茯苓多糖的提取
关于茯苓多糖提取的研究
浓度（ ｍｇ ／ ｍ ｌ １
图 １ 单糖 标准曲线
标 准 曲线方程 为 ：［ Ａｂ ｓ ］ ４ ９ ０ ＝ ０ ． ０ ｌ ５ ６ ＋０ ． ０ ５ ２ ｌ ×
时 （ ｈ ）
图 ３ 提取 时间对 多糖提取率的影响
－
２２ ２－
中国园艺文摘
● 第 第 ２ 第 ３ 均 平
１ ８ ０ ｌ ７ ０
加入 ９ ０ ％ 乙醇 （ 体积比 ） ２ ０ ０ ｍｌ 进行脱脂 ，回流加热 ３ ｈ，弃去 酒精 。再将茯 苓研磨成 粉 ，调整 温度 （ 水 量 和 温 度按 条件 加 入 ） ，加 水若 干 提 取 。取 出提 取 物 ，抽滤 ，取 滤液 ，即得到水提的茯苓 多糖 ，准确 量
作为正交试验水平因子的考查范 围，详细讨论见 ２ ． ５ 。
入标准 曲线即可求 出所测溶液的糖含量。
２ 结 果 和 分 析
２ ． １ 温 度对 多糖 提 取 率 的影 响
为考察 温度对 茯苓 多糖提取率 的影 响 ，固定 ｐ Ｈ
值 ７ ． ０ ，料液 比 ｌ ： ８ ，提取时 间 ３ ｈ，进行变温试验 。
苓粉末 的 颗粒 大小 ；加快 搅 拌 ，并 适 当增加 浸 提时 间 ；增加溶剂用量 ，提 高固液 比 ，增加提取次数等 。
中国园艺文摘
２ ０ １ ７ 年第８ 期
关于茯苓 多糖提取 的研究
王 洁 ，刘 鑫
（ 成都农业科技职业 学院，四川 成都 ６ １ １ １ ３ ０ ）
摘 要 ： 阐 述 温 度 、 料 液 比 、提 取 用 时 等 对 茯 苓 多 糖提 取 的 影 响 ，经 试 验 分 析 得 到 较 优 茯 苓 多糖 提 取
子。 其 中 ，多糖在有机体内大多以糖肽类 、核糖核酸 、 糖脂 类物 质存在 。通常所 说的 多糖又 可称为 多聚糖 ，
茯苓多糖制备工艺及药理作用研究进展
茯苓多糖制备工艺及药理作用研究进展一、本文概述茯苓，作为一种传统中药材，在中国以及亚洲其他地区的医药体系中具有悠久的历史和广泛的应用。
近年来，随着现代科学技术的进步，茯苓中的活性成分——茯苓多糖，因其独特的药理作用和潜在的医疗价值，受到了广大研究者的关注。
茯苓多糖的制备工艺及其药理作用的研究，不仅有助于深入理解茯苓的药理机制，同时也为开发新型药物或健康产品提供了理论支持和实践指导。
本文旨在全面综述茯苓多糖的制备工艺及其药理作用的研究进展。
我们将详细介绍茯苓多糖的提取分离方法，包括传统的水提法、酶解法以及近年来兴起的微波辅助提取、超声波提取等新型技术。
然后，我们将重点关注茯苓多糖的药理作用，包括其抗氧化、抗炎、抗肿瘤、免疫调节等多方面的生物活性。
我们还将对茯苓多糖在临床应用中的潜力和挑战进行讨论。
通过本文的综述，我们期望能够为读者提供一个全面、深入的了解茯苓多糖的窗口，为其后续的研究和应用提供有益的参考和启示。
二、茯苓多糖的制备工艺茯苓多糖的制备工艺是茯苓多糖研究和应用的关键环节。
随着科技的不断进步，茯苓多糖的提取和纯化技术也在持续发展。
目前，常见的茯苓多糖制备工艺主要包括提取、分离、纯化和鉴定等步骤。
提取是茯苓多糖制备的第一步，常用的提取方法有水提法、醇提法、酶提法等。
其中，水提法由于操作简便、成本低廉而被广泛应用。
通过调整提取温度、时间和料液比等参数，可以优化提取效果，提高茯苓多糖的得率。
