dna粗提取的实验步骤
实验05DNA的粗提取与鉴定(原卷版)
专题05DNA 的粗提取与鉴定一、实验原理1．提取DNA的原理利用DNA与RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。
如：(1)DNA在酒精溶液中的溶解性：DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精。
(2)DNA在NaCl溶液中的溶解性：DNA在不同浓度的NaCl溶液中的溶解度不同，它能溶于2 mol/L 的NaCl溶液。
2．鉴定DNA的原理在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂会呈现蓝色。
二、方法步骤1．称取约30 g洋葱，切碎，然后放入研钵中，倒入10 mL研磨液，充分研磨。
2．去除滤液中的杂质方案一在漏斗中垫上纱布，将洋葱研磨液过滤到烧杯中，在4 ℃冰箱中放置几分钟后，再取上清液方案二直接将研磨液倒入塑料离心管中，在1 500 r/min的转速下离心5 min，再取上清液3．DNA方案一在上清液中加入体积相等的、预冷的酒精溶液(体积分数为95%)，静置2～3 min，溶液中出现的白色丝状物就是粗提取的DNA；用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分方案二将溶液倒入塑料离心管中，在10 000 r/min的转速下离心5 min，弃上清液，将管底的沉淀物(粗提取的DNA)晾干4.DNA取两支20 mL的试管，各加入2 mol/L的NaCl溶液5 mL。
将丝状物或沉淀物溶于其中一支试管的NaCl溶液中，再向两支试管中各加入4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，将试管置于沸水中加热5 min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化。
三、操作提示1．以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g柠檬酸钠，防止血液凝固。
2．加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
四、关键点拨1．利用动物细胞提取DNA时，破碎细胞的方法：动物细胞无细胞壁，可直接使其吸水涨破。
2．不能选用哺乳动物成熟的红细胞作为实验材料，原因是哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
生物趣味实验——DNA的粗提取
（二）从唾液中提取自己的DNA 1、取自己的唾液，置于烧杯中，加入几滴洗洁精； 2、倒入一些橙汁，同时往烧杯里撒入一些盐，摇晃 均匀； 3、向滤液中缓缓加入预冷的酒精，并观察现象。
实验步骤
（一）从水果中提取DNA 1、往烧杯中加入20ML清水和3ML洗洁精，少许食盐 （3g左右），将混合液搅拌均匀备用； 2、将香蕉剥皮，放置于封口塑料袋中，倒入配制的混合 液，用手轻轻挤压破坏细胞，使DNA释放出来； 3、倒出香蕉并过滤，取出滤液； 4、向滤液中缓缓加入预冷的酒精，并观察现象。
DNA的粗提取
实验原理
1、水果的细胞里含有DNA，香蕉更易碾碎、不必 削皮，使实验更加简化； 2、食盐里的钠离子和氯离子可以中和DNA上的电 荷，使DNA变形聚集，更易沉淀出来； 3、洗洁精里有表面活性剂，可以破坏细胞膜和核 膜，使DNA释放出来； 4、橙汁里含有蛋白酶，可把和DNA紧密结合的蛋 白质分解，使得到的DNA更纯； 5、DNA可以溶于水但不溶于酒精，在高浓度酒精 下相互吸附形成沉淀。
DNA的粗提取与鉴定(鸡血)
DNA 的粗提取与鉴定一、实验目的：初步掌握DNA 的粗提取和鉴定的方法。
二、实验原理：1．DNA 的溶解性：2．DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性：蛋白酶能水解蛋白质，但对DNA 没有影响。
大多数蛋白质不能忍受60~80℃的高温，而DNA 在80℃以上才会变性。
洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA 没有影响。
3．DNA 的鉴定：（1）DNA+二苯胺→蓝色（沸水浴）（2）DNA+甲基绿→ 绿色三、实验材料：鸡血柠檬酸钠100mL+新鲜鸡血100mL ，离心取沉淀物 鸡血细胞液10mL+蒸馏水50mL （1：5） 2层纱布过滤，取滤液滤液+2mol/L 的NaCl 溶液40mL ，同一方向，缓慢，玻璃棒不能直插底部；2层纱布过滤，取滤液 约470mL 蒸馏水，直至丝状物不再析出圈，同一方向，缓慢，玻璃棒不能直插底部层纱布过滤，取黏稠物 2mol/L 的NaCl 溶液20mL ，过滤，2层纱布，取滤液 ，同一方向，缓慢，玻璃棒不能直插底部冷却的酒精50mL的NaCl 溶液5mL+DNA ，搅拌；再加二苯胺试剂5mL ，沸水浴5-15min 。
