3-2菊花的组织培养
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述菊花是一种常见的观赏植物，其花朵色彩丰富，形态优美，深受人们喜爱。
为了研究菊花的生长发育规律以及促进其繁殖，进行菊花的组织培养实验是一种有效的方法。
本文将详细介绍菊花组织培养实验的设计。
一、实验材料准备1.1 选择适宜的菊花组织在进行菊花组织培养实验时，需要选择健康、无病虫害的菊花植株作为实验材料。
可以选择嫩芽、叶片或花蕾等组织进行培养。
1.2 准备无菌工作环境在进行组织培养实验时，需要准备无菌工作环境，包括无菌培养室、无菌操作台、无菌培养器具等，以确保实验的无菌条件。
1.3 配制培养基根据菊花组织培养的需要，可以选择适宜的培养基，如MS培养基、B5培养基等，并添加适当的植物生长调节剂，如激素等。
二、组织切割和接种2.1 组织切割将选取的菊花组织进行切割，保持组织的完整性，避免受损，以提高组织培养的成功率。
2.2 组织接种将切割好的菊花组织放入含有培养基的培养器具中，进行组织接种，确保组织与培养基充分接触，促进组织生长。
2.3 培养条件控制在组织接种后，需要控制培养条件，如光照、温度、湿度等，以促进组织生长和分化。
三、培养过程管理3.1 培养器具清洁在培养过程中，需要定期清洁培养器具，避免细菌和真菌的污染，影响组织的生长。
3.2 培养基更换随着培养时间的推移，培养基中的营养物质会逐渐耗尽，需要定期更换新的培养基，以维持组织生长所需的营养。
3.3 组织生长监测在培养过程中，需要定期观察和记录组织的生长情况，包括组织的形态、颜色、生长速度等，以及时调整培养条件。
四、组织分化和再生4.1 组织分化诱导通过调节培养基中植物生长调节剂的浓度和种类，可以诱导菊花组织进行分化，形成新的器官或植株。
4.2 再生植株培养对分化成功的组织进行再生培养，培养出新的植株，为菊花的繁殖提供新的途径。
4.3 植株移栽将再生的植株移栽到适宜的生长环境中，进行后续的生长观察和繁殖。
五、实验结果分析5.1 记录实验数据在实验过程中，需要详细记录实验数据，包括组织的生长情况、分化情况、再生植株数量等，以便后续的结果分析。
菊花植物组织培养的实验步骤
菊花植物组织培养的实验步骤菊花植物组织培养是一种常用的无菌培养技术，用于研究植物的生长和发育过程，以及繁殖和遗传改良。
本文将详细介绍菊花植物组织培养的实验步骤，以帮助读者了解该技术的原理和操作过程。
1. 实验材料准备准备所需的实验材料，包括菊花的种子、培养基、无菌器皿、无菌器具等。
确保所有材料都是无菌的，以避免外源性污染对实验结果的影响。
2. 种子消毒将菊花种子浸泡在含有消毒剂的溶液中，如75%酒精或10%次氯酸钠溶液中，进行消毒处理。
消毒时间一般为5-10分钟，然后用无菌的蒸馏水冲洗3-5次，以去除残留的消毒剂。
3. 种子发芽将消毒后的种子均匀地分布在含有适宜培养基的培养皿上，然后密封培养皿，放置在恒温培养箱中进行发芽。
培养温度一般为25-28摄氏度，光照强度为1500-2000勒克斯。
4. 菊花愈伤组织诱导当种子发芽后，将发芽的胚乳离体培养，即将胚乳切割成小块，然后放置在含有适宜激素的培养基中进行培养。
常用的激素包括激素类似物2,4-D、NAA、BA等。
培养基的配方和激素浓度根据具体需求进行调整。
5. 菊花愈伤组织增殖愈伤组织在培养基中生长和分裂，形成愈伤组织的增殖体。
为了促进增殖体的生长，可以适当调整培养基的营养成分和激素浓度。
同时，还要注意定期更换培养基，以保持培养环境的稳定。
6. 菊花愈伤组织分化当愈伤组织增殖体生长到一定程度后，可以调整培养基的激素浓度，促使其分化为植株的各个组织。
例如，降低激素浓度可促进根系的形成，增加激素浓度可促进茎的生长。
7. 植株移栽当菊花愈伤组织分化为植株后，可以将其移栽到含有适宜培养基的培养皿中进行继续培养。
同时，注意给予足够的光照和适宜的温度，以促进植株的生长和发育。
通过以上步骤，我们可以成功地进行菊花植物组织培养实验。
该技术可以用于菊花的无性繁殖、基因转化等研究，为菊花的育种和遗传改良提供了有效的手段。
此外，菊花植物组织培养技术还可以应用于其他植物的研究和开发中，具有广泛的应用前景。
菊花的组织培养.ppt
（六）栽培
幼苗移栽后，每天观察并记录幼苗的生长情 况，适时浇水、施肥，直至开花
思考：在整个操作过程中，是如何来 实现无菌环境的？
2、消毒
① 流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷轻 轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右 ② 酒精处理
