吸收曲线的测绘

吸收曲线——精选推荐

吸收曲线题⽬：紫外——可见吸收曲线的测绘及维⽣素B12的含量测定⼀、⽬的：掌握紫外─可见分光光度计的原理和操作。

熟悉测绘吸收曲线的⼀般⽅法。

⽐较⾃动扫描型仪器与⼿⼯绘制吸收曲线的差别。

掌握两种测定含量的⽅法。

⼆、原理：维⽣素B12是含Co的有机物，深红⾊。

可以⽤其⽔溶液作测量液。

⽤与配置其⽔溶液相同的溶剂─本实验为⽔，作为参⽐溶液。

测不同浓度下的吸光度A对C作图，得吸收曲线。

也可配置好溶液后在⾃动扫描的仪器上⾃动绘制出吸收曲线。

由吸收曲线可得到VB12三个吸收峰峰位。

361nm的吸收峰⼲扰因素少，可依朗伯—⽐尔定律A=E·C·L以⽐较法，通过测量待测液及标准溶液的吸光度。

计算得到样品含量，也可以按药典规定以361±1nm处吸光系数值（207）计算得到含量。

三、仪器药品：紫外——可见分光光度计（两种型号）⽐⾊器VB12标准溶液VB12注射液四、实验内容：（⼀）吸收曲线绘制吸收曲线⽅法⼀1、将被测液与空⽩液分别盛装于1cm⽐⾊⽫中，并置于仪器中⽐⾊⽫架上，按仪器使⽤⽅法进⾏操作。

2、从仪器上限开始每隔20nm测量⼀次吸光度在吸收峰⾕的波段以5nm或更⼩的间隔测定⼀些点3、以波长为横坐标，吸收度为纵坐标绘图，得吸收曲线。

吸收曲线⽅法⼆1、将被测液与空⽩液分别盛装于1cm⽐⾊⽫中，并置于仪器中⽐⾊⽫架上，按仪器使⽤⽅法进⾏操作。

2、按仪器使⽤⽅法操作得到吸收曲线（⼆）吸光系数法测含量取维⽣素B12注射液样品，按照其标⽰含量，精密吸取⼀定量，⽤蒸馏⽔准确稀释k倍，使稀释液每ml含量约为25µg，置1cm ⽯英池中，以蒸馏⽔作空⽩，在紫外分光光度计（或有⾜够精度的其他仪器）上，找出361±1nm范围内的吸收峰，读取其吸光度，与48.31相乘，即得样品稀释液每ml含B12的µg数。

（三）标准⽐⾊法测含量（1）、标准溶液取质量较好的维⽣素B12注射液，按上述⽅法去测定其实际含量，准确稀释k倍，使其每ml含B12为50-100µg，以此溶液作为标准溶液。

一吸收曲线的绘制26页PPT

3.
2.
点击完“读取”按钮后，会弹出一个提示框，点击“是”按钮，即可继续。重复步骤2和3，直到读完样品室里样品
1.6查看标准曲线相关系数最后点保存
取出5个标准样品（空白不用取出），然后将三个试液依次放入样品室，继续下一步试液含铁量的测定
2.试液含铁量的测定
2.1填充样品表
依次输入3个试液ID
3.调零
2.
1.
4.样品光度测定
1. 鼠标点样品表表格以激活
3.
2.
重复步骤2和3，直到读完样品室里样品，将数据记录手写到实验报告上，数据不打印
三.标准曲线的绘制与试液含铁量的测定
1.标准曲线的绘制
1.1点开光度测定窗口
1.2建立数据采集方法
1. 2.
3.
4.
确认无误点下一步
文件名改为学号
峰值检测完，一定要点击保存，否则数据可能丢失！
7. 吸收曲线结果吸收曲线的数据待上机操作完成后跟标准曲线及样品数据一起打印
二、显色剂用量确定——吸光度测定
1.点开光度测定窗口
2.建立数据采集方法
1. 2.
3.
4.
1. 2.
该数据不保存，所以这里都不必修改，直接点完成
输入样品ID，放入几个样品就输到几（空白不输）
2.2调零
2.
1.
2.3试液吸光度测定
1. 鼠标点样品表表格以激活
3.
2.
重复步骤2和3，直到读完样品室里样品，然后点击保存
上机操作到此结束，取出样品室里的比色皿，到打印机处打印实验结果。
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一.吸收曲线的绘制
1.点开光谱测定窗口

用单色仪测定介质的吸收曲线

用单色仪测定介质的吸收曲线一、实验目的1、了解单色仪的构造原理并掌握其使用；2、加深对介质光谱特性的了解，掌握测量介质的吸收曲线或透射曲线的原理和方法；3、初步了解光电池的工作原理及其应用。

