流式细胞仪临床应用手册

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流式细胞仪及其临床应用

流式细胞仪及其临床应用

流式细胞术及其临床应用ABSTRACTKey words: Flowcytometry; Immunophenotyping; Leukemia; Activated platelets; Tumor; Apoptosis.流式细胞术(flowcytometry FCM)是对单个细胞或其他生物微粒进行快速定量分析和分选的一门技术。

在分析或分选过程中,包绕在流动液体中处理过的单个细胞或微粒通过聚焦的光源,产生电信号,这些信号代表光散射、荧光等参数,以此测定出细胞或微粒的物理和化学性质,并可根据这些性质分选出高纯度的细胞亚群,以对其进一步的培养或分析。

包绕细胞的液流称为鞘液。

所用仪器称为流式细胞仪(flowcytometer FCM)。

流式细胞术综合了光学、电子学、流体力学、细胞化学、免疫学、激光技术和计算机科学等多门学科和技术,具有检测速度快、精确、测量指标多、采集数据量大、分析全面、方法灵活等特点。

一、流式细胞仪(flowcytometer FCM)1.流式细胞仪的基本结构流式细胞仪的结构一般可分四部分,见图1。

(1)流动系统流动系统是流式细胞仪的心脏,因为细胞悬液在被检测之前必须首先形成一个很细的稳流,细胞在其内部排成单列通过测量区。

细胞悬液和鞘液分别(是分别还是同时)进入流动室,鞘液的作用是使样品悬液中的粒子组成单一纵列方式通过测量区,保证每个细胞通过激光照射区的时间相等,从而得到准确的细胞荧光信息。

(2)激光系统多采用氩离子激光器。

使发射光在可见光谱范围内488nm激发。

目前市场上大多数荧光色素适用于此波长。

激光的单色性好,功率高,稳定。

(3)光学和电子系统激光束射至经流体力学聚焦的个别细胞和粒子后,光散射在各个方向(360?)发射。

有两个光散射参数需收集,前向角散射(FSC)主要用于检测细胞体积的大小。

另一为侧向散射(SSC)用于检测细胞膜,胞质,核膜等细胞内部结构及胞质内颗粒。

荧光信号是由对细胞进行染色的特异性荧光染料受到激光激发后发射的。

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测血小板功能及其临床应用

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测血小板功能及其临床应用

流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)检测血小板功能及其临床应用血小板功能的检测包括测定血小板粘附、聚集和活化的能力。

然而,在血小板相关疾病的诊断中,检测血小板功能的方法常常是有争议的。

这通常是由于方法本身的原因造成的[1],譬如,静脉阻滞、抗凝剂选择、离心,甚至标本处理不当等因素,都可导致医源性血小板激活,影响临床诊断的价值。

这就要求建立一种灵敏、精确、快速、简便,最好可用于临床常规检测血小板功能测定方法。

关键词:血小板临床应用流式细胞术血小板功能的检测包括测定血小板粘附、聚集和活化的能力。

然而,在血小板相关疾病的诊断中,检测血小板功能的方法常常是有争议的。

这通常是由于方法本身的原因造成的[1],譬如,静脉阻滞、抗凝剂选择、离心,甚至标本处理不当等因素,都可导致医源性血小板激活,影响临床诊断的价值。

这就要求建立一种灵敏、精确、快速、简便,最好可用于临床常规检测血小板功能测定方法。

由于血小板的活化程度可由血小板膜糖蛋白表达水平的高低来判断,近年来,文献报道利用流式细胞术,特别是全血法流式细胞术,检测血小板膜糖蛋白的表达[2]。

该技术能灵敏、特异地检测血液中活化血小板,并评价其功能。

现就全血法流式细胞术检测血小板功能的方法及临床应用现状和潜力进行综述。

一、全血法流式细胞术1.方法学:流式细胞仪能快速测定大量个体细胞的特性。

样品中欲分析的细胞预先进行荧光标记,然后由压缩氮经硅管送达标本室,再以5 000~10 000个细胞/秒的速率逐个射入光敏感区。

在适当波长的激发光作用下,被特殊染色的细胞发射出一定量的荧光脉冲讯号。

探测器收集每个细胞的荧光讯号和光散射,然后传入计算机进行分析。

传统的流式细胞术检测血小板膜糖蛋白的表达,常用的样本是经洗涤的血小板或富含血小板的血浆。

由于血小板极易活化激惹,样本经离心、洗涤等步骤,容易人为地导致体外血小板激活,影响临床诊断价值。

为此,Shatti等[2]引入了全血法流式细胞术。

FCM(流式细胞术检测)原理及临床应用

FCM(流式细胞术检测)原理及临床应用
流式细胞术的概念
流式细胞术(flow cytometry FCM)是利用流式细 胞仪对单个生物颗粒(红细胞、白细胞、各类组织细 胞、血小板、微生物等)以及人工合成微球的物理和 生物学特性进行多参数定量分析,并能对特定细胞 群体加以分选的分析技术。
FCM的工作原理
流式细胞仪组成:
1.液流系统 2.光学系统 3.数据处理系统
双标记或多标记分析:目前使用的流式细胞仪 能用一个激光束激发检测三色甚至四色荧光信 号。检测时需注意荧光补偿。
常用免疫荧光染料组合
荧光染料 FITC+PE
激发波长 (nm)
488
发射波长(nm) 525、575
颜色 绿色、橙色
FITC+PeCy5
488
525、675
绿色、红色
FITC+ECD
488
实体瘤以多倍体居多;
G0 期:DNA 合成静止期 G1 期:DNA 合成前期 S 期: DNA 合成期 G2 期:DNA 合成后期 M 期: 细胞分裂期
DNA 倍体 2N 2N
2N-4N 4N 4N
DNA非2倍体出现是鉴别良性与恶性肿瘤的特异性指 标:
良性肿瘤和正常组织良性增生不出现DNA非2倍体细 胞而恶性肿瘤常可出现异倍体细胞;
过去认为 FCM测定残存白血病细胞不可靠, 因为现用的 McAb不能鉴别正常血细胞与白血 病细胞。虽然至今尚未发现白血病细胞特异抗 原,但近来有人提出根据白血病细胞的以下特 征, FCM检测的敏感度可明显提高
白血病细胞的某些抗原表达量明显高于相应 的正常血细胞
如小儿ALL,其CDl0+细胞的荧光强度可 高达3-4个对数值,而其 CD45则为弱阳性或 阴性。
525、625

