血细胞计数板的构造和使用方法简介
血细胞计数板相关知识及练习
血细胞计数板一、血细胞计数板的构造血细胞计数板被用以对人体内红、白血细胞进行显微计数之用，也常用于计算一些细菌、真菌、酵母等微生物的数量，是一种常见的生物学工具。
血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。
玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台。
中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用。
这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3。
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格；另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图：血细胞计数板（25格×16格）二、血细胞计数板的使用以计数酵母菌为例1.使用(1)用血细胞计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数。
(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可。
(3)将血细胞计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片。
(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血细胞计数室内。
(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数。
(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞) 。
(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数。
血球计数板的使用
血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.实验六微生物的显微直接计数法一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。
血细胞计数板的构造和使用方法简介(必3)
血细胞计数板的构造和使用方法一、血细胞计数板的构造血细胞计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的。
玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台；中间的平台较宽，其中间又被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网（见图B ——侧视图、图A ——俯视图；1.计数板 2.盖玻片 3.计数室）。
方格网上刻有9个大方格（见图C 、E ），其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物（细胞）计数用。
计数室通常有两种规格：一种是25×16型，即大方格内分为25个中方格（中方格之间用双线分开，见图C 、D ），每一中方格又分为16个小方格；另一种是16×25型，即大方格内分为16个中方格（见图E ），每一中方格又分为25个小方格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点：即每一大方格都是由25×16=16×25=400个小方格组成（见图D ）。
计数室边长为1mm （或2mm ），面积为l mm 2（或4 mm 2），盖上盖玻片后，计数室的深度为0.1mm ，所以计数室的容积为0.1mm 3（或0.4 mm 3）。
（图A ——俯视图：XB-K-25为计数板的型号和规格，表示此计数板分25个中格；0.1mm 为盖上盖玻片后计数室的深度；1/400mm 2表示计数室面积是1mm 2，分400个小格，每小格面积是1/400 mm 2）。
C D E二、血细胞计数板的使用（以计数酵母菌为例）(1)视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释。
样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数，以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。
(2)将血细胞计数板用擦镜纸擦净，在计数室上盖上一块专用的盖玻片。