二、实验原理当一束光入射到有一定厚度的介质平板上时，有一部分被反射，另有一部分光被介质吸收，剩下的光以介质板透射出来。

设有一束波长为，入射光强为的单色平行光垂直入射到一块厚度为d的介质平板上，如图1所示。

若从界面1射回的反射光的光强为，从界面1向介质内透射的光的光强为，入射到界面2的光的光强为，从界面2出射的透射光的光强为，则定义介质板的光谱外透射率和介质的光谱透射率分别为：这里，，，，都应该是光在界面1和2上以及介质中多次反、透射的总效果。

通常，介质对光的反射、透射和吸收不但与介质有关，而且与入射光的波长有关。

这里为简单起见，对以上及以后的各个与波长有关的量都省略波长标记，但都应理解为广谱量。

光谱透射率与波长的关系曲线称为透射曲线。

在介质内部（假定内部无散射），光谱透射率与介质厚度d有如下关系：式中，称为介质的线性吸收系数，一般也称为吸收系数。

它不仅与介质有关，而且与入射光的波长有关。

吸收系数与波长的关系曲线称为吸收曲线。

设光在单一界面上的反射率为R ，则透射光的光强为式中，，…分别表示光从界面2第一次透射，第二次透射……的光的光强。

所以通常，介质的光谱透射率i T 和吸收系数是通过测量由同一材料（相同）加工成的、表面性质相同（R 相同）但厚度不同的两块试样的光谱外透射率后计算得出的。

设两块试样的厚度分别为1d 和2d ，21d d ，光谱外透射率分别为和，则又一般R 和都很小，故上式可近似为（）所以综合以上本实验中采用光电池和微电流放大器测量光强。

合适条件下，光电池输出的光电流与照射到它表面的光的光强成正比。

光电流经由微电流放大器后由数字表直接显示其数值，从而计算光谱透射率和吸收系数，即其中，和分别表示式样厚度为和时微电流放大器上数字表的示值。

吸收曲线绘制

1.
4.样品光度测定
1. 鼠标点样品表表格以激活
3.
2.
重复步骤2和3，直到读完样品室里样品，将数据记录手写到实验报告上，数据不打印
三.标准曲线的绘制与试液含铁量的测定
1.标准曲线的绘制
1.1点开光度测定窗口
1.2建立数据采集方法
1. 2.
3.
4.
确认无误点下一步
文件名改为学号
一.吸收曲线的绘制
1.点开光谱测定窗口
2.建立数据采集方法
其余用默认值
3.执行基线校正
3.
2.
1.
此时池位置为1
4.扫描样品吸收曲线
2.
1.
此时池位置为2
5.创建吸收曲线文件名及保存路径
文件名改为学号保存路径为D:\An（n=1-10）\分光测铁\……
输入分析者姓名
6.峰值检测及数据保存
峰值检测完，一定要点击保存，否则数据可能丢失！
7. 吸收曲线结果吸收曲线的数据待上机操作完成后跟标准曲线及样品数据一起打印
二、显色剂用量确定——吸光度测定
1.点开光度测定窗口
2.建立数据采集方法
1. 2.
3.
4.
1. 2.
该数据不保存，所以这里都不必修改，直接点完成
输入样品ID，放入几个样品就输到几（空白不输）
保存路径为D:\An（n=110）\分光测铁\……
输入分析者姓名确认无误点完成
1.3填充标准表
依次输入5个标准样品ID和相应浓度（空白不输入），权重因子都为1 此处显示浓度仅为示例，请根据自己配制的试液算出具体浓度后输入，单位是mg/L
1.6查看标准曲线相关系数最后点保存
取出5个标准样品（空白不用取出），然后将三个试液依次放入样品室，继续下一步试液含铁量的测定

