常见血红蛋白电泳图谱及临床应用
血红蛋白电泳检查(电泳法)
血红蛋白电泳检查（电泳法）1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。
每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。
所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。
所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。
血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。
本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。
多余的染色液用酸性液体洗去。
待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。
运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。
血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。
常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。
清洁试管中，充分混匀。
3. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
4. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
6. 试剂6.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂6.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司6.3 包装规格：150tests6.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶 10块溶血素 1瓶缓冲液条带 10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml点样模具滤纸 10条×1盒6.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。
有效期两年。
7. 仪器设备7.1 仪器名称：SEBIA电泳仪7.2 仪器厂家：法国Sebia公司7.3 仪器型号：HYDRASYS8. 操作步骤8.1 血红蛋白液制作：抗凝血离心，5000rpm，5分钟，去掉血浆，用10倍体积的生理盐水洗涤红细胞3次，若红细胞体积小于10ul，需特别小心。
血红蛋白电泳参考值
血红蛋白电泳参考值血红蛋白电泳是一种常用的临床检验方法，用于评估患者血红蛋白的组成和变异性。
通过电泳的分离，可以分辨出正常和异常的血红蛋白类型，有助于诊断和监测一些血液相关的疾病。
在进行血红蛋白电泳之前，需要了解一些参考值的范围。
血红蛋白由四个亚基组成，即两个α和两个非α亚基。
正常情况下，α亚基与非α亚基的比例是1:1。
血红蛋白电泳的结果一般以不同区域的峰值出现来表示不同类型的血红蛋白。
下面是一些常见的血红蛋白类型及其参考值：1. HbA（Hemoglobin A）：HbA是正常血红蛋白的主要成分，约占总血红蛋白的97%。
其电泳峰值出现在电泳图的最高峰处。
2. HbA2（Hemoglobin A2）：HbA2是正常血红蛋白的一小部分成分，约占总血红蛋白的2.5%。
其电泳峰值出现在HbA之下。
3. HbF（Fetal Hemoglobin）：HbF是胎儿期的主要血红蛋白，出生后会逐渐减少。
正常成人的总血红蛋白中HbF含量应小于1%。
其电泳峰值出现在HbA2之下。
以上三种血红蛋白类型是正常情况下最常见的类型，它们的电泳峰值在正常范围内。
除了上述正常血红蛋白类型之外，血红蛋白电泳还可以检测到其他一些异常类型，常见的包括：1. HbS（Sickle Hemoglobin）：HbS是一种突变的血红蛋白，常见于镰状细胞性贫血患者。
