饮用水(自来水)质量标准及检验规程

目的:明确生活饮用水质量标准,规范生活饮用水检验方法。 适用范围：生活饮用水的检验. 责任者:化验员。 1。标准依据：GB5749—85 GB5750—85 3.检验规程：

3。1色：铂钴标准比色法：

用氯铂酸钾和氯化钴溶液配成标准色列，与水样进行比较，规定相当于1毫克铂在

1升水中所具有的颜色称为1度，作为色度单位.

3.1。1仪器：50ml 具塞比色管 3。1。2试剂：铂钴标准溶液

称取1.246克化学纯氯铂酸钾（K 2PtCL 6）及1.000克化学纯氯化钴（C 0C12·6H 2O ）,溶于100ml 蒸馏水中;加入100ml 浓盐酸，然后用蒸馏稀释至1000ml.此标准溶液的色

度为500度.

3。1.3步骤：

3.1.3。1取50ml透明的水样于比色管中，如水样色度过高,可少取水样，加纯水稀释后比色，将结果乘以稀释倍数。

3.1。3。2如水样浑浊，可将水样放置澄清或用离心法沉淀，取上清水样进行比色。

3。1.3.3另取50ml具塞比色管11支,分别加和铂一钴标准溶液0，0。50，1。00,1.50,2.00，2。50，3。00，3。50，4.00，4.50及5.00ml，加纯水至刻度，摇匀，即配成色度为0，5，10，15，20,25，30，35，40，45及50度的标准色列,可长期使用。

3.1.3.4将水样与铂钴标准色列比较,如水样与标准色列的色调不一致,即为异色，可用文字描述。

3.1.3。5计算：

M

C=────×500

V

式中：C--——水样的色度

M---—相当于铂一钴标准溶液用量,ml

V--—-水样体积，ml

3.2浑浊度：是反映天然水饮用水的物理性状的一项指标。天然水的浑浊度是由于水中含有泥沙、粘土、有机物、微生物等微粒悬浮物所致。

分光光度法—甲聚合物标准。

本法适用于测定生活饮用水及其水源水的浑浊度,最低检测限3度。

3.2。1原理：在适当温度下，硫酸肼与六次甲基四胺聚合成为一种白色的高分子聚合物,可用来作为浑浊度标准。在680nm波长下，天然水中可能存在的淡黄色和淡绿色对测定无干扰。

3。2.2仪器:50ml比色管、分光光度计、比色皿。

3.2.3试剂:

1%硫酸肼溶液:称取1.0000g硫酸肼[（NH

2）

2

SO

4

·H

2

SO

4

］.溶于纯水中，并定容至

100ml。

10%六次甲基四胺溶液：称取10。00g六次甲基四胺［（CH

2）

6

N

4

］，溶于纯水中,并

定容至100ml

甲聚合物标准液：将5.0ml10％硫酸肼溶液与5。0ml10％六次甲基四胺溶液在100ml 容量瓶中混匀，于25±3℃反应24h，冷后加纯水至刻度,成400度的浑浊度标准贮备液，备用。

3.2.4步骤：

3.2。

4.1取浑浊度400度的标准贮备液(3。3）0，0。5，1。25，2.50，5。00，10。00，12。50ml，置50ml比色管中，加纯水至刻度,摇匀后即得浑浊度为0、4、10、20、40、80、100的标准液，于680nm波长处，用3cm比色皿，以纯水为参比，测定吸光度,绘制标准曲线。

3.2。

4.2将水样摇匀，按(4。1）所术条件测定吸光度。当水样的浑浊度超过100度时，可用纯水稀释后测定。

3。2.5计算：

水样的浑浊度可于标准曲线上查得，乘以稀释倍数。

3.3臭和味：

3.3。1原水样的臭和味

取100ml水样,置于250ml三角瓶中，振摇后从瓶口嗅水的气味，用适当词句描述，并按六级记录其强度。

与此同时，取少量水入口中,不要咽下法，尝尝水的味道，加以描述，并按六级记录强度，原水的水味检定只适用于人体健康无害的水样。

3。3.2原水煮沸后的臭和味。

将上述三角瓶内水样加热至开始沸腾，立即取下三角瓶，稍冷后按上法嗅味和尝味,用适当词句描述其性质，并按六级记录其强度。

注：有时可用活性炭处理过的水作为无臭对照水。

臭和味的强度等级

3。4肉眼可见物:

