实验五白细胞分类计数

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白细胞计数和分类实验报告

白细胞计数和分类实验报告

白细胞计数和分类目的:掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、原理:各种白细胞必须经过染色,才易于区分其类别。

常用者为瑞氏(Wright’s)染色法和姬姆萨(Giemsa)染色法。

测定外周血液中各种白细胞的相对比值,以观察其数量、形态和质量变化,通过显微镜观察染色血涂片,计算血液中各类白细胞的百分率,称为白细胞分类计数。

利用白细胞总数和各类白细胞的百分率,即可计算每mm3血液中各类白细胞的绝对值。

实验器材:香柏油、盖玻片、推片、采血针或注射器、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针1ml 刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。

20ul刻度移液管、推片实验步骤白细胞分类1.血片制作:取一滴血,滴于洁净无油脂的玻片一端。

左手持玻片,右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。

将推片边缘置于血滴前方,然后向后拉,当与血滴接触后,血即均匀附在二玻片之间。

此后以二玻片约呈30—45度的角度平稳地向前推至玻片另一端。

推时角度要一致,用力应均匀,即推出均匀的血膜(血膜不可过厚、过薄)。

将制好的血涂片晾干,不可加热。

注:(1)良好涂片标准:1) 呈头、体、尾舌形2) 血膜厚薄适宜3) 两边留有空隙(2)涂片好坏与下列因素有关:1)血滴大小2)推片与玻片之间角度3)推片速度2、血涂片的染色步骤:(1)用蜡笔在血膜两端各划一道线,以免染料外溢,置涂片于染色架上。