紫外吸收曲线绘制

紫外吸收曲线绘制
绘制紫外吸收曲线是一种方法，用于显示物质对紫外光的吸收能力随波长变化的情况。

下面是一种基本的绘制流程：
1. 收集实验数据：首先，采集一系列关于该物质在不同波长下吸收的数据点。

这些数据可以通过光谱仪或其他光学仪器测量获得。

2. 绘制坐标系：在纵轴上表示吸光度或透过率，通常以百分比或吸收单位（如OD）为单位。

在横轴上表示波长，通常以纳米（nm）为单位。

3. 绘制曲线：按照数据点的顺序，将数据点连接起来，以形成一条曲线。

可以使用曲线拟合技术来使曲线更加平滑。

4. 调整图形：根据需要，可以添加坐标轴和标签，以及其他辅助线和说明。

确保图形清晰可读并符合规范。

在绘制紫外吸收曲线时，还需要注意以下几点：
- 绘制透过率曲线时，透过率越高，曲线越靠近纵轴上部；吸光度曲线则相反，吸光度越高，曲线越靠近纵轴下部。

- 注意选择合适的比例尺，以便曲线能够在图纸上充分展示。

- 如果样品溶液较稀，可以考虑将吸光度或透过率乘以一个修正因子，以提高曲线的显示效果。

最后，根据实验需要，可以根据绘制的紫外吸收曲线，分析物质在不同波长下的吸收峰位及强度，以获取相关的信息和结论。

紫外吸收曲线绘制

紫外吸收曲线绘制紫外吸收曲线绘制是一种常用的实验手段，用于研究物质在紫外光谱范围内的吸收性质。

这种曲线可以告诉我们物质在特定波长下的吸收强度，是研究物质结构和浓度的重要工具。

在本文中，我们将探讨紫外吸收曲线的绘制原理和应用。

一、紫外吸收原理物质在紫外光谱范围内的吸收性质是由其分子结构和化学键的能级分布决定的。

当分子或离子吸收紫外光时，能量被吸收，使得电子从基态跃迁到激发态。

这种跃迁会导致吸收峰的出现。

常见的紫外吸收物质包括有机化合物和生物大分子。

有机化合物的紫外吸收通常在200-400nm的波长范围内，而生物大分子的紫外吸收通常在220-320nm的波长范围内。

不同功能团对紫外光波长的吸收能力也有所不同。

二、紫外吸收曲线的绘制为了绘制紫外吸收曲线，我们需要使用紫外分光光度计。

该仪器通过向样品通入紫外光并测量透射光的强度来确定样品的吸收能力。

紫外分光光度计通常根据光的波长进行设置，具有可调节波长、光程和检测器灵敏度等功能。

绘制紫外吸收曲线的一般步骤如下：1.准备样品：选择合适的溶剂将样品溶解或稀释至适宜浓度。

为了保证准确的测量结果，应尽量避免杂质和空气的污染。

2.设定仪器：打开紫外分光光度计，并根据实验要求设定波长范围、光程和检测器灵敏度等参数。

3.基线校准：在设定的波长下，使用溶剂测量基线，以确定实验前的清洁状态。

4.测量样品：将样品放入样品室，测量透射光强度。

根据样品的吸光度，可以计算出吸光度值（A= -log(T)）。

5.绘制曲线：将吸光度值在纵坐标上表示，并以波长为横坐标。

根据测量的吸光度值可以得到吸收峰的位置和强度。

6.数据分析：通过观察曲线的形状和峰值的位置来分析样品的成分和浓度。

不同峰值对应不同的功能团或有机化合物，可以根据已知物质的吸收谱进行对比。

三、紫外吸收曲线的应用紫外吸收曲线在许多领域中都有重要应用。

一些常见的应用包括：1.物质鉴定：根据已知物质的紫外吸收光谱，可以对未知物质进行鉴定。

用单色仪测定介质的吸收曲线终结报告

五、实验数据整理1、校验单色波长示值校验结果见表1。

平均差值为0.1，即示值+0.1nm=实值。

由此看来，此台单色仪偏差可以接受，所以只要在数据处理的时候对偏差进行修正即可。

2、测量钕玻璃在610.0~508.0nm 范围内的吸收曲线d1= 0.8 mm d2= 3.8 m计算公式如下： 12n n T I =1221ln ln d d n n --=α测量和计算结果见表2。

3、钕玻璃在610.0~508.0nm范围内的吸收曲线结果分析铷玻璃在610.0~508.0nm范围内的吸收曲线图见后，附图。

六、思考题解答1．为什么要进行光源系统与单色仪系统共轴的调节？答：为了使光源系统的光充分进入单色仪系统，增大光电管接收到的光强，增大其读数，便于实验的进行，因为实验要求光电管读数值大于1500。

2．校对单色仪的波长示值为什么要用汞灯？而测量吸收曲线为什么要用溴钨灯？答：汞灯发出的光的谱线是线性的，校准单色仪的波长显示值时可以利用这一点将单色仪的读数和特征谱线的真值进行比较，得到校准值。

而测量吸收曲线时要求波长在508nm~610nm范围内连续变化，因此要用溴钨灯作为光源提供连续光谱。

3．试讨论单色仪的入射狭缝和出射狭缝的宽度对出射光单色性的影响？答：入射狭缝太宽会减小出射光的单色性，当入射狭缝宽度合适的时候出射狭缝的宽度不会影响出射光的单色性。

七、实验心得1、校正单色仪的时候应使特征普线位于显微镜的中央，具体来说就是调节手轮分别使特征谱线从两侧离开视野，估计出出射狭缝的宽度，然后调节手轮使特征谱线位于出射狭缝中央，调节时注意手轮的空程。