将水样摇匀，直接观察、记录。

3.5PH值

PH值是水中氢离子活度的倒数的对数值。水的PH值可用PH电位计法和比色法制定。PH值电位法比较准确，比色法简易方便。

PH电位法原理：以玻璃电极为指示电极，饱和甘汞电极为参比电极，插入溶液中组成原电池,在25℃时，每单位PH标度相当于59。1mv电动势变化值，在仪器上直接以PH的读数表示,温度差异在仪器上有补偿装置。

3。5.1试剂：———-下列标准缓冲溶液均需用新煮并放冷的纯水配制。配成的溶液应贮存在聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶内。此类溶液可以稳定1～2个月.

3。5.1。1PH标准缓冲液甲：称取10。21克在105℃烘干2小时的苯二甲酸氢钾

（KHC

8H

4

O

4

)，溶于纯水中，并稀释至1000ml，此溶液的PH值在20℃时为4。00。

3.5。1.2PH标准缓冲溶液乙：称取3.40克，在105℃烘干2小时的磷酸二氢钾

(KH

2PO

4

）和3.55克磷酸氢二钠（Na

2

HPO

4

），溶于纯水中，并稀释至1000ml。此溶液的

PH值在20℃时为6.88。

3。5。1.3PH标准缓冲溶液丙:称取3。81克硼酸钠（Na

2B

4

O

7

·10H

2

O)溶于纯水中，

并稀释至1000ml，此溶液的PH值在20℃时为9.22。

以上三种标准缓冲溶液的PH值随温度而稍有差异,见下表:

3。5。2步骤

3。5。2.1玻璃电极在使用前应放入纯水中浸泡24小时以上.

3。5。2。2用PH标准缓冲溶液甲、丙检查仪器和电极必须正常。

3。5。2.3测定时用接近水样PH的标准缓冲溶液校正仪器刻度。

3.5.2。4用洗瓶以纯水缓冲淋洗两电极数次,再以水样淋洗6-8次，然后插入水样中，1分钟后直接从仪器上读取PH值。

注：甘汞电极内为氯化钾的饱和溶液，当室温升高后,溶液可能由饱和状态变为不饱和状态，故应保持一定量氯化钾晶体。

3.5。3精密度与准确度:经68个实验室用本法测定PH值为8。6和7.7的合成水样，相对标准差分别为1。9%和2.7%，相对误差均为0.

3。6总硬度：

水的硬度系指沉淀肥皂的程度。使肥皂沉淀的原因主要是由于水中的钙、镁离子，此外铁、铝、锰、锶及锌等金属离子也有同样的作用。

总硬度可将上述离了的浓度相加进行计算，此法准确，但比较繁琐，而且在一般情况下,钙、镁离子以外的其它金属离子浓度都很低.所以多采用EDTA容量法测定钙、镁离子的总量，并经过换算，以每升水中碳酸钙的毫克数表示.

3。6。1应用范围:

3。6.1.1本法适用于测定生活饮用水及其水源水中的总硬度.