(2)滴加瑞氏染液,共计七八滴数,以盖满血膜为度,静置1分钟。

(3)再滴加等量的磷酸缓冲盐溶液,轻轻摇动,并轻吹液体使染色液与缓冲液混合均匀,静置15分钟。

(4)用清水冲洗。

切勿先倾去染液再冲洗,否则沉淀物附于血膜上不宜出去。

冲洗后斜置血涂片于空气中干燥。

或先用滤纸吸取水分迅速干燥,即可镜检。

3、白细胞分类计数:先用低倍镜检查涂片及染色是否均匀。

然后加一滴香柏油于血膜厚薄均匀处(一般在体尾交界处),在油镜下由此处开始按其形态特征进行分类计数,计数移动时避免重复。

白细胞分类计数操作程序

白细胞分类计数操作程序

白细胞分类计数操作程序一、背景简介白细胞是人体免疫系统的重要组成部分,对于诊断和监测疾病具有重要意义。

而白细胞分类计数操作是指通过显微镜观察和计数不同类型的白细胞,以评估人体免疫系统的功能状态。

本文将介绍一种白细胞分类计数操作程序,旨在提高操作的准确性和效率。

二、准备工作1. 实验室环境:确保实验室内的光线明亮且稳定,以便观察细胞样本。

2. 实验器材:准备好显微镜、玻璃载片、镊子、注射器、荧光染色剂等必要的器材。

3. 样本采集:从患者的血液中采集适量样本并置于抗凝剂中。

三、操作步骤1. 样本制备将采集到的样本倒入试管中,并加入适量抗凝剂。

轻轻摇匀,避免产生气泡。

2. 白细胞分离将均匀混合的样本转移到离心管中,设定合适的离心速度和时间,使白细胞沉淀于底部。

3. 样本涂片使用镊子将离心后的白细胞沉淀取出,滴在玻璃载片上。

用第二根载玻片压平,使细胞均匀附着在载片上。

4. 染色加入适量的染色剂,轻轻摇匀,然后在室温下静置一段时间,使细胞染色均匀。

5. 浏览和计数将载片放入显微镜中,调整合适的倍数和焦距,通过显微镜进行观察和计数。

根据不同类型的白细胞特征,对其进行分类计数。

四、操作要点1. 观察时要仔细检查每个视野,确保计数的准确性。

避免因视野不全或细胞过于密集而导致漏计或重复计数。

2. 注意显微镜的清洁和调试,保证观察时的清晰度和准确性。

3. 染色剂的选择要根据目的和样本特点进行,确保染色的有效性和准确性。

4. 操作时要避免产生气泡或其他污染,以免对结果产生影响。

5. 操作完毕后,及时清理实验台和实验器材,保持实验室的整洁和卫生。

五、结果记录和分析在操作过程中,需要记录每个类型的白细胞计数结果。

可以使用电子表格或者专用软件进行统计和分析。

通过比较不同时间点和不同样本的计数结果,可以对疾病的发展和治疗效果进行评估。

六、结论白细胞分类计数操作程序是一项重要的实验室技术,其结果可以为疾病诊断和治疗提供重要的参考依据。

白细胞形态分类实验报告

白细胞形态分类实验报告

一、实验目的1. 掌握血涂片制备的操作要领。

2. 熟悉瑞氏染色方法。

3. 熟悉正常外周血五种白细胞形态特点。

4. 掌握白细胞分类计数的方法。

二、实验原理白细胞是血液中的一种重要细胞,具有防御和免疫作用。

通过显微镜观察血涂片,对白细胞进行分类计数,可以了解血液中各种白细胞的数量和比例,从而判断患者的健康状况。

三、实验材料1. 器材:普通光学显微镜、分类计数器、香柏油、拭镜纸。

2. 试剂:瑞氏染液A液、瑞氏染液B液。

3. 标本:末梢血。

四、实验步骤1. 采血:取患者末梢血,用无菌采血针抽取血液。

2. 制备血涂片:将血液滴于洁净的载玻片上,用推片将血液均匀涂抹在玻片上,制成薄而均匀的血涂片。

3. 瑞氏染色:将血涂片置于染色缸中,加入瑞氏染液A液,染3-5分钟;加入瑞氏染液B液,染1分钟;冲洗干净。

4. 干燥:将染色后的血涂片晾干。

5. 镜检:先用低倍镜观察血涂片,选择细胞分布均匀的区域;然后换用高倍镜进行白细胞分类计数。

6. 分类计数:按照城垛形的方式往血涂片头部方向进行计数,将观察到的白细胞分类,以正“字计数,直至计数满100个白细胞。

五、实验结果与分析1. 白细胞分类计数结果:- 中性粒细胞:40%- 淋巴细胞:30%- 单核细胞:15%- 嗜酸性粒细胞:10%- 嗜碱性粒细胞:5%2. 结果分析:通过对白细胞的分类计数,可以看出患者血液中中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞的数量和比例。

正常情况下,中性粒细胞占白细胞总数的50%-70%,淋巴细胞占20%-40%,单核细胞占3%-8%,嗜酸性粒细胞占1%-5%,嗜碱性粒细胞占0%-1%。

六、实验结论本次实验成功制备了血涂片,并进行了瑞氏染色。

通过观察染色后的血涂片,对白细胞进行了分类计数,得到了患者血液中各种白细胞的数量和比例。

实验结果与正常参考值基本相符,说明本次实验操作规范,结果准确可靠。

七、实验体会1. 实验过程中要注意血涂片的制备,确保血涂片薄而均匀,以便于观察。

白细胞分类计数参考方法

白细胞分类计数参考方法

白细胞分类计数参考方法白细胞分类计数是一项重要的检验指标,用于评估人体免疫功能和诊断炎症、感染等疾病。

白细胞的分类计数需要准确可靠的方法和标准参考值,以确保结果的科学性和可比性。

本文将介绍白细胞分类计数的参考方法,帮助读者更好地理解和运用相关的检验结果。

一、白细胞分类计数的方法目前,常用的白细胞分类计数方法有手工计数法和自动计数法两种。

手工计数法是最传统的方法之一,通过显微镜观察染色后的血液标本,手动计数各类白细胞数量。

这种方法操作简单,成本较低,适用于小样本量和基础设备薄弱的实验室。

然而,手工计数法存在操作者主观性强、计数误差和速度较慢等缺点,容易产生结果的不稳定性。

自动计数法则是近年来快速发展的技术,主要利用血液细胞分析仪(Hematology Analyzer)实现白细胞的分类和计数。

该方法通过光学、流式细胞术等原理,自动识别和计算不同类型白细胞的比例和绝对值。

相比手工计数法,自动计数法具有高精度、高通量、快速便捷等优势,大大提高了检验效率和结果的准确性。

二、白细胞分类计数的参考值白细胞分类计数的参考值是指正常人群中不同类别白细胞的数量范围。

这些参考值是通过大样本的健康人群进行统计,经过相关统计学分析和计算得出的。

一般来说,白细胞分类计数的参考值包括中性粒细胞(Neutrophils)、淋巴细胞(Lymphocytes)、单核细胞(Monocytes)、嗜酸性粒细胞(Eosinophils)和嗜碱性粒细胞(Basophils)等五种白细胞的比例和绝对数量。

不同实验室或不同地区的参考值可能存在差异,因此在运用时需要结合具体情况进行解读。

同时,个体差异、年龄、性别、生理状态等因素也可能对白细胞分类计数的参考值产生影响,因此需综合分析结果,避免过度解读或片面评估。

三、进一步优化白细胞分类计数方法为了进一步提高白细胞分类计数的准确性和可比性,一些方法和技术逐渐得到应用。

1. 高级染色技术:传统的白细胞分类计数主要依靠各类染色液的着色效果区分细胞类型。

仪器发白细胞计数标准

仪器发白细胞计数标准

仪器发白细胞计数标准
白细胞计数是一项常用的临床实验室检测指标,用于评估患者体内白细胞的数量。

根据国际标准,正常成年人的白细胞计数范围通常为每升四千到九千五百个。

然而,这个范围可能因年龄、性别和健康状态等因素而有所不同。

白细胞分为五类,包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。

正常情况下,中性粒细胞是最主要的白细胞类别,其百分比通常在百分之五十到百分之七十五之间。

其他细胞类型的百分比通常较低,如淋巴细胞占百分之二十到百分之四十,而单核细胞只占百分之三到百分之八。

嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞通常只占总白细胞数的少部分。

注意,每个实验室可能使用略有不同的方法和仪器来进行白细胞计数。

因此,具体的参考值应该结合临床实验室的标准参考范围进行解读。

如果白细胞计数超出标准范围,医生可能会进一步分析和诊断患者的健康状况。

为确保准确性和可靠性,建议使用经过校准和维护的仪器,并由专业技术人员进行操作和解读结果。

白细胞分类计数实验报告结果

白细胞分类计数实验报告结果

白细胞分类计数实验报告结果大家好,今天要跟大家聊一聊一个咱们日常生活中虽然听上去挺“高大上”,但其实也很接地气的话题——白细胞分类计数。

别看这个名字有点长,听起来就像是医生用来吓唬人的东西,实际上它就是告诉我们白细胞的“家庭结构”到底是啥样的。

你看,我们人体里有个白细胞大家族,虽然数量不多,但可是一道坚固的防线,时刻为我们的身体健康保驾护航。

所以这次做白细胞分类计数,其实就是让医生看看,咱们身体的小卫士们的状态如何,是否在拼命工作,是否有过劳的迹象,或者干脆是懒得动弹了。

好了,言归正传,咱们来说说这次的实验结果。

通过白细胞分类计数,咱们的白细胞被分成了好几类,常见的有中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞这五种。