分离步骤通常采用离心、沉淀、过滤等方法，去除提取液中的杂质和蛋白质等干扰物质，以获得较为纯净的茯苓多糖。
在这一步骤中，选择合适的分离方法和操作条件，对于保证茯苓多糖的纯度至关重要。
纯化是茯苓多糖制备过程中的关键环节，常用的纯化方法有柱层析、薄层色谱、高效液相色谱等。
这些方法可以根据茯苓多糖的分子量和化学性质，将其与其他杂质进行有效分离，进一步提高茯苓多糖的纯度。
通过化学分析和仪器检测等手段，对纯化后的茯苓多糖进行鉴定，确定其化学结构和分子量等信息。
茯苓多糖提取课程设计
第三章 物料衡算
物料衡算是中药材生产设计计算的基础，计算的准确性至关重要。 物料计算是物料平衡计算，制药工程计算中最为重要的最基础的内容之 一，是进行药物生产工艺设计物料查找过程经济评估以及过程最优化的 基础，同时也是设备选型的重要依据。
本课程设计为“年处理260吨茯苓提取工艺提取工段设计”，要求每 批处理的茯苓饮片与水的质量之比为1：20，首先茯苓加水12倍量，浸 泡1小时，煎煮2小时；第二次加水8倍量，煎煮1小时，滤过，放料时间 为70分钟，装料等辅助时间设为40分钟，所以每批提取的时间为6h，每 天设为4班，因为年工作日为300天，所以每批要处理216.67Kg。首先查 得出料系数16.1㎏提取液/㎏药材，冷凝水进口温度25℃，出口温度 45℃；提取液密度1.02g/ml。
（四）超临界流体萃取技术
超临界流体萃取是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对中药有效 成分进行萃取和分离的新型技术。由于本身无毒无腐蚀性, 临界条件适 中，故成为超临界流体萃取法最常用的超临界流体，通常成为超临界流 体萃取法。此方法操作范围广，最常用的操作范围是压力83 MPa，温度 35℃- 80℃；便于调控，选择性好，可通过调控压力和温度, 改变超临 界的密度，从而改变其对物质的溶解能力，有针对性的萃取中药中某些 有效成分；操作温度低，适用于热敏性有效成分的提取；从萃取到分离 可一步完成,萃取后不会残留在萃取物上；而且价廉易得，可循环使 用。
5．溶剂的选择 运用溶剂提取法的关键是选择适当的溶剂。溶剂选择适当,就可以 比较顺利地将需要的成分提取出来。选择溶剂要注意以下三点：(1)溶 剂对有效成分溶解度大，对杂质溶解度小；(2)溶剂不能与中药的活性 成分起化学变化；(3)溶剂要经济、易得、使用安全、易于回收 等。 常见的提取溶剂可分为以下三类:
茯苓多糖的提取技术
茯苓多糖的提取技术作者：周琳来源：《农民致富之友》2013年第22期[中图分类号] S-1 [文献标识码] A [文章编号] 1003-1650 （2013）11-0182-01一、引言茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。
二、材料与方法1.茯苓多糖的提取方法2.均匀设计实验对超声波提取茯苓多糖提取工艺2.1器材及药品茯苓，数控超声波清洗器，紫外分光光度计，电子分析天平。
葡萄糖标准品，苯酚，浓硫酸和铝片等。
2.2.方法2.2.1药材粉碎度的选择参照文献条件，取不同粒度茯苓药材，在乙醇浓度50%，提取温度45℃条件下超声提取20 min，。
实验结果表明，药材粒度为20～60目时，提取时提取率较好。
