酶工程课后题
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第一章1.简述酶与一般催化剂的共性以及作为生物催化剂的特点共同点：只能催化热力学所允许的的化学反应，缩短达到化学平衡的时间，而不改变平衡点：反应前后酶本身没有质和量的改变：很少量就能发挥较大的催化作用：其作用机理都在于降低了反应的活化能。
酶作为生物催化剂的特点：1.极高的催化率；2.高度专一性；3.酶活的可调节性；酶的不稳定性。
5.酶失活的因素和机理。
酶失活的因素主要包括物理因素，化学因素和生物因素物理因素1热失活：热失活是由于热伸展作用使酶的反应基团和疏水区域暴露，促使蛋白质聚合。
2冷冻和脱水：很多变构酶在温度降低是会产生构象变化。
在冷冻过程中，溶质（酶和盐）随着水分子的结晶而被浓缩，引起酶微环境中的pH和离子强度的剧烈改变，很容易引起蛋白质的酸变性。
3.辐射作用：电离辐射和非电离辐射都会导致多肽链的断裂和酶活性丧失。
4.机械力作用：化学因素1.极端pH：极端pH远离蛋白质的等电点，酶蛋白相同电荷间的静电斥力会导致蛋白肽链伸展，埋藏在酶蛋白内部非电离残基发生电离，启动改变。
交联或破坏氨基酸的化学反应，结果引起不可逆失活。
极端pH也容易导致蛋白质水解。
2.氧化作用：酶分子中所含的带芳香族侧链的氨基酸以及Met, Cys等，与活性氧有极高的反应性，极易受到氧化攻击。
3.聚合作用：加热或高浓度电介质课破坏蛋白质胶体溶液的稳定性，促使蛋白质结构发生改变，分子间聚合并沉淀。
4.表面活性剂和变性剂：表面活性剂主要改变酶分子正常的折叠，暴露酶分子疏水内核的疏水基团，使之变性；变性剂与酶分子结合，改变其稳定性，使之发生变性。
生物因素微生物或蛋白水解酶的作用使酶分子被水解。
6.简述酶活力测定方法的原理直接测定法：有些酶促反应进行一段时间后，酶底物或产物的变量可直接检测。
间接测定法：有些酶促反应的底物或产物不易直接检测，一次必须与特定的化学试剂反应，形成稳定的可检测物。
酶偶联测定法：与间接测定法相类似，只是使用一指示酶，使第一酶的产物在指示酶的作用下转变成可测定的新产物。
酶工程习题(含参考答案)
酶工程习题（含参考答案）一、单选题（共47题，每题1分，共47分）1.酶的提取是（）的技术过程。
A、从含酶物料中分离获得所需酶B、使胞内酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中C、从含酶溶液中分离获得所需酶D、使酶从含酶物料中充分溶解到溶剂或者溶液中正确答案：D2.有些酶在细胞进入平衡期以后还可以继续合成较长的一段时间，这是由于（）。
A、该酶所对应的mRNA稳定性好B、该酶所对应的DNA稳定性好C、细胞自溶后使酶分泌出来D、培养基中还有充足的营养成分正确答案：A3.对酶的空间结构和催化机理有充分了解的基础上，对酶的结构进行精确的调控，从而获得具有所需催化活性的新酶的方法称为（）。
A、酶的人工改造B、酶的理性设计C、酶的定向进化D、酶的理性进化正确答案：B4.DNA重排操作中，由亲本基因通过DNase I剪切获得的随机片段（）。
A、具有同样长度、无序列倾向性B、具有同样长度、有序列倾向性C、具有不同长度、无序列倾向性D、具有不同长度、有序列倾向性正确答案：D5.天苯肽是由（）缩合而成。
A、L-天冬氨酸的a-羧基与D-苯丙氨酸甲酯的a-羧基B、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的氨基C、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸的氨基D、L-天冬氨酸的a-羧基与L-苯丙氨酸甲酯的a-羧基正确答案：B6.以下以代号表示的试剂中哪种能用于组氨酸咪唑基的化学修饰的（）。
A、DNFBB、DNSC、DPCD、DTNB正确答案：C7.搅拌罐反应器中进行某酶催化反应，反应液体积为5立方米，反应液温度从20℃升至40℃，热利用率为80%，反应过程中实际所需热量为（）kcal。
A、125000B、125C、80D、80000正确答案：A8.以下不是用于酶分子修饰的大分子修饰剂的是（）。
A、戊二醛B、右旋糖苷C、肼D、聚乙二醇E、肝素正确答案：A9.动物细胞的营养要求较复杂，必须供给各种氨基酸、维生素、激素和生长因子等，一般加入（）就可以满足要求。
酶工程习题及答案
酶工程试题(A)一名词解释（每题3分，共计30分）1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。
3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。
7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
二填空题(每空1分,共计30分)1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。
2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。
3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。
4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性；5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。
7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。
《酶工程》 课后习题答案
① 酶工程：由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新技术，是工业上有目的地设计一定的反应器和反应条件，利用酶的催化功能，在常温常压下催化化学反应，生产人类所需产品或者服务于其它目的地一门应用技术。
