常用试剂配制及显色方法
TLC_显色剂
碘:不饱和或芳香族化合物配制方法:在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶紫外灯:含共厄基团的化合物,芳香化合物硫酸铈:生物碱配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁:苯酚类化合物配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮) :广谱, 有荧光活性配制方法:% 桑色素+甲醇茚三酮:氨基酸配制方法:茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 醋酸二硝基苯肼(DNP) :醛和酮配制方法:12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇香草醛(香兰素) :广谱配制方法:15g 香草醛 + 250mL 乙醇 + 浓硫酸高锰酸钾:含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法: KMnO4 + 10g K2CO3 + 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月溴甲酚绿:羧酸,pKa<=配制方法:在100ml乙醇中,加入溴甲酚绿,缓慢滴加的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈:广谱配制方法:235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1 :广谱配制方法:135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + mL of 冰醋酸 + mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 :萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)磷钼酸(PMA) :广谱配制方法: 10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇碘:适用于不饱和或者芳香族化合物配制方法:在100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g 碘粒,30g 硅胶高锰酸钾适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法: KMnO4 + 10g K2CO3 + 10% NaOH +200mL 水. 使用期3 个月磷钼酸(PMA)广谱配制方法:10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇紫外灯适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物硫酸铈:生物碱配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法:1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法:% 桑色素+甲醇茚三酮适用于氨基酸配制方法:茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 醋酸二硝基苯肼(DNP)适用于醛和酮配制方法:12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇广谱配制方法:15g 香草醛+ 250mL 乙醇+ 浓硫酸溴甲酚绿适用于羧酸,pKa<=配制方法:在100ml 乙醇中,加入溴甲酚绿,缓慢滴加的NaOH 水溶液,刚好出现蓝色即至。
【全】常用显色剂配制
常常用用显显色色剂剂配配制制一一、、通通用用显显色色剂剂1.碘:检查一般有机物。
碘蒸气对很多化合物显黄棕色。
在一个密闭的玻璃缸内予先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和,将薄层或纸层放入缸内数分钟即可显色。
有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可以提高显色的灵敏度。
不饱和或者芳香族化合物 配制方法在100ml 广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g 碘粒,30g 硅胶 2.硫酸:通用。
浓硫酸:水(1:10),或10%硫酸的乙醇溶液。
3.四唑兰试剂:还原性物质在室温或微加热时显紫色。
溶液I :0.5%四唑兰甲醇溶液 溶液II :6N 氢氧化钠溶液临用前溶液I 和溶液II 等量混合。
4.铁氰化钾—三氯化铁试剂:还原性物质显蓝色,再喷2N 盐酸溶液,则蓝色更深。
二二、、生生物物碱碱显显色色剂剂1.改良碘化铋钾试剂:生物碱和某些含氮化合物显橙红色。
取7.3克碘化铋钾,冰醋酸10毫升,加水60毫升。
2.碘—碘化钾试剂:生物碱显棕褐色。
碘1克和碘化钾10克溶于50毫升水中,加热,加冰乙醇2毫升,用水黧到100毫升。
3.硅钨酸试剂(沉淀试剂)5克硅钨酸溶于100毫升水中,加盐酸至PH2左右。
4.苦味酸试剂(沉淀试剂) 1克苦味酸溶于100毫升水中。
5.鞣质试剂(沉淀试剂)1克鞣酸加乙醇1毫升溶解后,再加水至10毫升。
6.王水 浓盐酸:硝酸(1:3) 三三、、甙甙类类显显色色剂剂 11..糖糖的的检检出出试试剂剂 (1)苯胺-邻苯二甲酸试剂:喷后105~110℃烤10分钟,糖显红棕色(检测还原糖) [注]苯胺—邻苯二甲酸试剂的制备:苯胺0.93克,邻苯二甲酸1.66克,溶于水饱和正丁醇100ml 中。
(2)α-萘酚-硫酸试剂:喷后100℃烤3—6分钟,多数糖呈蓝色,鼠李糖呈橙色。
[注]试剂制备:15%α—萘酚乙醇溶液21ml,浓硫酸13ml ,乙醇87ml 及水8ml 混合后使用。
高中生物常见试剂及变色反应
高中生物常见试剂及变色反应高中生物常见试剂大全1.斐林试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.05g/ml CuSO4(乙液)。
