疫苗佐剂的研究进展

疫苗佐剂的研究进展

一、佐剂的定义

佐剂（Adjuvant）又称免疫调节剂（Immunomodulator）或免疫增强剂（Immunomodulator），是指先于抗原或与抗原混合或同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用的一类物质。佐剂的英文名adjuvant来源于拉丁文“adjuvare”,意思为“帮助”。药物佐剂，即某种可以加强药物疗效的物质。

二、佐剂的作用

佐剂可增强抗原的免疫原性、免疫应答速度及耐受性，可调节抗体对抗原的亲和性与专一性，可刺激细胞介导的免疫，可促进肠胃粘膜对疫苗的吸收。佐剂的作用机制当前了解的很少，阻碍了设计新的佐剂化合物，佐剂常激活多个免疫链，其中只有少数与抗原特异应答相关，要想确切地知道佐剂的作用很困难。

佐剂能增加对细胞的渗入性，防止抗原降解，能将抗原运输到特异的抗原呈递细(APC5)，增强抗原的呈递或诱导细胞因子的释放。在注射抗原后，抗原可直接被APC5吸收，与B细胞表面抗体结合或发生降解，抗原的吸收途径主要取决于抗原的特征，但也受佐剂影响。被APC5吸收的抗原通过两种途径MHCI或MHCII而呈递于CD8+或CD4+T细胞上。根据注射疫苗后分泌细胞因子方式的不同，可分为Th1应答与Th2应答。Th1应答主要通过诱导分泌IFN-γ, IL-2和IL-12，而Th2应答是通过诱导分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-12，不同的细胞因子分泌模式是相互拈抗的，促进一种

应答形式常会抑制另一种应答形式，产生I g G2a抗体被认为是Th1应答，然而诱导产生I g G1常与Th2应答有关。不同的佐剂虽然可诱导相似的抗体水平，但是细胞因子应答的方式可能不同，Th1或Th2应答方式对于疫苗的功效有显著的影响。

评价佐剂质量的优劣或能否适用于人用疫苗疫苗的主要因素为：

①能使弱抗原产生满意的免疫效果；

②不得引起中等强度以上的全身反应和严重的局部反应，在局部贮留的硬结必须逐渐被吸收；

③不得因其对佐剂本身的超敏反应，不应与自然发生的血清抗体结合而形成有害的免疫复合物；

④不得引起自身免疫性疾病；

⑤既不能有致癌性，也不得有致畸型性；

⑥佐剂的化学组成应明确，物理和化学性质稳定；

⑦在一定的保存期内的疫苗佐剂,应该稳定有效。

这些因素必须权衡考虑，但是副作用是其中最重要的一个因素，应考虑是局部反应还是全身反应，以及副反应的程度是否能被使用者接受；免疫促进作用可能刺激体液免疫和细胞免疫，或者两者均有，并且与不同疫苗的抗原成分和免疫途径有关；经济方面应考虑佐剂的来源，材料及制造工艺的价格。还应考虑到使用佐剂后是否能减少疫苗的免疫剂量及次数，以及免疫力持续的时间长短等。

在疫苗中应用免疫佐剂的潜在优点包括：

1.能优化免疫应答；

2.使疫苗能粘膜接种；

3.能促进细胞介导免疫应答；

4.能增强较弱免疫原(高度纯化的或重组的抗原)的免疫原性；

5.可减少提供保护性免疫所需的抗原量或者接种次数；能提高疫苗在免疫应答减弱者（新生儿，老人，免疫缺陷者）的疫苗接种效力。

三、佐剂的类别

根据发表的文献统计的新佐剂大约有数百种。不同的佐剂有不同促进免疫反应的机理。将这些佐剂进行理想的分类并不是很容易，可以按作用机理分类，如吸附抗原、颗粒佐剂、免疫调节因子等。但有的佐剂同时又不同的功能，因而也可按来源分类，如植物来源的、细菌来源的、人工合成的、有机物和无机盐等，但是有一些佐剂则是由不同来源的物质配制而成的。下表是根据佐剂的来源作一个简单的介绍。

正在研制和试验的人用疫苗佐剂的类型

四、部分佐剂的研究现状

１、脂质体

脂质体(Liposomes)是人工合成的双分子的磷脂单层或多层微环体，由一个或多个同心的类似细胞单位膜的类脂双分子层包裹着水相介质所组成。脂质体的各种结构使其能够携带亲水的（包于脂质体内部水相），疏水的（插入类脂双分子层）和两性的物质（吸附或联结于脂质体表面）。能将抗原传递给合适的免疫细胞，促进抗原对抗原提呈细胞的定向作用。它在医学、生物学领域除广泛应用于生物膜结构研究和作为药物载体外，还可作为免疫佐剂。已证明，小于5um的脂质体微粒能被肠道集合淋巴结提取并传递给巨噬细胞。它的优点：构成脂质体的物质均为生物体构成成分，可以生物降解，无毒性，不会发生抗体免疫反应。以HIV为例，在HIV中加入脂质体后，病毒被脂质体包容，获得一个外加包膜，类似于病毒在体内受到脂滴包裹保护，而且病毒蛋白在脂质体膜上插靠定位，稳定了病毒的结构，使病毒的热稳定性得到提高，37℃保存2周后滴度下降不明显。

脂质体象其它颗粒佐剂一样，有抗原“储存”作用。当含抗原的脂质体与各种细胞的抗血清结合时，对相应细胞有较大亲和力，起导向免疫作用。再有经电镜检查已证明，病毒蛋白插靠在脂质体表面，方向与在完整病毒表面非常相似，并且被特异抗血清凝集。

2、MF59：

MF59是一种经过微流体化（microfluidized）的油水乳剂，在10mM枸橼酸盐溶液中的主要成分为 4.3%的角鲎烯（三十六碳烯），0.5%的Tween-80,0.5%的Span85。

MF59是近年来许多制药公司和学术研究机构进行研究和开发最为广泛的一种新型佐剂。目前在抗原中加入MF59佐剂的研究性疫苗有很多种，流感，HIV，HCV，HBV，麻疹，疱疹等。对相同量的抗原，MF59比铝佐剂产生的抗体效价高3-50倍，对大白鼠和家兔的研究证明，对动物胚胎没有致畸的毒性作用。MF59在小鼠模型上显示有增进细胞免疫的作用，能加强IFN－γ，IL-4和IL-2的作用，而且对已散失IFNγ能力的老龄小鼠可以恢复其功能。在猴体模型上还显示能诱生CTL 活性。MF59与其它佐剂联合应用也已进入临床前和临床研究。用MF59与HIV、疱疹病毒和流感病毒的抗原混合后制备的疫苗已经分别进行了总数达3000多人的临床试验。结果表明其安全性很好并有明显的佐剂作用，能增强体液和细胞免疫反应。

3、免疫刺激复合物（ISCOM）：ISCOM疫苗是由皂角苷Quil A的糖苷、胆固醇、磷脂和抗原组成。抗原多数为病毒颗粒及其纯化抗原。通常胆固醇磷脂，可溶性抗原与Quil A的质量比为1：1：5。这些成分混合形成疏水性结合的胶体微泡，为一种像笼子一样的结构，抗原被包在微泡内。

免疫刺激复合物佐剂的作用有三类：

1、刺激B细胞反应，增加抗体产生；