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分 数为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即 将外植体取出，在无菌水中清洗
③ 消毒液处理
取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放 入质量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取 出后在无菌水中至少清洗3次，漂净消毒液
实验结果
先生长素， 后细胞分裂素
有利于细胞分裂,但不分化
先细胞分裂素， 后生长素
细胞既分裂也分化
同时使用
分化频率提高
三、影响植物组织培养的因素：
（4）不同植物激素使用量
生长素/细胞分裂素比值 比值高时
比值低时
比值适中
结果 促根分化，
抑芽形成 促芽分化，
抑根形成
促进愈伤组织生长
三、影响植物组织培养的因素：
菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎 上部新萌生的侧枝
三、影响植物组织培养的因素：
（2）离体的植物组织和细胞对营养、环境等条 件的要求相对特殊，需配置适宜的培养基。
MS培养基主要成分包括：
大量元素: N、P、 S 、 K、Ca、Mg等 微量元素: B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等 有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等
（四）培养
接种后的锥形瓶最好放在无菌箱中培养， 培养期间应定期消毒
培养温度控制在18-22℃ 每日用日光灯光照12h
（五）移栽 1、打开封口膜 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养 瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日
《菊花的组织培养》课件
菊花组织培养案例
菊花种子萌发的组织培养
利用组织培养技术，可实现菊花 种子取代传统方式萌发的目的。
菊花组织快速繁殖的组织 培养
通过组织培养技术，可以将菊花 的种子迅速繁殖，提高育种效率。
菊花细胞的悬浮培养
通过菊花细胞的悬浮培养技术， 可以在短时间内大量生产和收获 菊花组织。
常见问题及解决方案
1 细胞污染
《菊花的组织培养》PPT 课件
本课程将介绍如何进行菊花的组织培养。组织培养可以有效地促进植物生长 并获得质量更高的植物。让我们一起开始吧！
概述
什么是组织培养？
组织培养是指利用外界因素来控制细胞组织生 长、分化和发育的一种方法。
组织培养的意义
组织培养可用于繁殖难以育种的珍稀植物，也 可以研究细胞分裂及开发新品种等。
组织培养的发展趋势
未来的发展趋势是要提高组织培养技术的效率 和实用性，广泛应用于众多领域。
进行无菌操作可以避免细 胞污染，严格控制实验条 件。
2 培养基配制不当
按照具体的实验步骤制备 营养液，不同的植物需要 不同的培养基。
3 培养条件不合适
掌握适宜的环境温度、湿 度和通气量等因素，即可 提高菊花的培养成功率。
结语
菊花组织培养的应用前景
组织培养技术在植物学、农业及医学等领域有 广泛应用，将来有望推动更多领域的发展。
菊花的组织培养方法
1
材料准备
2
玻璃器皿、无菌培养基等实验用品。
3
培养基配制
பைடு நூலகம்
4
按照一定比例调配不同种类的营养物质，
如有机物、水、微量元素、激素等。
5
基本步骤
细胞分离、培养基配制、培养条件设置、 菊花细胞的悬浮培养等。
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计引言概述：菊花的组织培养实验是一项重要的研究工作，通过培养菊花组织，可以获得大量的优质菊花种苗，为菊花的繁殖和栽培提供了新的途径。
本文将详细介绍菊花的组织培养实验设计，包括材料准备、培养基配方、培养条件、培养步骤和结果分析等五个部分。
一、材料准备1.1 菊花材料的选择：选择菊花的优质品种作为实验材料，确保实验结果的准确性和可靠性。
1.2 菊花茎段的获取：从健康的菊花植株中选择茎段作为培养的材料，茎段的选择应具备一定的生长活力。
1.3 杀菌用具的准备：准备好消毒酒精、无菌培养器皿、无菌手套等杀菌用具，确保实验环境的无菌。
二、培养基配方2.1 基本培养基的配制：根据菊花的生长特性，配制适合菊花组织培养的基本培养基，包括植物激素和营养物质的添加。
