实验一 巨噬细胞吞噬功能实验

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巨噬细胞功能实验报告

巨噬细胞功能实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。

2. 掌握巨噬细胞的分离、培养和鉴定方法。

3. 学习巨噬细胞吞噬功能的检测方法。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有强大吞噬功能的免疫细胞,在免疫过程中起着重要作用。

巨噬细胞能够识别、吞噬和消化病原微生物、凋亡细胞等异物,并参与抗原呈递、免疫调节等过程。

本实验通过分离、培养和鉴定小鼠腹腔巨噬细胞,并检测其吞噬功能,以了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。

三、实验材料与仪器1. 实验动物:6-8周龄小鼠2. 试剂:胎牛血清、RPMI-1640培养基、无菌生理盐水、鸡红细胞、冷亚甲蓝染液等3. 仪器:超净工作台、CO2培养箱、倒置显微镜、移液器、培养皿、离心机等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离与培养(1)小鼠处死后,打开腹腔,取出肠系膜,剪成1cm×1cm的小块。

(2)将小块组织放入装有生理盐水的培养皿中,用剪刀剪碎,制成组织悬液。

(3)将组织悬液移入离心管,以1000r/min的速度离心5min,弃去上清液。

(4)加入适量RPMI-1640培养基,重悬细胞,以1000r/min的速度离心5min,弃去上清液。

(5)加入适量胎牛血清的RPMI-1640培养基,重悬细胞,调整细胞浓度至1×10^6个/mL。

(6)将细胞悬液接种于培养皿中,放入CO2培养箱中培养24h。

2. 巨噬细胞的鉴定(1)取少量细胞悬液,加入适量台盼蓝染液,混匀,室温放置5min。

(2)用血细胞计数板计数,计算细胞死亡率。

(3)收集培养24h的细胞,用倒置显微镜观察细胞形态,判断细胞类型。

3. 巨噬细胞吞噬功能的检测(1)取适量鸡红细胞,用生理盐水洗涤3次,调整红细胞浓度为2×10^9个/mL。

(2)将鸡红细胞加入巨噬细胞培养液中,37℃、5%CO2条件下孵育30min。

(3)取出细胞,用生理盐水洗涤3次,弃去上清液。

(4)加入适量冷亚甲蓝染液,混匀,室温放置5min。

大吞噬实验的实验报告

大吞噬实验的实验报告

一、实验目的1. 观察和了解巨噬细胞对异物的吞噬过程。

2. 掌握巨噬细胞吞噬实验的操作方法。

3. 分析巨噬细胞的吞噬功能。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞,主要来源于单核细胞。

在机体受到病原体感染时,巨噬细胞可以吞噬病原体,并激活其他免疫细胞,共同参与机体的免疫反应。

本实验通过观察巨噬细胞对异物的吞噬过程,了解巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料1. 小鼠:体重20-25g,雌雄不限。

2. 无菌生理盐水。

3. 鸡红细胞悬液。

4. 巨噬细胞培养液。

5. 巨噬细胞培养瓶。

6. 显微镜及配套设备。

7. 吸管、试管、离心机、移液器等。

四、实验步骤1. 实验前准备:将小鼠置于恒温恒湿的环境中饲养,适应环境。

实验前1天,用无菌生理盐水给小鼠灌胃,以提高巨噬细胞的活性。

2. 巨噬细胞培养:取小鼠腹腔巨噬细胞,加入巨噬细胞培养液,置于37℃、5%CO2的培养箱中培养。

3. 实验操作:a. 取鸡红细胞悬液,用生理盐水稀释至一定浓度。

b. 将培养好的巨噬细胞悬液加入鸡红细胞悬液中,混合均匀。

c. 将混合液加入巨噬细胞培养瓶中,置于培养箱中培养一段时间。

d. 取出培养瓶,用吸管轻轻吹打,使巨噬细胞与鸡红细胞分离。

e. 将分离后的巨噬细胞悬液离心,弃去上清液,收集沉淀。

4. 观察与记录:a. 取巨噬细胞沉淀,制成涂片。

b. 用姬姆萨染色液染色,置于显微镜下观察。

c. 记录巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,包括吞噬细胞的形态、吞噬的鸡红细胞数量等。

五、实验结果与分析1. 观察结果:在显微镜下,观察到巨噬细胞呈现出典型的吞噬形态,细胞内含有多个鸡红细胞。

2. 分析:a. 巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用,说明巨噬细胞在机体免疫过程中起着重要作用。

b. 吞噬细胞的形态变化与鸡红细胞的吞噬程度有关,吞噬程度越高,细胞形态变化越明显。

c. 通过观察巨噬细胞的吞噬功能,可以了解巨噬细胞在机体免疫反应中的活性。

六、实验结论本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,验证了巨噬细胞在机体免疫过程中的重要作用。

巨噬细胞观察实验报告(3篇)

巨噬细胞观察实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本形态和生物学特性。

2. 掌握巨噬细胞的分离和培养方法。

3. 观察巨噬细胞的吞噬功能,并分析其吞噬能力。

二、实验原理巨噬细胞是一种具有吞噬功能的免疫细胞,属于单核吞噬细胞系统。

在机体免疫应答中,巨噬细胞起着重要的作用。

本实验通过分离和培养小鼠腹腔巨噬细胞,观察其吞噬功能,以了解巨噬细胞在免疫应答中的作用。

三、实验材料1. 实验动物:小鼠2. 实验试剂:无菌生理盐水、台盼蓝染液、鸡红细胞悬液、小牛血清、RPMI-1640培养基等3. 实验设备:解剖显微镜、手术器械、细胞培养箱、细胞培养皿、离心机、显微镜等四、实验方法1. 巨噬细胞的分离和培养(1)无菌操作下,取小鼠腹腔液,加入等体积的生理盐水,混匀。

(2)将混合液以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(3)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。

(4)将细胞悬液接种于培养皿中,置于细胞培养箱中培养。

2. 巨噬细胞的吞噬功能观察(1)将培养好的巨噬细胞悬液,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(2)加入台盼蓝染液,染色5 min。

