多糖提取方法
多糖的提取方法
多糖的提取方法植物和动物体内含有丰富的多糖,在医药、食品、化妆品等领域有着重要的应用价值。
为了充分利用这些多糖资源,科学家们一直在探索各种多糖的提取方法。
本文将介绍几种常用的多糖提取方法,包括热水提取法、酶解法、酸碱法、超声波法和微波法。
一、热水提取法热水提取法是一种简单且常用的多糖提取方法。
首先,将植物或动物材料粉碎成粉末状,然后用适量的热水浸泡一段时间。
随后,将浸泡液过滤,得到的滤液中含有多糖。
最后,通过浓缩、沉淀和干燥等步骤,得到多糖提取物。
二、酶解法酶解法是利用特定的酶对植物或动物材料中的多糖进行水解的方法。
首先,将材料粉碎成粉末状,然后用适量的酶液浸泡一段时间,酶液中的酶能够降解多糖。
随后,将酶解液经过滤、浓缩和沉淀等步骤,得到多糖提取物。
三、酸碱法酸碱法是利用酸或碱对植物或动物材料中的多糖进行提取的方法。
首先,将材料粉碎成粉末状,然后用适量的酸或碱溶液浸泡一段时间。
酸或碱的作用能够将多糖与其他成分分离。
随后,通过中和、过滤、浓缩和沉淀等步骤,得到多糖提取物。
四、超声波法超声波法是利用超声波的机械作用对植物或动物材料进行提取的方法。
首先,将材料粉碎成粉末状,然后用适量的溶剂浸泡一段时间。
随后,将材料置于超声波设备中,超声波的振动能够促进多糖的释放。
最后,通过过滤、浓缩和干燥等步骤,得到多糖提取物。
五、微波法微波法是利用微波辐射对植物或动物材料进行提取的方法。
首先,将材料粉碎成粉末状,然后用适量的溶剂浸泡一段时间。
随后,将材料置于微波设备中,微波辐射能够加速多糖的释放。
最后,通过过滤、浓缩和干燥等步骤,得到多糖提取物。
在多糖的提取过程中,需要注意以下几点:首先,选择合适的提取方法,根据不同的多糖类型和材料特性进行选择;其次,控制提取条件,如温度、时间、酶的浓度等,以保证提取效果;最后,采用适当的分离和纯化方法,以得到纯度较高的多糖提取物。
多糖的提取方法多种多样,每种方法都有其适用的场景。
多糖的提取分离方法
1.多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位,决定在提取之前是否做预处理。
动物多糖和微生物多糖多有脂质包围,一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂,释放多糖。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类,在提取前,应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理,目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
1.1溶剂法1.1.1水提醇沉法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。
多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。
用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70 %左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置 5 h,多糖的质量分数和得率均较高。
影响多糖提取率的因素有:水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。
1.1.2酸提法为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解,可用乙酸或盐酸使提取液成酸性,再加乙醇使多糖沉淀析出,也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。
由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高,但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂,且酸会对容器造成腐蚀,除弱酸外,一般不宜采用。
因此酸提法也存在一定的不足之处。
1.1.3碱提法多糖在碱性溶液中稳定,碱有利于酸性多糖的浸出,可提高多糖的收率,缩短提取时间,但提取液中含有其它杂质,使粘度过大,过滤困难,且浸提液有较浓的碱味,溶液颜色呈黄色,这样会影响成品的风味和色泽。
食品中多糖的提取与应用