(3)将稀释后的酵母菌悬液摇匀，用吸管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘摘入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数室，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
(4)静置片刻，待酵母菌全部沉降到计数室低部，将血细胞计数板置载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数室后，再转换高倍镜观察并计数。
细胞计数板的使用方法
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍？），以每小格的菌数可数为度。
2．取洁净的细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面张力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
血细胞计数板计数法
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血球计数板的构造和使用
一、简介
血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为,其体积为.。
计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由
16×25=25×16=400个小方格组成,见图。
二、计数室两种规格
1．16×25型的计数板将计数室放大，可见它含16中格，一般取四角：1、4、13、16四个中方格（100个小方格）计数。
细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数
2．25×16型的计数板中央大方格以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格，供细胞计数用（见图三）。
一般计数
四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数。
细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80×400×10000×稀释倍
数
期的样液稀释后再计数。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法血球计数板是临床实验室中常用的一种设备，用于进行血细胞计数和形态观察。
正确的使用方法对于获得准确的结果至关重要。
下面将详细介绍血球计数板的使用方法。
首先，准备工作。
在进行血球计数之前，需要准备好所需的工具和试剂，包括血球计数板、显微镜、横纹管、生理盐水、乙醇等。
确保这些工具和试剂都是清洁的，并且没有污染。
接下来，进行样本制备。
首先，将一滴血液加入到横纹管中，然后用生理盐水进行稀释，直到样本达到合适的稀释倍数。
将稀释后的样本加入到血球计数板的计数室中，确保填满计数室的每一个小格。
然后，进行计数和观察。
将血球计数板放置在显微镜上，调整倍数和焦距，观察计数室中的血细胞。
使用显微镜的目镜和物镜进行细胞计数和形态观察，记录所观察到的细胞数量和形态特征。
最后，进行数据分析和结果记录。
根据观察到的细胞数量和形态特征，进行数据分析，计算出各种血细胞的数量比例。
将结果记录在实验记录表中，并进行结果的验证和复核。
在使用血球计数板的过程中，需要注意以下几点。
首先，确保血球计数板和显微镜的清洁和干燥，避免污染和误差。
其次，稀释样本时要注意控制稀释倍数，以确保观察到合适数量的细胞。
最后，进行计数和观察时，要认真细致，避免遗漏或重复计数。
血球计数板的使用方法并不复杂，但需要严格按照操作规程进行，以确保结果的准确性和可靠性。
正确的使用方法不仅可以提高实验效率，还可以避免误差和污染，保证实验结果的科学性和可信度。
希望以上介绍对于血球计数板的正确使用有所帮助。
细胞计数板的使用方法
血球计数板-基本构造血球计数板是一块特制的厚型载玻片，载玻片上有四个槽构成三个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一小方格网，每个方格网共分九个大格，中央的一大格作为计数用，称为计数区。
计数区的刻度有两种：一种是计数区分为16个大方格（大方格用三线隔开），而每个大方格又分成25个小方格；另一种是一个计数区分成25个大方格（大方格之间用双线分开），而每个大方格又分成16个小方格。