用法:将斐林试剂甲液和乙液混合,再将混合后的斐林试剂倒入待测液,水浴加热,如待测液中存在还原糖,则呈砖红色。
2.班氏糖定性试剂:为蓝色溶液。
和葡萄糖混合后沸水浴会出现砖红色沉淀。
用于尿糖的测定。
3.双缩脲试剂:成分:0.1g/ml NaOH(甲液)和0.01g/ml CuSO4(乙液)。
用法:向待测液中先加入2ml甲液,摇匀,再向其中加入3~4滴乙液,摇匀。
如待测中存在蛋白质,则呈现紫色。
4.苏丹Ⅲ:用法:取苏丹Ⅲ颗粒溶于95%的酒精中,摇匀。
用于检测脂肪。
可将脂肪染成橘黄色(被苏丹Ⅳ染成红色)。
5.二苯胺:用于鉴定DNA。
DNA遇二苯胺(沸水浴)会被染成蓝色。
6.甲基绿:用于鉴定DNA。
DNA遇甲基绿(常温)会被染成蓝绿色。
吡罗红:检测RNA,呈红色7、50%的酒精溶液:用于洗去苏丹Ⅲ在脂肪上的浮色。
8、70%的酒精溶液:用于医学临床上的消毒灭菌。
9、95%的酒精溶液:DNA不溶于酒精,尤其是体积分数为95%的冷冻酒精,而细胞中的某些物质可以溶解于酒精10、15%的盐酸:和95%的酒精溶液等体积混合可用于解离根尖,使细胞分离开来。
“有丝分裂观察”和“低温诱导染色体加倍”中15%盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化,并使细胞间的中胶层物质溶解,从而达到分离细胞的目的。
洗去卡诺氏液8%盐酸:(1)盐酸能改变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输;(2)盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分离,便于DNA与染色剂的结合11. 龙胆紫溶液或醋酸洋红:碱性染料,用于染色体染色时,前者呈深蓝色,后者呈红色改良苯酚品红染液:检测染色体,红色健那绿:检测线粒体,专一性让线粒体染色呈蓝绿色12.20%的肝脏、3%的过氧化氢、3.5%的氯化铁:用于比较过氧化氢酶和Fe3+的催化效率。
(新鲜的肝脏中含有过氧化氢酶)13、3%的可溶性淀粉溶液、3%的蔗糖溶液、2%的新鲜淀粉酶溶液:用于探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用实验。
常用化学试剂配方及显色剂大全
常用试剂及配置方法(一)化学成分定性反应试剂1、5%α-萘酚试剂α-萘酚5g,加乙醇100ml溶解,如不澄清,可过滤,装棕色瓶备用;2、费林(Fehling)试剂甲液:6.92g硫酸铜结晶、溶于100ml水中。
乙液:34.6g酒石酸钾钠的结晶、10g氢氧化钠共溶于100ml水中,贮藏于带橡皮塞的试剂瓶中。
使用时取甲、乙二液等量混合。
3、10%盐酸盐酸27ml,加蒸馏水使成100ml。
4、10%氧氧化钠氢氧化钠10g,加蒸馏水使成100ml。
5、苦味酸钠试纸取滤纸条浸入苦味酸饱和水溶液中,浸透后取出晾干,再浸入10%碳酸钠水溶液中,迅速取出,晾干即得。
6、普鲁土蓝试剂(1)10%氢氧化钾试液氢氧化钾6.5g,加蒸馏水使成100ml。
(2)10%硫酸亚铁水溶液取硫酸亚铁结晶8g。
加新沸过的冷蒸馏水使成250ml。
应临用时新鲜配制。
(3)10%盐酸溶液。
(4)5%三氯化铁溶液三氯化铁5g,加适量的蒸馏水使溶解成100ml。
7、1%三氯化铁试剂三氯化铁1g,加蒸馏水使溶解成100ml。
8、1%氢氧化钠试液氢氧化钠1g,加蒸馏水使成100ml。
9、1%醋酸镁甲醇液醋酸镁1g,加甲醇100ml。
10、1%三氯化铝乙醇液三氯化铝1g,溶解于100ml乙醇中。
11、0.9%氯化钠溶液氯化钠0.09g,加水100ml。
12、1.8%氯化钠溶液氯化钠1.8g,加水100ml。
13、2%红细胞生理盐水混悬液兔血10ml,放在盛有玻璃珠的三角烧瓶中,振摇10分钟,除去纤维蛋白,把脱纤维血倒在离心管中,加生理盐水混匀后,离心,使血细胞下沉,反复2~3次,至生理盐水不再显红色,取以上红细胞2ml,加生理盐水100ml,稀释成2%的红细胞混悬液(本液须置冰相保存,存期2~3天)。
14、0.15%三氯化铁-冰醋酸溶液1%三氯化铁溶液0.5ml,加冰醋酸100ml。
15、醋酸铅试液取醋酸铅9.5g,加新煮沸过的冷蒸馏水使成100ml。
TLC显色试剂及配方大全
TLC显色试剂及配方大全(1)显色试剂显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
l.通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1) 烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
ELISA检测试剂及方法
ELISA检测试剂1. 包被稀释液:0.05mmol/L碳酸盐缓冲液pH9.6Na2CO3 1.6gNaHCO3 2.9g加蒸馏水至1000 ml2. 洗涤液(PBST):10mmol/L PBS(pH7.4);0.05% Tween-2010mmol/L PBS(pH7.4)NaCl 8gKCl 0.2gNa2HPO4 1.42gK2HPO40.27g加蒸馏水至1000 ml3. 封闭液:10mmol/L PBS(pH7.4);1.0% BSA4. 抗体稀释液:(10mmol/L PBS(pH7.4);0.05%Tween-20;0.5%BSA)5. 显色液:a. TMB: 称取固体TMB 溶于DMSO 配成1mg/ml液体,4度避光保存,用前要检查其状态,若有凝固,可用手温将其融化。
b. 底物缓冲液(pH5.0): 柠檬酸1.02g,Na2HPO4.12H2O 3.58g,溶于100ml 水中。
c. 30% 过氧化氢:4℃避光保存。
使用前即时按照下列比列配制:1份TMB加9份底物缓冲液, 加0.01份H2O2即100:900:1。
如:底物缓冲液(pH5.0) 9ml,加TMB 1ml,加30%H2O2 10μl(即配即用)。
ELISA检测准步骤1.标本稀释:抗体稀释液1:5、1:25倍稀释唾液,1:200、1:400倍稀释血清。
2.加入标本:将上述稀释的标本加入已包被的ELISA板,100μl/孔,37℃,60min,洗涤液洗4次。
3.加入酶标抗体:加入1:20,000稀释的HRP标记的羊抗兔IgA。
100μl/孔,37℃,30min,洗涤液洗4次。
4.显色:加入TMB底物显色液,100μl/孔,室温(或25℃)避光显色5-15min,50μl终止液终止反应。
