临床基础检验学：第二章 血液一般检验
血液一般检验
大红细胞 macrocyte
直径＞ 10μm，中 央染色深 直径＞ 15μm
巨红细胞 megalocyte
细胞大小不 RBC之间直 ①骨髓造血功能紊乱、 ①严重增生性贫血（尤为 径相差1倍 造血调控功能减弱。② 巨幼细胞性贫血）。②人 均 anisocytosis 以上 推片不当 为推片破坏
A
B
C
渐渐增高
精神因素
肾上腺素 RBC
剧烈体力劳动或运动
相对缺氧 Epo RBC
气压降低
缺氧 代偿性RBC
妊娠中后期
血液稀释 RBC
老年人
造血功能减退 RBC
2．病理性变化 （ 1 ）红细胞和血红蛋白量减少：在临床 最常见于各种原因的贫血。 1 ）急性、慢性红细胞丢失过多：如各种 原因的出血。 2）红细胞寿命缩短：如各种原因的溶血 3）造血原料不足 4）骨髓造血功能减退
正常红细胞normal erythrocyte
red cell observed under electric microscope
正常红细胞
正常红细胞
【临床意义】 1.红细胞大小不一 （1） 小红细胞(microcyte)：＜6μ m （ 2 ） 大红细胞 (macrocyte) ：＞ 10μ m 。 常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、 恶性贫血等。 （3） 巨红细胞(megalocyte)：＞15μ m
泪滴形细胞 泪滴样或梨状 teardrop cell/dacro cyte
①RBC含有Heinz小 体或包涵体。②RBC 膜某点粘连拉长。 ③制片不当
骨髓纤维化（多见）、其他 贫血（少见）、骨髓病性贫 血、制片不当（细胞尖指向 相同方向）
临床检验基础试题库
第一章血液一般检验的基本技术㈠单项选择题(A型题)1. 成人静脉采血时，通常采血的部位是(A1型题)"实践技能"A 手背静脉B 肘部静脉C 颈外静脉D 内踝静脉E 股静脉[本题答案]2. 静脉采血时，错误的操作是(A1型题)“实践技能"A 从内向外消毒穿刺部位皮肤B 进针时使针头斜面和针筒刻度向上C 见回血后松开压脉带D 未拔针头而直接将血液打入容器E 如需抗凝应轻轻混匀[本题答案]4. EDTA盐抗凝剂不宜用于(A1型题)“实践技能"A 红细胞计数B 白细胞计数C 血小板计数D 白细胞分类计数E 凝血象检查和血小板功能试验[本题答案]6. 枸橼酸钠的抗凝原理是(A1型题)"基础知识"A 阻止凝血酶的形成B 阻止血小板聚集C 除去球蛋白D 与血液中的钙离子形成螯合物E 除去纤维蛋白原[本题答案]7. 关于抗凝剂，错误的叙述是(A1型题)"专业知识"A EDTA-Na2溶解度大于EDTA-K2B EDTA盐与血浆中钙离子生成螯合物C 肝素作为抗凝血酶Ⅲ的辅因子而抗凝D 枸橼酸钠可用于红细胞沉降率测定E 枸橼酸钠可用于输血保养液[本题答案]8. 对草酸盐抗凝剂，错误的叙述是(A1型题)"基础知识"A 草酸铵可使血细胞膨胀B 双草酸盐可用于血细胞比容测定C 对Ⅴ因子保护差D 过去用于凝血象的检查E 可干扰血浆中钾，钠和氯的测定[本题答案]9. ICSH建议，血细胞计数时首选抗凝剂是(A1型题)"基础知识"A EDTA-K2B EDTAC EDTA-Na2D 肝素E 枸橼酸钠[本题答案]11. 肝素抗凝主要是加强哪种抗凝血酶的作用(A1型题)"基础知识"A 抗凝血酶ⅠB 抗凝血酶ⅡC 抗凝血酶ⅢD 抗凝血酶ⅣE 抗凝血酶Ⅴ[本题答案]13. 关于双草酸盐抗凝剂，错误的说法是(A1型题)"专业知识"A 草酸钾可使红细胞缩小B 草酸铵可使红细胞胀大C 不可用于血细胞比容测定D 过去用于凝血象的测定E 目前应用较少[本题答案]14. 凝血象检查时，抗凝剂最好用(A1型题)"专业知识"A EDTA-K2B 38g/dl枸橼酸钠C 109mmol/L枸橼酸钠D 肝素E 草酸钠[本题答案]16. 关于细胞成分的特性，正确的说法是(A1型题)"基础知识"A 嗜酸性颗粒为酸性物质B 中性颗粒为酸性物质C 细胞核蛋白为碱性物质D Hb为碱性物质E 淋巴细胞浆为嗜酸性物质[本题答案]17. 关于瑞氏染色，错误的说法是(A1型题)"实践技能"A 室温越高，染色时间越短B 染液浓度越高，染色时间越短C 细胞数量越多，染色时间越长D 先倒去染液再用流水冲洗E 用缓慢的流水冲去染液[本题答案]㈢多项选择题(X型题)1. 真空采血的优点是"相关专业知识"A 特别适用于病房和野外流动采血B 可避免对医护人员的感染C 可避免标本间的交叉污染D 可减少溶血现象E 不能有效保护血液有形成分[本题答案] ABCD2. 