在电泳图上，其峰值出现在HbA下方。
2. HbC（Hemoglobin C）：HbC是一种血红蛋白突变，常见于C型血红蛋白病。
在电泳图上，其峰值出现在HbA2之上。
3. HbE（Hemoglobin E）：HbE是一种常见的血红蛋白突变，常见于东南亚部分地区。
在电泳图上，其峰值出现在HbA之上。
还有一些罕见的血红蛋白突变，如HbD、HbG等，它们的电泳峰值出现在不同位置，具体参考值需要根据具体情况进行分析。
通过血红蛋白电泳的分析，医生可以判断血红蛋白的组成和变异性，从而帮助诊断和监测一些血液相关的疾病。
生化检验辅导：血红蛋白电泳
血红蛋白电泳
珠蛋白生成障碍性贫血是世界上最常见和发病率最高的一种单基因遗传病，常见有两类，即α和β海洋性贫血(以往称地中海贫血)，是由于基因突变引起存在于红细胞内的几种血红蛋白(Hb)合成异常。
此项化验可用于检验异常Hb，进一步诊断一些相关疾病。
参考值
HbA：96％-98％
HbA2：1％--3％
HbF：1％～2％
临床意义
(1)HbA2增高是轻型β—海洋性贫血最重要的诊断依据；
(2)HbS病、β链异常的不稳定Hb病及某些巨幼细胞性贫血患者HbA2也可增高；
(3)缺铁性贫血时，HbA2常降低，可与轻型β—海洋性贫血鉴别；
(4)正常人Hb电泳后，一般只见两条区带(HbA和HbA2)，若出现新的区带，则可能为异常Hb，应进一步检查。
要求
用肝素或EDTA抗凝血。
蛋白电泳临床应用
血清蛋白电泳的临床应用九九重阳君搜集整理蛋白质在人体的生理、病理活动中发挥着极其重要的作用，许多疾病及其过程会显示出其特别的血清蛋白图谱，因此，利用血清电泳能帮助诊断和鉴别诊断各种疾病，以及帮助监视疾病的预后和治疗效果。
血清蛋白电泳是临床实验室检测蛋白质的常用方法。
它的扫描曲线可以直观的显示各种蛋白质组分，为此，血清蛋白电泳图谱至今仍然是了解血清蛋白全貌有价值的方法，用作初筛试验，以提供较全面的信息。
一、正常人血清蛋白电泳图谱及解释正常人血清蛋白电泳图谱，见图3-1，第一幅。
其主要包括五个区带，即白蛋白区带、α1球蛋白区带、α2球蛋白区带、β球蛋白区带、γ球蛋白区带。
（1）白蛋白区带主要有白蛋白构成，正常范围为57-68% ；（2）α1球蛋白区带主要包括抗胰蛋白酶、α1脂蛋白、α1酸性糖蛋白、甲状腺结合球蛋白、凝血酶原等；正常范围为1-5.7%；（3）α2球蛋白区带主要含有α2巨球蛋白、结合珠蛋白、铜蓝蛋白、α2脂蛋白、红细胞生成素等，正常参考范围4.9-11.2%；（4）β球蛋白区带主要含有转铁蛋白、β脂蛋白、补体C3、补体C4、β2微球蛋白等，正常参考范围为7-13%；（5）γ球蛋白区带主要含有IgG、IgM、IgA、IgD、IgE免疫球蛋白，正常参考范围为9.8-18.2%。
二、血清蛋白电泳与疾病在影响蛋白质生产、代谢、分泌的疾病中，可以见到各种常可鉴别的血清蛋白电泳图谱。
比如在单克隆γ球蛋白病、肝硬化、肾功能衰竭、低免疫球蛋白血症及多发性骨髓瘤等病症上，血清蛋白电泳是一项有助于建立诊断的技术。
疾病状态下电泳图谱的解释原则（1）有许多蛋白血清含量很低，往往难于在图谱上显示出明显区带，而被其它高浓度的蛋白所遮盖。
如铜蓝蛋白通常被α2巨球蛋白及结合珠蛋白所覆盖。
（2）有些蛋白如糖蛋白、脂蛋白，染色后着色较差，区带显示不明显。
（3）观察病人电泳图谱时，必须与正常人对照比较。
（4）遇到异常电泳图谱时，应当用免疫化学法做进一步分析，用以决定异常蛋白的性质和含量。
血红蛋白电泳
血红蛋白电泳检查（电泳法）1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。
每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。
所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。
所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。