② 比活力：指在特定条件下，单位质量的蛋白质或者 RNA 所拥有的酶活力单位数。
③ 酶活力：也称为酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。
其大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高。
④ 酶活国际单位 : 1961 年国际酶学会议规定：在特定条件(25℃，其它为最适条件 )下，每分钟内能转化1 μmol 底物或者催化1 μmol 产物形成所需要的酶量为 1 个酶活力单位，即为国际单位(IU)。
⑤ 酶反应动力学:指主要研究酶反应速度规律及各种因素对酶反应速度影响的科学。
酶的研究简史如下：(1)不清晰的应用：酿酒、造酱、制饴、治病等。
(2)酶学的产生： 1777 年，意大利物理学家 Spallanzani 的山鹰实验； 1822 年，美国外科医生 Beaumont 研究食物在胃里的消化； 19 世纪 30 年代，德国科学家施旺获得胃蛋白酶。
1684 年，比利时医生Helment 提出 ferment—引起酿酒过程中物质变化的因素(酵素)；1833 年，法国化学家 Payen 和Person 用酒精处理麦芽抽提液，得到淀粉酶； 1878 年，德国科学家 K hne 提出 enzyme—从活生物体中分离得到的酶，意思是“在酵母中”(希腊文)。
(3)酶学的迅速发展(理论研究)： 1926 年,美国康乃尔大学的”独臂学者”萨姆纳博士从刀豆中提取出脲酶结晶，并证明具有蛋白质的性质;1930 年，美国的生物化学家 Northrop 分离得到了胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶结晶，确立了酶的化学本质。
I.酶工程发展如下：①1894 年，日本的高峰让吉用米曲霉制备淀粉酶，酶技术走向商业化：②1908 年，德国的Rohm 用动物胰脏制得胰蛋白酶，皮革软化及洗涤；③1911 年， Wallerstein 从木瓜中获得木瓜蛋白酶，用于啤酒的澄清；④1949 年，用微生物液体深层培养法进行－淀粉酶的发酵生产，揭开了近代酶工业的序幕；⑤1960 年，法国科学家 Jacob 和 Monod 提出的控制子学说，阐明了酶生物合成的调节机制，通过酶的诱导和解除阻遏，可显著提高酶的产量；⑥1971 年各国科学家开始使用“酶工程”这一位词。
酶工程 课后习题答案
第一章酶工程基础1.名词解释：酶工程、比活力、酶活力、酶活国际单位、酶反应动力学①酶工程：由酶学与化学工程技术、基因工程技术、微生物学技术相结合而产生的一门新技术，是工业上有目的地设计一定的反应器和反应条件，利用酶的催化功能，在常温常压下催化化学反应，生产人类所需产品或服务于其它目的地一门应用技术。
②比活力：指在特定条件下，单位质量的蛋白质或RNA所拥有的酶活力单位数。
③酶活力：也称为酶活性，是指酶催化某一化学反应的能力。
其大小可用在一定条件下，酶催化某一化学反应的速度来表示，酶催化反应速度愈大，酶活力愈高。
④酶活国际单位: 1961年国际酶学会议规定：在特定条件(25℃，其它为最适条件)下，每分钟内能转化1μmol底物或催化1μmol产物形成所需要的酶量为1个酶活力单位，即为国际单位（IU）。
⑤酶反应动力学:指主要研究酶反应速度规律及各种因素对酶反应速度影响的科学。
2.说说酶的研究简史酶的研究简史如下：(1)不清楚的应用：酿酒、造酱、制饴、治病等。
(2)酶学的产生：1777年，意大利物理学家 Spallanzani 的山鹰实验；1822年，美国外科医生 Beaumont 研究食物在胃里的消化；19世纪30年代，德国科学家施旺获得胃蛋白酶。
1684年，比利时医生Helment提出ferment—引起酿酒过程中物质变化的因素（酵素）；1833年，法国化学家Payen和Person用酒精处理麦芽抽提液，得到淀粉酶；1878年，德国科学家Kűhne提出enzyme—从活生物体中分离得到的酶，意思是“在酵母中”（希腊文）。
(3)酶学的迅速发展（理论研究）：1926年,美国康乃尔大学的”独臂学者”萨姆纳博士从刀豆中提取出脲酶结晶，并证明具有蛋白质的性质;1930年，美国的生物化学家Northrop分离得到了胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶结晶，确立了酶的化学本质。
3.说说酶工程的发展概况I.酶工程发展如下：①1894年，日本的高峰让吉用米曲霉制备淀粉酶，酶技术走向商业化：②1908年，德国的Rohm用动物胰脏制得胰蛋白酶，皮革软化及洗涤；③1911年，Wallerstein从木瓜中获得木瓜蛋白酶，用于啤酒的澄清；④1949年，用微生物液体深层培养法进行a－淀粉酶的发酵生产，揭开了近代酶工业的序幕；⑤1960年，法国科学家Jacob和Monod提出的操纵子学说，阐明了酶生物合成的调节机制，通过酶的诱导和解除阻遏，可显著提高酶的产量；⑥1971年各国科学家开始使用“酶工程”这一名词。
(完整版)酶工程习题及答案
酶工程试题(A)一名词解释（每题3分，共计30分）1. 酶工程：又叫酶技术，是酶制剂的大规模生产和应用的技术。
2.自杀性底物：底物经过酶的催化后其潜在的反应基团暴露，再作用于酶而成为酶的不可逆抑制剂，这种底物叫自杀性底物。
3.别构酶；调节物与酶分子的调节中心结合后，引起酶分子的构象发生变化，从而改变催化中心对底物的亲和力，这种影响被称为别构效应，具有别构效应的酶叫别构酶4.诱导酶：有些酶在通常的情况下不合成或很少合成，当加入诱导物后就会大量合成，这样的酶叫诱导酶5.Mol催化活性：表示在单位时间内，酶分子中每个活性中心转换的分子数目6.离子交换层析：利用离子交换剂作为载体这些载体在一定条件下带有一定的电荷，当带相反电荷的分子通过时，由于静电引力就会被载体吸附，这种分离方法叫离子交换层析。
