融合标签技术及其应用
采用rfid技术促进烟草行业两化融合——电子标签技术在成品高架库改造中的应用
醚塑龃.采用R FI D技术促进烟草行业“两化”融合——电子标签技术在成品高架库改造中的应用张培弘(陕西中烟工业有限责任公司宝鸡卷烟厂信息中心,陕西宝鸡721013)£}i≮耍】宝鸡卷烟厂在2010年成品高架库物流系统改造过程中,不失时杌的启动了K FID技术在物流系统中的应用,实施了成品物流高?二架库信息系统提升改造项目。
该项目的技术方案主要是通过增加软硬件对现有流程实施改造。
应用信息技术提高企业的工业自动化程度,/,.’同时提升企业自身的信息化应用水平,实现了与宝鸡市烟草公司整托盘形式发货装车、托I盘黻、同城物流对撼.,.瞎罐词】K.F93技术;信息系统;流程;数据集成;物演.对接口:’/,两化融合是信息化和工业化的高层次的深度结合,是指以信息化作流程。
结合我厂成品物流系统结构及配置现状,通过对成品物流系统带动工业化、以工业化促进信息化,走新型工业化道路;两化融合的核的改造和信息系统的提升,实现与宝鸡市烟草公司整托盘形式发货装,满是信息化支撑,追求可持续发展模式。
车,托盘联运,同城物流对接。
实践证明,推进工业化与信息化相融合,是行业转变发展方式、㈡项目实施的主要内容增强竞争实力的重要手殴,努力推进“两化融合”已成为烟草行业的重本项目在宝鸡卷烟厂的应用包括如下建设内容:要发展战略。
1)在件烟下线环节,通过件烟扫码、件烟条码数据压缩、托盘电应用是信息化建设的出发点和落脚点,体现着信息化建设的成效,子标签读写,将托盘中存放的若干件卷烟条码(决策系统32位件烟条在烟草系统大力推进行业卷烟生产经营决策管理系统、卷烟物流数据统码)写^该托盘匕安装的电子标签中,完成基于电子标签的托盘件烟信计应用等重点项目,促进“两化”融合的背景下,宝鸡卷烟厂在2010息关联。
年成品高架库物流系统改造过程中,不失时机的启动了R FI D在物流系2)在仓储环节,以托盘的形式存储件烟,若发生托盘上实物件烟统中的应用,实施了成品物流高架库信息系统提升改造项目。
l融合标签技术概述
l融合标签技术概述
融合标签技术概述
融合标签技术的发展最初是为了简化蛋⽩质的纯化,即通
过重组蛋⽩质所含融合标签同固相介质中配体的特异相互作
⽤,实现重组蛋⽩质的亲和纯化陋哪“⽬。
⽬前,随着多种融合标
签系统的研究和发展,融合标签技术也得到了更为⼴泛的应⽤,
包括重组蛋⽩质的纯化、⽬的蛋⽩质的检测和定向固定、体内⽣
物事件的可视化、提⾼重组蛋⽩质的产量、增强重组蛋⽩质的可
溶性及稳定性。
融合标签的相对分⼦质量、来源、⽣理⽣化特性
各有不同陋191。
亲和融合标签既可以是⼩分⼦多肽⽚段如多聚组
氨酸标签,也可以是整个功能蛋⽩质如麦芽糖结合蛋⽩(MBP)。
这些融合标签的作⽤机制包括了酶与底物、细菌受体与⾎清蛋
⽩、多聚组氨酸与⾦属离⼦、抗原与抗体等f1¨q。
⼀些⾼表达的蛋
⽩质和分⼦伴侣如SUM0和NusA作为融合标签连接到⽬的蛋
⽩质上时,可以提⾼重组融合蛋⽩的表达量和可溶性,避免和减
少包涵体的产⽣,提⾼⽬标蛋⽩质的产量嗍。
如果融合标签的作
⽤类型为抗原和抗体,此类融合标签也被称为表位标签(epitope
tags)。
由于抗体对抗原的识别和结合有很⾼的特异性,⽽表位标
签通常为⼩分⼦多肽⽚段,对重组融合蛋⽩的结构和功能影响
较⼩,可以结合免疫检测技术⽤于追踪和定位⽬的蛋⽩,进⾏蛋
⽩质及蛋⽩质复合体的结构功能相关性研究哪52.11。
荧光蛋⽩如
绿⾊荧光蛋⽩(GYP)受激发时可以发出荧光,能够利⽤仪器定性
和定量检测。
有利于对含有融合荧光蛋⽩标签的重组蛋⽩的表
达、追踪、定位及相关结构功能研究刚础l。
综述:无缝克隆与基因融合(中文版)
无缝克隆与基因融合基因融合技术是基因功能研究的关键工具。
准确拼接的杂合分子,没有任何无关的序列,使我们可以对分子进行精确的研究。
本篇综述介绍了无缝融合基因和蛋白的应用,以及获得这些杂交分子的方法前言随着各种基因组测序项目的完成,人们越来越关注基因产物的功能分析。
基因融合技术在基因功能研究的许多方面具有重要的作用,包括基因和蛋白标记,报告基因的研究,结构域互换研究,突变研究和基因敲除或者插入实验。