5.检测:450nm测定各孔OD值,均做2孔重复,取平均值计算。
常用显色剂配制方法
常用显色剂配制方法Company Document number:WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998碘:不饱和或者芳香族化合物配制方法在100ml广口瓶中,放入张滤纸,少许碘粒或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶紫外灯含共轭基团的化合物,芳香化合物硫酸铈:生物碱配制方法10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法% 桑色素+甲醇茚三酮氨基酸配制方法茚三酮 + 100mL of 正丁醇+ 醋酸二硝基苯肼(DNP)醛和酮配制方法12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸 + 80mL 水 + 200mL 乙醇香草醛(香兰素)广谱配制方法15g 香草醛 + 250mL 乙醇 + 浓硫酸高锰酸钾含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法KMnO4 + 10g K2CO3 + 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3月溴甲酚绿羧酸,pKa<=配制方法在100ml乙醇中,加入溴甲酚绿,缓慢滴加的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈广谱配制方法235 mL 水 + 12 g 钼酸氨 + g 钼酸铈氨 + 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1广谱配制方法135 乙醇 + 5 mL 浓硫酸 + mL of 冰醋酸 + mL 茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2萜烯,桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法茴香醛:HClO4:丙酮:水 (1:10:20:80)磷钼酸(PMA)广谱配制方法10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇常用显色剂配制一、通用显色剂1.碘,检查一般有机物。
碘蒸气对很多化合物显黄棕色。
在一个密闭的玻璃缸内予先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和,将薄层或纸层放入缸内数分钟即可显色。
常用试剂配制及显色方法详解
常用试剂配制及显色方法详解(一)通用显色剂1.重铬酸钾--硫酸一般有机物均能显色,不同化合物显示不同颜色。
喷洒剂:5克重铬酸钾溶于100ml,40%硫酸中。
喷洒后加热至150oC斑点出现。
2.碘:检查一般有机物(1)碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色,有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可提高显色的灵敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液,取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。
3.碘--碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)。
4.5%--磷钼酸乙醇溶液:喷后120oC烤,还原性物质显兰色,再用氨气熏,则背景变为无色。
5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120oC,还原性物质显兰色。
6碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
:5%碳酸钠溶液。
溶液II溶液I和溶液II等量混合使用。
7.中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。
8.硝酸银--氢氧化铵(Tollen's--zoffaronl)试剂,喷后105oC烤5~10分钟,还原性物质显黑色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液。
溶液II:氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和溶液II以1:5混合。
注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。
9硝酸银--高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化铵溶液:2N氢氧化钠(1:1:2)。
临用前配制。
溶液II:高锰酸钾0.5g,碳酸钠1g,加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。
10.四唑试剂:还原性物质,在室温或微加热时显紫色。
溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液。
溶液II:6N氢氧化钠溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
11.铁氰化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色,再喷射2N/L盐酸溶液,则兰色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液。
溶液II:2%三氯化铁溶液。
TLC(薄层色谱)显色试剂及配方大全
薄层色谱的显色反应显色试剂显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
l.通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1)烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
实验室常用显色剂配制