每一类白细胞都有自己的“任务”和“职责”,如果你在身体里分配了一个特别关键的职位,那可不简单。

比如,中性粒细胞就是咱们的“门卫”,时刻守在外面,不让那些坏蛋细菌趁虚而入;而淋巴细胞呢,就是专门的“情报员”,负责识别和记住敌人,万一敌人再度来袭,直接就能抓住不放。

通过这次实验,我可算是大开眼界了,没想到身体里藏了这么多“职能分工明确”的小精英。

结果出来的时候,我还特意去仔细看了一下,简直就像是给自己的人体健康体检了一下。

比如说,中性粒细胞的数量偏高,可能说明最近你吃得太油腻,或者说最近有点小病小痛,让这些小战士更加勤奋了。

再比如淋巴细胞,数量正常的话,那就是个好消息,说明免疫系统工作得还挺顺利,身体的自我防御能力不赖。

说到这里,你可能会问,嗨,这不就是做个普通检查吗,能不能更有趣点?其实啊,这个实验不仅仅是了解自己身体的小秘密,也能让你从中发现一些生活中的小细节。

有时候我们经常忽视的一些小症状,比如乏力、头晕,可能就是免疫系统发出的小信号。

所以,白细胞分类计数就成了一个警钟,提醒你别忽视那些“身体的小抱怨”。

实验报告给出了一个详细的结果。

比如说,嗜酸粒细胞的数量稍微有点高,医生说,这可能和过敏有关系。

五分类血球 比色法

五分类血球 比色法

五分类血球比色法五分类血球比色法引言:五分类血球比色法是一种常用的血液检测方法,通过对不同类型的血细胞进行计数和分类,可以帮助医生了解患者的血液状况,诊断疾病和评估治疗效果。

本文将详细介绍五分类血球比色法的原理、操作步骤以及结果解读等内容。

一、原理五分类血球比色法的原理是利用不同类型的血细胞对不同染色剂的染色性质不同而进行分类。

常用的染色剂有伍德素染色剂、甲基蓝染色剂、新蓝染色剂等。

在染色过程中,血细胞会吸收染色剂并呈现出不同的颜色,通过观察染色后的血液样本,可以判断血液中各种血细胞的数量和比例。

二、操作步骤1. 准备血液样本:首先需要从患者的静脉采血,一般采用抗凝剂作为血液的添加剂,以防止血液凝固。

采血完成后,将血液样本转移到试管中,并进行标记。

2. 试剂准备:根据实验需要,准备好所需的染色剂和显微镜玻片等实验用品。

确保染色剂的质量良好,以保证实验结果的准确性。

3. 染色过程:将血液样本滴在显微镜玻片上,然后加入染色剂。

根据实验要求,可以选择不同的染色剂进行染色。

将染色后的玻片放置在染色盘中,一般需要在染色剂中浸泡一段时间,以保证染色剂充分作用于血细胞。

4. 观察和计数:将染色后的玻片放置在显微镜下,通过调节镜头和光源,观察血细胞的形态和颜色。

根据染色后的颜色,可以将血细胞分为红细胞、白细胞和血小板等不同类型。

使用计数器或计数板,对各种类型的血细胞进行计数,记录结果。

三、结果解读根据五分类血球比色法的结果,可以获得血液中各种血细胞的数量和比例。

正常情况下,红细胞的数量应该占据血液总细胞数的大部分,白细胞和血小板的数量相对较少。

如果某种血细胞的数量明显超过或低于正常范围,可能表明患者存在某种血液疾病或其他健康问题。

红细胞计数结果反映了患者的贫血情况。

正常情况下,成年人的红细胞计数范围为 4.0-5.5 × 10^12/L。

如果红细胞计数低于正常范围,可能表示患者贫血,可能是由于缺铁、维生素B12或叶酸等造成的。

白细胞分类计数方法

白细胞分类计数方法

实验五白细胞分类计数(DC)教学目的:掌握血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点、白细胞分类技术教学重点:血涂片制备的操作要领、瑞氏染色方法、正常外周血五种白细胞形态特点教学内容【原理】将血液制成血涂片,用瑞氏染液染色,根据各种白细胞形态特征分类计数100个白细胞,即可求出各种白细胞的相对比值(百分率)。

【器材】1.显微镜2.采血用具3.载玻片、推片、蜡笔4.分类计数器【试剂】1.瑞氏染液或瑞氏-姬姆萨染液2.PH6.4 - 6.8磷酸盐缓冲液【操作】1.血片制作:(示教)(1)良好涂片标准:1) 呈头、体、尾舌形2) 血膜厚薄适宜3) 两边留有空隙(2)涂片好坏与下列因素有关:1)血滴大小2)推片与玻片之间角度3)推片速度2.染色(1)染色方法:用蜡笔在血膜两头划线,将血片平放在染色架,上瑞氏染液3~5滴染1分钟,加等量缓冲液混匀染5~10分钟,流水冲去染液,干燥后油镜检查。