3。6。1.2本法于扰物质有以下两类:悬浮性或胶体有机物可影响终点观察，此时可将水样蒸干并于550℃灰化,干扰即可除去。金属离子如：Cu3+、Ni2+、C

3+、AL3+、Fe3+及高价锰等,由于封闭现象使指示剂褪色或终点延长,硫化钠及氯化钾可掩蔽重金属的干扰,盐酸羟胺可使高铁离子及高价锰离子还原低价离而消除其干扰。

3。6.1.3若取50ml水样，本法测定的最低价检测浓度为1。0mg/L。

3.6.2原理：EDTA在PH=10条件下，与水中的钙、镁离子生成无色可溶性络合物，指示剂铬黑T则与钙、镁离子生成紫红色络合物，滴定至终点时，钙、镁离子全部与EDTA络合而使铬黑T游离，溶液即由紫红色变为兰色。

3。6。3试剂：

0.01mol/L乙二胺四乙酸二钠标准溶液:称取 3.72克乙二胺四乙酸二钠

（C

10H

14

N

2

O

3

Na

2

·2H

2

O)溶于纯水中,并稀释至1000ml,标定.

PH=10缓冲溶液

试剂I：称取16。9氯化胺(NHCL）,溶于143ml浓氢氧化铵中。

试剂II：称取0。780克硫酸镁（MgSO

4·7H

2

O）及1.178克乙二胺四乙酸二钠，溶

于50ml纯水中，加入2ml氯化铵—氢氧化铵溶液(试剂I）和5滴铬黑T指示剂（此时溶液应呈紫红色,若为天蓝色，应再加极少量硫酸镁使呈紫红色）。用EDTA溶液滴定至溶液由紫红色变为天蓝色,合并试剂I及试剂II两种溶液，并用纯水稀释至250ml，合并后如溶液又变为紫色,在计算结果时应扣除试剂空白。

注:a、氢氧化铵--——氯化铵缓冲液应贮存于聚乙烯瓶或硬质玻璃瓶中，防止使用中因反复开盖，使氨水浓度降低而影响PH值.

b、配制缓冲液时，加入EDTA—Mg，是为了使某些含镁水样低的样品，滴定终点更敏锐,如果备有市售EDTA-Mg试剂,即可直接取1.25克EDTA—Mg，配入250ml缓冲溶液.

0。5％铬黑T指示剂：称取0。5克铬黑T(C

20H

12

O

7

N

3

Sna)，用95％乙醇溶解并稀释

至100ml，置于冰箱中保存,可稳定一个月.

固体指示剂：称取0。5克铬黑T，加100克氯化钠，研磨均匀,贮于棕色瓶内，密塞备用，可较长期保存。

5%硫化钠溶液:称取5.0克硫化钠（Na

2S·9H

2

O)溶于纯水中，并稀释至100ml.

1.0％盐酸羟胺溶液：称取1。0克盐酸羟胺(NH

2

OH·HCL），溶于纯水中，并稀释于100ml。

3。6.4步骤

吸取50.0ml水样(若硬度过大，可少取水样用水稀释至50ml，若硬度过小，改取100ml），置于150ml三角瓶中.

注：为防止碳酸钙及氢氧化镁在碱性溶液中沉淀,滴定时水样中的钙、镁离子含量,

不能过多，若取50ml水样,所消耗0.01mol/L EDTA溶液的体积应少于15ml。

若水样中含有金属干扰离子使滴定终点延迟或颜色发暗，可另取水样，加入0.5ml 盐酸羟胺溶液及1ml硫化钠溶液或0.5ml氰化钾溶液。

加入1—2ml缓冲溶液及5滴铬黑T指示剂（或一小勺固体指示剂)立即用EDTA标准溶液滴定，充分摇振，至溶液内紫红色变为蓝色，即表示到达终点。

3.6。5计算:

100。00

C

2V

2

×────×1000×1000

1000

C=──────────────

V

水

式中：C

2

为0.01mol/L EDTA标液的实际摩尔浓度。Mol/L

V

2

为耗EDTA标液的毫升数。

V

水

为水样的体积数，ml

C为水样的总硬度(CaCO

3

）mg/L。

3。7氯化物。

氯化物几乎存在在于所有的饮用水中，饮用水中氯化物的测定方法常用的有硝酸银滴定法及硝酸汞滴定法。硝酸银滴定法操作简单，但终点不甚明显；硝酸汞滴定法终点敏税，但测定要求严格控制PH.下面介绍硝酸银滴定法。