2.2.2提取次数的选择取20～60目粒度茯苓药材，在2.2.2.1条件下分别提取1，2，3次，结果表明，超声波提取1次后，茯苓多糖即已提取完全。
2.2.3 茯苓提取物中多糖含量的测定方法2.2.3.1 4%苯酚溶液的配制取苯酚100 g，加鋁片0.1 g和碳酸氢钠0.05 g，蒸馏并收集182 ℃馏分，称取4 g，在100 ml容量瓶加水溶解至刻度线，然后放冰箱内冷藏备用。
2.2.3.2制备标准曲线精密称取置五氧化二磷减压干燥器中干燥12 h以上的无水葡萄糖标准品15 mg，置25 ml容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀置室温下（约24℃）备用（浓度为0.6 mg/ml）。
精密量取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，分别置于100 ml容量瓶中，并加水至刻度，摇匀。
精密量取上述各溶液2 ml，置具塞试管中，分别加入4%的苯酚溶液1 ml，混匀后迅速加入浓硫酸7.0 ml，摇匀，并于45℃水浴中保温30 min后取出，置冰水浴中5 min后取出。
然后以第1份为空白对照组，用分光光度计在490 nm的波长处测定其吸收度A，以吸光度（A）为纵坐标，溶液浓度C为横坐标。
茯苓多糖的提取纯化及应用研究进展
四、结论与展望
茯苓多糖作为一种天然的生物活性物质，具有广泛的应用前景。在医药领域 中,茯苓多糖对机体各方面表现出多种生理功能,具重要的药理活性,在临床治疗 及药物开发方面展现出了广阔的前景；在食品领域中,茯苓多糖可以作为食品添 加剂改善食品口感和质地,同时也可以作为生产保健食品的原料；
在化妆品领域中,茯苓多糖具有保湿和抗氧化等作用,可以用于生产化妆品提 高产品的性能。然而,对于如何充分发挥其潜在的药用价值,还需要进行深入的研 究与探讨,在实际应用过程中也需要不断进行工艺优化以提高产品的质量和产量, 使茯苓这一传统中药中的有效成分更好地服务于人类健康和生活。
3、超声波辅助法
超声波辅助法是一种利用超声波的振动作用加速茯苓中多糖成分的释放的方 法。该方法具有操作简单、提取时间短、提取效率高等优点。在超声波的作用下， 茯苓组织的细胞壁被破坏，多糖成分更容易释放出来。同时，超声波的振动作用 还可以加速溶剂的渗透和扩散，进一步提高了提取效率。然而，超声波辅助法也 存在一些缺点，如超声波的噪音较大、对设备的要求较高等。
二、茯苓多糖的提取纯化方法
1、溶剂提取法
溶剂提取法是提取茯苓多糖的常用方法之一。该方法主要是利用多糖在不同 溶剂中的溶解度不同，将多糖从茯苓中分离出来。常用的溶剂包括水、醇类和酮 类等。其中，水是常用的提取溶剂，因为多糖在水中的溶解度较大。然而，水提 取法也存在一些缺点，如提取时间长、需要大量的水等。因此，一些研究人员尝 试使用其他溶剂进行提取，如醇类和酮类等。
多糖纯化技术
多糖的纯化技术主要包括沉淀法、色谱法、电泳法和膜分离法等。其中，沉 淀法操作简单，但纯化效果较差；色谱法能够实现高效分离，但成本较高；电泳 法能够分离出具有电泳活性的多糖，但不适用于大规模生产；膜分离法能够实现 分子级别的分离，但膜的制备和清洗成本较高。近年来，一些新的纯化技术，如 亲和色谱法、免疫分离法和纳米膜分离法等也逐渐应用于多糖的纯化。
