自动血细胞分析仪复检规则

2、制定镜检结果阳性判断标准
• （2） Abnormal Cell Types • a. Blast > 1 b. Meta >2 c. Myelo / Promyelocyte > 1 d. Atypical Lymphs > 5 e. NRBC > 1 f. Plasma Cells > 1
-镜检阳性判断标准（国内血液学复 检专家小组制定）
2、制定镜检结果阳性判断标准
• -涂片镜检阳性判断标准(The International Consensus Group for Hematology Review)： • （1）Morphology • a. RBC morphology at either 2+ / Moderate or greater. The only exception is Malaria, where any finding will be considered a positive finding. b. PLT morphology (giant platelets) at either 2+ / Moderate or greater. c. Platelet Clumps at > rare / occasional d. Dohle bodies at either 2+ / Moderate or greater e. Toxic granulation at either 2+ / Moderate or greater f. Vacuoles at either 2+ / Moderate or greater
• (5)WBC<4.0 或 > 30.0，同时为首次检测标本： 涂片镜检； • (6)WBC<4.0 或 > 30.0，三天内DELTA CHECK 未通过：涂片镜检； • (7)PLT <100 或 >1000，同时为首次检测标本： 涂片镜检； • (8)PLT为任意值，DELTA CHECK未通过：涂片 镜检； • (9)HGB <7g/dl 或高于不同年龄和性别参考区间 上限 2g/dl ，同时为首次检测标本：涂片镜检， 必要时检测标本的完整性；
二、血涂片复检的国际和国内现状
CAP问卷调查：263个实验室，涂片复检率 中位数为26.7%。 国内：复检率在0-15.0%，大部分医院血涂 片复检率低于5.0%，或者未实施显微镜观察。 有些实验室过分依赖自动血细胞分析仪分析 结果而未做或极少做血涂片复检，导致发生 较高的漏诊率，影响临床诊治疗效。
四、血涂片复检规则制定的原则
• 5、在较低假阴性率的前提下降低假阳性率， 假阳性率过高会无意义地增加工作量，延 迟检验报告的发放时间。 • 6、血液病或临床医师提出阅片时必须涂片 镜检。
五、血涂片复检规则的制定
人员的准备
根据卫生部医政司颁布的《全国临床 检验操作规程》和国家卫生行业标准 《白细胞分类计数参考方法》制定的 血涂片检测操作程序，对参加实验的 人员进行培训,统一判断标准，并研讨 可能出现的问题和解决的措施。
• （1）红细胞明显大小不均（指红细胞大小相差1 倍以上）；中空淡染（指>1/2淡染区的红细胞多 于30%），且只要发现疟原虫均认为是阳性； • （2）巨大血小板多于15%； • （3）见到血小板聚集； • （4）Dohle小体的粒细胞>10%； • （5）中毒颗粒中性粒细胞>10%； • （6）空泡变性粒细胞>10%；
• (31)PLT报警（包括PLT & MPV 报警，但 除外血小板聚集）：涂片镜检； • (32)未成熟粒细胞报警，同时为首次检测标 本：涂片镜检； • (33) 未成熟粒细胞报警：历史数据显示也 存在未成熟粒细胞, 涂片镜检； • (34)核左移：按照实验室SOP执行； • (35)不典型/变异淋巴细胞报警，同时为首 次检测标本：涂片镜检；
自动血细胞分析仪复检规则 的制定及验证

制定血细胞复检规则的必要性 血涂片复检的国际和国内现状 ISO15189的要求 血涂片复检规则制定的原则 血涂片复检规则的制定