血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。
本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。
多余的染色液用酸性液体洗去。
待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。
运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。
血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。
常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。
清洁试管中，充分混匀。
4. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
5. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
6. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
7. 试剂7.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂7.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司7.3 包装规格：150tests7.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶10块溶血素1瓶缓冲液条带10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml 点样模具滤纸10条×1盒7.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。
有效期两年。
8. 仪器设备8.1 仪器名称：SEBIA电泳仪8.2 仪器厂家：法国Sebia公司8.3 仪器型号：HYDRASYS9. 操作步骤9.1 血红蛋白液制作：抗凝血离心，5000rpm，5分钟，去掉血浆，用10倍体积的生理盐水洗涤红细胞3次，若红细胞体积小于10ul，需特别小心。
电泳技术及临床应用
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-点样
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-选择电泳类型
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-烘干染色
**市中心医院检验科生化室
操作步骤-扫描
**市中心医院检验科生化室
电泳结果
**市中心医院检验科生化室
2.血清蛋白电泳看的是什么？
含量的变化 : 条带中蛋白含量增或减
血清蛋白成分简介— β1区
转铁蛋白（TRF）是血浆中主要的含铁蛋白质，分子量7.7万，等电 点5.7，半寿期7天，点泳位于β 1区带。血浆中TRF水平可用于贫血 的诊断和对治疗的监测。TRF在急性时相反应中往往降低。因此在炎 症恶性病变时常随着白蛋白和前白蛋白同时下降，在慢性肝病及营 养不良时亦下降，可作为营养状态的一项指标。妊娠及口服避孕药 或雌激素注射可使血浆TRF升高。 血红素结合蛋白（Hpx）分子量为5.7万。和游离血红素有特异结合 能力，可配合结合珠蛋白对血红蛋白进行处理。当广泛溶血时，血 浆结合珠蛋白耗竭，循环中游离的血红可降解为珠蛋白和血红素两 部分，Hp可与血红素可逆结合，而在血循环中反复利用，这是机体 有效地保存铁的又一种方式。 β -脂蛋白：分子量300万。主要功能脂类的运输。肾病患者或某些 肠道疾病患者，常见导致血浆蛋白丢失，由于肝细胞补偿性的合成 增加，β -脂蛋白可有增加。 C4：补体成分，分子量20.6，属急性时相反应蛋白之一，在炎症、 创伤、心肌梗死、感染、肿瘤等情况下可见升高。
**市中心医院检验科生化室
血清蛋白电泳图谱
白蛋白 α1球蛋白区 α2球蛋白区 Β球蛋白区 Γ球蛋白区