流式细胞仪工作原理及临床应用

流式细胞仪工作原理及临床应用

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(上接第 $% 页) !& $& ’ ( )* 还可用来对其它免疫功能性疾病如 强直性脊髓炎、 变态反 + , - . 系统性红斑狼疮 / 病人, 应性疾病、 肾病综合症等进行检测与疗效观察。 !& ! ( )* 在白血病中的应用 白血病免疫分型是选择化疗方案和判断预后的 了解细胞的生物学行为,从而帮助肿瘤的诊断,选择 治疗方案和预后判断。 不同类型的肿瘤对化疗药物的敏感程序不同, 可 利用 ( )* 进行细胞周期分析,适当选用周期特异性 药物或非周期特异性药物, 为治疗方案和药理学研究 提供依据。 ( )* 还可进行活细胞内活性酶的检测。利用活 细胞酶探针测量单一活体细胞内酶的活性。 ( )* 还 可作细胞凋亡检测。 对以往的病理组织进行回顾性研 究。 2 注意的问题 有关流式细胞仪的一般故障与排除, 设备维修手 册中已有介绍, 不再赘述。提及一点操作者易忽略的 问题, 就是样品处理后最好在荧光显微镜下快速检查 一下,若在荧光显微镜下看到的效果很差,有细胞碎 ( )* 在肿瘤学中的应用 ( )* 在肿瘤学中的应用主要是利用 34 5 含量 片和凝集团, 在流式细胞仪上看到的情况会更差。不 仅不会获得有价值的结果,还会堵塞管道及喷嘴,带 来更大的麻烦。碰到这种情况, 可将样品重新处理后 观察。 随着单抗技术及其他相关技术的不断发展, 流式 细胞仪的应用领域将会得到不断的开拓, 成为科研与 临床不可缺少的重要手段。 这就要求操作人员熟悉了 解仪器各部分基本原理,减少和避免设备故障的发 生。 # ・ !"・

流式细胞的原理及临床应用课件

流式细胞的原理及临床应用课件
•流式细胞的原理及临ห้องสมุดไป่ตู้应用
PerCP/CD19 APC
•流式细胞的原理及临床应用
恶性肿瘤患者T 细胞亚群和SIL22R 的变化及意义卢香兰1 ,李 霞1 ,王萍萍1 ,李玲2 ,李艳1· 3 4 2 · 中国医科大学学报 J Chin Med Univ 第33 卷 第3 期 2004 年6 月
•流式细胞的原理及临床应用
疾病
T 细胞亚群
CD4+/CD8+
•流式细胞的原理及临床应用
• CD8+T细胞又称细胞毒性T细胞,Tc或CTL,它在T细胞免 疫应答中发挥重要功能。
• Tc细胞识别抗原活化后释放胞浆内颗粒毒素:穿孔素 perforin和颗粒酶granzyme,杀伤靶细胞。
•流式细胞的原理及临床应用
B淋巴细胞
▪ B淋巴细胞是免疫系统中的抗体产生细胞。 ▪ 1,产生的抗体可与抗原起特异性的结合,如中
就目前的研究文献而言,HLA-B27 与 AS 并非绝对相关,有些AS 患者表现 为HLA-B27阴性,而且并非所有HLA•流式细胞的原理及临B床2应7 用阳性者均出现AS 症状。
HLA-B27诊断的临床意义
▪ 强直性脊柱炎-90-100% 的强直性脊柱炎患者HLA-B27为阳性。但 是HLA-B27阳性的人群中只有8-20%是强直性脊柱炎。
•流式细胞的原理及临床应用
2、淋巴细胞亚群分析
•流式细胞的原理及临床应用
淋巴细胞亚群基础知识
▪ T淋巴细胞:主要杀伤病原体感染细胞及肿瘤细胞。 ▪ 表面标志物:CD3,与TCR形成复合体,是T细胞识
别抗原和转导信号的主要单位。 ▪ CD3+/CD4+:辅助性T细胞 ▪ CD3+/CD8+:杀伤性T细胞

流式细胞术的临床应用

流式细胞术的临床应用

流式细胞术的临床应用闫 虹(天津市人民医院检验学部,天津300121) 流式细胞术(flow cytometry,FC M)是20世纪70年代发展起来的对单细胞定量分析的一种新技术。

它借鉴了荧光标记技术、激光技术、单抗技术和计算机技术,具有极高的检测速度与统计精确性,而且从单一细胞可以测得多个参数,为生物医学与临床检验提供了全新视角和强有力手段。

目前,随着单克隆抗体技术的发展,流式细胞仪检测技术已经广泛使用在基础研究和临床实践的各个方面,在肿瘤学、血液学,免疫学、微生物学、细胞生物学-遗传学及临床检验学等诸多领域内发挥着重要作用[1]。

本文就其在临床上的应用综述如下。

1 流式细胞仪的工作原理 流式细胞仪主要由细胞流动室、激光聚焦区、检测系统、数据处理系统等4部分组成,其工作原理是将待测标本制成单细胞悬液,经染色后进入流动室,流动室充满流动的鞘液,鞘液压力与样品压力是不同的,当两者的压力差异达到一定程度时,鞘液裹挟着的样品流中细胞排成单列逐个经过激光聚焦区。

若将细胞中感兴趣的部分特异性地标上荧光染料,那么这些染料将在细胞通过激光检测区时受激光产生特定波长的荧光,通过一系列信号转换、放大、数字化处理,就可以在计算机上直观地统计染上各种荧光染料的细胞各自的百分率。

选择不同的单克隆抗体及荧光染料,可以利用流式细胞仪同时测定一个细胞上的多个不同的特征,如果对具有某种特征的细胞有兴趣,还可以利用流式的分选功能将其分选出来,以便进一步培养、研究。

2 流式细胞术在临床上的应用2.1 流式细胞术在免疫学中的应用 FC M与单克隆抗体结合,对细胞表面和细跑内抗原、癌基因蛋白及膜内受体的定量检测取得很大进展,并广泛应用于临床医学,克服了普通免疫学方法难以准确定量的不足。

在临床医学研究中,应用最为广泛的是流式细胞免疫表型分析,F M可以进行淋巴细胞亚群分析,可同时检测出一种或几种淋巴细胞表面亚群分析,将不同的淋巴细胞亚群区分开来,并计算出它们相互间的比例。

