7.检验程序确认和验证

检验程序确认和验证（2）

测量区间定义•measuring interval

•又称工作区间working interval

•在规定条件下，由具有一定测量不确定度的测量仪器或系统能测出的一组同类量的量值（VIM）。

–注1：在某些领域，也称“测量围”。

–注2：测量区间下限不应与“检出限”相混淆。

线性、线性围定义

•线性：linearity

•指待测标本中能直接按比例关系给出分析物浓度结果的能力。

注1：线性代表整个测量系统的反应。

注2：一个测量系统的线性由不同已知浓度的分析物测定得到。

•线性围：linear range

•指测量系统所能覆盖的可接受线性围，非线性误差小于设定标准。

分析测量围定义analytical measurement range 患者标本未经任何处理（稀释、浓缩或其他预处理），由测量系统直接测得的可靠结果围，在此围，一系列不同标本分析物测量值与实际浓度呈线性关系。

临床可报告围定义clinical reportable range

是定量检测项目向临床能报告检测围，患者标本可经稀释、浓缩或其他预处理。

区别

线性评价-CLSI文件

•EP6-A，Evaluation of the Linearity of Quantitative MeasurementProcedures，2003

•EP10-A3，Preliminary Evaluation of Quantitative Clinical Laboratory Measurement Procedures，2006 EP6-A方案和要求

1.设备熟悉阶段

–检验人员应熟悉检测系统的操作、正确的质控和校准、恰当的标本制备。

2.线性评估实验

–实验室验证厂商声明：5～7个浓度*重复2次。

–厂商建立新方法：9～11个浓度*重复2～4次。

–实验室改良已建立的方法：7～9个浓度*重复2～3次。

–时间：最好一天完成。

EP6-A方案和要求

•样品准备：可接受的基质

1.病人混合标本：1份标本的分析物浓度应接近可报告围上限，另1份标本的分析物浓度应接近检出限。

2.用推荐稀释液稀释病人混合标本：标本中分析物浓度应为高浓度，稀释液应按厂商推荐。

3.病人混合标本添加分析物：若没有干扰的话，含分析物的添加物无需高纯物质。

4.病人混合标本用低浓度经处理的材料稀释或经处理的混合材料稀释。

5.商品质控品/校准品/线性材料。

6.病人混合标本用生理盐水或其他稀释液稀释。

7.不稀释或过度稀释的商品质控品。

8.水溶液。

EP6-A方案和要求

•实验要求

–测量顺序：应随机。如存在明显携带污染或漂移，选择对后续标本影响最小的顺序进行。

–分析围：应接近或等于最低和最高厂商声明的性能围。

EP6-A方案和要求

•样品制备：足量混合血清。

–X1：低值混合血清。

–X2：3份X1+1份X5。

–X3：2份X1+2份X5。

–X4：1份X1+3份X5。

–X5：高值混合血清。

–更多水平：X4+X1 、X3+X2 、X2+X3 、X1+X4。

EP6-A方案和要求

•数据处理和分析：

1.初步数据检查

–有无极端明显差异或错误；

–X-Y图上有无离群值；

–每组数据有无漂移或趋势性变化。

2.离群值检查

–单个测定结果明显偏离其他检查结果； –单个离群值可删除，不用增加数据； –提示存在非线性或系统误差。

3.确定分析测量围 –作一元一次（直线）、二次（抛物线）或三次（S 形）多项回归分析。

阶别 回归方程 自由度 一次 Y=b0+b1X 2 二次 Y=b0+b1X+b2X2 3 三次 Y=b0+b1X+b2X2+b3X3 4

–一元一次：直线，是判断某种方法是否为线性的最适

方程。

–一元二次：抛物线，有增加趋势或减少趋势。

–一元三次：S 形，呈非线性，b2和b3做t 检验证明非线性。

4.非线性程度：计算线性偏差（DL ）。

–用户定义线性程度要求或非线性允许误差围，取决于偏移目标或测量误差。

5.考虑随机误差

–是否因随机变异导致非线性，用方差来估计，即S r 。

线性评价：Westgard

混合物 记录 均值

1 2 3

X1（0％） 6 6 6 6

X2（25％） 138 138 138 138 X3（50％） 278 277 279 278 X4（75％） 410 411 411 411 X5（100％）545 546 543 545

混合物 均值(Y) 理论值(X) 偏倚 误差％ X1 6 0（X3均值×0） +6 N/A X2 138 139（X3均值×0.5） -1 -0.7％ X3 278 278（X3均值） 0 0 X4 411 417（X3均值×1.5） -6 -1.4％ X5 545 556（X3均值×2.0） -11 -2.0％

验证：临床可报告围

• 实验方法：尚无公认方法。 • 实验结果与分析

–计算回收率：回收率=（实测值/预期值）*100% –按厂商说明书要求判断结果。

举例（最高）

稀释倍数 实测值 预期值 回收率 1:10 6688.9 6688.9 100.0 1:20 7193.8 6688.9 104.9 1:100 7509.3 6688.9 112.3 1:200 7560.8 6688.9 113.0 可报告围上限：20*6688.9=133778

举例（最低）

稀释倍数 实测值 预期值 回收率 1:10 92.5 85.70 107.9 1:40 23.6 21.42 110.2 1:50 19.6 17.14 114.4 1:100 11.3 8.57 131.9 1:200 6.75 4.29 157.3 可报告围下限：85.70/5=17.14

测量系统的灵敏度定义

• sensitivity of a measuring system • 简称灵敏度 sensitivity