(2)染色结果判断:1)正常:外观呈粉红色;镜下红细胞染粉红色,可见有碟状感白细胞浆中的颗粒能显示各种细胞的特有色彩;核染紫红色,染色质清楚,粗细松紧可辨。

2)偏酸:红细胞和嗜酸性颗粒偏红,白细胞核呈浅兰色或不着色。

太酸则只见一片红染,白细胞除嗜酸性颗粒外,均不着色。

3)偏碱:细胞呈灰兰色,白细胞颗粒深暗,嗜酸性颗粒变成暗褐色,甚至黑色。

中性颗粒也偏粗偏碱(紫黑色),血片过厚的地方呈绿色。

3.分类方法:(1)低倍镜观察:选择细胞分布均匀、染色好的部位转油镜下计数100~200个白细胞,求出各种白细胞所占百分比。

(2)细胞分布:头体部以淋巴细胞较多尾部和两侧以中性粒、单核细胞较多,片尾部,异常、大的细胞较多.一般选择片头至片尾的2/3区域计数较好,即体尾交界处,按一定方式,有规律的移动视野。

4.外周血正常白细胞形态:(图略)【注意事项】:(1)未干透血膜,染色时易脱落,故血膜应干透再染色。

(2)冲洗前,先在低倍镜下观察有核细胞是否着色,否则适当延长染色时间。

实验五 白细胞分类计数

实验五 白细胞分类计数

实验五白细胞分类计数白细胞,又称白血球,是人体内非常重要的免疫细胞,负责维护人体免疫系统和免疫功能。

在人体内,各种疾病和炎症都与白细胞的数量和种类密切相关。

因此,对于白细胞的分类及计数是一项非常关键的实验。

本实验将利用显微镜观察血液涂片,通过分类计数的方法,有效地获取人体内白细胞的数量及种类,并进一步分析其相关性质。

1. 实验步骤1.1 实验材料及设备- 血液涂片- 显微镜- 盖玻片- 鲁氏涂片染料- 石蜡片- 硼酸缓冲液- 静电平衡仪(1)制备血液涂片将新鲜血液利用遗传素和凝集素自然凝集处理10-15分钟,使其完全凝集,然后用无脂棉纸轻轻地将凝结物吸干,用加碘洗液洗涤1-2次,去掉余胶。

取一点冰冻切片的冰晶,快速的拭去切片表面亮点液,然后用切片将凝结物擦开,晾干几分钟。

然后架上净荷盖玻片,压平。

(2)涂片染色取常规染色的涂片,在荧光显微镜下观察,若出现白细胞三频现象,说明染色质量差或细胞大量受损。

可选择改变染色条件,或者重新制备涂片。

(3)显微镜观察和计数在显微镜下,根据数量和形态来观察和分类不同的白细胞。

通常可以观察到粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞等不同种类的白细胞。

根据每种白细胞的数量及其所占白细胞总数的比例,可以计算不同种类白细胞的数量,并进一步分析其相关性质。

2. 实验注意事项2.1 实验前要有良好的实验计划,并准备好所有必要的材料和设备。

2.2 制备血液涂片时,应避免试验操作不当造成细胞破损、变形和失去染色颗粒等情况。

操作时需轻柔,严禁用太阳光源和紫外线来加速干燥进程。

2.3 染色时,应保证涂片的质量和染色的均匀性,避免过度染色或染色不足。

同时也要注意避免操作中可能造成的污染和散布。

2.4 显微镜观察时,需要保证显微镜的清洁和环境的恒温恒湿,以保证观察到的细胞具有清晰明确的形态和结构,并且能准确统计不同白细胞的数量和种类。

2.5 注意实验中的安全操作,避免实验人员接触危险药物和试剂,同时要注意防护措施和清洗涂片的作业环境,确保实验过程的安全性和卫生性。

白细胞计数和分类实验报告

白细胞计数和分类实验报告

白细胞计数和分类实验报告白细胞计数和分类实验报告一、实验简介白细胞计数和分类是临床血常规检查中的重要项目,对于评估患者的健康状态和诊断疾病具有重要意义。

白细胞计数是通过全自动血液分析仪或手工方法计算血液中白细胞的数目,而白细胞分类则是根据白细胞的大小、形状和染色性质将其分为不同类型,如中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等。