**市中心医院检验科生化室
血清蛋白电泳图谱—正常sebia质控
血红蛋白电泳实验报告
实验汇报实验名称：血红蛋白电泳项目名称：两种碱性血红蛋白样品处理方法的电泳结果实验时间：2018年9月17日实验室：龙泉驿区妇幼保健院检验科实验人员：杨松报告单位：成都温伦科技有限公司一、实验目的：1、掌握生理盐水处理血红蛋白样品的方法2、掌握四氯化碳处理血红蛋白样品的方法3、掌握电泳仪实验的操作4、分析两种碱性血红蛋白样品处理方法电泳结果的不同二、实验原理：血红蛋白电泳就是利用在电场的作用下, 由于待分离样品中各种分子带电性质以及分子本身大小, 形状等性质的差异, 使带电分子产生不同的迁移速度, 从而对样品进行分离, 鉴定或提纯的技术，在临床检验中, 主要用于分离各类蛋白分子。
三、实验方法：琼脂糖电泳法四、实验器械：样品：10个EDTA抗凝管抽取的病人全血样品试剂：0.9%生理盐水500ml，四氯化碳500ml，界面液250ml，美国Helena Spife3000血红蛋白电泳检测试剂盒器材：移液枪，一次性移液枪头若干，EDTA抗凝管10个，玻璃试管10个设备：美国Helena Spife3000 全自动电泳仪五、实验步骤：1、取得医院检验科EDTA抗凝管抽取的病人全血样品10个，编号为1，2,3......10。
2、将1-10号十个个样品分别用移液枪取200ul到玻璃试管中，编号为1-1,2-1,3-1,.....10-1。
3、将1-10号10个样品进行生理盐水前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水混匀，3500 rpm离心10分钟.-吸走弃去清液。
-以上步骤连续进行三次。
-完全吸走弃去上清液。
-20ul制作后的样本+80ul溶血素，混匀。
-取溶血后的样本17ul加入样品孔。
4、将1-1到10-1号10个样品进行四氯化碳前处理，处理方法如下：-用0.9%生理盐水溶液5000μL与样品混合。
-3000rpm离心5分钟。
-弃去上清液，只留下红细胞。
-加入200ul 蒸馏水溶解红细胞。
-加入300ul 的四氯化碳，混合均匀，3000rpm离心5分钟。
临床分析血红蛋白电泳检查对血红蛋白病的诊断
临床分析血红蛋白电泳检查对血红蛋白病的诊断血红蛋白病是一类由于遗传缺陷引起的血液疾病，主要表现为血红蛋白的异常合成或结构异常，导致红细胞功能受损。
血红蛋白电泳检查是目前临床诊断血红蛋白病的重要方法之一。
本文将对血红蛋白电泳检查在血红蛋白病诊断中的临床应用进行分析。
一、血红蛋白电泳检查原理及方法血红蛋白电泳检查是运用电泳原理，通过不同血红蛋白组分在电场中迁移速度的差异，分离和检测出异常血红蛋白。
电泳仪器通常采用垂直电泳方式，将血液样品放置在聚丙烯凝胶上，加上电场使样品中的血红蛋白分子沿凝胶呈现不同的电泳迁移速度，形成具有不同区带的电泳图谱。
二、血红蛋白电泳检查对血红蛋白病的诊断意义1. 识别血红蛋白变异及异常血红蛋白电泳检查可明确识别出血红蛋白变异及异常类型，如地中海贫血、镰状细胞性贫血等。
在电泳图谱中，不同血红蛋白类型会呈现出明显的迁移带位移，从而帮助医生进行准确的诊断。
2. 帮助鉴别不同血红蛋白病亚型血红蛋白电泳检查还可用于鉴别不同血红蛋白病的亚型，因为不同的血红蛋白变异物质在电泳图谱中会呈现出特定的迁移带型。
根据电泳图谱的特征，医生可以确定血红蛋白病的具体亚型，指导后续的治疗和管理。
3. 监测疗效及病情变化血红蛋白电泳检查可以用于监测治疗效果以及评估病情变化。
通过定期进行电泳检查，医生可以观察到患者血红蛋白迁移带的变化，进而判断治疗是否有效或病情是否恶化。
这对于调整治疗方案和制定预后判断具有重要意义。
三、血红蛋白电泳检查的限制和注意事项1. 无法检测低浓度血红蛋白变异血红蛋白电泳检查对于低浓度血红蛋白变异的检测较为有限，因为低浓度的变异血红蛋白可能不足以在电泳图谱上显示出明显的迁移带。
在这种情况下，需要结合其他检测方法，如基因测序等，进行综合分析。
2. 存在疾病与正常之间的灰区由于一些血红蛋白变异的存在，使得某些情况下正常个体与患病个体之间存在重叠区域。