2.2 辅助培养基的添加：根据实验需求，可以添加一些辅助培养基，如生长调节剂、抗生素等，以促进菊花组织的生长和发育。
2.3 pH值和温度的调节：调节培养基的pH值和温度，使其适合菊花组织的生长和发育。
三、培养条件3.1 光照条件的控制：菊花组织培养需要适当的光照条件，可以选择自然光或人工光源，保持适当的光照强度和光照时间。
3.2 温度和湿度的控制：菊花组织培养需要适宜的温度和湿度条件，一般在25-28摄氏度的温度下，相对湿度保持在60-70%。
3.3 氧气和二氧化碳的供应：菊花组织培养需要充足的氧气和适量的二氧化碳供应，可以通过通风和培养器的设计来实现。
四、培养步骤4.1 材料表面消毒：将菊花茎段放入消毒酒精中浸泡，然后用无菌水洗净，使其表面彻底消毒。
4.2 茎段切割和培养：将消毒后的茎段切割成适当的大小，放入培养基中进行培养，培养基中应包含适量的植物激素和营养物质。
4.3 培养条件的控制：将培养器放置在适当的光照条件下，保持适宜的温度和湿度，同时定期通风和补充培养基。
五、结果分析5.1 菊花组织的生长情况：观察菊花组织在培养过程中的生长情况，包括生长速度、形态特征等。
菊花的组织培养优质课件ppt
体 组
脱分化
愈 伤 再分化
芽
织 或 细
细胞分 裂素≈
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
不需要光
需要光
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
（三）植物组织培养的理论基础---细胞全能性
ABCDE
BADCE
ABCDE
ABCDE
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
血红蛋白基因开启
红细胞
合成血红蛋白
肌动蛋白基因关闭 (不合成肌动蛋白)
肌细胞
血红蛋白基因关闭 合成肌动蛋白 肌动蛋白基因开启 (不合成血红蛋白)
2、稳定性
造血干细胞 原红细胞 早幼红细
胞 中幼红细胞 晚幼红细胞 成
熟红细胞 死亡
3、不可逆性
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
细胞分化是
否意味着细胞
中遗传物质的
植物组织培养
从使用情况来看，闭胸式的使用比较 广泛。 敞开式 盾构之 中有挤 压式盾 构、全 部敞开 式盾构 ，但在 近些年 的城市 地下工 程施工 中已很 少使用 ，在此 不再说 明。
（一）植物组织培养概念
在无菌和人工控制条件下，将离体的 植物器官、组织、细胞，培养在人工配置 的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导 其脱分化产生愈伤组织再分化形成丛芽， 最终形成完整的植株。
课题菊花的组织培养
是
。
答案：（1） aB Ab （2）纤维素酶 （3）聚乙二醇 （4）愈伤组织 （5）2 甲、乙两烟草品种旳花粉 48 AaBb 7/16
专题知识归纳
菊花旳组织培养
植物组 织培养
月季旳花药培养
概念：
原理：细胞旳全 基础：
能性
条 件 ： 脱分化
再分化
植物组织培养旳基本过 外植体
愈伤组织
胚状体
程：
外植体旳选择
• 2.你能说出MS培养基中多种营养物质旳作用吗？ 同专题2中微生物培养基旳配方相比，MS培养基 旳配方有哪些明显旳不同？
提醒：微量元素和大量元素提供植物细胞生活所 必需旳无机盐；蔗糖提供碳源，同步能够维持细 胞旳渗透压；甘氨酸、维生素等物质主要是为了 满足离体植物细胞在正常代谢途径受到一定影响 后所产生旳特殊营养需求。微生物培养基以有机 营养为主。与微生物旳培养不同，MS培养基则需 提供大量无机营养，无机盐混合物涉及植物生长 必须旳大量元素和微量元素两大类。
• 取甲乙两品种旳花粉分别培养成植株，将它们旳叶肉细胞制成原 生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放 到不小于800勒克斯光照下培养，成果有旳细胞团不能分化，有 旳能分化发育成植株。请回答下列问题：
• （1）甲、乙两烟草品种旳花粉旳基因型分别为 和 。
• （2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用 破除细胞壁。
• 3．基因型为AaBb旳水稻（24条染色体）旳花药经过无菌操作， 接入试管后，在一定条件下培养形成试管苗。
• （1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成旳不规则旳细胞团，
愈伤组织形成中，必须从培养基中取得
和小分子有机
物等营养物质。
• （2）要增进花粉细胞分裂生长，培养基中应有