食品中多糖的提取与应用食品是人类生活中不可或缺的一部分,而其中的多糖则成为了近年来备受关注的研究领域。
多糖是一种复杂的碳水化合物,广泛存在于植物和动物的组织中。
它们由若干个单糖组成,具有重要的营养和生物活性,因此在食品科学中应用广泛。
本文将探讨食品中多糖的提取方法和其在食品中的应用。
一、多糖的提取方法多糖的提取方法主要包括物理法、化学法和生物法。
物理法常用的有水煮提取法、超声波辅助法和微波辅助法。
水煮提取法是最常见的方法,通过将原料用水煮沸,使多糖溶于水中,再通过离心等分离手段得到多糖。
超声波和微波辅助法则是利用超声波或微波的物理效应,提高多糖的溶出率和提取效率。
化学法包括酸碱法和酶解法。
酸碱法常用的是酸提法和碱提法。
酸提法是用酸性介质将多糖从原料中释放出来,再通过中和或沉淀,得到多糖。
碱提法则是利用碱性介质将多糖从原料中提取出来。
酶解法则是使用特定的酶将多糖分解成较小的分子,然后通过过滤或离心得到目标多糖。
生物法是利用生物活性物质提取多糖,常用的有微生物发酵和超滤法。
微生物发酵是利用具有多糖分解能力的微生物对原料进行发酵,然后通过离心等手段得到多糖。
超滤法则是将发酵液经过超滤膜的过滤,使多糖留在膜上,得到纯净的多糖。
二、多糖在食品中的应用多糖在食品中的应用非常广泛,不仅可以作为增稠剂和稳定剂,还可以作为保湿剂、增甜剂和抗氧化剂等。
首先,多糖作为增稠剂和稳定剂,可以改善食品的质感,使其呈现出良好的流动性和黏稠度。
比如,将多糖添加到果冻中,可以增加果冻的黏稠度,使得果冻更加具有弹性和口感。
其次,多糖还可以作为保湿剂,可以保持食品的水分含量,延长食品的保鲜期。
例如,将多糖添加到面包中,可以提高面包的柔软度和保湿性,让面包更加美味。
另外,多糖还可以作为增甜剂来替代传统的糖类。
多糖相比于单糖,具有较低的热量和更稳定的甜味,因此成为了替代糖类的理想选择。
例如,在制作低糖饼干时,可以使用多糖来替代一部分糖类,降低热量含量,同时保持饼干的甜味。
植物多糖的提取和应用
植物多糖的提取和应用植物多糖是一种重要的生物高分子化合物,广泛存在于植物、动物、菌类等生物体内。
其中以植物多糖的应用最为广泛,因为植物多糖具有广泛的生物学活性和药理学作用,如刺激免疫、抗氧化、抗炎、抗肿瘤等。
本文将从植物多糖的提取方式和应用两个方面进行探讨。
一、植物多糖的提取方式1、物理法。
物理法是指利用物理方法从植物中提取多糖,如水浸法、微波法、超声波法等。
其中水浸法是最为常见、简便的多糖提取方法。
将植物切成细片或粉末状,加入适量的水或浓盐水中,采用高温加压或搅拌加热等方式进行提取。
2、化学法。
化学法是指利用化学试剂将植物中的多糖分离和提取,如酸法、碱法、醇沉法等。
其中酸法是最为常见的提取方法,将植物中的多糖酸解,然后采用醇沉法或洗涤法等方式分离和提取多糖。
3、酶解法。
酶解法是指利用酶解植物中的多糖,如纤维素酶、木聚糖酶等。
这种方法具有不使用化学试剂,提取得到的多糖活性较高的优点。
二、植物多糖的应用1、食品行业。
植物多糖在食品行业中被广泛应用,如鱼丸、肉制品、饼干、营养品等,具有增加口感、调节血糖、调节肠道菌群等作用。
2、药物行业。
植物多糖含有多种生物活性成分,如植物的抗肿瘤活性成分、免疫调节成分等。
因此,植物多糖被研究者广泛应用于药物行业,开发出了多种具有潜在药用价值的多糖制剂,如山楂多糖、金银花多糖等。
3、医用敷料。
植物多糖具有良好的保湿、抗菌、减少水肿等作用,因此被研究者应用于医用敷料中,用于烧烫伤、创面等治疗。
总之,植物多糖的应用前景十分广阔,其作用在医药、保健、食品等领域得到了广泛的关注和研究。
未来的研究方向主要是如何提高其提取效率,进一步开发和研究植物多糖的应用性能,为人们的生活带来更多的好处。
多糖提取方案(7月)
多糖提取方案方案一:热水侵提法材料5g→以1:10v加蒸馏水90℃回流4h→8000r/min,10min离心→沉淀重复三次→合并上清浓缩(抽滤,蒸发)→sevag去蛋白(正丁醇:氯仿=4:1,sevag:滤液=1:5,分液漏斗中反复进行,直到分界面处无白色混悬)→8000r/min离心10min→上清浓缩(抽滤,蒸发)→定容50ml→硫酸苯酚法测多糖含量方案二:水提醇沉法材料5g→加10ML 