五、总结：六、注意事项：1、巧记：1次加冷酒精，2次加蒸馏水；3个NaCl溶液浓度，4次过滤； 5种溶液(柠檬酸钠溶液,酒精溶液,二苯胺试剂,2mol∕L NaCl 溶液,0.015 mol∕L NaCl溶液)；6次搅拌。
2、实验中为减少提取过程中DNA的损失，最好使用塑料的容器。
3、DNA的鉴定中应设计对照实验，以排除NaCl溶液对实验结果的影响。
4、若提取DNA时，玻璃棒不易卷起含DNA的丝状物，可以改用不尖锐的牙签，轻轻将丝状物缠绕其上。
5、若丝状物足够多，还可以增加一个实验：蛋白质+双缩脲试剂→紫色6、析出DNA时，应加蒸馏水的体积：根据M1V1=M2V2，溶液的总体积为V2= M1V1/ M2=约570mL。
DNA的粗提取与鉴定
DNA 的粗提取与鉴定
一、实验原理：
1、析出DNA 的原理：DNA 在NaCL 溶液中的溶解度是随着NaCL 浓度的变化而变化的，当NaCL 的物质的量浓度为0.14mol/L 时，DNA 的溶解度最低，高于或低于这一浓度溶解度都会增高。
如图：
2、提纯DNA 的原理：
DNA 不溶于冷酒精，而细胞中某些物质可溶于冷酒精。
3、鉴定原理：DNA 遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色。
二、方法步骤：
材料准备：常用鸡血细胞液
柠檬酸钠(抗凝剂)+鸡血−−−→静置或离心
血浆(弃去)+鸡血细胞液。
如图：
说明：①柠檬酸钠防止血液凝固。
②弃去上清液，是因为DNA 存在于血细胞中，血浆很少(没有)。
③用鸟类血细胞是因为鸟类成熟红细胞含DNA ，而哺乳动物成熟红细胞不含DNA ，所以不能用。
④本实验还可以用菜花或动物肝脏等作实验材料。
第一次在2中，使DNA与蛋白质分离
①两次加入高浓度NaCL
第二次在5中，DNA再溶解
第一次在1中，使细胞吸水涨破
②两次加入蒸馏水
第二次在3中，降低DNA的溶解度
第一次在1中，取滤液(含核物质)
③三次过滤第二次在4中，取黏稠物质
第三次在6中，取滤液
说明：在第一、三次取滤液时，纱布1—2层，第二次取黏稠物时纱布应多层。
④5次搅拌均要求超一个方向，轻缓，防止DNA断裂。
(二
璃制品表面带电荷，DNA中的磷酸基带相反的电荷，会被吸附于玻璃表面，减少DNA。
DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定
方法步骤：
1.溶解鸡血细胞核内的DNA
取一个125mL烧杯，注入15mL蒸馏水，注入1mL制备好的鸡血细胞液，用玻璃棒沿顺（或逆）时针方向快速搅拌5min，血细胞吸入大量水分而被胀破（搅拌加速破开裂），释放出DNA。
向烧杯中注入20mL 2mol/L的NaCl溶液，用玻璃棒沿顺（或逆）时针方向搅拌1min，混合均匀，DNA溶解。
2.析出含DNA的粘稠物
取150mL蒸馏水，沿烧杯壁缓慢加入，同时，用玻璃棒沿顺（或逆）时针方向缓慢不停地搅拌，大量含DNA的粘稠物逐渐析出，并吸附在玻璃棒周围，此时，溶液中NaCl浓度为0.14mol/L.
3.洗涤粘稠物——提取含杂质较少的DNA
取一个100mL的烧杯，注入25mL 95%酒精（常温），持玻璃棒连同吸附的粘稠物转移到注入酒精的烧杯中，沿顺（或逆）时针方向搅拌1—2min，血色及大部分杂质被洗去，缠绕在玻璃棒上的丝状物，其主要成分是DNA（含杂质较少）。
4.DNA的鉴定
取两只试管，分别加入2mL 0.015mol/L NaCl溶液，1号试管中加入丝状物，用玻璃棒搅拌，混合均匀，两只试管中分别加入2mL二苯胺试剂，振荡，水浴3min，1号试管变深蓝色（说明DNA 的量多），冷却后蓝色略深，2号试管无颜色变化。
注意：操作步骤2中搅拌不能快，以免析出的粘稠物被搅碎，搅拌后难以进行后面的操作。
dna粗提取步骤
DNA粗提取步骤一、目的要求本实验旨在使学生掌握DNA粗提取的基本原理和操作步骤，了解DNA的物理、化学性质以及其在生物科学研究中的应用。
通过实验，要求学生能够独立完成DNA的粗提取，并对实验结果进行分析和解释。
二、实验原理DNA粗提取的原理基于DNA在不同物理和化学环境中的稳定性。
在一定浓度的盐溶液和适当的温度条件下，DNA的溶解度会发生变化，从而实现DNA 的分离和提取。
本实验采用盐析法进行DNA粗提取，具体操作步骤如下：1.细胞破碎：通过物理或化学方法破碎细胞，释放出细胞内的DNA。
常用的破碎方法包括机械破碎（如研磨、匀浆等）、化学破碎（如用酸、碱或酶处理）和冷冻破碎等。
2.去除杂质：通过离心、过滤等方法去除细胞碎片、蛋白质和其他杂质，使DNA充分溶解在溶液中。
3.调节盐浓度：通过调节盐浓度，使DNA在盐溶液中的溶解度发生变化，从而实现DNA的分离和提取。
常用的盐溶液包括氯化钠、氯化钾、氯化钙等。
4.沉淀DNA：通过降低pH值、加入乙醇或异丙醇等方法，使DNA从溶液中沉淀析出。
5.洗涤与干燥：用70%乙醇或无水乙醇洗涤DNA沉淀，去除残留的盐分和杂质，然后干燥得到粗提取的DNA。