静脉采血时，导致溶血的原因包括"实践技能"A 注射器和容器不干净B 未取下针头直接用力将血液注入容器C 抽血速度缓慢D 抗凝血混合时用力过猛E 分离血细胞时操作不慎[本题答案] ABDE3. 关于毛细血管采血，正确的说法是"相关专业知识"A 用于需血量少的试验B 切忌用力挤压，否则标本中可混入组织液C 手指血比耳垂血结果恒定D 采血部位皮肤应完整E 进行多项手工法检查时，无需考虑采血顺序[本题答案] ABCD4. 毛细血管采血法的注意事项包括"实践技能"A 采血部位不能有水肿等异常B 采血针刺入深度以4～5mm为宜C 消毒后，一定要待乙醇挥发干后穿刺D 严格按照无菌技术操作E 进行多项手工法检查时，应考虑采血顺序[本题答案] ACDE5. 关于EDTA盐的应用，正确的叙述是"专业知识"A 适合作血小板功能试验B 对红、白细胞形态的影响很小C 对血小板计数影响较小D ICSH建议，血细胞计数用EDTA-Na2作抗凝剂E 适合作凝血象检查[本题答案] BC6. 不宜用肝素作抗凝剂的检查项目是"实践技能"A 红细胞渗透脆性试验B 血细胞比容测定C 临床生化分析D 白细胞分类计数E 血小板凝集功能检查[本题答案] DE7. 枸橼酸钠作为抗凝剂主要用于"专业知识"A 红细胞沉降率测定B 血细胞比容测定C 血液保养液D 血栓与出血检查E 肝功能检查[本题答案] ACD8. 关于肝素，正确的说法有"专业知识"A 可加强抗凝血酶Ⅲ的作用B 有对抗凝血酶的作用C 有阻止血小板聚集的作用D 是红细胞脆性试验理想的抗凝剂E 适合于血液学一般检查[本题答案] ABCD9. 一张良好的血涂片的标准是"实践技能"A 厚薄适宜B 头体尾明显C 细胞分布要均匀D 血膜边缘要整齐E 血膜长度占载玻片长度的3/4左右[本题答案] ABCD10. 可影响手工法计数血细胞的结果是"实践技能"A 吸血快速B 用力挤压C 吸管内有残余酒精D 充液过多E 产生气泡[本题答案] BCDE11. 关于改良Neubauer氏计数板的结构，正确的叙述是"专业知识"A 整个计数池被划成9个大方格B 中央大方格用单线划成25个中方格C 每个中方格用双线划成16个小方格D 每个大方格加上盖玻片后容积为0.1mm3E 每个小方格面积均为1/400mm2[本题答案] AD12. 造成计数室内血细胞分布不均的原因包括"专业知识"A 充液前细胞悬液混匀不充分B 稀释倍数不准C 充液过多D 产生气泡E 充液后盖片被移动[本题答案] ACDE13. 影响血涂片质量的原因是"实践技能"A Hct高于正常B 推片用力不匀C 用未处理的新玻片D 冬天适当延长染色时间E 将刚制成的血膜在空气中挥动，使之迅速干燥[本题答案] ABC14. 不宜用于血细胞形态观察的标本是"实践技能"A EDTA-K2抗凝血B 未经抗凝的新鲜静脉血C 枸橼酸钠抗凝血D 肝素抗凝血E 草酸盐抗凝血[本题答案] DE。
《血液学一般检验》PPT课件
单核细胞绝对值 MO#
血小板计数 PLT 血小板平均体积
MPV 血小板分布宽度
PDW 血小板比容 PCT
h
25
五分类的检测项目
比三分群项目多出： 嗜酸粒细胞百分率 EO 嗜酸粒细胞绝对值 EO# 嗜碱粒细胞百分率 BA 嗜碱粒细胞绝对值 BA# 其余项目与三分群相同
（嗜酸性粒细胞）
增多：寄生虫感染（血吸虫、丝虫）； 过敏性疾病（变应性皮炎、哮喘）；
药物过敏（青霉素、金霉素）； 皮肤病。
h
9
（嗜碱性粒细胞）
增多：慢性粒细胞性白血病；嗜碱性粒 细胞性白血病；过敏性疾病；骨髓纤维 化和某些癌症转移可见嗜碱性粒细胞增 多。
减少：无临床意义。
h
10
（淋巴细胞）
h
2
2.血液的组成
血液分为：血浆和血细胞。 血浆分为：血浆蛋白（纤维蛋白原、清
蛋白、球蛋白）、无机盐（钾、钠、钙、 镁、磷等）、葡萄糖、脂类、激素、维 生素等。
血细胞分为：红细胞、白细胞（中性粒 细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、 淋巴细胞、单核细胞）、血小板。
h
3
3.血液的功能
1) 运输功能 2) 协调功能 3) 维护机体内环境稳定 4) 防御功能
h
6
临床意义 （中性粒细胞）
1) 生理性粒细胞增多：胎儿及新生儿；孕 妇妊娠五个月以上时；剧烈地运动和劳 动；暴热和严寒，白细胞总数常有一过 性增高，复温后恢复正常。
2) 病理性粒细胞增多：急性细菌性感染 （金黄色葡萄球菌、肺炎链球菌）；严 重的组织损伤或大量血细胞破坏（较大 手术后12－36h、急性心肌梗死后1－2h)
h
7
.
