浓度可使DNA溶解;0.14mol/L可使DNA析出。
②在溶解细胞中的DNA时,人们通常选用2mol/LNaCl溶液;将DNA分子析出的方法是向溶有DNA的NaCl溶液中缓慢注入蒸馏水,以稀释NaCl溶液。
酒精是一种常用有机溶剂,但DNA却不能溶于酒精(特别是95%冷却酒精),但细胞中蛋白质可溶于酒精。
2.从理论上分析,预冷的乙醇溶液具有以下优点。
一是抑制核酸水解酶活性,防止DNA降解;二是降低分子运动,易于形成沉淀析出;三是低温有利于增加DNA分子柔韧性,减少断裂。
3.采用DNA不溶于酒精的原理,可以达到什么目的?将DNA和蛋白质进一步分离。
4.提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。
利用该原理时,应选用怎样的酶和怎样的温度值?蛋白酶,因为酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
温度值为60~80℃,因为该温度值蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
补充:DNA的变性是指DNA分子在高温下解螺旋,其温度在80℃以上,如在PCR技术中DNA变性温度在95℃。
5.洗涤剂在提取DNA中有何作用?洗涤剂将细胞膜上的蛋白质,从而瓦解细胞膜。
6.当鉴定提取出的物质是否是DNA时,需要使用什么指示剂进行鉴定?在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。
原理总结:通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的;最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。
二、实验材料的选取不同生物的组织中DNA含量不同。
人教版高中生物选修1课件:专题5 DNA和蛋白质技术(选修一)
■高中生物课件(人教课标版)
课题3 血红蛋白的提取和分离
一、基础知识:
(一)蛋白质提取和分离原理 (二)蛋白质提取和分离的方法
1)凝胶色谱法:又称分配色谱法 2)电泳法
(三)缓冲液的作用
二、实验操作--实验步骤 样品处理 和粗分离 血液组成成分
C.模板:亲代DNA
(3)需要的条件: 模板、原料、能量、酶
(4)复制场所: 主要在细胞核
(5)复制特点: 半保留复制;边解旋边复制
(6)复制准确无误的原因:
DNA分子独特的双螺旋结构, 为复制提供了精确的模板 碱基互补配对保证了复制能准 确无误地进行
二、PCR原理 5/ G—G
/ 3 T—C
3/ A—G 5/
1. 下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是 A.氯化钠的浓 度越低,对DNA的溶解度越大 B.人血也可代替鸡血进行实验 C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 D.DNA不能溶于酒精 2. 在破碎鸡血细胞时,要先加入20ml的蒸馏水,其作用是 A. DNA溶解于水 B. 血细胞破裂,DNA释放 C.稀释血液,防止凝固 D. 有利于搅拌 3. 若选择的实验材料为植物细胞,破碎细胞时要加入一定量的洗 涤剂和食盐,加入食盐的目的是 A. 利于DNA的溶解 B. 分离DNA和蛋白质 C. 溶解细胞膜 D. 溶解蛋白质 4. 在DNA粗提取实验中,向在溶解DNA的NaCl溶液中,不断加 入蒸馏水的目的是 A.有利于溶解DNA B.有利于溶解杂质 C.减少DNA的溶解度 D.减少杂质的溶解度
3.分离血红蛋白
分离过程 红细胞 混合液 高速离心 10min
离心 管
脂类物质 有机溶剂
高中生物选修一专题五DNA和蛋白质技术知识点演示教学
5 DNA和蛋白质技术5.1 DNA的粗提取与鉴定1. 提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
DNA勺粗提取就是利用DNA与|RNA蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA去除其他成分。
2. DNA粗提取的原理:1)DNA和蛋白质等其它成分在不同浓度的NaCI溶液中的溶解度不同。
所以一般选用|2mol/L |的NaCI溶液充分溶解DNA使杂质沉淀,再缓慢注入蒸馏水使NaCI溶液浓度接近0遍0几,使DNA析出。
2)DNA 不溶于酒精溶液,而细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