3-2菊花的组织培养
PH、激素、 光照
植 物 体
影响植物组织培养的因素
1、外植体的选取 ➢不同植物的组织培养难度不同 ➢同一种植物的不同组织培养难度不同
影响植物组织培养的因素
2、培养基的配制(MS培养基)
影响植物组织培养的因素
2、培养基的配制(MS培养基)
➢大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S ➢微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co ➢有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 ➢植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
③氯化汞（升汞）—无菌水冲洗 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质 量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无 菌水中至少清洗3次，漂净消毒液
实验具体操作过程
流水冲洗
实验具体操作过程
（三）接种 1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子， 接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷 雾使空气消毒，酒精擦洗工作台并用紫外线 照射20分钟。
17、做前，能够环视四周；做时，你只能或者最好沿着以脚为起点的射线向前。。上午12时21分25秒上午12时21分00:21:2522.1.13
9、没有失败，只有暂时停止成功！。22.1.1322.1.13Thursday, January 13, 2022
10、很多事情努力了未必有结果，但是不努力却什么改变也没有。。00:21:2500:21:2500:211/13/2022 12:21:25 AM
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微 生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些 明显的不同？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的 无机盐；
蔗糖提供碳源，同时能够维持细胞的渗透压；
甘氨酸、维生素等物质主要是为了满足离体植物 细胞对特殊营养的需求。
菊花组织培养操作流程及注意事项
菊花组织培养操作流程及注意事项下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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菊花的组织培养精心设计
菊花的组织培养精心设计简介菊花是一种常见的花卉，具有丰富的花形和丰富的花色，备受人们喜爱。
为了满足市场对优质菊花的需求，培育高质量的菊花品种成为了菊花生产的重要环节之一。
本文将介绍菊花的组织培养技术，并提供一套精心设计的菊花组织培养方案。
菊花的组织培养技术菊花的组织培养是利用植物的组织细胞为材料，通过培养基和适当的生长条件，快速繁殖出大量相同的菊花植株。
菊花的组织培养可以有效地提高繁殖效率，加快新品种的选育速度，并且可以克服菊花育种中的某些难点。
菊花的组织培养步骤菊花的组织培养可以分为以下几个步骤：1.材料采集：选择器官发育完全的、无病虫害的菊花植株作为材料，从植株中切取茎段、芽鳞或叶片等组织细胞。
2.无菌处理：将采集到的材料进行表面消毒处理，以保证培养过程中无菌条件的要求。
3.培养基配置：根据菊花的生长需求，配置适宜的培养基，通常包括基本培养基、植物生长调节剂和营养物质等。
4.营养激素添加：根据不同的培养阶段，调整培养基中的营养激素种类和浓度，以促进组织分化和植株生长。
5.培养条件控制：菊花的组织培养需要适宜的光照、温度和湿度等条件，以确保培养过程的顺利进行。
6.观察和记录：定期观察培养过程中的植株生长情况和组织分化情况，并进行记录和分析。
菊花的组织培养方案为了提高菊花的组织培养效果，下面是一套精心设计的菊花组织培养方案：1. 材料采集：选择茎段为材料，茎段长度约为2-3厘米，要选取茎段顶部的生长点。
2. 无菌处理：将采集到的茎段进行外层消毒处理，可以使用75%酒精或次氯酸钠溶液进行浸泡消毒。
3. 培养基配置：本方案采用MS培养基，配方如下：•植物生长调节剂：添加0.3 mg/L的6-BA（6-苄氨基腺嘌呤）和0.1 mg/L的NAA（萘乙酸）。
