_安捷伦液相色谱培训教材共81页
2012奇正藏药 安捷伦气相色谱基础培训
转化为易挥发的液体和固体。 分析的有机物,约占全部有机物(约300万种)的20%。 6.不足之处:对被分离组分的定性能力较差。
2019年10月14日星期一
兰州制造中心实验室
1.4 色谱图及有关术语
• 从载气带着组分进入色谱柱起就用检测器 检测流出柱后的气体,并用记录器记录信 号随时间变化的曲线,此曲线就叫色谱流 出曲线,当待测组分流出色谱柱时,检测 器就可检测到其组分的浓度,在流出曲线 上表现为峰状,叫色谱峰。
2019年10月14日星期一
兰州制造中心实验室
• 理解色谱法(Gas Chromatography ) • 主要有2点:一是要 有两相,二是要有差异
。
• 两相:固定相和流动相 • 具体到气相色谱: • 固定相就是色谱柱(column),流动相就是气
体或者称为载气(carrier gas )。 • 差异就是指分配系数的差异。
(HP Part No. 19095Z-123) 载气: Helium, 5.2 psi 炉温: 60 C 进样口: 1 cc, 分流比 5:1 检测器: FID
2019年10月14日星期一
兰州制造中心实验室
药品中溶剂残留: USP 467
1
2
4
1 二氯甲烷(25 ppm) 2 氯仿(12 ppm) 3 苯(25 ppm)
- 不纯样品。 - 固体样品。 - 含有某些不做分析的高沸点 组
分样品。 - 含水量较高的样品。
2019年10月14日星期一
兰州制造中心实验室
应用
水中氯化烃 顶空分析
2
3
1
1. 氯代甲烷 2. 二氯甲烷 3. 三氯甲烷 4. 四氯化碳 4
Agilent 1200高效液相色谱培训材料使用说明书
Agilent 1200 LC[Agilent Chemstation B.04.02 Classic (中文)]现场培训教材安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部一、 目录二、 培训目的 (3)三、 培训准备 (3)1. 仪器准备 (3)2. 溶剂准备 (3)四、 方法建立 (3)1. 开机准备 (3)2. 数据采集方法编辑 (5)9 G1310A(单元泵) (5)9 G1312A,G1312B XL(二元泵)/G1311A(四元泵): (7)9 G1313A(标准型自动进样器),G1329A/B(自动控温自动进样器) (8)9 G1367B/C/D(高性能自动进样器) (9)9 G1328A(手动进样器) (11)9 G1316A,G1316B XL(柱温箱) (11)9 G1314A/B/D/E,G1314C XL(可变波长紫外检测器) (13)9 G1315B/D ,G1315C XL(二极管阵列检测器)/ G1365B/D ,G1365C XL(多波长紫外检测器) (15)9 G1362A(示差检测器) (17)9 G1321A(荧光检测器) (19)9 G4218A(蒸发光散射检测器) (23)3. 数据分析方法编辑 (25)9 谱图优化 (25)9 积分参数优化 (25)9 校正 (27)9 打印报告 (28)9 光谱 (29)4. 建立全新完整方法向导 (31)9 新建完整方法: (32)9 保存方法: (36)9 保存即时改变的方法 (36)9 调用方法: (36)5. 进样 (36)9 单针进样 (36)9 序列进样 (37)五、 关机 (37)1. 关闭检测器的灯 (41)2. 冲洗系统 (41)3. 封存色谱柱 (41)4. 关闭电脑 (41)5. 关闭模块 (41)六、 RRLC(快速液相)注意事项 (41)七、 Agilent 1200保养维护 (43)八、 Agilent 1200常见问题解决方法 (45)二、 培训目的9基本了解1200LC硬件操作。
安捷伦液质联用培训教材(中文版)
=安捷伦 G6300 系列LC/MSD Trap现场培训教材质谱数据系统毛细管电泳液相色谱气相色谱注意包含在该文件中的信息将可能在未通知的情况下改变。
安捷伦科技有限公司不对与该材料有关的任何活动做担保。