所以可用体积分数为95% ,预冷的酒精溶液来提纯DN A3. 提取DNA还可以利用DNA寸酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。
1)酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
2)温度值为60〜80C时,会使蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
3)植物细胞提取DNA时,常用洗涤剂瓦解细胞膜, 但对DNA没有影响。
4. 在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色,可以检测DNA勺存在。
5. 选用DNA含量相对高的生物组织提取DNA成功的可能性更大。
哺乳动物成熟的3)去除滤液中的杂质:往DNA滤液中加入|2mol/L的NaCl|溶液,过滤除去不溶的杂质。
再加蒸馏水调节NaCI溶液浓度接近|0.14mol/L |,析出|D N A过滤去除溶液中的杂质。
4)D NA勺提纯:将析出的DNA用|2mol/L的NaCj溶液溶解过滤取滤液,加入与滤液体积相等的、预冷的体积分数为95%勺酒精溶液,静置2-3分钟,析出匝丝状物即为粗提取的DNA5)D NA勺鉴定:白色丝状物溶于5mL2mol/L的NaCl|溶液,加入4mL二苯胺|,沸水浴5分钟后观察到DNA溶液呈蓝色。
7. 注意事项:在鸡血中要加入柠檬酸钠防止凝固;玻璃容器会吸附DNA,所以提取过程使用塑料烧杯;使用尼龙布过滤;加入酒精和用玻棒搅拌时,动作要轻口缓(细胞破裂快速搅拌),沿同一方向搅拌,以免加剧DNA分子的断裂导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
【测控设计】高中生物 专题5 DNA和蛋白质技术专题整合课件 新人教版选修1
DNA 在不同浓度 NaCl 溶 实验 液中溶解度不同,且不溶于 原理 冷酒精 选取材料→破碎细胞释放 实验 DNA→除杂→DNA 析出与 过程 鉴定 实验 获得较纯净的 DNA 结果 实验 为 DNA 研究打下基础 意义
解决了 DNБайду номын сангаас 研究 为蛋白质的研究和利用 中材料不足的问 提供了原材料 题
专题整合
-* -
Z 知识网络
HIshi wangluo
Z 专题归纳
HUANTI GUINA
Z 知识网络
专题
HISHI WANGLUO
Z 专题归纳
HUANTI GUINA
提取 DNA、PCR 技术与分离蛋白质的比较
提取 DNA PCR 技术 分离蛋白质 利用 DNA 热变性 依据相对分子质量的大 小不同或带电性质差异 原理体外扩增 DNA 来分离蛋白质 变性→复性→延 样品处理→粗提取→纯 伸 化→纯度鉴定 获得大量 DNA 相对分子质量或带电性 质不同的蛋白质得以分 离
高中生物选修1《专题5 DNA和蛋白质技术》复习课件
• 2.PCR的反应过程 • 一般要经历三十多次循环,每次循环可分为变 性→复性→延伸三步。学.科.网 zxxk. • 3.PCR技术反应过程中控制不同温度的意义 • (1)90 ℃以上时变性,双链DNA解聚为单链; • (2)50 ℃左右时复性,两种引物与两条单链 DNA结合; • (3)72 ℃左右时延伸,TaqDNA 聚合酶促使 DNA新链的合成。
• 5.玫瑰精油称为“液体黄金”,其提取方法() • A.只能用水蒸气蒸馏法 B.可用蒸馏法和压 榨法 • C.可用蒸馏法和萃取法 D.可用压榨法和萃 取法 • 【答案】 C
• (2009年高考江苏卷)下列关于DNA和蛋 白质提取与分离实验的叙述,正确的有(双 ) •选) 【答案】( BD • A.提取细胞中的DNA和蛋白质都需用 蒸馏水涨破细胞 • B.用不同浓度NaCl溶液反复溶解与析 出DNA可去除蛋白质 • C.蛋白质提取和分离过程中进行透析可 以去除溶液中的DNA • D.蛋白质和DNA都可以用电泳的方法 进行分离纯化
状物较少,可将混合液放入到冰箱中再冷却几分钟。
1. (改编)在DNA分子的粗提取实验中,两次向 烧杯中加入蒸馏水的作用是( ) A. 稀释血液、冲洗样品 B. 使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C. 使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D. 使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA 【答案】B