7.固定化酶：通过物理的或化学的方法，将酶束缚于水不溶的载体上，或将酶束缚于一定的空间内，限制酶分子的自由流动，但能使酶发挥催化作用的酶8.修饰酶：在体外用一定的化学方法将酶和一些试剂进行共价连接后而形成的酶9.非水酶学：通常酶发挥催化作用都是在水相中进行的，研究酶在有机相中的催化机理的学科即为非水酶学10模拟酶：利用有机化学合成的方法合成的比酶结构简单的具有催化作用的非蛋白质分子叫模拟酶。
二填空题(每空1分,共计30分)1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。
2.求Km最常用的方法是双倒数作图法。
3.多底物酶促反应的动力学机制可分为两大类，一类是序列机制，另一类是乒乓机制。
4.可逆抑制作用可分为竞争性，反竞争性，非竞争性，混合性；5.对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
6.酶活力的测定方法可用终止反应法和连续反应法。
7.酶制剂有四种类型即液体酶制剂，固体酶制剂，纯酶制剂和固定化酶制剂。
酶工程习题参考答案
第五章酶工程习题答案一、填空题1.决定酶催化活性的因素有两个方面，一是酶分子结构，二是反应条件。
2. Km是米氏常数。
它与酶的种类和反应条件有关。
3..对生产酶的菌种来说，我们必须要考虑的条件有，一是看它是不是致病菌，二是能够利用廉价原料，发酵周期短，产酶量高，三是菌种不易退化，四是最好选用能产生胞外酶的菌种，有利于酶的分离纯化，回收率高。
4.酶制剂有四种类型即液体酶制剂固体酶制剂纯酶制剂固定化酶制剂5.通常酶的固定化方法有吸附法，共价键结合法，交联法，包埋法。
6. 酶分子的体外化学修饰又可分为酶的表面修饰和内部修饰。
经化学修饰的酶热稳定性有较大提高，这是因为修饰剂的多个功能基团与酶分子上的的多个基团（如氨基、羧基、咪唑基等）相互交联，增加了酶分子构象的稳定性。
7. 生物酶工程主要包括三个方面：基因工程方法大量生产酶（克隆酶）；对酶基因修饰产生遗传修饰酶（突变酶）；设计新的酶基因，合成新的酶。
二、问答题1．解释下列名词：核酶：具有催化功能的RNA，包括剪切型核酶和剪接型核酶两类。
克隆酶：通过基因工程手段，克隆各种天然的蛋白质或酶基因，并将其与适当的调节信号连接，再通过一定的载体（质粒）导入能够大量繁殖的微生物体内，使之高效表达。
突变酶：利用有控制地对天然酶基因进行剪切、修饰或突变，从而改变这些酶的催化特性、底物专一性或辅酶专一性，使之更加符合人们的需要。
进化酶：创造特殊的进化条件，模拟自然进化机制（随即突变、基因重组和自然选择），在体外改造酶基因，并定向选择（或筛选）出所需性质的突变酶。
人工酶：又称模拟酶或酶模型，指利用有机化学、生物化学等方法设计和合成一些较天然酶简单的非蛋白质分子或蛋白质分子，以这些分子作为模型来模拟酶对其作用底物的结合和催化过程。
固定化酶：指在一定空间内呈闭锁状态存在的酶，能连续地进行反应，反应后的酶可以回收重复使用。
细胞固定化技术：将细胞限制或定位于特定空间位置的技术称为细胞固定化技术。
酶工程教材课后习题详解
简述酶活力单位的概念和酶活力的测定方法？概念：在最适条件（温度25℃）下，每分钟内催化1微摩尔（μmol）底物转化为产物所需的酶量为1个酶活力单位，即IU=1μmol /min。
测定方法：化学测定法、光学测定法、气体测定法1.如何控制微生物发酵产酶的工艺条件？发酵过程中，为了能对生产过程进行必要的控制，需要对有关工艺参数进行定期取样测定或进行连续测量。
参数中，对发酵过程影响较大的有温度、ＰＨ、溶解氧浓度等。
(1)温度:温度对发酵的影响是多方面的，主要表现在对细胞生长、产物形成、发酵液的物理性质和生物合成方面。
例如：枯草杆菌的最适温度为34--37℃，黑曲霉的最适温度为28--32℃(2)pH:发酵过程中pH的变化取决于所用的菌种、培养基的成分和培养条件。
微生物生长和生物合成都有其最适和能够耐受的pH范围，大多数微生物生长的最适pH6.3-7.5，霉菌和酵母生长的最适pH4-6，放线菌生长的最适pH7-8。
(3)溶解氧浓度:对于好氧发酵，溶解氧浓度是最重要的参数之一。
好氧性微生物深层培养时，需要适量的溶解氧以维持其呼吸代谢和某些产物的合成，氧的不足会造成代谢异常，产量降低。
2.提高酶产量的措施主要有哪些？50页选育优良的产酶细胞、添加诱导物、控制阻遏物浓度、添加表面活性剂等3.酶的生物合成有哪几种模式？根据酶的合成与细胞生长之间的关系，可将酶的生物合成分为3种模式，即：生长偶联型——（同步合成型、中期合成型）部分生长偶联型——延续合成型非生长偶联型——滞后合成型1.简述细胞破碎的主要方法和特点？机械破碎法：通过机械运动产生剪切力使组织细胞破碎.a捣碎法：常用于动物内脏、植物叶芽、细菌的细胞b研磨法：常用于微生物和植物细胞c匀浆法：常用于易于分散、比较柔软、颗粒细小的组织细胞物理破碎法：通过各种物理因素作用，使组织细胞的外层结构破坏，而使细胞破碎。
常用于微生物细胞的破碎.1.温度差破碎法;2.压力差破碎法（渗透压突变）;3. 超声波破碎法化学破碎法：通过各种化学试剂对细胞膜的作用，而使细胞破碎.1.有机溶剂处理：破坏膜磷脂结构，常用丙酮、丁醇、氯仿等。
酶工程课程习题库和参考答案
C、化学诱变 D、物理诱变
四、判断题 （ F ）1、相同的酶在不同的 pH 条件下进行测定时，酶活力不同。
（×）2、固定化细胞在一定的空间范围内生长繁殖，由于细胞密度增大，使生化反应 加速，所以能够提高酶活力。 （×）3、只有以金属离子为激活剂的酶，才可以进行金属离子置换修饰。 （√）4、包埋法可以用于酶、细胞和原生质体的固定化。 （√）5、有机溶剂的极性系数是指某种溶剂在正辛烷与水两相中的分配系数 五、简答题 1、何谓酶工程，其主要内容有哪些？
