肾功能不全试验的实验报告
肾功能不全试验的实验报告
医学ppt
6
实验步骤
复制肾功能衰竭模型:于实验前一天, 取两只家兔,称重,一只皮下或肌肉注 射1%HgCl2(o.8~1.0ml/kg)造成急 性肾功能衰竭,为实验组兔;另一只皮 下或肌肉注射等量的生理盐水(1.0ml/ kg)作为对照组兔。
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7
实验步骤
观察:24h后,比较两组动物的一般状态 、活动情况与尿量。
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3
ARF发病机制的中心环节是GFR的降低。 肾血流量减少,肾小管阻塞、肾小管原尿回 漏或肾细胞损伤等均可导致GFR的降低。
本实验通过皮下注射1%HgCl2造成家兔 急性肾小管性坏死。
通过本实验学习复制急性中毒性肾衰动
物模型;观察肾衰家兔的一般状态、酚红排
泄率、肌酐清除率等变化;观察急性肾衰时
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15
实验步骤
肾脏酚红排泄率:是反映肾血流量与肾 小管排泌功能的指标。正常情况下从静 脉注入酚红后15min或30min,肾脏酚红 排泄率分别>30%与>45%。
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实验步骤
血清和尿液肌酐含量测定——苦味酸沉定 蛋白法
原理:在碱性条件下,苦味酸与(血、尿 中)肌酐作用,生成黄红色苦味酸肌酐, 使溶液呈色后进行比色测定;然后加醋酸 ,在酸性环境中,黄红色的苦味酸肌酐被 清除,非肌酐物质(假肌酐)呈色,两者 比色之差为血及尿中肌酐。按表1、表2的 操作步骤测定血清及尿液肌酐。
下腹部正中剪毛,在耻骨联合上约1. 5cm处做切口,长约4cm,暴露膀胱,用 注射器收集2ml尿液于试管中,做尿肌酐 检查。
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12
实验步骤
在膀胱底部,找出两侧输尿管,并分离 之。在近膀胱端结扎输尿管,稍等片 刻 ,待其略充盈后,用眼科剪剪一小口, 向肾脏方向插入一细塑料管(塑料管事先 用肝素冲洗或充满肝素),结扎并固定, 用于收集尿液。
家兔急性肾功能不全
实验原理 HgCl2
肾小管上皮细胞坏死
原尿回漏
细胞碎片形成管型
肾间质水肿
肾小管阻塞
囊内压升高
GFR
实验步骤
急性肾功能不全动物模型的制备 称重、固定、颈部手术气管、A插管 下腹部手术(暴露膀胱时取尿5ml备用) 耳缘静脉缓慢输10%葡萄糖液50ml/kg 尿常规检验(尿液沉渣的镜检和尿蛋白定
取血0.1ml浆加入显色剂,在沸水中加热10min
取出置于冷水中冷却,用分光光度计测定尿素氮 的浓度(波长520nm)
试管
空白管 标准管 测定管
血浆 0.1
标准液 0.1
蒸馏水 显色剂
0.1Leabharlann 101010尿蛋白定性检查结果判断标准
结果 无混浊
微混浊 混浊 颗粒状混浊 絮状混浊 凝聚成块
符号 — ± +
取5ml尿液于离心管中,离心5min、 1500r/min
上清夜做尿蛋白检查,取3ml上清夜放入试管 加热至沸腾,然后加入5﹪醋酸3~5滴,再加
热至沸腾,在黑色背景下观察
离心管底部沉渣用生理盐水(1:3)稀释摇匀 取一滴滴在载玻片上,盖上盖玻片进行镜检
取1ml血液置于用草酸钾作抗凝处理的离心管内, 离心5min、3000r/min
性检查) 血浆尿素氮测定
实验后处理
列表显示实验结果
动物 血浆尿素氮(mg/ml) 尿蛋白(﹪) 尿沉渣 对照兔 实验兔
分析结果写出实验报告
注意事项
实验前一天给家兔注射氯化高汞以制备病 理模型。
实验前要对试管和注射器做抗凝处理。不 可用肝素。
尿液加热时应缓慢转动试管,逐渐加热升 温,避免受热不均。试管口不可对人
3 急性中毒性肾功能不全
3 急性中毒性肾功能不全三、急性中毒性肾功能不全【实验目的】1.复制急性中毒性肾功能不全的动物模型。
2.观察急性肾功能不全时动物血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化,分析其发生机制。
【实验原理】采用肾毒物重金属HgCl2溶液造成家兔急性肾小管坏死,复制急性肾功能不全的动物模型,通过观察动物的血气、酸碱、血尿素氮、血清钾及尿的变化,学习急性肾衰时内环境的变化。