这些活动包括但不仅限于为了某特殊目的而进行的销售和适应性。
安捷伦科技有限公司将不会对包含在材料里的与装备,表现和材料使用有关的错误或导致的损失负责。
这份文件中的任何部分都不得拷贝或复制或未经安捷伦科技公司的预先允许进行翻译。
安捷伦科技有限公司售后服务电话:800-8203278手机用户:400-8203278中文网站:/chem/cn2007年6月G6300A 系列离子阱软件概述以及开机关机操作仪器硬件概述1.1典型配置1.2仪器原理简介1.2.1离子阱的主体包含一个环电极和两个端电极,环电极和端电极都是绕Z轴旋转的双曲面,并满足r20=2Z20( r0为环形电极的最小半径,Z0为两个端电极间的最短距离)。
射频电压V rf加在环电极上,两个端电极都处于零电位。
1.2.2与四极杆分析器类似,离子在离子阱内的运动遵循马修方程,也有类似四极杆分析器的稳定图。
在稳定区内的离子,轨道振幅保持一定大小,可以长时间留在阱内,不稳定区的离子振幅很快增长,撞击到电极而消失。
离子阱的操作只有射频RF电压,没有直流DC电压,因此离子阱的操作只对应于稳定图上的X轴。
对于一定质量的离子,在一定V rf下,不同质量数的离子按照m/z由小到大在稳定图的X轴上自右向左排列。
当射频电压从小到大扫描时,排在稳定图上的离子自左向右移动,振幅逐渐加大,依次到达稳定图右边界,从离子阱中抛出,经过高能打拿极然后由电子倍增器检测。
1.3仪器硬件概述1.3.1离子源1.3.2离子源原理1.3.3仪器构造-示意图1.3.4 仪器构造-实物离子阱整体离子阱分解图1.3.5 LC-MSD Trap 的典型操作模式(以MS2为例):首先样品组分通过LC 进行分离,然后通过大气压电离源电离产生离子,离子阱在电场作用下,通过离子电荷控制(ICC )在阱中进行离子累积存储一定数量的离子,然后通过扫描隔离掉低于目标离子质量数的离子,通过在端电极上施加附加电场排除掉阱中高于目标质量数的离子,这个过程为Isolation ,接下来通过在端电极上施加特定离子的共振波形,使其与He 碰撞导致离子内能增加而使离子碎裂,此过程称之为Fragmenation 或CID ,最后在离子阱上扫描Rf 电压得到二级质谱。
安捷伦液相色谱仪讲座 ppt课件
1100 HPLC Maintenance & Troubleshooting
Agilent 1100系列HPLC 工作原理 日常维护 故障诊断 技术支持&服务流程
安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部
2
1100 HPLC Maintenance & Troubleshooting
13
Agilent 1100 四元泵 (G1311A)
14
Agilent 1100 四元泵工作原理
15
Agilent 1100 泵
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
16
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
Pump head screws
17
Agilent 1100 泵头(Pump Head)结构图
Agilent 1100系列密封垫冲洗-Seal Wash ( 可选)
Washer
Seal
Support seal assembly
当流动相中盐浓度>0.01M时,可以 减小密封垫的磨损。 对于Agilent 1100系列泵为可选件 。 用10%异丙醇水溶液冲洗
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带有Seal Wash的泵头结构图
脱气机的操作:操作泵之前,用至少两个体积(标准脱气
机30ml,对微脱气机10ml)冲洗 真空脱气机,特别是当 泵关闭了一段时间后(例如,过夜),以及在通道中使用 挥发性混合溶剂 时。
标准脱气机(G1322A).
标准脱气机每个通道体积为12ml 建议排液操作:5ml/min 排液6min以上。
微脱气机(G1379A).