2、调节光路是实验成败的关键，首先要进行共轴调节，然后调节凸透镜和溴钨灯的位置，直到光电管读数大于1500。

光谱法测量透明介质的吸收曲线

中国石油大学近代物理实验实验报告成绩：实验3-2 光谱法测量透明介质的吸收曲线【实验目的】1、了解光栅光谱仪的构造原理及其使用方法。

2、加深对介质光谱特性的了解。

3、掌握测量介质的吸收曲线或透射曲线的原理和方法。

【实验原理】设有一束波长为λ、入射光强为I 0的单色平行光垂直入射到一块厚度为d 的透明介质平板上，如图3-2-1所示。

如果从界面1反射的光强为I R ，从界面1向介质透射光的光强为I 1，在界面2处的入射光强为I 2 ，从界面2射出的透射光的光强为I T ，则定义介质板的光谱外透射率T 和介质的光谱透射率T i 分别为I I T T=（3-2-1） 12I I T i =（3-2-2）依据朗伯-比耳定律，在均匀介质内部光谱透射率T i 与介质厚度d 有如下关系d ie T α-=（3-2-3）式中α称为介质的线性吸收系数，一般也称为吸收系数。

设光垂直入射到厚度为d 的介质上，光要从介质前后表面发生反射。

如果α值很小，反射可以进行多次。

若介质表面的反射系数为R ，则透过样品的光强为()()()()dd d d d T T T T Te R e R I e R R I e R R I e R I I I I I I ααααα22205420322020432111111-------=+-+-+-=++++=（3-2-4）式中I T1、I T2、I T3 … 分别表示从界面2第一次透射、第二次透射、第三次透射…的光的光强。

所以()ddT eR e R I I T αα222011----== （3-2-5）通常介质的光谱透射率T i 和吸收系数α是通过测试由同一材料加工成的（α相同），表面性质相同（R 相同），但厚度不同的两块试样的光谱外透射率后计算得出的。

设两块试样的厚度分别为d 1和d 2，d 2＞d 1，光谱外透射分别为T 1和T 2。

由（3-2-5）式可得图3-2-1()()211222221211d d d d e R e e R e T T αααα------=一般R 和α都很小，故上式可近似为()1212d de T T --=α （3-2-6）即1221ln ln d d T T --=α （3-2-7）比较（3-2-6）式和（3-2-3）式，可得12T T T i =（3-2-8）实验中的WGD —8A 型光栅光谱仪采用光电倍增管测量光谱的光强。

061 高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定

高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定[适用对象] 药学、药物制剂、中药学、制药工程、中药学（国际交流方向）、生物工程专业[实验学时] 3学时一、实验目的1. 熟悉72型或721型分光光度计的使用方法2. 熟悉光谱曲线的绘制方法,能从吸收光谱曲线中选择最大吸收波长max3. 掌握分光光度计比色法的操作和测定有色物质含量的方法.二、实验原理1. 选择合适的波长间隔手工绘制KMnO4的吸收曲线并找出最大吸收波长max.2. 从吸收光谱选定的max为测定波长用标准曲线法测定样品溶液的含量.三、仪器设备容量瓶25 mL，50mL，1000 mL吸耳球/洗瓶500mL滴管/坐标纸/镜头纸/移液管10mL、5mL、2mL、1mL分光光度计721型KMnO4（实验用）分析纯四、相关知识点1. 分光光度法的原理2. 移液管的使用方法3. 吸收定律4. 比色测定方法5. 标准曲线的绘制6. 定量分析的原理7. 最大吸收波长的选择依据8. 标准溶液的配置方法五、实验步骤(一) 标准溶液的制备准确称取基准物KMnO40.1250g,在小烧杯中溶解后全部转入1000ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，每ml含KMnO4为0.1250mg。

(二) 比色测定（用721型分光光度计）1. 吸收曲线的绘制精密吸取上述KMnO4标准溶液20ml于50ml容量瓶中，加蒸馏水至标线，摇匀，以蒸馏水为空白，依次选择440，450，460，470，480，490，500，510，520，525，530，535，540，545，550，560，580，600，620，640，660，680，700nm波长为测定点，依法测出的各点的吸收度A。

以测定波长为横坐标，以相应测出的吸光度Ai为纵坐标，绘制吸收曲线；从吸收曲线处找出最大吸收波长max.2. 标准曲线的绘制取6支25ml容量瓶，分别加入0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 KMnO4标准液，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀。

kmno4吸收曲线测绘实验报告uv——5000

kmno4吸收曲线测绘实验报告uv——5000 实验目的：本实验旨在通过测定高锰酸钾（KMnO4）在紫外-可见光（UV-Vis）光谱区域的吸收曲线，探究其吸收特性，并通过测量不同浓度的KMnO4溶液的吸光度，建立浓度与吸光度之间的定量关系。