这就意味着即使电泳图谱出现异常迁移带，也不能完全肯定患者是否患有血红蛋白病，一定要结合临床症状和其他辅助检验结果进行研判。
血红蛋白电泳
血红蛋白电泳检查（电泳法）1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。
每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。
所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。
所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。
血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。
本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。
多余的染色液用酸性液体洗去。
待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。
运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。
血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血2.3 标本要求：抗凝剂选用EDTA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。
常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。
清洁试管中，充分混匀。
4. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
5. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
6. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
7. 试剂7.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂7.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司7.3 包装规格：150tests7.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶10块溶血素1瓶缓冲液条带10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml 点样模具滤纸10条×1盒7.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。
有效期两年。
8. 仪器设备8.1 仪器名称：SEBIA电泳仪8.2 仪器厂家：法国Sebia公司8.3 仪器型号：HYDRASYS9. 操作步骤9.1 血红蛋白液制作：抗凝血离心，5000rpm，5分钟，去掉血浆，用10倍体积的生理盐水洗涤红细胞3次，若红细胞体积小于10ul，需特别小心。
血清电泳临床意义图标
各位临床医生：我科新购入的全自动蛋白电泳分析仪，可进行血清蛋白电泳及血红蛋白电泳检测，现开展将近一个月了，从开展的情况看，血红蛋白电泳检测项目比较多，可血清蛋白电泳开单比较少，现用图表的格式将血清蛋白电泳检测的临床意义提供给各位，敬请各位临床医生多开单检查！血清蛋白电泳临床意义图表图1 典型的正常的血清蛋白电泳图谱图2 多发性骨髓瘤异常的血清蛋白电泳带型。
请注意gamma区域的带型特点表3.表4：1）持续高浓度型：诊断的特异性高，中晚期肝癌居多；2）马鞍型：较少见，但容易漏诊，当AFP增高在后峰时，往往已出现明显的肝癌表现；3）急剧上升型：多见于肿瘤发生迅速，恶性程度较高的肝癌，但是偶见AFP急剧升高，又迅速下降伴ALT升高的急性肝坏死；4）稳定上升型，定期检查，稳定上升，最有诊断价值；5）反复波浪型，多见于急慢性良性肝病。
并且人血清中的甲胎蛋白浓度的升降对于病情的发展、疗效的观察、肝癌的复发观察有很大的价值。