安捷伦液质联用培训教材(中文版)
=安捷伦 G6300 系列LC/MSD Trap现场培训教材质谱数据系统毛细管电泳液相色谱气相色谱注意包含在该文件中的信息将可能在未通知的情况下改变。
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安捷伦科技有限公司售后服务电话:800-8203278手机用户:400-8203278中文网站:/chem/cn2007年6月G6300A 系列离子阱软件概述以及开机关机操作仪器硬件概述1.1典型配置1.2仪器原理简介1.2.1离子阱的主体包含一个环电极和两个端电极,环电极和端电极都是绕Z轴旋转的双曲面,并满足r20=2Z20( r0为环形电极的最小半径,Z0为两个端电极间的最短距离)。
射频电压V rf加在环电极上,两个端电极都处于零电位。
1.2.2与四极杆分析器类似,离子在离子阱内的运动遵循马修方程,也有类似四极杆分析器的稳定图。
在稳定区内的离子,轨道振幅保持一定大小,可以长时间留在阱内,不稳定区的离子振幅很快增长,撞击到电极而消失。
离子阱的操作只有射频RF电压,没有直流DC电压,因此离子阱的操作只对应于稳定图上的X轴。
对于一定质量的离子,在一定V rf下,不同质量数的离子按照m/z由小到大在稳定图的X轴上自右向左排列。
当射频电压从小到大扫描时,排在稳定图上的离子自左向右移动,振幅逐渐加大,依次到达稳定图右边界,从离子阱中抛出,经过高能打拿极然后由电子倍增器检测。
1.3仪器硬件概述1.3.1离子源1.3.2离子源原理1.3.3仪器构造-示意图1.3.4 仪器构造-实物离子阱整体离子阱分解图1.3.5 LC-MSD Trap 的典型操作模式(以MS2为例):首先样品组分通过LC 进行分离,然后通过大气压电离源电离产生离子,离子阱在电场作用下,通过离子电荷控制(ICC )在阱中进行离子累积存储一定数量的离子,然后通过扫描隔离掉低于目标离子质量数的离子,通过在端电极上施加附加电场排除掉阱中高于目标质量数的离子,这个过程为Isolation ,接下来通过在端电极上施加特定离子的共振波形,使其与He 碰撞导致离子内能增加而使离子碎裂,此过程称之为Fragmenation 或CID ,最后在离子阱上扫描Rf 电压得到二级质谱。
最新安捷伦高效液相色谱工作站高级操作培训ppt课件
Slide 54
自动积分
•检查开始和结束区域,确定噪音。 •赋予初始Slope Sensitivity和Height Reject值. •对第一次积分赋予一个临时峰宽值。 •设置Area Reject为0。 •执行测试性积分,有可能重复几次。 •基于较早洗脱出的色谱峰宽计算峰宽值。 •优化Slope Sensitivity和Height Reject。 •从初始的峰宽和噪音水平计算Area Reject。
Slide 34
泵的辅助功能
选择Instrument More Pump Auxiliary…菜单,即 可弹出下图窗口。
在该窗口可以设置泵 的最大升流速率、泵 冲程大小以及设置溶 剂的压缩补偿因子。
Slide 35
自动进样器的扩展功能
Slide 36
色谱柱信息的输入
Slide 37
VWD停泵扫描采集光谱
Slide 59
Peak width: (半峰宽)
如果没有设置半峰宽的时间积分表,半峰宽在整个积分过程中自动变化,变化 遵从0.75×exiting peak + 0.25×current peak。
Timed Events :(时间性积分事件)
•Area Sum ON or OFF:设定某一时间段内进行峰面积加和,加和后保 留时间被分配到第一个峰的保留时间上。
使用VWD停泵扫描的功能,可以采集样品的吸收光谱, 主要操作步骤如下: 1.在Online工作站界面的View菜单下打开VWD Scans窗口; 2.按照正常的进样方式采集样品色谱数据,并保证能够在
Online Signal窗口中观测到色谱信号; 3.进样后,色谱图上出现基线时,扫描空白吸收光谱
GAgilent 1100制备液相现场培训教材
Agilent 1100 LC制备液相 现场培训教材 安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部 一、 培训目的: ● 基本了解1100LC硬件操作。
● 掌握化学工作站的开机,关机,参数设定,学会数据采集,数据分析的基本操作。
二、 培训准备: 1、仪器设备: Agilent 1100制备液相 ● G1361A :(单元泵);G1391A(梯度泵)。