传统的基因融合技术涉及到type II 限制酶消化和DNA连接反应(所谓的剪切/粘贴反应),曾被用来作为构建杂交基因的标准方法。
然而,这种方法常常会在接合处留下操作的序列,例如酶切位点。
这些多余的序列可以改变DNA元件的间隔,在接合处引入多余的氨基酸残基,可能对融合蛋白的结构和功能产生不需要的影响,因此影响对融合基因精确的研究。
这篇综述讨论了精确融合基因的应用之处,概括了实现无缝基因融合的方法。
无缝基因融合及其应用无缝克隆和基因融合就是将两个或者更多DNA片段精确结合在一起,在DNA片段的接合处没有任何不需要的序列。
这是获得杂交基因的理想情况。
以下强调几个例子,以表明无缝基因融合的重要性。
启动子和外显子研究基因启动子含有许多调控元件。
转录因子与它们结合并互相影响来调控转录。
启动子删除分析使我们鉴定到这些功能元件,获得关于基因调控机制的重要信息。
然而,因为不同调控元件之间的间隔常常是非常重要的,通常需要长度不变的linker来维持这些元件的间隔和螺旋面。
基因启动子的linker扫描分析需要无缝DNA融合或者序列替换技术。
分子演化方法例如外显子和DNA转移来获得具有需要生化和/或生理特征的蛋白也需要不同功能元件的无缝拼接。
在真核细胞中,通过内含子介导的RNA拼接可以构建嵌合体基因和/或蛋白。
在这些实验中RNA底物的合成和/或外显子标记核酶需要认真的设计,得到嵌合体前体基因。
只要杂合基因形成正确,无缝融合就可以通过拼接实现。
融合标签技术及其应用
融合标签技术及其应用摘要:融合标签技术是一种基于报告基因的重组DNA技术,融合标签技术的发展使重组蛋白质的纯化、固定及检测更加快速、简便,并很快得到了应用。
关键词:融合标签技术;重组蛋白;应用融合标签技术是20世纪末兴起的一种基因重组技术,其主要过程是利用重组DNA技术在靶蛋白编码基因的3’端或5’端融合某种标签的编码基因,通过适宜的宿主来表达重组蛋白质[1],表达的重组蛋白质可以通过融合的标签与包被在固相基质上的特异配基结合而进行纯化。
融合标签技术的发展使重组蛋白质的纯化更加快速、简便。
近几年,随着新的融合标签系统的开发,其功能逐渐多样化,除用于蛋白质纯化外,还用于蛋白质定位和检测等。
1 融合标签的种类融合标签根据其分子量大小可分为两大类:大的蛋白质分子(或蛋白质结构域及其衍生物)和小的多肽片段。
大的蛋白质标签有GST(谷胱甘肽巯基转移酶)、SPA(葡萄球菌蛋白A)和GFP(绿色荧光蛋白)等,它的使用会增加目标蛋白的溶解性,但在蛋白结晶和抗体产生等过程中,标签必须去除。
小的多肽标签有6×His(六聚组氨酸)、HA(流感病毒血凝素表位)、c-myc(人c-myc蛋白表位)、FLAG(专为蛋白纯化和检测设计的八肽)等,多数情况下,由于多肽标签相对较小,对融合蛋白质结构影响小,不需要从融合蛋白质中切除,因而多肽标签较蛋白质标签更为常用。
迄今为止,已有文献较为详尽地报道了各种融合标签[2],其大小从几个氨基酸到蛋白质不等,相互作用类型包括酶与底物,细菌受体与血清蛋白,六聚组氨酸与金属离子,抗原与抗体等[3],表1-1列出了目前报道较多的标签融合系统。
2融合标签技术的应用2.1用于蛋白的纯化。
融合标签技术用于重组蛋白质纯化已为大量实验所证实[4]。
理论上,根据亲和纯化原理可定向设计使目标蛋白质与纯化基质之间不发生任何直接相互作用的融合标签,以避免由于这种直接相互作用造成蛋白质变性。
目前已有许多不同的标签可供利用。
几种常用的蛋白标签的功能和优点
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域。
特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。
美国GeneCopoeia的蛋白表达载体按照表达宿主的不同新推出3类,分别为表达宿主为大肠杆菌,哺乳动物细胞的,以及慢病毒载体,宿主可以为哺乳动物细胞和原代细胞。