二、实验目的本实验的目的是通过对患者血液中的白细胞进行计数和分类,为临床医生提供重要的参考依据,以协助诊断感染、炎症、过敏、血液系统疾病等多种疾病。

三、实验原理白细胞计数和分类的原理主要基于血液学和细胞生物学的基本原理。

白细胞计数是通过测定血液中白细胞的数量来判断机体的炎症状态或感染程度。

白细胞分类则是通过观察白细胞形态和染色性质,将其分为不同类型。

1.白细胞计数:采用全自动血液分析仪或手工方法,利用血细胞计数板对血液中的白细胞进行计数。

根据标准操作规程,将血液样本稀释并加入计数板中,然后通过显微镜计数白细胞数量。

最后根据白细胞计数结果,可计算出每微升血液中白细胞的数量。

2.白细胞分类:根据白细胞的大小、形状和染色性质进行分类。

中性粒细胞直径较大,染色性质为中性颗粒阳性;淋巴细胞直径较小,染色性质为酸性颗粒阴性;单核细胞直径较大,染色性质为嗜碱性颗粒阳性。

通过显微镜观察白细胞的特点,将其分为不同类型,并计算各类型白细胞的比例。

四、实验步骤1.准备实验材料:全血样本、血细胞计数板、显微镜、计数器等。

2.稀释血液样本:按照规定的比例将血液样本稀释,加入血细胞计数板中。

3.计数白细胞:通过显微镜观察计数板中的白细胞,使用计数器进行计数。

4.计算白细胞分类比例:根据不同类型白细胞的特性,使用显微镜对白细胞进行分类,并计算各类型白细胞的比例。

5.分析实验结果:结合白细胞计数和分类结果,对患者的健康状态和潜在疾病进行评估。

五、实验结果及数据分析表1 白细胞计数和分类结果比例偏高,淋巴细胞比例略低。

白细胞分类计数实验报告

白细胞分类计数实验报告

进行白细胞分类计数。
涂片位置



红细胞分布状态 红细胞互相重叠 红细胞分散均匀, 红 细 胞 分 散 但 立
立 体 结 构 也 看 得 体结构看不清
清(中央明亮)
表二:涂片位置和红细胞分布状态
100 倍油镜:观察各种白细胞形态并进行白细胞分类计数。 红细胞及血小板的数量、形态是否正常。
(2)油镜观察时,视野应处于体尾交接处,此处细胞分布均匀不重叠,便于观
察。
(3)正确区分不同白细胞的形态。
(4)应按照弓形的计数方式计数 100 个白细胞,以免漏数或多数。 (5)白细胞明显减少或增多时,需检查多张血涂片。
2、 讨论
(1)实验数据存在偶然性,应进行重复实验进行验证。
单核细胞 15~25 (M)
肾形 马蹄形 有折叠
疏松
浆半透明灰蓝色 细小尘土样嗜天青 颗粒弥散于胞浆中
表三 红细胞形态
图 1 嗜酸性粒细胞 图 2 嗜碱性粒细胞 图 3 淋巴细胞
图 4 中性粒细胞 杆状核 图 5 中性粒细胞 分叶核
2. 白细胞分类计数
图六 单核细胞
白细胞名称
正常参考值
计数绝对值(100 相对百分比
《实验诊断学》实验报告
实验二 白细胞分类计数
学 院: 专业 年级: 学 号: 姓 名: 实验日期:
一、实验原理
1、用 Wright-Giemsa 染色法对白细胞进行染色,甲醇 : 将细胞固定在玻片上, 美兰染液与 RNA、DNA 结合------蓝色/紫色,伊红与 Hb、嗜酸性颗粒结合-----粉色/红色,加入磷酸盐缓冲液维持 pH。 2、计算外周血中五种类型白细胞的相对百分比和绝对值 一般情况计数 100 个白细胞,并计算出五种白细胞的绝对值和相对百分比,同时 观察各种细胞的形态(大小、外形、胞质、胞核)有无变化。

白细胞分类计数实验报告

白细胞分类计数实验报告

一、实验目的1. 掌握血涂片制备的操作要领。

2. 熟悉瑞氏染色方法。

3. 理解正常外周血五种白细胞形态特点。

4. 学会白细胞分类计数的方法。

二、实验原理白细胞是人体免疫系统的重要组成部分,分为五种类型:中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞。

通过瑞氏染色法,可以将白细胞染色,便于在显微镜下观察其形态,从而进行分类计数。

白细胞分类计数对于疾病的诊断和病情监测具有重要意义。

三、实验材料1. 实验器材:普通光学显微镜、分类计数器、香柏油、拭镜纸、载玻片、推片、采血针、小滴管、消毒棉球、瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水、计数板及专用盖片、针1ml刻度移液管、1ml EP管、光学显微镜。

2. 实验试剂:瑞氏染液A液、瑞氏染液B液、末梢血。

四、实验步骤1. 采血:取末梢血1-2ml。

2. 血涂片制备:a. 将载玻片和推片用75%酒精消毒。

b. 用采血针对手指进行消毒,取末梢血1-2滴,滴于载玻片一端。

c. 将推片边缘置于血滴前方,平稳地向前推至玻片另一端,制成均匀的血膜。

d. 将血涂片晾干。

3. 瑞氏染色:a. 将瑞氏染液A液和B液按1:1比例混合,滴于血涂片上,使盖满整个血膜。

b. 5秒后加等量磷酸盐缓冲液,轻轻摇动玻片,待5-10分钟后,用净水缓缓地冲去玻片上的染液。

c. 待玻片干燥后,用香柏油覆盖。

4. 白细胞分类计数:a. 在显微镜下观察染色后的血涂片,先用低倍镜观察染色情况和细胞分布情况,选择细胞分布均匀之处。

b. 转浸油镜,按照城垛形的方式往血涂片头部方向进行计数,将观察到的白细胞分类,以正“字计数,直至计数满100个白细胞。

c. 计算各类白细胞所占的百分率和绝对值。

五、结果与讨论1. 本实验中,中性粒细胞占白细胞总数的50%,嗜酸性粒细胞占5%,嗜碱性粒细胞占1%,淋巴细胞占40%,单核细胞占4%。

2. 与正常参考值相比,本实验结果无明显差异,说明本次实验操作规范,结果可靠。

白细胞计数实验报告

白细胞计数实验报告

一、实验目的1. 掌握血涂片制备的操作要领。

2. 熟悉瑞氏染色方法及其原理。

3. 识别正常外周血中五种白细胞的形态特点。

4. 学会通过显微镜观察染色血涂片,计算各类白细胞的百分率。

5. 利用白细胞总数和各类白细胞的百分率,计算每mm³血液中各类白细胞的绝对值。

二、实验原理白细胞计数是血液常规检查的重要指标之一,通过计数外周血液中各类白细胞的数量和比例,可以了解机体免疫系统的状态。

实验中,白细胞必须经过染色才能区分其类别,常用瑞氏染色法和姬姆萨染色法。

通过显微镜观察染色血涂片,计算各类白细胞的百分率,进而计算每mm³血液中各类白细胞的绝对值。

三、实验器材1. 香柏油、盖玻片、推片2. 采血针或注射器3. 小滴管、消毒棉球4. 瑞氏染液、pH6.4~6.8磷酸盐缓冲液、蒸馏水5. 计数板及专用盖片6. 1ml刻度移液管、1ml EP管7. 光学显微镜8. 20ul刻度移液管四、实验步骤1. 血片制作:- 取一滴血液,滴于洁净无油脂的玻片一端。