● G1313A(自动进样器)。
● G1316A(柱温箱)。
● G1315A/B (DAD/MWD检测器)。
● G1364A/B/C/D(馏份收集器)。
● 色谱柱: 2、溶剂准备: ● 色谱级纯或优级纯乙腈(ACN)或甲醇。
● 二次蒸馏水 第 2 页基本操作步骤: (一)、开机: 1、打开计算机,进入Windows NT (或Windows 2000)画面,并运行Bootp Server程序。
2、打开 1100 LC 各模块电源。
3、待各模块自检完成后,双击Instrument 1 Online图标,化学工作站自动与1100LC通讯,进入的工作站画面如下所示。
4、从“View”菜单中选择“Method and Run control”画面, 单击”View”菜单中的“Show Top Toolbar”,“Show status toolbar”,“System diagram”,”Sampling diagram”,使其命令前有“√”标志,来调用所需的界面。
5、把流动相放入溶剂瓶中。
6、打开Purge阀。
(工作站软件上打开Purge阀) 7、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Setup pump选项,进入泵编辑画面。
8 、设Flow:5ml/min,单击OK。
9、单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Pump control选项,选中On,单击OK,则系统开始Purge,直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续Purge,直到所有要用通道无气泡为止。
安捷伦内部工作液相色谱讲座ppt
为重力流出,脱气机或溶剂过滤头堵塞时,溶剂会流出不畅或不流出。
-查看过滤器是否变色. -临时取下过滤器,检查柱前压力是否正常. 清洁溶剂过滤器 -将堵塞的溶剂过滤器从瓶头组件中拿下。先用水冲洗残留之溶剂然后将过滤 器放在装有浓硝酸 (35%)的烧杯里浸一小时。 -用二次蒸馏水彻底冲洗过滤器。建议不使用超声波清洗机清洗。 -将过滤器重新装好。 -建议定期清洗溶剂过滤器及溶剂瓶,每三个月至少清洗一次。 注意:不要使用没有安装溶剂过滤器的系统.可能会严重堵塞系统
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Agilent 四元/二元/单元泵日常维护,故障诊断
当泵头安装有冲洗附件时,由于该附件中也有密封垫,这样就会增加 活塞杆运动时的阻力。所以开泵前一定要用10%异丙醇,并将其流速 调至约20滴/分钟使这溶液流过冲洗装置。
10%异丙醇有助于降低水的表面张力,并有抑菌作用。不要用其它溶 剂代替。 当泵头安装有冲洗附件而不使用,会使密封垫及活塞杆的寿命减短。
安捷伦液相高级操作培训课件
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2005-3-212020/3/28
Slide 5
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化学工作站的Change Access Level功能
如果要使用密码保护化学工作 站,请选中此选项。
化学工作站Scheduler的使用
Result栏中可以显示化学工作站执行 Command的结果
2005-3-212020/3/28
Slide 8
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选择在线信号
从 View菜单, 选择 Online Signals, 单击 Change,在Edit Signal Plot窗
第一章 化学工作站各个工作界面介绍
2005-3-212020/3/28
Slide 3
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化学工作站各个工作界面的切换
切换工作界面
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Slide 4
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第三天
上午:1 个性化报告的设定与编辑 2 工作站故障诊断功能的应用 3 结业考试
结业午餐
下午:1 化学工作站的重新安装、配置及启动(选修) 2 发结业证 3 自由练习、讨论