85%乙醇回流2h(一次)→以1:10v加蒸馏水90℃回流4h→8000r/min,10min离心→沉淀(重复3次)→合并上清浓缩(抽滤,蒸发)→以1:5v加95%乙醇,4℃,静置24h→8000r/min离心→沉淀分别用无水乙醇,丙酮,乙醚抽洗(重复3次)→sevag去蛋白(正丁醇:氯仿=4:1,sevag:滤液=1:5,分液漏斗中反复进行,直到分界面处无白色混悬)→8000r/min离心10min→上清浓缩(抽滤,蒸发)→定容50ml→硫酸苯酚法测多糖含量方案三:酶+热水侵提材料5g→以1:10v加蒸馏水,调节pH=6.0→加入1%复合酶,50℃水浴1h→90℃回流4h →8000r/min,10min离心→沉淀(重复3次)→合并上清浓缩(抽滤,蒸发)→sevag去蛋白(正丁醇:氯仿=4:1,sevag:滤液=1:5,分液漏斗中反复进行,直到分界面处无白色混悬)→8000r/min离心10min→上清浓缩(抽滤,蒸发)→定容50ml→硫酸苯酚法测多糖含量方案四:微波辅助法材料5g→以1:10v加蒸馏水→微波低火,3min→90℃回流4h→8000r/min,10min离心→沉淀(重复3次)→合并上清浓缩(抽滤,蒸发)→sevag去蛋白(正丁醇:氯仿=4:1,sevag:滤液=1:5,分液漏斗中反复进行,直到分界面处无白色混悬)→8000r/min离心10min→上清浓缩(抽滤,蒸发)→定容50ml→硫酸苯酚法测多糖含量方案五:超声波辅助法材料5g→以1:10v加蒸馏水→超声波600w,20min→90℃回流4h→8000r/min,10min离心→沉淀(重复3次)→合并上清浓缩(抽滤,蒸发)→sevag去蛋白(正丁醇:氯仿=4:1,sevag:滤液=1:5,分液漏斗中反复进行,直到分界面处无白色混悬)→8000r/min离心10min→上清浓缩(抽滤,蒸发)→定容50ml→硫酸苯酚法测多糖含量方案六:高浓度酸预处理法20mg材料→加2ml,90%的甲酸溶液,混匀,→100℃沸水浴2h→旋转蒸发3次以除去甲酸→加6mol./L盐酸10ml,真空封管,置于80℃,水浴2.5h→调pH至中性6.5-7.0→用磷酸缓冲液(pH=7.0)定容50ml方案七:碱提取法材料5g→以1:10v加0.5mol/lNaOH水溶液→4℃中提取,离心取上清→用36%乙酸中和地白的胶状沉淀→用水洗涤得到多糖→浓缩(抽滤,蒸发)→定容50ml→硫酸苯酚法测多糖含量方案八:盐提+水提+碱提+酸提材料5g→乙酸乙酯,丙酮索氏提取4h,去脂→1:10v,0.9%NaCl水溶液过夜→均浆,离心,重复3次,该上清为PC1→残渣于高压锅中120℃热水提30min,重复3次→上清过DEAE-Sephadex(A-50),柱,分别用磷酸缓冲液和1mol/Lnacl水溶液淋洗多糖PC2和酸性多糖PC2-A→0.5mol/lNaOH水溶液于4℃从以上残渣中提取上清,用36%乙酸中和地白的胶状沉淀→用水洗涤得到多糖PC3→残渣用88%甲酸提取后用水沉淀得到多糖PC4→分别测多糖的含量。
多糖的提纯化技术
多糖的提纯化技术
溶剂提取法
(1) 水提法:以水为溶剂,可采用热水浸提或冷水浸提(植物多糖多采用热水浸提,可直接或离心去除杂质),由于多糖不溶于乙醇,可通过沉淀将多糖提纯出来。
水提法的确缺点在于温度高、耗时长、提取率低。
(2) 酸提法:有些含酸性基团的多糖在酸性条件下不易溶解,可用盐酸或乙酸处理后,再用乙醇或不溶性络合物将多糖沉淀出来。
酸提法容易破坏多糖的空间结构,一般较少使用。
(3) 碱提法:一些含有糖醛酸的多糖和酸性多糖在碱性条件下都比较稳定,可提高多糖的提取率,一般用硼氢化钠或硼氢化钾作为溶剂。
碱提法的不足之处在于某些多糖在碱性较强时会降解,而且容易影响成品的色泽和风味。
多糖提取分离的原理和方法
多糖提取分离的原理和方法
多糖提取分离是指从植物、海洋生物、微生物等来源中提取和分离多糖类化合物的过程。
其原理主要基于多糖的化学性质和溶解性特点。
多糖提取分离的方法主要有以下几种:
1. 溶剂提取法:利用有机溶剂(如水、醇类、醚类等)将多糖提取出来。
这种方法适用于多糖相对溶解性较好的样品。
2. 酶解法:利用特定酶解剂酶解样品中与多糖相结合的其他物质,使多糖分离出来。
常用的酶解剂有蛋白酶、纤维素酶等。
3. 离子交换层析法:利用树脂的阳离子或阴离子交换功能将多糖从样品中分离出来。
这种方法适用于多糖具有不同电荷性质的样品。
4. 等温沉淀法:通过调节多糖样品中的溶液温度和离子浓度,使多糖形成胶体,并在一定条件下沉淀。
常用的方法有醇法、果胶酸盐法等。
5. 凝胶过滤法:利用凝胶材料的孔隙大小将多糖与其他物质分离。
常用的凝胶材料有琼脂、琼脂糖等。
补充说明:以上提到的方法只是多糖提取分离的常用方法之一,实际操作中还可
以根据样品特点选择合适的提取和分离方法。
1.多糖的提取方法
