干燥方式对银杏叶黄酮含量影响试验(精)
银杏叶中黄酮类化合物的含量测定
江苏畜牧兽医职业技术学院毕业论文（设计）专业药品质量检测技术班级药检071 学号200703123124论文 (设计) 题目：银杏叶中黄酮类化合物的含量测定***名：***设计地点：江苏畜牧业兽医职业技术学院指导教师：赵丽职称讲师论文完成时间： 2010年5月20日银杏叶中黄酮类化合物的含量测定刘江南药品质量检测技术摘要：黄酮类化合物是银杏叶的主要药用成分，其黄酮含量在很大程度上决定着银杏叶的利用价值。
以十二烷基硫酸钠(SDS)一正丁醇一正庚烷一水微乳系统为流动相，预制聚酰胺薄层板为固定相，通过调节微乳系统的极性，较好地分离出十几种银杏叶黄酮。
与传统的流动相系统—有机溶液系统相比，微乳系统显示出较强的分离优势。
通过对大龄银杏叶不同生长时期黄酮含量的测定与比较，分析银杏叶中黄酮含量随生长期的变化规律，揭示出大龄银杏树采摘叶片的最佳时期。
试验结果表明：不同生长时期的银杏叶黄酮含量变化幅度较大,在1年中黄酮含量出现2次峰值，8月份出现第1个峰值，黄酮含量为0.884%, 以后下降较快,10月叶色发黄后又上升到最高值 0.977%。
关键词：银杏叶黄酮含量薄层色谱生长时期高效液相色谱Title：In Gingko leaf flavonoid content determinationLiujiangnanDrug quality testing technologyAbstract：Flavonoids are the main medicinal components of ginkgo biloba,its flavonoid content toa large extent determines the value of ginkgo biloba use. Sodium dodecyl sulfate(SDS) 1-butanol 1-heptane microemulsion system of water as the mobile phase,pre-polyamide thin-layer plate as the stationary phase, by adjusting the polarity of themicroemulsion system, well separated a dozen of flavonoids. Mobile phase with thetraditional system - the organic solution systems, the microemulsion system showedstrong separation advantage.Leaves of Ginkgo biloba on older growth and flavonoidscontent during the comparison, analysis of flavonoids of Ginkgo biloba in thevariation with growth phase, revealing the older leaves of ginkgo trees picking thebest time. The results showed that: different growth stages of the content offlavonoids in a significant reduction in 1 year in the flavonoid content of 2 times thepeak, in August the first one peak appears, flavonoid content of 0.8844%, thendecreased rapidly in October leaves yellow color after rising to a maximum value0.977%.Key Words：Ginkgo biloba,Flavonoids content,TLC,Growth period,HPLC.1 前言1．1 银杏叶的介绍银杏(Ginkgo bilobal，又名公孙树，白果)系裸子植物门银杏科植物，有“活化石”之称，是当今地球上最古老的树种之一，为我国特产，我国银杏资源拥有量占世界总量的75％左右，占世界首位[1,2]。
银杏叶黄酮提取及含量测定
银杏叶黄酮提取及含量测定一、实验目的1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法2、了解银杏叶中黄酮的含量测定二、实验原理近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。
目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。
１．１有机溶剂浸提法目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂，如甲醇－水（１＋１）溶液。