一、制定血细胞复检规则的必要性
血细胞分析主要包括血细胞数量和质量的分 析；既白细胞、红细胞、血小板计数和三种 细胞形态学检查。如果仅靠仪器法进行血细 胞分析，不复检可能会造成以下问题： 漏诊：白血病、传单及寄生虫感染等 误诊：贫血、血小板减少性紫癜等 不能反映血细胞形态学病理改变 医疗纠纷时缺乏自我防护机制
4、初步复检规则评估
• 涂片镜检为阳性判断标准，将拟定的初步复检规 则进行评估，计算出真阳性（TP）、真阴性 （TN）、假阳性（FP）、假阴性（FN）和血涂 片复检的比率。真阳性为至少触发1条血细胞复检 规则且镜检符合涂片镜检阳性判断标准，镜检形 态学异常与所触发的规则不需要一一对应；真阴 性为未触发复检规则且镜检阴性；假阳性为触发 复检规则而镜检无形态学异常发现；假阴性为未 触发复检规则而镜检符合涂片镜检阳性判断标准， 涂片复检率=真阳性比率+假阳性比率。
• 血细胞分析仪的作用主要是血细胞数量和 形态大致正常时，仪器检测结果可直接报 告,这样就可以使白细胞数量和形态正常的 标本免予镜检,减少了工作压力。 • 当血细胞分析仪检测提示细胞数量和形态 异常时，需进一步镜检予以确认。
血细胞复检的概念
• 制定一套适合本实验室的血细胞复检规则， 当仪器分析的结果未触发制定的复检规则 时，可视为仪器所得白细胞分群（类）结 果能客观反映血象状况无须镜检．反之， 当仪器分析的结果触发制定的复检规则时， 则需要涂片镜检．因此，合理的筛选标准 的制定是正确使用仪器，保证结果质量的 重要因素
四、血涂片复检规则制定的原则
• 1、根据所用仪器对细胞形态的识别能力的差异， 建立复检规则； • 2、筛选标准所涉及的参数，所用仪器能够提供； • 3、在保证关键病理细胞不漏检的原则下，尽量减 少涂片复检率； • 4、具有诊断意义的重要参数不能出现假阴性，其 他参数的整体假阴性率也应低于5.0%，国际血液 学复检专家组认为5.0%是保证患者检测结果安全 性的最大可接受的假阴性率；
• 2005年国际血液学复检专家组通过对 13298份血液标本进行详细分析后，制定了 “41条自动血细胞分析和分类复检规则”， 结果表明，真阳性率为11.2%，假阳性率为 18.6%，真阴性率为67.3%，假阴性率为 2.9%，血涂片的复检率为29.8%。
三、ISO15189的要求
• 血液学检查部门需制定如下标准/程序并形成文件（不 仅限于如下标准/程序）： • 1、血细胞分析的显微镜复检标准（检测结果出现异常 计数、警示标志、异常散点图等情况时结果的确认方法 和程序）；血涂片制备和检验的书面程序/过程； • 2、血液计数结果超出仪器线性范围时宜规定识别和解 决方法（如对血样进行适当稀释和重复检验）；对于检 测样本存在一些影响因素（如有核红细胞、红细胞凝集、 小红细胞、红细胞有内容物或疟原虫、血小板凝块、巨 型血小板等）时，对仪器检测结果可靠性的判定和纠正 措施需有书面规定。
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（7）原始和幼稚细胞≥1%； （8）早幼粒细胞和中幼粒细胞≥1%； （9）晚幼粒细胞>2%； （10）异形淋巴细胞>5%； （11）有核红细胞≥1%； （12）浆细胞≥1%。
3、源自文库测方法
• 以双盲法分别进行仪器分析和血涂片镜检。 镜检内容包括：①WBC分类计数：计数 200个WBC，计算各类细胞的百分比，并 进行形态观察;②WBC和PLT数量评估; ③ RBC和PLT的大小、染色及形态； ④有无 巨大PLT及PLT聚集; ⑤其他异常:NRBC、 RBC冷凝集及寄生虫等。