• 2.(2010年青岛模拟)下列关于DNA粗提取 与鉴定的说法正确的是( ) • A.氯化钠的浓度越低,DNA的溶解度越大 • B.人的血液不可代替鸡血进行该实验 • C.柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂 • D.利用DNA易溶于酒精的特点可除去DNA 中的部分杂质 • 【答案】 B
• 1.(2008年江苏生物)下列叙述中错误的 是( ) • A.改变NaCl溶液的浓度只能使DNA溶 解而不能使其析出 • B.在沸水浴中,DNA遇二苯胺试剂会 呈现蓝色 • C.用电泳法可分离带电性质、分子大小 和形状不同的蛋白质 • D.用透析法可去除蛋白质样品中的小分 子物质
高中生物专题5DNA和蛋白质技术专题整合归纳课件选修1
C.向鸡血细胞液中加蒸馏水搅拌,可见玻棒上有白色絮
状物
D.DNA溶液加入二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝
• [解析] 本题考查学生对教材实验的掌握。酵母菌 和菜花细胞均为真核细胞,理论上均可作为提取 DNA的材料;DNA既溶于2mol/L NaCl溶液也溶于 蒸馏水,在2mol/L NaCl溶液中溶解度最大,在 NaCl溶液中溶解度最小;向鸡血细胞液中加蒸馏水 搅拌,是为了加速细胞膜和核膜破裂,此时玻棒上 没有白色絮状物;鉴定DNA的原理是DNA溶液加入 二苯胺试剂沸水浴加热,冷却后变蓝。
• (2)培养微生物L前,宜采用________方法对 接种环进行灭菌。
• (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量 大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质 电泳速度越快,说明其分子量越________。
• (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法) 进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的 ________确定其应用价值。除化学结合法外, 酶的固定化方法还包括________、 ________、离子吸附法及交联法等。
高中生物专题5DNA和蛋白质技 术专题整合归纳课件选修1
DNA和蛋白质技术
1.1.1 集合的概念
专题五
专题整合归纳
1.1.1 集合的概念
专题五
知识网络 知识总结 高考体验
蛋白质三者比较
分离DNA
PCR技术
实验 原 理
DNA在不同浓度NaCl 溶液中溶解度不同, 且不溶于冷酒精
利用DNA热变性原 理体外扩增DNA
实验 选取材料→破碎细胞释
过
放DNA→除杂
程 →DNA析出与鉴定
实验 结 果
获得较纯净的DNA
实验 意 为DNA研究打下基础 义
最新高中生物选修一专题五DNA和蛋白质技术知识点教学教材
5 DNA和蛋白质技术5.1 DNA的粗提取与鉴定1.提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
DNA的粗提取就是利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其他成分。
2.DNA粗提取的原理:1)DNA和蛋白质等其它成分在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同。
所以一般选用2mol/L的NaCl溶液充分溶解DNA,使杂质沉淀,再缓慢注入蒸馏水使NaCl溶液浓度接近0.14mol/L,使DNA析出。
2)DNA 不溶于酒精溶液,而细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
所以可用体积分数为95%,预冷的酒精溶液来提纯DNA。
3.提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。
1)酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
2)温度值为60~80℃时,会使蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
3)植物细胞提取DNA时,常用洗涤剂瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
4.在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色,可以检测DNA的存在。
5.选用DNA含量相对高的生物组织提取DNA,成功的可能性更大。
哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和细胞器,不适宜用来提取DNA,但适宜用来提取血红蛋白。