流式细胞术的临床应用ppt课件

流式细胞术的临床应用ppt课件

实验诊断科 分子诊断组
数据分析
设门(gating):
根据某些特性将分析细胞群
圈起来。
淋巴细胞:FSC/SSC CD45++/SSCdim T淋巴细胞:CD3+/SSCdim
实验诊断科 分子诊断组
数据分析
直方图
单参数分析
横坐标:信号强度
纵坐标:细胞数量
实验诊断科 分子诊断组
数据分析
散点图
双参数分析 横、纵坐标代表的均是信号强度 UL: cd3-cd4+ LL: cd3-cd4UR: cd3+cd4+ LR: cd3+cd4-
实验诊断科 分子诊断组
标本染色的一般方法
FCM的临床应用
已开展的临床项目 其他临床应用
实验诊断科 分子诊断组
标本染色的一般方法
标本来源:
外周血、骨髓、组织块、培养细胞、脑脊 液、胸腹水、肺泡灌洗液(BALF)及其脱落细 胞。 血清和各类体液样本(可溶性蛋白)
实验诊断科 分子诊断组
前期处理
CSF、BALF、胸腹 水等:
结合淋巴细胞绝对数来看待百分比的改变
AIDS
实验诊断科 分子诊断组
已开展的项目
HLA-B27
试剂:BD HLA-B27 Kit 标本:外周血 检测指标: T (CD3+)淋巴细胞上HLA-B27 定性检测
实验诊断科 分子诊断组
实验诊断科 分子诊断组
HLA-B27
临床意义:强直性脊柱炎(高度相关) 遗传性关节炎
数量的检测 采集时机的确定
某些肿瘤
实验诊断科 分子诊断组
已开展的项目
白血病和淋巴瘤(L&L)免疫分型

流式细胞仪在临床检验中的应用

流式细胞仪在临床检验中的应用

流式细胞仪在临床检验中的应用流式细胞仪是一种先进的生物医学仪器,能够对细胞进行高速、高分辨率的检测和分析。

它可以用于各种临床检验,有助于提高疾病的诊断和治疗的准确性和效果。

本文将探讨流式细胞仪在临床检验中的应用。

首先,流式细胞仪可以用于白血细胞计数和分类。

传统的白细胞计数方法需要进行显微镜检查,耗时且不准确。

而流式细胞仪通过分析细胞的体积和形状特征,可以快速、准确地计算出不同类型的白血细胞数量,并能够进一步对白细胞进行分类,如淋巴细胞、中性粒细胞、嗜酸性粒细胞等。

这些信息对于炎症、感染和肿瘤等疾病的诊断和治疗非常重要。

其次,流式细胞仪还可以用于免疫细胞表型分析。

免疫细胞表型分析是研究细胞表面分子的一种方法,可以确定细胞的类型和功能。

流式细胞仪通过与特定的抗体结合,可以测量不同细胞表面的抗原表达水平,从而确定细胞的免疫表型。

这对于免疫系统相关疾病的诊断和治疗具有重要意义,如白血病、自身免疫疾病等。

此外,流式细胞仪还可以用于检测细胞内的信号分子和功能,可以评估细胞的活力和功能状态。

流式细胞仪在肿瘤学研究中也有广泛的应用。

它可以检测和分离肿瘤细胞,通过测量肿瘤细胞的大小、形状和表面标记物的表达水平,可以评估肿瘤的类型、分级和预后。

此外,流式细胞仪还可以用于检测循环肿瘤细胞(CTC)和肿瘤间质细胞(TIC),这些细胞在肿瘤的转移和预后中起到重要的作用。

除了疾病诊断和治疗外,流式细胞仪还可以应用于药物研发和治疗监测。

通过对细胞的特征和功能进行分析,可以评估药物对细胞的影响和效果,从而指导药物的选择和使用。

此外,流式细胞仪还可以通过检测细胞的凋亡、增殖和细胞周期等指标,评估治疗的疗效和耐药性。

在临床检验中,流式细胞仪的应用广泛且日益重要。

它具有高通量、高分辨率和多参数分析的优势,可以提供丰富的静态和动态细胞信息,有助于提高疾病的早期诊断和治疗效果评估的准确性和效率。

随着流式细胞仪技术的不断发展和优化,相信它将在临床检验中发挥越来越大的作用,为人类健康事业作出更大的贡献。

流式细胞术的临床应用

流式细胞术的临床应用

一、诊断性指标如图1所示,图(左)白血病细胞成为一个单一的群体,很难区分原始或病态的白血病细胞和成熟的细胞。

但是通过CD45和(SSC)设门法之后(图右),看到图(左)无法区分细胞被分成了五群。

在这五群中,成熟细胞CD45表达的荧光比较强。

A门里是淋巴细胞,B门里是单核细胞,C门里就是粒细胞群,D门里是原始细胞,一般CD45表达较弱。

一些细胞碎片、红细胞和转移来的瘤细胞,由于不表达CD45,可能位于D门、D门偏下或者E门的位置。

CD45结合侧向散射光之后能把白血病细胞找出来,减少了其它细胞的干扰。

对D门里的白血病细胞做进一步的分型,就能准确看到白血病细胞群免疫分型的表达情况。

图13.白血病的特异性标志免疫表型分析主要是根据细胞的特异表面标志,把白细胞分成T细胞、B细胞和原始细胞。

T淋巴细胞白血病一般表达的分化抗原有胞浆内的cCD3、抗TCRαβ、抗TCRγδ、CD2、CD5、CD8、CD10和CD7;B淋巴细胞白血病一般表达的分化抗原有胞浆内的cCD79a、CD22、CD19 、CD10和CD20;髓系白血病一般表达的分化抗原有胞浆内的cMPO、CD117、CD13、CD33、CD14、CD15和CD64;NK淋巴细胞白血病一般表达的分化抗原有CD16、CD56和CD57;红白血病一般表达的分化抗原有GlyA和CD36;巨核细胞白血病一般表达的分化抗原有CD41、CD42和CD61;一系列非特异标志在不同的白血病中可能都有表达,尤其是表达在早期的造血干组细胞上,一般表达的分化抗原有CD34和HLA-DR。

其中,对T淋巴细胞白血病来讲比较特异的是胞浆内的CD3,当胞浆内CD3出现阳性的时候,高度怀疑是T淋巴细胞白血病。

对于B淋巴细胞白血病来讲,胞浆内的CD79a和CD19是比较特异的,cCD79a最具特异性。

cCD3和cCD79a分别表达于早期T细胞和B细胞。

cMPO是髓系特异标志。

如图2所示为B-ALL的表达图。

流式细胞仪中文手册

流式细胞仪中文手册

仪器操作手册本手册根据标准配置的CyFlow® Space编写而成,具体内容根据实际配置可能有所偏差,手册内容应以实际配置为准。

CyFlow Space 仪器操作手册内容CyFlow Space介绍 (4)典型分析步骤 (5)基本操作 (6)启动CyFlow Space (6)多激光测量 (7)开始检测 (8)关闭CyFlow (9)液量绝对计数(定量)----概述 (10)如何执行液量绝对计数 (12)光路几何示意图 (13)光路图标准设置----参数 (14)仪器设置 (15)参数设置对话框:脉冲信号高度、面积和宽度 (16)触发 (17)光电倍增管(PMT)电压,增益和对数放大 (18)样本进样速度 (19)阈值:L-L(低值)和U-L(高值) (20)附录 (21)安装要求 (21)仪器安装--概要 (22)仪器安装--顺序 (23)流动室精细校准 (24)流动室 (25)维护和服务 (26)运输和储存 (26)污染物处理 (26)安全使用激光器的说明 (27)CyFlow Space技术规格表 (28)Partec推荐使用体外诊断试剂IVDPartec CyFlow Space型流式细胞仪符合欧洲98/97/EC标准,已经取得欧洲CE认证。