【实验动物】家兔,体重1.5~2.5kg。
【实验药品与器材】1%HgCl2溶液,3%戊巴比妥钠溶液或20%氨基甲酸乙酯溶液,1%普鲁卡因溶液,生理盐水,1%肝素生理盐水溶液;兔台,手术器械,1ml和5ml注射器,试管,滴管,漏斗,吸管,试管夹,酒精灯,试管架,颈动脉插管,血气分析仪,生化分析仪,离心机,光电比色计,水浴锅。
【观察指标】全血:血气分析仪测定pH值、PaCO2、[HCO3]、[K]、[Na]和[Cl];血清:生化分析仪测定BUN;尿:尿量、尿蛋白定性和镜检;肾:大体、剖面。
-++-【实验方法与步骤】1.取家兔两只,一只为正常对照,一只为中毒实验兔。
于实验前一天称重后,实验兔皮下或肌肉注射1%HgCl2(按1.5~1.7ml/kg,一次注射),造成急性中毒性肾功能不全模型,对照兔则在相同部位注射同量的生理盐水,作为对照。
将两只兔笼均置于大漏斗上,收集尿液,测量24h尿量。
2.实验开始,家兔称重后,20%氨基甲酸乙酯溶液(0.5~1g/kg体重)或3%戊巴比妥钠(30mg/kg体重)耳缘静脉注入麻醉后,仰卧固定于兔台。
下腹部剪毛,在耻骨联合上1.5cm处作长约4cm的正中切口,分离皮下组织,沿腹白线切开腹膜,暴露膀胱,穿刺取出全部尿液,供尿蛋白定性和尿液镜检。
3.颈部正中切口,分离一侧颈总动脉,颈动脉插管内注入肝素生理盐水溶液,进行颈动脉插管。
4.抽取0.5ml动脉血作血气分析,取3ml动脉血(滴入肝素数滴后)离心(1500转/分,5~10分钟),取血清供尿素氮测定用。
肾功能不全实验课件
03 答案:肾功能不全的治疗方法包括药物治疗、透析治疗和肾移植等。
肾功能不全的预防措施有哪些? 答案:肾功能不全的预防措施包括控制高血压、糖尿 病等原发病,避免使用肾毒性药物,保持良好的生活习惯等。
04 答案:肾功能不全的预防措施包括控制高血压、糖尿病等原发病,避免使用肾 毒性药物,保持良好的生活习惯等。
发病机制:包括肾小 球滤过率下降、肾小 管重吸收功能障碍、 肾小管分泌功能障碍 等
病理生理:包括肾 小球硬化、肾小管 萎缩、肾间质纤维 化等
临床表现:包括水 肿、高血压、贫血 、尿毒症等
肾小球滤过率 下降:肾小球 滤过率降低, 导致尿液生成
减少
肾小管重吸收 功能障碍:肾 小管重吸收功 能受损,导致 尿液中电解质 和蛋白质含量
实验总结与思考题
实验目的:了解肾功能不全的诊断和治疗方法
实验方法:采用尿液、血液等样本进行检测和分析
实验结果:肾功能不全患者的尿液、血液等指标异常
实验结论:肾功能不全的诊断和治疗需要综合考虑多种因素,包括尿液、血液等指 标。
肾功能不全的诊断标准是什么? 答案:肾功能不全的诊断标准包括血肌酐、尿素氮、 肌酐清除率等指标的异常。
营养支持:保 证营养摄入, 提高患者抵抗 力和恢复能力
透析治疗:根 据病情,选择 合适的透析方 式,如血液透 析、腹膜透析
等
肾移植:对于 终末期肾病患 者,可以考虑 进行肾移植治
疗
实验原理
肾功能不全的定义:指肾脏功能受损,导致尿液生成减 少,体内代谢废物和毒素无法正常排出,引起一系列临 床症状和体征。
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汇报人:小无名
肾功能不全试验的实验报告教材课程
目 录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验步骤 • 实验结果分析 • 实验总结与反思
01 实验目的
了解肾功能不全的基本概念
了解肾功能不全的定 义、分类和病因。
了解肾功能不全的预 防和治疗措施。
掌握肾功能不全对机 体的影响和危害。
学习肾功能不全的实验原理
1
学习肾功能不全的生理机制和病理过程。
肾功能不全对人体的影响
内环境稳定失调
肾功能不全导致身体无法排除足够的废物和多余 水分,同时电解质和酸碱平衡也会受到影响,从 而引起内环境稳定失调。
消化系统影响
肾功能不全可引起恶心、呕吐、食欲不振等消化 系统症状。这是因为肾脏在维持酸碱平衡方面起 着重要作用,而酸碱平衡的失调会影响消化系统 的正常功能。
图表制作
根据统计分析结果,制作各种图表,如柱状图、折线图、饼图等,直观展示实 验结果,便于观察和比较。
结果解读与讨论
结果解读
根据统计分析结果和图表展示,对实验结果进行解读,明确实验目的是否达到,并指出实验的优缺点 和改进方向。
结果讨论
结合文献资料和实验结果,对实验结果进行深入讨论,探讨可能的机制和影响因素,为后续研究提供 参考和依据。同时,对实验中存在的问题和不足之处进行反思和总结,以提高实验质量和水平。
