一氧化氮检测试剂盒(化学法)
一氧化氮(Nitric oxide ,NO)含量测定试剂盒说明书
货号:QS1804 规格:50管/24样一氧化氮(Nitric oxide,NO)含量测定试剂盒说明书可见分光光度法注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义:NO(Nitric Oxide,NO)广泛分布于生物体内神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中,特别是神经组织中较丰富。
它作为细胞间及细胞内的信息物质,发挥信号传递的作用,是一种新型的生物信使分子,在机体的生理、病理过程中起着重要的作用。
测定原理:NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2—,在酸性条件下,NO2—与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO含量。
为了排除样品色素等的影响,每个样品需做对照管。
自备实验用品及仪器:天平、研钵或匀浆器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成和配制:提取液:液体50mL×1瓶,4℃保存。
试剂一:液体6mL×1瓶,4℃避光保存。
试剂二:液体6mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:液体12mL×1瓶,4℃避光保存。
样品处理:1.组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)为1:5~10的比例(建议称取约0.1g组织,加入1mL提取液)进行冰浴匀浆。
10000g,4℃离心15min,取上清,置冰上待测。
2.细菌、真菌:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为500~1000:1的比例(建议500万细胞加入1mL提取液),冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);然后10000g,4℃,离心15min,取上清置于冰上待测。
3.体液和培养液等其它液态样品:直接测定。
NO含量计算:标准曲线回归方程为:y= 0.016x -0.0103,R2= 0. 99861、组织样品:NO含量定义:25℃时,每克样品或每毫克蛋白15min生成1μmoL NO2—,相当于1μmoL NO。
Elabscience 一氧化氮(NO)比色法测试盒说明书
(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)Elabscience®一氧化氮(NO)比色法测试盒Nitric Oxide (NO) Colorimetric Assay Kit产品货号:E-BC-K035-S产品规格:50 assays(48 samples)/100 assays(96 samples)检测仪器:紫外-可见光分光光度计(550 nm)使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途本试剂盒适用于检测血清、血浆、及动植物组织样本中的NO含量。
检测原理NO在体内或水溶液中极易氧化生成NO2-,与显色剂生成淡红色偶氮化合物(如下图),生成偶氮化合物的浓度与NO的浓度具有线性关系,通过比色可以间接计算NO的浓度。
试剂一和试剂二的作用,为除去样本有色物质的干扰。
本试剂盒检测组织样本时,需测定总蛋白浓度,推荐使用本公司BCA试剂盒(货号E-BC-K318-M)进行测定。
提供试剂和物品说明:试剂严格按上表中的保存条件保存,不同测试盒中的试剂不能混用。
对于体积较少的试剂,使用前请先离心,以免量取不到足够量的试剂。
所需自备物品仪器:紫外-可见光分光光度计(550nm)、涡旋混匀仪、磁力搅拌器、分析天平、微量移液器(1000 μL,200 μL,100 μL,10 μL)、离心机、烧杯(50 mL,25 mL)。
耗材:枪头(1000 μL,200 μL,10 μL)、EP管(5 mL,2 mL)、吸水纸、擦镜纸、磁力搅拌子。
试剂:双蒸水、生理盐水(0.9% NaCl)或PBS(0.01 M,pH 7.4)。
试剂准备①试剂盒中的试剂平衡至室温。
②试剂四工作液:将试剂四加入37.5 mL双蒸水溶解,混匀即可,2-8℃避光保存2个月。
BC5485 一氧化氮(NO)含量检测试剂盒说明书
一氧化氮(NO )含量检测试剂盒说明书(化学法)微量法货号:BC5485 规格:100T/96S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系索莱宝工作人员。
试剂名称 规格 保存条件 提取液 液体110 mL×1瓶2-8℃保存 试剂一 粉剂×1瓶 2-8℃保存 显色液A 液 液体6 mL×1瓶 2-8℃保存 显色液B 液 液体6 mL×1瓶 2-8℃保存 标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制:1、 试剂一:临用前加入6mL 蒸馏水,可50℃助溶,2-8 ℃可保存12周。
冷却至常温使用;2、 显色液:临用前根据样本数量按照显色液A 液:显色液B 液=50μL: 50μL (100μL ,1T )的比例配制显色液,充分混匀,现配现用; 3、 标准品:10μmol/mL 亚硝酸钠。
4、 0.05μmol/mL 标准溶液的配制:取50μL 10μmol/mL 亚硝酸钠,加入950μL 蒸馏水,配制浓度为0.5 μmol/mL ;再取100μL 0.5μmol/mL 亚硝酸钠和950μL 蒸馏水混匀配制成0.05 μmol/mL 的标准溶液备用。
产品说明:一氧化氮(Nitric Oxide ,NO )是一种极不稳定的生物自由基,分子小,结构简单,常温下为气体,微溶于水,具有脂溶性,可快速透过生物膜扩散,作为一种新型的生物信使分子,在细胞间及细胞内发挥传递信号的作用。
其广泛分布于生物体内各组织中,特别是神经组织中。
在机体神经、循环、呼吸、消化、泌尿生殖等系统中也起着十分重要的作用。
NO 在体内或水溶液中极易氧化生成NO 2-。
在酸性条件下,NO 2-与重氮盐磺酸胺生成重氮化合物,进一步与萘基乙烯基二胺偶合,产物在550nm 处有特征吸收峰,测定其吸光值,可以计算NO 含量。
NO NO 2-NO 2- + 4-Aminobenzenesulfonamide Diazonium SaltDiazonium Salt + N-(1-Naphthyl)-Ethylenediamine Red Azo Dyes (550nm)注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
一氧化氮检测试剂盒(化学法)
一氧化氮检测试剂盒(化学法)说明书修订日期:2016.06.22 Cat number:KGT008Store at4℃for for6months,避光For Research Use Only(科研专用)一、实验原理一氧化氮NO(即血管内皮舒张因子),在生物体内作为一种反应性极强的自由基,兼有第二信使和神经递质作用,同时又是一种效应分子,在体内具有广泛的生理作用,如松弛血管平滑肌,抑制血小板聚集,调节血流,介导细胞毒效应和免疫调节,参与学习和记忆、动脉粥样硬化等作用。
NO本身半衰期极短,血液中的NO主要由血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、血小板、巨噬细胞等产生以硝酸盐的形式存在,通过其浓度可以间接测知NO浓度。
NO遇氧及水生成硝酸盐及亚硝酸盐,后二者遇硝酸盐显色剂可生成淡红色偶氮化合物,通过比色可间接测知NO浓度。
二、试剂盒组份组份KGT008(100assays)保存条件Buffer A100mL4℃Buffer B50mL室温或4℃试剂C粉剂一支4℃避光试剂D粉剂一支4℃避光Buffer E12mL室温亚硝酸钠标准液(2mmol/L)1mL4℃注意事项1.试剂C工作液配制:用时加入双蒸水至30mL,4℃避光保存。