本公司推出的甲胎蛋白试剂盒是检测人血清中的甲胎蛋白水平，胶乳增强的免疫方法，有较高的准确性和重复性。
HCY:用于检测血浆或血清中的同型半胱氨酸同型半胱氨酸（Hcy）是蛋氨酸代谢产生的一种含硫的氨基酸，80%的Hcy在血中通过二硫键与蛋白结合，只有很少一部分游离同型半胱氨酸参加循环。
Hcy水平与心血管疾病密切相关。
是心血管疾病发病的一个重要危险因子。
血液中增高的Hcy因为刺激血管壁引起动脉血管的损伤，导致炎症和管壁的斑块形成，最终引起心脏血流受阻。
高同型半胱氨酸尿症患者，由于严重遗传缺陷影响Hcy代谢，造成高Hcy血症。
轻微的遗传缺陷或VB营养缺乏会伴随中度或轻度的Hcy升高，也会增加心脏病的危险。
Hcy升高还可引起神经管畸形及先天性畸形等出生缺陷类疾病HbA1C：糖化血红蛋白是美国糖尿病协会，英国糖尿病研究计划和糖尿病控制和临床实验室推荐的一项重要检测项目。
目前，糖化血红蛋白实验反映糖尿病病人近2－3个月的平均血糖水平，用于糖尿病病人的监测管理。
血红蛋白与电泳技术 ppt课件
• HbH病患者脐血中HbBart,s含量约为25%， 成年期HbH约0.8-40%，可有少量HbBart,s，
HbA2减少。HbH-CS病人可有少量HbCS，
约2-3%。HbQ-H病的电泳为约HbQ80%， HbH15-20%，少量的HbBart,s，HbA、
HbA2不存在。
α-地贫的临床分型特征
α-地贫的临床分型特征
• 2、标准型α-地贫：
• 最常见的是-α3.7缺失型的纯合子(-α3.7/ α3.7)，其次是缺失2个α基因(--/αα),如主要 是东南亚缺失型(SEA型)
• 患者无明显临床症状，脐血HbBart,s含 量可达5-15%，成人Hb正常或轻度下 降，MCV、MCH轻度下降，少数可见 包涵体， Hb电泳偶可见HbH。
α-地贫的临床分型特征
• 3、HbH病：由于4个α-基因缺失3个引起， 其临床症状轻重程度取决于其基因型的不同。
• 单纯缺失型出生时贫血较轻或无贫血，此后 逐渐加重，通常为轻到中度贫血，伴有脾肿 大，偶有黄疸，当妊娠、感染、服用氧化性 药物时可加重，发育正常，骨骼面容改变不 明显，非缺失型多为HbH-CS，其发病年龄 较早，贫血较严重，肝脾大明显，多数需输 血， HbH及HbBart,s较高。
血红蛋白与电泳技术
浦北县人民医院 谢正慧 2012.11
血红蛋白的演化
• 2、妊娠中期---肝脾造血期 • ε-肽链合成停止，ζ-肽链合成逐渐停止，α
和γ合成增多--------胎儿型血红蛋白： • HbF(α2 γ2) • 还有少量的HbPortland(ζ2γ2)
血红蛋白的演化
3、妊娠后期---骨髓造血为主。 这时血红蛋白的主要肽链为α和γ，开始合成
总结
• 6、平时工作中，如果有Hb、MCV、MCH 降低的，或血涂片红细胞形态异常的，可 建议电泳排查是否有血红蛋白病或地贫。
血红蛋白电泳
血常规
临床症状
血红蛋白类型
αα/αα
-α/αα
α-地贫杂合子 （静置型）
-α/-α α-地贫纯合子
- -/αα α-地贫杂合子
- -/-α Hb H 病
α-地贫纯合子
- -/- - （水肿胎）
轻度的小红细胞 MCV: 75-80fL MCHC: 20-24
小红细胞贫血 Hb : 11-14g/dL MCV: 65-75 MCHC: 20-24
血红蛋白变异体电泳图谱
自动识别 自动定量
ALPHA-地贫
Strictly confidential to Sebia
Alpha-地贫
4 α genes
-Thal 2 heterozygous
Hb H
-Thal 2 homozygous
-Thal 1 heterozygous
-Thal 1 homozygous
Strictly confidential to Sebia
珠蛋白肽链如何聚合的？
4 α genes
2 β genes
α2β2: Hb A
2 δ genes 2 γ genes
α2δ2: Hb A2
Strictly confidential to Sebia
α2γ2: Hb F
不同时期的珠蛋白链合成
Strictly confidential to Sebia