3.7。1应用范围：本法适用于测定生活饮用水及其水源中氯化物的含量。溴化物及碘化物均能起相同反应,结果计算中均以氯化物量计入，硫化物、亚硫酸盐、硫代硫酸盐超过15mg/L耗氧量可干扰测定，硫化物等可用过氧化氢氧化除去干扰.耗氧量较高的水样可用高锰酸钾氧化或蒸干灰化等方法处理.本法的最低检测浓度为1.0mg/L。

原理：硝酸银与氯化物作用生成氯化银沉淀，当有多余的硝酸银存在时，则与铬酸钾指示剂反应，生成红色铬酸银沉淀，指示反应达到终点.

3。7。2试剂：

氯化钠标准溶液：将氯化钠（NaCL）置于坩埚内，于700℃灼烧1小时，冷却后称取8.2420克溶于纯水并定容至1000ml，吸取10.0ml,用纯水准确定容至100ml,此溶液1.00ml含0.500mg氯化物。

硝酸银标准溶液：称取2.4克硝酸银(AgNO

3

），溶于纯水并定容至1000ml，用氯化

钠标准溶液进行标定，吸取25。00ml氯化钠标准溶液,置于瓷蒸发皿内.加纯水25ml。

另取一瓷蒸发皿，加50ml纯水作为空白。各加入1ml铬酸钾溶液，用硝酸银标准溶液滴定.同时用玻璃棒不停地搅拌，直到产生淡桔黄色为止，每毫升硝酸银相当于氯化物

(CL-)的毫克数可由下式表示：

25×0。500

W=──────

V

2-V

1

式中：W为每毫升硝酸银相当于氯化物量,mg. V

1

为空白消耗的硝酸银标液的毫升数。

V

2

为NaCL标液消耗硝酸银标液的毫升数。

铬酸钾溶液：称取5克铬酸钾(K

2CrO

4

），溶液于少量纯水中，加入上面硝酸银溶液

至红色沉淀不褪,混匀，放置过夜后过滤.将滤液用纯水稀释至100ml。

氢氧化铝悬浮液：称取125克硫酸铝钾[KAL（SO

4）

2

·12H

2

O]或硫酸铝铵

[NH

4AL(SO

4

)

2

·12H

2

O］溶于1000ml纯水中，加热于60℃,慢慢加入55ml浓氨水，使成

氢氧化铝沉淀.充分搅拌后静置,弃去上清液。反复用纯水洗涤沉淀，至倾出液无氯离子（用硝酸银检定）为止。最后加入300ml纯水成悬浮液，使用前振荡均匀。

酚酞指示剂：称取0.5克酚酞（C

2OH

14

O

4

）溶于50ml95%乙醇中，加入50ml纯水，

再滴加0。05mol/L氢氧化钠溶液,使溶液呈微红色。

0。025mol/L硫酸溶液：吸取1.4ml浓硫酸，加入纯水中，并稀释至1000ml。

0。5mol/L氢氧化钠溶液：称取0。2克氢氧化钠，溶于纯水并稀释至100ml.

30％过氧化氢。

3。7.3步骤：

3.7。3.1水样预处理：

如水样带有颜色，则取150ml水样，置于250ml三角瓶内，加入2ml氢氧化铝悬浮液，振荡均匀,过滤，弃去最初滤下的20ml。

如水样含有亚硫酸盐和硫化物，则加氢氧化钠溶液，将水样调节至中性或弱碱性，加入1ml 30%过氧化氢,搅拌均匀。

如水样的耗氧量超过15ml/L，可加入少许高锰酸钾晶体，煮沸，加入数滴乙醇以除去多余的高锰酸钾，然后过滤。

3。7.3。2取50ml原水样或经过处理的水样(若氯化物含量高可取适量水样，用纯水稀释至50ml），置于瓷蒸发皿内，另取一瓷蒸发皿加入50ml纯水。

分别加入2滴酚酞指示剂，用0.025mol/L硫酸溶液或0。05mol/L NaOH溶液，调节至溶液的红色刚变为无色.再各加1ml铬酸钾溶液，用经过标定的硝酸银标准溶液进行滴定，同时用玻璃棒不停搅拌，直至产生桔黄色为止。

3。7。4计算：

（V

2-V

1

）×W×1000

C=──────────

V

3

式中：C为水样中氯化物（CL—)浓度,mg/L

W为硝酸银标液每毫升相当于氯化物（CL-）的量，mg

V

1

为纯水空白消耗硝酸银标液的毫升数.