但是不管计数区是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数区都由400个小方格组成。
计数区边长为1mm，则计数区的面积为1mm2，每个小方格的面积为1/400mm2。
盖上盖玻片后，计数区的高度为0.1mm，所以每个计数区的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为1/4000mm3。
使用细胞计数板计数时，先要测定每个小方格中微生物的数量，再换算成每毫升菌液（或每克样品）中微生物细胞的数量。
细胞计数板-使用方法1．视待测菌悬液浓度，加无菌水适当稀释（斜面一般稀释100倍），以每小格的菌数可数为度。
2．取洁净的细胞计数板一块，在计数区上盖上一块盖玻片。
3．将菌悬液摇匀，用滴管吸取少许，从计数板中间平台两侧的沟槽沿盖玻片的下边缘滴入一小滴（不宜过多），让菌悬液利用液体的表面力充满计数区，勿使气泡产生，并用吸水纸吸去沟槽中流出的多余菌悬液。
也可以将菌悬液直接滴加在计数区上（不要使计数区两边平台沾上菌悬液，以免加盖盖玻片后，造成计数区深度的升高），然后加盖盖玻片（勿使产生气泡）。
4．静置片刻，使细胞沉降到计数板上，不再随液体漂移。
将细胞计数板放置于显微镜的载物台上夹稳，先在低倍镜下找到计数区后，再转换高倍镜观察并计数。
由于生活细胞的折光率和水的折光率相近，观察时应减弱光照的强度。
5．计数时若计数区是由16个大方格组成，按对角线方位，数左上、左下、右上、右下的4个大方格（即100小格）的菌数。
如果是25个大方格组成的计数区，除数上述四个大方格外，还需数中央1个大方格的菌数（即80个小格）。
血球计数板的使用方法
血球计数板的使用方法
血球计数板是一种用于测量血液中各种血球数量的实验室工具。
下面是使用血球计数板的一般步骤：
1. 准备工作：
- 清洁血球计数板：使用酒精或其他适当的清洁剂将血球计
数板彻底清洁，并确保完全干燥。
- 准备血液样本：采集血液样本，并将其置于抽血管中。
2. 充填血液样本：
- 将橡胶管连接至抽血管的一端，并将另一端放入含有适当
稀释液（例如乙醇，盐水等）的试管中。
- 轻轻压抽血管，让血液与稀释液混合，确保样本适当稀释。
3. 填充计数室：
- 将计数室的一角放入混合好的血液样本液中。
- 逐渐放松手指，使液体自然充满整个计数室。
4. 观察计数室：
- 使用显微镜，在10倍或40倍放大倍数下观察计数室的血
球图像。
- 记录计数室内的血球数量。
5. 计算血球数量：
- 将计数室中各种血球的数量进行计算和统计。
- 根据计数室内的面积和深度，计算总血球数量。
- 可以使用计数室所覆盖的血球数量与已知的面积，以得出
总血球数量的近似值。
6. 清洗和储存：
- 使用适当的清洁剂彻底清洗计数室，确保无血液残留。
- 将计数室储存在干燥，洁净的地方，以防止污染和损坏。
请注意，使用血球计数板可能需要一定的实验室训练和技巧，以确保准确性和可靠性。
在进行血液分析时，应遵循实验室的操作指南和安全规定。
血细胞计数板计数法
血细胞计数板计数法
血球计数板是一种特制玻片，厚度比普通载玻片厚。
玻片中有四条下凹的槽，构成三个平台。
中间平台较宽，被一短横槽隔为两半，每半边上面刻有一个方格网。
方格网上刻有9个大方格，其中只有中间的一个大方格为计数室，供微生物计数使用。
计数室通常有两种规格，分别是16×25型和25×16型。
不管是哪一种构造，每一大方格都是由400个小方格组成。
16×25型的计数板将计数室放大，可见它含16中格。
一
般取四角（1、4、13、16）四个中方格（100个小方格）计数。
细胞个数／1mL＝100个小方格细胞总数/ 100×400××稀释倍数。
25×16型的计数板中央大方格以双线等分成25个中方格，每个中方格又分成16个小方格，供细胞计数使用。
一般计数
四个角和中央的五个中方格（80个小方格）的细胞数。
细胞
个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80×400××稀释倍数。
注意事项：从培养瓶中取培养原液计数必须摇匀培养液后再取样，培养后期的样液稀释后再计数。
血细胞计数板的使用
二、血细胞计数板的使用
（3）注意事项
①抽样检测前——摇匀：使酵母菌分布均匀 ②加样：先将盖玻片放在计数室上，用吸管吸取培养液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行渗入。多余培养液用滤 纸吸去。稍等片刻，待酵母菌全部沉降到计数室底部，计数。（全部沉降到底部——使细胞处于同一平面，便于 计数） ③计数：计上不计下，计左不计右 计数初始数量，连续观察记录7天，每个样品计数三次取均值 ④注意单位换算1ml=1000mm3,若稀释，结果乘以稀释倍数
二、血细胞计数板的使用