由于甲醇的毒性、挥发性较大，因此一般采用乙醇作为提取剂。
银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤，滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。
徐桂花等［１］提取银杏叶中黄酮类化合物时，采用乙醇（７０＋３０）溶液为提取剂，提取温度为７０℃，料液质量浓度比为１ｇ比４０ｍＬ，提取时间为４ｈ。
由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争，张林涛等［1］提出了以硼砂－氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮，其黄酮提取率与文献值相近，但提取工艺时间缩短为１ｈ。
１．２超声波提取法超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间，并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。
刘晶芝等［2］运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为：超声频率４０ｋＨｚ，超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比１００，提取温度３５℃，静置３ｈ，提取率为８１．９％。
郭国瑞等［3］以水为介质，超声波提取银杏叶中黄酮苷，与常规水浸提法比较，超声波提取效率大大提高，确定超声波提取的最佳工艺为：超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比３０，提取温度５０℃，提取率为８２．３％。
１．３超临界流体萃取法超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种重要的中药材，具有清热解毒、活血化瘀、增强免疫力等多种功效。
其中，银杏叶中的总黄酮醇苷是一种重要的活性成分，具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性。
因此，测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量对于评价银杏叶的质量和药效具有重要意义。
一、实验原理总黄酮醇苷是一类多酚化合物，可以被还原成黄色产物。
在碱性条件下，总黄酮醇苷与钾醇溶液反应，生成黄色产物，其吸光度与总黄酮醇苷的含量成正比。
因此，可以通过比色法测定银杏叶中总黄酮醇苷的含量。
二、实验步骤1. 样品制备取适量银杏叶样品，粉碎成细粉，并过筛备用。
2. 提取取适量银杏叶粉末，加入80%的乙醇，浸泡24小时。
然后，将混合物过滤，并将滤液收集。
重复以上步骤2次，将收集到的滤液混合。
3. 蒸发将混合滤液在水浴中蒸发至干燥，得到银杏叶提取物。
4. 溶解将银杏叶提取物用甲醇溶解，并经过滤。
5. 反应取适量银杏叶提取物溶液，加入2%的钾醇溶液和3%的氢氧化钠溶液，混合均匀。
然后，将混合液在60℃水浴中反应30分钟。
6. 比色将反应液冷却至室温，用甲醇稀释至适当浓度。
然后，用紫外分光光度计测定其吸光度，得到总黄酮醇苷的含量。
三、实验结果通过上述实验步骤，测定了不同银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量。
结果显示，样品A中总黄酮醇苷的含量为20.3mg/g，样品B中总黄酮醇苷的含量为18.7mg/g，样品C中总黄酮醇苷的含量为19.8mg/g。
四、实验分析通过上述实验结果可以看出，不同的银杏叶样品中总黄酮醇苷的含量有所差异。
这可能是由于银杏叶的生长环境、生长年限、收获季节等因素的影响。
因此，在评价银杏叶的质量和药效时，需要对其总黄酮醇苷含量进行测定。
本实验采用的是比色法测定总黄酮醇苷的含量。
这种方法简单、快速、准确，可以用于大规模的样品检测。
但是，在实际应用中需要注意的是，不同的总黄酮醇苷化合物具有不同的抗氧化、抗炎、抗肿瘤等生物活性，因此需要对不同种类的总黄酮醇苷进行分析和测定。
干旱胁迫对银杏叶类黄酮年动态变化的影响
ｃｎｃｆｒｓ ｓｉ ［ ］ Ｇ ｏｅｎ ２０ １６：ｌ 一 １ ． ａ ｉ ｏｅｔｏｌ Ｊ ． ｅｄｒｍ，０ ６，３ ３ Ｏ ３９ ｓ ［０］ ｏｓｎＡ Ｄ． ｏｌ ｃ ｉ ｎ ｌｎ ｇｏ ｔ［ ，Ｓｄ ｅ ： ｃｄｍｉ １ Ｒ ｂｏ Ｓｉ ａｉ ｔ ａ ｄｐａ ｔ ｒｗｈ Ｍ］ ｙ ｎｙ Ａ ａｅ ｃ ｄｙ
参 考 文 献
［ ］ 长春 ， １宋 王毅 勇 ， 百 兴 ， ． 泽 湿 地 开 垦 后 土 壤 水 热 条 件 变 化 阎 等 沼
［ ］ ｒ ＡＰ， ｒ ｇ－ａｖ Ｊ Ｃ ｂｅａＦ ｅ ａ． ｈｎｅ ｆｙｌ ａｔ — ８ Ｍｏａ Ｏ ｔ ａＣ ｌ Ｊ ， ａｒｒ ， ｔ １Ｃ ａｇｓｎｅｚｎ ｃｉ ｅ ｏ ｉ ｌ ｅ ｖ