○C2007 Partec GmbHOtto-Hahn-Str.32D-48161GermanyCyFlow® Space介绍Partec CyFlow® Space是什么?CyFlow®Space有哪些用途?本手册涉及内容?其他要用到的说明书?操作CyFlow®Space前应该具备哪些知识?Partec CyFlow®Space是一台配臵全面的桌面式/便携式流式细胞仪(FCM)。

它的特色即设计理念是可以配备3个激光光源,和1至9个光学通道(参数),通过简单地更换光学滤片或镜片可以满足任何实验的需求。

流式细胞仪使用方法说明书

流式细胞仪使用方法说明书

流式细胞仪使用方法说明书1. 概述流式细胞仪是一种用于细胞分析和排序的先进仪器。

本方法说明书旨在向用户介绍如何正确操作流式细胞仪以及最佳的使用方法。

请用户在使用前仔细阅读本说明书并遵循相关的安全操作规程。

2. 仪器组成流式细胞仪主要由以下几个组成部分构成:- 流体传送系统:用于将样本引入仪器并排除废弃物。

- 激光系统:产生激光束以激发样本中的荧光染料。

- 光学系统:收集样本产生的荧光信号并进行检测。

- 数据分析系统:用于解析和分析收集到的数据。

3. 使用准备在进行流式细胞仪实验之前,请确保以下几个步骤已经完成:- 仪器校准:根据仪器的使用手册进行仪器校准,确保仪器工作在最佳状态。

- 样本准备:按照实验需求,对待测样本进行合适的处理,例如细胞培养、染色等。

- 试剂准备:准备好所需的荧光染料、缓冲液等试剂。

4. 仪器操作以下是流式细胞仪的一般操作步骤:- 打开仪器电源,并等待仪器启动完成。

- 将样本装入合适的样本管,并在样本管中加入适量的荧光染料或其他试剂。

- 将样本管放入仪器中的样本槽,并调整流速和其他参数。

- 启动激光系统,并调整激光强度和波长以适应实验需求。

- 开始数据采集,根据仪器界面指示收集所需数据。

- 数据分析:根据实验需要,使用相应的数据分析软件对采集到的数据进行解析和处理。

5. 安全注意事项在使用流式细胞仪时,务必注意以下安全事项:- 佩戴个人防护装备,包括实验手套和护目镜。

- 遵循实验室的生物安全规程,确保样本处理符合相关的安全要求。

- 避免直接暴露于激光束下,以免损伤眼睛和皮肤。

- 在清洁仪器时使用合适的溶剂,并按照仪器清洁的标准程序进行操作。

6. 故障排除在实际操作中,有时可能会遇到仪器故障或其他问题。

以下是一些常见问题及其排除方法:- 仪器无法启动: 检查电源连接是否正常,重启仪器。

- 数据质量差: 检查样本制备和染色的质量,调整参数和仪器校准。

- 清洗困难: 检查是否有阻塞,按照清洁程序进行清洗。

流式细胞术的工作原理及其临床应用

流式细胞术的工作原理及其临床应用

流式细胞术的工作原理及其临床应用一、本文概述流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种在液流中快速检测和分析单个细胞的技术,广泛应用于生物学、医学和生物技术等众多领域。

本文将对流式细胞术的工作原理进行详细介绍,并探讨其在临床诊断和治疗中的广泛应用。

我们将概述流式细胞术的基本原理和技术特点,包括细胞染色、荧光信号检测和数据分析等方面。

然后,我们将深入探讨流式细胞术在免疫学、血液学、肿瘤学等领域中的临床应用,以及其在疾病诊断、预后评估、疗效监测等方面的重要作用。

我们将对流式细胞术的未来发展趋势进行展望,以期为读者提供全面而深入的了解。

二、流式细胞术的工作原理流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)是一种在液流中快速定量分析和分选细胞的技术。

其工作原理主要基于流式细胞仪的精确设计和操作。

待检测的细胞经过预处理,如荧光标记、固定和破膜等,使其带有可检测的荧光染料或抗体。

这些细胞随后被导入到流式细胞仪中,通过喷嘴形成单细胞悬液,并以一定的流速通过检测区域。

在检测区域,细胞经过激光束的照射,激发出荧光信号。

这些信号被光电倍增管等光电转换器接收,并转化为电信号。

电信号经过放大、数字化处理后,由计算机系统进行记录和分析。

流式细胞仪可以同时检测多个参数,如细胞大小、内部结构、DNA 含量、蛋白质表达等。

这些参数的分析主要基于荧光信号的强度和波长,以及细胞的电学特性,如电阻抗。

流式细胞术还可以结合分选技术,将特定类型的细胞从混合细胞群体中分离出来。

这主要通过在流式细胞仪的出口处设置电磁场或静电场,对带有特定荧光信号的细胞进行偏转,从而实现细胞的分选。

流式细胞术的工作原理是将单个细胞在液流中快速通过激光束,通过检测和分析荧光信号,实现细胞的定量和定性分析,以及细胞的分选。

这种技术具有高灵敏度、高分辨率和高通量的特点,广泛应用于生物医学研究的各个领域。

三、流式细胞术的临床应用流式细胞术(Flow Cytometry,FCM)作为一种高度灵敏且多功能的细胞分析技术,在临床医学领域的应用日益广泛。

流式细胞仪的原理和临床应用

流式细胞仪的原理和临床应用

现代医学仪器与应用2008年第20卷第1期M o dei ca l Eq ui pm ent a nd A pp l i ca t i on F e b.2008.V ol20.N o.1流式细胞仪的原理和临床应用沈二霞流式细胞术(f l ow cyt om e t r y,FC M)是利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理、化及生物特性进行分析的方法。

它是上个世纪70年代初发展起来的一项高新技术。

80年代初研制出了性能稳定良好的流式细胞仪,并开始被应用到临床医学研究及疾病的诊断和监测。

流式细胞仪具有检测速度快、测量指标多、采集数据量大、分析全面、方法灵活等特点。

近年来,随着流式细胞仪性能的不断改进和测定方法与技术的快速发展,流式细胞术成为常规实验诊断的重要手段,一些检验项目已成为临床疾病诊断、治疗方案选择、预后判断等不可或缺的内容…。