•pH值调节：将培养基的pH值调整至5.8-6.2。
4. 营养激素添加：根据不同的培养阶段，可以适当调整培养基中的营养激素浓度。
例如，在茎段分化阶段，可以增加6-BA的浓度，以促进茎段的分化生长。
菊花的组织培养
（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再由芽发育成叶 和茎。这一过程必须给予光照，其原因是_____________能利用光 能制造有机物，供试管苗生长发育。
（4）试管苗的细胞核中含_________条脱氧核糖核苷酸链。 （5）培育成的试管苗可能出现的基因型有_____________。 答案：（1）水、无机盐、维生素和小分子有机物 （2）细胞分裂 素 植物生长素 （3）叶绿体 （4）24 （5）AB、aB、Ab、ab
、配置培养基
① 配制培养液 ②调
③培养基的分装 分装到锥形瓶中，每瓶分装或. 由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此 不必添加植物激素.
、灭菌 分装好的培养基连同其他器械一起进行高压蒸 汽灭菌. （二）外植体消毒
、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝. 、消毒
①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可少许洗衣粉，用软刷 轻轻刷洗，刷洗后在流水下冲洗左右.
本课题内容小结
基础知识
实验操作
植物体的 组织培养
影响组织培 养的因素
细胞分化 细胞全能性 组织培养过程 营养 激素 环境条件
固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
作业：
、在植物组织培养过程中，为什么要进行一系列的 消毒、灭菌，并且要求无菌操作。
植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养 条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于 某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养 物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此 要进行严格的无菌操作。
② 酒精处理 用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体 积分数为％的酒精中摇动－次，持续－，立即 将外植体取出，在无菌水中清洗.
菊花的组织培养实验设计
菊花的组织培养实验设计实验名称：菊花的组织培养实验设计摘要：本实验旨在探究菊花的组织培养方法，通过培养菊花的组织，观察和记录其生长情况，以期获得优质的菊花组织培养技术。
引言：组织培养是一种常用的植物繁殖方法，可以通过无菌培养的方式，利用植物的组织和细胞进行繁殖和育种。
菊花作为一种常见的观赏植物，其组织培养技术的研究对于改良菊花品种、提高菊花的生产效益具有重要意义。
本实验设计了一套菊花的组织培养实验方案，旨在通过培养菊花的组织，观察和记录其生长情况，以期获得优质的菊花组织培养技术。
材料与方法：1. 材料准备：- 菊花种子- 培养基：含有适宜激素和营养物质的无菌培养基- 培养器具：无菌培养瓶、试管、无菌操作台等- 消毒液：70%酒精、漂白粉溶液等- 显微镜和显微摄影设备2. 方法步骤：步骤1：准备培养基- 按照菊花组织培养的需求，配制适宜的无菌培养基。
- 使用无菌技术将培养基倒入无菌培养瓶中，并密封。
步骤2：菊花种子消毒- 将菊花种子浸泡于70%酒精中，进行表面消毒。
- 使用无菌操作工具，将种子转移到含有漂白粉溶液的试管中，进行内部消毒。
- 用无菌蒸馏水冲洗种子，以去除漂白粉残留。
步骤3：菊花种子接种- 使用无菌操作工具，将消毒后的种子转移到培养基上。
- 将种子均匀分布在培养基上，避免种子之间的接触。
步骤4：培养条件设置- 将培养瓶密封，放置在适宜的温度和光照条件下。
- 维持适宜的温度（例如25°C）和光照强度（例如2000 lux）。
步骤5：观察和记录- 每隔一段时间，观察菊花组织的生长情况，包括菊花的根、茎、叶和花器官的形成情况。
- 使用显微镜观察细胞的分裂和组织的发育情况。
- 使用显微摄影设备拍摄菊花组织的照片，以记录实验结果。
结果与讨论：通过菊花的组织培养实验，我们可以观察到菊花组织在适宜的培养条件下的生长情况。
根据实验结果，我们可以评估不同培养基对菊花生长的影响，并选择最适合菊花组织培养的培养基配方。