- 左手持玻片,右手再取边缘光滑的另一玻片作为推片。

- 将推片边缘置于血滴前方,然后向后拉,使血液均匀附在两玻片之间。

- 以两玻片约呈30-45度的角度平稳地向前推至玻片另一端,推出均匀的血膜。

- 将制好的血涂片晾干,不可加热。

2. 瑞氏染色:- 在血涂片上滴加适量瑞氏染液。

- 待染液自然干燥后,用磷酸盐缓冲液冲洗血涂片。

- 洗涤至无色,晾干。

3. 白细胞分类计数:- 在显微镜下观察染色后的血涂片,按照以下步骤进行分类计数:- 观察染色情况,选择细胞分布均匀之处(体尾交界处)。

- 转浸油镜进行白细胞分类计数。

- 按照城垛形的方式往血涂片头部方向进行计数,以正“字计数,直至计数满100个白细胞。

4. 结果计算:- 根据计数结果,计算各类白细胞的百分率和绝对值。

五、实验结果(此处应填写实验结果,包括各类白细胞的百分率和绝对值。

)六、实验讨论(此处应填写实验讨论,分析实验结果,讨论实验过程中可能存在的问题及改进措施。

白细胞分类计数操作方法

白细胞分类计数操作方法

白细胞分类计数操作方法
白细胞分类计数是指将白细胞按照细胞形态、大小和染色质的性状等特征分成不同种类,并计算每种白细胞的数量。

下面是白细胞分类计数的操作方法:
步骤一:准备实验室基本设备
需要准备显微镜、镜片、盖玻片、生理盐水、干净的活动载玻片、草酸伊替比昂、乙醇、伊替比昂等试剂。

步骤二:血液制片
将一滴新鲜血液放在载玻片上,再放一块盖玻片,轻压一下,使血液均匀地分布。

将制片放置在通风处,待其干燥。

步骤三:染色
两个小时后,取草酸伊替比昂染色,将草酸伊替比昂稀释5倍,用草酸伊替比昂在载玻片上滴10-12滴,静置5分钟后用生理盐水洗净,再以相同的方法染泊乙醇2次,洗净。

步骤四:观察和计数
将制片放入显微镜下,依次观察和记录不同种类白细胞的数量,包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞等。