改进措施
在未来的实验中,应加强操作培训,提高动物模型的稳定性 。同时,增加对动物营养状况的监测,确保实验结果的准确 性。
对未来实验的建议
拓展研究
可以进一步研究不同药物对肾功能不全的治疗效 果,为临床治疗提供更多选择。
加强团队合作
建议加强实验团队之间的沟通与协作,提高实验 效率。
伦理考虑
实验性肾功能不全zdl-new
蛋白尿的形成机制
正常人每天尿中有少量的蛋白质,其量小于 200mg。日小便排出蛋白大于200mg时,就称之为病 理性蛋白尿。
形成机理:
肾小球滤过膜由三层结构组成,即肾小球毛细 血管内皮细胞,基底膜和肾小球囊脏层上皮细胞(足 细胞)。间隙覆有粘多糖薄膜,并带有负电荷,其通 透性大小与滤过膜的结构和电荷屏障有关。炎症﹑ 损伤和免疫复合物可以破坏滤过膜的完整性或降低 其负电荷而导致通透性增加,引起蛋白尿和血尿。
实验性急性肾功能不全
武大医学院病生教研室 张德玲
急性肾功能不全
(acute renal insufficiency, ARI)
定义: 各种病因引起双侧肾泌尿功能急剧降低,导致机体
内环境出现严重紊乱的病理过程。
主要表现: GFR下降,少尿或无尿
尿成分改变(蛋白,细胞,管型) 氮质血症,高钾血症 代谢性酸中毒
细胞 (高倍镜)
6. 尿蛋白定性检查
取尿液3ml于试管中 酒精灯上加热至沸腾 若混浊,加入5%醋酸3-5滴
再煮沸 尿变清,尿内有尿酸盐 混浊加重,尿中有蛋白
程度
等级
清晰
-
轻度白色浑浊 +
乳样浑浊
++
浑浊或少量碎片 +++
絮状浑浊
++++
蛋白含量 (g%) <0.01
0.01~0.05
0.05~0.2 0.2~0.5 >0.5
肾衰肾脏大体观的的形成机制
急性肾功能不全时,肉眼见肾脏体积增大,苍 白,切面肾皮质苍白缺血,髓质色深淤血,有时有 出血点。 形成机理:
汞中毒时,间质水肿,压迫血管,肾皮质缺血。 肾血流重新分布,肾髓质淤血。
氮质血症的的形成机制
是指尿素﹑尿酸和肌酐等非蛋白含氮物质的增多, 而这三种物质又以尿素增多为主,故常用血浆尿素氮 (BUN)作为氮质血症的指标。正常值10~20mg%。 形成机理:
肾脏检验测定实验报告
一、实验目的1. 了解肾脏的功能和结构;2. 掌握肾脏检验测定的原理和方法;3. 通过实验,验证肾脏的排泄功能。
二、实验原理肾脏是人体重要的排泄器官,主要功能是排泄代谢废物、调节水盐平衡和维持电解质平衡。
本实验通过测定尿液中的各种成分,了解肾脏的排泄功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:尿液样本、生理盐水、葡萄糖、氯化钠、尿素、酮体等试剂;2. 实验仪器:离心机、分光光度计、移液器、试管、烧杯等。
四、实验方法与步骤1. 尿液样本处理:取新鲜尿液样本,用移液器吸取一定量的尿液样本,加入适量生理盐水,充分混匀;2. 葡萄糖测定:取适量尿液样本,加入葡萄糖试剂,混匀,用分光光度计测定吸光度;3. 氯化钠测定:取适量尿液样本,加入氯化钠试剂,混匀,用分光光度计测定吸光度;4. 尿素测定:取适量尿液样本,加入尿素试剂,混匀,用分光光度计测定吸光度;5. 酮体测定:取适量尿液样本,加入酮体试剂,混匀,用分光光度计测定吸光度;6. 数据处理:将实验数据与标准曲线进行比对,计算各成分的浓度。
五、实验结果与分析1. 葡萄糖测定:根据标准曲线,计算出尿液样本中葡萄糖的浓度为X mmol/L;2. 氯化钠测定:根据标准曲线,计算出尿液样本中氯化钠的浓度为Y mmol/L;3. 尿素测定:根据标准曲线,计算出尿液样本中尿素的浓度为Z mmol/L;4. 酮体测定:根据标准曲线,计算出尿液样本中酮体的浓度为W mmol/L。
实验结果显示,尿液样本中葡萄糖、氯化钠、尿素和酮体的浓度分别为X mmol/L、Y mmol/L、Z mmol/L和W mmol/L。
与正常参考值相比,本实验尿液样本中各项指标均在正常范围内,说明肾脏的排泄功能正常。
六、实验讨论1. 通过本实验,我们了解了肾脏的排泄功能及其检验测定方法;2. 实验过程中,应注意尿液样本的处理和试剂的配制,以保证实验结果的准确性;3. 在实际临床应用中,肾脏检验测定对于诊断肾脏疾病具有重要意义。
肾功能不全疾病研究报告
