各种培养基成分
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1.营养肉汤
成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,蒸馏水1000mL,pH7.4。
制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,121℃高压灭菌15min。
2.营养琼脂培养基
成分:蛋白胨10g,牛肉膏3g,氯化钠5g,琼脂17g,蒸馏水1000mL,pH7.2。
制法:将除琼脂外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,分装于烧瓶内,121℃,15min高压灭菌备用。
3.MRS培养基
成分:蛋白胨10g,牛肉膏10g,酵母粉5g,K2HPO4 2g,柠檬酸二铵2g,乙酸钠5g,葡萄
(琼脂15~20g),蒸馏水1000mL。糖20g,吐温80 1mL,MgSO4 .7H2O 0.58g,MnSO4 4H2O 0.25g,
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
4.脱脂乳培养基
成分:牛奶,蒸馏水。
制法:将适量的牛奶加热煮沸20~30min,过夜冷却,脂肪即可上浮。除去上层乳脂即得脱脂乳。将脱脂乳盛在试管及三角瓶中,封口后置于灭菌锅中在108℃条件下蒸汽灭菌10~15min,即得脱脂乳培养基。
5.培养基A
成分:蛋白胨10.0g,酵母提取物1.0g,葡萄糖10.0g,NaCL5.0g,琼脂15.0g,水1000mL。制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至7.0~7.2,分装于三角瓶中,121℃,灭菌15min。
6.PTYG培养基
成分:胰胨Tryptone(Oxoid)5g,大豆蛋白胨5g,酵母粉(Oxoid)10g,葡萄糖10g,吐温80 0 1mL,琼脂15~20g,L-半胱氨酸盐酸盐0.05g,盐溶液4mL。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.8~7.0,分装于三角瓶中,115℃灭菌30min。
盐溶液制备:无水氯化钙0.2g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,MgSO4 。7H2O 0.48g,NaCO3
10g,NaCL 2g,蒸馏水1000mL,溶解后备用。
7.豆芽汁液体培养基
成分:豆芽汁10mL,磷酸氢二铵1g,KCL 0.2g,MgSO4.7H2O 0.2g,琼脂20g。
制法:将以上成分加入到蒸馏水中,加热使完全溶解,调pH至6.2~6.4,分装于三角瓶中,0.04%的溴甲酚紫酒精溶液(黄色5.2~6.8紫色)作为指示剂,115℃灭菌20min。
豆芽汁制备:将黄豆芽或绿豆芽200g洗净,在1000mL中煮沸30 min,纱布过滤得豆芽汁、补足水分至1000mL。
8.麦芽汁琼脂培养基
成分:优质大麦或小麦,蒸馏水,碘液。
制法:取优质大麦或小麦若干,浸泡6~12h,置于深约2cm的木盘上摊平,上盖纱布,每日早、中、晚各淋水一次,麦根伸长至麦粒两倍时,停止发芽晾干或烘干。
称取300g麦芽磨碎,加1000mL水,38℃保温2h,再升温至45℃,30min,再提高到50℃,30min,再升至60℃,糖化1~1.5h。
取糖化液少许,加碘液1~2滴,如不为蓝色,说明糖化完毕,用文火煮半小时,四层纱布过滤。如滤液不清,可用一个鸡蛋清加水约20mL调匀,打至起沫,倒入糖化液中搅拌煮沸再过滤,即可得澄清麦芽汁。用波美计检测糖化液浓度,加水稀释至10倍,调pH5~6,用于酵母菌培养;稀释至5~6倍,调pH7.2,可用于培养细菌,121℃灭菌20min。
9.查(察)氏培养基
成分:NaNO3 2g,K2HPO4 1g,MgSO4. 7H2O 0.5g,KCL 0.5g,FeSO4.7H2O 0.01g,蔗糖30g,琼脂15~20g,蒸馏水1000mL,pH值自然。
制法:加热溶解,分装后121℃灭菌20min。
10.马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)
成分:马铃薯(去皮)200g,葡萄糖(或蔗糖)20g,琼脂20g,水1000mL。
制法:pH值自然。将马铃薯去皮、洗净、切成小块,称取200g加入1000mL蒸馏水,煮沸20min,用纱布过滤,滤液补足水至1000mL,再加入糖和琼脂,溶化后分装,121℃灭菌20min。另外,用少量乙醇溶解0.1g氯霉素,加入1000mL培养基中,分装灭菌后可用于食品中霉菌和酵母菌计数、分离。
11.PY基础培养基
成分:蛋白胨0.5g,酵母提取物1.0g,胰酶解酪胨(Trypticase) 0.5g,盐溶液Ⅱ 4.0mL,蒸馏水1000mL。
盐溶液Ⅱ成分:CaCL2 0.2g,MgSO4.7H2O 0.48g,K2HPO4 1.0g,KH2PO4 1.0g,NaHCO3 10.0g,NaCL 2.0g,蒸馏水1000mL。
制法:加热溶解,分装后121℃灭菌20min。
12.甘露醇琼脂培养基(MSA)
成分:牛肉浸膏1g,月示胨NO.3(Difco)10g,D-甘露醇10g,NaCL 75g,琼脂约13g,酚红0.025g,水1000mL,pH7.2~7.6
制法:按量将各成分(酚红除外)混合,加热使完全溶解,调pH至7.4±0.2。加1%的酚红溶液2.5mL,混匀。121℃高压灭菌15min
13.高氏一号(淀粉琼脂)培养基(主用于放线菌、霉菌培养)
可溶性淀粉20g,KNO3 1g,NaCL 0.5g,K2HPO4 0.5g,MgSO4.7H2O 0.5g,FeSO4.7H2O 0.01g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,121℃灭菌20min。
14.淀粉铵盐培养基(主要用于霉菌、放线菌培养)
可溶性淀粉10g,(NH4)2SO4 2g,K2HPO4 lg,MgSO4.H2O lg,NaCL 1g,CaCO3 3g,蒸馏水1000mL,pH7.2~7.4,121℃灭菌20min。若加入15~20g琼脂即成固体培养基。
15.麦氏培养基(醋酸钠琼脂培养基)
葡萄糖1.0g,KCL 1.8g,酵母汁2.5g,醋酸钠8.2g,琼脂15g,蒸馏水1000mL,pH自然,0.7kg/cm2灭菌30min。
16.高盐察氏培养基(用于霉菌和酵母菌计数、分离用)
硝酸钠2g,磷酸二氢钾1g,硫酸镁(MgSO4 7H2O)0.5g,氯化钾0.5g,硫酸亚铁0.01g,氯化钠60g,蔗糖30g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,115℃灭菌30min。
注:①分离食品和饮料中的霉菌和酵母可选用马铃薯-葡萄糖-琼脂培养基和/或孟加拉红培养基。②分离粮食中的霉菌可用高盐察氏培养基。
17.糖、醇类发酵基础培养基
(1)一般细菌常以休和利夫森二氏培养基