茯苓多糖的提取及含量测定
李 俊 韩向晖 李仲洪 王振亚 王 硕 兰州
甘肃中医学院
摘要 目的 建立茯苓多糖的含量测定方法 ∀ 方法 用水提醇沉法提取茯苓多糖 酚2硫酸法紫外分光光度法测定茯
苓多糖的含量 ∀ 结果 Κ ¬
平均回收率为
快速 准确 重现性好 便于实际应用 ∀
ΡΣ∆ 为
线性范围为 ∗ Λ ∀结论 该方法
加水溶解并定容至
量瓶中 过滤 滤液备
用 即得 ∀
2 提取 !精制
2 1 提取
准确称取茯苓
切成碎片 加入 ∗ 倍量的
水 回流提取 次 时间分别是 和 ∀ 合并 次提
李俊 女 ∀ 年毕业于兰州大学化学系 讲师 ##
取液滤过 除去不溶性杂质 得
滤液 ∀取
减压蒸馏浓缩成
在搅拌下加入乙醇 使含醇量达
到
静置 离心 收集沉淀 加蒸馏水
3 2 2 浓硫酸用量的选择 量取葡萄糖对照品
加苯酚
浓硫酸用量为
和
其它条件如
项下 测得吸收度 分别
为
和
当浓硫
酸用量为
时吸收度最大 ∀
3 2 3 反应时间的选择 加 苯酚溶液
酸
其它条件如
项 时间为
浓硫
和
测得吸收度 分别为
和
∀ 吸收度 在
后变化不明显 并
在
内保持稳定 因此反应时间选择
∀
3 2 4 反应温度的选择 取 支试管 实验步骤同
ΑΒΣΤ Ρ ΑΧΤ ΟΒϑΕΧΤΙς Ε : ×
≥
ΜΕΤ ΗΟ∆ : ×
∂
√
√
∏
ΚΕΨ Ω ΟΡ ∆Σ ∂
∏ ∏
ΡΣ∆
¬
∗Λ
茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展
茯苓多糖的提取、结构及药理作用研究进展一、本文概述茯苓，作为一种具有悠久药用历史的中药材，其在中医药领域的应用广泛而深入。
茯苓多糖作为茯苓的主要活性成分之一，近年来受到了越来越多的关注。
本文旨在全面综述茯苓多糖的提取方法、化学结构以及药理作用的研究进展，以期为茯苓多糖的进一步开发利用提供理论支持和实验依据。
本文将概述茯苓多糖的提取方法，包括传统的水提法、醇提法以及现代的微波辅助提取、酶解法等，并分析各种方法的优缺点。
本文将详细介绍茯苓多糖的化学结构特征，包括其分子量、单糖组成、糖苷键类型等，以及近年来在结构解析方面取得的新进展。
本文将重点综述茯苓多糖的药理作用，如免疫调节、抗肿瘤、抗氧化、降血糖等，并探讨其可能的作用机制。
通过本文的综述，期望能够为茯苓多糖的深入研究和应用提供有益的参考和启示。
二、茯苓多糖的提取方法茯苓多糖的提取方法对于其后续的结构研究和药理作用分析具有重要影响。
近年来，随着科学技术的发展，茯苓多糖的提取方法也在不断地优化和创新。
传统的提取方法主要包括水提法、醇提法等。
水提法是以水为溶剂，通过加热煮沸使茯苓中的多糖成分溶解于水中，然后通过浓缩、干燥等步骤得到多糖提取物。
这种方法操作简单，成本低廉，但提取效率较低，且易受到其他水溶性杂质的干扰。
醇提法则是利用醇类溶剂对多糖的溶解性进行提取，常用的溶剂有乙醇、甲醇等。
醇提法相对于水提法，提取效率较高，但成本也相应增加，且需要注意溶剂残留的问题。
随着现代提取技术的发展，出现了许多新型的提取方法，如超声波提取法、微波提取法、超临界流体提取法等。
超声波提取法利用超声波的空化作用、机械振动和热效应等，使茯苓细胞壁破裂，多糖成分更易溶出。
这种方法提取时间短，效率高，但设备成本较高。