实验原理：KMnO4溶液在紫外-可见光区域的吸收特性主要由其电子跃迁引起。

当KMnO4溶液受到紫外或可见光照射时，分子内的电子会发生从低能级到高能级的跃迁，吸收一定能量的光子。

吸收光的波长与跃迁所涉及的能级差有关，不同的能级差对应不同的吸收峰。

实验步骤：1. 准备一系列不同浓度的KMnO4溶液，并记录每种浓度的溶液的浓度值。

2. 使用紫外-可见光分光光度计，设置波长范围为200-800 nm。

3. 将紫外-可见光分光光度计的比色皿室清洗干净，并填充纯水，用纯水进行基线校准。

4. 依次将不同浓度的KMnO4溶液装入比色皿，置于分光光度计中进行测量，并记录吸光度值。

5. 绘制KMnO4溶液浓度与吸光度之间的曲线图，并进行数据处理和分析。

实验结果：根据实验测量的数据，我们可以得到KMnO4溶液在紫外-可见光区域的吸光度曲线。

通常情况下，KMnO4溶液在200-800 nm波长范围内表现出多个吸收峰，其中较强的吸收峰通常出现在约500 nm处。

实验讨论：通过实验结果可以看出，KMnO4溶液的吸收特性主要集中在紫外-可见光区域，而且吸光度与溶液浓度呈正相关关系。

这意味着，可以通过测量KMnO4溶液的吸光度来确定其浓度。

此外，根据吸收峰的位置和强度，我们还可以推断KMnO4溶液中所含的不同物质。

实验结论：通过本实验，我们成功测定了KMnO4溶液在紫外-可见光区域的吸收曲线，并建立了浓度与吸光度之间的定量关系。

这对于后续的分析和定量测量提供了重要的参考。

同时，我们也加深了对KMnO4溶液吸收特性的理解，为进一步的研究提供了基础。

实验改进：在实验中，我们可以进一步提高实验的精确度和准确性。

061 高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定

高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定[适用对象] 药学、药物制剂、中药学、制药工程、中药学（国际交流方向）、生物工程专业[实验学时] 3学时一、实验目的1. 熟悉72型或721型分光光度计的使用方法2. 熟悉光谱曲线的绘制方法,能从吸收光谱曲线中选择最大吸收波长max3. 掌握分光光度计比色法的操作和测定有色物质含量的方法.二、实验原理1. 选择合适的波长间隔手工绘制KMnO4的吸收曲线并找出最大吸收波长max.2. 从吸收光谱选定的max为测定波长用标准曲线法测定样品溶液的含量.三、仪器设备容量瓶25 mL，50mL，1000 mL吸耳球/洗瓶500mL滴管/坐标纸/镜头纸/移液管10mL、5mL、2mL、1mL分光光度计721型KMnO4（实验用）分析纯四、相关知识点1. 分光光度法的原理2. 移液管的使用方法3. 吸收定律4. 比色测定方法5. 标准曲线的绘制6. 定量分析的原理7. 最大吸收波长的选择依据8. 标准溶液的配置方法五、实验步骤(一) 标准溶液的制备准确称取基准物KMnO40.1250g,在小烧杯中溶解后全部转入1000ml 容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，每ml含KMnO4为0.1250mg。

(二) 比色测定（用721型分光光度计）1. 吸收曲线的绘制精密吸取上述KMnO4标准溶液20ml于50ml容量瓶中，加蒸馏水至标线，摇匀，以蒸馏水为空白，依次选择440，450，460，470，480，490，500，510，520，525，530，535，540，545，550，560，580，600，620，640，660，680，700nm波长为测定点，依法测出的各点的吸收度A。

以测定波长为横坐标，以相应测出的吸光度Ai为纵坐标，绘制吸收曲线；从吸收曲线处找出最大吸收波长max.2. 标准曲线的绘制取6支25ml容量瓶，分别加入0.00，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 KMnO4标准液，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀。

用单色仪测定介质的吸收曲线

0.263456
0.294458
0.320209
575.65
575.15
574.65
574.15
573.65
573.15
572.65
572.15
571.4
571
570.5
570
569.5
569
568.5
568
0.349
0.358
0.412
0.491
0.614
0.736
0.856
0.975
0.965
0.97
吸收系数（/mm)
0.016402
0.0113140.0064650.115740.019897
0.029639
0.038721
波长修正值（nm)
610.15
608.15
606.15
604.15
602.15
600.15
598.15
596
594
592
590
589
588.5
588
587.5
1.222
0.968
6．选择薄钕玻璃片，在与厚钕玻璃片波长相对应的位置测量
根据两组数据，求钕玻璃的吸收系数曲线
五、数据处理以及误差分析
1．单色仪的调节和波长示值的校准 =__0.15___nm
真值
579.1
577.0
546.1
435.8
示值
578.9
576.8
546.0
435.7
偏差
0.2
0.2
0.1
0.1
2. 测量钕玻璃在610.0nm-550.0nm范围内的吸收曲线
3．装探测器，打开微电流放大器，微动溴钨灯，使放大器示值最大