(2）16×25型的计数板
计数池中央的大格又被双线划分 成16个中格，其中的每个中格又 被单线划分成25个小格，中央大 方格由16×25=400个小方格组成。 计4个中方格数，求每个小方格中 数目（共100个小方格）。 V大方格=0.1mm3 V中方格=0.1/16mm3 V小方格=0.1/400mm3 密度=每个小方格中数目/ V小方格
一、血细胞计数板的构造
二、血细胞计数板的使用
一、血细胞计数板的构造
血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器，由一块 比普通载玻片厚的特制玻片制成的。玻片中有四条下凹的槽，构成三个 平台 平台。
凹槽
计数25×16型的计数板
计数池中央的大格又被双线划分 成25个中格，其中的每个中格又 被单线划分成16个小格，中央大 方格由25×16=400个小方格组成。 计五个中方格数，求每个小方格 中数目（共80个小方格）。 V大方格=0.1mm3 V中方格=0.1/25mm3 V小方格=0.1/400mm3 密度=每个小方格中数目/ V小方格
血球计数板及其使用方法
血球计数板及其使用方法血球计数板是一种用于细胞计数和分类的实验工具，在医学、生物学等领域具有广泛的应用。
它对于研究细胞生长、增殖和凋亡等生命活动具有重要意义，也是疾病诊断和治疗的重要依据。
本文将详细介绍血球计数板的定义、原理和使用方法，并通过应用实例阐述其重要性和应用前景。
血球计数板的定义与原理血球计数板是一种用于细胞计数的实验工具，通常由一块载玻片和一块盖玻片组成。
载玻片上具有方格状沟槽，便于细胞分布和计数。
盖玻片则具有与载玻片相匹配的沟槽，可防止细胞逸出。
使用时，将样本溶液滴加在载玻片上，盖上盖玻片，然后在显微镜下观察和计数。
血球计数板的工作原理基于以下步骤：将样本溶液滴加在载玻片上；盖上盖玻片，确保没有气泡；将血球计数板置于显微镜下观察；根据方格状沟槽对细胞进行计数和分类。
血球计数板的使用方法使用血球计数板进行细胞计数和分类的步骤如下：样本处理：将待测样本溶液进行适当稀释，以便在显微镜下观察到单个细胞。
一般情况下，使用生理盐水或无血清培养液进行稀释。
仪器调试：将血球计数板放在显微镜下，调整显微镜焦距，使视野清晰。
同时，确保盖玻片与载玻片之间的密封性，以避免细胞逸出。
数据读取：在显微镜下逐个方格计数细胞。
根据细胞大小、形状和染色等特点对其进行分类。
通常情况下，血球计数板可分为白细胞计数板和红细胞计数板。
结果分析：根据计数结果，计算细胞浓度。
细胞浓度（个/mL）=方格内细胞数 /方格个数 /稀释倍数。
应用实例血球计数板在医学和生物学领域具有广泛的应用。
例如，在医学领域中，血球计数板可用于血常规检查，以监测白细胞、红细胞和血小板等血液细胞的数量和变化。
在生物学领域中，血球计数板可用于研究细胞生长、增殖和凋亡等生命活动。
例如，通过对比不同药物对肿瘤细胞生长的影响，可以为抗癌药物研发提供有力支持。
血球计数板作为细胞计数和分类的重要工具，在医学、生物学等领域具有广泛的应用。
通过血球计数板的使用，可以快速、准确地获得细胞数量和类型分布，为临床诊断、疾病治疗和科学研究提供有力支持。
血球计数板使用说明
而由于仪器（计数板、盖片、吸管等）不够准确与精密带来的误差称仪器误差；
由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差属于分布误差或计数域误差（filed error）。
仪器误差和分布误差统称为固有误差或系统误差。技术误差和仪器误差可通过规范操作、提高熟练程度和校正仪器而避免或纠正，但细胞分布误差却难于彻底消除。质量控制一般需采用以下措施。
n为测定例数，∑d2为双样之差的平方和。
3．人员质量评价一般用两差比值法或双样试验标准差评价法进行质量评价或工作人员自我考核；变异百分数法通常用于评价细胞计数的结果。
（1）两差比值法用于考核实验结果的精密度。采用同一稀释样间隔2h后进行重复计数，求出两次镜下计数值之差（取绝对值）与两次计数值标准差的比值，即两差比值（r）。
评分：score=100-20.1×r，20.1为失分系数（40/1.99）。评级：90-100为优秀，80-89为良好，70-79为中等，60-69为及格，<60时为不及格。
（2）细胞稀释液应等渗、新鲜、无杂质微粒，同时应该保证细胞没有明显的团块。
（3）严格操作，从取样、重悬、稀释、充池到计数都应规范，尤其应注意的是样品稀释及充池时既要作到充分混匀，又要防止剧烈震荡为破坏红细胞。必须一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖片之间的矩形边缘为宜。
血细胞计数板使用方法
血细胞计数板使用方法