肾功能不全疾病研究报告疾病别名:肾功能不全所属部位:腰部就诊科室:内科,肾内科病症体征:体重减轻,贫血,夜尿增多疾病介绍:肾功能不全是怎么回事?肾功能不全是由多种原因引起的,肾小球严重破坏,使身体在排泄代谢废物和调节水电解质,酸碱平衡等方面出现紊乱的临床综合症后群,分为急性肾功能不全和慢性肾功能不全,预后严重,是威胁生命的主要病症之一症状体征:肾功能不全有哪些症状表现?以下就是关于肾功能不全症状的详细介绍:第一期肾功能储备代偿期。
因为肾脏储备代偿能力很大,因此临床上肾功能虽有所减退,但其排泄代谢产物及调节水、电解质平衡能力仍可满足正常需要,临床上并不出现症状,肾功能化验也在正常范围或偶有稍高现象。
第二期肾功能不全期。
肾小球已有较多损害,60%-75%,肾脏排泄代谢废物时已有一定障碍,肌酐尿素氮可偏高或超出正常值。
病人可以出现贫血,疲乏无力,体重减轻,精神不易集中等。
但常被忽视,若有失水、感染、出血等情形,则很快出现明显症状。
第三期肾功能衰竭期。
肾脏功能已损害相当严重,75%-95%,不能维持身体的内环境稳定,患者易疲劳,乏力,注意力不能集中等症状加剧,贫血明显,夜尿增多,血肌酐、尿素氮上升明显,并常有酸中毒。
此期又称氮质血症期。
第四期尿毒症期或肾功能不全终末期。
此期肾小球损害已超过95%,有严重临床症状,如剧烈恶心、呕吐,尿少,浮肿,恶性高血压,重度贫血,皮肤瘙痒,口有尿臊味等。
化验检查:肾功能不全有哪些检查方法?以下就是关于肾功能不全检查的详细介绍:尿蛋白定性试验通常采用蛋白试纸法、磺基柳酸法、加热醋酸法3种方法。
正常情况下,尿蛋白定性试验呈阴性。
但此种检查方法易受一些因素的影响,可致假性结果,如尿酸盐含量高时,尿呈酸性反应,蛋白试纸法结果较实际情况低,磺基柳酸法易呈假阳性;大量使用青霉素时,磺基柳酸法易呈假阳性反应;使用磺造影剂时,磺基柳酸法、加热醋酸法均可出现假阳性反应;当尿呈强碱性时,假性结果更多,或出现蛋白试纸法假阴性反应,或出现磺基柳酸法和加热醋酸法的假阴性反应。
肾功能不全实验室生物化学诊断
血液
红细胞
尿素
铵 + 氰酸盐
Hb
不可逆
氨甲酰血红蛋白
反映近4星期左右期间尿素的平均水平
(五)血半胱氨酸蛋白酶抑制剂C (cystatin C,cys C)
特点: 有核细胞表达、分泌的一种碱性非糖基
蛋白,每日分泌量恒定。
分子量13kD,自由通过肾小球滤膜 途径:
cystainC被近曲小管上皮细胞摄取、分解,不回 到血液中,尿中仅微量排出。
意义 ◇ 尿中增高:
(1)敏感地反映近端重吸收功能受损 (2)血<5mg/L,尿中升高反映肾小管损伤
◇ 血清中增高: (1)肾小球滤过功能受损
(2)恶性肿瘤、炎症
2、1-微球蛋白
肝细胞和淋巴细胞产生 糖蛋白,分子量26-33KD
产生恒定,绝大部分被肾小管重新吸收 测定可以不受尿PH值影响
血液
有核细胞
cys C
非糖基化碱性蛋 白质
肾小管重吸收 分解
极少mg/L)
肾小球滤膜
特点:
1.在血浆中稳定,很少受到其他物质的 干扰,临床上使用较多
2.与肾小球滤过率相关性好,指标优 于肌酐
(六)菊粉(inulin)清除率
(1)菊粉的特点:
不被机体分解、结合、破坏
自由通过肾小球
不被肾小管分泌和重吸收
肾小体 肾小球 肾小囊
肾小管 近端小管 髓袢 远端小管
近端小管
远端小管
一、肾小球功能检查
肾小球滤过(glomerular filtration):
当血液流经肾小球的毛细血管网时,血浆中的水和小 分子溶质,包括分子量较小的血浆蛋白质,通过滤过 膜滤过入肾小囊形成原尿的过程。
原尿的成分除了不含有血细胞和部分血浆蛋白质 以外,与血浆成分相同。
急性肾功能不全(打印)
急性肾功能不全【实验目的】学习用氯化汞复制急性中毒性肾功能不全的动物模型。
观察急性肾功能不全时动物尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾酚红排泄率的变化以及肾脏的形态改变,分析和讨论其致病因素及发生机制。
【实验原理】采用肾毒物重金属氯化汞溶液造成家兔急性肾小管坏死,复制急性肾功能不全的动物模型,通过观察动物的尿蛋白、血肌酐、尿肌酐、肾酚红排泄率的变化以及肾脏的形态改变,学习急性肾衰时内环境的变化。
1 材料家兔;分光光度计,光学显微镜,离心机,恒温水浴箱;1%氯化汞溶液,氨基甲酸乙酯溶液,生理盐水,酚红,NaOH,醋酸,碱性苦味酸,肌酐标准应用液,葡萄糖;兔台,手术器械,1ml和5ml注射器,试管,滴管,漏斗,吸管,试管夹,酒精灯,试管架,颈动脉插管。
2 方法2.1 急性肾功能不全模型复制(已完成):取家兔两组,于实验前24小时称重后,一组为正常对照组,一组为中毒实验组。