实验室常用显色剂配制2008-12-13 11:58 来源: 作者:ala 网友评论条浏览次数 99 转入论坛浏览(1)硫酸(sulphuri acid)通用显色剂。
试液:a、5%浓硫酸乙醇或乙酐溶液b、浓硫酸与甲醇或乙醇等体积混合c、15%浓硫酸正丁醇溶液方法:用以上任一试液喷洒或浸湿晾干,于110摄氏度加热至呈色,或达最强荧光。
(2)碘(iodine)通用显色剂。
试液:a:0.5%碘的氯仿溶液。
喷后处理:待薄层上过量碘挥散,喷1%淀粉溶液,斑点转为兰色,如有过量碘留在薄层上,则背景也呈兰色。
b:碘蒸气:将少许碘晶体放入一密闭的容器内,使之充满饱和碘蒸气,将薄层放入容器片刻或数分钟即显色。
有时在容器内放一小杯水增加湿度,可提高显色的灵敏度,可提高显色的灵敏度。
在化合物斑点处显黄-棕色。
(3)磷钼酸(molybdophosphoric acid)用于还原性化合物、类脂、甾体化合物等。
试液:5%或10%磷钼酸乙醇溶液喷或浸后处理:于120摄氏度加热至最佳颜色形成,如将薄层放入含25%氢氧化铵溶液的容器内,可使背景颜色消退。
(4)香草醛-硫酸(vanillin-sulphuric acid)用于精油、高级醇、酚等试液:香草醛1g溶于100ml硫酸或香草醛0.5g溶于100ml硫酸-乙醇(1:1)溶液。
喷或浸后处理:于120摄氏度加热至颜色最深。
(5)三氯化铁(ferric chloride)用于酚类、羟酰胺酸。
试液:1%~5%三氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液。
注:酚类呈兰色或绿色,羟酰胺酸呈红色。
(6)三氯化铝(aluminium chloride)用于黄酮类化合物。
试液:1%三氯化铝乙醇溶液,紫外光长波下斑点显黄色荧光。
(7)碘化铋钾试剂(dragendorff reagent)用于生物碱和某些含氮化合物。
试液:a:次硝酸铋0.85g溶于10ml冰乙酸与40ml水中。
b:碘化钾8g溶于20ml水中。
各种常用显色剂及其配制方法
各种常用显色剂及其配制方法碘适用于不饱和或者芳香族化合物配制方法:在100ml广口瓶中,放入一张滤纸,少许碘粒。
或者在瓶中,加入10g碘粒,30g硅胶高锰酸钾适用于含还原性基团化合物,比如羟基,氨基,醛配制方法:1.5gKMnO4+10gK2CO3+1.25mL10%NaOH+200mL水.使用期3个月磷钼酸(PMA)广谱配制方法:10gof磷钼酸+100mL乙醇紫外灯适用于含共轭基团的化合物,芳香化合物硫酸铈生物碱配制方法:10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法:1%FeCl3+50%乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱,有荧光活性配制方法:0.1%桑色素+甲醇茚三酮适用于氨基酸配制方法:1.5g茚三酮+100mLof正丁醇+3.0mL醋酸二硝基苯肼(DNP)适用于醛和酮配制方法:12g二硝基苯肼+60mL浓硫酸+80mL水+200mL乙醇香草醛(香兰素)广谱配制方法:15g香草醛+250mL乙醇+2.5mL浓硫酸溴甲酚绿适用于羧酸,pKa<=5.0配制方法:在100ml乙醇中,加入0.04g溴甲酚绿,缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液,刚好出现蓝色即至。
钼酸铈广谱配制方法:235mL水+12g钼酸氨+0.5g钼酸铈氨+15mL浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1广谱配制方法:135乙醇+5mL浓硫酸+1.5mLof冰醋酸+3.7mL茴香醛,剧烈搅拌,使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2适用于萜烯,桉树脑(cineoles),withanolides,出油柑碱(acronycine)配制方法:茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)胺类物质常用的是:(1)磷钼酸显色剂:磷钼酸5%-10% 乙醇溶液,淡黄色,久置变为浅绿色,不影响使用。
浸板或喷板,加热,浅黄色背景,还原性物质显蓝绿色斑点,如果斑点太浓,可能显深黄色。
(2)CAM显色剂:钼酸铵9.6g,硫酸铈0.4g,10%硫酸水溶液200ml,混匀,极淡的黄色溶液,棕色瓶密闭保存,喷板,加热,白色背景,还原性物质显深蓝色斑点。
常用鉴定试剂的配制和应用
常用鉴定试剂的配制和应用一、通用试剂1、碘试剂检查一般有机化合物。
(1)碘蒸气预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内,使容器空间被碘蒸气饱和,将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。
有时,于容器中加放一小杯水,增加容器内的湿度,可提高显色的灵敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液喷洒试剂,置空气中待过量的碘挥发后,喷1%淀粉溶液,斑点由棕色转为蓝色。
2、硫酸试剂检查一般有机化合物。
5%硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。
喷洒后,置空气中干燥15min,100℃烤至斑点呈色(不同化合物呈不同颜色)。
3、重铬酸钾—硫酸试剂检查一般有机化合物。
5g重铬酸钾溶于l00ml40%硫酸中。
喷该试剂后,150℃加热至斑点出现(不同化合物呈不同颜色)。
4、磷钼酸试剂检查还原性成分。
5%磷钼酸乙醇溶液。
喷洒后,120℃加热至呈蓝色斑点。
5、磷钨酸试剂检查还原性成分20%磷钨酸乙醇溶液。
喷洒后,120℃烘烤,还原性物质呈蓝色斑点。
6、硝酸银—氢氧化铵试剂检查还原性成分。
溶液I:0.1mol/L硝酸银溶液。
溶液Ⅱ:10%氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和Ⅱ以1︰5混合。
喷洒后105℃加热5~l0min,至深黑色斑点出现。
7、中性高锰酸钾试剂检查易还原性成分。
0.05%高锰酸钾溶液。
喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。