急性大出血（在脾破裂后，白细胞迅速增高这 可能与应激状态、内出血而一过性缺氧有关）； 急性中毒（代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒和 化学药物如安眠药、敌敌畏中毒）；肿瘤性或 持续性增多如粒细胞性白血病。
第二章 血液一般检验
第二章血液一般检验通过本章节学习，你将能回答关于“血液一般检验”的下列问题：1．红细胞计数有哪些方法？红细胞显微镜计数法原理如何？红细胞计数参考方法是什么？2．什么是血细胞计数误差？如何减少误差？3．血红蛋白测定有哪些方法？WHO和ICSH推荐何种参考方法？4．简述氰化高铁血红蛋白测定法的实验原理？5．有哪些人为原因可造成红细胞形态异常？6．血细胞比容的离心沉淀测定有哪些方法？其原理如何？其优缺点？7．何谓网织红细胞？ICSH将网织红细胞分为几型？外周血中以哪型网织红细胞为主？8．常见网织红细胞染色方法有几种？网织红细胞活体染色的原理是什么？9．白细胞计数的方法学评价？10．白细胞计数时标本采集的质量保证?11．如何减少白细胞计数的固有误差？12．如何校正有核红细胞对白细胞计数的影响?13．显微镜计数法白细胞计数的质量考核与评价的方法有哪些?14．白细胞分类计数的方法学评价?15．中性粒细胞的核象变化及其临床意义?16．临床常用血栓与止血筛检试验的检查项目有哪些？17．如何评价出血时间测定的临床应用价值？18．PT、APTT测定的质量保证环节及主要临床意义？19．ISI、INR的含义如何？有何主要临床应用？20．如何从PLT、PT和APTT这三项筛检试验获取临床信息？21．何谓ABO血型抗体？IgM型血型抗体和IgG型血型抗体的产生及生物学特性有何不同？22．常用ABO血型鉴定方法有几种？23．如何区分Rh阳性血型和Rh阴性血型？常规鉴定Rh血型的方法是什么？24．为什么对有反复输血史和妊娠史的患者要同时使用酶介质法和抗人球蛋白试验配血？血液一般检验是指血液检验项目中最基础及最常用的检验，主要包括手工或仪器血细胞计数及相关参数测定、血细胞形态学检查、最常用凝血试验、交叉配血等。
随着科学技术的发展，自动化仪器已应用到血液一般检验工作中，使血液一般检验测定快速、项目扩展、参数增多。
因此，血液一般检验能及时、准确、随机、全面反映机体的基本功能状况。
临床检验基础 第二章 血液一般检验 01
【方法学评价】血红蛋白测定方
法大致分为4类（表2-7）。1966年，
ICSH推荐HiCN测定法作为Hb测定的标
准方法。1978年，IFCC和IAP在联合
发表的国际性文件中重申了HiCN法。
HiCN测定法是WHO和ICSH推荐的参考
方法，由于HiCN试剂含有剧毒的氰化钾，各
国均相继研发出不含氰化钾的血红蛋白测定
【质量保证】红细胞形态检查的质量保证见表2-
11，人为原因造成的红细胞形态异常见表2-12。
【临床意义】 1．正常形态红细胞
①正常红细胞呈双凹圆盘形，大小相对均一，平
均直径7.2μm（6.7～7.7μm）。 ②Wrihgt染色后为粉红色或琥珀色，血红蛋白充 盈良好，呈正色素性、向心性淡染。 ③中央部位为生理性淡染区，大小约为细胞直径
叉配血等。由于血液一般检验标本采集容易、
检测便捷，目前仍然是筛检疾病的首要项目。
第一节 红细胞检查
红细胞是血液中数量最多的有形成
分，其主要功能是作为携氧或二氧化碳的
呼吸载体和维持酸碱平衡等。可通过检测
红细胞参数和形态变化对某些疾病进行诊 断或鉴别诊断。
一、红细胞计数
红细胞计数（RBC）与血红蛋白和血细胞比容结 合，常作为诊断贫血、真性红细胞增多症及红细胞增 多的主要指标之一。
其结果也存在一定的差异，这种由于血细胞每
次在计数室内的分布不完全相同所造成的误差，
称为计数域误差或分布误差。
【参考区间】 ①成年：男性 （4.0～5.5） ×1012/L，女性 （3.5～5.0）×1012/L。②新 生儿（6.0～7.0）×1012/L。 医学决定水平：高于6.8×1012/L，应采 取相应治疗措施；低于3.5×1012/L可诊断贫 血；低于1.5×1012/L应考虑输血。
《血液一般检验》课件
血小板计数的 异常可能与多 种疾病有关， 如白血病、再 生障碍性贫血
等
采血：使用采血针或采血器进行采血 离心：将血液离心，分离出红细胞、白细胞、血小板等成分 染色：使用染色剂对血液成分进行染色，以便观察 观察：使用显微镜观察染色后的血液成分，进行血细胞计数和形态学观察