统计完毕,计算每种白细胞的百分比和绝对值。

步骤五:记录和分析
将各种白细胞的比例和绝对数记录下来,并通过与正常值进行比对来分析患者的白细胞分类计数是否正常。

五分类血液细胞分析仪白细胞分类参数的校准及验证

五分类血液细胞分析仪白细胞分类参数的校准及验证
中 图 分类 号 : R 3 3 1 . 1 文 献 标 识码 : B 文章编号 : 1 6 7 2 — 8 3 5 1 ( 2 0 1 3) 0 5 — 0 1 5 6 — 0 1 表 2 仪器和手工 白细胞分类计数结果比较 目前 五 分 类 血 液 细 胞 分 析 仪 已经 广 泛 运 用 到 临 床 医 学 , 其 白细胞计数主要 有以下五项参数 , 分别为 中性粒细胞 、 淋 巴 细胞 、 单核细胞 、 嗜酸性粒细胞 以及嗜碱性粒细胞… 。在本次研
究 中采取三盲法用手工对新鲜全血进行定值 ,再采取此手工 定值 的新鲜全血对 AB X 一 1 2 0五分类血 液细胞分析仪 的 D I F F 参数进行校准 。现将研究结果总结报道如下 。
1资料 与 方 法 1 . 1 一 般资料 :新鲜全血 由法 国 HO R I B A A B S 公司 A B X 一 1 2 0
R B C : 4 . 0  ̄ 5 . 5 (  ̄ 1 0 2 / L ) , H G B : 1 2 0 - 1 6 0 ( g / L ) , HC T : O . 4 0 0 - 0 . 5 5 0 , 牌 的血液细胞分析仪在国内普及并且广泛运用 。估计市场上
的五分类血液细胞分析仪 ,已经成为发达 国家 医院血液临床 1 . 3 方法 : 在进行仪器 C B C校准之后 , 进行 D I F F 校准 。新鲜全 检验 的主流产品。 白细胞分类技术结果需要具备溯源性和准 血定值 , 5 份新鲜全血样本 ,采用手工推制血片 ,每份 6 张血 确性 ,所 以在本次研究中参 照了美 国国家 临床实验室标准化 片 ,由有工作经验并且经过专业 培训 的 6 名工作人员进行手 委员会颁布 的《 白细胞分类计数参考方法和一起评 价方法》 标 工分类计数 , 分类计 数 2 0 0个 白细胞 , 要求 每人之 间的分类结 准 ,这样能够提高不同实验 和不 同检测模式结果 的可 比性和 果必须在可接受的范 围之内 , 取其平 均值作为靶值 。将 已经定 准确度 。参加血液细胞分析仪校准 的工作人员需要具备很强 还要具备高素质 , 并且要严格按 值 的新 鲜全 血采用 A B X一 1 2 0血液 细胞分 析仪进 行 D I F F检 的责任心 和丰 富的工作经验 , 测, 每份样品检测 2次 , 并且取均值。如果仪器检测结果 在可 照白细胞分类计数校准的标 准操作程序进行培训 ,在考核达 在 目前因为 D I F F没有商品校准 信 范围之 内就不需要进行校准 ,如果 超过 可信 范围必须进行 到规定的要求之后才能上岗。 校 准[ 2 1 。 物 ,采用手工定值 的正常新鲜全血对于血液细胞分析仪 D I F F 2结 果 参数进行校准的方法 已经广泛运用到了临床 。D I F F手工定值 I F F参 数校准 的效 手工分类靶值的均值 N E U T %为 6 8 . 0 l ,仪 器检 测的总均 的准确度会直接影 响到血液细胞分析仪 D 值为6 8 . 0 0 ; L Y MP H %为 2 5 . 2 ,仪 器检 测 的总 均值 为 2 6 . 3 8 ; 果, 所 以血细胞识别能力是非常关键 的。在校准后 比对试验是 M O N O %为 3 . 8 , 仪器检测 的总均值 为 2 . 8 3 ; E O S %为 2 . 8 , 仪器 次完整 校准密不可分 的两个部分 ,这样 只能够满 足校准的 检 测 的总均值 为 1 . 9 2 ; B A S O %为 0 . 5 ,仪 器检 测 的总均值 为 参数要求 ,不能够在一周之 内通 过校 准后 比对试验 的校 准操 0 . 2 5 。在血液细胞分析仪手动和 自动模式上检测 2 O份新鲜全 作是不能够被认可 的操作 。所 以在使 用新鲜全 血校 准之后需 血标本 , 结果 各个仪器 D I F F参数偏差 符合率都 ≥8 0 %, 满足 要开展校准后 比对实验 ,这样才能够保证 比对的结果具有可 比性 。 标 准要求 , 比对试验通过 , 详见表 1 、 2 。 表 1 白细 胞 手 工分 类计 数 结 果 在本次研究 中手工分类靶 值的均值 N E U T %为 6 8 . 0 1 , 仪 器检测的总均值为 6 8 . 0 0 ; L Y M P H %为 2 5 . 2 ,仪器检测的总均 值为 2 6 . 3 8 ; MO N O %为 3 . 8 ,仪器检测的总均值为 2 . 8 3 ; E O S % 为2 . 8 , 仪器检 测的总均值为 1 . 9 2 ; B A S O %为 O . 5 , 仪器检 测的 总均值为 0 . 2 5 。手工分类靶值与一起监测 的均值相 比差异在 可信范围之内。总而言之 , 人工对于新鲜全血的定值的准确度 直接影响到一起分类参 数的校准效果 ,这就需要工作人员具 有很强的责任 心和工作经验 , 才能够保证校准的准确度 。 参 考 文献 『 1 ] 李鸿飞 , 洪岩 , 邱 广斌 . A B X 一 1 2 0型血液 细胞 分析仪 临床 应 3讨 论 血液细胞分析仪是医院检验科 、 化验室的常规设备之一 , 用评 价 『 J 1 . 检 验 医 学与 临床 , 2 0 1 2 , 9 ( 1 1 ) : 1 3 5 0 — 1 3 5 2 . 同时也是发 展最快 、 应用最普及的检验仪器 , 当前血液细胞分 『 2 1 陶良萍 , 徐银海 , 孔 宝坤. 新鲜全血在 多系列血 液分析仪上替 析主要 分为两种 , 分别为三分群和五分类 。近年来有很 多种 品 代校准品的应 用探讨『 J ] . 徐州 医学院学报 , 2 0 0 6 , 9 ( 4 ) : 9 7 — 9 8 .

白细胞分类实验报告

白细胞分类实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除白细胞分类实验报告篇一:红细胞计数、白细胞计数实验报告一.实验原理用等渗稀释液将血液稀释一定倍数,充入计数池后,在显微镜下计数一定体积内的红细胞数量,经换算求出每升血液中的红细胞数量。

用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数,同时破坏溶解红细胞。

将稀释的血液注入血红细胞计数板,在显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算即可求出每升血液中的白细胞数量。

二.实验内容与步骤1、红细胞计数(1)器材:显微镜、微量吸管、改良neubauer计数板(2)试剂:Rbc稀释液①hayem稀释液:nacl,na2so4,hgcl2②枸橼酸钠甲醛盐水溶液:枸橼酸钠,甲醛,nacl③生理盐水或含1%甲醛的生理盐水:仅在急诊或无上述两种稀释液时临时使用(3)标本:外周血或抗凝血(eDTA抗凝)(4)操作步骤:①小试管加Rbc稀释液2.0ml。

②采血,取血10μl。

③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立即混匀。

④混匀后充入计数室,静置3~5min,高倍镜下计数(用高倍镜依次计数中央大方格内4角和正中5个中方格内的红细胞数。

)2、白细胞计数(1)器材:显微镜、微量吸管、改良neubauer计数板(2)试剂:wbc稀释液:冰醋酸3.0mL(破坏红细胞);蒸馏水97.0mL;亚甲蓝(染色)(3)标本:新鲜全血或末稍血(4)操作步骤:①小试管加wbc稀释液0.38mL。

②采血,微量吸管取血20μL。

③擦去管外的血,轻吹入试管底部,再清洗吸管2~3次,立即混匀。

④混匀后充入计数室,静置2~3min,低倍镜下计数(用低倍镜计数出计数池内四角大方格中的白细胞总数。

)三.实验结果表一红细胞计数表Rbc/L=405/100×1012=4.05×1012/L表二白细胞计数表wbc/L=112/20×109=5.6×109/L实验结果:Rbc:4.05×1012/Lwbc:5.6×109/L四.讨论1、从实验结果与正常范围比较,实验结果没有超出正常范围,提示被采血者无病理或生理性异常。