6.实验设计过程:1)实验材料的选取:本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为其DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长。
2)破碎细胞,获取含DNA的滤液:往鸡血细胞中加一定量的蒸馏水,同时用玻棒搅拌,使细胞吸水胀破释放DNA,过滤取DNA滤液。
3)去除滤液中的杂质:往DNA滤液中加入2mol/L的NaCl溶液,过滤除去不溶的杂质。
再加蒸馏水调节NaCl溶液浓度接近0.14mol/L,析出DNA,过滤去除溶液中的杂质。
4)DNA的提纯:将析出的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解过滤取滤液,加入与滤液体积相等的、预冷的体积分数为95%的酒精溶液,静置2-3分钟,析出白色丝状物即为粗提取的DNA。
2021学年高中生物专题五DNA和蛋白质技术整合归纳5课件人教版选修1.ppt
确的是
(D)
A.在甘蔗茎的组织样液中加入双缩脲试剂,温水浴后液体由蓝色变成砖
红色
B.在大豆种子匀浆液中加入斐林试剂,液体由蓝色变成紫色
C.提取DNA时,在切碎的洋葱中加入适量洗涤剂和食盐,充分研磨,过
滤并弃去滤液
D.将DNA粗提物溶解在2 mol/L NaCl溶液中,加入二苯胺试剂,沸水浴
后液体由无色变成蓝色
兔血不宜作为该实验的实验材料,A项错误。DNA析出过程中,搅拌要轻柔,
以防止DNA断裂,B项正确。DNA不溶于冷乙醇,向DNA提取液中加入适量预
冷的乙醇溶液,会使DNA析出,从而进一步提纯DNA,C项正确。向溶有DNA
的溶液中加入二苯胺试剂,沸水浴加热数分钟,溶液出现蓝色,D项正确。
3.(2018·江苏,17)关于还原糖、蛋白质和DNA的鉴定实验,下列叙述正
4.(2020·新课标Ⅱ卷,37)研究人员从海底微生物中分离到一种在低温下
有催化活性的α-淀粉酶A3,并对其进行了研究。回答下列问题: (1)在以淀粉为底物测定A3酶活性时,既可检测淀粉的减少,检测应采用的
试剂是__碘__液____,也可采用斐林试剂检测_还__原__糖___(或__答__:__葡__萄__糖__)____的增加。
[解析] A错:甘蔗茎的组织样液中含有大量的蔗糖,蔗糖属于非还原性 糖,与斐林试剂在50~65 ℃的水浴加热条件下不会产生砖红色沉淀。B错:大 豆种子的匀浆液中含有大量的蛋白质,鉴定蛋白质时应使用双缩脲试剂,双缩 脲 试 剂 在 常 温 下 能 与 蛋 白 质 发 生 反 应 , 生 成 紫 色 的 络 合 物 。 C 错 : 提 取 DNA 时,植物细胞需要先用洗涤剂溶解细胞膜。在切碎的洋葱中加入适量的洗涤剂 和食盐,进行充分的研磨,过滤后收集滤液。D对:在沸水浴条件下,DNA与 二苯胺试剂反应呈现蓝色。
高中生物选修一课件:专题5 DNA和蛋白质技术
加入二苯胺试剂4mL,用玻棒搅拌使DNA溶解,沸水 浴5min,观察溶液是否出现浅蓝色。
实验小结
1.共有“三次过滤,两次析出,七次搅拌” 2.加入“两次蒸馏水,三次NaCl溶液,一次酒精”
实验原理拓展介绍
1.DNA的释放 DNA主要在鸡血细胞的细胞核内,正常情况下不会释 放出来,蒸馏水对于鸡血细胞是一种低渗液,水分可 以大量进入血细胞,使之胀破,同时加上玻璃棒快速 搅拌的机械作用,加速血细胞的细胞膜和核膜的破裂。 但释放出来的大量DNA与RNA、蛋白质结合在一起, 即释放的不是纯净的DNA,常称为DNA核蛋白。
酒精溶液,利用这一原理可以_去__除__杂__质___,可以推测溶
于酒精中的可能有_某__些__盐__类__、__蛋__白__质、糖类。
或其他大分子物质
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专题五 DNA和蛋白质技术
课题二 多聚酶链式反应扩增 DNA片段
【课题背景】
在刑事侦破案件中常需要对样品DNA进行分析, PCR技术能快速扩增DNA片段,在几个小时内复制 出上百万份的DNA拷贝,有效地解决了因为样品中 DNA含量太低而难以对样品进行分析研究的问题。 现在PCR技术已广泛应用于遗传病的诊断、刑侦破 案、古生物学、基因克隆和基因测序。
随堂训练
1.在DNA的粗提取实验过程中,两次向烧杯中加入蒸 馏水的作用是( B ) A.稀释血液、冲洗样品 B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA
2.实验中NaCl的物质的量浓度为2 mol/L 和0.14 mol/L对DNA有何影响?