(3)用生理盐水冲洗3次,弃上清液。

(4)加入鸡红细胞悬液,混匀。

(5)将细胞悬液置于细胞培养箱中培养30 min。

(6)取出细胞,以1 000 r/min离心5 min,弃上清液。

(7)加入适量RPMI-1640培养基,轻轻吹打,使细胞悬浮。

(8)将细胞悬液滴于载玻片上,置于显微镜下观察。

五、实验结果与分析1. 巨噬细胞的分离和培养在实验过程中,成功分离和培养了小鼠腹腔巨噬细胞,细胞呈圆形或椭圆形,细胞核位于细胞中央,细胞质丰富。

2. 巨噬细胞的吞噬功能观察在显微镜下观察,发现巨噬细胞对鸡红细胞具有吞噬作用。

部分巨噬细胞吞噬了鸡红细胞,细胞质内出现红色颗粒。

3. 吞噬能力分析通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的数量,可以评估其吞噬能力。

实验结果显示,巨噬细胞的吞噬能力较强,吞噬鸡红细胞的数量较多。

吞噬功能测定实验报告

吞噬功能测定实验报告

一、实验目的1. 了解吞噬细胞吞噬功能的测定原理和方法。

2. 掌握中性粒细胞和巨噬细胞吞噬功能测定的操作步骤。

3. 分析吞噬功能测定的结果,评估吞噬细胞的功能状态。

二、实验原理吞噬细胞是免疫系统中的重要组成部分,具有吞噬、消化病原微生物和衰老细胞等功能。

吞噬功能测定是评估机体免疫功能的一种方法。

本实验通过测定中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬功能,了解其吞噬能力,从而评估机体免疫功能。

三、实验材料1. 实验动物:小白鼠(6-8周龄,体重20-25g)。

2. 试剂:中性粒细胞和巨噬细胞分离试剂、鸡红细胞悬液、瑞氏染液、生理盐水、0.1%吐温-80、磷酸缓冲盐溶液(PBS)等。

3. 仪器:显微镜、离心机、移液器、培养皿、载玻片、试管等。

四、实验方法1. 中性粒细胞和巨噬细胞分离将小白鼠处死,无菌操作取腹腔液,加入中性粒细胞和巨噬细胞分离试剂,充分混匀后室温放置5分钟。

低速离心(1000r/min,5分钟)分离中性粒细胞和巨噬细胞。

2. 吞噬功能测定(1)中性粒细胞吞噬功能测定取分离的中性粒细胞,加入鸡红细胞悬液,37℃孵育30分钟。

低速离心(1000r/min,5分钟)弃上清,加入瑞氏染液,染色5分钟。

洗涤、干燥、封片,显微镜下观察中性粒细胞吞噬鸡红细胞的情况。

(2)巨噬细胞吞噬功能测定取分离的巨噬细胞,加入鸡红细胞悬液,37℃孵育30分钟。

低速离心(1000r/min,5分钟)弃上清,加入瑞氏染液,染色5分钟。

洗涤、干燥、封片,显微镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况。

3. 结果分析计算吞噬百分率和吞噬指数。

吞噬百分率=吞噬有鸡红细胞的细胞数/细胞总数×100%;吞噬指数=吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的细胞数。

五、实验结果1. 中性粒细胞吞噬功能吞噬百分率:60.5%;吞噬指数:1.2。

2. 巨噬细胞吞噬功能吞噬百分率:70.2%;吞噬指数:1.8。

六、讨论本次实验成功测定了中性粒细胞和巨噬细胞的吞噬功能。

巨噬细胞的实验报告

巨噬细胞的实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本生物学特性;2. 掌握巨噬细胞吞噬功能实验的操作方法;3. 分析巨噬细胞吞噬功能的影响因素。

二、实验原理巨噬细胞是免疫系统中的一种重要细胞,具有吞噬、清除病原体、分泌细胞因子等生物学功能。

本实验通过观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,评估巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:小鼠;2. 实验试剂:鸡红细胞、生理盐水、冷亚甲蓝染色液、培养皿、显微镜、移液器等。

四、实验方法1. 实验动物处理:取健康小鼠,腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导腹腔巨噬细胞产生。

2. 巨噬细胞收获:实验前3小时,将小鼠处死,无菌操作下取出腹腔液,加入等体积生理盐水,混匀后离心(1000r/min,10min),弃上清,用生理盐水洗涤2次,沉淀即为巨噬细胞。

3. 巨噬细胞吞噬实验:将收获的巨噬细胞加入培养皿中,加入适量鸡红细胞,37℃培养1小时。

4. 巨噬细胞染色:将培养好的巨噬细胞加入冷亚甲蓝染色液,染色5分钟。

5. 巨噬细胞观察:用显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,计算吞噬百分率和吞噬指数。

五、实验结果与分析1. 实验结果:显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,部分鸡红细胞被吞噬细胞包裹。

2. 实验分析:(1)吞噬百分率:吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数×100%;(2)吞噬指数:吞噬的鸡红细胞总数/吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数。

六、实验结论本实验成功观察到了巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,说明巨噬细胞具有吞噬功能。

吞噬百分率和吞噬指数可以作为评估巨噬细胞吞噬功能的重要指标。

七、实验讨论1. 巨噬细胞在免疫系统中具有重要作用,吞噬功能是其重要生物学特性之一。

2. 本实验采用腹腔巨噬细胞,操作简便,结果可靠。

3. 影响巨噬细胞吞噬功能的主要因素包括:巨噬细胞的来源、成熟度、环境因素等。

4. 本实验为后续研究巨噬细胞吞噬功能的影响因素提供了基础。

八、实验总结本实验通过观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,成功评估了巨噬细胞的吞噬功能。

吞噬现象观察实验报告

吞噬现象观察实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的吞噬功能及其在免疫应答中的作用。

2. 观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,加深对吞噬作用机制的理解。

二、实验原理巨噬细胞是一类具有吞噬功能的免疫细胞,能够识别、吞噬并消化各种抗原物质,如细菌、病毒、细胞碎片等。

在本实验中,我们通过观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬作用,了解吞噬作用的过程和机制。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:清洁级雄性小鼠(体重20-25g)。

2. 实验试剂:鸡红细胞悬液、生理盐水、台盼蓝染色液、显微镜等。

3. 实验仪器:超净工作台、移液器、显微镜、离心机等。

四、实验步骤1. 麻醉小鼠,打开腹腔,收集腹腔巨噬细胞。

2. 将收集到的巨噬细胞用生理盐水洗涤两次,制成细胞悬液。

3. 将鸡红细胞悬液与巨噬细胞悬液按一定比例混合,置于37℃水浴中温育30分钟。

4. 取出混合液,用台盼蓝染色液染色,置于显微镜下观察。

5. 记录吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数量和形态变化。

五、实验结果在显微镜下观察到,巨噬细胞对鸡红细胞具有明显的吞噬作用。

具体表现为:1. 部分巨噬细胞表面出现鸡红细胞,表明巨噬细胞已将鸡红细胞吞噬入细胞内。

2. 吞噬鸡红细胞的巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变。

3. 部分巨噬细胞内可见被吞噬的鸡红细胞碎片。

六、实验分析与讨论1. 本实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,这与巨噬细胞的免疫功能相一致。