三、实验步骤1.准备实验材料与试剂（1）实验材料：鸡血细胞；（2）试剂：氯化钠、柠檬酸钠、蒸馏水、95%乙醇、70%乙醇；（3）仪器与器皿：离心管、离心机、滴管、玻璃棒、烧杯。
2.操作步骤（1）制备鸡血细胞溶液：取适量鸡血细胞，加入等体积的柠檬酸钠溶液，混合均匀后离心，去除上清液，得到鸡血细胞沉淀。
（2）破碎细胞：将鸡血细胞沉淀重新悬浮于适量蒸馏水中，加入适量的玻璃珠或石英砂，搅拌破碎细胞。
也可以采用匀浆、超声破碎等方法破碎细胞。
（3）去除杂质：将破碎后的溶液离心，去除上清液，得到的沉淀物为富含DNA的细胞碎片。
可以进一步用蒸馏水冲洗沉淀物，去除残留的蛋白质和其他杂质。
（4）调节盐浓度：向沉淀物中加入适量的氯化钠溶液，搅拌均匀，使DNA充分溶解在盐溶液中。
dna的粗提取实验报告
dna的粗提取实验报告DNA的粗提取实验报告引言DNA（脱氧核糖核酸）是生物体中负责遗传信息传递的分子，它的提取是进行分子生物学实验的基础步骤之一。
本实验旨在通过简单的方法提取DNA，并观察提取效果。
材料与方法材料：- 植物组织（如洋葱、豆芽等）- 高渗盐溶液（含有盐分的溶液，如食盐溶液）- 咖啡过滤纸- 酒精（酒精浓度为70%）- 水方法：1. 将植物组织切碎，使细胞破裂，释放DNA。
2. 将切碎的植物组织放入一个容器中，加入高渗盐溶液，搅拌均匀。
3. 将搅拌后的溶液过滤，使细胞碎片和其他杂质被滤掉，得到澄清的液体。
4. 将澄清的液体倒入一个试管中，加入等量的酒精，并缓慢倾斜试管，使酒精与液体缓慢混合。
5. 观察酒精与液体的交界面，可以看到白色的DNA沉淀。
6. 使用酒精漂浮在DNA沉淀上方的方法，将DNA转移到另一个容器中。
7. 加入适量的水，溶解DNA。
结果与讨论通过上述方法，我们成功地从植物组织中提取到了DNA。
观察到的白色沉淀物就是DNA，其形状呈线状或颗粒状。
实验过程中，我们注意到以下几个现象：1. 细胞破裂：切碎植物组织的过程中，细胞膜被破坏，使DNA从细胞内释放出来。
这一步骤的重要性在于提供了DNA的来源。
2. 高渗盐溶液：高渗盐溶液的作用是破坏细胞膜和核膜，使DNA从细胞内释放出来。
高渗盐溶液中含有盐分，可以改变细胞内外的渗透压，进而破坏细胞膜和核膜。
3. 过滤：通过过滤，我们可以去除细胞碎片和其他杂质，得到澄清的液体。
这一步骤的目的是减少后续操作中DNA沉淀的杂质。
4. 酒精沉淀：加入酒精后，DNA会从溶液中沉淀出来。
酒精与溶液的混合过程中，DNA会聚集在交界面上形成白色沉淀物。
这是因为DNA在酒精中不溶，而且比较重，所以会沉淀下来。
5. DNA的溶解：将DNA从酒精中转移到水中后，加入适量的水，使DNA溶解。
DNA在水中溶解后，呈现出透明的溶液。
本实验采用的是粗提取方法，所得到的DNA并不纯净。
DNA的粗提取
实验小结 1.共有“三次过滤，两次析出，七次搅拌”
2. 加入“两次蒸馏水， 三次 NaCl 溶液 ，一次酒精”
（二）DNA的鉴定
1. DNA的鉴定的原理
试剂： 二苯胺 条件： 沸水浴 现象： 沸水浴条件下， DNA遇二苯胺被染成蓝色
2. DNA的鉴定
⑴ 向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液5ml
5.滤取含 DNA 的黏稠物
6.将 DNA 的黏稠物再溶解 7.过滤含 DNA 的 NaCl 溶液 8.提取含有杂质较少的DNA 冷却的 95％的酒精 50 mL A:(1)向试管中加入0.015 mol／L 的 NaCl 溶液 5mL (2)加入 DNA 9.DNA 的鉴定 (3)4 mL 二苯胺试剂 B:(1)向试管中加入0.015mol／L 的 NaCl 溶液 5mL (2)4 mL 二苯胺试剂 2 mol／L 的 NaCl 溶液 20 mL
DNA的粗提取
一、提取DNA的原理 ⑴ DNA的溶解性 DNA和蛋白质等成分在不同浓度的NaCl溶 液中溶解度不同
选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，使杂 质沉淀；或让其他成分溶解，DNA析出
⑵ DNA不溶于酒精溶液 DNA不溶于酒精溶液， 但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 将DNA与蛋白质进一步分离。 ⑶ DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性
1.在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯 中加入蒸馏水的作用是( B )。 A.稀释血液、冲洗样品 B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出 C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA
2.提取鸡血中的DNA时，为什么要除去血液 中的上清液?