(难溶,可以60℃隔水加热至溶解)2.试剂D工作液配制:用时加入双蒸水至12mL,4℃避光保存。
3.显色剂配制:试剂C工作液︰试剂D工作液︰Buffer E=2.5︰1︰1的体积比配制(现配现用),配好的显色剂放冰箱保存,如颜色变得很深则不可再用。
4.亚硝酸钠标准液(20umol/L)配制:将亚硝酸钠标准液(2mmol/L)用双蒸水100倍稀释待用,现用现配。
三、操作步骤1.操作方法:于一次性塑料试管中按下表加入试剂试剂空白管标准管测定管双蒸水(mL)a﹡20μmoL/L亚硝酸钠标准液(mL)a﹡样本(mL)a﹡Buffer A(mL)0.80.80.8Buffer B(mL)0.40.40.4混匀后室温放置10分钟,3500~4000转/分,离心10分钟,取澄清的上清液上清液(mL)0.80.80.8显色剂(mL)0.40.40.4混匀,15分钟后,550nm比色,0.5cm光径比色杯,水调零,测各管OD值注意事项a﹡为取样量=标准品量=蒸馏水量)/()/20()mol/gprot (L gprot L mol OD OD OD OD NO 待测样本蛋白浓度标准管浓度值管-空白管标准管值空白管管测定管含量÷⨯-=μμ样品测试前稀释倍数标准管浓度值管-空白管标准管值空白管管测定管含量⨯⨯-=)/20()mol/L (L mol OD OD OD OD NO μμ四、计算1.计算公式血清:组织:2.计算举例(1)兔血清测定管OD 值为0.018,空白管OD 值为0.004,标准管OD 值为0.024。
碧云天(beyotime)生物产品代理目录价格表(2015年)
生物素3' 末端DNA标记试剂盒 生物素随机引物DNA标记试剂盒 D3308 化学发光法生物素标记核酸检测试剂盒 D3308B 封闭液(D3308专用) D3308W 洗涤液(5X,D3308专用)
产品名称
内切酶 产品编号 D6049 D6053 D6093 D6257 D6329 D6330 D6337 D6389 D6390 D6417 D6449 D6481 D6485 D6489 D6497 D6565 D6566 D6581 D6585 D6593 D6597 D6633 D6713 D6721 修饰酶 产品编号 D7012 D7021 D7027 D7035 D7039 D7051 D7062 D7066 D7069 D7073
1000U DNase I 100U RNase H Terminal Deoxynucleotidyl Transferase 500U 100U T4 Polynucleotide Kinase 500U T4 Polynucleotide Kinase 2000U BeyoRT M-MuLV反转录酶 2000U BeyoRT M-MuLV反转录酶(RNase H-) 产品名称 产品包装 2000U
ApaI BamHI BglII DpnI EcoRI EcoRI EcoRV HindIII HindIII KpnI MluI NcoI NdeI NheI NotI PstI PstI PvuII RsaI SacI SalI SmaI XbaI XhoI
产品名称
DNA末端平滑试剂盒 T4 RNA Ligase BeyoAP Alkaline Phosphatase Klenow Fragment Klenow Fragment,ExoT4 DNA Polymerase SP6 RNA Polymerase T3 RNA Polymerase T7 RNA Polymerase DNase I
一氧化氮检测试剂盒化学法
一氧化氮检测试剂盒(化学法)说明书修订日期:2016.06.22 Cat number:KGT008Store at4℃for for6months,避光For Research Use Only(科研专用)一、实验原理一氧化氮NO(即血管内皮舒张因子),在生物体内作为一种反应性极强的自由基,兼有第二信使和神经递质作用,同时又是一种效应分子,在体内具有广泛的生理作用,如松弛血管平滑肌,抑制血小板聚集,调节血流,介导细胞毒效应和免疫调节,参与学习和记忆、动脉粥样硬化等作用。
NO本身半衰期极短,血液中的NO主要由血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、血小板、巨噬细胞等产生以硝酸盐的形式存在,通过其浓度可以间接测知NO浓度。
NO遇氧及水生成硝酸盐及亚硝酸盐,后二者遇硝酸盐显色剂可生成淡红色偶氮化合物,通过比色可间接测知NO浓度。
二、试剂盒组份组份KGT008(100assays)保存条件Buffer A100mL4℃Buffer B50mL室温或4℃试剂C粉剂一支4℃避光试剂D粉剂一支4℃避光Buffer E12mL室温亚硝酸钠标准液(2mmol/L)1mL4℃注意事项1.试剂C工作液配制:用时加入双蒸水至30mL,4℃避光保存。
(难溶,可以60℃隔水加热至溶解)2.试剂D工作液配制:用时加入双蒸水至12mL,4℃避光保存。
3.显色剂配制:试剂C工作液︰试剂D工作液︰Buffer E=2.5︰1︰1的体积比配制(现配现用),配好的显色剂放冰箱保存,如颜色变得很深则不可再用。
4.亚硝酸钠标准液(20umol/L)配制:将亚硝酸钠标准液(2mmol/L)用双蒸水100倍稀释待用,现用现配。
三、操作步骤1.操作方法:于一次性塑料试管中按下表加入试剂试剂空白管标准管测定管双蒸水(mL)a﹡20μmoL/L亚硝酸钠标准液(mL)a﹡样本(mL)a﹡Buffer A(mL)0.80.80.8Buffer B(mL)0.40.40.4混匀后室温放置10分钟,3500~4000转/分,离心10分钟,取澄清的上清液上清液(mL)0.80.80.8显色剂(mL)0.40.40.4混匀,15分钟后,550nm比色,0.5cm光径比色杯,水调零,测各管OD值注意事项a﹡为取样量=标准品量=蒸馏水量)/()/20()mol/gprot (L gprot L mol OD OD OD OD NO 待测样本蛋白浓度标准管浓度值管-空白管标准管值空白管管测定管含量÷⨯-=μμ样品测试前稀释倍数标准管浓度值管-空白管标准管值空白管管测定管含量⨯⨯-=)/20()mol/L (L mol OD OD OD OD NO μμ四、计算1.计算公式血清:组织:2.计算举例(1)兔血清测定管OD 值为0.018,空白管OD 值为0.004,标准管OD 值为0.024。
南京建成生物工程研究所价目表
南京建成生物工程研究所价目表南京建成生物工程研究所价目表二○○四年七月一、抗氧化检测试剂及科研试剂:(注:**为新试剂盒)序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A001 超氧化物歧化酶(SOD)测试盒100T 盒羟胺法240.00 建成50T 盒羟胺法130.00 建成A003 丙二醛(MDA)测试盒100T 盒TBA法150.00 建成50T 盒TBA法90.00 建成A002 黄嘌呤氧化酶(XOD)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A015 总抗氧化能力(T-AOC)测试盒50T 盒比色法120.00 建成25T 盒比色法70.00 建成A018 羟自由基测试盒50T 盒比色法150.00 建成A052 超氧阴离子自由基(O )测试盒50T 盒比色法130.00 建成A044 髓过氧化物酶(MPO)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A007 过氧化氢酶(CAT)测试盒紫外分光光度法100T 盒紫外比色法100.00 建成可见光分光光度法100T 盒钼酸铵法100.00 建成A064 过氧化氢(H2O2)测试盒50T 盒比色法50.00 建成A004 谷胱甘肽—S转移酶(GSH—ST)测试盒80T 盒比色法200.00 建成A005 谷胱甘肽—过氧化物酶(GSH—PX)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A062 谷胱甘肽-还原酶(GR)测试盒50T 盒比色法200.00 建成A006 还原型谷胱甘肽(GSH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A061 