实验兔皮下或肌肉注射1%氯化汞(按0.8~1.0ml/kg),造成急性肾功能不全模型;对照兔则在相同部位注射同量的生理盐水,作为对照。
2.2麻醉固定:用200g/L的氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量给家兔耳缘静脉注射麻醉,将家兔仰卧位固定于固定架上。
2.3 心脏采血:先用手摸到第3、4肋间,心脏活动最为活跃处,垂直进针,有落空感,缓慢抽取血液约2ml于干燥试管中,作血肌酐检查。
2.4 采集尿液:下腹部剪毛,从耻骨联合向上沿中线作约4cmd切口,沿腹白线打开腹腔,暴露膀胱,用注射器抽取膀胱内尿液2ml于干燥试管中,作尿肌酐、尿常规检查。
2.5 输尿管插管:在膀胱底部仔细分离两侧输尿管。
用出线结扎近膀胱处的两侧输尿管,以阻断尿流,结扎固定。
将两侧导尿管外端用线扎在一起,用于收集尿液。
手术完毕后,用温热的生理盐水纱布覆盖腹部的创伤。
2.6 实验观察2.6.1血清和尿肌酐含量测定:将各组装有血液的试管放入离心机内,静置10min后,3000r/min离心15min。
肾功能不全的实验室生物化学诊断
①尿液α1-m升高是反映早期肾近端小管损伤的非常特异和 灵敏的指标。α1-m产生较恒定,测定不受尿pH等因素的影 响,故尿α1-m比尿β2-m更敏感地反映肾小管早期损害。
②血清α1-m升高提示肾小球滤过率降低。在Ccr< 100ml/min时,血清α1-m即出现升高。所以血清α1-m可用 以评估肾小球滤过功能,且比血Ccr和β2-m更灵敏。血清和 尿α1-m均升高,表明肾小球滤过功能和肾小管重吸收功能 均受损。
尿已浓缩 尿已稀释 等渗尿
高渗尿 低渗尿
Uosm下降示肾小管浓缩功能减退
尿渗量比尿比重受影响的因素少,更能准确 反映肾小管的浓缩稀释能力
3、渗透清除率(Cosm)测定(渗量清除率) (1) 定义:
表示单位时间内肾脏能够将多少血浆中的 渗透性溶质清除出去。
Uosm × V Cosm=————————
急性肾小球肾炎
Ccr 减低至正常的50%以下,血清尿
素、肌酐仍为正常。
② 估价肾功能的损害程度
肾功能损害:
< 80 ml/min
肾功能不全代偿期: 51-80ml/min
肾功能不全失代偿期: 20-50ml/min
肾功能衰竭期:
< 20ml/min
尿毒症终末期:
< 10ml/min
肾小球滤过率检测比尿素和肌酐检测更加敏感
血液循环
胃肠道 皮肤
血清尿素测定可观察 肾小球的滤过功能
肾脏 肾小球
[正常参考值]
1.78-7.14mmol/L
尿液
血清尿素和肌酐测定的临床意义
(1)肾前性氮质血症 尿素明显增高 肌酐正常或轻度增高 失水、休克、高蛋白饮食、蛋白分解增加
(2)肾后性氮质血症 尿素明显增高 肌酐正常或轻度增高 肾结石、前列腺肥大、泌尿生殖系统肿瘤
肾衰实验
肾脏的泌尿功能与急性肾功能不全一、实验目的1.观察神经体液等因素对尿生成的影响。
2.学习急性中毒性肾功能不全动物模型的复制。
3.了解中毒家兔肾功能的改变,并分析导致急性肾功能不全的发病机制。
4.观察利尿剂对急性肾功能不全的治疗效果,并分析药物作用机制。
二、实验原理㈠肾脏的功能正常的肾功能主要是泌尿,通过泌尿排出代谢废物,并维持水、电解质和酸碱平衡,保持机体内环境的稳定;红细胞生成素、1,25-二羟维生素D3等物质;并使某些激素,如胃泌素、甲状旁腺激素在肾内灭活,因而又与机体许多功能代谢活动密切相关。
㈡影响尿生成的因素尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收及分泌三个环节,凡能影响上述过程的因素,都可能影响尿的生成,从而引起尿量的变化。
1.影响肾小球滤过的因素⑴滤过分数即滤过膜的面积和通透性。
⑵有效滤过压其中肾小球毛细血管血压是经常变动的因素。
⑶肾血流量的变化受肾自身调节和神经体液调节,主要影响滤过平衡的位置。
2.肾小管和集合管的重吸收及分泌的调节⑴肾内自身调节①小管液中溶质的浓度临床上常用的利尿方式-渗透性利尿。
②球-管平衡近端小管定比重吸收Na+、H2O约65%~70%,那么,尿中排出的溶质和水不致因肾小管滤过率的增减而出现大幅度的变动。
⑵神经因素当肾交感神经兴奋时,作用于入球小动脉、出球小动脉,入球小动脉口径缩小更为明显,肾小球毛细血管血流量减少,毛细血管血压下降,那么,有效滤过压降低,肾小球滤过率降低;还激活RAAS,增加肾小管重吸收NaCl、H2O;直接增加近端小管、髓袢上皮细胞重吸收Na+、Cl-、H2O。
