Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱

默克---HILIC柱介绍

affected during eluent optimization.
0
1
2
Retention Time (min)
Injection #1001
Injection #501
BSFBMTPEJTQMBZFE
PDUBOPMXBUFSQBSUJUJPODPFGGJDJFOU
Toluene 甲苯
Hexane 正己烷
2
3
Analyte LogP *

3PCVTU[XJUUFSJPOJDTPSCFOU 强劲的两性离子吸附剂
The ZIC®-HILIC Column is designed to retain and separate all types
通常都很小甚至是负值， normally characterized by a small or negative LogP value*
在反相色谱上保留很弱。 and have poor retention on reversed-phase columns.
The ZIC®-HILIC Column is designed to retain and separate
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亲水作用色谱HILIC实用指南

指导与应用手册· 1亲水作用色谱 HILIC实用指南指导与应用手册2 · HILIC实用指南亲水作用色谱(HILIC)实用指南原著作书名:A Practical Guide to HILIC原著作者:Patrik Appelblad, Tobias Jonsson, Einar Pontén, Camilla Viklund and Wen Jiang中文版编辑：Wen Jiang (江文）ISBN 978-91-631-8370-6瑞典SeQuant AB出版, 地址: Box 7956, 907 19 Umeå, Sweden.版权所有© 2005-2008, SeQuant AB2008年2月第一版，第一次印刷，瑞典于默奥(Umeå)修订及额外资料可以在Merck SeQuant公司网页上找到，网址。

如有其它问题及信息反馈，请与info@联系。

HILIC实用指南–指导与应用手册引言本手册旨在介绍一种适用于分析强极性和强亲水化合物的液相色谱分析方法–亲水作用液相色谱(H ydrophilic I nteraction Li quid C hromatography，HILIC)。

主要介绍HILIC的基本理论和该分离模式下的一些实际问题，同时给读者介绍瑞典SeQuant 公司的ZIC ®-HILIC(硅胶基质)和ZIC ®-p HILIC(聚合物基质) 两性离子液相色谱柱(见图1)，以及使用这两种色谱柱分析不同类型亲水化合物的应用实例。

您也会从本手册中获得该类色谱和其他方面的色谱知识。

图1 ZIC ®-HILIC和ZIC ®-p HILIC两性离子固定相的官能团如果本手册不能解决您的HILIC 问题，SeQuant愿为你提供进一步帮助。

首先，建议您登陆SeQuant 公司网站主页()，从那您能找到关于我们产品的最新文献资料、应用报告和技术数据。

亲水多孔硅胶色谱柱

亲水多孔硅胶色谱柱柱床填充：亲水多孔硅胶（HILIC）色谱柱以其独特的分离机制在色谱领域得到了广泛的应用。

它是一种新型的色谱柱填充材料，能够有效地分离亲水性物质，广泛适用于分析和生物药物制剂的固定相。

亲水多孔硅胶填充物的独特性能使其在分析和制备中具有重要的应用价值。

亲水多孔硅胶色谱柱由一种多孔性硅胶基质组成，具有大的表面积和优异的亲水性能。

柱床填充物的多孔结构可以提供更大的分析表面积，使样品充分与固定相接触，有利于分析物的吸附和分离。

亲水多孔硅胶材料的亲水性能可以与溶液中的亲水性溶剂相互作用，从而实现分析物的选择性分离。

分离机理：亲水多孔硅胶色谱柱的分离机理是基于静电和极性相互作用的。

亲水性化合物在亲水多孔硅胶上发生吸附，而疏水性化合物则迅速通过柱床。

这种分离机理可以用于分离多种亲水性物质，如醇类、酚类、胺类等。

应用领域：亲水多孔硅胶色谱柱在药物分析、环境监测、食品安全等领域具有广泛的应用。

在药物分析中，亲水多孔硅胶色谱柱可以用于分离和定量分析亲水性物质，如抗生素、植物提取物等。

在环境监测中，亲水多孔硅胶色谱柱常用于分离和测定水中的有机污染物，如酚类、抗生素、农药等。

在食品安全领域，亲水多孔硅胶色谱柱可以用于检测食品中的添加剂、农药残留等亲水性物质。

优点：亲水多孔硅胶色谱柱具有以下几个优点。

首先，它的静电和极性相互作用机理适用于各种类型的亲水性化合物分离。

其次，亲水多孔硅胶色谱柱具有优异的选择性和分离效能，能够有效地分离复杂样品。

此外，亲水多孔硅胶色谱柱具有较大的样品容量和较好的重复性，可满足分析研究的需要。

总结：亲水多孔硅胶色谱柱是一种用于分离亲水性物质的重要工具，其独特的分离机理和优异的性能在多个领域得到了广泛的应用。

随着科学技术的不断发展和进步，亲水多孔硅胶色谱柱的分离效能和选择性还将进一步提高，为各种样品的分离和分析提供更好的解决方案。

亲水作用(Hilic)色谱简介,以及和正相色谱相、反相色谱比较

亲水作用（H i l i c）色谱，有时被称为“含水正相色谱”，有时又被称为“反反相色谱”，简单来说，是极性的固定相和极性的流动相组成，参考表1，在固定相方面，看似和正相色谱一样，那么，同一款色谱柱是否既可以用于正相色谱，又可以用于H i l i c色谱？在流动相方面，和反相色谱接近，那两种模式保留行为和流动相对保留的影响规律有什么差异？你对H i l i c色谱是否也疑惑重重？接下来让我们一起揭开亲水作用（H i l i c）色谱的神秘面纱吧。