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 测试盒50T 盒比色法180.00 建成A063 巯基(-SH)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A034 单胺氧化酶(MAO)测试盒50T 盒紫外比色法150.00 建成A012一氧化氮(NO)测试盒(硝酸还原酶法) 50T 盒比色法300.00 建成25T 盒比色法180.00 建成A013 一氧化氮(NO)测试盒(化学法测NO2—)100T 盒比色法150.00 建成A014 -1 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[(T-NOS、iNOS、cNOS)三型同时出结果] 50T 盒比色法480.00 建成25T 盒比色法260.00 建成A014-2 一氧化氮合成酶(NOS)测试盒[总NOS(T-NOS)] 50T 盒比色法350.00 建成25T 盒比色法200.00 建成A019-1 乳酸(LD)测试盒(测全血)50T 盒紫外比色法240.00 建成50T 盒可见光比色法240.00 建成A019-2 乳酸(LD)测试盒(测血清、组织)50T 盒比色法200.00 建成A020 乳酸脱氢酶(LDH)测试盒100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法130.00 建成A016-1 A TP酶测试盒(组织及细胞膜需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法240.00 建成50T 盒比色法150.00 建成A016-2 A TP酶测试盒(组织及细胞膜不需高速离心)(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ ATPase) 100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A057 Cu-A TP酶(Cu-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成序号产品名称规格单位检测方法售价厂家A069 氢-钾A TP酶(H+-A TPase)测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A070-1 超微量A TP酶测试盒(可测Na+K+、Ca2+Mg2+ A TPase、总ATPase)200T 盒比色法390.00 建成100T 盒比色法230.00 建成A070-2 超微量A TP酶测试盒(可测总A TPase)100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法180.00 建成A021 苹果酸脱氢酶测试盒50T 盒紫外比色法面议建成A022 琥珀酸脱氢酶测试盒50T 盒比色法240.00 建成A032 肌酸激酶(CK)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A023 胆碱酯酶(CHE)测试盒50T 盒比色法70.00 建成A024 乙酰胆碱酯酶(T-CHE)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A025 丁酰胆碱酯酶测试盒50T 盒比色法150.00 建成A027 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A031 b-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)测试盒50T 盒比色法260.00 建成A053 β-葡萄糖醛酸苷酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A055** 红细胞NADH高铁血红蛋白还原酶测试盒50T 盒比色法260.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A049 前列腺酸性磷酸酶(PACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A058 抗酒石酸酸性磷酸酶(StrACP)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A068 钙调神经磷酸酶(CaN)测试盒25T 盒比色法200.00 建成A072 全血2,3-二磷酸甘油酸(2,3-DPG)测试盒50T 盒比色法面议建成A047 谷氨酰胺合成酶(GS)测试盒50T 盒比色法300.00 建成A048 腺苷脱氨酶(ADA)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A073** 谷氨酰胺测试盒50T 盒比色法200.00 建成A074** 谷氨酸测试盒50T 盒比色法260.00 建成A075** 谷氨酰胺、谷氨酸(两种均可测)50T 盒比色法480.00 建成A076** 丙酮酸激酶(PK)测试盒50T 盒比色法面议建成A077** 己糖激酶(HK)测试盒50T 盒比色法面议建成A036 唾液酸(SA)测试盒(带SA标准) 50T 盒比色法200.00 建成A017-1 细胞凋亡测试盒(TdT酶、稀释液、POD)10片盒TUNEL法1450.00 建成A017-2 细胞凋亡测试盒(TdT介导的原位末端切口平移双标记法)(全套)10片盒TUNEL法1850.00 建成A008 维生素E(VE)测试盒50T 盒比色法130.00 建成A009 维生素C(VC)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A010 维生素B1(V B1)测试盒50T 盒比色法面议建成A011 维生素B2(V B2)测试盒50T 盒比色法面议建成A026 总氨基酸(T—AA)测试盒80T 盒比色法100.00 建成A030-1 羟脯氨酸测试前处理试剂消化液50T 瓶比色法100.00 建成调PH试剂50T 瓶比色法70.00 建成A030-2 羟脯氨酸(Hyp)测试盒(可测血清、培养液、尿液、心肌、皮肤、软骨、肝脏等等)50T 盒比色法180.00 建成A041 5’-核苷酸酶(5’-NT)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A035 D—木糖测试盒50T 盒比色法100.00 建成A056 糖化血红蛋白(GHb)测试盒15T 盒比色法55.00 建成A037 糖化血清蛋白(GSP)测试盒(果糖胺法)(带标准)50T 盒比色法150.00 建成25T 盒比色法80.00 建成A043 肝/肌糖元测试盒50T 盒比色法160.00 建成A038 脂蛋白(a)[LP(a)]测试盒96T 盒ELISA法380.00 建成A054 脂肪酶测试盒50T 盒比色法200.00 建成A067 总脂酶【脂蛋白脂酶(LPL)/肝脂酶(HL)】测试盒100T 盒比色法300.00 建成50T 盒比色法160.00 建成A042 游离脂肪酸(NEFA)测试盒50T 盒比色法160.00 建成A033 脂褐质测试盒50T 盒荧光比色法100.00 建成A039 血清铁测试盒50T 盒比色法100.00 建成A040 总铁结合力(TIBC)测试盒50T 盒比色法180.00 建成A029 铜兰蛋白(CP)测试盒50T 盒比色法150.00 建成A071 微量游离血红蛋白测试盒50T 盒比色法80.00 建成A028 白蛋白测试盒(溴甲酚绿法)100T 盒比色法30.00 建成A045-1 总蛋白定量测试盒(双缩脲法)100T 盒比色法30.00 建成A045-2 总蛋白定量测试盒(考马斯亮兰法)100T 盒比色法30.00 建成A046 蛋白标准品(总蛋白、白蛋白) 1ml 支7.00 建成A050-1 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒试管比浊法60.00 建成A050-2 溶菌酶(LZM)测试盒(带标准)30T 盒平板法60.00 建成A050-3 溶菌酶标准品2mg 支6.00 建成A050-4 微球菌粉30mg 支40.00 建成A065 解脲(溶脲)支原体快速培养基(UU培养基)每人份支培养基10.00 建成A066 人型支原体快速培养基每人份支培养基10.