菊花的组织培养.ppt
实验操作流程： （一）制备MS培养基 （二）外植体消毒 （三）接种 （四）培养 （五）移栽 （六）栽培
2、实验具体操作
（1）制备MS固体培养基 4 ℃保存的配制好的培养基 实验室一般使用_____
母液来制备 ①配制各种母液
10倍 配制母液时，大量元素浓缩__________ ，微量 元素浓缩__________ ，常温保存。激素类、维生素 100倍 1mg/ml 的质 类以及用量比较小的有机物可以按照__________ 量浓度单独配制母液。 用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩 倍数，计算用量。
愈 伤 组 织
再分化
根
芽
植 物 体
（二）影响植物组织培养的因素
材料的选择、营养成分、激素、一定的外界 因素（温度、空气、无菌环境、适合的PH、适 时光照等）。
MS固体培养基成分及比例
同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？
阅读课文，思考以下问题
1. 同微生物培养基相比，MS培养基的配方有哪些明显的不同？ 微生物培养基以有机营养为主。与微生物的培养不同， MS培养基则需提供大量无机营养，无机盐混合物包括植 物生长必须的大量元素和微量元素两大类。 2、你认为组织培养过程中，成功的关键有哪些？这些步骤的 适宜条件是什么？ 组织的脱分化及愈伤组织的再分化。 植物组织培养过程中，影响植物细胞脱分化、再分 化的最重要因素是植物激素。
2、实验具体操作
（1）.制备MS固体培养基 实验室一般使用_____ 4 ℃保存的配制好的培养基母液 来制备
③灭菌
将分装好的培养基连同其他器械一起进行
高压蒸汽灭菌 _________________。
2、实验具体操作
（2）外植体消毒 生长旺盛的嫩枝 。 ①选取菊花茎段时，要取 ________________ ②消毒流程： 流水 冲洗 酒精
菊花的组织培养
1．具有某种生物全套
本 课 时 栏 目 开 关
遗传信息
的任何一个活细胞，都
具有发育成
完整个体
的能力， 即每个生物细胞都具有
全能性
。 但在生物体的生长发育过程中并不表现出来，
这是因为在 的
特定的时间和空间
条件下，通过基因
选择性表达
，构成不同组织和器官。
2． 一个高度分化的植物细胞经过细胞 分裂 和细胞 分化 ， 最终形成了完整的植物体，这说明已分化的植物细胞具有
料也会因年龄、保存时间的长短等导致实验结果不同;在植 物组织培养中 ,培养基中常常要添加植物激素 ,但不是都必 须添加植物激素 ,如菊花茎段组织培养不必添加植物激素 ; 各种植物激素的作用是相互联系的,而不是互相独立的。
学习·探究区
第8课时
2．下面为植物组织培养过程图解，以下相关叙述错误的是 ( )
本 课 时 栏 目 开 关
A．b 过程发生了脱分化，在此过程中植物激素不发挥作用 B．c 过程发生了再分化，是愈伤组织重新分化成根或芽等 器官的过程 C． d 过程是在胚状结构外包裹人工胚乳和人工种皮制成人 工种子 D．人工种子可以解决有些作物品种繁殖能力差、结子困 难或发芽率低等问题
学习·探究区
学习·探究区
第8课时
本 课 时 栏 目 开 关
【活学活用】 3． 外植体接种前， 需要将接种室、 接种箱灭菌和对外植体消毒。 某同学依次进行了如下操作： ①接种前一天,将接种室的四个角用甲醛溶液和高锰酸钾熏 蒸。②将灭菌室和接种箱内用紫外灯灭菌。③接种前,操作 者用肥皂清洗双手,擦干,再用酒精棉球擦拭双手。④接种前 1 小时,在接种室内用喷雾器喷洒来苏水;桌椅也用来苏水擦 拭;接种箱内用甲醛溶液和高锰酸钾熏蒸。⑤用次氯酸钠溶 液将外植体消毒。 你认为合理的操作步骤依次是 ( B ) A.①④②③⑤ B.①②④③⑤ C.①④③②⑤ D.①②③④⑤
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无菌条件如何保证？
三、课题延伸
1、一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也 容易进行组织培养 2、实例：芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季
总结植物组织培养过程:
细胞分裂
离
素>生长素
体 组
脱分化
愈 伤
再分化
芽
织 或 细胞分 细 裂素≈
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
本课题内 容小结
基础 知识
实验具体操作过程
2、无菌操作要求 操作要在酒精灯火焰旁完成，每次使