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安捷伦气相色谱仪培训教材
Agilent 7890/5975-GC/MSD (For 1701E02系列工作站)现场培训教材1安捷伦科技有限公司生命科学与化学分析仪器部2培训目的● 初步了解Agilent 7890气相色谱仪和5975质谱仪的操作。
● 正确地执行仪器的开机、关机;初步掌握软件中有关仪器参数设定、分析方法的编辑、谱库检索及报告的打印。
注意事项:1.老化柱子分段老化。
按温度从低到高分段,程序升温老化。
这是最好的老化方法。
如HP-5柱,5-6℃/min至250℃,反复数次;再升至280℃,反复数次;接到MS上看基线情况。
270℃以后基线提高为正常。
再老化到300℃半小时。
无论何种方式,载气必须充足。
2.进样口用红色或灰色隔垫,可减少隔垫流失。
3.GC/MS接口处使用的垫圈是85%vesper材质 (5062-3508)。
注意安装方向(大的一端朝向质谱)。
4.新柱子安装时无方向性,但一旦使用过,不要再改变方向。
保存柱子时注意将两端密封好,避免水和空气破坏柱子内涂层仪器配置:341. 在操作系统桌面双击Config/配置图标进入仪器配置界面2. 如下图所示点击所要配置的仪器。
配置MSD 及GC :以下采用中文工作站界面,英文工作站请参考相应位置及图标在出现的画面中输入仪器名称、序列号等信息后,在质谱仪一栏中选择MSD 的型号,并输入MSD 的IP 地址,选择DC 极性(标注于MSD 侧板的中部金属上部);同样配置GC 后点击确定退出。
5配置完成后桌面上应出现“GCMS ”和“GCMS Data Analysis ”的图标(名称由配置时输入的仪器名称决定)。
如下图所示:开机1. 打开载气钢瓶(He)控制阀,设置分压阀压力至0.5Mpa2. 打开计算机,登录进入Windows XP系统。
3. 打开7890GC、5975MSD电源(若MSD真空腔内已无负压则应在打开MSD电源的同时用手向右侧推真空腔的侧板直至侧面板被紧固地吸牢),等待仪器自检完毕。
液相色谱基础知识培训教材
Inject Inject
用“5s”法计算柱效
Inject
Good Column
Bad Column
液相色谱基础知本身
. 减小填料的颗粒度 . 找到最佳的流速(根据不同内径) . 合适的温度 . 降低溶剂的粘度 . 增加柱长
液相色谱基础知识培训教材
其他影响柱效的因素
` 柱外效应
. 连接管路 . 进样器、检测器
` 进样体积 ` 进样量
液相色谱基础知识培训教材
容量因子 k'
与峰高的关系
与R的关系
改变k'值的方法∶
调节流动相的极性、pH、离子强度等 梯度淋洗
液相色谱基础知识培训教材
选择性系数 a
` 定义∶
. a =1 时两组分分不开,
` 改变a的途径
程度。是化学因素。 . N 是理论塔板数,描述色谱峰的谱带展宽程
度。
液相色谱基础知识培训教材
色谱柱的柱效 N
理论塔板数计算公式:
W
s
方法
Wtan
16 切线法
Wh
5.54 半峰高
W3s
9
3s
W4s
16
4s
W5s
25
5s
液相色谱基础知识培训教材
用“切线”法计算柱效
不好的色 谱柱的柱效反 而比好色谱柱 的要高,因为 其拖尾部分测 不出来
2020/11/26
液相色谱基础知识培训教材
` “分析型液相色谱” ` 定性及定量分析
. 灵敏度的要求 . 样品的复杂性 . 样品量的要求 . 精度及准确度的要求 . 容易使用
液相色谱基础知识培训教材
液相色谱的应用(二)
安捷伦液相色谱培训教材
第33页/共81页
意味着本次对该部分内容不进行编辑,使用原方法中设置的参数。还有,仪器参数 设置——四元泵的参数设置。1、停止时间:是仪器停止采集数据的时间,并不是 泵停止工作的时间。本例中工作站仅采集0~10分钟的色谱图,10分钟后,不再采 集数据,但泵仍然继续工作,向系统提供流动相。使用自动进样器
第46页/共81页
特别是在VWD设置中更不可选特殊设置中勾选“当关灯时可进行分析”,不然我们 的实验操作就没有意义了。这是为什么,大家一想就知道啦。 还有,在运行时选项表中要注意的问题是,除非有特殊要求,一般不建议选择“保 存GLP数据”、“将方法和数据保存在一起”选项,GLP
第47页/共81页
数据是最原始的数据,不允许改动。一般情 况下选择这两种选项只是浪费硬盘空间而已。 泵的设置方面,特别是梯度洗脱设置中建议 先预览一下,看看是不是我们想要的突变或 浙变效果。 数据分析中重点在于图谱的处理,以及如何 建立校正表。 有时我们得到的色谱图并不很理想,