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成二、不孕症系列酶免疫试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家B001 抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗心磷脂抗体测试盒(ACL)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B002 抗精子抗体测试盒(AsAb)IgG类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgA类48T 盒ELISA 160.00 建成抗精子抗体测试盒(AsAb)IgM类48T 盒ELISA 160.00 建成B003 抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗子宫内膜抗体测试盒(EmAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成B004 抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgG类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgA类48T 盒ELISA 260.00 建成抗卵巢抗体测试盒(AoAb)IgM类48T 盒ELISA 260.00 建成三、常用试剂:序号产品名称规格单位检测方法售价厂家C001 钾(K)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C002 钠(Na)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比浊法(手工)35.00 建成C003 氯(Cl)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)45.00 建成30T 盒比色法(手工)28.00 建成C004 钙(Ca)测试盒(带标准)30T 盒比色法(上机)40.00 建成30T 盒比色法(手工)30.00 建成C006 磷(Pi)测试盒(带标准)100T 套孔雀绿显色39.00 建成A059 碱性磷酸酶(AKP)测试盒50T 盒比色法100.00 建成A060 酸性磷酸酶(ACP)测试盒50T 盒比色法130.00 建成C009 谷丙转氨酶(SGPT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C010 谷草转氨酶(SGOT)测试盒100T 盒比色法30.00 建成C018 总胆红素、直接胆红素测试盒80T 套咖啡因比色法65.00 建成80T 套一步法65.00 建成C017 Υ—谷氨酰转移酶(Υ—GT)测试盒100T 套比色法88.00 建成C020 尿胆红素测试盒50T 套哈里森氏法25.00 建成C033 尿胆原测试盒50T 套25.00 建成C013 尿素氮(BUN)测试盒100T 套脲酶比色法36.00 建成100T 套二乙酰-肟比色法27.00 建成C016 淀粉酶(AMS)测试盒100T 套淀粉一碘比色法39.00 建成C012 尿酸测试盒50T 套比色法40.00 建成C011-1 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(除蛋白)60.00 建成C011-2 肌酐(Cr)测试盒(苦味酸法)100T 套比色法(不除蛋白)40.00 建成C021 血红蛋白稀释液(测试液)5ml 支HICN比色法4.50 建成C022 血红蛋白标准品5ml×4支套比色法12.00 建成C023 血红蛋白校正液250ml 瓶比色法35.00 建成100ml 瓶比色法14.00 建成C024 血小板稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C025 白细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C037 红细胞稀释液(计数液)100ml 瓶8.00 建成C026 血细胞仪清洗液250ml 瓶25.00 建成C028 CO2结合力测试盒2ml×3×10 套滴定法40.00 建成C034 脑脊液蛋白测试盒50T 盒磺基水杨酸法50.00 建成C038 血沉测试液100ml 瓶10.00 建成C039 嗜酸粒细胞直接计数液40ml×1 瓶50.00 建成C040 网织红细胞计数液8 ml×2 套试管法30.00 建成10 ml×1 瓶玻片法20.00 建成C035-1 尿蛋白定性测试盒100T 盒磺基水杨酸法30.00 建成C035-2 尿蛋白定量测试盒100T 盒CBB法30.00 建成C041 尿糖试剂100ml 瓶班氏法40.00 建成C027 尿粪隐血测试盒100T 套联苯胺法15.00 建成100T 套邻联甲苯胺法15.00 建成A051-1 肝素溶液10ml 支20.00 建成A051-2 肝素抗凝管10ml 支2.00 建成四、染液类序号产品名称规格单位检测方法售价厂家D001 碱性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D002 酸性磷酸酶染液50片套染色50.00 建成D003-1 酸性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-2 中性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-3 碱性酯酶染液5.0ml×4 盒染色50.00 建成D003-4 双重酯酶染液5.0ml´4 盒染色60.00 建成D009 快速血细胞染液50ml×2 套染色40.00 建成D004 糖元染液10ml×4 盒染色40.00 建成D005 苏木素染液50ml×1 瓶染色40.00 建成D019 伊红染液100ml×1 套染色50.00 建成D006 H-E染液套染色55.00 建成D007 瑞氏染液50ml×2 套染色40.00 建成D010 瑞氏一姬姆萨复合染液50ml×2 套染色40.00 建成D011 姬姆萨染液套染色30.00 建成D015 巴氏染液(脱落细胞染色)套染色50.00 建成D017 快速H-E组织细胞及脱落细胞染液10ml×4 染色20.00 建成D008 革兰氏染液50ml×4 套染色50.00 建成D012 抗酸染液50ml×2 套染色40.00 建成D013 溴酚兰溶液1.0ml 支染色10.00 建成D014 溴乙淀溶液1.0ml 支染色20.00 建成D016 细胞活性鉴别染液20ml 瓶伊文斯蓝法20.00 建成D018 血管通透性测试染液20ml 瓶美蓝法20.00 建成D020** 过氧化物酶染液5ml 套染色20.00 建成五、各种浓度及PH值的缓冲液:(注: 以下缓冲液PH值、摩尔浓度按客户要求配制。
人试剂盒说明书人血清一氧化氮NOELISA检测试剂盒
人试剂盒说明书人血清一氧化氮NOELISA检测试剂盒人试剂盒说明书,人血清一氧化氮(NO)ELISA检测试剂盒樊克生物专业供应:使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本血清试验原理:NO试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知NO浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。
先将NO和生物素标记的抗体同时温育。
洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。