8、碱性高锰酸钾试剂检查还原性成分。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液。
溶液I和Ⅱ等量混合使用,喷洒后,粉红背景上显黄色斑点。
9、四唑蓝试剂检查还原性成分。
溶液I:0.5%四唑蓝甲醇溶液。
溶液Ⅱ:25%氢氧化钠溶液。
临用前两液等量混合。
喷洒后,微热或室温放置显紫色斑点。
10、荧光素—溴试剂检查不饱和化合物。
溶液I:0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中。
溶液Ⅱ:5g溴溶于l00ml四氯化碳中。
先喷洒溶液I,然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内,黄色斑点出现后,于紫外光灯下检视,红色底板上显黄色荧光斑点。
11.荧光显色试剂检查一般有机化合物。
TLC显色试剂及配方大全
TLC显色试剂及配方大全显色试剂显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
l.通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1) 烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银O.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
实验室最常用的显色剂及配制方法
实验室最常用的显色剂及配制方法(1)硫酸(sulphuri acid)通用显色剂。
试液:a、5%浓硫酸乙醇或乙酐溶液b、浓硫酸与甲醇或乙醇等体积混合c、15%浓硫酸正丁醇溶液方法:用以上任一试液喷洒或浸湿晾干,于110摄氏度加热至呈色,或达最强荧光。
(2)碘(iodine)通用显色剂。
试液:a:0.5%碘的氯仿溶液。
喷后处理:待薄层上过量碘挥散,喷1%淀粉溶液,斑点转为兰色,如有过量碘留在薄层上,则背景也呈兰色。
b:碘蒸气:将少许碘晶体放进一密闭的容器内,使之布满饱和碘蒸气,将薄层放进容器片刻或数分钟即显色。
有时在容器内放一小杯水增加湿度,可进步显色的灵敏度,可进步显色的灵敏度。
在化合物斑点处显黄-棕色。
(3)磷钼酸(molybdophosphoric acid)用于还原性化合物、类脂、甾体化合物等。
试液:5%或10%磷钼酸乙醇溶液喷或浸后处理:于120摄氏度加热至最佳颜色形成,如将薄层放进含25%氢氧化铵溶液的容器内,可使背景颜色消退。
(4)香草醛-硫酸(vanillin-sulphuric acid)用于精油、高级醇、酚等试液:香草醛1g溶于100ml硫酸或香草醛0.5g溶于100ml硫酸-乙醇(1:1)溶液。
喷或浸后处理:于120摄氏度加热至颜色最深。
(5)三氯化铁(ferric chloride)用于酚类、羟酰胺酸。
试液:1%~5%三氯化铁的0.5mol/L盐酸溶液。
注:酚类呈兰色或绿色,羟酰胺酸呈红色。
(6)三氯化铝(aluminium chloride)用于黄酮类化合物。
试液:1%三氯化铝乙醇溶液,紫外光长波下斑点显黄色荧光。
(7)碘化铋钾试剂(dragendorff reagent)用于生物碱和某些含氮化合物。
试液:a:次硝酸铋0.85g溶于10ml冰乙酸与40 ml水中。
b:碘化钾8g溶于20ml水中。
方法:试液a和b等量混合,置棕色瓶保存试液。
用前将试液1ml加2ml冰乙酸和10ml 水混合。
各种显色剂及其配制方法
显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
l.通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液与0.5-1.5mol/L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷 1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC加热15~20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1) 烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银0.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇l00ml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I.荧光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
TLC显色剂配比方法
(3)醛酮类
①品红/亚硫酸
检出物:醛基化合物。
溶液:I.0.01%品红溶液,通入二氧化硫直至无色;Ⅱ.0.05mol/L氯化汞溶液;
Ⅲ.O.05mol/L硫酸溶液。
方法:将I、Ⅱ、Ⅲ以1:1:10混合,用水稀释至l00ml。
②邻联茴香胺
检出物:醛类、酮类。
溶液:本品乙酸饱和溶液。
结果:阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。
⑥Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛/盐酸)试剂
检出物:吲哚衍生物及胺类。
溶液:1%本品的浓盐酸溶液与甲醇按1:1混合。
方法:喷后板于50℃加热20min。
结果:呈不同颜色的斑点。
(7)胺类
①硝酸/乙醇
④绕丹宁
检出物:类胡萝卜素醛类。
溶液:I.1%~5%绕丹宁乙醇溶液;Ⅱ.25%氢氧化铵或27%氢氧化钠溶液。
方法:先喷溶液I,再喷溶液Ⅱ,干燥。
(4)有机酸类
①溴甲酚绿
检出物:有机酸类。
溶液:溴甲酚绿0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml。
④碘铂酸钾
检出物:生物碱类及有机含氮化物。
溶液:10%六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合,加6%碘化钾溶液,混匀。临用前配制。
⑤硫酸高铈铵/硫酸
检出物:生物碱及含碘有机化物。
溶液:硫酸铈1g混悬于4ml水中,加三氯乙酸1g,煮沸,逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。