微波提取法则是利用微波对物质分子的热效应和非热效应，使茯苓中的多糖成分快速溶出。
微波提取法具有提取速度快、提取效率高、节能环保等优点，但需要注意微波功率和时间的控制。
茯苓多糖的提取
茯苓多糖的提取技术作者：周琳班级：食品0931班【摘要】茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。
为进一步优化茯苓多糖的提取工艺，促进其开发应用，文章参考大量国内外文献，对近几年茯苓多糖的提取及其应用作一综述。
【关键词】茯苓多糖，提取，超声波法1.引言自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖(zymosan)具有免疫增强以及抗肿瘤作用以来，人们对多糖的研究产生了极大的兴趣，尤其是其生物活性方面的研究。
茯苓多糖到底是什么呢？它有什么作用呢？茯苓多糖是近年来研究较多的一种真菌多糖，来源于多孔菌科真菌茯苓的菌核，约占整个茯苓菌核干重的70%～90%［1］，其化学组成为（1→3）-β-D- 葡聚糖［2］。
茯Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核，在我国资源丰富，全国各地均自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖具有免疫增强以及抗肿瘤作用以有栽培，主产于云南、安徽、湖南等省。
茯苓是一味使用历史悠久的中药，在《神农本草经》中被列为上品，谓其“主胸胁逆气，利小便，久服安魂宁神，不饥延年。
”《本草纲目》也记载：茯苓“治头风虚眩，暖腰膝，主五劳七伤。
”历代医家均肯定茯苓既有滋补强身作用，又有渗湿利水、益脾和胃、宁心安神之功。
茯苓药性缓和，补而不峻，利而不猛，既能扶正，又可祛邪，能治疗脾胃虚弱、遗精早泄、心悸失眠、健忘多梦、小便不利、呕吐腹泻等症。
其主要有效成分茯苓多糖是一种非特异性免疫促进剂，其不仅能够提高机体的抗病能力，还有较强的抗癌作用。
其性味甘、淡、平，归脾胃肺肾经，有利水渗湿、益脾宁心之功效。
主治气虚劳伤、水肿、痰饮、呕吐、腹泻、热淋、遗精、惊悸、健忘等证。
茯苓多糖是茯苓的有效部位之一，为灰白色粉末，味微咸，无臭，略有吸湿性。
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茯苓多糖的提取技术作者：周琳班级：食品0931班【摘要】茯苓多糖为我国传统中药茯苓的主要有效成分，具有抗肿瘤、抗病毒、增强机体免疫力、抗氧化、降血糖血脂、保肝、催眠等作用，可用于医疗、保健等领域，具有广阔的开发应用前景。
为进一步优化茯苓多糖的提取工艺，促进其开发应用，文章参考大量国内外文献，对近几年茯苓多糖的提取及其应用作一综述。
【关键词】茯苓多糖，提取，超声波法1.引言自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖(zymosan)具有免疫增强以及抗肿瘤作用以来，人们对多糖的研究产生了极大的兴趣，尤其是其生物活性方面的研究。
茯苓多糖到底是什么呢？它有什么作用呢？茯苓多糖是近年来研究较多的一种真菌多糖，来源于多孔菌科真菌茯苓的菌核，约占整个茯苓菌核干重的70%～90%［1］，其化学组成为（1→3）-β-D- 葡聚糖［2］。