1.多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位,决定在提取之前是否做预处理。
动物多糖和微生物多糖多有脂质包围,一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂,,多糖提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。
1.1.2酸提法为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH值下难以溶解,可用乙酸或盐酸使提取液成酸性,再加乙醇使多糖沉淀析体是指物质处于临界温度和临界压力以上时的状态,这种流体兼有液体和气体的特点,密度大,粘稠度小,有极高的溶解,渗透到提取材料的基质中,发挥非常有效的萃取功能。
而且这种溶解能力随着压力的升高而增大,提取结束后,再通过减压将其释放出来,具有保持有效成分的活性和无溶剂残留等优点。
由于CO2的超临界条件(TC=304.6℃,Tp=7.38MPa)容易达到,常用于超临界萃取的溶剂,在压力为8~40MPa时的超临界CO2足以溶解任何非极性、中极性化合物,在加入改性剂后则可溶解极性化物。
壁内的活性多糖,多糖释放的多少和复合酶的加入量、酶解温度、酶解时间、酶解pH值有直接的关系。
酶解法提取的实质是通过酶解反应强化传质过程。
此法具有条件温和、杂质易除和得率高等优点。
1.3物理强化法1.3.1微波辅助提取法微波萃取是高频电磁波穿透萃取媒质,到达被萃取物料的内部,能迅速转化为热能使细胞内部温度快速上升,细胞内部压力超过细胞壁承受力,细胞破裂,细胞内有效成分流出,在较低的温度下溶解于萃取媒质,通过进一步过滤和分离,获得萃取物料。
多糖的提取分离方法
1.多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位,决定在提取之前是否做预处理。
动物多糖和微生物多糖多有脂质包围,一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂,释放多糖。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类,在提取前,应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理,目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
1.1溶剂法1.1.1水提醇沉法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。
多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。
用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70 %左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置5 h,多糖的质量分数和得率均较高。
影响多糖提取率的因素有:水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。
1.1.2酸提法为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解,可用乙酸或盐酸使提取液成酸性,再加乙醇使多糖沉淀析出,也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。
由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高,但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂,且酸会对容器造成腐蚀,除弱酸外,一般不宜采用。
因此酸提法也存在一定的不足之处。
1.1.3碱提法多糖在碱性溶液中稳定,碱有利于酸性多糖的浸出,可提高多糖的收率,缩短提取时间,但提取液中含有其它杂质,使粘度过大,过滤困难,且浸提液有较浓的碱味,溶液颜色呈黄色,这样会影响成品的风味和色泽。
多糖的提取分离方法
1.多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位,决定在提取之前是否做预处理。