⑶体液因素①抗利尿激素提高远曲小管和集合管上皮细胞对水的通透性;也增加髓袢升支粗段对NaCl的主动重吸收和内髓部集合管对尿素的通透性。
由于抗利尿激素主要感受血浆晶体渗透压、循环血量和动脉血压,因此,水的利尿效果较生理盐水好。
②肾素-血管紧张素-醛固酮系统血管紧张素Ⅱ的作用为:刺激醛固酮的合成,调节远曲小管、集合管Na+、K+的转运;刺激近端小管重吸收NaCl;刺激抗利尿激素的分泌。
家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测范文
家兔急性肾功能不全及其肾功能评价指标检测姓名温正煌学号4011专业临床医学班级本部4班实验目的1.用氯化汞中毒方法复制家兔急性肾功能不全模型。
2.观察急性肾功能不全时肾功能评价指标变化,从而探讨致病因素及急性肾功能不全的可能发病机制。
实验材料和方法实验仪器:分光光度计,离心机,恒温水浴锅,哺乳动物手术器械,注射器,试管架,试管,试管夹,微量移液器,量筒实验药品和试剂:20%氨基甲酰乙酯,0.6%酚红溶液,20%葡萄糖溶液,10%NaOH,12.5%NaOH 溶液,50%乙酸溶液,1%氯化汞,碱性你苦味酸,生理盐水,肌酐标准应用液,蒸馏水实验动物家兔实验步骤1.1急性肾功能不全模型复制:于实验前24h,取两只家兔,称重,一只作为实验兔,按0.8~1.0ml/kg体重剂量皮下或肌肉注射10g/L氯化汞造成急性肾功能不全备用,另一只皮下注射或肌肉注射等量的生理盐水作为对照兔。
1.2麻醉固定:用200g/L氨基甲酸乙酯按5ml/kg体重剂量注射耳缘静脉,缓慢注射。
待兔麻醉后将其仰卧,先后固定四肢及兔头。
1.3心脏采血:剪去家兔胸前区部位的毛,在第3~4肋间靠近胸骨处,用左手食指摸到心跳最明显处,右手持注射器垂直刺入心脏,当针穿刺心脏时,血液由于心脏搏动的力量自动进入注射器,取血3ml,推入干燥试管,静置。
1.4 膀胱插管术:从耻骨联合向上沿中线作约3~4厘米的切口,沿腹白线打开腹腔,将膀胱轻拉至腹壁外,先辨认清膀胱和输尿管的解剖部位,先用注射器取尿液2ml于试管中,然后在输尿管下方穿线结扎尿道,再用止血钳提起膀胱前壁(靠近顶端部分),选择血管较少处,切一纵行小口,插入插管后结扎,将膀胱插管平放于耻骨处,引流管自然下垂,管口低于膀胱水平,排空膀胱,术毕,用温热生理盐水纱布覆盖腹部切口。
然后准备小烧杯,收集尿液。
1.5酚红排泄试验:按1ml/kg耳缘静脉注射0.6%酚红溶液,开始计时,再按30ml/kg耳缘静脉缓慢注射20%葡萄糖溶液。
家兔急性肾功能不全
草
酸
钙
磷酸钙结晶
结 晶
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符号 — ± +
++
+++ ++++
蛋白质的大约含量(﹪) 无
0.01以下 0.01~0.05 0.05~0.20
0.20~0.50 0.50以上
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红细胞管型
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10
白细胞管型
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上皮细胞管型
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透明管型
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颗粒管型
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脂肪管型
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尿酸结晶
取血0.1ml浆加入显色剂,在沸水中加热10min
取出置于冷水中冷却,用分光光度计测定尿素氮 的浓度(波长520nm)
试管
空白管 标准管 测定管
血浆 0.1
标准液 0.1
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蒸馏水 显色剂
0.1
10
10
10 7
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8
尿蛋白定性检查结果判断标准
结果 无混浊
微混浊 混浊 颗粒状混浊 絮状混浊 凝聚成块
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5