表1 反相、正相、Hilic色谱对比一、Hilic简介1.1流动相在大多数的Hilic分离中，采用的流动相为含有少量水/缓冲液与有机相混合（典型的是乙腈），水的比例为3%-40%之间。

水的比例不低于3%是由于Hilic色谱的保留机理决定的，普遍认为Hilic色谱流动相中的水会被吸附到极性固定相的表面形成水膜，然后分析物在水膜和流动相之间进行液液分配作用，加上极性官能团和固定相之间的氢键作用力，离子官能团之间的静电作用力等，实现被分析物的保留。

水膜的作用非常重要，所以Hilic流动相中至少含有3%的水。

当水的比例大于40%时，保留一般很弱（k≈0）。

1.2固定相应用于Hilic色谱的固定相有：纯硅胶柱、氨基柱、二醇基柱、酰胺基柱等。

纯硅胶柱有固定相不易流失的优点，在使用CAD、ELSD和LC-MS检测器时，最受欢迎；氨基柱，在Hilic 色谱中的应用，特别适合碳水化合物（糖类）分离；二醇基柱，亲水性很好，可以提供不同的选择性。

二、Hilic和正相色谱相比2.1固定相的区别同样是Silica，NH2，Diol柱，与用于正相色谱中的色谱柱不同，专为Hilic色谱设计的色谱柱，可以用于水/有机物的流动相中，换句话说，Hilic色谱对固定相的耐水性要求更高，否则会因固定相的水解，出现基线噪音大、色谱柱寿命短等问题。

所以用于正相色谱中的色谱柱，不一定能用于Hilic色谱。

糖类化合物亲水作用色谱保留行为评价_傅青

松三糖（ｍｅｌｅｚｉｔｏｓｅ），均购自Ｄｒ．ＥｈｒｅｎｓｔｏｒｆｅｒＧｍ－ｂＨ（Ａｕｇｓｂｕｒｇ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。称取适量的标准品用５０％（ｖ／ｖ）的乙腈水溶液溶解配制成混合标准溶液备用。乙腈（Ｍｅｒｃｋ）、甲醇（Ｍｅｒｃｋ）、丙酮（Ｋｅｒｍｅｌ）均为色谱纯；Ｍｉｌｌｉ－Ｑ超纯水（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ）。甲酸铵和甲酸购自Ａｃｒｏｓ（ＮｅｗＪｅｒｓｅｙ，ＵＳＡ）。１００ｍｍｏｌ／Ｌ甲酸铵缓冲溶液：称取６．３ｇ甲酸铵固体溶入１Ｌ水中制得，并用甲酸将其ｐＨ值调至３．０。药材及样品处理：取干燥的地黄药材２５ｇ，粉碎，用２５０ｍＬ水煎煮１２０ｍｉｎ。固液分离后，固体继续用２５０ｍＬ水再煎煮９０ｍｉｎ。合并两次煎煮液，喷雾干燥。称取上述地黄干粉１０ｍｇ，溶于１ｍＬ水中，使用石墨化碳进行预处理［１８］，收集１５％（ｖ／ｖ）的乙腈水溶液洗脱部分，氮气吹干后，溶于２００μＬ５０％（ｖ／ｖ）的乙腈水溶液中，备用。１．２实验条件流动相：Ａ相为乙腈，Ｂ相为水，Ｃ相为１００ｍｍｏｌ／Ｌ甲酸铵缓冲液（ｐＨ３．０）；考察有机溶剂影响时将乙腈换为甲醇或丙酮；用于建立保留方程的保留时间测定时使用Ａ、Ｂ两相，Ｂ相体积比依次为１０％、１５％、２０％、２５％、３０％、３５％和４０％，预测保留时间时Ｂ相体积比为２２％；考察缓冲盐浓度影响时，Ａ相体积比为７８％，Ｃ相体积比依次为０、５％、１０％、１５％和２０％；每个实验重复两次；流速：１．０ｍＬ／ｍｉｎ；柱温：３０ ℃；检测器：蒸发光散射检测器（ＥＬＳＤ），参数设置为吹扫氮气压力为２．０７×１０５Ｐａ，漂移管温度８５ ℃，增益值１０；保留因子（ｋ）：ｋ＝（ｔＲ－ｔ０）／ｔ０，其中，ｔＲ为溶质保留时间，ｔ０为死时间。ｔ０的测定方法：流动相为１００％乙腈时，进样０．５μＬ甲醇得到的保留时间。实验测得麦芽糖色谱柱的死时间为１．９１２ｍｉｎ。

亲水作用色谱法（HILIC）的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用

亲水作用色谱法（HILIC）的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用秦智莹;任光辉;谭雅男;王永涵;赵娣;李宁;卢杨;陈西敬【摘要】亲水作用色谱法解决了大多数极性化合物的色谱分离问题，其已成为包括铂类抗癌药在内的许多极性化合物的色谱分离的首选。

亲水作用色谱法在极性化合物的分离与检测、药代动力学研究等的应用均日益广泛。

如何高效地完成亲水作用色谱的方法开发是药物分析科学家和药代动力学科学家都面临的重要问题，然而目前还没有专门的文献对此进行系统化的整理和研究。

本文以此为切入点，围绕亲水作用色谱法方法开发中的固定相选择、流动相筛选、pH值与洗脱的优化等方面，综述了亲水作用色谱（HILIC）的方法开发策略，以及其在铂类抗癌药分析中的应用。