1流式细胞仪的构成及工作原理流式细胞仪主要由液流系统、光学系统、电子系统、分析系统和细胞分选系统五个部分组成。

将待测细胞制成单细胞悬液。

经荧光染料染色后加入样品管,在一定气体压力下待测样品被压人流动室。

待测细胞在鞘液的包裹下单行排列,依次通过检测区,被荧光染料染色的细胞受到强烈的激光照射后,产生散射光和荧光信号。

这两种信号同时被前向光电二极管和90o方向的光电倍增管(PM T)接收。

散射光分为前向角散射(for w ard sc at t er,FSC)和侧向角散射(si desc at t e r,SSC)。

前者主要反映被测细胞的大小,后者主要反映被测细胞的胞质、胞膜、核膜的折射等,以及细胞内颗粒的性状。

光信号通过波长选择通透性滤片后,经光电倍增管接收后转为电信号,再经数/模转换器转换为可被计算机识别的数学信号。

以一维直方图或二维点阵图及数据表或三维图形显示出来f l,21。

流式细胞仪还可以对分析中的目的细胞进行分选,它是通过分离含有单细胞的液滴而实现的。

流动室的喷嘴上安装有超高频的压电晶体。

流式细胞仪原理及应用

流式细胞仪原理及应用
BD Biosciences Immune Function
数据存储
• FCS 2.0格式
• 常以列表模式(LIST MODE):将每个细胞的每个检测参 量依次排列顺序存储
FSC SSC FL1 FL2 Event 1 30 60 638 840 Event 2 100 160 245 85 Event 3 300 650 160 720
• 诊断原发性免疫缺陷病(如先天性无 r 球蛋白血症)或继发 性免疫缺陷病(如AIDS)
• 造血干细胞移植后免疫重建(6个月NK;9个月T、B)
• Th/Ts:机体免疫功能亢进:自身免疫性疾病,如SLE、类风
湿性关节炎等(治疗有效恢复正常)
• Th/Ts:机体免疫功能低下:AIDS、病毒感染、慢性活动性
淋巴细胞 活化功能研究
T淋巴细胞活化
BD Biosciences Immune Function
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达
活化标记 • 分泌细胞因子
CFSE示踪原理
• 羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)是一种 可穿透细胞膜的荧光染料,CFSE进入细胞后可以 不可逆地与细胞内的氨基结合偶联到细胞蛋白质上。 当细胞分裂时,CFsE标记荧光可平均分配至两个 子代细胞中,因此其荧光强度是亲代细胞的一半。 这样,在一个增殖的细胞群中,各连续代细胞的荧 光强度呈对递减,利用流式细胞仪在488nm激发光 和荧光检测通道可对其进行分析。
数据分析
等高图和密度图分析
BD Biosciences Immune Function
数据分析
三维图分析
BD Biosciences Immune Function
BD Biosciences Immune Function

流式细胞术及其临床应用课件(1)

流式细胞术及其临床应用课件(1)
光源与光学系统
➢ 激发光源 ➢ 光学系统
信号收集与光电转 换系统
计算机与分析系统
细胞分选与浓缩系统
激发光源 滤光片
流动室、鞘 液和样本流
信号检测器
计算机分析
(二)激光光源与光学系统
(一)激发光源 :激光器
气体激光器:氩离子(488nm、355nm)、氦氖(633nm)、氪离子 (647nm)、氪氩(568nm);
(四)计算机和分析系统
十字门
线性门
流式细胞仪特点
流式细胞术的最大特点是能在保持细胞及细胞器或微 粒的结构及功能不被破坏的状态下,通过荧光探针的 协助,从分子水平上获得多种信号对细胞进行定量分 析或纯化分选
细胞不被破坏,测量快速、大量、准确、灵敏、定量
目前国内主要流式细胞仪厂家 Beckton Dickinson(BD) BACKMAN COULTER
淋巴细胞亚群分析
试剂:BD Multitest IMK Kit 标本:外周血(常用) 配色:CD3-FITC/CD8-PE/CD45-PerCP/CD4-APC
(三)荧光信号
目前常用FCM配置(BD Calibar) 488nm激光管常用染料有 第一通道(FL1):FITC (Fluorescein Isothiocyanate) 第二通道(FL2):PE (Phycorey- thrin) 第三通道(FL3):PerCP (Peridinin Chlorophyll Protein) PE-Cy7、PE-Cy5、 PerCP-Cy5.5 633nm激光管常用染料有
1
10
2 700
3 720
4
15
……
Counts
0…………101…………102…………103

流式细胞仪及其应用指南课件

流式细胞仪及其应用指南课件
流式细胞可快速准确地检测血小板自身抗体。
注:化学试剂直接作用于红细胞的溶血剂有:以草酸为主的溶血剂(Coulter Q-Prep),基于NH4CL的BD公司的FACSLyse溶血剂。 流式细胞仪数据保存及分析
加入10ml无Ca、Mg离子0. 激发光488nm 发射光575nm
抗体染色一般方法
目标细胞数量及检测终浓度:1×106/ml
从组织获取淋巴细胞
淋巴节、扁桃体、脾、胸腺等淋巴组织由于结构松
散,容易分离成单个细胞。一般对样本进行切剪、研磨、过滤 便可。
方 法:
1. 将样本置于陪替氏培养皿,加入15ml BSA-PBS; 2. 将样本切成3-4mm3大小,用镊子将其分离;
3. 将样本经滤网过滤,用密度法分离、提纯淋巴细胞。
其他标本:通常在其他组织中分离淋巴细胞需用酶进
阳性标本此时应作B27 阴性标本处理还会出B27 单弱阳性情况出现可能是由于B27
流式数据包含有各项参数信息及分析颗粒信号信息
缺点: 流25式%r细E胞DT仪AC,pDH374.阳性干细胞需计数严标准格方案掌:I握SHA溶GE 血时间,对白细胞表面抗原有影响,
计数外周血中检测网织红细胞:使用TO染料能够特异性地与RNA结合,结合系数高达3000,故具有很好的信噪比。
另溶血后染色/染色后溶血效果各有不同。 法并立即上机检测与固定后24 小时内染色分析在荧光强度上也没有明显差异然而要注
详细信息,见细胞探针公司网站:
将淋巴、单核、粒及红细胞碎片相区分。 聚集血小板在流式细胞仪可被检测出来但是如果血小板发生了聚集流式细胞仪便
Signal to Noise
室温孵育10分钟;
• 外周血白细胞分析:100ul全血 • 血小板分析:1~5ul全血(根据样本血小板数量) • 红细胞分析:1ul全血(根据样本中红细胞数稀释后使