除了必要的复制和筛选的元件,协助表达和翻译的元件外,本文将各类载体分别按照功能标签的不同确定种类并将个标签的功能初步介绍如下:His6:His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点:1.标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白的干扰,或进行金属螯和亲和层析复性;3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究;4.His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体;5.可应用于多种表达系统,纯化的条件温和;6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
Flag:Flag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
FLAG作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:1.FLAG作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
融合标签技术及其应用
小可以分为两大类: 大的蛋白质分子 (或蛋白质结构 域及其衍生物) 和小的多肽片段。在大多数情况下, 由于多肽标签相对较小, 对融合蛋白质结构影响很 小, 不需要从融合蛋白质中切除, 因而多肽融合标签 较蛋白质标签更为常用。迄今为止, 已有很多文献
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多源数据融合技术在智慧旅游信息服务中的应用
多源数据融合技术在智慧旅游信息服务中的应用多源数据融合技术在智慧旅游信息服务中的应用随着信息技术的快速发展,智慧旅游信息服务逐渐成为旅游业发展的重要方向。
多源数据融合技术作为智慧旅游信息服务中的关键技术之一,通过整合来自不同来源和不同格式的数据,为游客提供更加丰富、准确和个性化的旅游信息服务。
本文将探讨多源数据融合技术在智慧旅游信息服务中的应用,分析其在提升旅游体验、优化旅游管理、促进旅游产业发展等方面的作用。
一、多源数据融合技术概述多源数据融合技术是指将来自不同传感器、不同平台、不同时间的数据进行综合处理,以获得更准确、更全面的信息。
在智慧旅游信息服务中,多源数据融合技术能够整合来自旅游网站、社交媒体、移动应用、物联网设备等多种渠道的数据,为用户提供全面的旅游信息服务。
1.1 多源数据融合技术的核心特性多源数据融合技术的核心特性包括数据的多样性、实时性、准确性和智能性。
多样性体现在数据来源的广泛性,包括文本、图像、声音、视频等不同形式的数据;实时性体现在数据更新的及时性,能够快速响应旅游环境的变化;准确性体现在数据处理的精确性,通过算法优化提高数据的可靠性;智能性体现在数据分析的智能化,利用机器学习等技术进行深入的数据挖掘和分析。
1.2 多源数据融合技术的应用场景多源数据融合技术在智慧旅游信息服务中的应用场景非常广泛,包括但不限于以下几个方面:- 旅游信息推荐:通过分析用户的历史行为和偏好,为用户提供个性化的旅游信息推荐。
- 旅游路线规划:结合实时交通数据和景区信息,为用户提供最优的旅游路线规划。
- 旅游安全预警:利用气象数据和地理信息,为用户提供旅游安全预警服务。
- 旅游资源管理:通过分析旅游数据,为旅游管理者提供决策支持,优化资源配置。
二、多源数据融合技术在智慧旅游信息服务中的应用多源数据融合技术在智慧旅游信息服务中的应用,不仅能够提升游客的旅游体验,还能够优化旅游管理,促进旅游产业的发展。
RFID技术介绍及其应用举例
RFID技术介绍及其应用举例摘要:RFID(无线射频识别)技术,又称为电子标签或者无线标签,是一种利用无线射频通信实现的非接触式自动识别技术,被列为21世纪最有前途的重要产业和应用技术之一。
本文从几个方面来介绍RFID的相关知识,首先,介绍RFID的技术、国内外的研究现状、以及其优缺点、工作原理。
然后,例举实例说明了RFID的应用。
最后,总结了RFIDD的应用现状和今后的发展前景。
关键词:RFID技术;无线技术;标签1. 概述由于自动化与信息化的普及水平还不高,近几年来矿难、交通等事故以及自然灾害的频频发生,给我们敲响了警钟。
让我们思考如何使灾害给人们所带来的伤痛降到最低,有时候面对错综复杂的环境,地面人员只有依靠先进的监控设备才能及时了解人员、车辆的位置,及一些指标的变化,对人员和车辆进行实时的监控、管理和调度,以免因人员疏忽、通道堵塞、车辆碰撞等造成的损失。