• (10)MCV <75fl or > 105fl (成人)，同时为首次检测标本， 而且标本采集时间小于24小时：涂片镜检； • (11) MCV> 105fl (成人) 而且标本采集时间大于24小时： 涂片检查RBC是否有大细胞相关的改变，如无大细胞相关 的改变，通知临床重新抽新鲜血标本；如无新鲜全血，则 必须在报告中备注标本采集时间超过24小时； • (12) MCV为任意值，DELTA CHECK未通过，同时标本 采集时间小于24小时：检测标本的完整性及是否标本信息 错误； • (13) MCHC>=生物参考区间上限2 0g/L：检查标本是否存 在高脂血症、溶血、RBC聚集及球形红细胞； • (14) MCHC<30同时MCV正常或增高：可能为静脉输液污 染或其他标本原因；
• (36) 不典型/变异淋巴细胞报警: 历史数据显示也存在不典 型/变异淋巴细胞, 涂片镜检； • (37)原始细胞报警，同时为首次检测标本：涂片镜检； • (38) 原始细胞报警: 3-7天内的历史数据显示不存在 原始细胞, 按照实验室SOP执行； • (39) 原始细胞报警: 历史数据显示也存在原始细胞, 涂片镜 检； • (40)有核红细胞报警：涂片镜检，如发现有核红细胞，计 数其数量，必要时更正WBC计数结果； • (41) Retics图形异常：检查仪器的输出，如果是仪器吸样 时出现问题，重新进行检测，如果问题持续存在，涂片镜 检；
• (21) Baso # >0.5同时为首次检测标本：涂片镜检； • (22) NRBC #为任意值，同时为首次检测标本： 涂片镜检； • (23) Retic Absolute # >0.100，同时为首次检测 标本：涂片镜检； • (24)怀疑性报警（幼稚粒细胞/杆状核细胞报警除 外），成人同时为首次检测标本：涂片镜检； • (25) 怀疑性报警，儿童同时为首次检测标本：涂 片镜检 ；
仪器准备
包括校准、灵敏度调节和报警信息系统参数 设置。评估前，由供应商工程师用全血校 准物对所用的仪器进行校准，并将仪器的 灵敏度调整到合适水平，使其性能评价符 合制造厂家的标准。实验室用全血质控物 进行严格的室内质量控制,保证结果的准确 性和稳定性。
确定标本的数量及类型
国际血液学复审协作组要求各研究单位完 成的标本量至少1000例，其中包括80%首 检标本、20%复检标本，用于验证Delta规 则。这些标本从日常检测中随机抽取,而且 要有一定数量标本中含有幼稚细胞。国内 实验室研究时抽取的病例应包括门诊、急 诊和住院患者。
• (26)WBC不可信报警：检查标本的完整性，重新 检测，必要时涂片镜检； • (27)RBC碎片：涂片镜检； • (28)双相RBC同时为首次检测标本：涂片镜检；
• (29)阻抗RBC：检查白细胞直方图/散点图是否异 常，涂片镜检是否存在RBC形态异常； • (30)PLT聚集报警，任意值：检查标本是否血凝， 涂片镜检评估血小板数量，如果发现血小板明显 聚集，按照实验室SOP执行；
• (15) RDW>22同时为首次检测标本：涂片镜检； • (16)未分类或分类不完整：涂片镜检，手工分类； • (17) Neut # <1.0 or > 20.0同时为首次检测标本： 涂片镜检； • (18)Lymph # >5.0 (成人) 或>7.0 (<12岁儿童) 同 时为首次检测标本：涂片镜检； • (19) Mono # >1.5 (成人) 或 >3.0 (<12岁儿童) 同 时为首次检测标本：涂片镜检； • (20) Eos # >2.0同时为首次检测标本：涂片镜检；
1、设计初步复检规则
• (1)新生儿首次检测标本； • (2)WBC, RBC, HGB, PLT, Retics超过仪器 线性范围：稀释标本，重新检测； • (3)WBC, PLT低于实验室验证的仪器线性范 围：按照实验室SOP进行检测； • (4)WBC, RBC, HGB, PLT未检测出结果： 检查标本是否血凝，重新检测标本，如果 仍然无结果，应用其他方法检测；
5、拟定预期指标
实验室可根据所用血细胞分析仪的性能特点、 医院规模、病种差异和实验室常规工作的 质量管理要求等，制定相应的自动血细胞 分析和白细胞分类涂片复检预期指标,如假 阳性率＜20%、假阴性率＜5%、复检率＜ 30%等。