大肠杆菌耐药性研究进展

大肠杆菌耐药性研究进展教郁，高维凡，胡彩光(沈阳农业大学，辽宁省沈阳市，110000)摘要：大肠杆菌是典型的革兰氏阴性杆菌，其引起的大肠杆菌病是一种常见疾病，在治疗过程中容易产生耐药性，且耐药谱广，耐药机制复杂，给养鸡业预防和治疗该病带来很大困难。

大肠杆茵对抗生素的耐药问题是当前国内外研究的热点。

本文对大肠杆菌耐药的现状以及产生耐药性机制的研究进行了综述，以便正确理解大肠杆菌耐药性的特点及其规律，从而为防治大肠杆菌耐药性的产生及合理用药提供理论依据。

关键词：大肠杆菌；耐药性；作用机制The research progress on mechanism of Drg-resistance of Escherichia coli Abstract: E.coli is gram-negative bacteria, colibacillosis is a kind of common disease. Escherichia coli strains showed high levels of resistance, resistance spectrum to expand, and multiple drug resistance. The drug resistant gene is complex and diverse. So the prevention and treatment of the disease bring a lot of difficulties. Antibiotic resistance is the current domestic and international research hot spot. The advances on mechanism of resistance and the present situation of E coli resistance are summarized．Thus the trend of the drug-resistance on the E coli resistance can be understood better and the basis for preventing the production of the resistant stains and using drugs reasonablely can be furtherly provided．Keywords: Eescherichia coli; resistance; resistance mechanism致病性大肠杆菌为医学和兽医学临床感染中最常见的病原菌之一。

从发病情况看，大肠杆菌病发病率在细菌病引发的疾病中居世界首位。

兽医临床上大肠杆菌造成的危害十分严重，它一年四季均可致病，一直是困扰养殖业发展的常见病、多发病，给养禽业造成了严重的经济损失；大肠杆菌病的主要防治措施是应用疫苗及抗生素。

国内外已研制出多种疫苗对大肠杆菌病进行预防，但因大肠杆菌具有多种血清型，仅国内报导就有80余种，应用疫苗对大肠杆菌病进行防治尚不能满足对该病的防治要求。

抗生素在大肠杆菌病预防及治疗方面有着不可替代的作用，但是随着抗生素的广泛、持续及不当使用，大肠杆菌耐药谱不断扩大和耐药水平不断提高，大肠杆菌耐药及多重耐药现象已十分严重。

虽然新型抗生素不断问世，但抗生素的研制速度远远低于耐药菌的产生速度。

因此了解大肠杆菌耐药状况，掌握大肠杆菌耐药趋势，研究大肠杆菌耐药机理，对控制耐药菌株的蔓延具有十分重要的意义。

1.大肠杆菌耐药性现状近年来，随着抗生素及各种化学合成药物在我国畜牧业生产中的广泛应用，大量的抗生素、消毒剂等不断进入水、土壤、河流、沉积物等各种环境中。

使得大肠杆菌耐药谱不断扩大和耐药水平不断提高，给我国畜牧业的持续发展和人类健康带来潜在的危害。

国内外各地均分离得到耐药家畜源性大肠杆菌，并对这些病原菌进行了耐药谱系的检测。

梅姝等[1]报道分离得到的长春地区127株鹿源大肠杆菌对5种抗菌药物呈现不同程度的耐药性，且大多数菌株呈多重耐药性，对阿莫西林、卡耐霉素较为敏感。

宋立等[2]报道分离到禽源大肠杆菌241株，耐药性非常严重，以多重耐药为主，耐10～19种药物的菌株占50%以上，总体上耐药率最高的是萘啶酸（88.1%），其它依次为四环素85.7%、磺胺甲基异恶唑81.0%、复方新诺明77.1%、氨苄西林76.2%、阿莫西林74.3%、链霉素66.2%、氟喹诺酮类57.1%～66.7%、氯霉素52.9%、庆大霉素39.0%、卡那霉素36.2%。

细菌对氟苯尼考、奥格门丁、头孢曲松、头孢噻吩、阿米卡星普遍敏感，耐药率仅为0～19.5%。

Zafer cantekin等[3]报道200个致病性大肠杆菌分离株的耐药性表型为青霉素（94%）、萘啶酮酸（85.5%）、磺胺甲基异恶唑（70%）、甲氧氨苄嘧啶/磺胺甲基异恶唑（69%）、氨苄青霉素（63%）、甲氧苄氨嘧啶（57%）、链霉素（45%）、恩诺沙星（39%）、头抱菌素（37%）、卡那霉素（33%）、氯霉素（20%）、新霉素（11%）、头抱吠辛（2%）、阿莫西林-克拉维酸（2%），另外43%的分离株呈现四环素药敏试验阳性，用PCR检测发现分离株中带tetA和tetB基因的分别占48%和32%,同时带有tetA和tetB基因的分离株占13%。

郑朝朝等[4]报道分离的23株鸡源、14株猪源大肠杆菌氟苯尼考耐药菌株检出率分别为62%和58%，不同动物源floR基因同源性为99.8%，与GenBank报道的floR 基因比较存在3个氨基酸替代，鸡源floR基因在开放阅读框的第439，479，683等位存在点突变，猪源floR基因在开放阅读框的第439，683，1100等位出现点突变。