一旦事故发生,监控设备还可以帮助地面入员实时地掌握被困人员的分布信息,及时有效地制定出抢救方案,以避免灾难的进一步扩大,将损失降到最低。
RFID(无线射频识别)[1]技术,是一种电子标签或者无线标签,利用无线射频通信实现的非接触式自动识别技术。
RFID标签具有体积小、容量大、寿命长、可重复使用等特点,可支持快速读写、非可视识别、移动识别、多目标识别、定位及长期跟踪管理。
成本的节约和效率的提升,促使RFID技术成为各个行业实现信息化的重要切入点。
近年来,随着在物流[2]、制造、公共信息服[3]务等行业的广泛应用,RFID技术自身的产业化也在稳步发展之中,在行业中的应用也日益广泛和深入。
同时,RFID技术开始与通信技术以及互联网技术融合,朝着构建一个实现全球物品、人员信息实时共享的物联网目标迈进,而这也正是RFID产业长远发展的动力所在。
与此同时,电信业凭借着在无线通信技术领域的优势以及对于社会信息化的基础设置——公众通信网的运营,成为信息化最重要的推动力量,提升社会信息化水平。
T_DNA标签技术及其在植物功能基因组研究中的应用
T -DNA 标签技术及其在植物功能基因组研究中的应用杨永智(青海大学农林科学院,青海西宁 810016)摘要:综述了T -DNA 转移和整合机理的研究进展,植物T -DNA 标签的种类和特点及其在功能基因组研究中的应用。
关键词:T -DNA ;T -DNA 标签;植物功能基因组学;突变中图分类号:Q812 文献标识码:A 文章编号:1006-8996(2006)06-0034-06T -DNA tagging and its applicatlon in plantfunctional genome researchYANG Yong -zhi(Academy of Agriculture and F orestry Science ,Qinghai University ,X ining 810016,China )Abstract :This paper viewed the principle of T -DNA trans fer and integration ,the types and the charac 2ters of T -DNA insertion mutation in plant and the application of T -DNA tagging to plant functional ge 2nome research 1K ey w ords :T -DNA ;T -DNA tagging ;plant functional genomics ;mutantT -DNA 标签技术是以农杆菌(Agrobacterium )介导的转化为基础的一种插入突变研究方法。
插入突变是将某些DNA 元件插入到植物基因组中后,相应位点的基因的表达就可能受到抑制,利用插入元件作为标签,在插入位点处贴了一个标签,使得植物基因组的插入位点容易辨认。
根据插入位点的基因序列与植物表型变异等的相互关系可以从基因组中分离出相应的基因并鉴定其功能。
anti-tag
标签抗体,别名为抗原表位,又称抗原决定簇,是抗原分子中决定抗原特异性的特殊区域或基团,是与抗体特异性结合的结构或序列。
随着生物技术的发展,科研人员可以通过DNA 重组技术,构建包含目的基因以及表位标记的融合蛋白,进而通过特异性标签抗体对其鉴定与纯化,以达到研究的需求。
Flag抗体-抗Flag标签抗体融合标签,如Flag、GST等标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
常用的标签包括myc、HA、Flag、His、GST等。
其中Flag标签系统利用一个短的亲水性八氨基酸肽(DYKDDDDK)融合到目标蛋白。
Flag标签可位于蛋白质的C端或N端,该系统已广泛应用于各种细胞类型,包括细菌、酵母和哺乳动物细胞等,相应的Flag标签抗体也被广泛应用。
由于Flag标签系统的纯化条件是非变性的,因此可以纯化所有有活性的融合蛋白。
Flag标签可以通过加入肠激酶处理去除,肠激酶专一识别该肽序列C末端的5个氨基酸残基。