答：DNA的提取，关键是对杂质的去除，由于 上清液是血液中的血浆部分，不含DNA，所以 要除去上清液(含有蛋白质)。
DNA的粗提取
DNA的粗提取
【活动原理】DNA是长链状分子，很多分子缠绕在一起会形成絮状物，它主要存在于细胞核中。
本实验利用清洁剂破坏细胞膜和核膜，使DNA分子释放出来。
利用酒精和水进行分层，DNA进入酒精层析出，蛋白质和脂类等物质保留在水层中。
【活动目标】
1．参与粗提取DNA的实验活动，体验DNA的数量和分布特征；
2．通过DNA的粗提取，进行基本实验技能的训练。
【材料器具】
香蕉一根（或洋葱、菠菜、椰菜）、食盐、温水、汤匙、搅拌器（或研钵）、清洁剂（或肥皂水）、牙签、纱布、小玻璃广口瓶、外用酒精（75%～90％）。
【方法步骤】
1．将切碎的香蕉（或其他材料）放入搅拌器中，加入一匙食盐和少许温水，安全搅拌5～10s；或者将实验材料置于研钵中研磨，直至呈半流体状（水不能太多）。
2．将搅拌或研磨液用纱布过滤到广口瓶中，滤液量约占广口瓶容积的1/4。
3．将2匙清洁剂加入滤液中，轻轻地摇动广口瓶，但不能使瓶中出现皂液泡沫（要5min以上）。
4．沿广口瓶壁徐徐注入外用酒精，直至瓶内液体接近瓶口。
此时，瓶内底层为香蕉残渣物，上层是酒精液。
静置5min左右，用牙签挑起悬浮在酒精溶液表面的絮状物，这就是DNA的粗提取物。
【讨论】
1. 用不同的材料做实验，要比较哪种材料能提取更多的DNA，你该怎样做？
2. 试用不同的清洁剂做实验，看一看哪种品牌的效果最好。
用洗发水或沐浴露效果如何？
3. 试一试用同一种不同量的清洁剂做实验，看看效果如何？
【思考】
用枯枝落叶做实验材料能否提取到DNA？。
实验2-DNA的粗提取与鉴定s
（5）. DNA的鉴定
向两支试管中分别加入 2mol/L NaCl 溶液2ml
其中一支试管中加入DNA丝状物
各加入二苯胺试剂2ml
混匀后，置于沸水浴中加热5min
待冷却后，比较两只试管中溶液的颜色变化
观察现象：
溶解丝状物的溶液变为蓝色
思考题： 1、研磨的目的是什么，如果研磨不充分，会对 实验结果产生怎样的影响？ 2、研磨液中可能含有哪些成分？ 3、研磨液中SDS和食盐的作用分别是什么？
⑶.过滤：在漏斗中垫上尼龙纱布，将菜花研磨 液过滤到烧杯中(有条件可将滤液倒入塑料离心 管中进行离心，用1000 r/min的转速，离心 2～5 min，取上清液放入烧杯中)。在4 ℃冰 箱中放置几分钟后，再取上清液 ⑷.沉淀：将一倍体积的上清液倒入两倍体积 的体积分数为95％的预冷乙醇溶液中，并用 玻璃棒缓缓、轻轻地搅拌溶液(玻璃棒不要直 插到烧杯底部)。沉淀3～5 min后，可见白色 的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转，将 絮状物缠绕在玻璃棒上
实验2 DNA的粗提取与鉴定
实验原理
1. 研磨液中的变性剂可使细胞破裂，释放 DNA。 2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些 物质则可以溶于酒精溶液。利用这一原理， 可以进一步提取出含杂质较少的DNA。 3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因 此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
以菜花为实验材料进行DNA的粗提取
Байду номын сангаас
1、课前准备
将新鲜菜花和体积分数为95％的乙醇溶液放 入冰箱冷冻室24h。
2、提取DNA的具体步骤
⑴.取材：称取5-10g菜花，去梗取花，切碎。 ⑵.研磨：将碎菜花放入研钵中，倒入2-4mL 研磨液，充分研磨10min。
dna粗提取实验流程
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dna粗提取方法
dna粗提取方法DNA粗提取方法DNA（脱氧核糖核酸）是构成生物体的基因遗传物质，对于研究基因组学、进化学以及疾病诊断等方面具有重要意义。
DNA粗提取是从生物样本中提取出DNA的一种常用方法，本文将介绍DNA粗提取的步骤和相关注意事项。
一、实验前的准备工作在进行DNA粗提取前，需要准备以下实验材料：1. 细胞样本：可以是人体组织、细菌、植物组织等；2. 细胞裂解液：包括裂解液缓冲液和蛋白酶K等；3. 蛋白沉淀剂：如氯化钠、聚乙二醇等；4. 离心管、离心机、超声波仪等实验设备。
二、DNA粗提取步骤1. 细胞裂解：将细胞样本加入细胞裂解液中，通过机械或化学方法使细胞壁破裂，释放出细胞内的DNA。
2. 蛋白沉淀：加入蛋白沉淀剂，与DNA结合的蛋白质会沉淀到底部，形成蛋白质沉淀物。
3. DNA沉淀：将上述混合液离心，离心后，DNA会沉淀到离心管的底部形成DNA沉淀物。
4. 洗涤：将DNA沉淀物用乙醇洗涤，去除杂质。
5. 干燥：将洗涤后的DNA沉淀物在通风处晾干，使其变为干燥的DNA固体。
三、注意事项1. 实验操作过程中应注意无菌操作，避免外源性DNA的污染。
2. 细胞裂解液的选择应根据具体实验目的进行优化，以获得高质量的DNA。
3. 实验过程中应控制温度，避免DNA的降解。
4. 保存提取得到的DNA时，应避免阳光直射，存放在低温干燥的环境中，以防止其降解。
5. 实验操作中应注意个人安全，避免接触有毒物质和腐蚀性液体。
DNA粗提取方法是提取DNA的常用方法之一，它能够快速、高效地从生物样本中提取出DNA，为后续的分子生物学研究提供了重要的基础。