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7.DNA在 NaCl溶液中的溶解度有两重性,随着 NaCl溶
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4、 Taq DNA聚合酶的应用
高温解决了打开双链的问题,但是,又导致 DNA聚合酶失活的问题,耐高温的Taq DNA 聚合酶解决了高温导致DNA聚合酶失活的问 题,促成了PCR技术的自动化
5、 缓冲液需要为PCR反应提供的物质
DNA模板,分别与两条模板链相结合的两种引 物,四种脱氧核苷酸,耐热的DNA聚合酶,同 时通过控制温度使DNA复制在体外反复进行
11、复制的意义 DNA分子通过复制使遗传信息从亲代传给了 后代,从而保持了遗传信息的连续性
12、DNA复制过程中的等量关系
①一条双链DNA分子,复制N次,形成的子代 DNA分子中,含亲代DNA母链的有两个DNA 分子,占子代DNA总数的2/2N;亲代DNA分 子母链两条,占子代DNA中脱氧核苷酸链总 数的2/2 N+1= 1/2N
5、反应
将离心管放入PCR仪上,设置好PCR仪的循 环程序
循环数 第一次 30次 最后一次
变性
94°C, 10min 94℃, 30s 94℃, 1min
复性 -
延伸 -
55℃,30s 72℃, 1min
55℃,30s 72℃, 1min
6、注意事项 PCR技术高度灵敏,为了避免外源DNA等因素的 污染而造成干扰实验,PCR操作时要注意做到:
8、细胞内复制和PCR不同点
① PCR过程需要的引物不是RNA,而是人工 合成的DNA单链,其长度通常为20-30个脱 氧核苷酸
② PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是 通过对反应温度的控制来实现的
(五) PCR的反应过程
1、PCR的反应步骤
PCR一般经历三十多次循环,每次循环可以 分为三个基本步骤──变性、复性和延伸 2、循环过程冈崎片断连接起来。形 成一条完整的新的DNA链。新链与旧链构成新的 DNA
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5 DNA和蛋白质技术
5.1 DNA的粗提取与鉴定
1.提取生物大分子的基本思路是选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
DNA的粗提取就是利用DNA与RNA、蛋
白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异,提取DNA,去除其
他成分。
2.DNA粗提取的原理:1)DNA和蛋白质等其它成分在不同浓度的
NaCl溶液中的溶解度不同。
所以一般选用2mol/L的NaCl溶液充分溶解DNA,使杂质沉淀,再缓慢注入蒸馏水使NaCl溶液浓度接近0.14mol/L,使DNA析出。
2)DNA 不溶于酒精溶液,而细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。
所以可用体积分数为95%,预冷的酒精溶液来提纯DNA。
3.提取DNA还可以利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理。
1)酶具有专一性,蛋白酶只水解蛋白质而不会对DNA产生影响。
2)温度值为60~80℃时,会使蛋白质变性沉淀,而DNA不会变性。
3)植物细胞提取DNA时,常用洗涤剂瓦解细胞膜,但对DNA没有影响。
4.在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色,可以检测DNA的存在。
5.选用DNA含量相对高的生物组织提取DNA,成功的可能性更大。