物相容性的物质，进行共价连接，从而改变酶的结构和性质。 10、酶的金属离子置换修饰：把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子，使酶的特性 和功能发生改变。 二、填空题 1、根据分子中起催化作用的主要组分的不同，酶可以分为_蛋白类酶_和 __核酸 类酶__两大类。 2、转录是以DNA 为模板，以核苷三磷酸 为底物，在依赖 DNA 的 RNA 聚合酶 的作用下生成RNA 的过程。 3、植物细胞培养主要用于生产色素、香精、药物 、酶 、等次级代谢产物。 4、细胞破碎的主要方法有机械破碎，物理破碎，化学破碎法 ，酶促破碎法 。 5、定点突变是在 DNA 序列的某一特定位点上 进行碱基的改变，从而获得突变基因 的操作技术。
延。 4、何谓膜分离技术？在酶的生产中有何应用？
答：借助于一定孔径的高分子薄膜，将不同大小、不同形状和不同特性的物质颗粒 或分子进行分离的技术称为膜分离技术。
在酶的生产中，可以利用微滤技术除去粗酶液中的微生物细胞，利用超滤技术除去相 对分子质量不同的蛋白质等杂质，进行酶的分离纯化，同时还达到酶液浓缩的目的，特 别适用于液体酶制剂的生产。 5、 何谓大分子结合修饰？有何作用？
1、答：端粒酶（Telomerase）是催化端粒合成和延长的酶。端粒酶的催化过程主要包
球球总结的-酶工程课后题作业
球球总结的-酶工程课后题作业1、什么是酶工程，其研究的内容有哪些？它是从应用的目的出发研究酶，是在一定生物反应装置中利用酶的催化性质将相应原料转化为有用物质的技术。
酶工程分为化学酶工程和生物酶工程。
前者指自然酶、化学修饰酶固定化酶及化学人工酶的研究和应用；后者则是酶学和基因重组技术为主的现代分子生物学技术相结合的产物，主要包括3个方面（1）用基因工程技术大量生产酶（克隆酶）（2）修饰酶基因差产生遗传修饰酶（突变酶）（3）设计新的酶基因合成自然界不曾有的新酶3、目前公认的酶的作用机制有哪些？研究酶动力学和酶的抑制作用对于了解酶的作用机制有何帮助？（1）酶的作用机制1、酶能降低反应物的活化能2、酶与底物首先形成一个不稳定的过渡态中间复合物3、酶的趋近和定向效应，构象变化效应、酸碱催化机制、共价催化和微环境效应5个方面影响酶的催化作用。
（2）酶促反应动力学是研究酶促反应的速率以及一个像比速率的各种因素。
酶促反应动力学的研究有着重要的理论意义和实践意义。
如在研究酶的结构和功能的关系以及酶的作用机制时，需要动力学提供实验依据；为了充分发挥酶催化反应的高效率，寻找最有力的反应条件；为了解酶在代谢中的作用和某些药物的作用机制等，都需要掌握酶促反应的规律。
4、什么是别构酶？它与普通酶的区别是什么？它是怎样调节酶活力的？能发生别构效应的酶称为别构酶。
别构酶通过别构效应，调节酶活力。
别构效应：当效应剂（底物、产物或其它效应物）与酶分子中的调解中心结合后，就诱导或稳定住酶分子的某些构象。
使酶的活性中心对底物的亲和力和催化能力受到影响，从而调节酶促反应的速度及代谢途径的进程。
别构效应也有正协同效应和负协同效应之分。
正协同效应：使得在一定配体浓度区间内，酶促反应速度对配体浓度变化极其敏感。
负协同效应：提供了一个配体浓度对酶促反应速度影响不敏感的区间。
（2）与普通酶的区别：○1其动力学不符合米氏方程，其活力得到代谢物的浓度的调节。
酶工程学习通课后习题
酶工程学习通课后习题第一次作业一、填空题1、日本称为“酵素”的东西，中文称为（），英文则为（），是库尼（）于1878年首先使用的。
其实它存在于生物体的细胞内与细胞外。
2、1926年，萨姆纳（）首先制得脲酶结晶，并指出酶的本质是（）。
他因这一杰出贡献，获1947年度诺贝尔化学奖。
二、判断题1、酶是具有生物催化特性的特殊蛋白质。
（）2、酶的分类与命名的基础是酶的专一性。
（）三、简答题1酶工程主要涉及哪些方面的研究和运用。
2、酶有哪些催化特性？第二次作业一、单选题1、酶促反应降低反应的活化能的能量来源是（）。
A、酶与底物结合能B、底物形变能C、酶分子构象变化释放的能量D、底物化学键断裂释放的化学能2、在米氏方程的双倒数作图中，酶对底物的米氏常数是双倒数直线的（）。
A、纵轴截距的倒数B、斜率C、横轴截距绝对值的倒数D、横轴截距的绝对值二、填空题1、1961年，国际酶委会规定的酶活力单位为：在特定的条件下（）每（）内，催化（）的底物转化为产物的酶量为一个国际单位，即1IU。
2、求Km最常用的方法是（）。
3、可逆抑制作用可分为（）、（）、（）和混合性抑制。
4、Km值增加，其抑制剂属于（）抑制剂，Km不变，其抑制剂属于（）抑制剂，Km减小，其抑制剂属于（）抑制剂。
三、判断题1、酶活力指在一定条件下酶所催化的反应速度，反应速度越大，意味着酶活力越高。
（）2、酶反应速度随底物浓度的提高而逐渐增大。
（）3、酶活性部位的氨基酸残基在一级结构上可能相距很远，甚至在不同的肽链上，通过肽链的折叠、盘绕而在空间结构上相互靠近。
（）四、简答题1、酶的变性与酶的失活2、简述核酶的主要类型。
3、影响酶催化的主要因素。
五.名词解释1、Kcat2、Km六、计算题1、下面是某人对酶测定的一些数据，据此求出该酶的最大反应速度和米氏常数（双倒数作图法）。
1.0 10-2 140第三次作业一、单选题1、在米氏方程的双倒数作图中，酶对底物的米氏常数是双倒数直线的（）。
酶工程课后作业
②波长选择和标准曲线的制作 取9 支25mL 的刻度试管编号, 并按表1 所示加入各种试剂, 在沸水浴 中加热5min, 冷却后定容至25mL。1 号试管为标准空白样, 任选其它 一支试管( 本实验选择6 号试管) , 在450～550nm 的范围内每隔10nm 测定溶液的吸光度。再以蒸馏水为空白样, 在450～550nm 的范围内 每隔10nm 测定1 号试管溶液的吸光度。根据选择的最适波长, 在此波 长下以1 号试管为标准空白样测定其它试管内溶液的吸光度, 利用回 归分析求得标准曲线方程和相关系数。