【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2018(037)011【总页数】5页(P654-658)【关键词】亲水作用色谱;方法开发;极性化合物;铂类抗癌药【作者】秦智莹;任光辉;谭雅男;王永涵;赵娣;李宁;卢杨;陈西敬【作者单位】中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;【正文语种】中文【中图分类】R917自1990年Alpert首次提出亲水作用色谱(HILIC)的概念，亲水作用色谱便受到了药代动力学科学家们的持续关注与应用研究[1-4]。

直至现在，新的HILIC固定相依旧层出不穷，亲水作用色谱的保留机制仍是色谱分离研究的热点[5-9]。

商业化的亲水作用色谱柱(HILIC)早在2003年初就进入研发阶段，目前市场上已有多种类型的亲水作用色谱柱，涉及的固定相类型也是非常多。

HILIC色谱柱介绍

亲水作用（HILIC）是近年来色谱领域研究的热点之一。

本文简介了HILIC的起源、定义、分离特点；比较了HILIC和反相色谱（RPLC）的选择特性，讨论了HILIC与质谱联用技术的特点，并对其使用中的进行了总结。

1. HILIC的概念亲水色谱（HILIC）是一种用来改善在反相色谱中保留较差的强极性物质保留行为的色谱技术。

它通过采用强极性固定性，并且结合高比例有机相/低比例水相组成的流动相来实现这一目的。

而这样的流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱（ESI-MS）的灵敏度。

2. HILIC的分离机制HILIC的分离机理在目前还存在着争议，主要包括以下三个方面：（1）分配机理（2）离子交换（3）偶极-偶极相互作用。

更多的试验现象则表明HILIC的保留机理包含氢键作用、偶极作用和静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来。

影响保留的主要因素普遍认为HILIC保留行为受到多种参数的影响，如固定相的官能团、有机改性剂的含量、流速、柱温、流动相缓冲体系的pH值、缓冲盐的种类和浓度。

影响样品在固定相上的保留行为的最主要因素都是流动相中有机相的比例，例如乙腈的含量的增加会显着增加样品的保留因子。

在HILIC分离模式中，溶剂洗脱能力由弱到强为：四氢呋喃<丙酮<乙腈<异丙醇<乙醇<甲醇<水, 流动相中水是最强的洗脱溶剂。

一般采用乙腈-水体系作为流动相，其中水相的比例为5%-40%以保证其显着的亲水作用。

如图1所示，将流动相中的水相用甲醇、乙醇、异丙醇代替，随着流动相极性的减小，待测物在柱上的保留就会增强。

Figure 1. HILIC retention as a function of polar modifier. 100 mm length ACQUITY UPLC BEH HILIC column. Peaks: 1 = methacrylic acid, 2 = cytosine, 3 = nortriptyline, 4 = nicotinic acid.4. HILIC与RP-HPLC的比较传统的反相色谱（RPLC）对强极性和亲水性的小分子物质的保留和分离能力较弱，通常流动相需要采用高比例的水相才能实现其保留，然而高比例的水相会导致一系列问题，比如固定相的反浸润和ESI-MS灵敏度的下降。

美国药典色谱柱型号对照之欧阳体创编

美国药典色谱柱型号对照下面是USP规定的编号所对应的色谱柱类型。

L1：十八烷基键合多孔硅胶或无机氧化物微粒固定相，简称ODS柱L2：30～50mm表面多孔薄壳型键合十八烷基固定相，简称C18柱L3：多孔硅胶微粒，即一般的硅胶柱L4：30～50mm表面多孔薄壳型硅胶柱L5：30～50mm表面多孔薄壳型氧化铝柱L6：30～50mm实心微球表面包覆磺化碳氟聚合物，强阳离子交换柱L7：全多孔硅胶微粒键合C8官能团固定相，简称C8柱L8：全多孔硅胶微粒键合非交联NH2固定相，简称NH2柱L9：强酸性阳离子交换基团键合全多孔不规则形硅胶固定相，即SCX柱L10：多孔硅胶微球键合氰基固定相（CN），简称CN柱L11：键合苯基多孔硅胶微球固定相，简称苯基柱L12：无孔微球键合季胺功能团的强阴离子交换柱L13：三乙基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相（C1），简称C1柱L14：10mm硅胶化学键合强碱性季铵盐阴离子交换固定相，简称SAX柱L15：已基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，简称C6柱L16：二甲基硅烷化学键合全多孔硅胶微粒固定相 C2柱L17：氢型磺化交联苯乙烯-二乙烯基苯共聚物,强阳离子交换柱L18：3～10mm全多孔硅胶化学键合胺基（NH2）和氰基（CN）柱L19：钙型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物，强阳离子交换柱L20：二羟基丙烷基化学键合多孔硅胶微球固定相（Diol），简称二醇基柱L21：刚性苯乙烯－二乙烯基苯共聚物微球填料柱L22：带有磺酸基团的多孔苯乙烯阳离子交换柱L23：带有季胺基团的聚甲基丙烯酸甲酯或聚丙烯酸酯多孔离子交换柱L24：表面含有大量羟基的半刚性聚乙烯醇亲水凝胶柱L25：聚甲基丙烯酸酯树脂交联羟基醚（表面含有残余羧基功能团）树脂。