血细胞计数板是一种用于直接计数血液中各种细胞数量的实验仪器。
下面是使用血细胞计数板的一般步骤：
1. 准备工作：
- 将血细胞计数板放在平坦的台面上。
- 清洁计数板上的两个计数网格，使用适量的酒精擦拭。
- 使用打火机或者酒精灯点燃火种，将火种放在计数板下方，以产生对比度，使细胞更容易观察。
2. 取血：
- 使用消毒酒精消毒指尖。
- 使用一次性血液采集器（如针头）在指尖处戳破皮肤，让血滴在计数板上的适应深度的点上。
3. 观察与计数：
- 使用显微镜，放大10倍或40倍，直接观察计数板上的血液样本。
- 计数板上的每个计数网格都有一定的面积，在10倍放大时，每个计数网格相当于0.1 mm²。
- 细胞计数的原则是在一个或多个网格内计数，并计数总共有多少个细胞。
可以按照上下或者左右方向移动计数网格，以覆盖较多的面积。
- 对于每种血细胞（如红细胞、白细胞和血小板），在一个或多个网格内计数，
并计算平均值。
注意事项：
- 操作前请确保计数板上的网格清洁且无损坏。
- 采血操作时需要注意卫生，使用一次性血液采集器，一次使用后丢弃。
- 使用显微镜时，需要调节焦距以确保观察到清晰的图像。
- 在计数之前务必摇匀血样，确保细胞分布均匀。
- 记录计数的结果和每个网格的计数次数，以便计算平均值时使用。
以上是血细胞计数板的一般使用方法，具体的使用步骤可能会根据不同的血细胞计数板和实验要求而有所差异。
建议在操作之前，详细阅读和遵守设备使用说明书和实验方案。
血球计数板的使用
血球计数板生物实验用具血球计数板是显微镜上的外挂物件,可用来测量细胞,细菌等一些微小物体的长度,还有就是测量数量,如单位体积细胞的数量.血球计数板的构造和使用血球计数板是由一块比普通载玻片厚的特制玻片制成的.玻片中有四条下凹的槽,构成三个平台.中间的平台较宽,其中间又被一短横槽隔为两半,每半边上面,刻有一个方格网.方格网上刻有9个大方格,其中只有中间的一个大方格为计数室,供微生物计数用.这一大方格的长和宽各为1mm,深度为0.1mm,其体积为0.1mm3.计数室通常有两种规格.一种是大方格内分为16中格,每一中格又分为25小格;另一种是大方格内分为25中格,每一中格又分为16小格.但是不管计数室是哪一种构造;它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成,见图.血球计数板的使用以计数酵母菌为例(1)用血球计数板计数酵母菌悬液的酵母菌个数.(2)样品稀释的目的是便于酵母菌悬液的计数,以每小方格内含有4-5个酵母细胞为宜,一般稀释10倍即可.(3)将血球计数板用擦镜纸擦净,在中央的计数室上加盖专用的厚玻片.(4)将稀释后的酵母菌悬液,用吸管吸取一滴置于盖玻片的边缘,使菌液缓缓渗入,多余的菌液用吸水纸吸取,捎待片刻,使酵母菌全部沉降到血球计数室内.(5)计数时,如果使用16格×25格规格的计数室,要按对角线位,取左上,右上,左下,右下4个中格(即100个小格)的酵母菌数.如果规格为25格×16格的计数板,除了取其4个对角方位外,还需再数中央的一个中格(即80个小方格)的酵母菌数.(6)当遇到位于大格线上的酵母菌,一般只计数大方格的上方和右方线上的酵母细胞(或只计数下方和左方线上的酵母细胞).(7)对每个样品计数三次,取其平均值,按下列公式计算每1ml菌液中所含的酵母菌个数.3.计算公式(1)16格×25格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=100小格内酵母细胞个数/100×400×104×稀释倍数(2)25格x16格的血球计数板计算公式:酵母细胞数/ml=80小格内酵母细胞个数/80×400×104×稀释倍数4.血球计数板的清洁血球汁数板使用后,用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干,或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物.若不干净,则必须重复清洗直到干净为止.实验六微生物的显微直接计数法一、实验目的了解血球计数板的构造、计数原理和计数方法，掌握显微镜下直接计数的技能。
血细胞计数板使用方法
血细胞计数板使用方法计数公式一、2mm×2mm方格的计数2mm×2mm表示计数室的边长，即一个大方格的边长。
由于计数室厚度为0.1mm，所以计数区的总体积为0.4mm3。
计数室通常也有两种规格：一种是16×25型，即大方格内分为16中格，每一中格又分为25小格；另一种是25×16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是由16×25=25×16=400个小方格组成。