2. 吞噬过程中,巨噬细胞表面出现鸡红细胞,说明巨噬细胞通过表面受体识别鸡红细胞。

3. 吞噬后,巨噬细胞体积增大,细胞核形态发生改变,说明巨噬细胞在吞噬过程中发生了代谢变化。

4. 吞噬鸡红细胞过程中,部分鸡红细胞碎片被巨噬细胞消化,说明巨噬细胞在吞噬作用中具有一定的消化功能。

七、实验结论通过本实验,我们成功观察了小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,加深了对吞噬作用机制的理解。

实验结果表明,巨噬细胞在免疫应答中发挥着重要作用,具有识别、吞噬和消化抗原物质的能力。

巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告

巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告

巨噬细胞吞噬作用的观察细胞学实验报告实验目的:观察巨噬细胞的吞噬作用,了解巨噬细胞在防御机体内外侵犯的微生物和异物时的作用机制。

实验原理:巨噬细胞是一种能够吞噬和消化体内外各种微生物及其他异物的免疫细胞,其作用主要通过两种方式实现:异物与巨噬细胞表面的膜蛋白结合,通过膜囊泡(吞噬体)形成吞噬泡;吞噬泡与溶酶体融合,形成溶酶体-吞噬体复合物,完成异物的吞噬和溶解。

实验步骤:1.实验前准备1.1. 预先培养巨噬细胞至对数生长期,并调整细胞浓度为1×10^6 cells/mL;1.2.准备巨噬细胞富集培养液、悬浮液和含有正常培养液的对照组,分别标记为A、B和C组;1.3.准备大肠杆菌溶菌液;1.4.准备各组的显微镜载玻片。

2.差速计数法确定吞噬指数2.1.取3只显微镜载玻片,分别滴加A、B和C组巨噬细胞液,每个组各滴2滴;2.2.于25℃恒温槽中孵育15分钟;2.3.分别在显微镜下用10倍镜进行巨噬细胞数目计数;2.4.计算巨噬细胞吞噬指数,公式如下:吞噬指数=A-B/C-B。

3.吞噬试验3.1.在显微镜盖片上涂抹一层巨噬细胞富集液;3.2.将滴管中的巨噬细胞悬浮液加入巨噬细胞富集液之上,形成巨噬细胞层;3.3.在巨噬细胞层上滴加大肠杆菌溶菌液,并进行密封;3.4.将盖片置于37℃恒温槽中孵育30分钟;3.5.取出巨噬细胞盖片,用0.01%新洁尔灭溶液洗涤;3.6.加入吉姆萨酮染色试剂,显色15分钟后以洁净水洗净;3.7.在显微镜下观察巨噬细胞内的大肠杆菌数量。

4.数据处理4.1.统计吞噬细胞内大肠杆菌数量;4.2.分析吞噬指数和巨噬细胞内大肠杆菌数量的关系。

实验结果:根据差速计数法得出的巨噬细胞吞噬指数为0.67、在吞噬试验中观察到,巨噬细胞内存在许多吉姆萨酮染色的大肠杆菌。

实验讨论:巨噬细胞的吞噬作用是免疫系统中重要的第一道防线,可以吞噬和杀灭多种病原菌和异物。

实验结果表明,巨噬细胞吞噬指数为0.67,说明巨噬细胞具有较强的吞噬能力。

巨噬细胞吞噬功能检测

巨噬细胞吞噬功能检测

巨噬细胞吞噬功能测定【实验原理】巨噬细胞对颗粒性异物具有很强的吞噬功能。

当鸡红细胞被注入小鼠腹腔时,会被腹腔中的巨噬细胞吞噬。

取小鼠腹腔液涂片、染色,在显微镜下可见到鸡红细胞被吞噬的现象。

计算吞噬百分率和吞噬指数,可判断吞噬细胞的吞噬功能。

【试剂和器材】1. 动物体重20-25g的健康小鼠。

2. 1%鸡红细胞(CRBC)悬液自鸡液静脉或心脏采血,放Alsever液中保存(鸡血与Alsever 液1:5混合),置4℃可有效保存1个月,临用前用生理盐水将CRBC洗3次,按红细胞压积配成1%CRBC悬液。

3. 6%可溶性淀粉肉汤培养基肉汤培养基100ml加入可溶性淀粉6g,混匀,置100℃水浴煮沸消毒。

4. 其他试剂瑞氏(Wright)染液、生理盐水等。

5. 器材无菌注射器及针头、剪刀、镊子、解剖盘、载玻片、显微镜等。

【步骤和方法】1.试验前3天,于小鼠腹腔注射6%可溶性淀粉肉汤培养基1ml。

2.于试验当天,小鼠腹腔注入1%CRBC悬液0.5ml,并轻轻揉腹。

3.30min后小鼠颈椎脱臼处死,取腹腔液涂片,自然干燥后瑞氏染色,用油镜观察。

【结果判定】镜下可见吞噬细胞核呈蓝色,被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形,其胞浆呈红色而核被染成蓝色。

呈油镜下随机观察100个巨噬细胞,计数吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数和吞噬的鸡红细胞总数。

吞噬百分率= (吞噬CRBC的巨噬细胞数/100)*100%吞噬指数= 吞噬细胞吞噬的CRBC总数/100【注意事项】1.涂片的薄厚要适当,否则影响计数。

2.小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。

3.如小鼠腹腔液过少,可注入适量生理盐水。

4.剪开小鼠腹腔时应避免出血,否则将影响试验结果。

5.被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化,时间过短未被吞噬,必须掌握好吞噬作用时间。

阿氏液配方:葡萄糖 2.05克柠檬酸钠0.8克柠檬酸0.055克氯化钠0.42克加蒸馏水至100毫升,加热溶解后将pH值调到6.1,经过69千帕,15分钟的高压灭菌,放置在4℃的环境内,保存备用。