2 糖化酶的活力测定原理及是用淀粉作底物, 通过测定 被酶分解产生葡萄糖的含量来定量分析糖化酶的活力。但针对一些 特殊情况还有另外一些方法, 如复合糖化酶中作为底物的淀粉同样 能被其他类型酶制剂所分解, 要是用麦芽糖作底物, 相比淀粉底物方 法而言, 麦芽糖只能被糖化酶专一分解。还有在筛选高活力糖化酶 菌株时, 采用Starch- PAGE 电泳活性染色法, 就可既简便、准确、灵 敏, 又可节约大量试剂。 糖化酶有催化淀粉水解的作用, 能从淀粉分子非还原性末端开 始, 分解α- l, 4 葡萄糖苷键生成葡萄糖。葡萄糖分子中含有醛基, 能 被次碘酸钠氧化, 过量的次碘酸钠酸化后析出碘, 再用硫代硫酸钠标 准溶液滴定,计算出酶活力。 糖化酶水解麦芽糖生成D- 葡萄糖。生成的葡萄糖可通过与葡萄 糖脱氢酶反应而测得, 葡萄糖脱氢酶(GlucDH)试剂中加入变构酶可 将α- D- 葡萄糖转化成β- D- 葡萄糖。在GlucDH 的作用下, β- D- 葡萄 糖与NAD(烟酰胺腺嘌呤二核苷酸)发生反应生成NADH,后者即等于 葡萄糖初始浓度, 可用于分光光度法在340 nm 测定其数值。
⑶高压液相色谱法
基于上述考虑, 巴迪安尼等建立了测定漆酶活性的高压液相色谱法, 其 大致步骤是, 以愈创木酚为底物, 在无氧溶液中加入漆酶, 3 分钟后, 用三氯乙 酸中止反应, 并将反应体系置于一40 ℃ 避光的低温恒温器中, 非酶催化反应 基本停止, 再用高压液相色谱纯化、分离愈创木酚, 用分光光度法测定愈创木 酚的浓度, 据此即可推算出每分钟漆酶分解的愈创木酚的微克分子数[ “ ” 。 比较研究表明, 以愈创木酚为底物的分光光度法测出的漆酶的K 二值与用高 压液相色谱法测定的同一漆酶的K m 值相差较大, 初级氧化产物进一步反应 所生成的发色基团对于分光光度法显然有明显干扰。费利斯利用高压液相色 谱对与植物代谢发生各种联系的52 种芳香族化合物的漆酶分解产物作了分 析研究, 提出了根据这些底物的酶促分解速率测定漆酶活性的方法[ 2 2 ’ 。 他们找到了这些分解产物的最大吸收波长, 发现这些吸收峰值往往彼此接近, 因此, 在存在多种酚类底物的体系中测定漆酶活性的方法是不可取的。总之, 测定漆酶活性的仪器己从简单的瓦氏呼吸器改进为分光光度计, 进而发展到 精密的高压液相色谱仪, 测定的精确度和灵敏度亦随之而不断提高。值得提 出的是, 目前所通常采用的分光光度法测定的漆酶活性常用某种特定底物在 一定时间内的光吸收的变化值来表示, 尚未统一换算成酶学上的标准活性单 位, 这就不利于测试结果的比较分析, 因此, 漆酶活性表达的标准化和规范化 工作仍应待加强。 ————摘自中国知网《漆酶活性测定方法概述》周易勇
酶工程智慧树知到课后章节答案2023年下聊城大学
酶工程智慧树知到课后章节答案2023年下聊城大学聊城大学第一章测试1.根据酶分子中起催化作用的主要组分不同，自然界中的天然酶可以分为（）和（）两大类别。
答案:蛋白类酶; 核酸类酶2.酶工程的主要研究任务包括（）答案:酶的生产; 酶的改性; 酶的应用3.酶在体外应用时表现出的特点，描述正确的是（）答案:对酸、碱敏感4.酶只能在水溶液中发挥作用。
答案:错5.早期，人们利用分子修饰方法确定酶的活性中心基团。
答案:对第二章测试1. D-乳酸脱氢酶[EC 1.1.1.28]只能催化丙酮酸加氢生成D-乳酸，而不能生成L-乳酸。
说明D-乳酸脱氢酶具有（）答案:绝对专一性2.下列关于酶作用特点的描述，不正确的是（）答案:酶催化作用对环境没有要求3.当酶促反应速率V达到最大反应速率Vmax的80%时，底物浓度是Km的（）倍答案:84.酯酶可催化所有含酯键的脂类物质生成醇和酸，制酶具有（）答案:键专一性5.如果一个酶，对A、B、C三种底物的米氏常数分别为Ka、Kb、Kc，而且Ka>Kb>Kc,那么这个酶的最适底物是（）答案:C第三章测试1.在酶的发酵生产中，为了提高产酶率和缩短发酵周期，最理想的合成模式是（）答案:延续合成型2.米曲霉在含有单宁的培养基中生长，单宁酶的生物合成与细胞生长同步进行，这种酶的生物合成模式属于（）同步合成型3.延续合成型的酶其生物合成可以受到诱导物的诱导，一般不受分解代谢物阻遏。
答案:对4.产酶微生物需要的培养基多种多样，但是一般包括（）等几大类成分。
答案:生长因素; 碳源; 无机盐; 氮源5.细胞产酶需要一定的温度。
一般来说发酵产酶的温度越低越好，因为低温条件有利于提高酶对应的mRNA的稳定性。
答案:错第四章测试1.使用酶解法破碎酵母细胞，应该使用（）β-葡聚糖酶2.温度差破碎法对于那些较为脆弱、易于破碎的细胞如革兰氏阴性菌等有较好的破碎效果。
答案:对3.常用的细胞破碎方法有（）答案:物理破碎法; 酶促破碎法; 化学破碎法; 机械破碎法4.对于常速离心来说，离心时间是指颗粒从离心管中样品液的液面完全沉降到离心管底的时间，称为（）答案:沉降时间5.溶液的浓度越高，浓度差越大，超滤流率越快。
2020年智慧树知道网课《酶工程(山东联盟)》课后章节测试满分答案
第一章测试1【多选题】(2分)酶工程的研究内容主要包括（）。
A.酶的作用机制B.酶的生产C.酶的应用D.酶的改造2【单选题】(2分)对于结合酶来说，与酶蛋白结合较为松散的是（）。
A.辅酶B.辅因子C.辅基D.金属离子3【单选题】(2分)以下关于酶的可逆抑制剂说法正确的一项是A.竞争性抑制剂的结构与底物无相似之处B.增加底物浓度能减少非竞争性抑制剂对酶催化活性的影响C.非竞争性抑制剂与酶作用时，通常会引起酶催化反应的最大反应速率减小D.反竞争性抑制剂与酶作用时，通常会引起酶催化反应的米氏常数增大4【单选题】(2分)酶活力单位1kat是指特定条件下A.每秒催化1μmol底物转化为产物的酶量B.每分催化1μmol底物转化为产物的酶量C.每秒催化1mol底物转化为产物的酶量D.每分催化1mol物转化为产物的酶量5【单选题】(2分)下列关于酶活性部位的描述，()项是的。