ｍｅｓｒ ｇｓｉ ｍ ｃ ｂａ ｂｏ ａｓＣ［ ］ Ｓｉ Ｂｏ Ｂｏｈｍ，９ ７ ａｕ ｎ ｏｌ ｉｒ ｉ ｉｍ ｓ ｉ ｏ ｌ Ｊ ． ｏ ｉ ｌ ｌ＆ ｉｃｅ １８ ，
１ ７０ － ０ ９： ３ ７ ７．
量碳 及其 微ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 物熵 与 环境 条件 的关 系非 常 复杂 ， 需要
进一 步探 讨这 种影 响 及其 机理 。 综上 所述 ， 此项 研 究结 果 指 出了 围湖造 田土地 利
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银杏叶中有效成分黄酮的研究
银杏叶中有效成分黄酮的提取研究及黄酮的检验和分析姬晨辉（内蒙古农业大学理学院内蒙古呼和浩特010018）摘要：银杏是我国的特有植物，又称公孙树。
银杏叶为最古老的中生代孑遗植物银杏的干燥叶。
银杏有裸子植物活化石之称。
据《本草纲目》记载，银杏果具有敛肺平喘、止遗尿、白带的作用。
在医药上有很高的利用价值。
银杏叶的提取方法有有机溶剂萃取法、水提取法、碱性稀醇或碱性水提取法、超临界萃取法、超声波提取法、酶法等。
本文采取乙醇提取总黄酮的方法，用分光光度法测定总黄酮的含量。
关键词：银杏叶总黄酮乙醇含量测定Abstract: Ginkgo biloba is our country's endemic plants, also known as maidenhair tree. Ginkgo biloba is the oldest Mesozoic relict plant Ginkgo biloba dried leaves. Ginkgo has gymnosperms living fossil. According to the "Compendium of Materia Medica" records, ginkgo fruit with convergence lung asthma, only enuresis, vaginal discharge effect. In medicine has a high value in use. Ginkgo biloba extract organic solvent extraction method, water extraction, dilute alkali or alkaline aqueous alcohol extraction, supercritical extraction, ultrasonic extraction, enzymatic and so on. This paper adopts ethanol extract flavonoids method, using spectrophotometric determination of total flavonoids.Key word s: Ginkgo biloba Flavonoids Ethanol Determination1 材料与方法1.1 试验材料银杏叶采集于自然生长的银杏树叶、75%酒精、石油醚、旋转蒸发器、丙酮、4～5碳烷基醇、醋酸酯1.2 试验方法1.2.1 银杏叶总黄酮提取率计算方法银杏叶总黄酮提取率（%）=提取液中心黄酮的重/提取所用银杏叶中总黄酮含量*100%。
银杏叶有效成分含量的影响因素
银杏叶有效成分含量的影响因素
银杏叶的有效成分受其不同来源的影响，有效成分含量差别很大。
其中影响黄酮类成分的主要因素为产地、采叶时间、树龄、雌雄、采叶部位及加工方式，影响内酯类成分的主要因素为产地、采叶时间、加工方式。
青岛三九九洲生物技术有限公司原料产地，位于全国闻名的"银杏之乡"——
山东郯城的万亩银杏林种植基地，郯城属暖、温带半湿润季风区，土壤湿润肥沃，年平均气温13.2℃，年均降水量843毫米，年均日照2425小时，无霜期206天，四季分明，气候宜人，盛产银杏。
有实验表明，银杏幼叶的总黄酮含量明显高于老树叶；雌树的6种黄铜总量高于雄树；同一棵树的同一枝条上，上部树叶的黄铜含量最高；银杏鲜叶收获后及时通风干燥、其中人工干燥的方式银杏叶质量最好。
年年康银杏叶精的原料均采用每年的6-9月采摘的3-
5年的雌树小苗叶，有效成分含量高。
且年年康银杏叶精的提取物直径在110-120纳米之间，实验表明，提取物的直径若低于该区间则很难提取出真正的黄铜成分，而高于该区间不能被人体吸收，年年康银杏叶精，采用先进的三级萃取技术，将银杏叶提取物的直径有效控制在110-
120纳米之间，保证了产品的高吸收性。
银杏是所有含有黄酮的植物中含有黄酮最多的植物，且银杏总黄酮为138种黄酮的组合，其效果明显区别于山楂、葛根中的单一黄酮。
千年典藏版：产品选用的银杏叶均采摘自500年以上的银杏树，由于树身存活的时间长，因此其树叶本身含有独特的长寿因子，年年康银杏叶精将这种特有长寿因子提取出来，与138种银杏总黄酮融合在一起，形成了有效成分浓度更高的浓缩版银杏叶精。
干燥方式对银杏叶黄酮含量影响试验
干燥方式对银杏叶黄酮含量影响试验摘要为探讨不同干燥方式对银杏植物中黄酮含量的影响,以高效液相色谱分析法测定以不同干燥方式处理后的银杏叶总黄酮醇苷含量。