吞噬现象实验报告

吞噬现象实验报告

一、实验目的1. 观察和理解细胞吞噬作用的过程。

2. 学习并掌握巨噬细胞吞噬功能测定的方法。

3. 了解巨噬细胞在非特异性免疫中的作用。

二、实验原理吞噬作用,又称胞吞作用,是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。

在高等动物体内,巨噬细胞和嗜中性粒细胞的吞噬作用是非特异性免疫的重要组成部分。

巨噬细胞具有识别并结合病原体、凋亡细胞及其它异物的能力,通过吞噬作用将其消灭,从而保护机体免受病原体的侵害。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:小鼠2. 试剂:鸡红细胞、无菌淀粉液、冷亚甲蓝染色液、生理盐水3. 仪器:显微镜、载玻片、移液器、吸管、培养皿等四、实验方法1. 诱导巨噬细胞产生:实验前3小时,小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。

2. 制备吞噬细胞悬液:取小鼠腹腔液,加入适量生理盐水,混匀后用移液器吸取上清液,即为吞噬细胞悬液。

3. 吞噬实验:将鸡红细胞与吞噬细胞悬液混合,在37℃恒温箱中孵育30分钟。

4. 制备涂片:取一片载玻片,滴加适量吞噬细胞悬液,再加入适量鸡红细胞,混匀后滴加适量冷亚甲蓝染色液,盖上盖玻片。

5. 观察与计数:在高倍显微镜下观察吞噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,计数吞噬细胞的数量和吞噬鸡红细胞的数量。

五、实验结果在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。

通过计数吞噬细胞的数量和吞噬鸡红细胞的数量,计算出吞噬百分率和吞噬指数。

六、实验分析1. 吞噬百分率:吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数× 100%2. 吞噬指数:吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数实验结果显示,小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能,吞噬百分率和吞噬指数均较高,说明巨噬细胞在非特异性免疫中发挥着重要作用。

七、实验结论1. 吞噬作用是细胞的一种重要生物学功能,在非特异性免疫中发挥着重要作用。

2. 小鼠腹腔巨噬细胞具有较强的吞噬功能,吞噬百分率和吞噬指数均较高。

实验1.吞噬细胞功能的测定

实验1.吞噬细胞功能的测定

实验一、巨噬细胞吞噬功能的观察
[原理]
吞噬细胞属于机体的固有免疫系统,对异物有识别和清除的能力。

巨噬细胞是吞噬细胞之一,主要分布于机体的淋巴结、脾脏、结缔组织等处。

[材料]
1.小鼠、1%绵羊红细胞、瑞氏染液等。

2.注射器、吸管、手术器械、显微镜等。

[方法]
1.实验前3天,小鼠腹腔注射硫乙醇酸钠培养基,诱导腹腔巨噬细胞。

2.将上述小鼠腹腔注射1%绵羊红细胞2ml/只,等待30-60min。

3.小鼠断颈椎处死,轻揉腹部约1min,吸取腹腔液做推片。

4.标本片充分干燥后,瑞氏染液染色10min,冲洗,吸干水后镜检。

5.镜下观察巨噬细胞的吞噬现象,计算吞噬百分数和吞噬指数。

吞噬百分数=(发生吞噬的巨噬细胞个数/所观察的巨噬细胞总个数)*100%
吞噬指数=所观察到的巨噬细胞一共吞噬的红细胞个数/所观察的巨噬细胞总个数
实验报告:要求画图、计算吞噬百分数和吞噬指数(以上为实验结果)、讨论(非必须)及结论。

强烈建议实验报告使用A4大小的纸张。

实验报告不返还,若要留底请自行备份。

实验一 巨噬细胞吞噬功能实验

实验一  巨噬细胞吞噬功能实验

实验一巨噬细胞吞噬功能实验1、【实验原理】(1)巨噬细胞作为单核吞噬细胞系统的主要细胞,具有活跃的吞噬功能。

能清除体内抗原物质及变性的细胞,在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。

MΦ受抗原刺激后活化,可使其吞噬功能明显增强。

(2)此实验采用体内法,即:在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡红细胞30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷美蓝染色,油镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数,及观察巨噬细胞中内因被杀死而染为蓝色的鸡红细胞的形态、数目,以判断巨噬细胞中的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异免疫水平。

2、【实验步骤】(1)试验前3d,小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。

(2)实验时,每只小鼠腹腔注射鸡红细胞液1ml,轻揉腹部,使红细胞在腹腔中分布均匀,利于吞噬(3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用吸管取出腹腔液,均匀涂布于载玻片上,然后再滴一小滴0.03%冷美蓝溶液,盖上盖玻片。

(4)低倍镜下找到观察区域后,换高倍镜下进行观察,计数3、【实验结果】4、【结果分析】(1)如图所示,在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可以看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。

(2)镜下可见吞噬细胞核呈蓝色,被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形,其胞浆呈红色而核被染成蓝色。

(3)由于未将腹腔液和冷美蓝溶液充分混合均匀,使得视野中出现大片深染区域。

总体实验结果较好,视野中央可见清晰的吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞。

5、【注意事项】(1)涂片的薄厚要适当,否则影响计数。

(2)小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。

(3)如小鼠腹腔液过少,可注入适量生理盐水。

(4)剪开小鼠腹腔时应避免出血,否则将影响试验结果。

(5)被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化,时间过短未被吞噬,必须掌握好吞噬作用时间。

实验二双向琼脂扩散实验1、【实验原理】(1)可溶性抗原与相应抗体特异性结合,两者比例适当并有电解质存在及一定的温度条件下,经一定的时间,可形成肉眼可见的沉淀线/环的现象,称为沉淀反应。

细胞吞噬实验报告

细胞吞噬实验报告

一、实验目的通过本实验,观察细胞吞噬作用的过程,了解细胞吞噬功能的机制,加深对细胞吞噬作用的理解。

二、实验原理细胞吞噬作用是指细胞通过质膜内陷形成内吞泡的方式吞入不能渗透过膜的较大固体物质的过程。

细胞吞噬作用是细胞免疫和体液免疫的重要组成部分,对于清除病原体、衰老细胞和凋亡细胞等异物具有重要作用。

三、实验材料1. 细胞:小鼠腹腔巨噬细胞、鸡红细胞;2. 试剂:无菌生理盐水、0.03%冷亚甲蓝溶液、无菌淀粉液;3. 仪器:显微镜、载玻片、滴管、酒精灯、镊子、剪刀等。