Flag抗体可以用于检测和Flag标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测Flag融合表达蛋白等。
His抗体-抗His标签抗体融合标签根据其相对分子质量大小可以分为两大类:大的蛋白质分子和小的多肽片段。
融合标签的使用可以简化蛋白质的纯化过程、控制蛋白质固定的空间取向及方便检测、使体内生物事件可视化、提高重组蛋白质的产量、增强重组蛋白质的可溶性和稳定性等。
His标签是由6个组氨酸(His-His-His-His-His-His)组成的短肽,专门设计用于重组蛋白质的吸附纯化。
由于分子量较小,并且较容易分离和纯化,His融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。
利用His标签可以建立一个基于融合蛋白的高效检测和纯化系统。
His抗体可以用于检测和His标签融合表达蛋白的表达、细胞内定位,以及纯化、定性或定量检测His融合表达蛋白等。
RFID介绍及应用案例
零售业
RFID技术在零售业中广泛应用于库 存管理和商品追踪,提高运营效率 和客户满意度。
技术优势
快速识别:RFID技术可以同时识别多个标签,提高了识别速度和效率。 穿透性强:RFID技术可以穿透纸张、塑料等非金属材质,方便读取。 存储信息量大:RFID标签可以存储大量信息,包括产品序列号、生产日期等。 安全性高:RFID技术采用加密算法对标签信息进行保护,确保数据的安全性和完整性。
技术挑战
成本问题:RFID标签和阅读器的成本较高,限制了大规模应用 标准化问题:不同厂商的RFID产品存在兼容性问题,需要制定统一的标准 隐私保护:RFID技术可能涉及隐私泄露的风险,需要采取相应的保护措施
穿透能力和环境影响:RFID信号容易受到金属、液体等物质的干扰,影响识别效果
解决方案
技术升级:不断改进RFID技术,提高识别准确率和稳定性 标准化:推动RFID技术的标准化进程,促进不同系统之间的互操作性 数据安全:加强数据加密和安全传输等方面的技术研发,保障数据安全 行业合作:加强与各行业的合作,共同推动RFID技术的普及和应用
未来RFID技术将加强对恶意攻击的防范,建立更加完善的安全防御机制,防止数据泄露和被 篡改。
未来RFID技术将更加注重合规性,遵守相关法律法规和标准,确保数据合法合规地使用和管 理。
THANKS
汇报人:XX
Part Four
RFID技术应用案例 分析沃尔玛RFI计划麦德龙集团RFID应用
融合蛋白的标签
重组蛋白表达技术现已经广泛应用于生物学各个具体领域, 特别是体内功能研究和蛋白质的大规模生产都需要应用重组蛋白表达载体。
蛋白表达载体按照表达宿主的不同分为3类,分别为表达宿主为大肠杆菌,哺乳动物细胞的,以及慢病毒载体,宿主可以为哺乳动物细胞和原代细胞。
当某一个标签的使用,一是能构成表位利于纯化和检测;二是构成独特的结构特征(结合配体)利于纯化。
除了必要的复制和筛选的元件,协助表达和翻译的元件外,本文将6个标签的功能初步介绍如下:(一) His 6His6是指六个组氨酸残基组成的融合标签,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。
组氨酸残基侧链与固态的镍有强烈的吸引力,可用于固定化金属螯合层析(IMAC),对重组蛋白进行分离纯化。
使用His-tag有下面优点:1.标签的分子量小,只有~0.84KD,而GST和蛋白A分别为~26KD和~30KD,一般不影响目标蛋白的功能;2.His标签融合蛋白可以在非离子型表面活性剂存在的条件下或变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时特别有用,用高浓度的变性剂溶解后通过金属螯和亲和层析去除杂蛋白,使复性不受其它蛋白的干扰,或进行金属螯和亲和层析复性;3.His标签融合蛋白也被用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA相互作用研究;4.His标签免疫原性相对较低,可将纯化的蛋白直接注射动物进行免疫制备抗体;5.可应用于多种表达系统,纯化的条件温和;6.可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。