结果表明,以晒干、阴干、烘干和微波干燥处理后,银杏叶总黄酮含量分别为0.751%、0.849%、0.826%和0.884%,干燥方法以微波最好,阴干次之,晒干最差。
直射光线对黄酮含量影响较大,在银杏采集加工中,应避免用晒干的方法处理。
关键词银杏叶;总黄酮;干燥方式;含量测定银杏(Ginkgo biloba)又名公孙树,属侏罗纪植物,被誉为植物界的“活化石”,是我国的特产植物,在湖北省恩施自治州种植十分广泛,据统计,截止2008年底,恩施州银杏实有面积已达9 053.2hm2,产量达2 218t。
银杏树在用材、绿化环境方面作用巨大,银杏的种子又名白果,是传统的滋补药物和食物;其果、叶含有丰富的银杏双黄酮、异银杏双黄酮、去甲基银杏双黄酮及二萜内酯、银杏内酯A、银杏内酯B、银杏内酯C等,均可作药用,其中银杏叶中所含的槲皮素、山萘素、异鼠李素等黄酮化合物具有活血化淤、降低血脂、扩张脑血管、清除自由基和抗衰老等功效和作用,已广泛用于治疗冠心病、心绞痛、治疗老年痴呆症和增强记忆功能、防治皮肤病、脱发等多种疾病[1]。
如何更好地开发利用银杏植物是当前生物化学研究中的一大热门,本研究采用高效液相色谱分析法测定以不同的干燥方式处理后银杏叶总黄酮醇苷含量,探讨银杏采集加工中直射光线对黄酮含量的影响。
1材料与方法1.1材料和仪器1.1.1材料。
银杏叶于2008年6月下旬采于恩施州利川市团堡镇银杏基地内,分别采用晒干、阴干、烘干和微波干燥4种方法进行干燥处理。
1.1.2仪器。
为美国PerKinElmer公司Series200高效液相色谱仪(包括Series200紫外检测器、Series200二元泵、600Series接口及色谱工作站)。
1.1.3供试药剂。
槲皮素、山奈素、异鼠李素对照品(中国药品生物制品检定所,批号分别为10081200406、110861200405、110860200407),甲醇(色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中心),磷酸(分析纯,天津市化学试剂一厂),水为饮用纯净水(杭州娃哈哈集团生产)。
不同干燥方法对银杏叶黄酮含量的影响
不同干燥方法对银杏叶黄酮含量的影响
邓国栋;何郡;郁建平
【期刊名称】《食品研究与开发》
【年(卷),期】1999(020)001
【摘要】对新鲜银杏叶片采用不同的干燥方法处理，利用ＨＰＬＣ测定黄酮含量，发现阴干，晒干的样品黄酮含量稍高于烘干、杀青的样品，而肝则与烘干的样品差异不大，在几种方法中以阴干处理黄酮含量最高。
【总页数】3页(P42-44)
【作者】邓国栋;何郡;郁建平
【作者单位】贵州大学南区生化营养研究所;贵州大学南区生化营养研究所
【正文语种】中文
【中图分类】TQ461
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高温和干旱对银杏光合作用、叶片中黄酮苷和萜类内酯含量的影响
高温和干旱对银杏光合作用、叶片中黄酮苷和萜类内酯含量的影响张成军;郭佳秋;陈国祥;解恒才【期刊名称】《生态与农村环境学报》【年(卷),期】2005(021)003【摘要】为了探讨高温和干旱的相互作用对银杏(Ginkgo biloba)生长及叶内次生代谢物的影响,设干旱、高温(夜间30 ℃)和干旱+高温3个处理,测定了2年生银杏幼苗的生长指标、光合特性、叶片水势、气孔导度以及叶内黄酮苷和萜类内酯的含量.与对照(未经干旱或高温处理)相比,高温引起银杏叶片最大净光合速率降低,气孔导度和光补偿点增加;干旱处理后,银杏最大净光合速率、气孔导度和叶片水势均降低,但光补偿点以及叶片黄酮苷和萜类内酯含量增加,表观量子产量变化不明显.高温和干旱共同作用下,银杏光补偿点和呼吸速率增高,光饱和点显著降低,根冠干重比无统计学上显著变化,但总干重降低.上述结果说明干旱和高温降低了银杏对光的适应范围,银杏光能利用效率变低,气孔导度下降,最大净光合速率降低,呼吸作用增强,抑制了生长;干旱引起黄酮苷和萜类内酯含量增加的幅度大于高温.【总页数】5页(P11-15)【作者】张成军;郭佳秋;陈国祥;解恒才【作者单位】南京师范大学,生命科学学院,江苏,南京,210097;哈尔滨医科大学,第二附属医院,黑龙江,哈尔滨,150086;南京师范大学,生命科学学院,江苏,南京,210097;哈尔滨太阳岛风景区,黑龙江,哈尔滨,150010【正文语种】中文【中图分类】Q945.78【相关文献】1.施肥与干旱胁迫对银杏生长及黄酮苷和萜类内酯含量的影响 [J], 冷平生;李月华;苏淑钗;王沙生;蒋湘宁2.索氏提取-HPLC-ELSD法检测银杏叶片中萜类内酯的含量 [J], 高翠华;姜恒3.HPLC-RID法测定银杏叶片中4种萜类内酯的含量 [J], 窦国义;高宝益;李红梅4.光强与光质对银杏光合作用及黄酮苷与萜类内酯含量的影响 [J], 冷平生;苏淑钗;王天华;蒋湘宁;王沙生5.银杏黄酮苷和萜类内酯含量的季节变化 [J], 冷平生;王天华;苏淑钗;蒋湘宁;王沙生因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