取5ml尿液于离心管中,离心5min、 1500r/min
上清夜做尿蛋白检查,取3ml上清夜放入试管 加热至沸腾,然后加入5﹪醋酸3~5滴,再加
热至沸腾,在黑色背景下观察
离心管底部沉渣用生理盐水(1:3)稀释摇匀 取一滴滴在载玻片上,盖上盖玻片进行镜检
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6
取1ml血液置于用草酸钾作抗凝处理的离心管内, 离心5min、3000r/min
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实验步骤
酚红排泄率测定: 1)两组家兔分别耳缘静脉注射o.6%酚
红溶液(1ml/kg),接着从颈外静脉插管 处注射20%葡萄糖溶液(30ml/kg)。收 集从开始注射酚红起15min或30min的尿 液。换算成单位时间的尿量(ml/min)。
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实验步骤
将收集的尿液倒入500ml量筒内,加10 %NaOH lOml,用自来水补充至500ml 处,混匀后,取出适当量放入与比色管 口径相同的试管中与标准比色管比较, 得出15min或30min内肾脏酚红排泄率。
家兔急性 肾功能不全
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1
实验目的
复制急性中毒性肾衰动物模型,通过对 肾功能指标的检测及肾脏形态学改变的 观察,了解中毒家兔肾功能的改变。判 断、分析致病因素及导致急性肾衰的可 能发病机制。
实验原理
肾脏是一个多功能器官,其主要功能之一 是泌尿功能。肾脏通过调节肾血流、肾小 球滤过率、肾小管排泌与重吸收以及排泄 体内代谢物质以维持机体内环境的稳定。 当肾血流量减少,肾小球滤过率下降或肾 小管排泌重吸收功能障碍时,肾的泌尿功 能受到影响,从而导致肾功能不全。
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实验步骤
尿肌酐/血肌酐的意义:器质性肾衰时比 值<20;功能性肾衰时比值>40。
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内生肌酐清除率(Ccr):
能较准确的反映肾小球滤过率(GFR)
Ccr=[Cr]尿×尿量(ml/min)/[Cr]血
为此,实验步骤收集尿液必须采集有“记录单
位时间的尿量”的尿液样品做尿肌酐[Cr]尿测定 ,才能与血肌酐[Cr]血比,计算出GFR。肌酐能 自由从肾小球滤过,在肾小管中很少被重吸收
测定管 0.1 _
_ 2 0.5
标准管 _ 0.1
_ 2 0.5
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空白管 _ _
0.1 2 0.5
20
实验步骤
混匀,放10min后加蒸馏水6。0ml,摇匀 ,以530nm波长比色,空白管调零,读 OD值。计算:
[Cr]u(mg%)=OD测/OD标 ×0.05步骤
复制肾功能衰竭模型:于实验前一天, 取两只家兔,称重,一只皮下或肌肉注 射1%HgCl2(o.8~1.0ml/kg)造成急 性肾功能衰竭,为实验组兔;另一只皮 下或肌肉注射等量的生理盐水(1.0ml/ kg)作为对照组兔。
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7
实验步骤
观察:24h后,比较两组动物的一般状态 、活动情况与尿量。
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表1 血清肌酐测定
单位(ml)
肌酐标准应 用液
(0.05mg/m l) 血清
蒸馏水
碱性苦味酸
标准管 0.20
测定管 _
_
0.20
_
_
2.0
2.0
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空白管 _
_ 0.20 2.0
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实验步骤
混匀,37OC水浴30 min,以510nm波长比 色,空白管调零,读OD值,然后,各管加 50%醋酸液两滴,放置6min后,在测OD’ 值。计算:
[Cr]p(mg%)=OD测-OD’测/ OD标-OD’标 ×0.01/0.2×100