动物多糖和微生物多糖多有脂质包围,一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂,释放多糖。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类,在提取前,应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理,目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
1.1 溶剂法1.1.1 水提醇沉法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法。
多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。
用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70 %左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置5h,多糖的质量分数和得率均较高。
影响多糖提取率的因素有:水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。
1.1.2 酸提法为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解,可用乙酸或盐酸使提取液成酸性,再加乙醇使多糖沉淀析出,也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。
由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高,但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂,且酸会对容器造成腐蚀,除弱酸外,一般不宜采用。
因此酸提法也存在一定的不足之处。
1.1.3 碱提法多糖在碱性溶液中稳定,碱有利于酸性多糖的浸出,可提高多糖的收率,缩短提取时间,但提取液中含有其它杂质,使粘度过大,过滤困难,且浸提液有较浓的碱味,溶液颜色呈黄色,这样会影响成品的风味和色泽。
多糖的提取分离方法
1、多糖的提取方法生物活性多糖主要有真菌多糖、植物多糖、动物多糖3 大类。
多糖的提取首先要根据多糖的存在形式及提取部位,决定在提取之前就是否做预处理。
动物多糖与微生物多糖多有脂质包围,一般需要先加入丙酮、乙醚、乙醇或乙醇乙醚的混合液进行回流脱脂,释放多糖。
植物多糖提取时需注意一些含脂较高的根、茎、叶、花、果及种子类,在提取前,应先用低极性的有机溶剂对原料进行脱脂预处理,目前多糖的提取方法主要有溶剂提取法、生物提取法、强化提取法等。
1.1溶剂法1.1.1水提醇沉法水提醇沉法就是提取多糖最常用的一种方法。
多糖就是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂。
用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70 %左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置 5 h,多糖的质量分数与得率均较高。
影响多糖提取率的因素有:水的用量、提取温度、浸提固液比、提取时间以及提取次数等。
水提醇沉法提取多糖不需特殊设备,生产工艺成本低,安全,适合工业化大生产,就是一种可取的提取方法。
但由于水的极性大,容易把蛋白质、苷类等水溶性的成分浸提出来,从而使提取液存放时腐败变质,为后续的分离带来困难,且该法提取比较耗时,提取率也不高。
1.1.2酸提法为了提高多糖的提取率,在水提醇沉法的基础上发展了酸提取法。
如某些含葡萄糖醛酸等酸性基团的多糖在较低pH 值下难以溶解,可用乙酸或盐酸使提取液成酸性,再加乙醇使多糖沉淀析出,也可加入铜盐等生成不溶性络合物或盐类沉淀而析出。
由于H+的存在抑制了酸性杂质的溶出,稀酸提取法提取得到的多糖产品纯度相对较高,但在酸性条件下可能引起多糖中糖苷键的断裂,且酸会对容器造成腐蚀,除弱酸外,一般不宜采用。
因此酸提法也存在一定的不足之处。
1.1.3碱提法多糖在碱性溶液中稳定, 碱有利于酸性多糖的浸出,可提高多糖的收率,缩短提取时间,但提取液中含有其它杂质,使粘度过大,过滤困难,且浸提液有较浓的碱味,溶液颜色呈黄色,这样会影响成品的风味与色泽。
中药提取物除多糖的方法
中药提取物除多糖的方法
中药提取物中多糖的去除方法主要有以下几种:
1.水提醇沉法:根据多糖大分子化合物的特性,选择水与醇等极性强的溶剂,期间可用热
水与冷水两种浸提方法,再通过加入乙醇使多糖从提取液中沉淀出来。
2.酸提法:为提升多糖提取率,可在水提醇沉法的基础上,控制酸度,以便在酸性较强的
环境中避免多糖中糖苷键断裂。
3.碱提法:部分多糖在碱液中具备更优异的提取率,为避免在酸性溶液中造成多糖损失,
通常碱提法会防止多糖降解,并加入氮气或硼氢化钠等药品,以此控制碱性浓度,避免碱性较强发生多糖水解状况。
4.酶法:生物方法,利用酶将多糖从其他成分中分离出来。
5.物理法:如超滤法、凝胶色谱法等,根据多糖和其它成分分子大小的差异进行分离。
6.化学法:利用多糖在不同化学环境下溶解度的差异进行分离。
多糖的分离纯化及分析
多糖的分离纯化及分析一、多糖的提取方法(一)溶剂提取法1、水提法水提醇沉法是提取多糖最常用的一种方法.多糖是极性大分子化合物,提取时应选择水、醇等极性强的溶剂.用水作溶剂来提取多糖时,可以用热水浸煮提取,也可以用冷水浸提渗滤,然后将提取液浓缩后,在浓缩液中加乙醇,使其最终体积分数达到70%左右,利用多糖不溶于乙醇的性质,使多糖从提取液中沉淀出来,室温静置5h,多糖的质量分数和得率均较高.2、酸碱提法有些多糖适合用稀酸提取,并且能得到更高的提取率。
有些多糖在碱液中有更高的提取率,尤其是提取含有糖醛酸的多糖及酸性多糖。
与酸提类似,碱提中碱的浓度也应得到有效控制,因为有些多糖在碱性较强时会水解。
3、超临界流体萃取法超临界流体萃取技术是近年来发展起来的一种新的提取分离技术.(二)生物酶提取法酶技术是近年来广泛应用到有效成份提取中的一项生物技术,在多糖的提取过程中,使用酶可降低提取条件,在比较温和的条件中分解植物组织,加速多糖的释放或提取。
此外,使用酶还可分解提取液中淀粉、果胶、蛋白质等的产物,常用的酶有蛋白酶,纤维素酶,果胶酶等。
(三)超声提取法超声波是一种高频率的机械波,其主要原理是利用超声波产生的“空化作用”对细胞膜的破坏,有利用植物有效成分的释放,而且超声波能形成强大的冲击波或高速射流,有效地减小、消除与水相之间的阻滞层,加大了传质效率,有助于溶质的扩散。
超声波提取与传统的提取方法相比,有提取效率高、时间短、耗能低等优点。
(四)微波提取微波是频率介于300MHz和300GHz之间的非电离电磁波,微波提取的原理是微射线辐射于溶剂并透过细胞壁到达细胞内部,由于溶剂及细胞液吸收微波能细胞内部温度升高,压力增大,当压力超过细胞壁的承受能力时,细胞壁破裂,位于细胞内部的有效成份从细胞中释放出来,传递转移到溶剂周围被溶剂溶解。
二、多糖的分离纯化(一)多糖的分离采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物,分级的方法可达到纯化的目的.可按溶解性不同进行分级、按分子大小和形状分级(如分级沉淀、超滤、分子筛、层析等),也可按分子所带基团的性质分级.1、按溶解性不同分离(1)分步沉淀法分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质,从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀.(2)盐析法盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。
微生物多糖提取方法
微生物多糖提取方法:1、分步沉淀法多糖的结构和分子量不同,其性大小不同,在有机溶剂(如醇或酮)中的溶解度不同,根据这一原理,可以依此增加醇浓度,从而将多糖按分子量从大到小的沉淀出来。
但是分沉淀法一般得不到均一性多糖。
仍需要借助柱层析法等进一步纯化,方可得到均一性的多糖。
2、柱层析法要获得均一性的多糖,一般是先经过阴离子交换柱进行粗步纯化,然后再用凝胶柱进一步纯化。
有些多糖也采用大孔树脂柱进行纯化。
下面对这三种柱层析法进行详细介绍。
3、阴离子交换法一般使用阴离子交换柱对真菌、藻类和高等植物的多糖进行初步分离。
阴离子交换色谱常用的介质有DEAE-纤维素、DEAE-琼脂糖凝胶、DEAE-葡萄糖凝胶。
常用的有DEAE-52和DEAE-Sepharose。
例如用DEAE-52柱对大杯香菇等菌类、玉米等植物、桑黄等藻类粗多糖进行分离纯化。
使用DEAE-52填料进行多糖的初步分离纯化,该柱子一般直径偏大,其中以2.6cm多,操作过程中流动相的流速也较快,流速一般在0.7-2ml/min之间,以1ml/min多,至于柱子的长度,选择范围较广,从25-100cm不等。