方法:喷后薄层于1l0℃加热数分钟。
③香草醛/硫酸
检出物:高级醇、酚、甾类及精油。
溶液:香草醛1g溶于硫酸lOOml。
方法:喷后于120℃加热至呈色最深。
显色剂配制方法
显色剂配制方法中药成分鉴别常用显色剂及其配制方法一、通用显色剂(1)硫酸①浓硫酸与甲醇等体积小心混合,冷却;②15%浓硫酸的正丁醇溶液;③5%浓硫酸的乙酸酐溶液;④5%浓硫酸的乙醇溶液;⑤浓硫酸与乙酸等体积混合。
用以上任一试液喷薄层板后,于110℃烘烤15min,不同类的成分显不同颜色。
(2)碘①0.5%碘的氯仿溶液;②碘蒸气在一密闭的玻璃缸内预先放入少许碘结晶,使缸为碘蒸气饱和。
将薄层板放入缸内数分钟即可显色,碘对很多化合物显黄棕色。
(3)高锰酸钾-硫酸高锰酸钾0.5g溶于15ml 40%硫酸中。
检测易还原性物质。
(4)铬酸-硫酸重铬酸钾5g溶于100ml 40%硫酸中。
易还原性物质显色。
(5)荧光显色液①0.25%的罗丹明B乙醇溶液;②0.01%的荧光素乙醇溶液;③0.1%的桑色素乙醇溶液。
用以上任一试液喷薄层板后,在荧光背景下可能显黑色或其他荧光斑点。
二、专属性显色剂(一)生物碱及含氮类化合物(1)改良碘化铋钾(Dragendorff)试剂①碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸与40ml水中;②碘化钾0.8g溶于20ml水中。
试液①与试液②等量混合置棕色瓶内保存作贮备液。
用前将1ml贮备液、2ml冰醋酸与10ml水混合。
用于生物碱与某些含氮化合物,显橙红色。
(2)碘-碘化钾(Wagner)碘1g与碘化钾10g溶于50ml水(微温),加2ml乙酸,加水至100ml。
用于生物碱,显棕褐色。
(3)碘铂酸5ml 15%氯化铂溶液加45ml 10%碘化钾溶液,用水稀释至100ml。
用于生物碱,不同生物碱显不同颜色。
(4)碘铂酸钾 10%六氯铂酸溶液3ml与97ml水混合,加100ml 6%碘化钾溶液,混匀。
新鲜配制。
用于生物碱与其他有机含氮化合物,不同生物碱显不同颜色。
(5)Ehrlich ①10%对二甲氨基苯甲醛盐酸溶液与丙酮按1:4混合。
②对二甲氨基苯甲醛1g,溶于100ml 96%乙醇中。
用于吲哚类,有时喷后要加热。
分析工作常用显色剂
分析工作常用显色剂常用鉴定试剂的配制和应用一、通用试剂1、碘试剂检查一般有机化合物。
(1)碘蒸气预先将盛有碘结晶的小杯置于密闭的玻璃容器内,使容器空间被碘蒸气饱和,将薄层置于容器内数分钟即显棕色斑点。
有时,于容器中加放一小杯水,增加容器内的湿度,可提高显色的灵敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液喷洒试剂,置空气中待过量的碘挥发后,喷1%淀粉溶液,斑点由棕色转为蓝色。
2、硫酸试剂检查一般有机化合物。
5%硫酸乙醇溶液作为色谱显色剂用。
喷洒后,置空气中干燥15min,100℃烤至斑点呈色(不同化合物呈不同颜色)。
3、重铬酸钾—硫酸试剂检查一般有机化合物。
5g重铬酸钾溶于l00ml40%硫酸中。
喷该试剂后,150℃加热至斑点出现(不同化合物呈不同颜色)。
4、磷钼酸试剂检查还原性成分。
5%磷钼酸乙醇溶液。
喷洒后,120℃加热至呈蓝色斑点。
5、磷钨酸试剂检查还原性成分20%磷钨酸乙醇溶液。
喷洒后,120℃烘烤,还原性物质呈蓝色斑点。
6、硝酸银—氢氧化铵试剂检查还原性成分。
溶液I:0.1mol/L硝酸银溶液。
溶液Ⅱ:10%氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和Ⅱ以1∶5混合。
喷洒后105℃加热5~l0min,至深黑色斑点出现。
7、中性高锰酸钾试剂检查易还原性成分。
0.05%高锰酸钾溶液。
喷洒后粉红色背景上显黄色斑点。
8、碱性高锰酸钾试剂检查还原性成分。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
溶液Ⅱ:5%碳酸钠溶液。
溶液I和Ⅱ等量混合使用,喷洒后,粉红背景上显黄色斑点。
9、四唑蓝试剂检查还原性成分。
溶液I:0.5%四唑蓝甲醇溶液。
溶液Ⅱ:25%氢氧化钠溶液。
临用前两液等量混合。
喷洒后,微热或室温放置显紫色斑点。
10、荧光素—溴试剂检查不饱和化合物。
溶液I:0.1g荧光素溶于l00ml乙醇中。
溶液Ⅱ:5g溴溶于l00ml四氯化碳中。
先喷洒溶液I,然后将薄层板放入盛有溶液Ⅱ的缸内,黄色斑点出现后,于紫外光灯下检视,红色底板上显黄色荧光斑点。
11.荧光显色试剂检查一般有机化合物。
各种显色剂及其配制方法
显色剂可以分成两大类:一类是检查一般有机化合物的通用显色剂;另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。
显色剂种类繁多,本章只能列举一些常用的显色剂。
I.通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L 硫酸溶液与0.5-1.5mol / L硫酸铵溶液,喷后110oC烤15min,不同有机化合物显不同颜色。
②0.5%碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。
③中性0.05%高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。
④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。
溶液1: 1 %高锰酸钾溶液;溶液H:5%碳酸钠溶液;溶液I和溶液n等量混合应用。
⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6%高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸),喷后薄层于180oC 加热15 〜20min。
⑥酸性重铬酸钾试剂喷5%重铬酸钾浓硫酸溶液,必要时150oC烤薄层。
⑦5%磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤,还原性化合物显蓝色,再用氨气薰,则背景变为无色。
⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色,再喷2mol/L 盐酸溶液,则蓝色加深。