流式细胞仪临床应用手册范本

流式细胞仪临床应用手册范本

目录第一部分流式细胞术简介 (1)第二部分流式项目检测列表 (4)第三部分流式细胞术在各类疾病中的应用 (7)第一章感染性疾病 (7)第二章肿瘤、细胞治疗应用 (9)第三章血液系统疾病 (14)第四章器官移植检测 (15)第五章风湿免疫性疾病 (16)第六章呼吸系统疾病 (18)第七章消化系统疾病 (20)第八章泌尿系统疾病 (21)第九章心脑血管疾病 (22)第十章妇产科及儿科相关疾病 (24)第十一章内分泌患者免疫功能检测 (26)第十二章皮肤科疾病 (27)第一部分流式细胞术简介1 流式细胞术定义流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,为生物医学与临床检验学发展提供了最强有力的工具。

流式细胞分析技术(flow cytometry,FCM)又称流式细胞术,是20世纪70 年代发展起来的一种快速、准确、客观的检测技术,它能够同时检测快速直线流动状态中的单个细胞或微球的多项物理及生物学特性--在极短的时间内高速分析上万个甚至是几十万个细胞,并能同时从一个细胞中测得多个参数,对其加以定性定量分析,还可以对特定群体加以分选。

目前,流式细胞术已经广泛用于临床应用与基础研究,在免疫学、遗传学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学等医学与生命科学所有领域内发挥着重要的作用。

2 流式细胞仪工作原理制备成单细胞悬液的标本或单个微粒在上样前进行荧光染色。

流式细胞仪检测到上样管后,产生一定的气体压力将待测样本压入流动池。

同时鞘液(不含细胞或微粒的缓冲液)在仪器产生的高压作用下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与样本流形成一定的角度,形成一个圆形的鞘液流,包围着细胞或微粒高速流动,使待测细胞在鞘液的包裹下单行排列,逐个地通过流式细胞仪的激光聚焦区(流动池),从而被检测到,并发出散射光及荧光等多种光学信号。

光学信号通过光电信号转换器及电子信号处理系统采集及分析后,最后以图形的形式将数据结果显示在电脑屏幕上。

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流式细胞仪临床应用手册案场各岗位服务流程销售大厅服务岗:1、销售大厅服务岗岗位职责:1)为来访客户提供全程的休息区域及饮品;2)保持销售区域台面整洁;3)及时补足销售大厅物资,如糖果或杂志等;4)收集客户意见、建议及现场问题点;2、销售大厅服务岗工作及服务流程阶段工作及服务流程班前阶段1)自检仪容仪表以饱满的精神面貌进入工作区域2)检查使用工具及销售大厅物资情况,异常情况及时登记并报告上级。

班中工作程序服务流程行为规范迎接指引递阅资料上饮品(糕点)添加茶水工作要求1)眼神关注客人,当客人距3米距离时,应主动跨出自己的位置迎宾,然后侯客迎询问客户送客户注意事项15度鞠躬微笑问候:“您好!欢迎光临!”2)在客人前方1-2米距离领位,指引请客人向休息区,在客人入座后问客人对座位是否满意:“您好!请问坐这儿可以吗?”得到同意后为客人拉椅入座“好的,请入座!”3)若客人无置业顾问陪同,可询问:请问您有专属的置业顾问吗?,为客人取阅项目资料,并礼貌的告知请客人稍等,置业顾问会很快过来介绍,同时请置业顾问关注该客人;4)问候的起始语应为“先生-小姐-女士早上好,这里是XX销售中心,这边请”5)问候时间段为8:30-11:30 早上好11:30-14:30 中午好 14:30-18:00下午好6)关注客人物品,如物品较多,则主动询问是否需要帮助(如拾到物品须两名人员在场方能打开,提示客人注意贵重物品);7)在满座位的情况下,须先向客人致歉,在请其到沙盘区进行观摩稍作等待;阶段工作及服务流程班中工作程序工作要求注意事项饮料(糕点服务)1)在所有饮料(糕点)服务中必须使用托盘;2)所有饮料服务均已“对不起,打扰一下,请问您需要什么饮品”为起始;3)服务方向:从客人的右面服务;4)当客人的饮料杯中只剩三分之一时,必须询问客人是否需要再添一杯,在二次服务中特别注意瓶口绝对不可以与客人使用的杯子接触;5)在客人再次需要饮料时必须更换杯子;下班程序1)检查使用的工具及销售案场物资情况,异常情况及时记录并报告上级领导;2)填写物资领用申请表并整理客户意见;3)参加班后总结会;4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;1.3.3.3吧台服务岗1.3.3.3.1吧台服务岗岗位职责1)为来访的客人提供全程的休息及饮品服务;2)保持吧台区域的整洁;3)饮品使用的器皿必须消毒;4)及时补充吧台物资;5)收集客户意见、建议及问题点;1.3.3.3.2吧台服务岗工作及流程阶段工作及服务流程班前阶段1)自检仪容仪表以饱满的精神面貌进入工作区域2)检查使用工具及销售大厅物资情况,异常情况及时登记并报告上级。