DEAE-Sepharose柱也常被用在对菌类、植物和藻类粗多糖的初步分离纯化中,在选择层析柱的直径、流速和长度的方面与DEAE-52相似。
DEAE-52或DEAE-Sepharose柱的流动相都是纯水和不同浓度的NaCl溶液。
4、凝胶色谱法凝胶色谱法根据被分离组分尺寸大小与凝胶的孔径关系实现分离,类似于分子筛的作用。
常用的凝胶有葡聚糖凝胶(SephadexG)、SephadexLH-20、聚丙烯酸凝胶ToyopearlHW等。
多糖的进一步分离往往会选择用各种凝胶进行分离纯化。
选择使用哪一种凝胶对多糖进行纯化的标准是多糖的分子量,不同种类和型号的凝胶能够分离多糖类型和分子量范围不同。
凝胶柱的柱子规格常具有长而细的特点,直径以1.6cm偏多。
无论什么类型的凝胶柱,流动相多为蒸馏水或者一定浓度的NaCl溶液。
食品中多糖的提取与分离技术
食品中多糖的提取与分离技术多糖是一类重要的生物大分子,广泛存在于食品中。
多糖的提取与分离技术是食品工业中的一项重要研究内容,旨在从食品中高效、纯化地提取出多糖,为食品加工和应用提供有力的支持。
一、多糖的提取方法多糖的提取方法有很多种,其中较为常见的有水提法、酸碱法和酶解法。
水提法是最常见的提取方法之一,因为多糖大多具有良好的溶解性。
水作为良好的溶剂,可以帮助提取多糖。
水提取法操作简单、成本低廉,适合大规模工业生产。
不过,水提取法提取的多糖往往含有其他杂质,纯度较低。
酸碱法是利用酸或碱的作用将多糖与其他成分进行分离的方法。
在适宜的酸碱条件下,多糖与其他成分的化学性质差异使得它们易于分离。
酸碱法可以提取较高纯度的多糖,但操作相对复杂,需要选择适当的酸、碱和条件。
酶解法是利用酶的作用将多糖与其他成分分离的方法。
多糖本身具有酶解性,通过选用适当的酶,可以将多糖与其他成分进行分离。
酶解法提取的多糖纯度较高,但酶的选择和酶解条件需要进行一定的优化。
除了以上三种常见的提取方法外,还有一些新兴的提取技术,如微波辅助提取、超声波辅助提取和离子液体萃取等。
这些新技术在提取多糖方面具有较高的效率和纯度,但仍需要进一步研究和优化。
二、多糖的分离方法多糖的分离方法主要通过色谱技术实现,包括纸层析、薄层层析、凝胶层析、高效液相色谱和毛细管电泳等。
纸层析和薄层层析是最常用的分离方法之一。
这两种方法操作简单、成本低廉,适用于小规模样品的分离。
但纸层析和薄层层析的分离效果较差,无法实现较高纯度的分离。
凝胶层析是利用凝胶过滤效应将多糖与其他成分分离的方法。
凝胶层析具有较好的分离效果,可以实现较高纯度的多糖分离。
但凝胶层析的操作相对复杂,需要选择适当的凝胶材料和操作条件。
高效液相色谱是目前应用较广的分离方法之一。
高效液相色谱具有分离效果好、纯度高的特点,适用于大规模样品的快速分离。
但高效液相色谱的设备和耗材成本较高,需要专业的操作技术。
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Shibata最原始GE-3提取方法(略有改进)一般来说这是用来提Umbilicaria中的带乙酰基的多糖的。
1.用研钵粉碎地衣体,加入20倍重量的蒸馏水,水浴锅加热浸提3小时(80℃左右)。
2.过滤浸提液,取上清液。
将过滤后的地衣体继续用上述方法浸提两次,每次3小时。
3.合并三次浸提上清液,抽滤。
4.将浸提液旋转蒸发浓缩至一定体积(约100-200ml)。
5.加入约3倍体积的无水乙醇,沉淀多糖。
放入4℃中冷藏过夜。
收集沉淀。
6.真空冷冻干燥。
(可省略)
7.将收集的沉淀溶于热水(80℃),过滤掉不溶于热水的部分。
8.将滤液-20℃冰冻过夜,第二天融化,离心(8000r/min左右)收集不溶解的部分。
9.用丙酮清洗一次,乙醚清洗三次。
10.真空冷冻干燥,即得纤维性粉末GE-3。
需要的仪器:水浴锅,旋转蒸发仪,大型离心机,真空泵,真空冷冻干燥机
乙醇回流提多糖的方法
1.用研钵粉碎地衣体,加入10倍重量的体积的95%的乙醇回流2-3h左右。
2.冷却室温,收集过滤后的地衣体,将残渣自然阴干。
3.重复1-2步骤一次。
4.将乙醇处理后的残渣,加20倍体积重量的蒸馏水煮3h左右。
过滤收集上清液和残渣。
5.重复4步骤2次。
6.合并三次上清液,旋转蒸发浓缩至黏稠。
7.加入3倍体积的无水乙醇沉淀多糖,边加入边搅拌。
4℃冷藏过夜。
8.收集沉淀。
9.用乙醚清洗几次。
10.真空冷冻干燥。
需要的仪器:回流冷凝管,加热套,水浴锅,旋转蒸发仪,大型离心机,真空泵,真空冷冻干燥机。