四、实验方法1. 细胞培养:将小鼠腹腔巨噬细胞接种于培养皿中,加入无菌生理盐水,37℃、5%CO2培养箱中培养24小时。

2. 巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验:(1)取培养好的巨噬细胞,用无菌生理盐水洗涤2次,制成细胞悬液;(2)取鸡红细胞,用无菌生理盐水洗涤2次,制成红细胞悬液;(3)将细胞悬液与红细胞悬液按一定比例混合,37℃、5%CO2培养箱中孵育30分钟;(4)将孵育后的混合液用无菌生理盐水洗涤2次,制成细胞悬液;(5)取载玻片,将细胞悬液滴于载玻片上,加盖玻片;(6)在显微镜下观察细胞吞噬鸡红细胞的现象。

3. 细胞吞噬功能测定:(1)取培养好的巨噬细胞,用无菌生理盐水洗涤2次,制成细胞悬液;(2)取鸡红细胞,用无菌生理盐水洗涤2次,制成红细胞悬液;(3)将细胞悬液与红细胞悬液按一定比例混合,37℃、5%CO2培养箱中孵育30分钟;(4)将孵育后的混合液用无菌生理盐水洗涤2次,制成细胞悬液;(5)计算吞噬百分率和吞噬指数。

五、实验结果1. 观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。

2. 吞噬百分率为:[吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数/巨噬细胞总数]×100%。

3. 吞噬指数为:[吞噬的鸡红细胞总数/吞噬有鸡红细胞的巨噬细胞数]。

六、实验分析1. 通过实验观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,证实了细胞吞噬作用的可行性。

巨噬细胞吞噬实验报告

巨噬细胞吞噬实验报告

巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞吞噬实验报告巨噬细胞是一类重要的免疫细胞,它们在机体内起着清除病原体和细胞垃圾的重要作用。

巨噬细胞通过吞噬和消化来清除这些有害物质,从而维护机体的健康。

本次实验旨在探究巨噬细胞的吞噬能力,并观察不同条件下巨噬细胞的吞噬效果。

实验材料和方法:1. 巨噬细胞:从小鼠腹腔摘取巨噬细胞,经过离心、洗涤后制备成细胞悬液。

2. 有害物质:使用荧光染料标记的细菌和细胞碎片作为巨噬细胞吞噬的目标。

3. 细胞培养基:提供适宜的营养和环境条件供巨噬细胞生长。

4. 显微镜:观察和记录巨噬细胞的吞噬情况。

实验步骤:1. 将巨噬细胞悬液均匀分配到培养皿中,加入适量的细胞培养基,使巨噬细胞处于良好的生长状态。

2. 在巨噬细胞培养基中加入荧光染料标记的细菌和细胞碎片,使其与巨噬细胞悬液充分接触。

3. 将培养皿置于恒温培养箱中,以37摄氏度、5%二氧化碳的条件下培养巨噬细胞。

4. 在培养的不同时间点,取出培养皿进行显微镜观察,并记录巨噬细胞吞噬的数量和程度。

5. 对实验结果进行统计和分析,得出结论。

实验结果:在观察巨噬细胞吞噬的过程中,我们发现了一些有趣的现象。

首先,在实验开始的早期,巨噬细胞对细菌和细胞碎片的吞噬速度较快,数量也相对较多。

然而,随着时间的推移,巨噬细胞的吞噬速度逐渐减慢,吞噬的数量也逐渐减少。

这表明巨噬细胞在一段时间内能够高效地吞噬有害物质,但随着吞噬的进行,巨噬细胞的饱和度逐渐增加,导致吞噬速度下降。

此外,我们还发现了巨噬细胞对不同类型有害物质的吞噬能力存在差异。

在实验中,我们使用了荧光染料标记的细菌和细胞碎片作为巨噬细胞的吞噬目标。

观察结果显示,巨噬细胞对细菌的吞噬效果较好,吞噬数量较多,而对细胞碎片的吞噬效果相对较差。

这可能是因为细菌具有较小的体积和较强的运动能力,更容易被巨噬细胞捕获和吞噬。

而细胞碎片可能较大且较为静态,巨噬细胞需要更多的时间和能量来吞噬。

结论:通过本次实验,我们对巨噬细胞的吞噬能力有了更深入的了解。

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告

小鼠腹腔巨噬细胞吞噬实验报告一、实验目的本实验旨在研究小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,通过观察巨噬细胞对特定颗粒物质的吞噬过程,了解巨噬细胞在免疫防御中的作用机制,为进一步研究免疫系统的功能和相关疾病的发生发展提供实验依据。

二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中的重要细胞成分,具有强大的吞噬能力。

在本实验中,将鸡红细胞作为被吞噬的靶物质注入小鼠腹腔,一段时间后,巨噬细胞会对鸡红细胞进行吞噬。

通过涂片、染色等处理,可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并计算吞噬百分率和吞噬指数,以评估巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与方法(一)实验材料1、实验动物:健康昆明小鼠,体重 18 22 g。

2、试剂:生理盐水、6%淀粉肉汤、鸡红细胞悬液、瑞氏染液等。

3、器材:注射器、显微镜、载玻片、盖玻片、离心机等。

(二)实验方法1、小鼠腹腔注射 6%淀粉肉汤 1 ml,诱导腹腔巨噬细胞产生。

2、三天后,给小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液 1 ml。

3、注射 30 分钟后,将小鼠断颈处死,腹腔注入生理盐水 2 ml,轻揉腹部,然后抽取腹腔液。

4、抽取的腹腔液以 1000 rpm 离心 5 分钟,弃上清,留沉淀。

5、沉淀用生理盐水重悬,制成细胞涂片。

6、涂片自然干燥后,用瑞氏染液染色。

7、油镜下观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的情况,并计数。

四、实验结果(一)巨噬细胞形态观察在油镜下,巨噬细胞体积较大,形态不规则,胞浆丰富,常含有吞噬的颗粒物质。

未吞噬鸡红细胞的巨噬细胞胞浆呈淡蓝色,细胞核呈紫红色,形状多样。

(二)吞噬现象观察可以观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的不同阶段,有的巨噬细胞胞浆内含有 1 2 个鸡红细胞,有的则含有多个。

被吞噬的鸡红细胞形态完整,部分已被消化。

(三)吞噬百分率和吞噬指数计算随机观察 200 个巨噬细胞,计算其中吞噬鸡红细胞的巨噬细胞数,得出吞噬百分率。

同时,计算每个巨噬细胞吞噬鸡红细胞的平均数,即为吞噬指数。

本次实验中,吞噬百分率为____%,吞噬指数为____。

巨噬细胞的吞噬作用

巨噬细胞的吞噬作用

巨噬细胞的吞噬作用——巨噬细胞体内吞噬鸡红细胞实验前言:病原微生物一旦突破体表防御屏障侵入体内,首先接触的是遍布全身的大、小吞噬细胞,他们分布于血液和组织中,并可以在某些趋化因子的作用下被吸引至微生物侵入部位。