能分离分子量100～5000MW范围的水溶性中性、阳离子型及阴离子型聚合物（用聚氧乙烯测定）的固定相L26：丁基硅烷化学键合全多孔硅胶微球固定相，即C4柱L27：30～50mm的全多孔硅胶微粒L28：多功能载体，100Å的高纯硅胶加以氨基键合以及C8反相键合的官能团L29:氧化铝,反相键合,含碳量低,氧化铝基聚丁二稀小球,5mm，孔径80ÅL30:全多孔硅胶键合乙基硅烷固定相L31:季胺基改性孔径2000Å的交联苯乙烯和二乙烯基苯(55%)强阴离子交换树脂L32: L-脯氨酸铜配合物共价键合于不规则形硅胶微粒的配位体的交换手性色谱填料L33:能够分离分子量4000～40000MW范围蛋白质分子的球形硅胶固定相, pH稳定性好L34：铅型磺化交联苯乙烯－二乙烯基苯共聚物强阳离子交换树脂，9mm球形L35：锆稳定的硅胶微球键合二醇基亲水分子单层固定相，孔径150ÅL36:5mm胺丙基硅胶键合L-苯基氨基乙酸－3,5二硝基苯甲酰L37：适合分离分子量2000～40000MW的聚甲基丙烯酸酯凝胶L38：水溶性甲基丙烯酸酯基质SEC色谱柱L39：亲水全多孔聚羟基甲基丙烯酸酯色谱柱L40：Tris 3,5－二甲基苯基氨基甲酸酯纤维素涂覆多孔硅胶微球L41：球形硅胶表面固定α1酸糖蛋白固定相L42: C8和C18硅烷化学键合多孔硅胶固定相L43:硅胶微球键合五氟代苯基固定相L44:多功能固定相,60 Å高纯硅胶基质键合磺酸阳离子交换功能团和C8反相功能团L45: β-环糊精键合多孔硅胶微球L46:季胺基改性苯乙烯-二乙烯基苯聚合物微球L1 Octadecyl silane chemically bonded to porous silica or ceramic. L1 十八烷基键合硅烷化学键合于多孔硅胶或陶瓷微粒，3-10u。

亲水作用色谱法(HILIC)的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用

亲水作用色谱法(HILIC)的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用秦智莹;任光辉;谭雅男;王永涵;赵娣;李宁;卢杨;陈西敬【期刊名称】《药学研究》【年(卷),期】2018(037)011【摘要】亲水作用色谱法解决了大多数极性化合物的色谱分离问题,其已成为包括铂类抗癌药在内的许多极性化合物的色谱分离的首选.亲水作用色谱法在极性化合物的分离与检测、药代动力学研究等的应用均日益广泛.如何高效地完成亲水作用色谱的方法开发是药物分析科学家和药代动力学科学家都面临的重要问题,然而目前还没有专门的文献对此进行系统化的整理和研究.本文以此为切入点,围绕亲水作用色谱法方法开发中的固定相选择、流动相筛选、pH值与洗脱的优化等方面,综述了亲水作用色谱(HILIC)的方法开发策略,以及其在铂类抗癌药分析中的应用.【总页数】5页(P654-658)【作者】秦智莹;任光辉;谭雅男;王永涵;赵娣;李宁;卢杨;陈西敬【作者单位】中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198;中国药科大学基础医学与临床药学学院,江苏南京211198【正文语种】中文【中图分类】R917【相关文献】1.亲水作用色谱在糖类化合物分析中的应用 [J], 蒲江华;赵峡;韩文伟;白明月2.高效液相色谱法亲水作用模式在亲水化合物分析中的应用 [J], 程继业;程奇蕾;耿颖3.亲水作用色谱及其在环境分析中的应用进展 [J], 郭亚丽;袁琴;李瑞萍;黄应平4.高效液相色谱法亲水作用模式在亲水化合物分析中的应用研究 [J], 宣园园5.亲水作用色谱法（HILIC）的方法开发策略及其在铂类抗癌药分析中的应用 [J], 秦智莹;任光辉;谭雅男;王永涵;赵娣;李宁;卢杨;陈西敬;因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

高效亲水作用色谱-蒸发光散检测应用于甘油磷酸胆碱含量测定

不能用于检测低浓度GPC 样品。

本研究采用HPLC-HILIC-ELSD 方法检测GPC 的含量，色谱柱为Venusil HILIC 色谱柱(4.6 mm ×250 mm ，5 μm)，流动相为0.05 mol/L 乙酸铵水溶液-(以乙腈-甲醇=6∶4)=2∶8，流速1.0 mL/min ，ELSD 检测器，漂移管温度70 ℃。

该方法分析速度快，15 min 即可完成单个样品分析；主要物质GPC 与其他杂质的分离度良好；log 峰面积与log 进样量的线性关系良好，用外标两点法对GPC 进行定量结果准确；方法重现性好，该方法可用于GPC 的定量检测。

1 材料与方法1.1 仪器与试剂仪器：高效液相色谱仪器(岛津CBM-20A)、蒸发光散射检测器(岛津ELSD-LTII)、分析天平(赛多利斯BT125D)、Venusil HILIC(4.6 mm ×250 mm ，5 μm)色谱柱。