再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。
产生颜色。
颜色的深浅和样品中NO的浓度呈比例关系。
试剂盒内容及其配制自备材料1.蒸馏水。
2.加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3.振荡器及磁力搅拌器等。
安全性1.避免直接接触终止液和底物A、B。
一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。
2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。
3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。
操作注意事项1.试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。
稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
3.不用的其它试剂应包装好或盖好。
不同批号的试剂不要混用。
保质前使用。
4.使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。
使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。
6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
7.底物A应挥发,避免长时间打开盖子。
底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。
避免用手接触,有毒。
实验完成后应立即读取OD值。
8.加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
9.按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
样品收集、处理及保存方法1、血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。
使用不含热原和内毒素的试管。
收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
碧云天-总一氧化氮检测试剂盒说明书
总一氧化氮检测试剂盒产品简介:总一氧化氮检测试剂盒(Total Nitric Oxide Assay Kit, 即Nitrate/Nitrite Assay Kit)采用了硝酸盐还原酶(Nitrate reductase)还原硝酸盐(nitrate)为亚硝酸盐(nitrite),然后通过经典的Griess reagent检测亚硝酸盐,从而测定出总一氧化氮。
一氧化氮本身极不稳定,在细胞内很快代谢为硝酸盐(Nitrate)和亚硝酸盐(Nitrite),通过上述方法检测出硝酸盐和亚硝酸盐的总量,就可以推算出总的一氧化氮的量。
本试剂盒采用了NADPH依赖性硝酸盐还原酶(NADPH dependent nitrate reductase)。
高浓度的NADPH会干扰后续的检测,消除NADPH的一种常用方法就是使用Lactate dehydrogenase (LDH)清除NADPH。
本试剂盒采用了LDH清除NADPH的方法,使检测结果更加准确。
对亚硝酸盐的检测下限达到2微摩尔/升,在2-80微摩尔/升的范围内有很好的线性关系。
浓度过高的样品可以适当稀释后再进行检测。
样品范围广,可以检测细胞裂解液、组织裂解液、细胞或组织的培养液、血清、血浆或尿液等中一氧化氮的含量。
酚红和10%血清对测定无明显干扰。
样品需要量少。
根据样品中一氧化氮的浓度不同,仅需0-60微升样品。
检测速度快,仅需约80分钟即可完成检测。
本试剂盒采用了间接的一氧化氮检测方法,如需检测细胞内实际的一氧化氮水平,可以采用碧云天生产的DAF-FM DA (NO荧光探针)(S0019)。
保存条件:-20℃保存,一年有效。
NADPH,Nitrate Reductase,NaNO2 (1M),Griess Reagent I 和Griess Reagent II需避光保存。
NADPH配制成溶液后必须分装并-70℃保存。
注意事项:RPMI 1640等含有较高浓度硝酸盐的培养液容易对本试剂盒的检测产生干扰,请尽量避免。
人一氧化氮NOELISA试剂盒使用方法
人一氧化氮(NO)ELISA试剂盒使用方法本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:48T6μmol/L -200μmol/L使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中一氧化氮(NO)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人一氧化氮(NO)水平。
用纯化的人一氧化氮(NO)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入一氧化氮(NO),再与HRP 标记的一氧化氮(NO)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的一氧化氮(NO)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中人一氧化氮(NO)浓度。
试剂盒组成1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
一氧化氮检测试剂盒及检测方法与设计方案
图片简介:本技术阐述了一种一氧化氮检测试剂盒,包括R1试剂和R2试剂,R1试剂包括盐酸多巴胺、乙酸和乙酸钠,pH为4.50~5.30;R2试剂包括3甲基2苯并噻唑啉酮腙盐酸盐、叠氮化钠、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、稳定剂和叠氮化钠,pH为7.2~7.5;R1试剂和R2试剂均为液体试剂。
本技术提供的一氧化氮检测试剂盒的R2试剂的采用双缓冲液体系,减弱空气对R2试剂pH值减低作用,从而减少对主导反应的影响,并同时其还能激活主导反应。
技术要求1.一种一氧化氮检测试剂盒,其特征在于,包括独立包装的R1试剂和R2试剂:所述R1试剂包括以下浓度的组分:盐酸多巴胺50-300mmol/L,ProClin300 1-5ml/L,乙酸50-150mmol/L,乙酸钠40-100mmol/L;所述R2试剂包括以下浓度组分:3-甲基-2-苯并噻唑啉酮腙盐酸盐40-200moml/L,PIPES 200-500mmol/L,磷酸二氢钠168-336mmol/L,磷酸氢二钠32-64mmol/L,稳定剂1-5ml/L,叠氮化钠1-5g/L,其中所述R1试剂的pH为4.50~5.30,所述R2试剂的pH为7.2~7.5。
2.如权利要求1所述的一氧化氮检测试剂盒,其特征在于,所述R1试剂还包括以下浓度组分:磷酸氢二钠80-300mmol/L。
3.如权利要求1所述的一氧化氮检测试剂盒,其特征在于,所述R1试剂还包括硫酸0.02~0.5mol/L。
4.如权利要求1所述的一氧化氮检测试剂盒,其特征在于,所述R1试剂还包括0.5-20g/L的表面活性剂,所述表面活性剂选自Tritox-100、Emulgen A90、Emulgen A60、GENAPOLX-080,吐温-20和吐温-80中的一种。
5.如权利要求1所述的一氧化氮检测试剂盒,其特征在于,所述稳定剂选自ProClin300、乙二醇、脱氧胆酸钠、胆酸钠、硫磺脱氧胆酸钠、谷氨酸钠、三乙醇胺、聚乙二醇400、木糖醇、甘露醇和山梨醇中的一种。
测定试剂盒(测总NOS)
一氧化氮合酶一氧化氮合酶((NOS )测定试剂盒测定试剂盒((测总NOS )说明书修订日期说明书修订日期::2015.07.13 Cat number :KGT020-1/KGT020-2 Store at -20 for for ℃ 3 months For Research Use Only (科研专用)一、实验原理NOS 催化L -Arg 和分子氧反应生成NO ,NO 与亲核性物质生成有色化合物,在530nm 波长下测定吸光度,根据吸光度的大小可计算出NOS 活力。