溶液I :1%铁氰化钾溶液;溶液n:2 %三氯化铁溶液;临用前将溶液I和溶液n等量混合。
2.专属性显色剂由于化合物种类繁多,因此专属性显色剂也是很多的,现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下:(1)烃类①硝酸银/过氧化氢检出物:卤代烃类。
溶液:硝酸银o.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇100ml,用丙酮稀释至200ml,再加30%过氧化氢1 滴。
方法:喷后置未过滤的紫外光下照射;结果:斑点呈暗黑色。
②荧光素/溴检出物:不饱和烃。
溶液:I •荧光素0.1g溶于乙醇100ml ;n. 5%溴的四氯化碳溶液。
方法:先喷(I),然后置含溴蒸气容器内,荧光素转变为四溴荧光素(曙红),荧光消失,不饱和烃斑点由于溴的加成,阻止生成曙红而保留荧光,多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。
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常用试剂配制及显色方法(一)通用显色剂1.重铬酸钾——硫酸一般有机物均能显色,不同化合物显示不同颜色。
喷洒剂:5克重铬酸钾溶于100ml,40%硫酸中。
喷洒后加热至150o C斑点出现。
2.碘:检查一般有机物(1)碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色,有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可提高显色的灵敏度。
(2)0.5%碘的氯仿溶液,取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。
3.碘——碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)。
4.5%——磷钼酸乙醇溶液:喷后120o C烤,还原性物质显兰色,再用氨气熏,则背景变为无色。
5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120o C,还原性物质显兰色。
6.碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色。
溶液I:1%高锰酸钾溶液。
溶液II:5%碳酸钠溶液。
溶液I和溶液II等量混合使用。
7.中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。
8.硝酸银——氢氧化铵(Tollen’s--zoffaronl)试剂,喷后105o C烤5~10分钟,还原性物质显黑色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液。
溶液II:氢氧化铵溶液。
临用前溶液I和溶液II以1:5混合。
注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。
9.硝酸银——高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。
溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化铵溶液:2N氢氧化钠(1:1:2)。
临用前配制。
溶液II:高锰酸钾0.5g,碳酸钠1g,加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。
10.四唑试剂:还原性物质,在室温或微加热时显紫色。
溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液。
溶液II:6N氢氧化钠溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
11.铁氰化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色,再喷射2N/L盐酸溶液,则兰色加深。
溶液I:1%铁氰化钾溶液。
溶液II:2%三氯化铁溶液。
临用前溶液I和溶液II等量混合。
12.浓硫酸:甲醇(1:1)溶液,或5%硫酸的乙醇溶液,喷后100o C烤15分钟,各种不同物质显不同颜色。
13.萤光显色剂溶液:试喷以下一溶液,不同的物质财富在萤光背景上可能显黑色或其他萤光斑点。
A:0.2%2.7——二氯萤光素乙醇溶液。
B:0.01萤光素乙醇液C:0.1%桑色素乙醇溶液D:0.05罗丹明B乙醇溶液E:萤光素一溴,检不饱和化合物。
(1)0.1%萤光素乙醇溶液(2)5%溴的CCL4溶液。
喷洒(1)以后,放置(2)溶液的缸内,可在UV光下检查萤光,萤光素与溴化合成曙红(ensln)(无萤光),而光饱和化合物则与溴加成,保留了原来的萤光;若点样量较多,则成黄色斑点,底板成红色。
14.碱式醋酸铅试剂(可做喷洒或沉淀试剂,多种有机化合物均反应)。
取Pbo14g置乳钵内,加蒸馏水10ml,研后成糊状后,倾入玻璃瓶中,乳钵用10ml 蒸馏水洗净,洗液并入瓶中,加醋酸铅溶液(取醋酸铅22g,加蒸馏水70ml制成)70ml,用力振摇,放置七天,滤过,并自滤器中添加适量新沸过的冷蒸馏水使成100ml即得。
(二)生物碱显色剂通用显色剂:1.改良碘化铋钾(Dragendorff)试剂:生物碱和某些含氯化合物显橙红色。
溶液I:碱式硝酸铋0.85g,溶于冰乙酸10ml和40ml.溶液II:碘化钾0.8g溶于水20ml.储存液:溶液I和溶液II等量混合(置棕色瓶中杨以长期保存)。
显色剂:储存1ml与冰乙酸2ml和水70ml混合,用前配制。
2.碘化铂钾(碘铂酸)试剂,不同的生物碱显不同的颜色。
10%六氯化铂酸溶液3ml和水97ml混合,加6%碘化钾溶液100ml,混合均匀,临用前配制。
3.碘—碘化钾(Wagner)试剂:生物碱显棕褐色。
碘1g和碘化钾10g溶于50ml水中,加热,加冰醋酸2ml用水稀释到100ml。
4.改良碘化铋钾:碘,碘化钾(1:1)试剂;生物碱显紫棕色或灰黑色。
5.硫酸铈——硫酸试剂(改良sonnensclein试剂):喷后110o C烤几分钟,不同的生物碱显不同的颜色。
硫酸铈0.1g悬浮于水4ml中,加三氯化乙酸1g,加热煮沸,放冷,逐滴加入浓硫酸直到混浊消失为止。