原理：利用自动化仪器进行血 液检测
红细胞计数：反映贫血程 度，判断血液携氧能力
白细胞计数：反映免疫系 统功能，判断感染程度
血小板计数：反映凝血功 能，判断出血风险
血红蛋白：反映贫血程度， 判断血液携氧能力
血型：判断输血安全性， 判断遗传性疾病风险
血沉：反映炎症程度，判 断疾病活动性
避免空腹采血，以免影响检验结果 避免剧烈运动后采血，以免影响检验结果 避免饮酒后采血，以免影响检验结果 避免服用某些药物后采血，以免影响检验结果
血红蛋白测定：评估贫血程度
血液生化检验：包括血糖、血脂、肝功能等 血液免疫学检验：包括抗体、补体等
血型鉴定：ABO血型和Rh血型
血液寄生虫学检验：包括疟疾、丝虫病等
采集血液样本：通过静脉穿刺或指尖采血等方式获取血液样本
血液样本处理：将血液样本进行离心处理，分离出血清和血细胞
血液样本检测：使用血液分析仪对血清和血细胞进行检测，获取各项指标数据
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汇报人：PPT
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定义：血液一般检验是 对血液中的各种成分进 行检测，包括红细胞、 白细胞、血小板等
目的：了解血液状况， 诊断疾病，评估治疗效 果，监测疾病进展，指 导临床治疗
全血细胞计数：包括红细胞、白细胞、血小 板等
第二章 血液一般检验 1
NO.2 质量控制 血涂片染色 2、染色中：
项目
质量控制
时间与浓度 染色过程
pH
染液浓度低，室温低、细胞多、有核细胞多，则染色时间要长；反之，则染色时间要相应短
血涂片应水平放置；染液不能过少，以免蒸发后染料沉淀，不易冲洗掉，使细胞深染或胞中出现大 量碱性颗粒；可用洗耳球轻吹，让染液覆盖全部血膜；加缓冲液后要让缓冲液和染液充分混合，两 者比例为（1-1.5）：1
NO.2 血涂片染色
成分 碱性 酸性物质 中性颗粒 细胞核
红细胞
Wright染色血细胞着色的原理
着色原理
与伊红结合染成红色，该物质称为嗜酸性物质，如血红蛋白及嗜酸性颗粒等
与亚甲蓝结合人染成蓝紫色，该物质称为嗜碱性物质，如淋巴细胞胞质及嗜碱性颗粒等
呈等电状态，与伊红、亚甲蓝均结合，染成淡紫红色，该物质称为嗜中性物质
偏酸或偏碱均可导致染色效果不佳
冲洗染液 脱色与复染
①应用流水将染液冲去，而不能先倒掉染液后在用流水冲洗，以免染料沉着于血涂片上，干扰检查 ②流水不宜太快，水压不宜太高，避免水流垂直冲到血膜上，而导致血膜脱落 ③冲洗时间不宜过长，以免脱色 ④冲洗后的血涂片应立即立于玻片架上，防止血涂片被剩余水分浸泡脱色 ⑤若见血膜上有染料颗粒沉积，用甲醇或Wright染液溶解，但应立即用水冲洗
NO.2 血涂片染色
①准备：血膜干透后，用蜡笔在两端划线，以防止染色时染液 外溢。将血涂片放染色架上。 ②加染液：在涂片上滴加瑞氏染液5～10滴，以染液覆盖整个 血膜为度，稍静置0.5 ～ 1min。 ③加缓冲液：滴加缓冲液5～10滴，与上述染液充分混匀。 ④染色：染色5～10min. ⑤冲洗：不要先倒掉染液，平持血涂片用流水缓缓冲洗干净。 ⑥干燥：直立血涂片，使其自然干燥。
第二章血液一般检验红细胞检验2讲课文档
RBC、Hb临床意义：
• 病理变化------减少：
• 一般成年男性血红蛋白＜120g/L,成年女性血红蛋白＜110g/L，红细胞＜ 3.5 X1012/L为贫血。
• 根据血红蛋白减低的程度贫血可分为四级。
轻度： 90g／L <血红蛋白<120g／L、 中度：血红蛋白60～90g／L、 重度：血红蛋白30～60g／L、 极度：血红蛋白＜30g/L。 当RBC＜1.5×1012/L，Hb＜45g/L时，应考虑输血
在骨髓内粗制滥造；也可能因红细胞脆 性增大，在推片时碎裂所致。
第42页，共84页。
泪滴状 RBC
第43页，共84页。
（3）红细胞内血红蛋白含量改变
①正常色素性normochmic ：
见于：正常人、急性失血、再障等。
②低色素性hypochromic ： 见于：缺铁性贫血、地中海性贫血等。
③高色素性hyperchromic ：
• 见于：巨幼贫、铅中毒。
第52页，共84页。
卡波氏环
第53页，共84页。
④有核红细胞
（nucleated eryhrocyte）
