壳聚糖的制备

壳聚糖的制备

甲壳素是许多甲壳类动物(如虾、蟹)及昆虫等外壳的重要组成成分,同时也存在于菌类的细胞壁中，还可来源于有机酸类，抗生素与酶酿造副产物。甲壳素是一种十分丰富的天然资源，在自然界蕴藏量仅次于纤维素。它不溶于水和酸性介质，甲壳素脱乙酰后形成壳聚糖（CTS）。其溶解性较甲壳素大。它是生物合成的天然高

分子,

葡聚糖,酰度

(

滴定法、热分析法、气相色谱法、元素分析法、紫外光谱一阶导数、苦味酸分光光度法等。常用的有酸碱滴定法、红外光谱法、紫外光谱法、电位滴定法等。

一、壳聚糖的制备

将虾壳去腿去杂质后,流水冲洗,洗净残余的虾肉,于60℃烘箱中烘干，用研钵

磨碎.称取10g虾壳3份,于100mL5%HCl中浸泡4h至无气泡冒出,再补加50mL5%HCl,浸泡2h,除去虾壳中的钙质和无机盐,抽滤用去离子水洗至中性,加100mL10%NaOH于50℃水浴中加热2h,除去蛋白,过滤,用去离子水80℃水浴中反应4h,水洗至中性,抽滤,烘干后得白色粉末状甲壳素分别为2.08,2.00,2,12g，平均产率为20.6%。

二、壳聚糖制备工艺的设计

30%以下,,但是

℃进行

,

,真空干燥,

1.

,可与酸定量反应生成盐,且胺基特别稳定,即使在50%氢氧化钠溶液中，在150℃也不会分解,基于上述特性来测定脱乙酰度。准确称取0.2g样品置于250ml三角烧瓶中,加入0.2mol/L盐酸标准溶液25ml,搅拌0.5～1h完全溶解,以甲基橙作指示剂,0.2mol/L氢氧化钠标准溶液滴定过量的盐酸至终点,另取1份样品于105烘箱中

至恒重,测定样品含水量。

这种方法简单,但由于达到终点时,壳聚糖析出沉淀,使终点判定容易产生误差,尤其在样品摩尔质量较大情况下更是如此,从而导致实验的重复性差。而且样品受溶解度影响较大,有时需加热才能使样品完全溶解,这样使盐酸挥发,测定结果受到影响。但这种方法不需大型仪器,操作简便易行,经常操作,积累一定操作经验,会改

2.

,作

单,,应

3.

,

,

红88与壳聚糖的作用。酸性红88这种带负电荷的染料与壳聚糖大分子上质子化的氨基以1∶1的化学计量形成络和物,此时酸性红88的最大吸收波长为505nm,吸光度达到最低点,可以定量利用这一变色作用。本文用酸性红143,与已知含量壳聚糖作用,测定未知含量壳聚糖。

(1)壳聚糖标准溶液的配制:准确称取0.1504g日本产壳聚糖,溶于

100ml0.1mol/LHCl,准确称取5ml,10ml,15ml,20ml,25ml此溶液,用0.1mol/L的HAC溶

液定容至250ml。

(2)染料标准溶液的配制:称取酸性红0.5g143溶于0.1mol/LHAC溶液中,并稀释至

1000ml。

染料,用

,直线

昂贵,不易得到,且具有选择性；物理降解法虽然对环境没有污染，但降解效率太低。H2O2有很强的氧化性,可以氧化甲壳素主链上的壳素氧化降解法制备低分子量

的甲壳素。

1.利用H2O2制备低分子量分布的壳聚糖

将虾皮用HCl浸泡去除碳酸钙盐;再用稀碱除去蛋白质得甲壳素;然后浓碱在50℃与其反应,并控制反应时间,分别制备出脱乙酰度为85%,93%,99%的壳聚糖,最后用H2O2氧化不同脱乙酰化壳聚糖,得到不同低分子量的壳聚糖。

2．低聚壳聚糖的制备

取样品按壳聚糖∶水=1∶30(质量∶体积)将其分散在水中。在50℃下加热,用滴

2.

,

,

CTS 为例,1。

1测定方法

准确称取105e烘干至恒重的样品013~015g壳聚糖样品,置于250ml三角瓶中,加入011mol/L盐酸标准溶液

30m,l在20e~25e搅拌至溶解完全(若粘度太大可加适量加蒸馏水稀释),加入2~3滴混合指示剂(1%)甲基橙+(1%)苯胺蓝(1B2),用011mol/L氢氧化钠标准溶液滴定游

C1)盐酸标准溶液的浓度,mol/L

C2)氢氧化钠标准溶液的浓度,mol/L

V1)加入的盐酸标准溶液的体积,ml

V2)滴定耗用的氢氧化钠标准溶液的体积,ml

G)样品重,g01016)与1ml1mol/L盐酸溶液相当的氨基量,g9194%)理论氨基含量