黄酮分离实验报告
一、实验目的本实验旨在通过溶剂萃取、柱层析等方法，从植物材料中提取和分离黄酮类化合物，并对其纯度和含量进行测定，以了解黄酮类化合物的提取和分离纯化过程。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：- 植物材料：某种富含黄酮类化合物的植物（如银杏叶、橙皮等）- 提取溶剂：乙醇、水、甲醇等- 分离材料：硅胶、氧化铝、大孔树脂等2. 实验仪器：- 热水浴锅- 烘箱- 漏斗- 筛子- 烧杯- 蒸馏装置- 分光光度计- 薄层层析装置三、实验步骤1. 提取：- 将植物材料干燥、粉碎，过筛后备用。
- 称取一定量的植物粉末，加入适量的提取溶剂，置于热水浴锅中加热回流提取。
- 提取结束后，将提取液过滤，收集滤液。
2. 溶剂萃取：- 将滤液分别用不同极性的有机溶剂（如石油醚、氯仿、乙酸乙酯等）进行萃取。
- 将有机溶剂层收集于烧杯中，水层用有机溶剂重复萃取，直至水层颜色不再变化。
3. 薄层层析：- 将分离后的有机溶剂层浓缩干燥，得到粗提物。
- 将粗提物用适当溶剂溶解，点样于薄层层析板上。
- 以不同极性的有机溶剂为展开剂，进行薄层层析。
- 观察并记录各化合物在薄层层析板上的位置。
4. 柱层析：- 将薄层层析中分离出的目标化合物，进行柱层析分离。
- 将柱层析柱装填好固定相，将目标化合物溶解于适当溶剂，进行上样。
- 用不同极性的有机溶剂梯度洗脱，收集各洗脱液。
- 对各洗脱液进行检测，确定目标化合物的位置。
5. 纯度测定：- 将分离出的目标化合物进行纯度测定，如紫外光谱法、红外光谱法等。
- 根据实验结果，确定目标化合物的纯度。
6. 含量测定：- 采用适当的方法测定目标化合物的含量，如分光光度法、高效液相色谱法等。
- 计算目标化合物的含量。
四、实验结果与分析1. 提取：- 实验结果表明，乙醇为较佳的提取溶剂，提取效率较高。
2. 溶剂萃取：- 实验结果表明，不同极性的有机溶剂对黄酮类化合物的萃取效果不同，可利用这一性质进行初步分离。
3. 薄层层析：- 实验结果表明，目标化合物在薄层层析板上的位置较明显，有助于进一步分离。
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定
银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定银杏叶是一种常见的中草药，被广泛用于治疗心血管疾病、脑血管疾病等疾病。
银杏叶中含有丰富的总黄酮醇苷，是其主要药效成分之一。
因此，测定银杏叶片中总黄酮醇苷的含量对于研究其药效作用具有重要意义。
本文旨在介绍一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法。
一、实验材料和仪器1.实验材料银杏叶片粉末、无水乙醇、二氯甲烷、硫酸、硝酸、硼酸、钠氢碳酸、碳酸钠、硫酸铜、硝酸铅、氢氧化钠、酚酞指示剂、氯仿、石油醚、乙酸乙酯、甲醇等。
2.仪器紫外分光光度计、高速离心机、旋光仪、恒温水浴器、电子天平、磁力搅拌器等。
二、实验步骤1.提取样品中的总黄酮醇苷取适量的银杏叶片粉末，用无水乙醇进行浸提，提取液在恒温水浴器中加热回收至干燥。
将干燥后的提取物用二氯甲烷和无水乙醇混合溶解，制备成10mg/mL的样品溶液。
2.测定样品中总黄酮醇苷的含量将样品溶液加入紫外分光光度计中，以350nm为波长进行测定。
同时取一定量的样品溶液，用硫酸进行水解反应，加入硝酸、硼酸、钠氢碳酸等试剂，然后用碳酸钠进行中和，加入硫酸铜、硝酸铅等试剂，用氢氧化钠进行沉淀，最后用酚酞指示剂进行滴定。
3.计算总黄酮醇苷的含量根据测定结果，计算样品中总黄酮醇苷的含量。
具体计算公式如下：总黄酮醇苷含量（mg/g）=（C×V×D）/m其中，C为滴定所用的氢氧化钠的浓度，V为样品溶液的体积，D 为稀释倍数，m为样品的质量。
三、实验结果与分析本实验所得到的银杏叶片中总黄酮醇苷的含量为XXmg/g。
该结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
同时，该实验方法具有可靠性高、操作简便等优点，适用于银杏叶片中总黄酮醇苷的含量测定。
四、结论本文介绍了一种测定银杏叶片中总黄酮醇苷含量的方法，该方法具有可靠性高、操作简便等优点。
实验结果表明，银杏叶片中含有较高的总黄酮醇苷含量，这也是其药效作用的主要来源之一。
温度和干旱胁迫对银杏叶代谢物含量的影响
Ｔ ｈ ｅ ｉ ｎ ｌ ｆ ｕ ｅ ｎ ｃ ｅ ｓ ｏ ｆ ｔ ｅ ｍｐ ｅ ｒ ａ ｔ ｕ ｒ ｅ ａ ｎ ｄ ｄ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｔ ｓ ｔ ｒ ｅ ｓ ｓ ｏ ｎ ｔ ｈ ｅ ｍｅ ｔ ａ ｂ ｏ ｌ ｉ ｔ ｅ ｓ ｉ ｎ ｌ ｅ ａ ｖ ｅ ｓ ｏ ｆ Ｇ ｉ ｎ ｋ ｇ ｏ ｂ ｉ ｌ ｏ ｂ ａ ｆ Ｃ Ｈ Ａ Ｎ Ｇ
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温 度和 干 旱胁 迫 对 银 杏 叶代 谢 物 含 量 的影 响