正常值:0.7~0.8mg%(1mg%=88.4mol/L) 。
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表2 尿肌酐测定
单位(ml)
尿液(原尿或1: 50稀释)
尿肌酐标准应 用液
(0.5mg/ml) 蒸馏水
碱性苦味酸
12.5%NaoH
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3
ARF发病机制的中心环节是GFR的降低。 肾血流量减少,肾小管阻塞、肾小管原尿回 漏或肾细胞损伤等均可导致GFR的降低。
本实验通过皮下注射1%HgCl2造成家兔 急性肾小管性坏死。
通过本实验学习复制急性中毒性肾衰动
物模型;观察肾衰家兔的一般状态、酚红排
泄率、肌酐清除率等变化;观察急性肾衰时
肾脏大体形态;根据实验指标,判断、分析
急性肾衰的发病机制及病理生理变化;对急
性肾衰的病因、发病机制和功能代谢变化加
深理解。
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实验对象
家兔2—3kg。
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5
实验药品与器材
1%HgCl2、生理盐水、25%氨基甲酸乙 酯、0.6%酚红、20%葡萄糖、10% NaOH、手术器械一套,注射器、试管、 加样器、721分光光度计、水浴锅、离心 机。
家兔称重,耳缘静脉注射25%氨基甲酸 乙酯4.0ml/kg,待动物麻醉后,固定 于兔台。
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角 膜 反 射
夹 肢 反 射
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实验步骤
家兔心脏采血3~5ml置于一干燥管中(不 抗凝),放置10min后,3000r/min离心 15min,小心吸取血清置于另一干燥管中 ,备测血肌酐
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实验步骤
肾脏酚红排泄率:是反映肾血流量与肾 小管排泌功能的指标。正常情况下从静 脉注入酚红后15min或30min,肾脏酚红 排泄率分别>30%与>45%。
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实验步骤
血清和尿液肌酐含量测定——苦味酸沉定 蛋白法
原理:在碱性条件下,苦味酸与(血、尿 中)肌酐作用,生成黄红色苦味酸肌酐, 使溶液呈色后进行比色测定;然后加醋酸 ,在酸性环境中,黄红色的苦味酸肌酐被 清除,非肌酐物质(假肌酐)呈色,两者 比色之差为血及尿中肌酐。按表1、表2的 操作步骤测定血清及尿液肌酐。
下腹部正中剪毛,在耻骨联合上约1. 5cm处做切口,长约4cm,暴露膀胱,用 注射器收集2ml尿液于试管中,做尿肌酐 检查。
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实验步骤
在膀胱底部,找出两侧输尿管,并分离 之。在近膀胱端结扎输尿管,稍等片 刻 ,待其略充盈后,用眼科剪剪一小口, 向肾脏方向插入一细塑料管(塑料管事先 用肝素冲洗或充满肝素),结扎并固定, 用于收集尿液。
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实验步骤
如果心脏采血失败,则颈总动脉采血 颈部正中剪毛,切开皮肤,分离左侧颈
总动脉,在动脉下穿两根丝线,用一根 丝线结扎动脉的远心端,近心端用动脉 夹夹闭,在结扎线下方的动脉壁上剪一 小斜口,然后向心脏方向插入动脉导管 放血3ml备测血肌酐
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实验步骤
分离右侧颈外静脉,插管用于输液。输 液速度一定要慢
,但有少量是由近曲小管分泌。内生肌酐在血
浆中的浓度相当低,近曲小管分泌的肌酐量可
忽略不计,因此Ccr与菊粉清除率相近,可以代 表肾小球滤过率。
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实验步骤
肾形态学观察:处死家兔,取出肾脏,称 肾重量,计算肾体比,比较两组家兔肾 脏外形,纵向剖开肾脏,观察皮髓质条 纹、色泽等。