6.碘化氯钾(vmayer)试剂(沉淀试剂):取HgCL2(毒)1.35g加蒸馏水60ml溶解后,量取碘化钾5g,加碘馏水10ml使溶解将两液混合,加蒸馏水稀释使成100ml即得。
7.硅钨酸(Bertrand)试剂(沉淀试剂):5g硅钨酸溶于100ml蒸馏水中,加稀盐酸使呈酸性反应即得。
(三)强心甙显色剂1.碱性3.5——二硝基苯甲酸试剂:强心甙显紫红色、几分钟后褪色。
2%3.5——二硝基苯甲酸甲醇溶液与2N氢氧化钾溶液,用前按劳1:1混合。
2.碱性三硝基苯:在浅橙色背景上显橙红色。
溶液I:间三硝基苯100mg。
溶于二甲基甲酰胺40ml,加浓HCL3~4滴,加水至100ml,避光能长期保存。
溶液II:5%碳酸风溶液先喷溶液I,再喷溶液II,喷后90~103.0o C烤5分钟。
3.三氯乙酸试剂:喷后110o C烤7~10分钟,紫外光下观察萤光。
试剂I:25%三氯乙酸的乙醇或氯仿溶液,配制后可放置数日。
或用试剂II:上述乙醇溶液用前每10ml加过氧化氢溶液4滴或新配3%氯铵T水溶液按4:1混合。
4.三氯化锑试剂:喷后100o C烤5分钟,日光下或紫外光下观察。
25%或饱和的三氯化锑氯仿溶液。
5.磷酸——溴试剂溶液I:10%磷酸溶液。
溶液II:溴化钾饱和溶液:25%盐酸溶液(1:1:1)。
薄层用溶液I喷洒后,在125o C烤12分钟(薄层太湿时则烤的时间可适当延长),在紫外光下观察一次,将薄层再烤热,趁热喷溶液II,再在紫外光下观察。
6.Keller——Kllianl试剂:(检查α——去氧糖)试液:100ml冰HAC和FeCL3试液0.5ml混匀,试样1ml混匀。
试样1ml加试液2ml溶解后,沿试管壁滴入浓硫酸2接触面即显棕色。
渐变浅绿,兰色。
最后HAC层全部染成兰色。
(四)黄酮甙显色剂黄酮类成份在紫外光下大多显出不同颜色,用氨熏,喷三氯化铝溶液或喷氢氧化钠等碱性溶液,则颜色变深或变色。
1.氨气2.10%氢氧化钠或氢氧化钾溶液。
3.1%或5%碳酸钠溶液。
4.1%或5%三氯化铝乙醇溶液。
5.2%乙酸镁甲醇溶液。
6.饱和三氯化锑的氯仿溶液,100o C烤5分钟。
以上六种试剂在喷前喷后将薄层置日光与紫外光下观察。
7.1~2%三氯化铁乙醇溶液。
8.1%中性乙酸铅或碱式乙酸铅溶液。
9.0.1N硝酸银溶液。
10.铁氰色钾——三氯化铁试剂。
溶液I:2%铁氰化钾溶液。
溶液II:2%三氯化铁溶液。
临用前溶液I与溶液II等量混合。
11.硼氢化钾试剂:双氢黄酮化合物显红、橙红色。
溶液I:1~2%硼氢化钾(钠)异丙醇溶液,必须新鲜配制。
溶液II:浓盐酸先喷I、5分钟后放入盐酸蒸气槽内。
12.Shinoda试剂:在混有锌粉的硅胶薄层上喷盐酸,黄酮醇显红紫色。
制备硅胶薄层时,加入2%w/w锌粉混合,薄层展开后盐酸溶液,如展开剂为酸性,可在展开后先喷锌——丙酮混悬液,再喷盐酸溶液。
罗丹明——氨试剂。
溶液I:0.1%罗丹明B的4%盐酸溶液。
溶液II:浓氨溶液。
先喷溶液I,然后再将薄层放入氨汽槽内。
14.对氨基苯磺酸试剂。
溶液I:对氨基苯磺酸盐溶液。
溶液II:5%亚硝酸钠溶液。
将对氨基苯磺酸0.3g溶液对8%盐酸溶液100ml中,到紫溶液25ml用冰冷却,加预冷的溶液II1.5ml。
15.硼酸——柠檬酸试剂溶液I:饱和硼酸的丙酮溶液。
溶液II:柠檬酸丙酮溶液。
先喷溶液I,再喷溶液II。
16.福林试剂(Folin Ciocalteu试剂)钨酸钠10g和钼酸钠2.5g溶于70ml水中,再缓缓加85%磷酸5ml和浓盐酸10ml,将混合液回流煮沸10小时,然后加硫酸锂15g,水5ml及溴1滴,再回去流煮沸15分钟,所得溶液冷却后移置100ml溶量瓶中并用水稀释到刻度(贮备液),溶液应不显绿色。
溶液I:20%碳酸钠溶液。
溶液II:临用前上述贮备液1份用水三分稀释。
先喷溶液I,稍干再喷溶液II。
(五)皂甙灶显色剂1.25%磷钼酸乙醇溶液:喷后在140o C加热5~10分钟皂甙元均呈深兰色。
2.三氯化锑浓盐酸或氯仿溶液:喷后在90o C烤10分钟(应在通风厨中进行),不同的皂甙元在可见光或紫外光下显出各种颜色。
3.硫酸:甲醇(1:2)溶液,喷后加热,不同的皂甙元可显红褐色、紫色、黄色或黑色,所显颜色与温度无关。
4.氟磺酸:乙酸(1:1)溶液,喷后130o C加热5分钟。
各种皂甙元可显天兰紫、粉红、淡棕等色,在紫外光下也显不同萤光。
5.碘蒸汽:薄层置于碘蒸汽筒中,皂甙无皆显棕黄色斑点。
6.三氯快乙酸或三氯乙酸:乙酸(1:2)溶液,喷后在100o C加热20分钟皆显黄色。
7.2%血球生理盐水混悬液(溶血试验、检皂甙)。
取新鲜兔血(由心脏或静脉取血)适量,用洁净小毛刷迅速搅拌除去纤维蛋白,并用生理盐水反复离心洗涤至上清液无色后,量取沉降红血球(可以管的离心管通接读取)用生理盐水配成2%混悬液贮冰箱内备用(贮存期2~3天)。
(六)蒽醌甙显色剂蒽醌及其甙本身在日光下显黄色,在紫外光下则显黄,红橙色萤光。
在薄层上用氨熏或喷氢氧化钾与碱溶液,则颜色变深或变色。
1.氨气2.10%氢氧化钾、甲醇溶液。
3.3%氢氧化钠溶液或碳酸钠溶液。
4.50%哌啶的苯溶液。
5.饱和喷酸锂溶液。
6.饱和硼砂溶液。
7.0.5%乙酸镁甲醇溶液:喷后90o C烤5分钟。
8.0.5%乙酸铝溶液,喷后紫外光下看萤光。
9.0.5%牢固兰B试剂,喷后则原来氢氧化钠、锂、钾等溶液碱溶液显萤光的斑点此时在可见光下显棕、紫或绿色。
也可先喷本试剂,再喷稀氢氧化钠溶液而显色。
也用于酚类及能偶芳香胺的显色。
溶液I:新配的0.5%牢固兰B盐的水溶液。
溶液II:0.1N/L氢氧化钠溶液。
先喷溶液I,喷溶液II。
(七)香豆精甙显色剂1.0.5%碘的碘化钾溶液,香豆精各种颜色,很多其他类型的化合显色。
2.重氟化氨基苯磺酸试剂,香豆精显黄、橙、红、棕紫等颜色也用于酚类,芳香胺反转偶合的朵环化合物的显色。
对氨基苯横酸0.9g克加热溶于12N盐酸9ml,用水稀释到100ml,取此溶液10ml 用冰冷却,加冰冷的4.5%亚硝酸钠溶液10ml,0o C放15分钟(在0o C可保存三天),用前加等体积1%碳酸钠溶液。
3.重氮化对硝基苯胺试剂、香豆精显黄、红、棕、紫等颜色,也用于酚类的显色。
对硝基苯苯胺0.7g溶于12N盐酸9ml,用水稀释到100ml,将此溶液逐渐滴加到冰冷的1%亚硝酸钠溶液5,再用冰冷的水稀释到100,需临用时新配。
4.4——氨基安替比林——铁氰化钾试剂:香豆素和酚类显橙红至深红色。