茯Poria cocos (Schw.) Wolf又称茯菟、茯灵、松薯等, 为多孔菌科(Polyporaceae) 真菌茯苓的干燥菌核，在我国资源丰富，全国各地均自从20世纪60年代研究发现酵母细胞壁多糖具有免疫增强以及抗肿瘤作用以有栽培，主产于云南、安徽、湖南等省。
茯苓是一味使用历史悠久的中药，在《神农本草经》中被列为上品，谓其“主胸胁逆气，利小便，久服安魂宁神，不饥延年。
”《本草纲目》也记载：茯苓“治头风虚眩，暖腰膝，主五劳七伤。
”历代医家均肯定茯苓既有滋补强身作用，又有渗湿利水、益脾和胃、宁心安神之功。
茯苓药性缓和，补而不峻，利而不猛，既能扶正，又可祛邪，能治疗脾胃虚弱、遗精早泄、心悸失眠、健忘多梦、小便不利、呕吐腹泻等症。
其主要有效成分茯苓多糖是一种非特异性免疫促进剂，其不仅能够提高机体的抗病能力，还有较强的抗癌作用。
其性味甘、淡、平，归脾胃肺肾经，有利水渗湿、益脾宁心之功效。
主治气虚劳伤、水肿、痰饮、呕吐、腹泻、热淋、遗精、惊悸、健忘等证。
茯苓多糖是茯苓的有效部位之一，为灰白色粉末，味微咸，无臭，略有吸湿性。
具有抗肿瘤、提高机体免疫力、保肝与催眠、抗衰老、抗单纯疱疹病毒、防石、消石、抗炎等作用。
可广泛应用于医疗保健、食品等领域。
茯苓多糖可用于抗肿瘤药物的研发，从而为肿瘤、癌症的治疗提供新的方法，还可作为免疫增强剂，用于保健品的开发与研制。
另外，羧甲基茯苓多糖具有水溶性及增稠性，可配制成各种保健食品。
因此，茯苓多糖的提取及开发意义重大为了提高茯苓多糖的提取得率，下面以茯苓多糖为考察指标，进行加热回流和超声波提取茯苓多糖的对比实验。
以茯苓多糖为评价指标，采用正交实验法对茯苓多糖加热回流及超声波提取工艺进行优选，并将两种方法进行比较。
结果两种方法的提取得率有显着性差异(P0.05)。
结果是超声波提取茯苓多糖较优。
为了更好地利用茯苓，提高茯苓多糖的收率，让我们了解食用菌多糖的相关提取技术与作用等。
本文采用了均匀设计法进行茯苓多糖超声提取工艺研究，以筛选茯苓多糖超声提取的最佳工艺条件。
现将茯苓多糖的提取、纯化及应用综述如下。
2．材料与方法茯苓多糖主要存在于茯苓细胞壁中，按照溶解度的不同又分为水溶性茯苓多糖和碱溶性茯苓多糖［3］。
通常采用水提醇沉法、碱提醇沉法提取。
水溶性多糖的提取主要与提取次数、时间、固液比及温度等因素有关。
随着提取次数增多，多糖的浸出率明显增高，但提取次数不易过多，一般为两次，否则，将造成后期工作量增大，提取成本过高。
提取时间延长可提高多糖的浸出率，但浸提时间过长，将造成提取工艺延长。
同时，还有可能增加杂质的溶出，通常选3h。
固液比也影响多糖的浸出，在保证浸出率的前提下，尽可能减少液体体积，以减少浓缩工作量。
多糖的浸出率还与浸提温度有关，随后者的升高而提高，但温度过高可能破坏多糖的结构，一般选择80℃提取。
碱溶性多糖的提取一般在4℃下进行，其影响因素除以上几点外，还与碱浓度有关，常采用0.5mol/L。
在乙醇沉淀步骤中，浸提液浓缩比及乙醇加量是影响茯苓多糖沉淀率的主要因素［4］。
2.1 茯苓多糖的提取方法有2.1.1水提醇沉法称取一定量茯苓粉末→热水浸提→抽滤→滤液减压浓缩(浸提液∶浓缩液=10∶1) →95%乙醇沉淀（含醇量达80%）→于冰箱中静置过夜→离心→沉淀物用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤→真空干燥得茯苓多糖粗品［4］。