(二) FlagFlag标签蛋白为编码8个氨基酸的亲水性多肽(DYKDDDDK),同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。
Flag 作为标签蛋白,其融合表达目的蛋白后具有以下优点:1. Flag 作为融合表达标签,其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质,这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。
重组蛋白融合标签及对应的酶切酶
重组蛋白融合标签及对应的酶切酶一、概述重组蛋白是一种人工合成的蛋白质,通常用于生物技术和药物研发领域。
在研究和应用中,为了更好地研究和分析重组蛋白,通常需要在其N端或C端连接不同的标签,以便于对其进行纯化、检测和定位等操作。
而对于大多数重组蛋白而言,酶切酶是一个重要的工具,它可以通过切割特定的肽键来去除标签或实现蛋白质的精确裁剪。
重组蛋白融合标签及对应的酶切酶是重要的研究话题。
二、重组蛋白融合标签1. His标签His标签是一种常用的重组蛋白融合标签,它通常由6个组氨酸构成,其序列为His-His-His-His-His-His。
这种标签能够与金属离子亲和层析柱上的镍离子结合,便于对融合蛋白进行纯化。
常用的His标签融合蛋白包括His-tag、GST-His-tag等。
对应的酶切酶包括Thrombin、Enterokinase等,可以在需要的时候精确切割掉His标签。
2. FLAG标签FLAG标签是另一种常用的重组蛋白融合标签,它是一个八肽序列,其序列为DYKDDDDK。
FLAG标签常用于蛋白质检测和免疫印迹等分析中。
常用的FLAG标签融合蛋白包括pET21a-FLAG、CMV-FLAG等。
对应的酶切酶为Enterokinase等,可实现对FLAG标签的精确切割。
3. GFP标签GFP标签是一种表达在绿色荧光蛋白上的重组蛋白融合标签,其序列与GFP蛋白的序列相同,能够使融合蛋白在荧光显微镜下直接观察到。
常用的GFP标签融合蛋白包括pGFP、pGFP-V-RS等。
对应的酶切酶为Bgl II等。
4. HA标签HA标签是一种可溶酶敏感的蛋白质标签,其序列为YPYDVPDYA。
HA标签常用于蛋白质的免疫检测、纯化等。
对应的酶切酶为Enterokinase等。
5. Myc标签Myc标签是另一种常用的重组蛋白融合标签,其序列为EQKLISEEDL。
Myc标签常用于免疫印迹、免疫沉淀等研究中。
对应的酶切酶为Enterokinase等。
蛋白质工程技术知识点总结
蛋白质工程技术知识点总结蛋白质是生物体内功能最多样化的大分子,具有多种生物学功能,在生物医学领域有着广泛的应用。
蛋白质工程技术是指利用基因重组、蛋白质工程和蛋白质设计等技术手段,对蛋白质进行人工改造和设计,以获得具有特定功能和性质的蛋白质。
本文将围绕蛋白质工程的基本原理、技术手段和应用领域进行介绍和总结。
一、蛋白质工程的基本原理1. 基因重组技术基因重组技术是蛋白质工程的基础技术,通过将感兴趣的基因分子导入到宿主细胞中,使宿主细胞能够表达这些基因,从而产生感兴趣的蛋白质。
常用的基因重组技术包括质粒转染、病毒载体转染、基因枪转染等。
2. 蛋白质纯化技术蛋白质的产生过程中会伴随很多其他杂质,因此需要对蛋白质进行纯化。
目前常用的蛋白质纯化技术主要包括离子交换、凝胶过滤、亲和纯化、透析、超速离心等。
3. 蛋白质结构分析技术蛋白质工程需要对蛋白质的结构进行分析,以确定蛋白质的二、三维结构,常用的技术包括X射线晶体学、核磁共振、质谱、表面等离子共振等。
4. 蛋白质工程设计和改造技术蛋白质工程的设计和改造技术是指对蛋白质的氨基酸序列进行修改、融合、重组等,以获得更理想的蛋白质性质和功能。
常用的技术手段包括点突变、插入、删除、重组、融合以及改变翻译后修饰等。
二、蛋白质工程的技术手段1. 蛋白质工程中的点突变技术点突变技术是通过对蛋白质基因进行特定的DNA序列改变,使蛋白质的氨基酸序列发生改变,从而改变蛋白质的性质和功能。
常用的点突变技术包括重叠PCR、引物设计、缺失突变和插入突变等。