用器械后，都需要用火焰灼烧灭菌，接种 后立即盖好瓶盖。
实验具体操作过程
3、材料的切取和接种 插入时应注意方向，不要倒插，茎段、茎
尖基部插入培养基利于吸收水分和养分。
➢进行外植体的接种
接种前用体积分数为70%的酒精将工 作台擦拭一遍，打开紫外灯照射20分钟。 工作台消毒后，首先点燃酒精灯。
PH、激素
PH、激素、 光照
植 物 体
影响植物组织培养的因素
1、外植体的选取 ➢不同植物的组织培养难度不同 ➢同一种植物的不同组织培养难度不同
影响植物组织培养的因素
2、培养基的配制(MS培养基)
影响植物组织培养的因素
2、培养基的配制(MS培养基)
➢大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S ➢微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co ➢有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等 ➢植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等
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谢谢大家！
4、环境不清洁
影响植物组织培养的因素
4、消毒：在培养的整个过程中，都需要是一 个无菌环境
5、pH、温度、光照 菊花： pH=5.8、温度控制在18—22℃、每日 光照12h
实验具体操作过程
制备MS固 体培养基
外植体消毒
接种
栽培
移栽
培养
实验具体操作过程
（一）制备MS固体培养基
MS培养基包括20多种营养成分，实验 室一般使用4。C保存配制好的培养基母液来 制备。
实验具体操作过程
1、配置各种母液 ①无机物中大量元素浓缩10倍，微量元素浓 缩100倍，常温保存 ②激素类、维生素类以及用量较小的有机物 一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液 ③用母液配制培养基时，需要根据各种母液 的浓缩倍数，计算用量
实验具体操作过程
2、配置培养基 ①定容 ②调PH ③培养基的分装
每种材料或配方至少要做一组以上的重复。 设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培 养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培 养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污 染。
实验具体操作过程
（四）培养 无菌箱中培养，定期消毒，保持适宜的温度， 光照
➢接种后的锥形瓶放在培 养箱或培养室中培养。
➢培养条件：18-22℃， 每日光照12小时。
菊花 组织 培养
实验 操作
植物体 的组织
培养
影响组 织培养 的因素
细胞分化
细胞全能性 组织培养过程
营养 激素 环境条件
MS固体培养基制备 外植体消毒 接种 培养 移栽 栽培
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②愈伤组织是通过细胞分裂形成的，其细胞排 列疏松而无规则，高度液泡化呈无定形状态的 薄壁细胞。
③再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培 养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过 程叫再分化。
三、实验过程
请阅读课本：32页图3-1。
离器官体、的组植织物、脱分化
愈 伤
再分化
根
细胞
组 营养、温度、芽
织 营养、温度、
组织、细胞等，培养在人工配制的培养基上， 给予适当的培养条件，使其生长、增值、分 化成完整植株的技术。
二、实验原理
2、植物细胞的全能性 植物细胞具有全能性，即生物体的细胞
具有使后代细胞形成完整植株个体的能力。 植物细胞表现出全能性的条件： ①离体状态 ②在一定的营养物质、激素和其他外界条件 （光照、温度）
酒精摇动
倾倒酒精
无菌水冲洗
升汞消毒
无菌水冲洗
倾倒升汞
特别提醒：接种过程必须始终在酒精灯旁进 行，每次使用器械后，都需要用火焰灼烧灭 菌，操作过程中避免双手从培养皿上方移动。
特别提醒：每瓶内接种材料不宜过多（建议 4-5个），彼此之间留出一定空间，从而避 免互相污染。
实验具体操作过程
思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实 验吗？
植物组织培养的污染