然而，需要注意的是，DNA粗提取方法提取得到的DNA质量较低，适用于一些对DNA纯度要求不高的实验，如PCR反应等。
对于一些对DNA质量要求较高的实验，如测序、限制性酶切等，需要使用更为精细的DNA提取方法。
DNA粗提取是一种常用的DNA提取方法，通过简单的步骤可以从生物样本中提取出DNA。
dna粗提取与鉴定实验步骤
dna粗提取与鉴定实验步骤一、一周知识概述。
1、实验：DNA的粗提取与鉴定的实验目的、实验原理；2、实验：DNA的粗提取与鉴定的实验方法与步骤；3、实验过程中的注意事项。
二、学习重难点。
1、该实验的实验原理。
2、该实验的实验方法和步骤。
三、重难点精析。
（一）实验目的：1、了解生物组织中DNA的存在部位和形式。
2、初步掌握DNA的粗提取和鉴定的方法。
3、观察提取出来的DNA物质。
（二）实验原理：鸟类血液中红细胞有细胞核，细胞核内DNA与蛋白质结合成染色质。
利用DNA在0.14mol/L的氯化钠溶液中溶解度最低，而蛋白质此时的溶解度高的特点，可以使DNA与蛋白质分离，形成沉淀析出，通过过滤，得到粗提取的滤出物DNA。
再利用DNA不溶于酒精，但细胞中的其他物质可溶于酒精的特点，进一步提取出含杂质较少的DNA。
利用DNA遇二苯胺（沸水浴）成蓝色的特性，可以鉴定提取的DNA。
（三）实验材料：鸡血细胞液：先配备10%的柠檬酸钠溶液，按180mL新鲜鸡血混合100mL10%柠檬酸钠溶液的比例，立即将血液与柠檬酸钠充分混合，同时用玻璃棒搅拌以免凝血。
然后，用离心机以2000转/min的速度离心4min后，用吸管除去离心管上清液，就可获得所需的鸡血细胞悬液。
每组大约需要5—10mL鸡血细胞悬液。
如果无离心机，可将与柠檬酸钠充分混合的血液置于冰箱内，静置一天，使血细胞自行沉淀后，也可获得所需的鸡血细胞悬液。
（四）试剂与仪器：1、2mol/L的NaCl溶液。
称取117g的NaCl，加蒸馏水至1000mL，使之完全溶解，即可获得2mol/L 的NaCl，须按此配方配备大量的2mol/L的NaCl。
2、二苯胺试剂。
A液——1.5g二苯胺溶于100mL冰醋酸中，再加1.5mL浓硫酸，用棕色瓶保存。
B液——体积分数为0.2%的乙醛溶液。
实验前，将0.1mL的B液加入到10mL的A液中，现配现用。
3、0.015mol/L的NaCl溶液。
dna的粗提取方法
dna的粗提取方法DNA的粗提取方法DNA是生物体内最基本的遗传物质，对于研究生物学、医学等领域具有重要意义。
因此，DNA的提取方法也成为了科学研究中的一项重要技术。
下面将介绍一种简单易行的DNA粗提取方法。
材料准备1. 10% SDS溶液：称取10克SDS加入100毫升去离子水中，混合均匀后加热至70℃左右，搅拌至SDS完全溶解即可。
2. 0.5M EDTA溶液：称取186.1克EDTA加入500毫升去离子水中，调节pH至8.0。
3. 1M Tris-HCl缓冲液：称取121.14克Tris-HCl加入1000毫升去离子水中，调节pH至8.0。
4. NaCl溶液：称取58.44克NaCl加入1000毫升去离子水中，搅拌均匀后过滤灭菌。
5. 蛋白酶K：用去离子水将蛋白酶K稀释至10mg/ml浓度。
6. 高锰酸钾：用去离子水将高锰酸钾稀释至0.1%浓度。
7. 95%乙醇：用去离子水将95%乙醇稀释至70%浓度。
8. 细胞样品：可以是动物组织、细菌、真菌等样品。
步骤步骤一：制备细胞裂解液1. 取适量的细胞样品，用PBS缓冲液洗涤3次，去除细胞外的杂质。
2. 向含有10% SDS的裂解液中加入适量的蛋白酶K，搅拌均匀后在60℃水浴中孵育2小时。
3. 将孵育后的裂解液加入相同体积的高锰酸钾溶液中，搅拌均匀后再加入相同体积的4M NaCl溶液中，轻轻摇晃混合即可。
步骤二：沉淀DNA1. 将上述混合溶液离心10分钟，收集上清液至新离心管中。
2. 向上清液中滴加等体积的冷乙醇（70%），轻轻摇晃后放置于-20℃冷冻库中保存至少30分钟以上。
3. 将离心管取出，离心10分钟，倒掉上清液，将沉淀用无菌去离子水洗涤3次。
步骤三：纯化DNA1. 将沉淀加入含有0.5M EDTA的去离子水中，搅拌均匀后放置于60℃水浴中孵育30分钟。
2. 在孵育过程中，制备1M Tris-HCl缓冲液，并调节pH至8.0。
3. 孵育结束后，向上述溶液中加入相同体积的1M Tris-HCl缓冲液，轻轻摇晃混合均匀。
dna粗提取实验步骤
dna粗提取实验步骤嘿，朋友们！今天咱来聊聊 DNA 粗提取实验那些事儿。
你想想啊，DNA 可是生命的密码呢，就像一个神秘的宝藏藏在细胞里。
那咱要怎么把它给找出来呢？这就好比要在一个大宝藏库里找到那颗最特别的宝石。
首先呢，得准备好实验材料。
就像要去挖宝藏得先有工具一样，咱得有细胞样本呀，比如洋葱什么的。
把洋葱切碎碎的，就像把宝藏库的大门给打开。
然后呢，往里面加一些特别的溶液。
这就像是给宝藏库洒下一些神奇的粉末，让 DNA 能显现出来。
这时候细胞就会被破坏，DNA 就开始慢慢现身啦。
接着呀，要进行搅拌啦。
这就好像在宝藏库里翻找呀找，把那些有用的东西都搅和在一起。
再来呢，就是过滤啦。
把那些不要的杂质都给过滤掉，就像把宝藏库里的一些石头啊、沙子啊给筛出去，留下我们想要的宝贝。
过滤完了，可别以为就大功告成了哦。
还有很重要的一步呢，那就是沉淀。
让 DNA 慢慢沉淀下来，就像宝藏终于落到了地上，我们可以清楚地看到它啦。
等 DNA 沉淀好了，把上面的液体倒掉，剩下的就是我们辛辛苦苦提取出来的 DNA 啦！是不是很神奇呀？你说这过程像不像一次奇妙的探险？从开始的准备到一步步的操作，每一步都充满了惊喜和期待。