2. 蛋白质工程中的插入和删除技术插入和删除技术是指在蛋白质的氨基酸序列中直接插入或删除特定的氨基酸残基,从而改变蛋白质的结构和功能。
常用的技术手段包括基因克隆、引物设计、限制性内切酶切割等。
3. 蛋白质工程中的重组和融合技术重组和融合技术是指将两种或多种不同的蛋白质基因进行重组组合,从而产生具有新功能和性质的蛋白质。
常用的重组和融合技术包括PCR扩增、质粒构建、引物设计等。
蛋白质纯化的内含肽与几丁质结合域标签
一、概述蛋白质纯化是生物化学研究中常用的一项技术,它能够帮助研究者获取纯净的蛋白质样品,从而进行进一步的研究和分析。
在蛋白质纯化的过程中,标签技术起着至关重要的作用。
几丁质结合域标签作为蛋白质纯化的一种常见标签,在近年来备受关注。
本文将重点探讨几丁质结合域标签在蛋白质纯化中的应用及其优势。
二、几丁质结合域标签的特点几丁质是一种富含氮的多聚糖,其结合域可以与几丁质结合,并保持稳定的结合。
几丁质结合域标签是通过将几丁质结合域融合到目标蛋白质的N端或C端,使其具有与几丁质特异性结合的能力。
这种标签技术在蛋白质纯化中有许多优势,包括但不限于:易于操作、结合强度高、适用范围广等。
三、几丁质结合域标签在蛋白质纯化中的应用几丁质结合域标签可应用于亲和层析、凝胶过滤层析和离子交换层析等蛋白质纯化技术中。
通过在蛋白质表达载体中融合几丁质结合域标签,利用几丁质与几丁质结合域的高亲和力,可以实现目标蛋白质的快速、高效纯化。
几丁质结合域标签还可用于蛋白质的表达与定位等方面,发挥重要作用。
四、几丁质结合域标签的优势1.易于操作:几丁质结合域标签的融合操作相对简单,不需要额外的特殊设备和试剂,适用性较强。
2.结合强度高:几丁质结合域标签与几丁质的结合能力较强,可以保证目标蛋白质在纯化过程中的稳定性。
3.适用范围广:几丁质结合域标签适用于各种类型的蛋白质,包括但不限于细菌表达的蛋白质、哺乳动物表达的蛋白质等。
五、几丁质结合域标签的发展与应用前景随着生物技术的不断发展,几丁质结合域标签作为一种有效的蛋白质纯化标签技术,其在科学研究和生物制药领域的应用前景将更加广阔。
未来,研究者可以进一步优化几丁质结合域标签的结构和性能,以满足不同蛋白质的纯化需求,并且可望将其应用于生物制药领域,为蛋白质药物的研发和生产提供更多选择。
六、结论几丁质结合域标签作为一种常见的蛋白质纯化标签技术,具有易于操作、结合强度高、适用范围广等优势,已在生物化学研究和生物制药等领域得到广泛应用。
标签抗体汇总综述
标签抗体汇总综述自20世纪70年代中期融合标签技术出现以来,亲和标签已成为一种重组蛋白纯化十分有效的工具,具有结合特性高、纯化条件温和、纯化步骤简单、适用性广泛等显著优势。
目前为止已出现了种类众多,功能各异、用途多样的亲和标签,极大的促进了重组蛋白的有效纯化。
常用亲和标签列表一、亲和标签分类根据自身分子量大小的不同可分为两类:①一类为大的蛋白质分子如GST-tag、SPA-tag、GFP-tag等。
使用时会增加目标蛋白的溶解性,但在蛋白结晶和抗体生产的过程中,标签必须去除。
②另一类为小的多肽标签如6*His-tag、HA-tag、c-myc tag等。
多数情况下由于多肽标签相对较小,对融合蛋白质结构影响小,不需要从融合蛋白质中切除,因而多肽标签较蛋白质标签更为常用。
二、常用亲和标签Flag-tagFlag标签是由八个亲水氨基酸(DYKDDDDK)组成的一个短肽,分子量很小,因此不会遮盖融合蛋白中其他蛋白表位与结构域。
该标签具有天然的亲水特性,可位于蛋白质的C端或N端,利于抗体检测,同时含有一个肠激酶切割位点,可通过肠激酶切除标签。
His-tagHis-tag由人工合成的组氨酸首尾相连构成,通常由6个氨基酸(HHHHHH)组成,也有3个和8个的情况。
His融合标签与其他标签相比有很多明显优势,是目前用于纯化的融合标签中使用最为广泛的一种。
His标签融合蛋白一般采用固定化金属离子亲和层析进行分离纯化,操作较为简便。
StrepⅡ-tagStrepⅡ即链霉亲和素结合肽,是一个小分子的短肽标签,由8个氨基酸(WSHPQFEK)组成,可位于融合蛋白的任一位置。
广泛应用于多种目标蛋白在原核表达系统、哺乳动物表达系统等的纯化。