A.活性部位是酶分子中直接与底物结合，并发挥催化功能的部位B.活性部位的基因按功能可分为两大类：一类是结合基团，一类是催化基团C.酶活性部位的集团可以是同一条肽链但在一级结构上相距很远的基团D.不同肽链上的有关基团不能构成该酶的活性部位6【单选题】(2分)对于结合酶来说，决定反应特异性的是A.全酶B.辅基C.辅酶D.酶蛋白7【判断题】(2分)竞争性抑制的特点是酶催化反应的最大反应速度Vm不变，而米氏常数Km减小。
A.错B.对8【判断题】(2分)非竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm减少，而米氏常数Km不变。
A.错B.9【判断题】(2分)反竞争性抑制剂的特点是最大反应速度Vm和米氏常数Km同时减小。
A.错B.对10【多选题】(2分)酶的改性研究内容主要包括（）。
A.酶定向进化B.酶分子修饰C.酶与细胞的固定化D.酶的非水相催化第二章测试1【单选题】(2分)培养基中常用的无机氮源主要有A.酵母膏B.豆饼粉C.硝酸铵D.牛肉膏2【单选题】(2分)酶生产中最理想的合成模式是A.中期合成型B.滞后合成型C.延续合成型D.同步合成型3【单选题】(2分)下列不属于常用的物理诱变剂的是A.紫外线B.快中子C.X射线D.8-AG4【单选题】(2分)属于微生物培养常用的微量元素是A.磷B.钙C.硫D.铜5【单选题】(2分)细菌和放线菌生长的最适pH值为A.pH4～6B.pH6.5～8C.pH1～3D.pH8～106【判断题】(2分)酶的合成与细胞生长同步进行，生长进入平衡期后，酶又延续合成一段时间，该产酶模式称为滞后合成型A.错B.对7【判断题】(2分)滞后合成型模式的特点是酶的合成不受分解代谢物或产物的阻遏;酶所对应的mRNA相当稳定。
酶工程练习及答案
1、酶制剂的稳定性及其常用的衡量指标有那些？a.酶制剂的稳定性是指酶活力（活性）的稳定性。
是酶（蛋白质）抵抗各种因素的影响,而保持其催化活力(生物活性)的能力。
b.其常用的衡量指标半衰期（T1/2）。
半衰期是指一定环境条件（温度、pH值和酶制剂的存在方式）下，酶制剂丧失50%活力所需的时间。
2、酶分子化学修饰的定义及其作用。
a. 酶分子化学修饰是指在体外将酶分子通过人工的方法，与一些化学集团（物质）进行共价连接，从而改变酶的结构和性质的技术。
b.作用：1.改善酶制剂的性能：主要是稳定性和免疫原性等，亦可赋予酶新的功能。
2.酶学意义：阐明酶的结构。
3、酶分子化学修饰的方法有那些？a.酶分子的表面修饰：1.化学固定化；2.酶的小分子修饰，包括分子内交联；3.可溶性大分子的共价修饰（分子间交联）。
b.酶分子的内部修饰：1.酶蛋白的主链修饰；2.肽链伸展后的修饰；3.金属酶的金属取代。
4、酶分子化学修饰常涉及的蛋白质侧链基团及主要反应类型。
a.-SH；-NH2；-COOH；-OH；酚基；胍基；吲哚基；硫醚基及二硫键等。
b.酰化反应；烷基反应；氧化还原反应；芳香环取代反应。
5、如何评价修饰酶的特性？a.特性评价：1.稳定性：包括热、酸碱稳定性、抗蛋白酶等稳定性2.免疫原性3.作为药物酶的体内半衰期T1/24.酶动力学参数，如Km、Vm等的变化5.对组织的分布能力b.方法评价：1.活力回收及修饰酶活力2.性能的改善6、酶分子非共价修饰的方法有那些？a.反相胶束b.脂质体包裹c.添加物d.蛋白质间的非共价相连7、酶分子的遗传改造技术有那些？8、何谓人工模拟酶，其有那几种形式？a.吸收酶中那些起主导作用的因素，利用有机化学、生物化学等方法设计和合成一些较天然酶简单的非蛋白质分子或蛋白质分子，以其来模拟酶对底物的结合和催化过程，这些人造的分子就称为模拟酶。
b.①化学人工酶：1.全合成的人工酶（胶束模拟酶，肽模拟酶）；2.半合成酶②抗体酶③印迹酶9、酶制剂在医疗保健上有那些应用？a.治疗——药物酶b.诊断——酶法诊断以样品的酶活性作为诊断指标；酶作为分析工具c.酶制剂在药物生产上的应用d.作为药物靶位点在药物上设计上的应用10、酶制剂在动物饲料上有那些应用？a.补充内源酶的不足b.摧毁植物细胞壁，使营养物质更好地被利用c.水解非淀粉多糖，降低消化道食糜黏度，利于消化吸收d.消除抗营养因子及毒素11、酶制剂在食品上有那些应用？a.淀粉的加工b.淀粉的酶法转化c.在蔗糖工业上的应用12、酶制剂在轻化工业上有那些应用？a.在洗涤剂上的应用b.在纺织和印染工业上的应用c.在化妆品及牙膏中的应用d.在皮革和裘皮制造中的应用e.在造纸工业上的应用f.在有机酸等生产中的应用13、何谓酶反应器，如何衡量反应器的性能？a.以游离酶、固定化酶或固定化细胞作为生物催化剂，进行酶促反应的装置，称为酶反应器。
酶工程习题（答案全）
酶工程习题（答案全）第一章绪论一、名词解释1、酶：是具有生物催化功能的生物大分子2、酶工程：酶的生产与应用的技术过程称为酶工程。
它是利用酶的催化作用进行物质转化的技术，是将酶学理论与化工技术、微生物技术结合而形成的新技术，是借助工程学手段利用酶或细胞、细胞器的特定功能提供产品的一门科学3、核酸类酶：为一类具有生物催化功能的核糖核酸分子。
它可以催化本身RNA 剪切或剪接作用，还可以催化其他RNA，DNA多糖，酯类等分子进行反应4、蛋白类酶：为一类具有生物催化功能的蛋白质分子，它只能催化其他分子进行反应。
5、酶的生产：是指通过人工操作获得所需酶的技术过程。
主要包括微生物发酵产酶，动植物培养产酶，酶提取和分离纯化等6、酶的改性是通过各种方法改进酶的催化特性的技术过程，主要包括酶分子的修饰，酶固定化，酶非水相催化等7、酶的应用：是通过酶的催化作用获得人们所需要的物质或者不良物质的技术过程，主要包括酶反应器的选择和设计以及酶在各领域的应用等。