常丽， 周 昕， 汪贵斌
（ 南京林业大学森林资源与环境学院 ， 南京 ２ １ ０ ０ ３ ７ ）
摘 要 ： 设 置 ３个温度水平与 ３个干旱胁迫水平的 ９个处理 盆栽试验 ， 研 究了银 杏叶初 生代谢产物 可溶性糖 、 可 溶性蛋 白质及 次生代谢产物黄酮类化合 物含 量的变化 。结果表 明： 干旱 处理促进 可溶性糖 、 可溶性蛋 白质 的积 累， 但抑制类黄酮的合成。低 温促进银杏 叶片可溶性糖及 类黄 酮的合成 ， 高温抑制类黄 酮的合成 。胁迫 前期 ， 干旱 因
子是抑制类黄酮合成的首要 因素 ， 胁迫后期 ， 低 温因子是促进类黄酮合成的首要 因素 。相 关分析表明 ， 干旱 胁迫和
温度 胁 迫 处理 下 ， 可溶 性 糖 含 量 与 类 黄 酮 的 相 关 性 不 明 显 ， 可溶 性 蛋 白质 含 量 与 类 黄 酮 含 量 整体 呈显 著 负相 关 。 关 键词 ： 银杏 ； 类黄酮 ； 可 溶性 糖 ； 可 溶性 蛋 白 ； 温度 ； 干 旱
不同处理方式对银杏叶活性成分的影响
第 １期
秦 俊 哲 等 ： 同 处 理 方 式 对 银 否 叶 活 性 成 分 的 影 响 不
・ ６３ ・
坐标 ， 线性 回归 得标 准 曲 线 方 程 ： ＝８ ７ ５ Ａ： ． １ Ｃ＋ ０ ０ ０７ Ｒ 一０ ９ ９４ 线 性 范 围 为 ： ． ０ ～ ０ ０ ３ｍｇ ＝ ． ４ ， ． ９ ， ００９ ． ９ ／
（ Ｏ—， Ｄ１ １１ ＤＡ２ １ ＤＭ ３ ｌ ＤＳ ０ ） 安 徽 三星 树 脂 有 限 公 司 ． ０， Ｏ ， ４１，
试 剂 ： 照 品 银 杏 酸 （ １ ０ Ｃ ７： ， １ ０ Ｃ１ １ Ｃ ７： ） 芦 丁 ： 国 药 品 生 物 制 品 检 定 所 ． 对 Ｃ ５： ， １ １ Ｃ ３： ， ５： ， １ ２ ， 中 正
中图法 分类号 ： ２４ ２ Ｒ ８ ．
文献 标识码 ： Ａ
０ 引 言
银杏树 是现存 种子 植物 中最古老 的 孑遗植 物 ， 食 用 、 用 、 集 药 材用 为 一体 ， 有较 高 的综 合 利用 价 值． 具
银 杏 叶中含有 １ ０多种 生理活 性物质 ， ７ 具有 改善血 管循 环 、 制周 围血管 失 调 、 抗 血小 板 活化 因 子等 作 控 拮
叶脱 除银杏 酸 的报 道． 为此本实 验探索 了萎 凋与 干燥 方 式 对银 杏 叶活性 成 分 的 影 响 ， 以期 降低 银 杏 酸含
量， 提高银杏 叶产 品的食用 安全性 ．
１ 材 料 与 方 法
１１ ． 材 料 与 仪 器
材 料 ： 鲜银杏 叶 ，０ ０年 ６月 采摘 于陕 西科 技 大 学 银 杏 园林 银 杏 树 枝 干 的 中下 部 ； 孔 吸 附树 脂 新 ２１ 大
实验1总黄酮
超声波-回流法银杏叶中总黄酮提取的研究摘要：对超声波和回流法两种不同提取银杏叶中总黄酮方法进行了探讨,研究超声浸提时间、乙醇浓度、料液比对银杏叶总黄酮浸提的影响，并对试验结果进行验证．测定了银杏叶中总黄酮的含量。
实验结果表明,超声波提取方法较回流法提取率高。
超声波提取总黄酮的最佳操作条件是用80%乙醇浸提,时间50min,料液比1：10。
关键词：银杏叶;黄酮;超声波；回流前言：银杏叶是银杏的叶片,含有黄酮类活性物质。
根据文献记载,银杏叶提取物在医药、保健品、化妆品等领域已得到广泛的应用。
其所含有的黄酮类物质,可防止高血压及动脉硬化,活血化瘀,抗肝脏毒,抗炎,祛痰,解热,提高机体免疫功能,抗菌,抗病毒,缓解高血压患者的头痛等多种药理作用。
它的提取主要以回流法为主,操作简便,但费时。
本文采用超声波提取方法并与传统的回流提取方法比较;同时对超声波提取方法的各项影响因素进行了研究。
结果表明,超声波提取法不但提取率高且节省时间。
1实验部分1.1实验目的1.1.1探讨超声波和回流法提取银杏叶中的总黄酮提取率的高低。
1.1.2采用单因素实验探究超声浸提时间、乙醇浓度、料液比对银杏叶总黄酮含量的影响。
1.2实验原理银杏叶为银杏的干燥叶，我国的银杏资源占世界70%以上。
银杏黄酮是银杏叶中主要活性成分之一，是开发医药、保健食品和绿色化学品的重要资源。
另外银杏叶还含有39种营养及功能成分，包括蛋白质、糖、维生素C、维生素E、胡罗卜素、18种氨基酸、25种矿物质营养微量元素，其中钙、磷、硼、硒含量较高，其他如人体所需的铁、氟、铜、锰、锌、铬等含量也较丰富，其中维生素C、维生素E、胡罗卜素、硒、锌、钙等作为营养性抗氧化剂与非营养性抗氧化剂—银杏黄酮、萜内酯、儿茶素、多酚类等对保护机体不受自由基所致的氧化和损伤发挥着重要的作用。
因此，将银杏叶作为高营养、保健功能价值的资源加以开发利用，这对于提高银杏叶综合利用率有重要意义。
银杏叶黄酮的提取与含量测定
银杏叶黄酮的提取与含量测定银杏叶黄酮的提取与含量测定摘要：本论文以银杏叶为原材料,用乙醇提取法提取银杏中的黄酮类物质,分别以银杏叶重量的9倍量和6倍量的7O％乙醇回流浸提两次，减压浓缩，加水沉降离心，过大孔吸附树脂柱，以80％乙醇洗脱，减压浓缩，真空干燥。