GST-tagGST即谷胱甘肽-S-转移酶,具有解毒作用,可将谷胱甘肽中的硫基转移至含硝基或卤化物的复合物中。
其天然大小为26KD。
近年来,商品化的GST融合蛋白表达体系以及GST标签抗体系统至今仍被广泛应用。
综述RFID技术及其应用领域
综述RFID技术及其应用领域一、本文概述随着信息技术的迅猛发展,无线射频识别(RFID)技术作为一种重要的自动识别技术,正逐渐渗透到各个领域,为现代社会的智能化和便捷化提供了强大的技术支持。
本文旨在全面综述RFID技术的基本原理、发展现状以及广泛的应用领域,以期为相关领域的研究人员和技术人员提供有价值的参考。
本文将对RFID技术的基本概念进行介绍,包括其定义、特点以及与传统识别技术的区别。
在此基础上,文章将详细阐述RFID系统的工作原理,包括标签、阅读器和天线等关键组件的功能及相互作用。
本文将回顾RFID技术的发展历程,分析其技术演进趋势和主要挑战。
通过对比不同时期的RFID技术标准和应用案例,展示该技术在全球范围内的推广和应用情况。
本文将重点介绍RFID技术在各个领域的应用实践。
这些领域包括但不限于物流管理、零售业、医疗卫生、智能交通、动物跟踪以及智能家居等。
通过具体案例分析,揭示RFID技术在实际应用中的优势、挑战及未来发展趋势。
通过本文的综述,我们期望能够为读者提供一个全面、深入的了解RFID技术及其应用领域的机会,并激发更多创新和应用的灵感。
二、RFID技术原理与组成RFID,即无线射频识别,是一种通过无线电信号识别特定目标并读取相关数据的技术。
其基本原理是利用射频信号和其空间耦合、传输特性,实现对静止或移动物品的自动识别。
RFID系统主要由三部分组成:标签(Tag)、阅读器(Reader)和天线(Antenna)。
标签,也被称为射频卡或应答器,通常附着在目标对象上,存储和传输数据。
阅读器,也称为读写器或查询器,负责发送射频信号给标签并接收从标签返回的信号,以此实现对标签的读写操作。
天线则是标签和阅读器之间传输射频信号的媒介。
在RFID系统中,标签和阅读器之间的通信主要基于电磁耦合原理。
当阅读器的天线发射出射频信号时,如果其有效范围内存在标签,标签的天线会接收到这些信号并驱动内部的电子电路进行工作。
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摘要ຫໍສະໝຸດ 融合标签最初是作为一种有效的工具用于纯化重组蛋白质, 近几年的研究表明, 融合标签的作用并不局限于此。本
文综述了融合标签技术的发展及在生命科学研究中的各种应用, 包括重组蛋白质的纯化; 目的蛋白质的检测、 定向固定; 体内 生物事件的可视化; 提高重组蛋白质的产量; 增强重组蛋白质的可溶性及稳定性。 关键词 融合标签,重组蛋白质,定向固定,可视化,可溶性 ZMOJ 文献标识码 9 文章编号 O###N?#$O (!##$) #"N#8!?N#8
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融合标签的分类
融合标签是一个广义的概念, 根据其分子量大
与包被在固相基质上的特异配基结合而使重组蛋白 质得以纯化。融合标签技术的发展最初是为了使重 组蛋白质的纯化更加简便, 这已为大量的实验所证 实。近几年, 随着一些新的融合标签系统的开发, 其 功能也日渐多样化。本文综述了近几年融合标签技 术在生命科学研究中的各种应用, 包括重组蛋白质
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融合标签技术是 !# 世纪末兴起的一种基于报 告基因的重组 4*9 技术, 其主要过程是利用重组 4*9 技术在靶蛋白编码基因的 ?] 端或 8] 端融合某 种标签的编码基因, 通过适宜的宿主来表达重组蛋
[ON8] 白质 , 表达的重组蛋白质可以通过其融合的标签
的纯化, 目的蛋白质的检测和定向固定, 体内生物事 件的可视化, 提高重组蛋白质的产量, 增强重组蛋白 质的可溶性及稳定性。
融合标签技术及其应用
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中图分类号
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