第12页/共81页
溶剂切换阀,则两个泵头可分别控制两种溶剂,类似四元比例阀,但并不完全一样, 只能同时混合两种溶剂,不可实现四种溶剂的同时使用。
二元泵为高压泵,为后混合式,精度更高,而且由于为高压混合,产生的气泡 也更少,所以价格也比四元泵贵得多。四元泵为低压泵,流速稳定性相对较差,低压 混合容易产生气泡,在实验中常会遇到这样的问题,多元
第25页/共81页
这里还有一点得注意的是流通池的后压力非常重要,一定要使用适当出口连接管, 出口管线要使用专用废液管为系统提供适当的后压,不得私自将废液管截短,以防 气泡进入流通池。但如果压力过高,流通池的石英窗片可能破裂。
在这里我要说的是,对安捷伦1200高效液相色谱仪正确的操作方法和定期的维 护保养的是很重要的。
安捷伦液相色谱仪日常和维护和故障诊疗培训课件
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Agilent 1100/1200 在线脱气机日常维护,故障诊断
防止堵塞溶剂过滤器
污染的溶剂或溶剂瓶里的藻类生长将会缩短溶剂过滤器的使用寿命,并且影 响泵的运行。这在水溶剂或磷酸盐缓冲液 (pH 4 至 7) 中尤其如此。下 列建议 将会延长溶剂过滤器的使用寿命并维持泵的运行。
Agilent 四元/二元/单元泵日常维护,故障诊断
如何更换活塞杆密封圈
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Agilent 四元/二元/单元泵日常维护,故障诊断
Agilent 1100/1200 系列泵使用须知
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入口主动阀
new style
Cartridge 8
出口单向阀
old style
12
3
4
Outlet Ball Valபைடு நூலகம்e
冲洗阀
7
5
Purge Valve
6
Active Inlet Valve
(common to all except 1050)
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1100/1200 HPLC 日常维护 & 故障诊断
Agilent 1100/1200系列 HPLC
工作原理 日常维护 故障诊断 技术支持&服务流程
安捷伦科技有限公司 生命科学与化学分析仪器部
奇正藏药 安捷伦气相色谱基础培训-PPT文档资料97页
b. 保留时间tr:试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组份随 流动相通过柱子的时间t0和组份在固定相中滞留的时间。
c. 调整保留时间tr’ :某组份的保留时间扣除死时间后的保留时间, 它是组份在固定相中的滞留时间。即
tr’= tr -tM 4)色谱峰底宽W :由色谱峰的两边拐点做切线,与基线交点的距离。
安捷伦气相色谱基础培训
2019/9/30
质量C基础知识
2019/9/30
兰州制造中心实验室
1.1 概 述
色谱法是一种分离方法,它利用物质在两相 中分配系数的微小差异进行分离。当两相做 相对移动时,使被测物质在两相之间进行多 次分配,这样原来的微小差异产生了很大的 效果,使各组分分离,以达到分离分析及测 定一些物理化学常数的目的。
2019/9/30
兰州制造中心实验室
根据固定液的化学性能,色谱柱可分为非极性、极性与手性 色谱分离柱等。固定液的种类繁多,极性各不相同。色谱柱 对混合样品的分离能力,往往取决于固定液的极性。常用的 固定液有烃类、聚硅氧烷类、醇类、醚类、酯类以及腈和腈 醚类等。新近发展的手性色谱柱使用的是手性固定液,主要 有手性氨基酸衍生物、手性金属配合物、冠醚、杯芳烃和环 糊精衍生物等。其中以环糊精及其衍生物为色谱固定液的手 性色谱柱,用于分离各种对映体十分有效,是近年来发展极 为迅速且应用前景相当广阔的一种手性色谱柱。 在进行气相色谱分析时,色谱柱的选择是至关重要的。不仅 要考虑被测组分的性质,实验条件例如柱温、柱压的高低, 还应注意和检测器的性能相匹配。有关内容我们将在以后章 节中加以详细讨论。
气密型进样器
顶空 样品 恒温箱 1. 样品放置在一个恒温箱中(或炉中),从而可以达温度平衡。 2. 利用一个气密型的进样器或其它合适的手段取出样品上方的相同的顶空气体。 3. 再使用一般的GC仪器来分析样品的顶空气体。