试剂：蒸馏水、甘油磷酸胆碱标准品(含量99.5%韩国药典标准品)、甘油磷酸胆碱供试品(中山百灵生物技术有限公司批号GP20630-GP20632)、乙腈(色谱纯，阿拉丁)、乙醇(色谱纯，阿拉丁)、乙酸铵(分析纯，阿拉丁)。

1.2 色谱分析条件高效液相系统：岛津LC-20AT 、等度洗脱、流速1.0 mL/min 、0 引言甘油磷酸胆碱(glycerylphosphorylcholine ，简称GPC)是一种重要的药物原料。

GPC 的分子式为C 8H 20NO 6P ，是有甘油分子和磷酸胆碱基团脱去水分子构成，是重要的神经传递质乙酰胆碱的生物合成前体。

GPC 能在小肠和通过静脉注射吸收，并且能进入脂蛋白的结构中[1]，因此具有药用价值。

研究表明，GPC 有保肝作用[2]，有改善老年人认知能力和记忆力的作用[3]，还有多种健脑功效，因此GPC 在食品、药品、化妆品领域具有重要应用价值。

GPC 含量检测方法的研究有许多。

亲水作用色谱HILIC

亲水作用色谱HILIC亲水作用色谱（Hydrophilic Interaction Chromatography，HILIC）是一种广泛应用于分离和分析水溶性和极性化合物的色谱技术。

相较于传统的反相色谱，HILIC色谱中的固定相具有较高的极性，能够更好地与水溶性化合物发生相互作用，实现它们的分离。

HILIC色谱的原理是基于极性相互作用和水溶性离子交换作用。

在此技术中，流动相通常由水/有机溶剂混合物组成，水作为均相溶剂，有机溶剂中的水分子与固定相上的羟基或氨基等官能团发生相互作用。

这种相互作用可以是静电作用、氢键作用或增强静电作用等。

相比之下，传统的反相色谱通常采用非极性溶剂作为流动相，化合物是通过与非极性碳链上的疏水相互作用分离的。

HILIC色谱的选择固定相的原则是具有较高的极性和较大的表面积。

目前常用的固定相有硅胶、氨基硅胶、糖胶和酰胺硅胶等。

流动相溶剂的组成需要根据目标化合物的特性进行优化选择。

水相的pH值、流速以及有机溶剂含量的改变都会对分离结果产生重要影响。

一般来说，流动相的pH值越接近目标化合物的pKa值，分离效果越好。

HILIC色谱具有许多优势和应用价值。

首先，它能够有效分离极性和水溶性的化合物，包括氨基酸、肽段、核苷酸、酚类、天然产物等。

其次，HILIC色谱对峰形状和分离度的要求相对较低，适用于对样品复杂度要求较高的复杂样品分析。

此外，HILIC色谱还可用于生物样品前处理和中种质标志物的筛选等。

最后，HILIC色谱可以与其他色谱技术如质谱联用，从而进一步提高分析的灵敏度和选择性。

虽然HILIC色谱在水溶性化合物的分离上有诸多优势，但也存在一些挑战和注意事项。

由于流动相中存在水，需要特殊的装置和方法来处理水的吸附和出峰等问题。

此外，流动相中水及其它极性溶剂的挥发性较差，不利于质谱检测。

因此，在HILIC色谱与质谱联用时，需要特殊的接口装置和离子源来处理流动相中的挥发性物质。

总之，亲水作用色谱HILIC是一种有效的色谱技术，适用于水溶性和极性化合物的分离和分析。

Venusil液相色谱柱选购指南

Venusil 液相色谱柱选购指南Venusil XBP色谱柱订购指南XBP-C18：通用型，非极性，两次封尾，广泛的PH适用范围（1.5-10.0）；适用于各类非极性，极性化合物；稳定性好，酸或碱性流动相下都有较好的使用寿命。