①细菌污染：菌斑呈粘液状，界限比较明显， 一般接种后1－2天即能发现。主要是大肠杆 菌和链球菌。
植物组织培养的污染
②真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限 不明显，伴有不同颜色的孢子接种后3－10 天才能发现。主要是霉菌污染。
污染途径
1、外植体带菌 3、接种操作时带入
2、培养基及接种 器具灭菌不彻底
③氯化汞（升汞）—无菌水冲洗 取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质 量分数为0.1％的氯化汞溶液中1－2min，取出后在无 菌水中至少清洗3次，漂净消毒液
实验具体操作过程
流水冲洗
实验具体操作过程
（三）接种 1、接种室消毒 污染的主要来源是空气中的细菌和孢子， 接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷 雾使空气消毒，酒精擦洗工作台并用紫外线 照射20分钟。
菊花的组织培养
一、项目介绍
菊花是菊科菊属的多年生宿根草本植物, 是我国的传统名花。
长期以来菊花采用分株、扦插等无性繁殖 方法进行繁殖。但是传统的繁殖方法易受环境 影响,繁殖周期长。
植物组织培养具有增殖效率高、繁殖速度 快等特点,可以用较短的时间和较少的空间生 产出大量的试管苗。
二、实验原理
1、植物组织培养 指在无菌条件下，将离体的植物器官、
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做一枚螺丝钉，那里需要那里上。20. 11.1501 :44:090 1:44No v-2015 -No v-2 0
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（二）外植体消毒 1、选材：菊花茎段，取生长旺盛的嫩枝
实验具体操作过程
2、表面消毒
①流水冲洗
菊花茎段用流水冲洗后可加少许洗衣粉，用软刷轻轻 刷洗，刷洗后在流水下冲洗20min左右
② 酒精处理—无菌水冲洗
用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入体积分数 为70％的酒精中摇动2－3次，持续6－7s，立即将外 植体取出，在无菌水中清洗
实验具体操作过程
3、灭菌
分装好的培养基连同其他器械一起进行高压 蒸汽灭菌。 注意： ①温度为121℃时，维持15-20分钟。若灭菌时 间过长，会使培养基中的某些成分变性失效。 ②某些生长调节剂如赤霉素等以及某些维生素 遇热是不稳定的，不能同培养基一起高压灭菌， 而需要进行过滤灭菌。
实验具体操作过程
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二、实验原理
3、细胞分化 ①定义：在植物的个体发育过程中，细胞在形
态、结构和生理功能上出现稳定性差 异的过程。 ②实质：基因的选择性表达
③结果：形成各种不同的组织和器官
三、实验过程
请阅读课本：32页图3-1。
离器官体、的组植织物、脱分化
愈 伤
细胞
组
根 芽
植 物 体
织
外植体：离体的植物器官或组织片段
影响植物组织培养的因素
3、不同植物激素浓度的使用顺序和使用量
影响植物组织培养的因素
3、不同植物激素浓度的使用顺序和使用量
总结植物组织培养过程:
细胞分裂
离
素>生长素
体 组
脱分化
愈 伤
再分化
芽
织 或 细胞分 细 裂素≈
组 织
根 细胞分裂
植 物 体
胞 生长素
素<生长素
植物组织培养过程示意图
上面的示意图中还有什么地方不够完善的？ 没有进行灭菌处理，试管也没有做密封等。
实验结果
➢5-7天，外植体膨胀、生长，颜色变浅， 若出现染菌，及时转瓶。
实验结果
➢2-3周，愈伤组织开始形成。
染菌5-7天后
染菌1-2周后
实验结果
➢3-5周之后，诱导出的新叶片和芽。
实验具体操作过程
（五）移栽 1、打开封口膜 移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养 瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日 2、清洗转移 用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过 毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间
你能说出各种营养物质的作用吗？同专题2中微 生物培养基的配方相比，MS培养基的配方有哪些 明显的不同？ 微量元素和大量元素提供植物细胞生活所必需的 无机盐；