二、试剂盒组份组份KGT020-1 25TKGT020-2 50T 保存条件Buffer A 6.0 mL 6.0 mL*2 -20℃ 试剂 B 粉剂*2 粉剂*3 -20℃ 试剂 B 稀释液 0.6ml*2 0.6ml*3 -20℃ Buffer C 3.0 mL 6.0 mL 4℃避光 Buffer D 3.0 mL 6.0 mL 室温 Buffer E60 mL60 mL*24℃注意事项1. Buffer A : 底物缓冲液6ml×2瓶,-20℃以下避光冷冻保存3个月。
临用前化冻摇匀。
没有用完的试剂,可以-20℃以下避光冷冻保存以备下次再用。
2. 试剂B 工作液:促进剂淡黄色或白色粉剂×3支,稀释液0.6ml×3支。
-20℃以下冷冻保存6个月。
测试前取试剂 B 稀释液一支0.6ml 加入一支粉剂中充分混匀(即将1.5ml 小离心管反复颠倒,并将小离心管尖部的液体弹下来),测试后剩余的试剂可放入-20℃以下冷冻保存,时间不超过一周。
若发现粉剂变成黄褐色或咖啡色,则不可再用。
3. Buffer C :黄色显色剂6ml×1瓶,4℃避光冷藏保存3个月。
4. Buffer D :透明剂6ml×1瓶,室温保存6个月。
天冷后会凝固,待37℃水浴变澄清时再使用。
5. Buffer E :终止剂60ml×2瓶,4℃保存6个月。
一氧化氮检测试剂盒原理
一氧化氮检测试剂盒原理一氧化氮检测试剂盒是一种基于化学反应的检测方法。
该方法利用了一氧化氮与二氧化氮(Nitrogen Dioxide, NO2)在碱性条件下的反应,通过测量反应产生的颜色变化来间接检测一氧化氮的含量。
一氧化氮检测试剂盒通常包含两种关键试剂:Griess试剂和还原剂。
Griess试剂是一种含有硫酸铁铵和磷酸的溶液,它可以与反应中产生的亚硝酸盐(Nitrite)反应生成深紫色的染料。
还原剂是一种强还原剂,如氢氨基钠(Hydroxylamine hydrochloride),它的作用是将一氧化氮和二氧化氮还原为亚硝酸盐。
一氧化氮检测试剂盒的操作步骤通常如下:1. 准备样品:收集待测样品,并将其加入试剂盒中。
2. 加入试剂:加入Griess试剂和还原剂,使样品中的一氧化氮与还原剂发生反应。
3. 反应发生:在碱性条件下,一氧化氮与还原剂反应生成亚硝酸盐。
4. 颜色变化:亚硝酸盐与Griess试剂反应生成深紫色的染料,产生颜色变化。
5. 测量光密度:使用光度计或分光光度计测量反应产物的光密度,光密度与一氧化氮的含量成正比。
6. 计算浓度:通过与已知一氧化氮浓度的标准品比较,计算待测样品中一氧化氮的浓度。
一氧化氮检测试剂盒的原理是基于一氧化氮与还原剂在碱性条件下的反应,通过测量反应产生的染料的光密度来间接检测一氧化氮的含量。
这种检测方法具有灵敏度高、操作简便、结果准确等优点,被广泛应用于生物医学研究、临床诊断和药物研发等领域。
总结起来,一氧化氮检测试剂盒利用一氧化氮与还原剂在碱性条件下的反应,通过测量反应产生的染料的光密度来间接检测一氧化氮的含量。
该方法操作简便、结果准确,被广泛应用于生物医学研究和临床诊断中。
通过对一氧化氮的检测,可以更好地了解其在生物体内的功能和调节作用,为相关研究和治疗提供重要的参考依据。
NO试剂盒说明书
NO试剂盒说明书一氧化碳试剂盒说明书(硝酸还原酶法)一.测定意义:NO化学性质活泼,体内代谢转化为硝酸盐(NO3)和亚硝酸盐(NO2),血清(NO3)与(NO2)浓度之和(NO2+NO3)才能准确代表体内(NO)水平。
血清(NO3+NO2)含量测定,国内有的单位采用金属镉还原法,但该法操作繁琐(血清需除蛋白),反应不易控制(金属镉可将NO2进一步还原),且不能完全将NO3还原为NO2,准确性差。
本测试法为一种灵敏、简捷、快速、稳定、易推广的方法。
二、原理:NO化学性质活泼,在体内代谢很快转化为NO2和NO3,而NO2又进一步转化为N03-,而NO2-又进一步转化为NO3-,本法利用硝酸还原酶特异性将NO3-还原为NO2-,通过显色深浅测定其浓度的高低。
一、试剂组成与配制:1.试剂一:液体6ml×2瓶(50T)如6ml×1瓶(25T),-20℃以下保存。
使用前请放37℃水浴中或室温使其溶解后再用。
2.试剂二:液体6ml×2瓶(50T)如6ml×1瓶(25T),-20℃以下保存。
使用前请放37℃水浴中或室温后再用。
混合试剂的配制:按试剂一:试剂二=1:1的比例配制,用多少配多少,配好后充分混合后待用,现用现配3、试剂三:液体12ml×1瓶(50T)如6ml×1瓶(25T),室温保存4、试剂四:液体6ml×1瓶(50T)如3ml×1瓶(25T),室温保存5、试剂五:粉剂×1支,用时加90℃-100℃热蒸馏水20ml(50T)如10ml(25T)[注],充分溶解,避光保存。
6、试剂六:粉剂×1支,用时加蒸馏水8ml(50T)如4ml(25T),避光冷藏保存,当颜色变成深咖啡色不可再用。
7、试剂七:液体8ml50T(4ml25T)×1瓶,室温保存。
显色剂的配制:需多少配多少试剂五:试剂六:试剂七=2.5:1:1.若能在一月内用完者也可以一次配成。
大鼠(Rat)一氧化氮(NO)-NEWA
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断大鼠(大鼠(Rat Rat Rat))一氧化氮(一氧化氮(NO NO NO))ELISA 检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被一氧化氮(NO)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB 在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的一氧化氮(NO)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
试剂盒组成名称96孔配置48孔配置备注微孔酶标板12孔×8条12孔×4条无标准品0.3mL*6管0.3mL*6管无样本稀释液6mL3mL无检测抗体-HRP10mL5mL无20×洗涤缓冲液25mL15mL按说明书进行稀释底物A6mL3mL无底物B6mL3mL无终止液6mL3mL无封板膜2张2张无说明书1份1份无自封袋1个1个无注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、2.5、5、10、20、40μmol/L试剂的准备20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
S0021 一氧化氮检测试剂盒
一氧化氮检测试剂盒
产品名称 一氧化氮检测试剂盒
包装 500次
产品简介:
¾ 碧云天生产的一氧化氮检测试剂盒采用了经典的Griess Reagent,并对其测定的溶液体系进行了优化,使检测下限达到 1µM,在1-100µM范围内有非常完美的线性关系。
¾ 检测速度极快,完成一条标准曲线或5-10个样品的测定只需3分钟。 ¾ 样品范围广,可以检测细胞或组织及其培养液中的一氧化氮的含量,酚红和10%血清均对测定无明显干扰,也可以检测
血清、血浆和尿液中一氧化氮的含量。
包装清单:
产品编号 S0021-1 S0021-2 S0021-3
—
产品名称 1M NaNO2 Griess Reagent I Griess Reagent II
说明书
包装 1m盒在自订购之日起4个月内有效。
注意事项: ¾ 本试剂盒所提供试剂均为有毒害试剂,操作时请小心。 ¾ 如保存不当导致溶液变色或沉淀,则说明该溶液已经失效,请购买新的试剂盒。 ¾ 对于血清样品中NO含量的测定,粗略地计算,可以直接用水稀释标准品,从而计算出血清样品中NO的浓度。 比
较精确的计算。如果测定的正常血清是常见血清可以从文献上查到其中NO的浓度。然后用该已知NO浓度的血清稀 释标准品,这样就可以得到比较精确的NO浓度。或者使用已知浓度的人或其它动物的血清稀释标准品也同样可以 达到目的。或者参照类似文献进行血清中NO浓度的测定。 ¾ 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