一般方法开发时，可作为首选。

（对应：Zorbax XDB-C18,Waters Sunfire-C18,Supelco Asentis,Luna-C18）粒径5um 孔径100Å比表面380m2/g规格（mm） Venusil XBP-C18 Venusil XBP-C8 Venusil XBP-NH2 Venusil XBP-苯基 Venusil XBP-C4 Venusil XBP-C1 Venusil XBP-CN Venusil Silica 价格（￥）2.1×30 VX950302-0 VX850302-0 VN850302-0 VX650302-0 VX450302-0VX150302-0 VC950302-0 Vsi950302-0 2400.002.1×50 VX950502-0 VX850502-0 VN850502-0 VX650502-0 VX450502-0VX150502-0 VC950502-0 Vsi950502-0 2600.002.1×100 VX951002-0 VX851002-0 VN851002-0 VX651002-0 VX451002-0VX151002-0 VC951002-0 Vsi951002-0 3000.002.1×150 VX951502-0 VX851502-0 VN851502-0 VX651502-0 VX451502-0VX151502-0 VC951502-0 Vsi951502-0 3200.004.6×50 VX950505-0 VX850505-0 VN850505-0 VX650505-0 VX450505-0VX150505-0 VC950505-0 Vsi950505-0 2500.004.6×100 VX951005-0 VX851005-0 VN851005-0 VX651005-0 VX451005-0VX151005-0 VC951005-0 Vsi951005-0 2800.004.6×150 VX951505-0 VX851505-0 VN851505-0 VX651505-0 VX451505-0VX151505-0 VC951505-0 Vsi951505-0 2990.004.6×200 VX952005-0 VX852005-0 VN852005-0 VX652005-0 VX452005-0VX152005-0 VC952005-0 Vsi952005-0 3100.004.6×250 VX952505-0 VX852505-0 VN852505-0 VX652505-0 VX452505-0VX152505-0 VC952505-0 Vsi952505-0 3200.004.6×104/包 VX950105-0 VX850105-0 VN850105-0 VX650105-0 VX450105-0 VX150105-0 VC950105-0 Vsi950105-0 1200.00粒径3um 孔径100Å比表面380m2/g 粒径10um 孔径100Å比表面380m2/g 制备柱规格(mm) VenusilXBP-C18 VenusilXBP-C8 价格(￥) 规格(mm) VenusilXBP-C18 VenusilXBP-C8 价格(￥)2.1×30 VX930302-0 VX830302-0 2500.00 10×150 VX901510-0 VSi901510-0 5600.002.1×50 VX930502-0 VX830502-0 2700.00 10×250 VX902510-0 VSi902510-0 5900.002.1×100 VX931002-0 VX831002-0 3100.00 20×50 VX905020-0 VSi900520-0 9500.002.1×150 VX931502-0 VX831502-0 3300.00 20×150 VX901520-0 VSi901520-0 12500.004.6×50 VX930505-0 VX830505-0 3000.00 20×250 VX902520-0 VSi902520-0 15500.004.6×100 VX931005-0 VX831005-0 3600.00 30×150 VX901530-0 VSi901530-0 24500.004.6×150 VX931505-0 VX831505-0 3900.00 30×250 VX902530-0 VSi902530-0 29500.004.6×10，4/包 VX930105-0 VX830105-0 1500.00 50×150 VX901550-0VSi901550-0 42500.0050×250 VX902550-0 VSi902550-0 49500.00Venusil XBP (L) Venusil ASB-C18XBP(L)C18是与 XBP C18相同的键合相，但是比表面较低，使得保留时间缩短。

奶粉中双氰胺的检测方法HPLCUV和HPLCMSMS法

奶粉中双氰胺检测方法（HPLC-UV 和HPLC-MS/MS 法）北京时间1月25日凌晨消息, 新西兰牛奶中发觉了有害物质——双氰胺。

双氰胺又名二氰二胺, 缩写DICY 或DCD 。

即使国际标准未对食品中双氰胺限量, 但高剂量双氰胺对人体是有毒。

本文采取 Cleanert ® MAS-QuChERS-双氰胺净化管和Venusil ® HILIC 液相色谱柱, 建立了奶粉中双氰胺MAS-QuEChERS 快速前处理方法和LC-UV 以及LC-MS/MS 检测方法。

1 试验部分1.1 仪器、试剂与材料高效液相色谱仪, 涡旋振荡器, 超声波清洗机, 氮吹仪。

双氰胺标准品（CAS: 461-58-5; FW=84.08）, Cleanert ® MAS-QuChERS-双氰胺净化管, Venusil ®HILIC 液相色谱柱, 微孔滤膜, 乙酸铵、乙酸、乙腈为色谱纯, 试验用水为超纯水。

图1双氰胺分子式1.2 试验步骤提取、净化: 称取1g 试样于50mL 具塞离心管中, 加入2mL 水溶解后, 加乙腈定容至10mL, 超声10min, 8000r/min 离心5min, 取2mL 上清液加入Cleanert ® MAS-QuChERS-双氰胺净化管填料, 涡旋0.5min, 8000r/min 离心5min, 取上清液过0.22µm 滤膜, 待测。

1.3 试验条件1.3.1高效液相色谱法（HPLC 法）:色谱柱: Venusil ® HILIC （5μm , 100Å, 4.6*250mm ）; 流动相: 10mmol/L 乙酸铵（pH=4.0）: 乙腈=10: 90; 波长: 220nm; 进样量: 10µl; 柱温: 30℃; 流速: 1mL/min 。

1.3.2 LC-MS/MS 法: （1）色谱条件:NH NH 2NH N色谱柱: Venusil® HILIC（5μm, 100Å, 2.1*150mm）;流动相: 0.5mmol/L乙酸铵（pH=4.0）: 乙腈=10:90; 进样量: 10µL; 柱温: 30℃; 流速: 0.2 mL/min。

VenusilHILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱

VenusilHILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱Venusil HILIC丙基酰胺亲水作用液相色谱柱，键合相为中性的酰胺基团。

在处理强极性化合物方面，Venusil HILIC色谱柱比反相C18色谱柱表现出更大的优势，利用亲水作用色谱原理，可保留或分离强极性、水溶性碱性有机化合物。

HILIC是一种亲水作用色谱模式，其洗脱是以化合物亲水性/极性增加的次序排列，典型的流动相是乙腈（40%--97%）－水（或挥发性缓冲盐），所以HILIC色谱具有和反相色谱互补的选择性，同时它可以使用更高挥发性的流动相，增加了HILIC色谱的LC/MS分析灵敏度，降低了分离的压力。

同时HILIC色谱摒弃了离子对试剂，极大的方便了制备色谱方法的开发。

Venusil HILIC色谱柱与传统的氨基柱和硅胶柱相比，Venusil HILIC色谱柱具有更好的重现性和寿命。

Venusil HILIC是是替代氨基柱和硅胶柱的最佳选择。

硅胶纯度>99.999%；pH适用范围2.0-8.0；孔径100?水溶性维生素分析（与硅胶柱比较）另外，Venusil HILIC 由于其出色的亲水性用于测益母草中的盐酸水苏碱已经被中国药典所收录。