吞噬细胞依据其形态大小分为两大类:一类是血液中的单核细胞及从血液游走到血管外并固定于各组织中的巨噬细胞,称为大吞噬细胞;另一类是血液中的嗜中性粒细胞称为小吞噬细胞。

它们是机体非特异性免疫的重要因素。

今我设计的实验是检测巨噬细胞的吞噬功能,淀粉可以在实验动物腹腔内引起非感染性炎症渗出,在腹腔局部聚集较多巨噬细胞;将鸡红细胞注入实验动物腹腔内,可检测腹腔内的巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬功能。

【实验目的】熟悉巨噬细胞吞噬功能的体外测定功能。

【实验原理】当鸡红细胞注入小鼠腹腔内,巨噬细胞可借助细胞表面的免疫识别受体或直接吞噬鸡红细胞而将其消化,通过显微镜观察该吞噬现象,可了解巨噬细胞的吞噬功能。

【实验材料及试剂配制】(1)体重25g左右的小鼠。

(2)5ml、1ml无菌注射器,6号、9号针头,10ml离心管,清洁载玻片,烧杯,解剖剪,眼科镊,湿盒,解剖板,图钉,37℃水浴箱。

(3)4%淀粉肉汤:称面粉3克、可溶性淀粉5克、加营养肉汤至100ml,混匀,先微火加热,不断搅拌使成糊状,再高压灭菌。

临用时,与无菌营养肉汤等量混合。

(4)D-Hank’s液:NaCl 8.0g、KCl 0.4g、Na2HPO4•H2O 0.12g、KH2PO4 0.06g、葡萄糖 1.0g、1%酚红 2.0ml。

将上述成分溶于1000ml双蒸水,分装于500毫升盐水瓶,8磅15min灭菌,4℃冰箱保存,临用时用3.5%NaHCO3调pH至7.2~7.4. (5)生理盐水(6)2%鸡红细胞:无菌操作抽取鸡翅静脉血,抗凝,置于离心管中,用无菌生理盐水洗3次,最后一次离心2000r/min, 10min,按积压将鸡血细胞用Hank’s液配成2%浓度。

巨噬细胞的吞噬实验

巨噬细胞的吞噬实验

常穿出血管,聚集于炎症组织周围,作变形运动,吞噬细菌。
体内有炎症时,它数量就增多。嗜酸性粒细胞数量最少。淋巴
细胞与免疫有亲密关系,患结核病时,淋巴细胞显著增加。单核
细胞是血液中最大细胞,变形活动非常活跃,能吞噬细菌和
异物。单核细胞穿出血管到结缔组织中可变为巨噬细胞。
❖ 嗜酸性粒细胞含有粗大嗜酸性颗粒,颗粒内含有过氧化物酶
巨噬细胞的吞噬实验
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观察时,将视野光线调暗。在高倍镜下,先分辨清鸡红细胞和 巨噬细胞。鸡红细胞为淡黄色、椭圆形、有核细胞。而数量较 多、体积较大圆形或不规则细胞,其表面有许多似毛刺状小突 起(伪足),胞质中有数量不等蓝色颗粒(为吞入含台盼蓝 淀粉肉汤形成吞噬泡)即为巨噬细胞。变换视野,仔细观察巨噬 细胞吞噬鸡红细胞过程。可见有鸡红细胞(一至多个)紧贴附 于巨噬细胞表面;有巨噬细胞已将1至数个红细胞个别吞入; 有巨噬细胞已吞入1个或几个红细胞在胞质中刚才形成椭圆形 吞噬泡;有巨噬细胞内吞噬泡体积缩小,并展现圆形,这是 与初级溶酶体发生融合,泡内物正在被消化分解。
巨噬细胞的吞噬实验
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目标要求
1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象原理 2.熟悉细胞吞噬作用基础过程
巨噬细胞的吞噬实验
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基础原理
❖ 高等动物体内巨噬细胞、单核细胞和嗜中性粒细胞,含有 吞噬功效。它们广泛分布在组织和血液中,在机体非特异 免疫功效中起着主要作用。当病原微生物或其它异物侵入 机体时,能招引巨噬细胞,而巨噬细胞又含有趋化性,它 经过产生活跃变形运动,主动向病原体和异物移行聚集, 首先把异物吸附在细胞表面,随之,吸附区域细胞膜向内 凹陷,伸出伪足包围异物,并吞入胞质,形成吞噬泡,继 而在细胞质中初级溶酶体与吞噬泡融合,形成吞噬溶酶体, 把病原体杀死,异物消化分解。

巨噬细胞吞噬实验报告

巨噬细胞吞噬实验报告

一、实验目的1. 了解巨噬细胞的基本特性及其在免疫反应中的作用。

2. 观察和分析巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象。

3. 掌握显微镜下观察细胞吞噬作用的实验技术。

二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中重要的细胞类型,具有强大的吞噬能力。

当巨噬细胞遇到抗原时,会通过吞噬作用将其捕获、消化并清除。

本实验以鸡红细胞作为抗原,观察小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬过程,从而了解巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:健康小鼠(体重20-25g)2. 实验器材:解剖显微镜、显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、剪刀、镊子、吸管等3. 实验试剂:生理盐水、鸡红细胞悬液、冷亚甲蓝染色液、无菌淀粉液四、实验步骤1. 小鼠腹腔巨噬细胞诱导:实验前3小时,将小鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导腹腔巨噬细胞渗出。

2. 鸡红细胞悬液制备:将鸡红细胞用生理盐水洗涤三次,制成红细胞悬液,浓度为1×10^9/L。

3. 腹腔巨噬细胞收集:将小鼠处死,打开腹腔,用生理盐水冲洗腹腔,收集腹腔液。

4. 巨噬细胞染色:取腹腔液1ml,加入1ml冷亚甲蓝染色液,混匀,染色5分钟。

5. 制片观察:取载玻片,滴加1滴腹腔液,盖上盖玻片,用解剖显微镜观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的形态学变化。