吸收曲线的测绘实验十五吸收曲线的测绘一、实验目的1．掌握测定及绘制药物吸收曲线的方法；2．掌握紫外－可见分光光度计的使用方法。

二、实验原理在紫外－可见光区，物质对光的吸收主要是分子中电子能级跃迁所致，同时伴随着分子的转动和振动能级的变化，因此电子吸收光谱一般比较简单、平缓。

紫外吸收光谱能表征化合物的显色基团和显色分子母核，作为化合物的定性依据，相同的化合物其紫外吸收光谱一定相同。

实验证明，若溶剂固定不变，化合物吸收曲线所出现的λmax、λmin或λsh为一定值，且它们的数目也一定，从而为鉴别化合物提供了有力的依据。

根据药典规定，百分吸光系数是指当溶液浓度为1％，液层厚度为1cm时，指定波长的E＝A/Cl 。

吸光度。

即%11cm化合物对光的选择吸收的波长以及相应的吸光系数，是该化合物的物理常数，当已知某纯化合物在一定条件下的吸光系数后，即可由上式计算出该化合物的含量。

三、实验仪器及试剂1．仪器紫外－可见分光光度计、容量瓶、吸量管。

2．试样维生素B12注射液。

四、实验内容与步骤取维生素B12注射液，稀释成100μg/mL的水溶液，作为试样溶液。

将此被测溶液与空白溶液（水）分别盛装于1cm厚的吸收池中，放置在仪器的吸收池架上，按仪器使用方法进行操作。

从仪器波长范围的上限（或下限）开始，每隔10cm测量一次，在吸收峰和吸收谷处，每隔2nm测量一次，每次测量均需用空白调节100％透光率，然后读取测定溶液的吸光度，记录不同波长处的测定值。

以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，并连成曲线，即得吸收曲线。

五、数据处理1．记录波长及相应的吸光度：波长(λ)nm 360吸光度（A）波长(λ)nm 362吸光度（A）2.以波长为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制吸收曲线。

六、实验注意事项及讨论1．严格按照仪器的操作要求进行。

2．每调整一次波长均需用空白重新调节100％透光率。

3．调整波长时，最好朝着一个方向旋转，即：波长由小到大，或又大到小。

实验1-高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定

实验1-高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定一、实验目的1. 熟悉72型或721型分光光度计的使用方法2. 熟悉光谱曲线的绘制方法,能从吸收光谱曲线中选择最大吸收波长?max3. 掌握分光光度计比色法的操作和测定有色物质含量的方法.二、实验原理1. 选择合适的波长间隔绘制KMnO4的吸收曲线并找出最大吸收波长?max.2. 从吸收光谱选定的?max为测定波长用标准曲线法测定样品溶液的含量.三、仪器和试剂容量瓶, 移液管, 分光光度计, KMnO4（实验用）四、实验步骤(一) 标准溶液的制备准确称取基准物,在小烧杯中溶解后全部转入1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，每毫升含KMnO4为。

(二) 比色测定（用721型分光光度计）1. 吸收曲线的绘制精密吸取上述KMnO4标准溶液10ml于50ml容量瓶中，加蒸馏水至标线，摇匀，以蒸馏水为空白，依次选择440，450，460，470，480，490，500，510，520，525，530，535，540，545，550，560，580，600，620，640，660，680，700nm波长为测定点，依法测出的各点的吸收度A。

以测定波长为横坐标，以相应测出的吸光度A i为纵坐标，绘制吸收曲线；从吸收曲线处找出最大吸收波长?max.2. 标准曲线的绘制取6支25ml容量瓶，分别加入，，，，， ml KMnO4标准液，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀。

以第一管蒸馏水为空白，在最大吸收波长处，依次测定各溶液的吸光度A，然后以浓度C s（mg/ml）为横坐标，相应的吸光度A s为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 样品的测定取待测样品2ml于25 ml容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀。

按依上法操作，测出相应的A值。

(三) 计算C样（KMnO4）（?g/ml）= C供? nC样为测样品中KMnO4的浓度（?g/ml）C供为标准曲线中查得的供试液的浓度（?g/ml）n：样品溶液稀释为供试液的倍数六、思考题1. 怎样选择测定波长2. 比色测定的注意事项（待测样品：取 KMnO4于250 ml容量瓶中）。