就像你在寻找宝藏的路上，不知道下一刻会发现什么。
做这个实验的时候，可一定要细心哦，就像对待珍贵的宝藏一样。
要是不小心弄错了一步，那可能就找不到我们想要的 DNA 啦。
所以呀，大家一定要认真对待这个实验，感受一下从细胞里找出DNA 这个神秘宝藏的乐趣！怎么样，是不是迫不及待想自己动手试试啦？。
dna粗提取的实验步骤
***实验步骤——以洋葱为实验材料：1、称取30克已切碎的洋葱，放入研钵中，加入少量石英砂助研，倒入10mL 2mol/L 的氯化钠溶液，充分研磨。
洋葱含有挥发性刺激物，有效减少刺激，才能使实验顺利进行。
上课前，教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿，使其凉透但又不能结冰；或将洋葱切成几大块，放入清水泡一会儿，让其挥发性刺激物溶于水，可以减轻刺激。
然后将洋葱切碎备用。
研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂，使DNA溶于2mol/L的氯化钠溶液，没必要将洋葱研成粥糊状，后者既浪费时间又影响实验效果。
研磨时，切忌使用搅拌器（榨汁机）。
使用搅拌器虽可以提高研磨效率，但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒，无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。
只能将酒精直接倒入滤液中，许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来，DNA藏在其中，无法分辨。
学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。
2、研磨后，用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中，得到滤液。
3、向滤液中加入95%的酒精溶液20mL，沿烧杯壁缓缓倒入，不要震动或搅拌。
此时，烧杯中的液体分为上、下两层，下层较浑浊，上层澄清，很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出，用玻璃棒可将其轻轻卷起。
实例: 用鸡血细胞液粗提取DNA 并鉴定步骤1、提取鸡血细将制备好的鸡血细胞液(已在课前配好) 5~10mL，注入到50ml 烧杯中。
向烧杯中加入蒸馏水20mL，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌5min，然后，用放有纱布的漏斗将血细胞过滤至1000mL 的烧杯中，取其滤液。
图示胞的细胞核物质2、溶解细胞核内的DNA 将物质的量浓度为2mol/ L 的NaCl 溶液40 mL 加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min，使其混合均匀，这时DNA 在溶液中呈溶解状态。
3、析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现。
继续加入蒸馏水，溶液中出现的黏稠物会越来越多。
当黏稠物不再增加时停止加入蒸馏水。
dna的粗提取与鉴定实验报告
dna的粗提取与鉴定实验报告DNA 的粗提取与鉴定实验报告一、实验目的1、了解 DNA 粗提取的原理和方法。
2、学习并掌握 DNA 鉴定的基本技术。
二、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度随氯化钠浓度的变化而改变。
在014mol/L 的氯化钠溶液中，DNA 的溶解度最低。
2、 DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质（如蛋白质）则溶于酒精。
3、 DNA 与二苯胺试剂在沸水浴条件下会呈现蓝色反应，从而可以鉴定 DNA 的存在。
三、实验材料和用具1、材料新鲜的鸡血细胞液（抗凝剂处理）2、用具（1）烧杯、玻璃棒、滴管、量筒、离心机、纱布、漏斗、铁架台、酒精灯、石棉网、三角架、火柴。
（2）体积分数为95%的酒精溶液、2mol/L 的氯化钠溶液、蒸馏水、二苯胺试剂。
四、实验步骤1、制备鸡血细胞液将新鲜的鸡血加入抗凝剂，静置一段时间后，离心处理，去除上清液，留下鸡血细胞液。
2、提取细胞核物质向鸡血细胞液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液，搅拌均匀，使血细胞破裂，释放出细胞核物质。
3、溶解 DNA沿烧杯壁缓缓加入蒸馏水，并不断搅拌，直到溶液中氯化钠浓度降至 014mol/L 时，DNA 溶解度最小，此时会有白色丝状物析出。
4、过滤含 DNA 的黏性物用多层纱布过滤上述溶液，滤去杂质，留下含 DNA 的黏性物。
5、进一步提纯 DNA将上述黏性物再溶解于 2mol/L 的氯化钠溶液中，然后过滤，除去不溶的杂质。
6、析出 DNA向滤液中缓缓加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液，并用玻璃棒搅拌，溶液中会出现白色的丝状 DNA。
7、 DNA 的鉴定取两支洁净的试管，分别编号为 1、2。
向 1 号试管中加入 2mol/L的氯化钠溶液 2mL，向 2 号试管中加入 DNA 丝状物和 2mol/L 的氯化钠溶液 2mL。