• 幼稚红细胞，病理时出现。
• 见于：
溶血性贫血；
造血系统恶性疾患或骨髓转移性肿瘤；
慢性骨髓增生性疾病； 脾切除后。
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有核红 细胞
第55页，共84页。
第7页，共84页。
（三）. 血红蛋白Hb测定
即测定血液中各种血红蛋白的总浓度。 （xx g/L）
血液中血红蛋白以各种形式存在，包括 氧合血红蛋白、碳氧血红蛋白、高铁血红 蛋白或其他衍生物。
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Hb测定的方法
第二章 血液一般检验 3
NO.2 白细胞分类计数
4、质量控制
标本：
②接触放射线、应用肾上腺皮质素或促肾上腺皮质素、严重化脓感染。
NO.2 白细胞分类计数
6、临床意义 单核细胞的功能 ①吞噬和杀灭功能 ②清除衰老损伤或已死亡的细胞及异物 ③调节免疫反应（抗原提呈） ④抗肿瘤活性
NO.2 白细胞分类计数
6、临床意义
单核细胞增多：健康儿童单核细胞可较成，直径13-15，圆形 ，细胞质着色不清，橘黄色颗粒 、粗大、整齐排列、均匀充满胞 质，细胞核多分2叶，眼睛形，染 色质粗糙，深紫红色。
NO.3 白细胞形态检查
嗜碱性粒细胞，直径10-12微米 ，圆形，细胞质着色不清，紫 黑色颗粒、量少、大小不均、 排列杂乱、可盖于核上。细胞 核因颗粒遮盖而胞核不清晰。 染色质粗糙，深紫红色。
NO.1 白细胞计数
3、方法评价
显微镜计数法：设备简单、费用低廉； 费时、重复性较差；适用于基层医疗单 位和分散检测。
血液分析仪法：操作简便，效率高，重 复性好；仪器较贵，准确性取决于仪器 的性能及工作状态；适合于大批量的标 本集中检测。
NO.1 白细胞计数
4、质量控制
计数域误差：每次充液后血细胞在计数室内分布不可能完全相同所造成的误差 属偶然误差。可通过调整计数白细胞的数量或稀释倍数减小。
④寄生虫：如发现疟原虫等应报告。
⑤红细胞、血小板的形态：如有异常改变应报告。
NO.2 白细胞分类计数
2、血液一般检验
第二节 白细胞检查
白 细 胞 分 类
中性分叶核粒细胞(Nsg) 中性杆状核粒细胞(Nst) 嗜酸性粒细胞(E) 嗜碱性粒细胞(B)
N
粒细胞(GRAN) 白 细 胞
（LEU）
淋巴细胞(L)
单核细胞(M)
粒细胞增殖动力学各阶段
分裂池
1
成熟池、 2 贮存池
1/20
组织 5 固有池
3
4
循环池
（50%）
网织红细胞检测的目的： ①鉴别贫血的类型（增生性、非增生性、 增生增高性）。
②检查骨髓的功能。
③检测贫血的治疗效果。
④评估骨髓移植后、再生障碍性贫血细胞 毒药物诱导治疗后或EPO治疗后的红细胞 造血情况。
【检测原理】 1、普通显微镜法： 活体染料（新亚甲蓝或煌焦油蓝）的 碱性着色基团（+）可与Ret中RNA的磷 酸基（-）结合，形成蓝色的点状、线 状或网状结构。 2、仪器法： 流式细胞仪、Ret计数仪、血液分析仪等
还原血红蛋白（Fe2+）--99% 高铁血红蛋白（Hi）--1% 氧合血红蛋白（HbO2） 碳氧血红蛋白（HbCO，COHb） 硫化血红蛋白（SHb）
【检测原理】
HiCN法：氰化高铁血红蛋白法 在溶血标本中，Hb中的Fe2+被高铁氰化钾氧 化为Fe3+，Hb转化为Hi。Hi与KCN中的氰离 子反应生成HiCN，在540nm处的吸光度与溶 液中的浓度呈正比，根据测得吸光度可求 得Hb的浓度。 WHO和ICSH推荐的参考方法。
注意：
正常RBC可自然退化变性，即使
高质量的正常人血涂片，也可见
到变形或破碎的红细胞，但数量 很少，分布局限。
2、异常红细胞形态 在排除人为因素后，若血涂片中出 现异常形态红细胞且数量较多，往 往提示病理性改变。 常见的异常形态可分为红细胞大小、 形态、血红蛋白含量、结构和排列 异常。
血液一般检验
1．手工法 必须用同一抗凝血标本，且所测定数据必 须准确，不然误差很大。
2．血液分析仪法 必须注意红细胞3个平均指数之间 及与红细胞计数、血红蛋白、血细胞比容测定3个检测 指标之间相互关联性。
3．采取XB分析法或浮动均值法，常应用于血液分析 仪质量控制。MCHC是最为稳定指标；任何一个参数 如有3次>3％，或连续五次有2％～3％变异，即表明仪 器失控。（天天最少有60份标本医院。）
魏氏法：为传统方法，为国内规范方法 .