V

2

为水样消耗硝酸银标液的毫升数。

V

3

为水样的体积,ml

3。8细菌总数。

细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中,于37℃经24小时培养后，所生长的细菌菌落的总数。

3.8。1平板法

3.8.1。1应用范围

本法适用于测定饮用水和水源中的细菌总数。

所测定的细菌总数增多，说明水被生活废弃物污染，但不能说明污染的来源，因此必须结合总大肠菌群数来判断水污染的来源和安全程度。

3.8.1.2原理

每种细菌都有它一定的生理特性,培养时应用不同的营养条件及其他生理条件（如温度、培养时间、PH、需氧性质)去满足其要求，才能分别地将各种细菌培养出来.在实际工作中，不可能做到,一般是根据测定要求而采用常用方法进行细菌总数的测定,所测定的结果只包括在所使用的条件下生长的细菌总数。

3.8.1.3培养基

3。8.1。3.1成份:

蛋白胨 10g

牛肉膏 3g

氯化钠 5g

琼脂 10—20g

蒸馏水 1000ml

3。8。1。3。2制法

将上述成份混合后，加热溶解,调整PH为7.4-7。6过滤，分装于玻璃容器中,经121℃灭菌20分钟，储存于冷暗处备用。

3。8。1。4步骤：

3.8。1。

4.1生活饮用水

以无菌操作方法用灭菌吸管吸取1ml充分混匀的水样,注入灭菌平皿中，倾注约15ml已融化并冷却到45℃左右的营养琼脂培养基，并立即旋摇平皿，使水样与培养基

充分混匀.每次检验时应做一平行接种，同时另用一个平皿只倾注营养琼脂培养基作为空白对照。

待冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于37℃恒温箱内培养24小时，进行菌落计数，即为水样1ml中细菌总数。

3。8。1.4.2水源水

以无菌操作方法吸取1ml充分混匀的水样,注入盛有9ml灭菌水的试管中，混匀成1：10稀释液.

吸取1：10的稀释液1ml注入盛有9ml灭菌水的试管中，混匀成1:100稀释液,按同法依次稀释成1:1000、1:10000稀释液等备用，吸取不同浓度的稀释液时必须更换吸管。用灭菌吸管取2—3个适宜浓度的稀释液1ml，分别注入灭菌平皿内，以下操作同生活饮用水的检验步骤。

3。8.1。5菌落计数及报告方法。

作平皿菌落计数时，可用眼睛直接观察,必要时用放大

镜检查，以防遗漏。在记下各平皿的菌落数后,应求出同稀释度的平均菌落数，供下一步计算时应用，在求同稀释度的平均数时,若其中一个平皿有较大片状菌落生产时,则不宜采用。而应以无片状菌落生产的平皿作为该稀释度的平均菌落数。若片状菌落不到平皿的一半，而其余一半中菌落数分布又很均匀，则可将此半皿计数后乘2以代表全皿菌落数，然后再求该稀释度的平均菌落数。

3。8。1.6各种不同情况的计算方法。

首先选择平均菌落数在30-300之间者进行计算，当只不有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则即以该平均菌落数乘其稀释倍数报告之（见表18例1）。

若有两个稀释度，其平均菌落数均在30～300之间,则应按两者菌落总数之比值来决定,若其比值小于2应报告两者的平均数。若大于2则报告其中较小的菌落总数。（见表18例2及3）

若所有稀释度的平均菌落数均大于300，则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之(见表18例4）。

若所有稀释度的平均菌落数均小于30，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表18例5).