然后向两支试管中各加入 4mL 二苯胺试剂，混合均匀后，将试管置于沸水浴中加热 5 分钟，观察颜色变化。
dna粗提取的步骤
dna粗提取的步骤
嘿，朋友们！今天咱就来讲讲 DNA 粗提取的那些事儿。
咱先得准备好材料啊，就好像要做饭得先有食材一样。
细胞就是咱要处理的对象，这里面可藏着 DNA 呢。
然后，就是破碎细胞啦。
你可以想象一下，就像打破一个鸡蛋，要把里面的东西放出来。
这一步可得小心点，别太用力把 DNA 也给弄碎啦。
接下来就是关键的一步啦，加盐！为啥加盐呢？这就好比给 DNA 加点调料，让它更容易现身。
盐能让 DNA 聚集起来，变得更明显。
再之后呢，就是离心啦。
这就好像让这些东西在一个旋转的舞台上跳舞，重的就会沉下去，轻的就会浮上来。
DNA 就在这个过程中慢慢显现出来啦。
哎呀，这提取 DNA 不就跟找宝藏似的嘛，得一步步探索，一点点发现。
你想想看，我们平时看不到的 DNA，就藏在那些小小的细胞里，通过这些步骤，就能把它给弄出来，多神奇啊！
有时候我就在想，这 DNA 就像是生命的密码，我们通过这些步骤去解开这个密码，去了解生命的奥秘。
提取出来的 DNA 看着可能不咋起眼，但它里面蕴含的信息可多了去了。
这整个过程，不就像是一场奇妙的冒险嘛！从准备材料开始，每一步都充满了未知和挑战，但也有着发现的乐趣。
所以啊，大家要是有兴趣，真可以自己动手试试，感受一下提取DNA 的神奇过程。
说不定你还能从中发现一些意想不到的东西呢！别犹豫啦，赶紧行动起来吧！。
DNA粗提取和鉴定实验
DNA的粗提取与鉴定实验一、实验原理①DNA主要存在于细胞核②DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的.当NaCl的物质的量浓度为 mol／L时,DNA的溶解度最低.利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出.③DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质可以溶于酒精溶液.利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA.⑷DNA遇二苯胺沸水浴会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂.二、实验材料和用具鸡血细胞液5~10ml；体积分数为95%的冷酒精溶液实验前置于冰箱内冷却24h；蒸馏水；质量浓度为0．１g/ml的柠檬酸纳溶液；质量的浓度分别为2mol/L和0．015mol/L的氯化纳溶液新教材不要求0、015的浓度了,都是用的2mol/L；二苯胺试剂；铁架台；镊子；水浴锅；玻璃棒；滤纸；滴管；量筒100ml,一个；烧杯；1000ml,一个,50ml、100 ml 、500ml 各二个；试管20ml,二个；漏斗；试管夹；纱布.三、课前准备鸡血细胞液取质量浓度为0．1g/ml的柠檬酸纳溶液抗凝剂100ml,置于500ml烧杯中.注入新鲜的鸡血约180ml,同时用玻璃棒搅拌,使血液与柠檬酸纳溶液充分混合,以免凝血.将烧杯中的血液置于冰箱内,精置一天,使血细胞自行沉淀.也可以将血液倒入离心管内,用1000r/min转每分的离心机离心2min,血细胞沉淀于离心管底部.实验时.用吸管除去离心管上部的澄清液,就可以得到鸡血细胞液.四、方法步骤①提取鸡血细胞的细胞核物质将制备好的鸡血细胞液5 mL～10mL,注入到50 mL烧杯中.向烧杯中加入蒸馏水20 mL,同时用玻璃棒充分搅拌5 min,使血细胞加速破裂.然后,用放有1-2层纱布的漏斗将血细胞液过滤至1000mL.取其滤液.②溶解细胞核内的DNA将氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L的溶液40mL加入到滤液中,并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min,使其混合均匀,这时DNA在溶液中呈溶解状态 .③析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水,同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌,这时烧杯中有丝状物出现,注意观察丝状物呈什么颜色.继续加入蒸馏水,溶液中出现的粘稠物会越来越多.当粘稠物不再增加时停止加入蒸馏水这时溶液中氯化钠的物质的量浓度相当于 mol／L经验值：需加约570mL蒸馏水,且分多次加入.将溶液中的DNA与其他杂质分离,这一步骤是实验成败的关键.实验中应该缓慢贴壁加入蒸馏水,并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌,以利于DNA分子的附着和缠绕.④滤取含DNA的粘稠物用放有多层纱布的漏斗,过滤步骤3中的溶液至 500mL的烧杯中,含 DNA的粘稠物被留在纱布上,滤液丢弃.⑤将DNA的粘稠物再溶解取 1个 50 mL烧杯,向烧杯内注入氯化钠的物质的量浓度为 2 mol／L的溶液 20mL.用钝头镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中,用玻璃棒不停地搅拌,约3分钟,使粘稠物尽可能多地溶解于溶液中.⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液取1个100 mL烧杯,用放有两层纱布的漏斗过滤步骤5中的溶液.取其滤液,DNA溶于滤液中.