EDTA或枸橼酸钠抗凝血液标本充分混合后，吸 人魏氏血沉管200mm刻度处，将血沉管垂直室温放 置最少60min，应防止振动、风吹、阳光直射，然后 读取柱中红细胞沉淀上透明血浆层约lmm处结果。
ICSH方法: 参考方法, 用于验证其它方法可靠性。 P39
血液一般检验
属于还未完全成熟红细胞(当嗜碱性物质消耗殆尽后 才被视为成熟红细胞)，普通为8～9.5μm。
血液一般检验
20/84
血液一般检验
21/84
血液一般检验
22/84
[检测原理]
1.普通光学显微镜法 活体染色（新亚甲蓝或煌焦油蓝)碱性着色基团 网织红细胞RNA磷酸基(带负电荷) RNA胶体间负电荷降低而发生凝缩， 蓝色点状、线状或网状结构 ， 显微镜下计数1000个红细胞中所占网织红细胞数，以
血液一般检验
17/84
血液一般检验
18/84
临床意义
贫血分类 正细胞贫血
贫血红细胞形学分类
MCV MCH MCHC 正常 正常 正常
贫血
再生障碍性贫血、 急性失血性贫血 溶血性贫血
大细胞性贫血 增高 增高 正常 单纯小细胞性
各种造血物质缺乏 或利用不良贫血
临床基础检验学血液常规检查课件
检测完的血液标本 经消毒后再集中燃烧。
思考题：
1.血浆与血清有何不同？ 2.采血前应考虑哪些问题？ 3.采血时应注意些什么?
1
第二章
一般血液学检验
主要内容
第一节 外周血液血细胞形态学检验 第二节 红细胞检验 第三节 白细胞检验
2、异常红细胞形态
大小异常 染色异常 形态异常 结构异常
红细胞形态变化
1.红细胞大小不一
〔1〕小红细胞 (microcyte) 指直径小于 6μm的红细胞。出现较多染色过浅的小红 细胞，提示血红蛋白合成障碍，见于缺铁 性贫血。而遗传性球形细胞增多症，其血 红蛋白充盈良好，生理性中心浅染区却消 失。
白或其他衍生物时，呈暗红色、紫黑色。
第一节 血液标本采集和抗凝剂选择
一、血液标本种类 全血：由血细胞和血浆组成，主要用于临床
血液 学检查，如血细胞计数、分类和形态学检 查. 血浆：为全血除去血细胞的局部，适合临床 生化 检查，内分泌激素测定、血栓与止血的检 查。 血清：是离体后的血液自然凝固后析出的液
方法 将肘部静脉上端用压脉带 系紧，使静脉充分暴露，局部消 毒，用注射器刺入取血；
用途 需血量较多或采用全自动血液分析仪测定 时使用； 评价 采集的血量可任意控制,但操作环节多，在 移液及丢弃注射器时可能造成环境污染位同普通法。采血器有套筒
〔2〕大红细胞 (macrocyte )指直径大于10μm的 红细胞。常见于巨幼细胞性贫血，也可见于溶血 性贫血、恶性贫血等。
〔3〕巨红细胞 (megalocyte)指直径大于15μm 的红细胞。最常见于叶酸及维生素B12缺乏所致 的巨幼细胞性贫血。
《诊断学》临床血液学检测 血液一般检测 ppt课件
（4） 红细胞大小不均(amisocytosis)：红细胞大小悬殊， 直径可相差一倍以上。
这种现象见于病理造血，反映骨髓中红细胞系增生 明显旺盛。
ppt课件
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红细胞大小改变
ppt课件
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2、 形态异常
较常见的有： （1） 球形细胞（spherocyte） ： 直径小于6µm，厚度增加大于2.9µm。
中性粒细胞 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 淋巴细胞 单核细胞
杆状核
分叶核
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53
（一）白细胞计数
【参考值】 成人（4～10）×109/L 新生儿（15～20）×109/L 6个月～2岁（11～12）×109/L
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【临床意义】
通常白细胞数高于10x109/L称白细胞增多，低于 4x109/L称白细胞减少。
血红蛋白测定（hemoglobin HB ）
白细胞计数（white blood cell count WBC）及其 分类（differential count DC）
近年来由于血液学分析仪的广泛应用，增加了
红细胞平均值测定；
红细胞形态检测；
血小板计数及平均值测定；
血小板形态检测。