该法采用水作为溶剂，具有价廉、无毒、操作安全等优点，其缺点是浸提时间长且提取率较低。
2.1.2稀碱浸提法稀碱法浸提碱溶性茯苓多糖应注意，在提取结束后应迅速用醋酸中和，以免多糖活性受影响［4］。
取一定量茯苓粉末溶于0.5 mol/L稀碱液中， 4℃放置过夜，滤液以10%的醋酸中和至中性，再加入95%乙醇沉淀，以下步骤同水提醇沉法。
该法提取率较水提醇沉法高，但浸提程序较繁琐，浸提条件较剧烈，极易破坏多糖的立体结构，使其生物活性受到限制。
2.1.3 酶+热水浸提法该法通过外加酶降解茯苓的细胞壁，从而促进茯苓多糖的浸出。
通常加入蛋白酶或植物复合酶，后者主要是由纤维素酶、中性蛋白酶、果胶酶等组成的混合酶系。
陈莉［4］采用植物精提复合酶+热水浸提法提取茯苓多糖，在普通热水浸提基础上加入酶解步骤，通过改变酶加入量、酶解温度、酶解时间等因素将茯苓多糖的浸出率提高到热水浸提法的2.32倍。
黄才欢［5］采用有机溶剂预处理一木瓜蛋白酶水解加热水浸提法提取多糖，使得水溶性多糖的提取率明显提高，比常规浸泡水煮法的提取率约高85%。
酶解法可以在较低的温度下提高多糖的提取率，与传统的热水浸提法相比，浸提时间缩短，得率提高，是水溶性茯苓多糖提取的好方法。
2.1.4发酵醇沉法发酵醇沉法提取茯苓多糖包括胞外多糖的提取及胞内多糖的提取，前者将发酵液离心得上清液，浓缩至一定体积，乙醇沉淀，将沉淀物用丙酮、乙醚洗涤，得胞外多糖。
后者包括胞内水溶性多糖及碱溶性多糖的提取。
水溶性多糖的提取:取有机溶剂处理（脱脂）后的茯苓菌丝体粉末采用水提醇沉法进行提取；碱溶性多糖的提取:将上述提取水溶性多糖后的菌丝体滤渣用5倍量0. 5 mol/L 的NaOH浸提，步骤同稀碱浸提法。
液体发酵具有易于操作、节约资源、产率高、周期短、可大规模投入工业生产等优点，已逐渐成为获取茯苓多糖的主要方法［9］。
但研究表明［10］，发酵茯苓菌丝体中总多糖的提取率较天然茯苓低，这可能因为发酵茯苓菌丝体多糖的提取工艺不完善，有待进一步优化，也可能由于发酵茯苓菌丝体中总多糖占总糖的比例低于天然茯苓。
2.1.5微波、超声波辅助提取法微波提取法利用加热导致细胞内的极性物质，尤其是水分子吸收微波能，从而使胞内温度迅速上升，液态水汽化产生的压力将细胞膜和细胞壁冲破，形成微小的孔洞，进而出现裂纹，从而使胞外溶剂容易进入细胞内，溶解并释放出胞内产物［6］。
聂金媛等［7］利用微波辅助法提取茯苓多糖，在微波占空比42%，固液比为1∶50，提取时间18 min条件下，提取率达2.792%，为传统水回流提取法的两倍。
该法具有受热均匀、快速、高效、安全、节能等优点，近年来，普遍应用于多糖的提取。
超声波提取技术也是近年来发展起来的一种提取生物活性物质的方法，具有方便、快速、提取物活性高的特点。
赵声兰等［8］采用超声波法提取茯苓多糖，但提取率不高，最高达到1.6%。
2.2 正交实验法对茯苓多糖加热回流及超声波提取工艺进行优选及两种方法比较。
2.2.1 仪器与药品UV-2550型紫外可见分光光度仪(日本岛津)，超声波清洗器(KQ-100DB型，江苏昆山)，FA1004 电子分析天平(上海良平仪表有限公司)。