1．16×25型的计数公式为：酵母细胞个数／1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×100×10000×稀释倍数2．25×16型的计数公式为：酵母细胞个数／1mL ＝80个小方格细胞总数/ 80 ×100×10000×稀释倍数二、1mm×1mm方格的计数1．16×25型的计数公式：酵母细胞个数／1mL=100个小方格细胞总数/ 100 ×400×10000×稀释倍数2．25×16型的计数公式：酵母细胞个数／1mL＝80个小方格细胞总数/ 80 ×400×10000×稀释倍数红细胞计数方法准备显微镜红细胞稀释液（Hamyem液枸橼酸钠稀释液）计数板盖玻片微量吸管洗耳球刻度吸管1 准备计数板弄干净计数板和盖玻片2 加稀释液往试管里加2ml红细胞稀释液3 加血加10微升末梢血或抗凝血，吸打2-3次，混匀4 充池用微量吸管或玻璃棒将红细胞悬液充入计数池5 静置室温下3-5min6 计数用正中5个中方格内的红细胞数7 计算红细胞/L=N*25/5*10*10的6次方*200=N/100*10的12次方N 为5个中方格内的红细胞计数原则：数上不数下，数左不数右（以上图为例，压了上方和左边红线的都要数，就算在方框外也要算，只要它压了线，压了下方和右边红线的都不数，就算在方框里也不能计算），计数路线是上图的城墙型。
血球计数板的使用-图文
对每个样品计数三次，再取其平均值。
N1=(n1-1+n1-2)/2 N2=(n2-1+n2-2)/2 N3=(n3-1+n3-2)/2
N=(N1+N2+N3) /3
N1=(n1-1+n1-2)/2
计数一个样品要从两个计数室中计得的平 均数值来计算。
n1-1
n1-2
N1=(n1-1+n1-2)/2
x个 = N/(5×16) ×16×25个
1cm3
(1mm × 1mm × 0.1mm÷1000)cm3
x = N/(5×16) ×16×25个× 1cm3 × 1000÷ (1mm × 1mm × 0.1mm)
=50000 N
②用血球计数板对藻细胞进行计数 的方法与步骤：
ⅰ检查计数室 先用显微镜对计数板的计数室进行镜检是否干净
如果规格为25格×16格的计数板统计计数池中央 大方格内四角及中央中格内(即80个小方格)的单 胞藻数，并记录。
计数时，小心移动载物台，从上到下，由左及右 又由右及左依次计数各小格内的细胞数。一般可 采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则 处理。凡压方格的上线和左线的细胞，统一算此 方格内的细胞，而压方格的下线和右线的细胞， 统一不算此方格内的细胞。
。若有污物，则需用清水清洗，吹干，用擦镜纸 擦拭干净。
盖玻片使用前浸在75%的酒精溶液中，使用时用 眼科镊取出，放在滤纸上吸水，用擦镜纸擦拭干 净。
将盖有盖玻片的计数板放在显微镜的载物台上， 调焦，用低倍镜找到计数区检查是否干净。
从试管中吸出培养液进行计数之前，要将 试管轻轻震荡几下，这样使单胞藻分布均 匀，防止单胞藻凝聚沉淀，提高计数的代 表性和准确性，求得的培养液中的单胞藻 数量误差小。
血细胞计数板计数方法及公式
血细胞计数板计数方法及公式下面将详细介绍血细胞计数板的计数方法及相关的公式。
一、准备工作：1.准备好血液样品：迅速取血液样品，一般采用患者的静脉血，因为静脉血液的成分更为稳定。
将血液样品加入适量的稀释液中，常用的稀释液有伊城液和吐温液等。
2.拿出一块血细胞计数板：血细胞计数板有两个组成部分，一个是红细胞计数板，另一个是白细胞计数板。
一般情况下，我们会使用红细胞计数板进行血细胞计数。
3.准备显微镜和计数板显微镜片：显微镜是用来观察血细胞计数板中细胞数量的工具。
计数板显微镜片上有横向和纵向的方格，每个小方格都有固定的尺寸。
二、计数方法：1.调整显微镜：先将显微镜放在目视位置，然后调整出满足观察血细胞计数板的清晰图像。
通过调整目镜和近物镜的位置，确保目标细胞在显微镜视野的中心区域。
2.选择计数板区域：在血细胞计数板中选择一个区域进行计数，应尽量选择相对均匀的区域。
计数板中的小方格可以根据需要选择计数的数量。
通常，我们选择九个小方格，并计算它们中细胞数量的平均值。
3.计数细胞数量：使用显微镜在所选区域内计数细胞的数量。
红细胞计数时只计数在上、左边线和板心线上的细胞，不计数在下、右边线上的细胞；白细胞计数时只计数在上、右边线和板心线上的细胞，不计数在下、左边线上的细胞。
4.计算细胞数量：根据计数得到的细胞数量和所选计数的小方格数量，可计算出血液样品中细胞的浓度。
三、计算公式：血液中各种细胞的数量可以通过血细胞计数板的计数结果来计算。