8、酶的专一性：又称为特异性，是指酶在催化生化反应时对底物的选择性，即在一定条件下，一种酶只能催化一种或一类结构相似的底物进行某种类型反应的特性。
亦即酶只能催化某一类或某一种化学反应。
9、酶的转换数：酶的转换数Kp。
又称为摩尔催化活性，是指每个酶分子每分钟催化底物转化的分子数二、填空题1、根据分子中起催化作用的主要组分的不同，酶可以分为_________和____________两大类。
2、核酸类酶分子中起催化作用的主要组分是__________，蛋白类酶分子中起催化作用的主要组分是________________。
3、进行分子内催化作用的核酸类酶可以分为________________，_________________。
4、酶活力是_______________的量度指标，酶的比活力是_______________的量度指标，酶的转换数的主要组分是________________的度量指标。
酶工程智慧树知到课后章节答案2023年下华南理工大学、暨南大学、华南农业大学
酶工程智慧树知到课后章节答案2023年下华南理工大学、暨南大学、华南农业大学华南理工大学、暨南大学、华南农业大学第一章测试1.酶的国际命名采用四码编号法，如葡萄糖氧化酶的系统编号为［EC1.1.3.4］，下列说法正确的是（）。
A:第三个号码表示属于亚类中的某一小类 B:第四个号码表示这一具体的酶在该小类中的序号 C:第一个号码表示该酶属于６大类酶中的某一大类 D:第二个号码表示该酶属于该大类中的某一亚类答案:第三个号码表示属于亚类中的某一小类;第四个号码表示这一具体的酶在该小类中的序号;第一个号码表示该酶属于６大类酶中的某一大类;第二个号码表示该酶属于该大类中的某一亚类2.催化反应通式A＋B＋ATP == AB＋ADP＋Pi（或AB＋AMP＋PPi）的酶属于（）。
A:合成酶 B:异构酶 C:氧化还原酶 D:裂合酶答案:合成酶3.核酸类酶是（）。
A:催化RNA进行剪接反应的一类酶 B:催化RNA进行水解反应的一类酶 C:催化DNA进行水解反应的一类酶 D:由RNA组成的一类酶答案:由RNA组成的一类酶4.RNA剪切酶是（）。
A:催化其他RNA分子进行反应的酶 B:催化本身RNA分子进行剪切反应的R酶 C:催化其他RNA分子进行剪切反应的R酶 D:催化本身RNA分子进行剪接反应的R酶答案:催化其他RNA分子进行剪切反应的R酶5.酶的转换数是指（）。
A:每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数 B:每个酶分子催化底物转化为产物的分子数 C:酶催化底物转化成产物的数量 D:每摩尔酶催化底物转化为产物的摩尔数答案:每个酶分子每分钟催化底物转化为产物的分子数6.催化两个化合物缩合成一个化合物的酶称为合成酶。
（）A:对 B:错答案:错7.多糖剪接酶是催化多糖分子进行剪切和连接反应的核酸类酶。
（）A:对 B:错答案:对8.酶活力的大小可以用一定条件下酶所催化的反应初速率表示。
（）A:错 B:对答案:对9.酶的比活力是酶纯度的量度指标，是指在特定条件下，单位体积蛋白质或RNA所具有的酶活力单位数。
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1.简述酶工程的概念及内容
2.
1.名词解释：诱导物、终产物阻遏、分解代谢产物阻遏、葡萄糖效应
① 诱导物：诱导酶起始合成的物质（通常是酶的底物），可以引起阻遏蛋白的构象变化，使之不利于与操纵基因结合，如乳糖；而能引起阻遏蛋白的构象变化从而有利于其与操纵基因结合，阻遏酶产生的物质称为辅助阻遏，如氨基酸和核苷酸等。
② 终产物阻遏：催化某一特异产物合成的酶，在培养基中有该产物存在的情况下常常是不合成的，即受阻遏的。
③ 分解代谢产物阻遏：大肠杆菌在含有能分解的两种底物（如葡萄糖和乳糖）的培养基中生长时，首先分解利用其中的一种底物（葡萄糖），而不分解另一种底物(乳糖)，这是因为葡萄糖的分解代谢产物阻遏了分解利用乳糖的有关酶合成的结果，此作用即为分解代谢产物阻遏。
④ 葡萄糖效应：由于葡萄糖常对分解利用其他底物的有关酶的合成有阻遏作用，故分解代谢产物阻遏又称为葡萄糖效应。
3.举例说明酶生物合成调节机制在产酶生物菌种改造中的指导意义
若通过基因工程手段和传统诱变的技术获得在抗代谢物存在时也能正常生长的突变株，有的突变株的相关酶系合成对这种抗代谢物不敏感，这也就解除了某些代谢物对有关酶系的反馈阻遏。
例如，异亮氨酸合成途径中的关键酶——高丝氨酸脱氢酶受蛋氨酸的反馈阻遏，通过选育蛋氨酸结构类似物抗性突变株或者蛋氨酸缺陷型菌株，可提高该酶量，从而提高异亮氨酸产量。
此外，在育种工作中，还可以筛选组成型菌株以提高酶的产量。
以β-半乳糖苷酶的生产为例，将诱导型菌株培养在含有抑制物质邻硝基-β -D 岩藻糖苷和乳糖的培养基中时，由于诱导酶的合成被抑制，野生型因不能利用乳糖而不能生长，但组成型酶突变株对于乳糖的利用则不受限制，因而此环境中生长的突变株为组成型酶产生菌。
4.在酶的发酵过程中，提高酶产量的措施有哪些
①添加诱导物：对于诱导酶的发酵生产，在发酵培养基中添加诱导物能使酶的产量显著增加。
诱导物一般分为三类：酶的作用底物，如青霉素是青霉素酰化酶的诱导物；酶的反应产物，如纤维素二糖可诱导纤维素酶的产生；酶的底物类似物，如异丙基β -D-硫代半乳糖苷对β -半乳糖苷酶的诱导效果比乳糖高几百倍。
②降低阻遏物浓度：微生物酶的生产受到代谢末端产物的阻遏和分解代谢物阻遏的调节。
为避免分解代谢物的阻遏作用，可采用难于利用的碳源，或采用分次添加碳源的方法培养液中的碳源保持在不至于引起分解代谢物阻遏的浓度。
③添加表面活性剂：在发酵生产中，非离子型的表面活性剂常被用作产酶促进剂，但它的作用机制尚未完全研究清楚。
④添加产酶促进剂：产酶促进剂是指那些非微生物生长所必须，能提高酶产量但作用机制尚未阐明的物质，它可能是酶的激活剂或稳定剂.