哺乳动物成熟的红细胞无细胞核和细胞器,不适宜用来提取DNA,但适宜用来提取血红蛋白。
6.实验设计过程:1)实验材料的选取:本实验用鸡血细胞做实验材料有两个原因。
一是因为其DNA含量丰富,材料易得;二是鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长。
2)破碎细胞,获取含DNA的滤液:往鸡血细胞中加一定量的蒸馏水,同时用玻棒搅拌,使细胞吸水胀破释放DNA,过滤取DNA滤液。
3)去除滤液中的杂质:往DNA滤液中加入2mol/L的NaCl溶液,过滤除去不溶的杂质。
再加蒸馏水调节NaCl溶液浓度接近0.14mol/L,析出DNA,过滤去除溶液中的杂质。
4)DNA的提纯:将析出的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解过滤取滤液,加入与滤液体积相等的、预冷的体积分数为95%的酒精溶液,静置2-3分钟,析出白色丝状物即为粗提取的DNA。
5)DNA的鉴定:白色丝状物溶于5mL2mol/L的NaCl溶液,加入4mL二苯胺,沸水浴5分钟后观察到DNA溶液呈蓝色。
7.注意事项:在鸡血中要加入柠檬酸钠防止凝固;玻璃容器会吸附DNA,所以提
取过程使用塑料烧杯;使用尼龙布过滤;加入酒精和用玻棒搅拌时,动作要轻缓(细胞破裂快速搅拌),沿同一方向搅拌,以免加剧DNA分子的断裂,导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
二苯胺试剂要现用现配等。
5.2多聚酶链式反应扩增DNA片段
1. PCR又叫多聚酶链式反应,是一种体外迅速扩张DNA片段的技术,其复制过程与细胞内DNA的复制类似。
需要:1)解旋酶(打开DNA双链);2)DNA母链(提供DNA复制的模板);3)四种脱氧核苷酸(合成子链的原料);4)DNA聚合酶(催化合成DNA子链)5)引物(使DNA聚合酶能够从引物的3,端开始连接脱氧核苷酸)。
2.为了明确地表示DNA的方向,通常将DNA的羟基(-OH)末端称为3,端,而磷酸基团的末端称为5,端。
DNA聚合酶不能从头开始合成DNA,而只能从3,端延伸DNA链,因此DNA复制需要引物。
当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的3,端开始延伸DNA链,因此DNA的合成方向总是从子链的5,端向3,端延伸。
1
2
3.PCR 利用了DNA
使用的PCR
PCR 反应需要在一定的
DNA
DNA
复制在体外反复进行。
4.PCR 一般要经历30
温度上升到
DNA 解聚为单链。
复性指当温度下降到
DNA 结合。
延伸指当温度上升到
A 、T 、C 、G )在DNA
聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA 链。
5PCR
酶吸
6.DNA
在可以利用这一特点进行
的测定。
5.3 血红蛋白的提取和分离
1.负责血液中
2.溶解度、
吸附性质和对
3.
法。
内部有许多贯穿的通道,
当相对分子质量
质因此得以分离。
4.
20mmol/L PH 为7.0
)。
5.许多重要的生物大分子,
如
在一定的PH 下,
在电场的作用下,电泳利用了待分离样品中各种分子带电性质的差异以及分子本身的大小、形状的不同使带电分
6.
样品的处理及粗分离包括:1
2 3
4)透析:把血红蛋白装入透析袋,置于20mmol/L 磷酸缓冲液(PH 为7.0
)中,除
7.用缓冲液平衡好的凝胶装填色谱柱时,
降低分离
8.血红蛋白提取和分离的程序可分为四大步,包括:样品处理、粗分离、纯化和纯度鉴定。
首先通过洗涤红细胞、
血红蛋白的释放、离心等操作收集到血红蛋白溶液,再经过透析去除分子量较小的杂质,
然后通过凝即样品的纯化;。