五、实验结果1. 在显微镜下观察到,巨噬细胞呈圆形或椭圆形,细胞质丰富,细胞核较大,呈蓝色。

2. 鸡红细胞呈圆形,直径约为7-8μm,呈红色。

3. 观察到部分巨噬细胞周围有红细胞聚集,说明巨噬细胞已经吞噬了鸡红细胞。

4. 部分巨噬细胞内部可见吞噬的红细胞,且红细胞被巨噬细胞质包围,说明巨噬细胞已经将鸡红细胞包裹在内。

六、实验分析1. 本实验观察到巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬现象,说明巨噬细胞具有吞噬能力。

2. 吞噬过程中,巨噬细胞通过质膜内陷形成吞噬泡,将鸡红细胞包裹在内,然后将其消化。

3. 吞噬作用是机体免疫系统的重要组成部分,有助于清除体内的病原体和衰老细胞。

巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告

巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告

巨噬细胞吞噬作用的观察实验报告一.实验目的1.通过小鼠腹腔巨噬细胞对异物吞噬作用的观察,了解巨噬细胞在非特异性免疫中的功能。

2.掌握小鼠等实验动物腹腔巨噬细胞采集和制片的方法。

3.学习小鼠腹腔注射的操作方法和步骤。

二.实验原理1.向小鼠腹腔内注射无菌淀粉肉汤,排异反应使小鼠产生大量巨噬细胞,且巨噬细胞吞噬淀粉肉汤后不会对细胞造成伤害,反而被“喂养”。

连续多天注射使小鼠腹腔内聚集大量巨噬细胞。

2.台盼蓝是一种生物染料,专一染色死细胞。

活细胞的细胞质膜对台盼蓝有不透过性。

巨噬细胞吞噬含有台盼蓝的淀粉肉汤后,可以消化其中的淀粉和蛋白质,但是不能消化其中的台盼蓝,因此台盼蓝会聚集在溶酶体中。

是一种溶酶体染色的方法。

3.当向小鼠腹腔中注射鸡红细胞时,鸡红细胞作为外源物质,会被小鼠细胞识别并吞噬,在适当的的时机,我们就有可以在显微镜下观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的过程三.实验材料及设备1.实验材料:a)连续2~3天向腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤的小鼠一只b)鸡红细胞悬液c)生理盐水2.实验设备:a)普通光学显微镜b)载玻片、盖玻片若干c)注射器d)染色皿若干、吸水纸、滴管、剪刀、白瓷板等四.实验方法及步骤1.小鼠处理与巨噬细胞采集a)连续2-3天(每天一次)向小鼠腹腔中注射含台盼蓝的淀粉肉汤。

b)选择已注射淀粉肉汤3小时以上的小鼠一只。

c)一人控制住小鼠,露出腹部,另一人用注射器向小鼠腹腔中注射1ml鸡红细胞悬液。

按摩小鼠腹部。

d)20-30分钟后,再注射1-1.5ml生理盐水(0.9%NaCl)按摩小鼠腹部。

e)3分钟后,引颈法处死小鼠f)迅速在腹腔剪开一个不大的开口(注意要剪开腹部的肌肉层),用无针头的注射器吸取腹腔液。

g)在载玻片上滴2-3滴腹腔液,加上盖玻片,在显微镜下观察。

2.观察在不同倍数下观察样本,找到正在消化或者吞噬鸡红细胞的巨噬细胞。

注意避免玻片液体干涸。

五.实验结果小鼠红细胞巨噬细胞鸡红细胞已吞噬鸡红细胞的巨噬细胞图1小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡血红细胞装片(100X物镜不染色)左上角示未知种类细胞100x物镜放大倍数,光镜下可见随机分布的不同种类的细胞。

小鼠大吞噬实验报告(3篇)

小鼠大吞噬实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 观察小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能。

2. 了解巨噬细胞在免疫过程中的作用。

3. 掌握巨噬细胞吞噬实验的操作方法和结果分析。

二、实验原理巨噬细胞是机体免疫系统中一类重要的细胞,具有强大的吞噬能力。

在实验中,通过向小鼠腹腔注射鸡红细胞,观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况,可以了解巨噬细胞的吞噬功能。

三、实验材料与试剂1. 实验动物:昆明种小鼠2. 实验试剂:鸡红细胞悬液、生理盐水、0.1%台盼蓝染色液3. 实验仪器:显微镜、注射器、载玻片、盖玻片、染色皿、吸水纸、滴管四、实验方法1. 将昆明种小鼠随机分为实验组和对照组,每组10只。

2. 实验组小鼠腹腔注射鸡红细胞悬液(浓度为2×10^8个/ml),对照组小鼠腹腔注射等体积的生理盐水。

3. 24小时后,处死小鼠,取出腹腔液。

4. 将腹腔液滴加在载玻片上,加盖玻片,制成细胞涂片。

5. 用0.1%台盼蓝染色液染色,显微镜下观察巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬情况。

6. 计算吞噬百分率和吞噬指数。

五、实验结果1. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬百分率为(±标准差)%。

2. 实验组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的吞噬指数为(±标准差)。

六、实验分析1. 实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,且吞噬百分率和吞噬指数均高于对照组。

2. 巨噬细胞在免疫过程中发挥着重要作用,其吞噬功能是机体非特异性免疫的重要组成部分。

3. 本实验结果与文献报道相符,说明实验方法可行,结果可靠。

七、实验结论1. 小鼠腹腔巨噬细胞具有吞噬鸡红细胞的能力,其吞噬功能在免疫过程中具有重要意义。

2. 本实验为巨噬细胞吞噬功能的研究提供了实验依据。

八、实验讨论1. 实验过程中,巨噬细胞的采集和制片方法对实验结果有一定影响。

在实验过程中,应注意避免污染和细胞损伤。

2. 实验结果表明,小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能与鸡红细胞的浓度、实验时间等因素有关。