2. Bochu W, Chunhong T, Liancai Z, Qi C.
Investigation on the effects of diamide on NO production in vascular endothe
一氧化氮检测试剂盒及检测方法与设计方案
一氧化氮检测试剂盒及检测方法与设计方案一氧化氮(NO)是一种重要的生物活性分子,在许多生理和病理过程中发挥重要作用。
因此,开发一种简单快速、灵敏准确的一氧化氮检测试剂盒及相应的检测方法和设计方案具有重要的意义。
以下将详细介绍一氧化氮检测试剂盒及相应的设计方案。
首先,对于试剂的选择,应选取具有高度灵敏性和特异性的试剂。
一氧化氮的浓度通常很低,因此需要使用高灵敏度的化学试剂来检测其浓度。
一种常用的试剂是Griess试剂,该试剂与一氧化氮反应生成可检测的化合物。
此外,还有一些基于荧光和发光技术的试剂可用于一氧化氮的检测。
其次,在实验步骤方面,应设计简单可行的实验步骤来进行一氧化氮的检测。
一种常用的实验步骤是将待测样品和试剂混合,并在一定的温度和时间条件下反应,然后通过光谱测定试剂与一氧化氮反应产生的化合物的吸光度或荧光强度。
实验步骤应尽可能简单明了,以提高实验的可重复性和稳定性。
在检测原理方面,应该基于一氧化氮的化学性质和检测方法的原理来设计。
一氧化氮是一种高活性的气体,其荧光、发光、吸光度或电化学性质可用于检测。
例如,荧光性染料可以与一氧化氮反应生成荧光产物,通过测定荧光的强度来分析一氧化氮的浓度。
另一种常用的方法是通过光谱测定试剂与一氧化氮反应产生的化合物的吸光度。
此外,还可以使用电化学方法来检测一氧化氮的浓度。
最后,在数据分析方面,应使用合适的统计方法来处理实验数据,计算并分析一氧化氮的浓度。
如果设计了标准曲线,可以根据标准曲线来计算样品中一氧化氮的浓度。
此外,对于复杂的样品或实验结果,可以使用统计学方法进行数据分析和解释。
总结起来,设计一氧化氮检测试剂盒及相应的检测方法和设计方案应包括试剂的选择、实验步骤、检测原理以及数据分析等方面。
通过合理的设计,可以开发出简单快速、灵敏准确的一氧化氮检测方法,为一氧化氮的检测提供重要的工具和技术支持。
人血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒试验方法
人血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒试验方法人血清一氧化氮(NO)ELISA试剂盒(用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内),仅供科研使用,不得用于临床!原理本试验采用双抗体夹心ABCELISA法。
用抗人NO单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的NO与单抗结合,加入生物素化的抗人NO,形成免疫复合物连接在板上,辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合,加入底物工作液显蓝色,最终加停止液硫酸,在450nm处测OD值,NO浓度与OD值成正比,可通过绘制标准曲线求出标本中NO浓度。
试剂盒构成(28℃保管)酶标板(CoatedWells) 96孔酶标抗体工作液(EnzymeConjugate) 12ml 10×标本稀释液(SampleBuffer)12ml 20×浓缩洗涤液(WashBuffer)50ml标准品(Standards):1000μM/瓶 2瓶底物工作液(TMBSolution) 12ml 第一抗体工作液(BiotinylatedAntibody) 12ml 停止液(StopSolution)12ml准备试剂与收集血样1.收集标本:血清、血浆(EDTA)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测,28℃保管48小时;更长时间须冷冻(20℃或70℃)保管,避开反复冻融。
2.标准品液配制:使用前加入1ml蒸馏水混匀,配成1000μM的溶液。
设标准管8管,第一管加标本稀释液900ul,第二至第八管加入标本稀释液500ul。
在第一管中加入1000μM的标准品溶液100ul混匀后用加样器吸出500ul,移至第二管。
如此反复作对倍稀释,从第七管中吸出500ul弃去。
第八管为空白对照。
3.10×标本稀释液用蒸馏水作1:10倍稀释(示例:1ml浓稀释液 9ml蒸馏水)。
4.洗涤液:用重蒸水1:20稀释(示例:1ml浓缩洗涤液加入19ml的重蒸水)检测程序1.加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul,将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
碧云天一氧化氮合成酶检测试剂盒
一氧化氮合成酶检测试剂盒产品编号产品名称包装S0025 一氧化氮合成酶检测试剂盒 100次产品简介:¾一氧化氮合成酶检测试剂盒(Nitric Oxide Synthase Assay Kit)可以检测活细胞内总的一氧化氮合成酶的活性。
如果和特异性的一氧化氮合成酶抑制剂配合使用,也可以检测不同类型的一氧化氮合成酶的活性。
¾本试剂盒提供了一种在生理条件下通过荧光检测活细胞内一氧化氮合成酶活性的方法,不需要使用传统方法所需的放射性同位素。
本试剂盒采用了可以穿透细胞膜的最新一代一氧化氮荧光检测探针DAF-FM DA (3-amino,4-aminomethyl-2’,7’-difluorescein, diacetate),在提供充足的底物的条件下检测细胞内的一氧化氮合成酶可以催化产生的一氧化氮量,从而检测出一氧化氮合成酶的活性。