《吸收曲线的绘制》课件

实验法
实验法
通过实验测量物质对不同波长的光的吸收程度，从而绘制出吸收曲线。实验设备包括光源、单色仪、样品池和检测器等。
优点
缺点
实验法需要使用昂贵的设备和专业的操作技能，实验过程繁琐，耗时较长。
实验法能够直接测量物质的吸收特性，数据准确可靠，适用于各种类型的物质。
理论法
理论法
基于物质的光学性质和分子结构，通过理论计算得到吸收曲线。
分子极性
分子极性越大，越容易被吸附，影响吸收曲线的形状。
分子量
分子量越大，吸收速率越慢，吸收曲线越平缓。
环境因素的影响
温度
温度越高，分子热运动越剧烈，有利于物质的溶解和扩散，吸收速率加快。
压力
压力对吸收过程的影响取决于气体在溶液中的溶解度，压力越大，溶解度越大，吸收速率越快。
搅拌速度
搅拌速度影响物质的传质速率，搅拌速度越快，传质速率越快，吸收速率越快。
在化学工程中的应用
1 2
化学反应过程
吸收曲线可以用于描述化学反应过程中物质浓度的变化，有助于理解反应机理和优化反应条件。
分离过程优化
在化学工程中，吸收曲线可以用于优化分离过程，如蒸馏、萃取等，以提高产品的纯度和收率。
3
工艺流程模拟
通过吸收曲线的模拟，可以对化学工艺流程进行预测和优化，降低实验成本和时间。
根据数据特性和分析目的选择合适的绘制方法，如散点图、折线图、柱状图等。
合理设置图表参数，如坐标轴范围、刻度、标签等，以提高图表的清晰度和可读性。
对图表进行合理的分析和解释，避免主观臆断和误导性的结论。
实际应用的可行性
吸收曲线绘制结果应具有实际应用价值，能够为相关领域的研究和应用提供有价值的参考。

实验1-高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定(精)

高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定一、实验目的1. 熟悉72型或721型分光光度计的使用方法2. 熟悉光谱曲线的绘制方法,能从吸收光谱曲线中选择最大吸收波长λmax3. 掌握分光光度计比色法的操作和测定有色物质含量的方法.二、实验原理1. 选择合适的波长间隔绘制KMnO4的吸收曲线并找出最大吸收波长λmax.2. 从吸收光谱选定的λmax为测定波长用标准曲线法测定样品溶液的含量.三、仪器和试剂容量瓶, 移液管, 分光光度计, KMnO4(实验用)四、实验步骤(一) 标准溶液的制备准确称取基准物KMnO40.2500g,在小烧杯中溶解后全部转入1000ml容量瓶中,用蒸馏水稀释到刻度,摇匀,每毫升含KMnO4为0.25mg。

(二) 比色测定(用721型分光光度计)1. 吸收曲线的绘制精密吸取上述KMnO4标准溶液10ml于50ml容量瓶中,加蒸馏水至标线,摇匀,以蒸馏水为空白,依次选择440,450,460,470,- 1 -480,490,500,510,520,525,530,535,540,545,550,560,580,600,620,640,660,680,700nm波长为测定点,依法测出的各点的吸收度A。

以测定波长为横坐标,以相应测出的吸光度A i为纵坐标,绘制吸收曲线;从吸收曲线处找出最大吸收波长λmax.2. 标准曲线的绘制取6支25ml容量瓶,分别加入0.00,1.00,2.00,3.00,4.00, 5.00 ml KMnO4标准液,用蒸馏水稀释到刻度,摇匀。

以第一管蒸馏水为空白,在最大吸收波长处,依次测定各溶液的吸光度A,然后以浓度C s(mg/ml)为横坐标,相应的吸光度A s为纵坐标,绘制标准曲线。

3. 样品的测定取待测样品2ml于25 ml容量瓶中,用蒸馏水稀释到刻度,摇匀。

按依上法操作,测出相应的A值。

(三) 计算C样(KMnO4)(μg/ml)= C供? nC样为测样品中KMnO4的浓度(μg/ml)C供为标准曲线中查得的供试液的浓度(μg/ml)n:样品溶液稀释为供试液的倍数六、思考题1. 怎样选择测定波长2. 比色测定的注意事项(待测样品:取0.09-0.10g KMnO4于250 ml容量瓶中) - 2 -。

实验1、分光光度计的使用和高锰酸钾吸收曲线的绘制

实验一、高锰酸钾的吸收曲线的绘制和含量测定
一、实验目的
1. 熟悉分光光度计的使用方法
2. 熟悉光谱曲线的绘制方法,能从吸收光谱曲线中选择最大吸收波长λmax
3. 掌握分光光度计比色法的操作和测定有色物质含量的方法.
二、实验原理
1. 选择合适的波长间隔手工绘制KMnO4的吸收曲线并找出最大吸收波长λmax.
2. 从吸收光谱选定的λmax为测定波长用标准曲线法测定样品溶液的含量.
三、实验步骤
(一) 标准溶液的制备
准确称取基准物KMnO4 0.1250g,在小烧杯中溶解后全部转入1000ml容量瓶中，用蒸馏水稀释到刻度，摇匀，每ml含KMnO4为
0.1250mg。