体外吞噬作用实验报告

体外吞噬作用实验报告

体外吞噬作用实验报告实验报告:体外吞噬作用一、实验目的:探究巨噬细胞的体外吞噬作用,并观察其对被吞噬物的分解能力。

二、实验原理:体外吞噬作用是巨噬细胞对细菌或其他小型微生物进行吞噬的一种生理过程。

巨噬细胞通过细胞膜上的受体与目标微生物进行黏附,并通过吞饮囊将其完全包裹。

随后,吞饮囊与溶酶体融合,形成吞噬体。

在吞噬体内,溶酶体释放的酶可以消化吞噬物,从而实现细菌或微生物的降解。

三、实验材料:1. 体外培养的巨噬细胞;2. 细菌培养基及菌液;3. 细胞培养基;4. 显微镜;5. 细胞计数板;6. 10 ml试管。

四、实验步骤:1. 取一株体外培养的巨噬细胞,并保存在体外培养条件下。

2. 向10 ml试管中加入巨噬细胞培养基5 ml,并将培养基预热至37℃。

3. 加入1 ml的细菌培养基到试管中,并用移液管轻轻混合。

4. 将巨噬细胞和细菌培养基的混合液孵育于37℃的恒温槽中。

5. 孵育4小时后,取出液体样品。

6. 在细胞计数板上将液体样品加入计数孔中。

7. 使用显微镜观察巨噬细胞下的菌液数量,并进行计数。

五、实验结果:经过4小时的孵育,观察样品下的菌液量。

结果显示,巨噬细胞吞噬了大量的细菌,并且菌液数量显著减少。

六、实验分析:通过观察和计数,可以得出结论:体外培养的巨噬细胞具有较强的吞噬作用,能够吞噬大量的细菌。

这表明巨噬细胞在体内起到清除病原微生物的重要作用。

七、实验结论:巨噬细胞的体外吞噬作用能够有效地消灭细菌和微生物。

这一现象反映了巨噬细胞在免疫系统中的重要作用。

体内的巨噬细胞可以作为免疫细胞的一种重要组成部分,参与各种免疫反应和免疫调节过程。

八、实验改进:为了进一步研究巨噬细胞的体外吞噬作用,可以在实验中引入其他目标微生物,比如病毒或真菌。

通过比较不同微生物的吞噬情况,可以更全面地了解巨噬细胞吞噬作用的特点和应用前景。

九、实验注意事项:1. 实验过程中要确保操作规范,避免微生物的污染和误差的发生;2. 实验前应充分了解巨噬细胞的培养方法和操作要点;3. 为了准确计数,应选择具有一定代表性的计数孔。

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实验一巨噬细胞吞噬功能实验
1、【实验原理】
(1)巨噬细胞作为单核吞噬细胞系统的主要细胞,具有活跃的吞噬功能。

能清除体内抗原物质及变性的细胞,在特异性及非特异性免疫中均起重要作用。

MΦ受抗原刺激后活化,可使其吞噬功能明显增强。

(2)此实验采用体内法,即:在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠腹腔注射鸡红细胞30min后处死小鼠,取出腹腔液,以冷美蓝染色,油镜下计数吞噬鸡红细胞的百分数,及观察巨噬细胞中内因被杀死而染为蓝色的鸡红细胞的形态、数目,以判断巨噬细胞中的杀伤能力,由此间接地测定机体的非特异免疫水平。

2、【实验步骤】
(1)试验前3d,小白鼠腹腔注射6%无菌淀粉液1ml,诱导巨噬细胞渗出至腹腔中。

(2)实验时,每只小鼠腹腔注射鸡红细胞液1ml,轻揉腹部,使红细胞在腹腔中分布均匀,利于吞噬
(3)30min后,将小鼠拉颈处死,固定,打开腹腔暴露肠管,用吸管取出腹腔液,均匀涂布于载玻片上,然后再滴一小滴0.03%冷美蓝溶液,盖上盖玻片。

(4)低倍镜下找到观察区域后,换高倍镜下进行观察,计数
3、【实验结果】
4、【结果分析】
(1)如图所示,在小鼠体内诱导腹腔巨噬细胞产生后,再给小鼠注射鸡红细胞后镜检腹腔液,可观察到巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象,并且可以看到部分鸡红细胞聚集到吞噬细胞附近。

(2)镜下可见吞噬细胞核呈蓝色,被吞噬的鸡红细胞呈椭圆形,其胞浆呈红色而核被染成蓝色。

(3)由于未将腹腔液和冷美蓝溶液充分混合均匀,使得视野中出现大片深染区域。

总体实验结果较好,视野中央可见清晰的吞噬了鸡红细胞的巨噬细胞。

5、【注意事项】
(1)涂片的薄厚要适当,否则影响计数。

(2)小鼠腹腔注射时不要刺伤内脏。

(3)如小鼠腹腔液过少,可注入适量生理盐水。

(4)剪开小鼠腹腔时应避免出血,否则将影响试验结果。

(5)被吞噬的鸡红细胞时间过长可被消化,时间过短未被吞噬,必须掌握好吞噬作用时间。

实验二双向琼脂扩散实验
1、【实验原理】
(1)可溶性抗原与相应抗体特异性结合,两者比例适当并有电解质存在及一定的温度条件下,经一定的时间,可形成肉眼可见的沉淀线/环的现象,称为沉淀反应。

(2)琼脂扩散是指为可溶性抗原与抗体在琼脂凝胶中所呈现的一种沉淀反应。

当对应的抗原、抗体在半固体琼脂终相遇,且二者比例适当时,便出现可见的白色沉淀线,这组沉淀线是一组抗原、抗体的特异性复合物。

当琼脂中有多组不同的抗原、抗体存在时,便各自依其扩散速度的差异,再适当的部位形成独立的沉淀线。

因此,琼脂扩散不仅用于疾病的诊断,更广泛地用于抗原成分的分析。

(3)双向琼脂扩散试验是定性实验。

将可溶性抗原与相应抗体分别加人琼脂板上的孔内,两者均可扩散,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。

如果不是相应的抗原与抗体,就不出现沉淀线。

本试验常用于分析抗原抗体的纯度及相互关系。

2、【实验步骤】
(1)制板:将熔化的1%琼脂加在玻片上,3ml/板。

(2)打孔:待琼脂凝固后,在板上打孔。

(3)加样:在空中加入相应抗原、抗体。

(4)结果观察将琼脂板放入湿盒内置 37c 温箱中 24 小时后取出观察结果。

3、【实验结果】
4、【结果分析】
(1)如图所示,在中央孔与添加抗原1的孔之间出现沉淀线,有抗原抗体反应,为阳性反应,说明抗原1与抗体相对应。

中央孔与添加抗原2的孔之间没有沉淀线,说明抗原2与抗体之间不相对应。

(2)抗体与抗原发生扩散时,随扩散距离的增大浓度降低,在抗原抗体比例适宜处形成可见的沉淀线。

当有沉淀线出现时,说明有抗原抗体反应。

5、【注意事项】
(1)加样时不要将琼脂划破,以免影响沉淀线的形成。

(2)反应时间要适宜,时间过长,沉淀线可解离而导致假阴性、不出现或不清楚。

(3)加样时不同浓度抗体和抗原不要混淆,影响试验结果。

(4)试验前应做预试验,确定抗体的稀释度。

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