从化学结构上看，盐酸益母草碱和盐酸水苏碱由于含有较多的极性基团（-OH、-NH2、-COOH）和孤对电子，水溶性特别强，因此普通的C18反相色谱柱已不能满足此类化合物的分析要求，最重要的原因即亲水性成分在C18柱上没有保留。

而丙基酰胺键合硅胶（HILIC)克服了传统正相色谱柱在水相条件下不稳定的缺点,其常使用流动相是和反相色谱相同的水相缓冲液(< 40%)及有机溶剂,但是其梯度条件通常是初始为高比例有机相，逐步加大水相含量;极性丙基酰胺键合硅胶的HILIC色谱柱在反相条件下，可以有效的保留极性化合物，是一种崭新的极性化合物HPLC分离解决方式.可用于奶粉中双氰胺检测！。

HILIC色谱柱介绍

亲水作用色谱(HＩLIＣ)就是近年来色谱领域研究得热点之一。

本文简介了HＩＬIC得起源、定义、分离特点；比较了ＨIＬIC与反相色谱（RＰＬC）得选择特性，讨论了HILIC与质谱联用技术得特点,并对其使用中得注意事项进行了总结.ﻫ1、HIＬIC得概念亲水色谱（ＨILIＣ)就是一种用来改善在反相色谱中保留较差得强极性物质保留行为得色谱技术。

它通过采用强极性固定性,并且结合高比例有机相/低比例水相组成得流动相来实现这一目得.而这样得流动相组成尤其有利于提高电喷雾离子化质谱（EＳI-MS）得灵敏度。

ﻫ２、HＩLIC得分离机制ﻫHＩLIＣ得分离机理在目前还存在着争议,主要包括以下三个方面：（1）分配机理（2）离子交换(3)偶极—偶极相互作用。

更多得试验现象则表明HIＬIＣ得保留机理包含氢键作用、偶极作用与静电作用等多种次级效应，很难将其区分开来.３、ＨILIＣ影响保留得主要因素普遍认为ＨILIC保留行为受到多种参数得影响，如固定相得官能团、有机改性剂得含量、流速、柱温、流动相缓冲体系得pH值、缓冲盐得种类与浓度。

影响样品在固定相上得保留行为得最主要因素都就是流动相中有机相得比例，例如乙腈得含量得增加会显著增加样品得保留因子。

在ＨILＩC分离模式中,溶剂洗脱能力由弱到强为:四氢呋喃＜丙酮<乙腈〈异丙醇<乙醇<甲醇＜水，流动相中水就是最强得洗脱溶剂。

一般采用乙腈—水体系作为流动相,其中水相得比例为5％-40％以保证其显著得亲水作用.如图1所示,将流动相中得水相用甲醇、乙醇、异丙醇代替，随着流动相极性得减小,待测物在柱上得保留就会增强。

Figure１、ＨILＩC ｒｅtenｔion as aｆｕｎｃtｉoｎof polar ｍodｉfier、１00 ｍm lenｇｔh AＣQＵＩTY UPLC BEH HILICｃolｕmｎ、Peakｓ：1= metｈacｒyl ｉc acｉd, 2 = cｙｔosinｅ，3 = nortripｔｙlｉne, 4 = nｉｃｏtinｉcａcid、4、HILIC与RP－ＨPＬC得比较ﻫ传统得反相色谱（RPLＣ）对强极性与亲水性得小分子物质得保留与分离能力较弱，通常流动相需要采用高比例得水相才能实现其保留,然而高比例得水相会导致一系列问题，比如固定相得反浸润与ＥＳI－MＳ灵敏度得下降。

亲水作用色谱HILIC

IC 离子色谱
高浓度无机盐，酸。很难用来分析适用于离子化合物。含有非挥发性
中性物
的无机盐，酸，不能与质谱联用。
HILIC 亲水色谱
高水溶性有机溶剂，低的缓冲液浓适用于极性和亲水性化合物的液质
度，不使用离子对试剂
联用分析。
The Operation Notes of API LCMSMS (2010)
1.2-HILIC 分离条件
3
1 Alpert A. J. J Chromatogr, 1990, 499: 177.
API 液质联用仪使用笔记(2010)
2HILIC 柱介绍
1
2 HILIC 柱介绍
2.1 HILIC 柱
中性（Neutral）固定相弱（weak）或没有离子交互作用（Ionic interaction）低选择性（less selectivity）
API 液质联用仪使用笔记(2010)
6 所有成分在有机相中的溶解性
3.1.2.1 辛醇-水分配常数（log P） LogP 小于零的小分子含有亲水性、带电的、可离子化的官能团
3-HILIC 液相方法开发
The Operation Notes of API LCMSMS (2010)
4 亲水色谱柱的选择
35
12.3 Merck
35
13 第三篇：分析方法开发
36
13.1 36
14 液相方法的验证
37
15 索引
37
The Operation Notes of API LCMSMS (2010)
表目录
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表目录
表 1-1 四种色谱与质谱联用的优缺点............................................................................................ 2 表 9-1 各品牌pH范围大的反相柱 ........................................................................ 错误！未定义书签。

OSAKA SODA PC HILIC系列液相色谱柱说明书(原资生堂)