班中工作程序服务流程行为规范问询需求按需求提供饮品客户离开后清理桌面阶段工作及服务流程服务准迎客:保得知需客户班中工作程序工作要求注意事项1)在饮品制作完毕后,如果有其他客户仍在等到则又销售大厅服务岗呈送;2)所有承装饮品的器皿必须干净整洁;下班程序5)检查使用的工具及销售案场物资情况,异常情况及时记录并报告上级领导;6)填写物资领用申请表并整理客户意见;7)参加班后总结会;8)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;1.3.4展示区服务岗岗位职责1.3.4.1车场服务岗1.3.4.1.1车场服务岗岗位职责1)维护停车区的正常停车秩序;2)引导客户车辆停放,同时车辆停放有序;3)当车辆挺稳时,上前开车门并问好;同时提醒客户锁好车门;4)视情况主动为客户提供服务;5)待车辆停放完好后,仔细检查车身情况请客户签字确认;1.3.4.1.2阶段工作及服务流程班前阶段1)自检仪容仪表2)检查周边及案场区设备、消防器材是否良好,如出现异常现象立即报告或报修3)检查停车场车位是否充足,如有异常及时上报上级领导班中工作程序服务流程行为规范1.敬礼2.指引停车3.迎客问好4.目送阶段工作及服务流程班中工作程序工作要求注意事项1)岗位应表现良好的职业形象时刻注意自身的表现,用BI规范严格要求自己2)安全员向客户敬礼,开车门,检查车辆情况并登记,用对讲系统告知销售大厅迎宾,待客人准备离开目送客人离开;迎送引导敬为问指引销售检查车为引敬下班程序1)检查使用的工具情况,异常情况及时记录并报告上级领导;2)参加班后总结会;3)统计访客量;4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;1.3.4.2展示区礼宾岗1.3.4.2.1展示区礼宾岗岗位职责1)对过往的客户行标准的军礼,目视;2)与下一交接岗保持信息联系,及时将信息告知下一岗位,让其做好接待工作;3)热情礼貌的回答客户的提问,并做正确的指引;4)注视岗位周边情况,发现异常及时上报上级领导;1.3.4.2.2展示区礼宾岗工作及服务流程阶段工作及服务流程班前阶段1)自检仪容仪表2)检查周边及案场区设备、消防器材是否良好,如出现异常现象立即报告或报修班中工作程序服务流程敬礼问指引样板敬礼目送行为规范1.迎接客户2.指引客户3.为客户提供帮助4.目送客户工作要求注意事项1)礼宾岗必须掌握样板房户型、面积、朝向、在售金额、物业服务管理费用等客户比较关注的话题;2)礼宾岗上班后必须检查样板房的整体情况,如果发现问题必须及时上报并协助销售进行处理;3)视线范围内见有客户参观时,远处目视,待客户行进1.5米的距离时,敬军礼并主动向客户微笑问好,“欢迎您来参观样板房,这边请,手势指引样板房方向”;阶段工作及服务流程班中工作程序工作要求注意事项4)参观期间,礼宾岗需注意背包或穿大衣等可以重点人员进行关注,避免样板房的物品丢失,当巡检时发现有物品丢失及时上报上级领导,对参观的可疑人员进行询问,根据销售部的意见决定是否报警;5)样板房开放时间,在未经销售、项目部允许而进行拍照、摄像等行为劝阻,禁止任何人员挪动展示物品;6)样板房开放时礼宾岗要关注老人、小孩、孕妇及行动不便的人群,对在参观过程中出现的意外及物品损坏必须及时上报上级领导,根据销售部的意见进行处理并做好登记;7)样板房开放期间礼宾岗要礼貌准确的回答客户的问题,对不能回答的问题需引导给销售人员由其进行解答,严禁用含糊不清或拒绝来回答;8)留意客户是否离开样板房,通知电瓶车司机来接客户;9)当客户参观完毕离开样板房,待客户1.5米距离时微笑敬礼目送客户,手势指向出门的方向,若电瓶车未到,向客户致歉并说明电瓶车马上就到;10)每天下班要对样板房物品进行检查并做好登记,如出现丢失或损坏须向上级领导呈报,根据销售部意见进行处理并做好记录;11)礼宾岗下班后要关闭样板房的水源、电源及监控系统并与晚班人员做好交接;12)对于特殊天气,样板房礼宾岗要检查周边环境,以防不则;下班程序1)检查使用的工具情况,异常情况及时记录并报告上级领导;2)参加班后总结会;3)统计访客量;4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;1.3.4.3电瓶车服务岗1.3.4.3.1电瓶车服务岗岗位职责1)严格按照规定的路线及线路行驶,将客人送到指定地点;2)正确执行驾驶操作流程,确保车行安全;3)了解开发建设项目的基本情况并使用统一说辞,在允许的情况下礼貌回答客户问题;4)车辆停放时及时对车辆进行清洁,确保车辆干净;5)负责车辆的检查;6)对车辆实施责任化管理,未经允许任何人不得驾驶;7)不允许非客户人员乘坐电瓶车;8)做好电瓶车的交接工作1.3.4.3.2电瓶车服务岗工作及服务流程阶段工作及服务流程班前阶段1)自检仪容仪表2)检查电瓶车运行状态,如发现问题立即上报上级领导进行维修并做好记录班中工作程序服务流程行为规范1)迎接客户上车2)转弯、减速、避让提示客户3)下车提示客户小心工作要求注意事项1)电瓶车驾驶员载客至样板房过程中禁止鸣笛、超速、遇车避让;2)客户上车时应主动问好,欢迎您来到XX项目,车辆行驶时应提示客户坐稳扶好,到达目的地时,驾驶员提示客户样板房已经到达请小心下车,客户离开电瓶车时应说:欢迎下次乘坐,谢谢再见,问指引车辆起车辆行驶下请慢走;3)带客户下车时应检查车上是否有遗留物品,并提示客户随身带好物品;4)电瓶车必须严格按照规定路线行驶;5)做好行车记录;下班程序1)待客户全部离开后将电瓶车开至指定位置,并将车辆进行清洁及充电;2)整理客户意见,参加班后会;3)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;1.3.5样板房服务岗1.3.5.1样板房讲解岗岗位标准1.3.5.1.1样板房讲解岗岗位职责1)负责来访样板房客户的全程接待与讲解;2)协助、配合置业顾问介绍;3)客户离开后,样板房零星保洁的处理;4)收集客户意见、建议及现场问题点的填写(样板房日常庶务)反馈单,下班后递交案场负责人;1.3.5.1.2样板房讲解刚工作及服务流程阶段工作及服务流程班前阶1)自检仪容仪表,以饱满的工作状态进入工段作;2)检查样板房设备设施运行情况,如有异常及时上报并做好登记;3)检查样板房保洁情况及空调开启情况;设备设施班中工作程序服务流程行为规范1)站立微笑自然2)递送鞋套3)热情大方、细致讲解4)温馨道别保持整洁工作要求注意事项1)每日对接样板房设备清单,检查空调开启及保洁状态;2)站在样板房或电梯口,笑意盈盈接待客户;3)顾客出现时,身体成30度角鞠躬“欢迎光顾XX样板房”4)引领入座并双手递上鞋套