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6
一、红细胞计数和血红蛋白的检测
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1、大小异常
（1）小红细胞（microcyte)：红细胞直径小于6µm。 见于低色素性贫血，如缺铁性贫血。
（2）大红细胞(macrocyte)：直径大于 10µm。 见于溶血性贫血，急性失血性贫血，也可见
于巨幼细胞贫血。
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（3）巨红细胞(megalocyte)：直径大于15µm。
2第二章 血液一般检验 02 血栓与止血、血型
第三十三页，编辑于星期一：一点 二十六分。
【检测原理】DD检测原理见表2-77-1。 【方法学评价】与FDP测定相同。
【质量保证】DD检测的质量保证见表2-
77-2。
第三十四页，编辑于星期一：一点 二十六分。
第三十五页，编辑于星期一：一点 二十六分。
第三十六页，编辑于星期一：一点 二十六分。
第四节 血栓与止血一般检查
血液凝固是由凝血因子按一定顺序相继激活而生成凝 血酶，最终使纤维蛋白原变为纤维蛋白的过程。在生理情 况下，人体的凝血、抗凝血与纤维蛋白溶解（纤溶）系统
相互作用、相互制约，并受神经-体液的调节，使血液既不
溢出血管壁而出血，也不在血管内发生凝固而导致血栓形 成。但在病理情况下，凝血功能亢进、抗凝血或纤溶功能 降低，可引起血栓前状态或血栓形成；反之，则可导致低 凝状态或出血。
长。
2．TT缩短 一般无临床意义。
第二十七页，编辑于星期一：一点 二十六分。
（六）纤维蛋白（原）降解产物
纤维蛋白原、可溶性纤维蛋白、纤维蛋白多聚体和 交联纤维蛋白均可被纤溶酶降解，生成纤维蛋白（原） 降解产物（FDP）。血液FDP浓度增高是体内纤溶亢进的 标志，但不能鉴别原发性纤溶亢进与继发性纤溶亢进。 FDP中X、Y、D和E等片段具有纤维蛋白原的抗原决定 簇，用其免疫动物可获得抗FDP抗体。因此，通过免疫 学方法可检测血浆FDP浓度。
第十二页，编辑于星期一：一点 二十六分。
（2）PT结果审核与复查：应该结合标本质量和临床诊
断等对结果作出综合判断后，才能发出正确的检验报告。重 视异常结果的复查，必要时重新采集标本进行复查，并加强 与临床沟通，及时掌握反馈信息。
【参考区间】每个实验室必须建立相应的参考区间 。①PT：成人11～13s，超过正常对照值3s为异常。② INR：因ISI不同而异。③PTR：成人0.85～1.15。④ PTA：70％～130％。
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静置5
Hb(g/L)＝ A × 64458(mg)× 251 = A × 367.7
44
1000
A：540nm处标本吸光度。 44：HiCN在光径1.0cm、540nm条件下的毫摩尔消光系
数（Lmmol-1cm-1）。 64458（mg）：Hb的毫克分子量，即1mmol/LHb溶液
中的Hb毫克数。 1000：将mg转变为g。 251：血液稀释倍数。
参考方法、操作简单、试剂KCN有剧毒、高 反应快、可检测除 WBC/高球蛋白血症标
SHb外的所有Hb、产 本可致混浊、对HbCO 物稳定，便于质控 的反应慢、不能测定
SHb
十二烷基硫酸 钠血红蛋白 （SDS-Hb）测 定法
次选方法、操作简便、SDS质量差异大、消光
呈色稳定，结果准确 系数未定、SDS易破坏
N2、CO2
在含有苯肼和硫化氢的环境中， HbO2 转变为SHb SHb也见于服用阿司匹林或可待因的患者
(一) 检测原理
表 血红蛋白测定方法及基本原理
测定方法
测定原理
全血铁法
Hb分子组成
比重法、折射仪法 血液物理特性
血气分析法 比色法
Hb与O2可逆性结合的特性 Hb与衍生物光谱特点
临床常用
HiCN测定法是WHO和ICSH推荐的参考方法
第二章 血液一般检验
第一节 红细胞检查
一、红细胞计数 二、血红蛋白测定 三、血细胞比容测定 四、红细胞平均指数计算 五、网织红细胞计数 六、红细胞沉降率测定
七、红细胞形态检查
要求
掌握： （1）HiCN、HCT、红细胞平均指数、RET、ESR的检 测原理 熟悉： （1）HiCN 、HCT、红细胞平均指数、RET、ESR的方 法学评价、质量保证、临床意义 （2）HGB结构及SDS-Hb测定 （3）红细胞形态及其临床意义
PLT>700×109/L、HbCO增多(转化）