以下是常用的计算公式：1.红细胞计数（RBC）：RBC (cells/μl) = (细胞计数/小方格数) × 稀释倍数2.白细胞计数（WBC）：WBC (cells/μl) = (细胞计数/小方格数) × 稀释倍数× 视野因数3.血红蛋白浓度（Hb）：Hb (g/dl) = (所选小方格内红细胞的平均数× 见识之因数) × 稀释倍数× 104. 血小板计数（Plt）：Plt (cells/μl) = (细胞计数/小方格数) × 稀释倍数× 恒定因素4.平均红细胞容积（MCV）：MCV (fl) = Hb (g/dl) / RBC (cells/μl)5.平均红细胞血红蛋白含量（MCH）：MCH (pg) = Hb (g/dl) / RBC (cells/μl)以上公式中，"细胞计数"是通过显微镜计数得到的细胞数量，"小方格数"是选择的计数板中的小方格数量，"稀释倍数"是将血液样品稀释到适宜浓度的倍数，"视野因数"、"常量因数"和"平均红细胞表面积"等是根据实验条件和仪器进行校正的常数。
血球计数板及其使用方法
血球计数板及其使用方法1、血球计数板的构造血球计数板是一种生物学或医学仪器，用以对人体血液中红细胞、白细胞进行显微计数，也常用于一些细菌、真菌、酵母菌等较大细胞或微生物的计数。
血球计数板的形状如图1所示，血球计数板是一块特制的厚载玻片，载玻片上由4个槽构成3个平台。
中间的平台较宽，其中间又被一短横槽分隔成两半，每个半边上面各刻有一方格网，每个方格网共分9个大方格（大方格用三线隔开），中央的一大方格作为计数用，称为计数室，如图2所示。
计数室的规格常有两种:一种叫希利格式（16×25型），是一个计数室分为16个中方格（中方格之间用双线分开），而每个中方格又分成25个小方格;另一种叫汤麦式(25×16型），是一个计数室分成25个中方格，而每个中方格又分成16个小方格。
但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同特点，即计数室都由400个小方格组成。
计数室的边长常为1mm,则计数室的面积为1mm2，盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm，所以每个计数室的容积为0.1mm3,每个小方格的边长为0.05mm,每个小方格的容积为1/4000mm3、16×25型的每个中方格的边长为0.25mm，每个中方格的容积为1/160mm3,25×16型的每个中方格的边长为0.2mm，每个中方格的容积为1/250mm3,如图3所示。
另外，有血球计数板规格为计数室边长为2mm,则计数室的面积为4mm2,计数室的高度为0.1mm,所以每个计数室的容积为0.4mm3,每个小方格的边长为0.1mm，每个小方格的容积为1/1000mm3。
16×25型的每个中方格的边长为0.5mm，每个中方格的容积为1/40mm3;25×16型的每个中方格的边长为0.4mm，每个中方格的容积为2/125mm3。
2、血球计数板的使用方法（以计数酵母菌为例）(1)用血球计数板计数培养液中的酵母菌个数。
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血细胞计数板的构造和使用方法简介
【摘要】人民教育出版社高中生物教材必修3《稳态与环境》中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验用到血细胞计数板（血球计数板），教材中没有介绍其构造和用法，学生对此感到很生疏。
本文简要介绍血细胞计数板的构造和使用方法。
【关键词】血细胞计数板的构造计数方法使用方法
人民教育出版社高中生物教材必修3《稳态与环境》中“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验用到血细胞计数板（血球计数板），教材中没有介绍其构造和用法，学生对此感到很生疏。
下面简要介绍血细胞计数板的构造和使用方法。
1.血细胞计数板的构造
血细胞计数板(血球计数板)是显微镜上的外挂物件，可用来测量细胞、细菌等一些微小物体的长度，测量单位体积细胞的数量等。
血细胞计数板是由一块比普通玻片大而厚的特制玻璃片制成的，它的两边有两个凸起部分，中间有四条槽沟构成三个平台，中央的平台较宽，而且被一短槽隔成两半，每个半边上各刻有一个方格网，每个方格网共有九大格，中央的大格就是计数室、中央的平台比两边稍低，加盖盖玻片后，中央平台要比两边平台低0.1mm,也就是盖上盖玻片后计数室深度为0.1mm.。
（见图A、B、C、D）
1.1 计数室的规格有两种，一种是由25中格组成，每个中格又分为16个小格（共25×16＝400小格）（见图E）；另一种是由16中格组成，每个中格又分成25个小格（共16×25＝400小格）(见图F)。