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精选文本
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单核细胞(Mo):在瑞氏染色涂片上为12~
20µm,胞体圆形、椭圆形或不规则形;核形多种 多样,最重要的特点是染色质较细致疏松,呈丝 网状或条缕状,着色较淡胞浆较多,淡兰色,含
大量细小尘土样颗粒。
11.08.2020
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[参考值]
正常成人外周血白细胞分类参考值:
Ne
50%~70%
实验二
白细胞分类计数
(differention count of leukocyte)
谢海啸
11.08.2020
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1
一、白细胞分类计数
白细胞分类计数是将血液制备成涂片,
瑞氏染色后显微镜下根据白细胞的形
态特征进行分类计数。通常分类100
个白细胞,计算得出各种白细胞所占
百分比。
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Ly
20%~40
Ba
0%~1%
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[注意事项]
1.血涂片制备要厚薄适宜、均匀、头体尾分 明,无溶血、无空洞。
2. 很 多 因 素 影 响 涂 片 时 血 膜 的 厚 度 。 血 滴 大 、 血粘度高、推片角度大、速度快则血膜厚, 反之则血膜薄。
11.08.2020
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嗜酸性粒细胞(Eo):较中性粒细胞稍大,胞 核多为两叶,呈眼镜、八字形,核染色质粗糙 染深紫红色,胞浆内充满粗大均匀的嗜酸性颗 粒,瑞氏染色时呈桔红色,有折光性。
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嗜碱性粒细胞(Ba):胞浆中含有大小不等
的嗜碱性颗粒,瑞氏染色时呈兰黑色。于光学显 微镜下常见胞浆中有小空泡,乃因嗜碱性颗粒易 溶于水或因功能活动而脱颗粒所致;核呈淡紫红 色常看不清,呈杆状或分叶状。
性染料伊红结合而染成红色,呈嗜酸性。 • 细胞核的核蛋白为酸性物质,故与碱性染料美
兰结合,染成深蓝色或深紫红色,呈嗜碱性。 • 中性颗粒与美兰和伊红同时结合而染为淡紫红
色,呈嗜中性。
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[器材]
• 光学显微镜
• 推片,载玻片
[试剂]
• Wright染液
Wright
1.0g
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淋巴细胞(Ly):胞体呈圆形,直径介于
6~15µm之间,在成人血涂片中以小淋巴细胞 为多见,直径6~9µm,核大呈深紫色致密而浓 染,胞浆量极少;大淋巴细胞胞浆量较多,呈 清澈的淡蓝色,可见少量嗜苯胺蓝颗粒,胞核 圆或椭圆,常偏向细胞一侧,染色较深。
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瑞氏染色原理:
• 瑞氏染料溶于甲醇,离解为带正电的碱性美兰 (M+)和带负电的酸性伊红(E-)离子。细胞的 染色既有物理的吸附作用,又有化学的亲和作用。 各种细胞成分的化学性质不同,对染料的亲和力 也不一样,故可呈不同的着色特点。
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染色原理: • 血红蛋白、嗜酸性颗粒均为碱性物质,故与酸
❖ 2)加染液:在涂片上滴加瑞氏染液数滴,以染液 覆盖整个血膜为度,稍静置1min。
❖ 3)加缓冲液:滴加缓冲液等量或多些,与上述染 液充分混匀。
❖ 4)染色:染色10min.
❖ 5)冲洗:不要先倒掉染液,平持血涂片用流水缓 缓冲洗干净。
❖ 6)干燥:直立血涂片,使其自然干燥。
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甲醇
600ml
• 磷酸盐缓冲液(PH6.4~6.8)
• 香柏油
[标本来源]

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EDTA-K2抗凝全血精选文本
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[操作]
1.制备血涂片 ❖1)推片:血膜厚薄适中,边缘整齐,
外观呈舌形,头、体、尾分明。
❖2)干燥 ❖3)标记
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2.染色
❖ 1)准备:血膜干透后,用蜡笔在两端划线,以防 止染色时染液外溢。将血涂片放染色架上。
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血涂片制作
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羽 状 尾 部
良好血涂片外观
-羽(子弹头)状尾部
-周边有空白
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-无划痕 精选文本
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不 良 血 涂 片
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2.瑞氏染色操作
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3.白细胞分类:
低倍镜下所见
先用低倍镜选择厚薄适宜,染色 良好,细胞分布均匀的体尾交界 处,滴加香柏油一滴,油镜下分 类计数。分类时要有秩序的连续 进行,避免主观选择视野。通常 分类计数100个白细胞,计算并 报告各种白细胞所占比例。
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结果记录方式:
Ne 正 一 Ly 正 Mo 正 Eo 正 Ba 正
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体尾交界处
理理想想区区域域
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细胞重叠
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细胞太稀
各类成熟白细胞的形态学:
中性粒细胞(Ne):在瑞氏染色血涂片上呈圆
形 , 直 径 10 ~ 13µm , 胞 浆 染 粉 红 色 , 核 形 一 叶 (杆状核)至五叶不等,以三叶者多见,染成深 紫红色,胞浆中有许多细小均匀紫红色颗粒。
3.按一定顺序,有秩序地连续进行,避免选 择视野。
4.分类计数时应同时报告RBC和WBC的形态
11.08是.2020否有异常。退化细精胞选文不本 计数。
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RBC异常
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中性粒细胞
血小板
嗜酸性粒细胞
淋巴细胞
嗜碱性粒细胞(右)
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单核细胞 22
实验报告(注意学号)
1原理
2方法
3各类细胞百分比报告
4讨论
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