得到的银杏叶提取物其黄酮含量在33％以上,并以不同浓度的乙醇和水来分析黄酮的收率。
关键词：黄酮；大孔树脂；提取；乙醇Abstract: The present paper take the gingko leaf as material,ethanolextraction of Ginkgo biloba extract flavonoids substances , Ginkgo bilobarespectively to the weight of nine times and six times the volume of 7O %ethanol extraction twice ,decompression nrichment,Centrifugal watersettlement , with the pocket adsorption Resin Column, T o 80% ethanoleluting , decompression enrichment, Vacuum Drying ．The flavonoid contentabove 33% about the extraction of Ginkgo leaf, The yield of flavonoids wasanalyzed by the ethanol and water with different concentrations.Keywords: Flavonones ,he pocket adsorption Resin Column,xtraction,thanol1 前言银杏 (G inkgob iloba)为银杏科(Ginkgoaceae)银杏属(Ginkgo)多年落叶乔木，属于距今二亿多年前中生代侏罗纪的裸子植物，现仅存一科一属一种，有裸子植物“活化石”之称[1]。
银杏黄铜的提取工艺、性质和功能研究
银杏黄酮的提取工艺、性质和功能研究摘要目的从银杏叶中分离纯化出总黄酮，并用来做定性、定量分析及其功能研究。
方法采用超声提取法从银杏叶中提取总黄酮，再用硅胶柱层析法分离纯化，用镁粉、浓盐酸做定性分析，以NaNO2、Al(NO3) 3和NaOH为显色剂在510nm处测定其吸光值，分析其含量，用普鲁士蓝法进行总黄酮还原力的测定。
结果与镁粉、浓盐酸反应溶液颜色呈橙色，银杏叶提取液稀释10倍后测得吸光度0.147；稀释5倍时吸光度为0.262；不稀释时浓度为1.229，当样品浓度为0.04mg/ml时还原力最强。
结论用超声波辅助提取法、硅胶柱层析法能较快速的分离纯化出银杏叶中的总黄酮，银杏叶黄酮具有较强的还原力。
关键词银杏总黄酮；提取工艺；银杏黄酮功能前言银杏又名公孙树，为银杏科银杏属植物。
银杏叶中黄酮类化合物含量较高，为2.5%~5.91%，主要含有黄酮和银杏内酯等有效成分，其中银杏黄酮具有扩张血管，增加脑血管流量，降低脑血管阻力，改善脑血管循环功能，保护脑细胞，免受缺血损害扩张冠状动脉；防止心绞痛及心肌梗塞，抑制血小板活化因子、抗氧化，防止血栓形成，清除有害的氧化自由基，提高免疫力和调血脂等药理作用[1]。
对治疗心脑血管疾病，增加冠状动脉血流量，及治疗脑缺血、脑老化、老年痴呆症哮喘等有独特疗效[1]。
国内外相继有银杏叶黄酮新药投入市场。
1 实验仪器：紫外分光光度计、电子天平、超声波提取机、漏斗、滤纸、三角瓶、50ml 移液管、容量瓶、移液枪、烧杯等。
2 实验方法[2]2.1 银杏黄酮提取步骤：（一）采用超声提取法从银杏叶中提取总黄酮。
（二）称取100g磨碎的银杏叶，用1000ml 60％的乙醇溶解称取的银杏叶。
（三）在超声功率800Hz下提取，连续超声35min。
（四）提取液减压布式漏斗过滤，再旋转蒸发器浓缩回收乙醇。
2.2 柱层析方法2.2.1 硅胶的预处理13称取3g硅胶样品放入烧杯中，再放入烘箱中105℃，干燥40min。
银杏叶的提取物实验报告
一、实验目的本实验旨在通过提取和分离银杏叶中的有效成分，探讨银杏叶提取物的制备方法，并对其化学成分进行定性定量分析，为银杏叶的进一步开发和应用提供实验依据。
二、实验原理银杏叶中主要有效成分包括黄酮类化合物和萜类化合物，具有扩张血管、调节血脂、拮抗血小板活化因子、保护缺血损伤、抗炎及抗肿瘤等多种药理作用。
本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 银杏叶：干燥、粉碎- 乙醇：分析纯- 水浴锅- 高效液相色谱仪- 色谱柱- 标准品：槲皮素、银杏内酯等- 试剂：甲醇、乙腈等2. 实验仪器：- 电子天平- 粉碎机- 滤纸- 离心机- 恒温水浴锅四、实验方法1. 银杏叶提取液的制备：- 称取一定量干燥、粉碎的银杏叶，加入适量乙醇，浸泡一段时间后，水浴加热回流提取。
- 提取液过滤，滤液浓缩至适量，得银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 标准品溶液的制备：准确称取一定量的槲皮素标准品，用甲醇溶解并定容，得标准品溶液。
- 样品溶液的制备：准确称取一定量的银杏叶提取物，用甲醇溶解并定容，得样品溶液。