PC HILIC系列色谱柱使用说明书在此，非常感谢您选购我公司的聚合物包被型PC HILIC系列色谱柱。

PC HILIC系列色谱柱以CAPCELL PAK填料合成技术应用于独有PC（磷酸胆碱）填料素材而诞生的HILIC模式用色谱柱。

磷酸胆碱结构图在亲水性相互作用法（HILIC）机理下，可实现对常规C18色谱柱保留较弱的强亲水性物质的保留。

与未修饰硅胶作为填料的硅胶色谱柱相比，PC HILIC亲水性更强，能够获得更佳保留分离效果。

物性值如下表所示。

pH范围耐压官能团细孔径粒径比表面积2PC 10 5 450 3-7.5 20 为了能够长期且稳定地使用色谱柱，请在熟读该使用说明书后进行正确使用。

1.色谱柱的启用每一根色谱柱在出厂前，都经过了严格的出厂测试，只有满足出厂标准方可出售。

每一根PC HILIC系列色谱柱的柱盒内均含有色谱柱的性能测试报告供使用者查看。

性能测试报告包含了色谱柱柱号，色谱柱规格，填料批次号，理论塔板数和所用的测试条件等的检测数据。

为了保证色谱柱的正常使用，建议在使用前检查以下事项：1.检查色谱柱包装盒是否完整，有无拆封和碰撞痕迹。

2.色谱柱标签是否与包装上的柱号、柱型相符，色谱柱两端堵头是否完整。

3.色谱柱包装盒内是否有色谱柱性能测试报告。

2.色谱柱的安装2.1安装色谱柱之前，请使用不含有缓冲盐、强酸或强碱的流动相对液相色谱系统进行冲洗置换。

2.2为尽量减少死体积，色谱柱的接头使用了外径1/16英寸配管的螺头(MALE NUT)。

请确保装置的配管接头正确连接，并且锥箍的顶端已插入接头内侧(参照图1)。

若配管不匹配，特别是直接使用其他类型色谱柱所用配管时，锥箍前端的配管长度（图1中的V）与色谱柱尾端接头的长度（图1中的L）经常会不同，因而引发故障。

若L＞V，会产生死体积，甚至出现色谱峰展宽或拖尾现象，并且分离变差。

若L＜V，由于锥箍无法密封，所以会导致漏液。

※频繁更换色谱柱，可能会导致螺头的锥箍损坏而发生漏液现象。

亲水作用色谱HILIC实用指南

亲水作用色谱HILIC实用指南亲水作用色谱（Hydrophilic Interaction Liquid Chromatography，HILIC）是一种基于水相和有机相之间的亲水相互作用的色谱技术。

相比于传统的反相色谱，HILIC具有一些独特的优点，如对极性和亲水性化合物的分离选择性较好，对极性官能团敏感，适用于分离极性和离子性化合物等。

以下是HILIC实用指南，详细介绍了HILIC的原理、方法优化、样品准备和常见应用等方面。

一、HILIC原理HILIC是基于极性固定相和亲水性移动相之间的相互作用来实现对样品化合物分离的一种色谱技术。

相比于反相色谱中的疏水固定相和非极性移动相，HILIC中使用的固定相具有较高的极性和亲水性，移动相则是非极性有机溶剂和含水溶液的混合物。

在HILIC中，样品中的化合物首先与亲水性固定相发生强烈的相互作用，然后通过梯度洗脱或改变移动相极性的方法实现化合物的分离。

这种固定相与样品的亲水性相互作用可以增加样品组分之间的分离度和选择性，尤其对于氮、氧和硫等极性官能团的分离具有良好的效果。

二、HILIC方法优化1.移动相优化：常用的HILIC移动相是乙腈和水的混合物，其中乙腈的含量通常在60-90%之间，水的含量根据目标分离和分析目的进行调整。

对于样品的初步试验分析可以根据目标分离的极性化合物进行初始移动相的优化。

2.固定相优化：目前市面上有多种亲水性固定相可供选择，常用的有含亲水性官能团的硅胶、硅胶微球和羧甲基纤维素等。

选择合适的固定相应根据分离目标化合物和分析需求进行选择。

3.样品前处理：对于复杂的样品矩阵，在进行HILIC分析前需要进行样品前处理。

常见的前处理方法包括固相萃取、离子交换、凝胶层析等。

三、样品准备1.溶解样品：将样品溶解在适当的溶剂中，并通过离心或过滤等方法去除杂质，以减少对固定相和仪器的污染。

2.样品浓度：根据仪器的灵敏度和样品的特点，合理调整样品的浓度，以确保在HILIC条件下能够得到明确的色谱峰，并最大限度地避免样品的淡化或浓缩效应。

丙基酰胺键合硅胶色谱柱

丙基酰胺键合硅胶色谱柱
丙基酰胺键合硅胶色谱柱是一种用于分离不同分子量的有机物的高效液相色谱仪。

它是一种以丙基酰胺（ACN）为溶剂的高效液相色谱仪，柱子内部由硅胶材料和丙基酰胺结合而成。

该柱子可将大分子固体物质转化为小分子溶液，然后在有机溶剂中进行分离。

丙基酰胺键合硅胶色谱柱的优势在于，它可以分离出大分子尺寸的有机物质，而这些有机物质很难在其他形式的色谱仪中被分离出来。

此外，丙基酰胺键合硅胶色谱柱也可以用于分离组成复杂样品的有机物质，并且可以快速准确地测量每个有机物质的含量。