2.器材及试剂：定期校准分光光度计、比色杯、
微量采血管、刻度吸管、试剂质量（CN-）
3.技术操作：采血、稀释、混匀；HbCO转化
4.废弃物的处理：KCN是剧毒品
(转化液配制、废液处理)
以水1：1稀释废液
1升稀释后的废液 +
35ml 次氯酸钠
严禁在废液中 加入酸性溶液
溴代十六烷基 溶血性强且不破坏WBC，精密度、准确性略低
三甲铵（CTAB）适用于血液分析仪检
测定法
测
各测定法标准应溯源到HiCN量值
表 HiCN转化液成分和评价
转化液 作用
评价
都氏液 文-齐液
① K3Fe(CN)6和KCN ：使Hb形成 反应速度很慢，
稳定的HiCN
15℃时40min才能
②NaHCO3:使高球蛋白血标本 使Hb完全转化为
第一节 红细胞检查
一、红细胞计数 二、血红蛋白测定 三、红细胞形态检查 四、血细胞比容测定 五、红细胞平均指数 六、网织红细胞计数 七、嗜碱性点彩红细胞计数 八、红细胞沉降率测定
二、血红蛋白测定
简介
红细胞的运输蛋白：运输O2和CO2
• １血红蛋白的结构
血红蛋白(hemoglobin,Hb或HGB) 是在人体有核红细胞和网织红细胞内合成的
（2）参考液比色法测定 以参考液Ｈｂ（ｇ／Ｌ）为横坐标，吸光度
为纵坐标，绘出标准曲线
2.十二烷基硫酸钠血红蛋白测定法
以氰化高铁血红蛋白法测得的Ｈｂ浓度为横坐标， 本法测得吸光度为纵坐标，绘出标准曲线
(三)方法学评价 比色法
表 血红蛋白测定的方法学评价
测定方法
优点
缺点
氰化高铁血红 蛋白（HiCN） 测定法
成人时期 ＨｂA ＨｂA２
α2γ2
α2β2 α2δ2
新生儿﹥７０ ％，１岁后﹤ ２％
９０％以上 ２％～３％
• 2 血红蛋白的种类
生 99% Hb的铁呈Fe2+ ： 还原血红蛋白(deoxyhemoglobin；
理
reduced hemoglobin,HHB,Hbred），可与O2可逆
条
结合形成氧合血红蛋白(oxyhemoglobin，HbO2)
一种含色素辅基的结合蛋白质
有 核 红 细 胞
4个血红素
HGB
4条珠蛋白肽链
原卟啉 铁原子(Fe2+)
α类链(2条) 非α类链(2条)
不同时期血红蛋白的种类和肽链组合
时期
胚胎时期
种类
肽链
Ｈｂ Gｏｗｅｒ－１ ζ2ε2 Ｈｂ Gｏｗｅｒ－２ α2ε2 Ｈｂ Pｏｒｔｌａｎｄ ζ2γ2
比例
胎儿时期 ＨｂF
件
下 1% Hb的铁呈Fe3+：高铁血红蛋白(hemiglobin,Hi；
methemoglobin ,MetHb)
血红蛋白衍生物
血红素第六个配位键被CO等占据
碳氧血红蛋白（carboxyhemoglobin, HbCO,COHb ）
CO与Hb结合力比氧高240倍
硫化血红蛋白（sulfmethemoglobin, SHb）
SDS（十二烷基硫酸钠）亲水端与球蛋白結合 立体结构的改变 氧化 : Fe 2+ --> Fe 3+ SDS 疏水端与 Fe 3+ 键结合 --> SDS-Hb （538nm、不含有毒物、脂溶性）
(二) 操作步骤
1.氰化高铁血红蛋白( HiCN )测定法
（1）直接定量测定法
加转化液5ML 采血(20ul)与转化 分钟 测定 计算
的溶血液不浑浊
HiCN
①K3Fe(CN)6和KCN ：使Hb形成 WHO和我国卫生部
稳定的HiCN
推荐使用
②KH2PO4:维持pH在7.2±0.2， 防止高球蛋白浑浊
③非离子型表面活性剂：溶解
RBC、游离Hb，防止溶血液浑浊；
助溶剂
(四)质量控制
1.标本：高脂血症、高球蛋白、WBC>30×109/L、
重复性好
WBC，不适用于同时进
行WBC计数的血液分析
仪、不能测定SHb
测定方法
优点
缺点
碱羟血红蛋白 试剂简易，不含毒性， 575nm波长比色、不便
（AHD575）测 呈色稳定，准确性与 于自动检测、HbF不能
定法
精确性较高
转化
叠氮高铁血红 准确性与精确性较高
蛋白（HiN3) 测定法
试剂仍有毒性（为 ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱiCN的1/7)、HbCO转 化慢（20min）
1.氰化高铁血红蛋白( HiCN )测定法
• 原理
RBC 溶血液 Hb
SHb除外
K3Fe(CN)6
Fe2+→Fe3+
Hi (高铁血红蛋白)
KCN
HiCN (氰化高铁血红蛋白)
最大吸收峰为540nm， 波谷为504nm
2.十二烷基硫酸钠血红蛋白(SDS-Hb）测定法
Fe 2+
SLS
Fe 3+
Fe 3+