茯苓(湖南靖州)，葡萄糖标准品(供含量测定用，批号110833-200503，中国药品生物制品检验所)，苯酚，氢氧化纳，冰乙酸，无水乙醇，丙酮，碳酸氢纳，浓硫酸和铝片等。
2.2.2 方法及结果2.2.2.1 正交实验设计及结果根据茯苓多糖的理化性质，以及大生产中的可行性原则(减少工序，降低成本)，选取提取次数、药品粒度、固液比(提取溶液为0.5%的NAOH溶液)、提取时间为考察因素，进行L9(34)正交实验，以茯苓多糖的含量(用苯酚-硫酸紫外分光光度法测定)为评价指标，优选两种方法的最佳工艺。
2.2.2.2 实验结果分析2.2.2.2.1 加热回流提取茯苓多糖由实验可知，极差中C项最大，D项最小，即该4个因素对用加热回流提取多糖产量的影响程度由大到小为：CABD，表明在加热回流的实验条件下，就茯苓多糖的产率而言，各因素对其影响的主次顺序是：固液比药品粒度提取时间提取次数，而由实验知因素C对用该方法提取茯苓多糖有显着影响，就多糖产率而言所选最适宜的提取工艺条件为：A2B3C2D3。
综合考虑，用加热回流的方法提取茯苓多糖的最佳工艺条件为：药品粒度为40目，提取时间为100 min，固液比为1∶12，提取次数为2次。
2.2.2.2.2 超声提取茯苓多糖根据实验可以知，极差中B项最大，C项最小，即该4个因素对用超声提取茯苓多糖的产量的影响程度由大到小为：BDAC，表明在超声提取该实验条件下，各因素对其影响的主次顺序是：提取时间提取次数药品粒度固液比，由实验知因素B和D对用该方法提取茯苓多糖有极显着的影响，因素A对用该方法提取茯苓多糖有显着影响，就多糖产率而言所选最适宜的提取工艺条件为：A1B2C2D3。
综合考虑：用超声提取茯苓多糖的最佳工艺条件为：药品粒度为20目，提取时间45 min，固液比为1∶10，提取次数为3次。
2.2.2.3 最佳提取工艺验证在加热回流提取最佳条件下(药品粒度40目，提取时间为100 min，固液比为1∶12，提取次数为2次)进行3次重复实验。
结果见表7。
表1 因素水平设计(加热回流法)表2 因素水平设计(超声提取法) 表3 加热回流提取实验结果表4 超声提取实验结果加热回流法方差分析结果表6 超声提取法的方差分析结果加热回流提取茯苓多糖最佳条件验证实验中可看出，加热回流提取茯苓多糖中最佳提取工艺条件具有较好重复性，茯苓多糖的产率较高，说明该最佳提取工艺是合理可靠的。
在超声提取最佳条件下(药品粒度为20目，提取时间45 min，固液比为1：10，提取时间为3次)进行3次重复实验。
超声提取茯苓多糖的最佳工艺条件验证实验中可看出，超声提取茯苓多糖中最佳提取工艺条件具有较好重复性，茯苓多糖的产率较高，说明该最佳工艺条件是合理、可靠的。
2.2.2.4 加热回流提取工艺和超声提取工艺比较对加热回流提取工艺和超声提取工艺的最佳提取工艺进行t检验，得t=5.4121，α=0.05，f=3+3-2=4，t0.05/2 (4)=2.776。
故︱t︱ t0.05/2,即P0.05，所以两种方法提取茯苓多糖有显着性差异。
由实验结果可知，就茯苓多糖的提取得率而言，超声波提取法优于加热回流提取法。
2.3均匀设计实验对超声波提取茯苓多糖提取工艺结果最佳提取工艺条件为：溶剂70%的乙醇，料液比为1∶10，温度25℃，提取20 min。