若所有稀释度的平均菌落数均不在30～300之间，则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之（见表18例6）.

菌落计数的报告：菌落数在100以内时按实有数报告，大于100时,采用二位有效数字，在二位有效数字后面的数值，以四舍五入方法计算，为了缩短数字后面的零数也可用10的指数来表示(见表18“报告方式”栏），在报告菌落数为“无法计数"时,应注明水样的稀释倍数。

表18 稀释度选择及菌落数报告方式

3.9总大肠菌群

在饮用水的微生物安全监测中，普遍采用正常的肠道细菌作为粪便污染指标，而不是直接测定肠道致病菌。

总大肠菌群系指一群需氧及兼性厌氧的，在37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌，总大肠菌群数系指每升水样中所含有的总大肠菌群的数目.

总大肠菌群可用多管发酵法或滤膜法检验。

3.9.1多管发酵法.

3.9.1。1应用范围

本法适用于饮用水、水源水，特别是混浊度含量高的水质中总大肠菌群的测定。

水样中总大肠菌群数的总量,表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能性。

3。9.1。2原理

根据总大肠菌应具有的生物特性,如革兰氏阴性无芽胞杆菌，在37℃24h内能发酵乳糖并产酸产气，能在选择性培养基上产生典型菌落。

3。9。1.3培养基

3。9。1。3.1乳糖蛋白胨培养液

成份

蛋白胨 10g

牛肉膏 3g

乳糖 5g

氯化钠 5g

1。6％溴甲酚紫乙醇溶液 1ml

蒸馏水 1000ml

3.9.1。3。2三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液

按上述乳糖蛋白胨培养液浓缩三倍配制.

3.9。1。3。3品红亚硫酸钠培养基（供多管发酵法用）

成份

蛋白胨 10g

乳糖 10g

磷酸氢二钾 3.5g

琼脂 15-30g

蒸馏水 1000ml

无水亚硫酸钠 5g左右

5%碱性品红乙醇溶液 20ml

3。9.1.3.4伊红美蓝培养基

成份

蛋白胨 10g

乳糖 10g

磷酸氢二钾 2g

琼脂 20—30g

蒸馏水 1000ml

2％伊红水溶液 20ml

0.5%美蓝水溶液 13ml

3.9。1。4步骤：

3。9.1。4.1生活饮用水

初发酵试验:在2个各装有已灭菌50ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的大试管或烧瓶中（内有倒管）内,以无菌操作各加入水样100ml;在10支装有已灭菌5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的试管中（内有倒管）,以无菌操作各加入水样10ml混匀，后置于37℃恒温箱内培养24小时。

平板分离：经培养24小时后,将产酸产气及只产酸的发酵管，分别接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基上，再置于37℃恒温箱内培养18～24小时挑选符合下列特征的菌落，取菌落的一小部分进行涂片.革兰氏染色、镜检.

品红亚硫酸钠培养基上的菌落。

紫红色,具有金属光泽的菌落.

深红色，不带或略带金属光泽的菌落。

淡红色,中心色较深的菌落。

伊红美蓝培养基上的菌落。

深紫黑色，具有金属光泽的菌落.

紫黑色,不带或略带金属光泽的菌落.

淡紫红色,中心色较深的菌落.

1。复发酵试验:上述涂片镜检的菌落如为革兰氏阴性无芽胞杆菌，则挑取该菌落的另一部分再接种于普通浓度乳糖蛋白胨培养液中（内有倒管),每管可接种分离自同一初发酵管的最典型的菌落1~3个，然后置于37℃恒温箱中培养24小时，有产酸产气者（不论倒管内气体多少皆作为产气论），即证实有总大肠菌群存在。

2。根据证实有总大肠菌群存在的阳性管（瓶）数

3。查表19报告每升水样中的总在肠菌群数。

表19总大肠菌群数检数表

3.9。1.4。2水源水

将水样作1：10稀释。

于各装有5ml三倍浓缩乳糖蛋白胨培养液的5个试管中（内有倒管)，各加入10ml 水样，于各装有10ml乳糖蛋白胨培养液的5个试管中（内有倒管），各加入1ml水样，于各装有10ml乳糖蛋白胨培养液的5个试管中（内有倒管），各加入1ml 1：10稀释水样。共计15管，三个稀释度。以后的检验步骤同上述生活饮用水的检验方法。

根据证实有总大肠菌群存在的阳性管数查表20报告每升水样中的总大肠菌群数.