⑦提取含杂质较少的DNA在上述滤过的溶液中,加入等体积的、冷却的、体积分数为 95％的酒精溶液使用冷却的酒精,对DNA的凝集效果较佳,并用玻璃棒搅拌,溶液中会出现含杂质较少的白色丝状物.用玻璃棒将丝状物卷起,并用滤纸吸取上面的水分.这种丝状物的主要成分就是DNA.⑧ DNA的鉴定取两支20 mL的试管,各加入氯化钠的物质的量浓度为0．015 mol／L的溶液5 mL,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解.然后,向两支试管中各加入4mlL的二苯胺试剂.混合均匀后,将试管置于沸水中加热 5 min,待试管冷却后,观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化.五、讨论①两次使用蒸馏水第一次：细胞吸水胀破第一步第二次：使 DNA黏稠物析出第三步②三次过滤第一次： DNA存在于滤液里第一步第二次： DNA被留在纱布上第四步第三次： DNA存在于滤液里第六步过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1－2层③两次析出第一次：用 mol／L 的NaCI溶液含杂质多第三步第二次：用冷却的95％的酒精第七步④六次搅拌：第一、二、三、五、七、八步其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质答：用高盐浓度的溶液溶解DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质.因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质在NaCl溶液浓度低于 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低；在 mol/L 时,DNA溶解度最小；当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大.。
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实验步骤——以洋葱为实验材料：
1、称取30克已切碎的洋葱，放入研钵中，加入少量石英砂助研，倒入10mL 2mol/L的氯化钠溶液，充分研磨。
洋葱含有挥发性刺激物，有效减少刺激，才能使实验顺利进行。
上课前，教师可先将洋葱放入冰箱冷冻一会儿，使其凉透但又不能结冰；或将洋葱切成几大块，放入清水泡一会儿，让其挥发性刺激物溶于水，可以减轻刺激。
然后将洋葱切碎备用。
研磨的目的主要是使洋葱细胞破裂，使DNA溶于2mol/L的氯化钠溶液，没必要将洋葱研成粥糊状，后者既浪费时间又影响实验效果。
研磨时，切忌使用搅拌器（榨汁机）。
使用搅拌器虽可以提高研磨效率，但搅拌器将洋葱切成极细小的颗粒，无法通过过滤将洋葱颗粒剔除。
只能将酒精直接倒入滤液中，许多洋葱小颗粒因为轻会漂浮起来，DNA藏在其中，无法分辨。
学生看不到白色纤维状粘稠物的DNA。
2、研磨后，用漏斗和纱布将汁液过滤到小烧杯中，得到滤液。
3、向滤液中加入95%的酒精溶液20mL，沿烧杯壁缓缓倒入，不要震动或搅拌。
此时，烧杯中的液体分为上、下两层，下层较浑浊，上层澄清，很快上层溶液中就会有白色纤维状粘稠物析出，用玻璃棒可将其轻轻卷起。
实例: 用鸡血细胞液粗提取DNA 并鉴定步骤
1、提取鸡血细将制备好的鸡血细胞液(已在课前配好) 5~10mL，注入到50ml 烧杯中。
向烧杯中加入蒸馏水20mL，同时用玻璃棒沿一个方向快速搅拌5min，然后，用放有纱布的漏斗将血细胞过滤至1000mL 的烧杯中，取其滤液。
图示胞的细胞核物质
2、溶解细胞核内的DNA 将物质的量浓度为2mol/ L 的NaCl 溶液40 mL 加入到滤液中，并用玻璃棒沿一个方向搅拌1min，使其混合均匀，这时DNA 在溶液中呈溶解状态。
3、析出含DNA的粘稠物沿烧杯内壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒沿一个方向不停地轻轻搅拌，这时烧杯中有丝状物出现。
继续加入蒸馏水，溶液中出现的黏稠物会越来越多。
当黏稠物不再增加时停止加入蒸馏水。
4、滤取含DNA的粘稠物用放多层纱布的漏斗，过滤溶液至1000 mL 的烧杯中。
取纱布上的黏稠物。
5、将DNA 的粘稠物再溶解取一个50 mL 烧杯，向烧杯内注入物质的量浓度为2mol/ L 的NaCl 溶液20 mL。
用钝头镊子将纱布上的黏稠物夹至NaCl 溶液中，用玻璃棒沿一个方向不停地搅拌3min，使黏稠物尽可能多地溶解于溶液中。
6、过滤含DNA的氯化钠溶液取一个100 mL 烧杯，用放有两层纱布的漏斗过滤以上溶液。
取其滤液(DNA 溶于滤液中)。
7、提取含杂质较少的DNA 在上述滤过的溶液中，加入冷却的、体积分数为95% 的酒精溶液50 mL(加入时动作要慢)，并用玻璃棒沿一个方向搅拌，溶液中会出现含杂质较少的丝状物。
当玻璃棒上出现丝状物缠绕时，继续慢慢搅拌，至不再增加时，用玻璃棒将丝状物卷起，并用滤纸吸取上面的水分。
取两支20 mL 的试管，各加入物质的量浓度为L 的NaCl 溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。
然后，向两支试管中各加入 4 mL的二苯胺试剂。
混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，等试管冷却后，观察并且比较两支试管中溶液颜色的变化。