杨汉春等[5]报道71株鸡源大肠杆菌都对四环素有耐药性，耐药率为100%，对氨苄西林、磺胺、头孢噻吩、三甲氧苄氨嘧啶/磺胺存在高度的耐药性，耐药率分别为76%、79%、77%、75%；对氯霉素和庆大霉素有中度的耐药性，耐药率分别为30%和32%；所有菌株对头孢曲松和头孢噻呋都敏感。

在71株鸡源大肠杆菌临床分离菌株中，对4种以上抗菌药物有耐药性的占86%(61/71),其中8耐和9耐菌株占66%（47/71），2耐和3耐菌株占14%（10/71），表现多重耐药特性。

叶满玉等报道根据药敏结果80株大肠杆菌对β-内酞胺类药物耐药率，氨节青霉素87.5%（70/80）、头孢噻吩27.5%（22/80）、头孢西丁3.75%（3/80）、头孢他啶8.25%（66/80）、头孢曲松2.5%（2/80）、头孢噻肟82.5%（66/80）、亚胺培南0%（0/80）、氨曲南2.5%（2/80）、头孢噻夫3.75%（3/80）、头孢吡肟0%（0/80）、头孢泊肟7.5%(6/80)。

杜向党等[6]对豫北地区临床分离的102株鸡源大肠杆茵进行了MICS值测定及氟苯尼考耐药基因floR的检测。

结果显示对头孢喹肟、阿米卡星和氟苯尼考的敏感率分别为93.1%、59.8%和54.9%，而对复方新诺明的耐药率达到100%，此外对四环素、多西环素、氨苄西林、恩诺沙星和沙拉沙星的耐药率为78.4%～94.1%。

氟苯尼考耐药基因的分子检测显示，有45.1%的菌株显示floR基因阳性。

刘雅妮等[7]对2009年分离自上海3个鸡饲养场的172株大肠杆菌进行了13种抗菌药物药敏试验，其中耐药率在90%以上的有恩诺沙星（96.5%）、四环素（94.8%）、氨苄西林（94.2%）、庆大霉素（93.6%）、复方新诺明（91.3%）；80%以上的有阿米卡星（85.5%）、阿莫西林（82.0%）、氟苯尼考（80.2%）；70%以上的磺胺异口恶唑（75.0%）、氧氟沙星（73.8%）；50%以上的有头孢唑啉（52.3%）；40%以上的有头孢噻呋（41.9%），而对粘杆菌素几乎全部敏感（99.4%）。

孙金福等[8]对自辽宁地区分离的27株禽源大肠杆菌进行耐药谱检测，结果表明氨苄青霉素、安灭菌、青霉素G和四环素的耐药菌株率高达100%，利福平的耐药菌株率达96.3%，氯霉素、红霉素的耐药菌株为70.4%，卡那霉素、环丙沙星、氟哌酸的耐药菌株率为59.3%，链霉素的耐药菌株达到63.0%。

氨苄西林／舒巴坦复方制剂、复达欣、庆大霉素和磷霉素的高敏菌株率分别为100%、77.8%、74.1%和51.9%。

氨基糖苷抗性基因aadA1、aacA4和aph（3、）—Ⅱ的阳性率分别是44.4%、27.8%和55.6%，aadB未捡出。

孙慧等[9]报道由山东地区采集并分离出禽源大肠杆菌共110株，对其进行5种氨基糖昔类抗菌药的敏感性的测定，并采用二重PCR法扩增耐氨基糖苷类药物的aac（3、）-Ib和ant（3、）-Ia基因。

结果表明，大肠杆菌分离株对链霉素耐药率达92.7%，其次是卡那霉素52.7%，相对敏感的是阿米卡星,耐药率只占19.10%。

PCR扩增结果显示ant（3、）-Ia的检出率为54.55%，aac（6、）-Ib的检出率为16.34%，二者同时检出率为4.55%。

金文杰等[10]对分离保存的216株禽致病性大肠杆菌进行氨基糖苷类药物耐药基因的分子流行病学检测，结果表明aadAl阳性率高达49.1%，strA和strB的阳性率分别为56%和65.7%，aph（3、）的阳性率为16.2%；近三分之二的被检菌株携带有2种以上氨基糖苷类药物耐药基因。

药敏试验结果显示所有被检菌株对链霉素耐药率为68.9%，而对阿米卡星的耐药率为38.9%。

2.大肠杆菌耐药机制大肠杆菌的耐药可以是天然固有的，也可以通过后天的基因突变、基因转移获得。

固有耐药性（intrinsic resistance），即耐药性的产生并不依赖于抗菌药物的存在，而是细菌细胞所固有的，与细菌的遗传和进化密切相关。

固有耐药性包括自发基因突变导致的耐药性和细胞膜药物外输作用引起的耐药性。

获得性耐药性（acquired resistance)是指细菌在抗菌药物选择性压力存在下经过基因突变，或细菌在生长过程中由于移动耐药因子的转移而获得的一种表型。

主要包括移动因子和抗菌药压力作用下引起基因突变所导致的耐药性。

就目前的研究现状来看，大肠杆菌的耐药性机制主要有5种：①抗生素作用位点的改变或新作用位点的产生；②酶对抗生素的修饰和破坏；③增加抗生素从大肠杆菌向细胞外的主动排出作用；④细菌外膜通透性的改变；⑤质粒介导的耐药性。

一种耐药机制可以对多种抗生素表现为抗性，同一种抗生素也常常出现多种耐药性机制共同抑制的现象。