- 色谱条件：流动相：甲醇-水（体积比80:20）；流速：1.0ml/min；检测波长：254nm。
- 样品溶液和标准品溶液分别进样，记录色谱图，根据标准品溶液的峰面积计算样品溶液中槲皮素含量。
五、实验结果与分析1. 银杏叶提取液的制备：- 经过提取、过滤、浓缩等步骤，成功制备了银杏叶提取物。
2. 高效液相色谱法测定银杏叶提取物中的槲皮素含量：- 样品溶液色谱图显示，在254nm波长下，银杏叶提取物中存在一个与槲皮素标准品峰相似的峰，说明提取物中含有槲皮素。
- 根据标准品溶液的峰面积计算，银杏叶提取物中槲皮素含量为2.5%。
六、结论本实验采用溶剂提取法提取银杏叶中的黄酮类化合物，并利用高效液相色谱法对其含量进行测定，成功制备了银杏叶提取物，并确定了其中槲皮素含量。
银杏叶中黄酮类化合物的提取
随着时间的↑ 随着时间的↑黄 酮类化合物提取 4h之前 率↑ ，4h之前 时间↑ 时间↑提取率的 影响比较明显， 影响比较明显， 4h之后时间的 之后时间的↑ 4h之后时间的↑ 提取率增加变缓。 提取率增加变缓。
实验条件：温度 ℃ 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：温度80℃ ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
提取率 （ % ） 提取率（
三 、实验结果及讨论
料液比对提取率的影响：
90 85 80 75 70 65 1:10 1:15 1:20 1:25 1:40
↑ 1:15
料液比
随着料液比↑提取 随着料液比 提取 率也随之↑。 率也随之 。在 1:15之前，对提 之前， 之前 取率的影响比较 明显， 明显，在1:15之 之 后，对提取率影 响变小。 响变小。
芦丁的化学结构式
二、研究内容
测量波长的选取： 测量波长的选取：
1.5 1.2
0.9 0.6 0.3 0 400 450 500 550 600
500nm ↓
波长( nm） 波长 ( nm ）
根据吸收光谱可 知，该有色溶液在波 nm具有最大吸 长500 nm具有最大吸 光度， 光度，且吸收范围较 宽，所以选择吸收波 nm作为定量测 长500 nm作为定量测 定波长。 定波长。
80 70 60 50 40 50 60 70
↑ 80℃ ℃
80
90
100
温度（ 温度 （ ℃ ）
浸取温度的↑ 浸取温度的↑提 取率液随着↑ 取率液随着↑ 。 80℃之前提取率 ℃ 增加迅速， ℃ 增加迅速，80℃ 之后， 之后，温度对提 取率的影响变小。 取率的影响变小。
实验条件：时间 浸取剂70%乙醇溶液 ；料液比 实验条件：时间4 h ；浸取剂 乙醇溶液 料液比1:15
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干燥方式对银杏叶黄酮含量影响试验
摘要为探讨不同干燥方式对银杏植物中黄酮含量的影响,以高效液相色谱分析法测定以不同干燥方式处理后的银杏叶总黄酮醇苷含量。
结果表明,以晒干、阴干、烘干和微波干燥处理后,银杏叶总黄酮含量分别为0.751%、0.849%、0.826%和
0.884%,干燥方法以微波最好,阴干次之,晒干最差。
直射光线对黄酮含量影响较大,在银杏采集加工中,应避免用晒干的方法处理。
关键词银杏叶;总黄酮;干燥方式;含量测定
银杏(Ginkgo biloba)又名公孙树,属侏罗纪植物,被誉为植物界的“活化石”,是我国的特产植物,在湖北省恩施自治州种植十分广泛,据统计,截止2008年底,恩施州银杏实有面积已达9 053.2hm2,产量达2 218t。
银杏树在用材、绿化环境方面作用巨大,银杏的种子又名白果,是传统的滋补药物和食物;其果、叶含有丰富的银杏双黄酮、异银杏双黄酮、去甲基银杏双黄酮及二萜内酯、银杏内酯A、银杏内酯
B、银杏内酯C等,均可作药用,其中银杏叶中所含的槲皮素、山萘素、异鼠李素等黄酮化合物具有活血化淤、降低血脂、扩张脑血管、清除自由基和抗衰老等功效和作用,已广泛用于治疗冠心病、心绞痛、治疗老年痴呆症和增强记忆功能、防治皮肤病、脱发等多种疾病[1]。
如何更好地开发利用银杏植物是当前生物化学研究中的一大热门,本研究采用高效液相色谱分析法测定以不同的干燥方式处理后银杏叶总黄酮醇苷含量,探讨银杏采集加工中直射光线对黄酮含量的影响。
1材料与方法
1.1材料和仪器
1.1.1材料。
银杏叶于2008年6月下旬采于恩施州利川市团堡镇银杏基地内,分别采用晒干、阴干、烘干和微波干燥4种方法进行干燥处理。
1.1.2仪器。
为美国PerKinElmer公司Series200高效液相色谱仪(包括Series200紫外检测器、Series200二元泵、600Series接口及色谱工作站)。
1.1.3供试药剂。
槲皮素、山奈素、异鼠李素对照品(中国药品生物制品检定所,批号分别为10081200406、110861200405、110860200407),甲醇(色谱纯,天津市科密欧化学试剂开发中心),磷酸(分析纯,天津市化学试剂一厂),水为饮用纯净水(杭州娃哈哈集团生产)。