Alpha地贫（HbH病）
α2β2: Hb A (↘)
β4: Hb H
α2δ2: Hb A2 (↘)
Strictly confidential to Sebia
筛查α-地中海贫血
Hb A
Hb F
Hb Bart’s
血红蛋白电泳(hemoglobin electrophoresis)(HbA2定量)
血红蛋白电泳（hemoglobin electrophoresis）（HbA2定量）实验原理血红蛋白电泳（hemoglobin electrophoresis）目的是检出和确认各种正常和异常的血红蛋白。
根据不同的血红蛋白带有不同的电荷，等电点不同，在一定的pH缓冲液中，血红蛋白的等电点小于缓冲液的pH时带负电荷，电泳时在电场中向阳极泳动，反之，Hb带正电荷向阴极泳动。
在一定电压下，经过一定时间的电泳，不同的血红蛋白所带电荷不同，分子量不同，其泳动方向和速度不同，可分离出各自的区带，同时对电泳出的各区带进行比色或电泳扫描，可进行各种血红蛋白的定量分析。
一般最常用的是pH8.6醋酸纤维薄膜电泳。
胞浆内存在糖原或多糖类物质（如粘多糖、粘蛋白、糖蛋白、糖脂等）中的乙二醇基（CHOH-CHOH）经过碘酸（periodic acid）氧化，转变为二醛基（CHO-CHO），与雪夫(Schiff )试剂中的无色品红结合，形成紫红色染料而沉积于细胞内多糖所在处。
该反应称为过碘酸-雪夫(P AS)阳性反应，以前也称为糖原染色。
实验方法材料：1. 缓冲液（1）pH8.6 TEB缓冲液：称取Tris10.29 g，EDTA 0.6 g，硼酸3.2 g，加蒸馏水至1000 ml。
（2）硼酸盐缓冲液：称取硼砂6.87 g，硼酸5.56 g，加蒸馏水至1000 ml。
2. 醋酸纤维薄膜、电泳仪、加样器、分光光度计、比色杯。
方法：1. 血红蛋白溶液的制备取肝素或者枸橼酸钠抗凝血3 ml，2000 rpm离心10分钟后弃去血浆；用生理盐水洗涤红细胞三次（750 rpm，离心5分钟），再2200 rpm，离心10分钟，弃去上清液；加入等量的蒸馏水；再加入0.5倍体积四氯化碳，用力振摇5分钟，2200 rpm，离心10分钟后将上层Hb液吸出备用。
2. 浸膜将醋酸纤维薄膜剪成3 cm×8 cm的纸条，浸入pH8.6 TEB缓冲液，浸透后取出，用滤纸吸干。
血红蛋白电泳及临床意义
血红蛋白电泳及临床意义血红蛋白电泳可以将血红蛋白中各正常成分或异常成分分离，以便进一步鉴定或定量测定。
用等电聚焦毛细管电泳(CIEF)和区带电泳(CZE)可分离出十几种Hb变异链，有作者采用CZE法对正常人和地中海贫血患者血液样品在pH 11.8碱性磷酸盐缓冲液(PBs)中进行分离，分离的速度很快(<8分钟)，两者的电泳图谱明显不同[1]。
对胎儿红细胞处理后，分离其血红蛋白，可分离出α、β和γ几种球蛋白链，如采用低pH 3.2的缓冲液，虽然分析时间延长，但变异体的分辨效果更佳。
显然CE技术对鉴别诊断血红蛋白病起重要作用。
1 材料与方法1.1 检测对象收集2011年1月～2012年12月受检300例均为门诊进行婚前检查或前前检查人员。
其中男60例，女240例，年龄22～35岁，平均为29岁。
1.2 方法电泳槽中的阳极注入 pH9.1的Tris缓冲溶液，阴极注入 pH8.6的巴比妥缓冲溶液，要求两极液面尽量成同一水平。
把醋酸纤维素薄膜裁成4cm×12cm大小，浸入薄膜浸泡液中10min左右，取出，用滤纸吸去多余浸泡液，把薄膜粗面朝上，贴在电泳槽支架上，用两层纱布搭桥，不接通电源，自由平衡5min。
用血红蛋白吸管吸取2～3μ浓度为1 80～100g/L的血红蛋白溶液，放在盖玻片边缘(盖玻片长约1cm)，把血红蛋白液用盖玻片印在醋酸纤维素薄膜靠阴极一端约1.5cm处(薄膜下衬一片干燥滤纸，吸去多余的血红蛋白液)，同时用正常人血红蛋白液作对照。
接通电源，平衡5min，电压调至150V，电流量约为0.2mA/cm簿膜宽，电泳15～20min。
电泳完毕后，取下薄膜条，置于氨基黑10B染色液里染色10min，取出，用漂洗液漂洗，换液数次，直至薄膜条洁白为止。
2 结果在pH 8.6或pH 8.8电泳时，正常人的血红蛋白A及血红蛋白A2都向正极方向泳动，血红蛋白A在前，血红蛋白A2在后。