7.结合酶生物合成模式，浅谈该如何提高酶的合成量
（一）遗传控制①诱变育种 a. 使诱导型变为组成型：选育组成型突变株 b. 使阻遏型变为去阻遏型 c. 解除反馈阻遏：选育营养缺陷型突变株、选育结构类似物抗性突变株 d. 解除分解代谢物阻遏：选育抗分解代谢阻遏突变株②基因工程育种：改变细胞调节基因，使菌种由诱导型变为组成型；增加结构基因的拷贝数，增加细胞专一性酶的生产。
（二）条件控制① 添加诱导物酶的作用底物、作用底物的前体、反应产物、酶的底物类似物或底物修饰物② 降低阻遏物浓度: 产物阻遏：除去终产物；添加阻止产物形成的抑制剂分解代谢物阻遏：避免使用葡萄糖、避免培养基过于丰富、添加一定量的cAMP ③ 添加表面活性剂: 离子型( Tween－80),对细胞有毒害作用; 非离子型( TritonX－100),增加细胞通透性. ④ 添加产酶促进剂：酶促进剂对不同细胞、不同酶的效果各不相同，需通过试验选用适当的产酶促进剂并确定最适浓度,其作用机制并未阐明清楚。
如添加植酸钙镁可使桔青霉素生产磷酸二酯酶的量提高 10－20 倍。
8.
1.名词解释ATPE:双水相萃取技术等电聚焦IEF 2-DE双向凝胶电泳IEC:离子交换层析根据待分离物质带电性质不同的分离纯化方法. HPLC:高效（压）液相层析利用样品中的溶质在固定相和流动相之间分配系数的不同，进行连续的无数次的交换和分配而达到分离的过程
5. 双水相萃取和反胶束萃取的原理?各自如何在酶的分离纯化中应有?
双水相萃取原理：是依据样品中目标组分在两相间的分配系数不同来进行选择性分离，当样品加入双水相体系后，由于表面性质、电荷作用和各种作用力（如疏水键、氢键和离子键等）的存在和环境条件的影响，各组分在两相中的浓度不同。
由于分配系数等于系统平衡时两相中目标组分的浓度比，因此，在双水相萃取体系中可以利用各组分 K 值的不同对物质进行分离。
应用：双水相萃取已经用于多种生物酶的分离，如利用 PEG/磷酸盐双水相体系提取发酵液中的碱性木聚糖酶，利用 PEG/羟丙基淀粉体系从黄豆中分离磷酸甘油酸和磷酸甘油醛脱氢酶，利用 PEG/K3PO4 双水相体系萃取纯化葡萄糖淀粉酶，利用PEG/Dextran 双水相体系分离过氢氧化酶等。
此外，α -淀粉酶、胆固醇氧化酶、脂肪酶、纤维素酶、L-天冬酰胺酶等在双水相体系中也得到较好的分离。
反胶束萃取的原理：当蛋白质样品与反胶束溶液表面和蛋白质表面的相互作用，在两相界面形成了包含蛋白质的反胶束团，此时蛋白质以最大限度扩散进入反胶束中，从而实现蛋白质的正萃取。
然后，含有蛋白质的反胶束与另一水相接触，通过改变水相条件（如 PH、离子强度等），可以调节蛋白质反萃取回水相，从而实现正萃取或反萃取过程，回收目的蛋白质。
应用：反胶束萃取已经用于多种酶蛋白的分离，如利用十六烷甲基三甲基溴化铵（CTAB）、异辛烷/正辛醇反胶束溶液萃取纤维素酶，利用二烷基磷酸盐/异辛烷反胶束溶液萃取溶菌酶，利用琥珀酸二酯磺酸钠/异辛烷反胶束溶液提取发酵液中的碱性蛋白酶和α -淀粉酶等。
此外，胰蛋白酶、碱性蛋白酶、异柠檬酸脱氢酶、β -羟基丁酸脱氢酶、脂肪酶等也可以利用反胶束萃取进行分离。
3.如何评价固定化酶的固定化效果。
由于选用的固定化方法不同，固定化酶的活力和性质也有所不同，因此需要对不同的固定化方法进行评价。
评价的指标主要有：（1）固定化酶的比活每克（毫克）干固定化酶所具有的酶活力单位。
或：单位面积（cm2）的酶活力单位表示（酶膜、酶管、酶板）。
（2）操作半衰期是衡量稳定性的指标。
指在连续使用的条件下，固定化酶活力下降为最初活力一半所需要的时间（t1/2）。
固定化酶的操作半衰期是影响其实际应用的重要因素。
(3)偶联效率＝（加入的蛋白量－溶液中残留的蛋白量）/加入的总蛋白量×100％ (4)活力回收＝(固定化酶活力/投入的总酶活力)×100％ (5)相对酶活力具有相同酶蛋白量的固定化酶活力与游离酶活力的比值。
(6)酶载量单位载体所固定的酶活力（或酶蛋白量）。
4.简述固定化对酶性质的影响（固定化酶的性质）。
（1）稳定性大多数酶固定化后，稳定性都增强，操作寿命和保存寿命也延长。
（2）固定化酶的最适温度和最适pH 固定化后，大多数酶的热稳定性提高，所以最适温度也随之提高。
酶固定化后，对底物作用的最适pH和酶活力－pH曲线常常会发生偏移。
带负电荷的载体固定化的酶的最适pH向碱性偏移，带正电荷的载体固定化的酶的最适pH向酸性偏移。
（3）固定化酶的动力学特征固定化酶的表观米氏常数Km随载体的带电性能变化。
（4）固定化酶的专一性酶固定化后，一般不会改变其专一性。
但也有少数情况酶固定化后专一性会发生改变。