可见，尽管计数室有两种规格，但是，不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点，即每一大方格都是16×25=25×16=400个小方格组成。
1.2 计数室的大小有两种，一种是边长为1mm,则计数室面积为1mm2,每个小格面积为〖SX(〗1〖〗400〖SX)〗mm 2 ，盖上盖玻片后，计数室的高度为0.1mm。
所以，一个计数室的体积为0.1mm3，每个小方格的体积为〖SX(〗1〖〗4000〖SX)〗mm 3 ；另一种是边长为2mm，则计数室的面积为4mm2，每个小格面积为〖SX(〗1〖〗100〖SX)〗mm2，盖上盖玻片后计数室的高度为0.1mm，所以，一个计数室的体积为0.4mm3，每个小方格的体积为〖SX(〗1〖〗1000〖SX)〗mm3。
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2.计数方法
2.1 25×16计数室：显微镜下数左上、右上、左下、右下和中央共五个中格，即5×16＝80个小方格的细菌数，若这80个小方格细菌数为A(对每个样品计数三次,取其平均值)。
①若计数室的边长为1mm,则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗A〖〗80〖SX)〗×400×10×1000=50000A（若菌液被稀释，还要乘以
稀释倍数）；②若计数室的边长为2mm，则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗A〖〗80〖SX)〗×400×2.5×1000=12500A （若菌液被稀释，还要乘以稀释倍数）。
2.2 16×25计数室：显微镜下数左上、右上、左下、右下共四个中格，即4×25＝100个小方格的细菌数，若这100个小方格的细菌数为B(对每个样品计数三次,取其平均值)。
①若计数室边长为1mm,则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗B〖〗100〖SX)〗×400×10×1000=4000B （若菌液被稀释，还要乘以稀释倍数）。
②若计数室的边长为2mm，则每毫升菌液的含菌量计算公式为〖SX(〗B〖〗100〖SX)〗×400×2.5×1000=10000B （若菌液被稀释，还要乘以稀释倍数）。
3.使用方法（以酵母菌为例）
3.1 取血细胞计数板，盖上盖玻片，将加入酵母菌的试管摇匀后，用滴管吸取少许菌液，从计数板中间平台两侧的沟槽内沿盖玻片的边缘滴入一小滴，菌液会沿着沟槽扩散，充满计数区，然后用吸水纸吸去多余的菌悬液。
3.2 静置数分钟，待全部菌体细胞沉降到载玻片表面再置于显微镜下观察，先用低倍镜观察，找到计数板刻度后，换高倍镜计数，将结果记录下来，作为原始数据使用，取下盖玻片，用水将计数板浸泡、冲洗干净（切勿用硬物洗刷或擦抹，以免损坏网格刻度），待自然晾干，放入盒内保存。
3.3 每个样品计数通常应重复三次以上，取平均值，求出每个小方格中的酵母菌平均数，按以上计数方法计算。
3.4 由于菌液处于不同的空间位置，要在不同的焦距下才能看到，故观察时必须不断调节细准焦螺旋，才能找到全部菌体，以免误差，对于压线的菌体，采取计上不计下，计左不计右的计算方法，以减少误差，若酵母菌已出芽，只要芽体达到母体的〖SX(〗1〖〗2〖SX)〗，即可单独计为一个个体。
3.5 由于酵母菌是单细胞生物，细胞体积很小，不易观察，在观察显微镜时，要注意对视野的明暗进行选择，太明或太暗都不好，如果样品密度很大，为了计数准确，常常需将待测样品稀释成不同浓度的菌液后再进行计数，一般每一小格内酵母菌数目平均在10个以上的，通常应该稀释，稀释倍数以每小格5～6个菌体为宜。
3.6 取液过程中，为了防止污染，一定要用无菌滴管或无菌移液器，稀释时尽量取少一些，稀释后的溶液不能放回原液。
4.血球计数板的清洁
血球汁数板使用后，用自来水冲洗,切勿用硬物洗刷,洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇,无水乙醇,丙酮等有机溶剂脱水使其干燥.通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。
若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。
举例：在用血细胞计数板（1mm×1mm）刻度为25中格×16小格，装入液体后液体高度为0.1mm,经过计数计算，求得每个小格中的平均酵母菌数为A个，且已知稀释倍数为B，则1mL培养液中的酵母菌数为〖CD#4〗个？（答案
4AB×106）。
参考文献
［1］《高中生物新课程探究实验指导》，教育部教学仪器研究所，凯普生物科技有限公司编著.人民教育出版社,2007年2月第1版.。