四、吸收曲线的绘制(含皿差实验)
精密吸取上述KMnO4标准溶液20ml于50ml比色管中，加蒸馏水至标线，摇匀，以蒸馏水为空白，依次选择440，450，460，470，480，490，500，510，520，525，530，535，540，545，550，560，580，600，620，640，660，680，700nm波长为测定点，依法测出的各点的吸收度A。

以测定波长为横坐标，以相应测出的吸光度Ai为纵坐标，绘制吸收曲线；从吸收曲线处找出最大吸收波长λmax.
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吸收曲线的测定推荐优秀PPT

吸收曲线的绘制
绘制方法：
在坐标纸选好坐标分度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，用平滑曲线连接各点作图。
入射光的选择
从吸收曲线上选择测定葡萄糖的适宜波长，即吸光度最大值处对应的入射光波长，记为最大吸收波长 λmax
总结讨论
选择最佳入射光波长的依据和方法是什么？葡萄糖蒽酮吸收曲线有哪些特征？
用吸量管吸取适量蒸馏水和葡萄糖标准溶液，分别注入大试管中，依次加入蒽酮试剂和浓硫酸,摇匀后,加热煮沸10min后，低温冷却。
绘制吸收λ曲/线n：m溶液显色，测6量2吸5光度，绘图 630
640
650
660
葡萄糖蒽酮络合物对各波长光的吸收值（A）
在坐标纸选好坐标分度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，用平滑曲线连接各点作图。
用吸量管吸取适量蒸馏水和葡萄糖标准溶液，分别注入大试管中，依次加入蒽酮试剂和浓硫酸,摇匀后,加热煮沸10min后，低温冷却。
用吸量管吸取适量蒸馏水和葡萄糖标准溶液，分别注入大试管中，依次加入蒽酮试剂和浓硫酸,摇匀后,加热煮沸10min后，低温冷却。A 绘源自吸收曲线：溶液显色，测量吸光度，绘图
吸光度最大处对应的波长称为最大吸收波长λmax ，为620nm.
吸收曲线的绘制
吸收曲线是选择入射光的依据。将不同波长的光依次通过某一固定浓度和厚度的有色溶液，分别测定该物质对不同波长的单色光的吸收程度，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标作图，这个图形即为该物质的吸收曲线
绘制吸收曲线：溶液显色，测量吸光度，绘图
葡萄糖的显色反应
用吸量管吸取适量蒸馏水和葡萄糖标准溶液，分别注入大试管中，依次加入蒽酮试剂和浓硫酸,摇匀后,加热煮沸10min后，低温冷却。
，吸光度为纵坐标作图，这个图形即为该物质的吸收曲线。

高锰酸钾吸收曲线绘制PPT

给予该生当年期末生物化学与分子生物学课程基本原理与基本理论部分开卷考试部分免试奖励。
用722型分光光度待计测测定蛋相白应波液长（下m的高l）锰酸钾吸光度—最大吸收波—长。 3.0
化学结构相似的物质最大吸收波长相同，吸收系数不同。
合上盖，调 A 参数调为 0;
5
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第十七页，编辑于试星剂期五：十五点三十二分。
第K第为二一吸十页光五，系页编数，辑，编于是辑星牛2物于期m质血星五g在/期：清m单五十l标位：五浓准十点度五蛋三和点十白单三二位溶十分厚二。液度分（的。条m件l）下对入—射光的吸0光.6度。 1.2
1.8
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第二十一页，编辑于星期五：十五点三十二分。
第八页，编辑于星期五：十五点三十二分。
光吸收示意图
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第九页，编辑于星期五：十五点三十二分。
吸收光谱和物质的定性分析
➢ 物质的吸收光谱与物质分子结构有关。 ➢ 吸收光谱曲线是物质的特征曲线。用各种不同波长的光线作为入射光测定物质的吸光度（Absorbance），然
后以波长（λ）为横轴，相应的吸光度（A）为纵轴，按结果作图，可得到该物质的吸收光谱曲线，这种曲线体现了物质对不同波长的光的吸收能力。 ➢ 在一定的温度、pH值等条件下吸收光谱的曲线形状是一定的。在吸收光谱中，往往可找到一个或几个吸收最大值，该处的波长称为最大吸收波长（λmax）。物质不同，它们的最大吸收波长也往往不同。
➢ 在一定的浓度范围内，颜色的深浅与蛋白质含量呈线性关系。因此可用比色法测定蛋白质浓度。
第二十一页，编辑于星期五：十五点三十二分。
紫红色铜双缩脲复合物分子结构
第二十二页，编辑于星期五：十五点三十二分。