但血红蛋白F与血红蛋白A的位置很靠近，难以准确地分离和定量，可作1min碱变性试验，来测定血红蛋白F。
血红蛋白电泳检查（电泳法）
血红蛋白电泳检查（电泳法）1. 原理血红蛋白是由两对多肽链组成的复杂分子。
每一条链含有血红素和络合铁原子的卜啉。
所有血红蛋白的血红素部分都是相同的。
所测定的血红蛋白的蛋白部分称之为珠蛋白。
正常人血红蛋白多肽链包括α、β、δ和γ。
血红蛋白的结构、分子特性取决于形成其肽链的氨基酸顺序和性状。
氨基酸不同可形成不同的血红蛋白，其表面电荷不同，在电场中的泳动率不同。
本实验在碱性（PH=8.60）条件下，以琼脂糖凝胶电泳的方法进行，对红细胞洗涤后造成溶血，电泳分离血红蛋白后以氨基黑染色。
多余的染色液用酸性液体洗去。
待琼脂糖凝胶板干燥后，肉眼可直接判别有无电泳条带异常。
运用光密度扫描仪检测准确定量分析电泳条带异常情况。
血红蛋白异常有二种类型：血红蛋白性质或结构的异常称之为血红蛋白病。
血红蛋白中的一条链合成减少引起血红蛋白性质异常，称之为地中海贫血。
2. 标本采集2.1 标本采集前病人准备：受检者应空腹。
2.2 标本种类：抗凝血2.3 标本要求：抗凝剂选用ED TA，柠檬酸或肝素均可，避免碘乙酸。
常规静脉采血1.8ml，加入含有109mmol/L枸橼酸钠溶液0.2ml的干燥。
清洁试管中，充分混匀。
3. 标本储存：储存于2-8℃冰箱中，5天。
4. 标本运输：储存于2-8℃状态下的冰壶或泡沫箱密封运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染、溶血或脂血标本不能作测定。
6. 试剂6.1 试剂名称：血红蛋白电泳检查试剂6.2 试剂生产厂家：法国Sebia公司6.3 包装规格：150test s6.4 试剂盒组成琼脂糖凝胶 10块溶血素 1瓶缓冲液条带 10包×2条薄滤纸1×10张氨基黑（浓缩液）1瓶×100ml点样模具滤纸 10条×1盒6.5 试剂储存条件及有效期：贮存于室温（15～30℃）或冰箱（2～8℃），不能冷冻。
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Hb A: a2b2 Hb F: a2g2 Hb A2:a2d2
正常新生儿：HbA(α2β2): 12%-40% HbF(α2γ2): 6%-93% HbA2(α2δ2):0.1%-1.0%
血红蛋白是由4条多肽链（2对）和4个可以结合 铁和氧气的血红素组成
一、原理：Hb中的珠蛋白和其他蛋白质一样为两性电解质，在不同的缓冲液中可带正或负电荷，在电场 中向阴极或阳极移动，由于不同的蛋白质之间其等电点、分子大小、形态及所带电荷不同，其移动速率 不同（电泳迁移率不同），在一定的支持介质中可借以分离。 二、仪器：Helena BioSciences SAS-3样本分析系统(英国海伦娜生物科学) 三、操作： （一）血红蛋白液的制取 1、取一份红细胞（或全血）加十份生理盐水洗涤，3000转/分钟离心5分钟，弃盐水 2、洗涤三次后，弃盐水 3、按压积红细胞体积加等体积蒸馏水，摇匀，再加1/2体积的四氯化碳震荡1-3分钟，3000转/分钟离心 5分钟，吸取上层血红蛋白溶液（此浓度约为10%）待用 （二）仪器操作 1、开机 2、吸取30ul血红蛋白溶液加入样本盘 3、取两片点样刀锋放在自动加样器2，14号位，点样的时候把梳子从14号的位置跳至12号位置 4、电泳槽内加界面液（3100） 5、揭掉电泳片表面的保护膜，放入电泳片，避免气泡，擦掉四周多余液 6、用BLOTC吸去电泳片上多作的缓冲液 7、放好碳棒，盖好盖子，按下箭头选择“”为测试项目再按“START”进入程序再按“Enter”开始电 泳，约18分钟，仪器示警，按“STOP”结束操作，打开盖子，铲掉盐桥 8、将电泳片放在染色架上，放入染色槽中，按下箭头选择“START”为测试项目约15分钟，仪器示警， 表示已完成操作，按下“STOP”结束操作 9、拿出电泳片即可扫描
Hb A: a2b2 Hb F: a2g2 Hb A2:a2d2
常见有HbJ, HbK, HbG和HbD