详细的检测原理参考图1。
采用一些一氧化氮合成酶的抑制剂则可以测定出特定类型的一氧化氮合成酶的活性。
例如,采用iNOS抑制剂,未加iNOS抑制剂测定出来的酶活力减去加了iNOS抑制剂测定出来的酶活力就是iNOS的酶活力。
图1. 一氧化氮合成酶检测试剂盒原理图¾本试剂盒是目前为止世界上最先进的一种一氧化氮合成酶检测试剂盒。
和Calbiochem等多年前就开始提供的一氧化氮合成酶检测试剂盒相比无需使用同位素,和Sigma等最近推出的基于荧光的一氧化氮合成酶检测试剂盒相比采用了最新一代的荧光探针,灵敏度更高,特异性更好。
本试剂盒的缺点是和其它荧光法一氧化氮合成酶检测试剂盒一样,仅能提供一氧化氮合成酶的相对活性。
¾本试剂盒和检测细胞内一氧化氮水平的不同之处在于提供了充足的底物L-Arginine和一些可以穿透细胞膜的反应辅助因子,确保一氧化氮合成酶的催化的一氧化氮合成不会受底物的量或辅助因子的量的限制,从而可以测定出细胞内一氧化氮合成酶活力。
¾本试剂盒最适合用于贴壁的细胞或组织的一氧化氮合成酶的检测,对悬浮细胞也可以进行检测。
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一氧化氮检测试剂盒(化学法)
说明书修订日期:2016.06.22 Cat number:KGT008
Store at4℃for for6months,避光
For Research Use Only(科研专用)
一、实验原理
一氧化氮NO(即血管内皮舒张因子),在生物体内作为一种反应性极强的自由基,兼有第二信使和神经递质作用,同时又是一种效应分子,在体内具有广泛的生理作用,如松弛血管平滑肌,抑制血小板聚集,调节血流,介导细胞毒效应和免疫调节,参与学习和记忆、动脉粥样硬化等作用。
NO本身半衰期极短,血液中的NO主要由血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、血小板、巨噬细胞等产生以硝酸盐的形式存在,通过其浓度可以间接测知NO浓度。
NO遇氧及水生成硝酸盐及亚硝酸盐,后二者遇硝酸盐显色剂可生成淡红色偶氮化合物,通过比色可间接测知NO浓度。
二、试剂盒组份
组份KGT008(100assays)保存条件
Buffer A100mL4℃
Buffer B50mL室温或4℃
试剂C粉剂一支4℃避光
试剂D粉剂一支4℃避光
Buffer E12mL室温
亚硝酸钠标准液(2mmol/L)1mL4℃
注意事项
1.试剂C工作液配制:用时加入双蒸水至30mL,4℃避光保存。
(难溶,可以60℃隔水加热至溶解)2.试剂D工作液配制:用时加入双蒸水至12mL,4℃避光保存。
3.显色剂配制:试剂C工作液︰试剂D工作液︰Buffer E=2.5︰1︰1的体积比配制(现配现用),配好的显色剂放冰箱保存,如颜色变得很深则不可再用。
4.亚硝酸钠标准液(20umol/L)配制:将亚硝酸钠标准液(2mmol/L)用双蒸水100倍稀释待用,现
用现配。
三、操作步骤
1.操作方法:
于一次性塑料试管中按下表加入试剂
试剂空白管标准管测定管
双蒸水(mL)a﹡
20μmoL/L亚硝酸钠标准液(mL)a﹡
样本(mL)a﹡
Buffer A(mL)0.80.80.8
Buffer B(mL)0.40.40.4
混匀后室温放置10分钟,3500~4000转/分,离心10分钟,取澄清的上清液
上清液(mL)0.80.80.8
显色剂(mL)0.40.40.4混匀,15分钟后,550nm比色,0.5cm光径比色杯,水调零,测各管OD值
注意事项a﹡为取样量=标准品量=蒸馏水量
)
/()/20()mol/gprot (L gprot L mol OD OD OD OD NO 待测样本蛋白浓度标准管浓度值
管-空白管标准管值
空白管管测定管含量÷⨯-=
μμ样品测试前稀释倍数
标准管浓度值
管-空白管标准管值
空白管管测定管含量⨯⨯-=
)/20()mol/L (L mol OD OD OD OD NO μμ四、计算
1.计算公式
血清:组织:
2.计算举例
(1)兔血清测定管OD 值为0.018,空白管OD 值为0.004,标准管OD 值为0.024。
L
mol L mol NO NO /14/20004
.0024.0004
.0018.0/32μ=⨯--=
--μ(2)小鼠10%脑组织测定管OD 值为0.012,空白管OD 值为0.004,标准管OD 值为0.023.10%小
鼠脑匀浆蛋白浓度为4.45gprot/L
gprot
/mol 89.145.420004
.0023.0004
.0012.0/32μ=÷⨯--=
--NO NO 3.查标准曲线计算:以测得的吸光度查坐标图上相对应浓度
标准曲线的制备:按下表制备亚硝酸钠系列溶液。
(带标准品,标准曲线可以不做。
)
相当于NO 浓度(μmol/L )0481216202mmol/L 亚硝酸钠标准液(μL )
010********双蒸水(μL )
5000
4990
4980
4970
4960
4950
每一浓度取0.1ml 测定步骤进行,以测得的吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,做标准曲线。
五、操作注意点
1.严格按照操作规程。
2.要用一次性塑料试管或用清洗十分干净的玻璃管。
3.离心后的上层液一定要澄清,若有混浊要再次离心。
4.溶血及混浊血清对测定结果有影响。
5.血清及组织块零下冷冻后可保存半月左右。
温度越低保存时间越长。
零上4~5℃可保存三天。
6.
所有试剂配制均应在测试前一天配制,目的使其充分溶解。
在测试过程中,第一次吸的试剂要丢弃,样品和试剂要垂直加入试管,不要加在管壁上(因试剂及样品量小)。
离心前要用漩涡混匀器充分混匀,至少放置10分钟以上。