滤膜法。

3。9.1.4.2。1应用范围

本法适用于饮用水和水源水,特别是低浊度水样中总大肠菌群数的测定.

本法适用于较大量水样的测定.

如检验原水样量过少，可加适量灭菌水稀释体积加大后再测定。

3。9。1。4。2原理

滤膜是一种微乳薄膜,孔径0.45-0。65um，能滤过大量水样，并将水中含有的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜贴在选择性培养基上,经培养后直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落,算出每升水样中含有的总大肠菌群数。

3.9。1。4。3培养基

品红亚硫酸钠培养基：

成份

蛋白胨 10g

酵母漫膏 5g

牛肉膏 5g

乳糖 10g

琼脂 15-20g

磷酸氢二钾 3。5g

无水亚硫酸钠 5g左右

5％碱性品红乙醇溶液 20ml

蒸馏水 1000ml

乳糖蛋白胨培养液：同前相同。

乳糖蛋白胨半固体培养基:

成份

蛋白胨 10g

牛肉膏 5g

酵母漫膏 5g

乳糖 10g

琼脂 5g左右

蒸馏水 1000ml

此培养基制成后，需用已知大肠菌群株进行鉴定，应在6-8h产生明显气泡。

3.9.1。

4.4步骤。

3。9。1.4.4.1准备工作

1.滤膜灭菌:将滤膜放入烧杯中，加入蒸馏水,置于沸水浴中煮沸灭菌三次,每次15分钟,前两次煮沸后需更换水洗涤2—3次,以除去残留溶剂.

2.滤器灭菌:用点烯的酒精棉球,火焰灭菌。也可用121℃灭菌20分钟。

3.过滤水样

3。1用无菌镊子夹取灭菌滤膜边缘部分，将粗糙面向上，贴放已灭菌的滤床上，稳妥地固定好滤器，将333ml水样（如水样含菌数较多,可减少过滤水样量）注入滤器中，加盖,打开滤器阀门，在负0。5大气压下抽滤。

3。2水样滤完后，再抽气约5S，关上滤器阀门，取下滤器，用灭菌镊子夹取滤膜边缘部分，移放在品红亚硫酸钠培养基上，滤膜截留细菌面向上，滤膜应与培养基完全贴紧，两者间不得留有气泡，然后将平皿倒置，放入37℃恒温箱内培养22～24小时.

3。9。1.4.5观察结果

挑选符合下列特征菌落进行革兰氏染色，镜验。

紫红色，具有金属光泽的菌落；

深红色，不带或略带金属光泽的菌落；

淡红色，中心色较深的菌落。

3。9。1。4.5.1凡系革兰氏染色阴性无芽胞杆菌，再接种乳糖蛋白胨培养液或乳糖蛋白胨固体培养基（接种前应将此培养基放入水浴中煮沸排气,冷却凝固后方能使用），经37℃培养,前者于24小时产酸产气者，或后者经6～8小时培养后产气者,则判定为总大肠菌群阳性.