,双手递上时不宜过高,与客人坐下时的膝盖同高;5)与客户交谈时声音要足,吐字清晰避迎客,引导客协助置向客户免重复;6)专注你接待的客户,勿去应其他客户,以示尊重,对其他客户微笑点头以示回应;7)若无销售人员带领的客户,要主动介绍房子的户型及基本信息,谈到房子的价位时请客户直接与销售人员联系不要直接做回答;8)参加样板房时,未经销售或其他人员允许谢绝拍照及录像,谢绝动用样板房物品及附属设施,对客遗失物品做好登记并上报上级领导;9)时刻注意进入样板房的客户群体,特别是小孩,要处处表达殷勤的关心,以示待客之道;10)时刻留意客户的谈话,记下客户对样板房的关注点和相关信息;11)送别,引领客户入座示意脱下鞋套双手承接,客户起身离去时,鞠躬说感谢您参观样板房,并目送客户离开;下班程序1)检查样板房设备设施是否处于良好的运营状态,如出现异常及时维修;2)需对接样板房物品清单;3)整理客户意见,参加班后会;4)积极配合销售人员的接待工作,如果下班时间已经到,必须待客人离开后下班;1.3.5.2样板房服务岗岗位标准(参见销售大厅服务岗岗位标准)1.3.6案场服务岗管理要求培训及例会岗前培训BI规范及楼盘基本情况在岗培训每月至少一次1)公司企业文化2)客户服务技巧3)客户心理培训4)突发事件处理5)营销知识培训6)职业安全7)7S现场管理例会日会:每日参加案场管理岗组织的总结会并及时接收案场信息周会:每周参加管理岗组织的服务类业务点评会客户信息收集反馈每日汇总客户信息反馈到案场管理岗样板房客户车场岗客户监督考核1)考核频次:至少每月一次;2)考核人:案场管理岗;3)每月汇总客户信息反馈表,依据上级检查及客户满意度调查情况进行绩效加减;4)由案场负责人直接考核;5)连续两个月考核不合格者直接辞退1.4案场基础作业岗1.4.1案场基础作业岗任职资格岗位类型岗位名称任职资格基础作业岗安全岗基本要求:1)男性:身高1.80米以上;2)年龄:(18-30)岁;3)普通话标准;4)学历:高中以上;技能要求:1)熟悉项目的基本情况2)具备过硬的军事素质素质要求:1)性格:开朗、主动服务意识强有亲和力;2)从业经历:具有同岗位经验半年以上案场保洁岗及绿化养护岗基本要求:1)男女不限;2)年龄30岁以下3)学历:初中以上技能要求“案场保洁岗:熟知药剂使用及工具使用案场绿化养护岗:熟知树木习性及绿化养护知识素质要求:具有亲和力,对保洁及绿化工作有认同感案场技术保障岗基本要求:男性五官端正学历:中专(机电一体化)技能要求:1)具有水或电及空调证书;2)熟悉各岗位操作工具的使用;3)同岗工作一年以上素质要求:踏实肯干,具有亲和力及主动服务意识1.4.2案场基础作业岗通用行为规范通用规范 参照标准君正物业员工BI 规范手册1.4.3安全岗岗位标准1.4.3.1安全岗岗位职责1)负责销售案场管理服务区域的安全巡视工作,维持正常秩序;2)监督工作区域内各岗位工作状态及现场情况及时反馈信息;3)发现和制止各种违规和违章行为,对可疑人员要礼貌的盘问和跟踪察看;4)谢绝和制止未经许可的各类拍照、摆放广告行为;1.4.3.2安全岗作业要求1)按照巡视路线巡视签到检查重点部位;2)遇见客户要站立、微笑、敬礼,礼貌的回答客户的提问并正确引导;3)人过地净,协助案场保洁人员做好案场的环境维护;4)在每一巡视期内检查设备设施运行状态并做好记录;5)协助做好参观人员的车辆引导、指引和执勤工作;6)积极协助其他岗位工作,依据指令进行协助;1.4.4保洁岗岗位标准1.4.4.1保洁岗岗位职责1)负责案场办公区域、样板房及饰品的清洁工作;2)负责案场外围的清洁工作;3)负责案场垃圾的处理;4)对案场杂志等资料及时归位;1.4.4.2保洁岗作业要求1)每天提前半小时上岗,对案场玻璃、地面等进行全方位清洁;2)卫生间每十分钟进行一次巡视性清洁;3)阴雨天提前关闭门窗;4)掌握清洁器具的使用;5)熟知清洁药剂的配比及使用;1.4.5绿化岗岗位标准1.4.5.1绿化岗岗位职责1)负责管理区域内一切绿化的养护;2)确保绿化的正常存活率;3)对绿植进行修剪及消杀;1.4.6案场技术岗岗位标准1.4.6.1案场技术岗岗位职责1)全面负责案场区域内设备设施的维护、维修及保养;2)协助管理岗完成重大接待工作案场的布置;3)现场安全的整体把控;1.4.6.2案场技术岗岗位要求1)每日案场开放前对辖区设备设施进行检查,保障现场零事故;2)每日班后对设备设施进行检查保障正常运行并做好相关记录;3)报修后5分钟赶到现场;4)接到异常天气信息,对案场设备进行安全隐患排除;1.4.7案场基础作业岗岗位要求培训及例会岗前培训BI规范及楼盘基本情况在岗培训每月至少一次1)公司企业文化2)客户服务技巧3)客户心理培训4)突发事件处理5)营销知识培训6)职业安全7)7S现场管理例会日会:每日参加案场管理岗组织的总结会并及时接收案场信息周会:每周参加管理岗组织的服务类业务点评会客户信息收集反馈每日汇总客户信息反馈到案场管理岗监督考核1)考核频次:至少每月一次;2)考核人:案场管理岗;3)每月汇总客户信息反馈表,依据上级检查及样板房客户车场岗客户客户满意度调查情况进行绩效加减;4)由案场负责人直接考核;5)连续两个月考核不合格者直接辞退2服务创新案例项目推荐亮点服务为客户爱车提供遮阳服务服务员面向客户时刻关注客户上午11点给客户送上点心,关怀到心2服务创新案例项目推荐亮点服务夏日毛巾送清凉,冬日毛巾暖人心洗手间提供百宝箱样板房门口提供卷尺待客户使用摆件销售大销售大标准摆布置整齐规范布置整齐规范水中花、烟缸、百宝箱、项目推介书茶几物品、花、烟缸水中花时尚周围用木桩装垃圾桶装饰(石子边缘放置一枚花卉)垃圾桶上方加印LOGO整齐的伞架样板房没有样板房门口销售大厅设梯所设的温馨字画套分门别类摆放娱乐实施(桌球等)目录第一部分流式细胞术简介 (1)第二部分流式项目检测列表 (4)第三部分流式细胞术在各类疾病中的应用 (10)第一章感染性疾病 (10)第二章肿瘤、细胞治疗应用 (14)第三章血液系统疾病 (22)第四章器官移植检测 (23)第五章风湿免疫性疾病 (24)第六章呼吸系统疾病 (27)第七章消化系统疾病 (30)第八章泌尿系统疾病 (33)第九章心脑血管疾病 (35)第十章妇产科及儿科相关疾病 (37)第十一章内分泌患者免疫功能检测 (39)第十二章皮肤科疾病 (41)第一部分流式细胞术简介1 流式细胞术定义流式细胞仪是集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的新型高科技仪器,为生物医学与临床检验学发展提供了最强有力的工具。

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