3。9.1.4。5。21L水样中总大肠菌群数等于滤膜上生长的大肠菌群菌落总数乘以3。

3.10余氯:

余氯是指水经加氯消毒,接触一定时间后，余留在水中的氯。

余氯有三种形式：总余氯包括HOCL、NH

2CL、NHCL

2

等,化合余氯包括NH

2

CL、NHCL

2

及其它氯胺类化合物,游离余氯包括HOCL及OCL-等。

余氯可用邻联甲苯胺比色法，邻联甲苯胺—亚砷酸盐比色法,N，N一二乙基对苯胺一一硫酸亚铁胺容量法测定。第一法较简单，可测定总余氯及游离余氯。第二法可以分别测定三种形式的余氯，并能去除假色的干扰。第三法可分别测定游离余氯，一氯胺、二氯胺及三氯胺。

邻联甲苯胺比色法：

3。10。1应用范围:本法适用于测定，生活饮用水及其水源水的总余氯及游离余氯；水中含有悬浮性物质时干扰测定，可用离心法去除。干扰物质的最高允许含量如下：高铁0。2mg/L；四价锰0.01mg/L；亚硝酸盐：0。2mg/L。本法最低检测浓度为0.01mg/L 余氯。

3.10。2原理：在PH值小于1.8的酸性溶液中，余氯与邻联甲苯胺反应,生成黄色的醌式化合物，用目视法进行比色定量;还可用重铬酸钾—铬酸钾溶液配制的永久性余氯标准溶液进行比色。

3。10。3永久性余氯比色溶液的配制：

3.10.3.1磷酸盐缓冲贮备溶液:将无水磷酸氢二钠（Na

2HPO

4

）和无水磷酸二氢钾

(KH

2PO

4

）置于105℃烘箱内2小时,冷却后，分别称取22。86克和46.14克。将此两种

试剂共溶于纯水中，并稀释至1000ml.至少静置4天，使其中胶状杂质凝聚沉淀,过滤.

3.10。3.2磷酸盐缓冲液（PH6.45）：吸取200.0ml磷酸盐缓

冲贮备液,加纯水稀释至1000ml。

3.10.3。3重铬酸钾—铬酸钾溶液：称取0.1550克干燥的重铬酸钾（K

2Cr

2

O

7

）及0。

4650克铬酸钾（K

2CrO

4

），溶于磷酸盐缓冲溶液中，并定容至1000ml。

此溶液所产生的颜色相当于1mg/L余氯与邻联甲苯胺所产生的颜色.

3。10。3.4 0。01-1。0mg/L永久性余氯标准比色管的配制方法：按表21所列数量，吸取重铬酸钾—铬酸钾溶液,分别注入50ml刻度具塞比色管中，用磷酸盐缓冲溶液稀释至50ml刻度,避免日光照射,可保存6个月。

若水样余氯大于1mg/L，则需将重铬酸钾—铬酸钾溶液的量增加10倍,配成相当于10mg/L，余氯的标准色。再适当稀释，即为所需的较浓余氯标准色列。

3。10。4试剂:

邻联甲苯胺溶液;称取1。35克二盐酸邻联甲苯胺[（C

6H

3

CH

3

NH

3

)

2

·2HCL］，溶于500ml

纯水中，在不停搅拌下将此溶液加于150ml浓盐酸与350ml纯水的混合液中，盛于棕色瓶内，在室温下保存，可使用6个月，当温度低于0℃时，邻联甲苯胺将析出，不易再溶解.

3.10。5步骤：

3。10.5.1取配制永久性余氯标准比色管用的同型50ml比色管，先放入2。5ml邻联甲苯胺溶液，再加入澄清水样50.0ml，混合均匀，水样的温度最好为15～20℃，如低于此温度，应先将水样管放入温水浴中,使温度提高到15～20℃。

3.10.5.2水样与邻联苯胺溶液接触后,如立即进行比色，所得结果为游离余氯，如

放置10分钟使产生最高色度。再进行比色,则所得结果为水样的总余氯。总余氯减去游离余氯等于化合余氯。

3。10。5.3如余氯浓度很高，会产生桔黄色。若水样碱度过高而余氯浓度较低时，将产生淡绿色或淡蓝色，此时可多加1ml邻联甲苯胺溶液,即产生正常的淡黄色。

3.10。5.4如水样浑浊或色度较高，比色时应减除水样所造成的空白.

表20 总大肠菌群（MPN）检数表

（总接种量55。5ml,其中5份10ml水样；5份1ml水样;5份0.1ml水样）