第十二章 肾功能试验

第二节 血清尿素测定
一、脲酶比色法
【原理】脲酶比色法测定尿素分两个步骤，首先尿素经脲酶水
解后生成氨及氨基甲酸，氨基甲酸又自发生成氨和二氧化碳。氨 在碱性介质中与苯酚及次氯酸反应，生成蓝色的游离型吲哚酚， 此过程需用亚硝基铁氰化钠催化反应。蓝色吲哚酚的生成量与尿 素氮含量成正比，与同样处理的尿素氮标准管比色测定，可求出 样品中尿素氮的含量。
第一节 概述
肾功能试验主要用于评价肾脏的排泄功能和疾病是 肾脏受损部位。测定机体内非蛋白氮（NPN）是肾 功能试验的重要项目。
非蛋白氮是蛋白质和核酸在体内分解代谢的产物， 主要包括尿酸、尿素、肌酐、肌酸、游离氨、氨基 酸等，在血浆中的浓度为14.3~25mmol/L。其中尿 素中的氮量约占NPN的一半，尿毒症时可达到 80%~90%。这些物质基本上都由肾脏随尿液排出体 外。故测定血和尿中这些代谢产物的含量，对肾功 能的实验诊断有一定的临床意义。
第一节 概述 二、肾脏的排泄功能试验
远曲肾小管试验： 常选择的有尿液浓缩稀释试验、
尿液渗透压测定、渗透溶质清除率、自由水清除率 和尿折射率测定。
近曲肾小管试验： 肾小管葡萄糖最大重吸收试验、
肾小管对氨基马尿酸最大排泄量试验和酚红排泄试 验等。
第一节 概述
二、肾脏的排泄功能试验
（三）、肾血流量测定
第十二章 肾功能试验
第一节 概述
肾脏(kidney)不仅是机体内最重要的排泄器官， 还是重要的内分泌器官，肾脏在维持机体内环 境的稳定和平衡方面起着极为重要的作用。各 种肾脏疾病均可造成机体代谢紊乱，并导致血 液和尿液生物化学的改变。因此，血、尿生物 化学检验是指导肾脏疾病诊断和治疗的重要指 标。
6、肾小管的最大功能试验（TmPHA和TmG） 本 实验属于对肾小管功能进行定量的试验，是肾小管 功能的重要指标，可反映有效肾单位总数。其试验 方法准确性好，灵敏度高，但操作繁琐，要求条件 高，故不适合用于临床常规肾功能检查。
第二节 血清尿素测定
氨基酸脱氨基作用产生氨，氨在肝脏经鸟氨酸循环合成尿素， 尿素通过血液运输至肾脏，由尿液排出体外。尿素是体内氨 基酸分解代谢的终产物之一，因此测定血液尿素(BUN)的含 量可以了解机体肾功能状况。
3、菊糖清除率和对氨基马尿酸清除率 菊糖清除率反 映肾小球滤过功能，对氨基马尿酸清除率反映肾血流 量。一般只在研究中用。
第一节 概述
三、肾脏功能试验的选择与评价
4、血清肌酐、肌酸测定 在严重肾功能不全尿量 明显减少时，血清肌酐、肌酸测定在一定程度上可 帮助判断肾功能损害程度。
5、酚红排泌试验 由于受肾血流量影响，中等 以上程度肾损害时酚红排泌试验才有所改变，因此， 可大致反映近曲小管功能。
（二）、主要肾功能试验的评价
1、尿素测定 检查肾小球滤过功能的试验。主要用于 肾功能障碍晚期或严重损害，对氮质血症和尿毒症诊 断有特殊价值，但对早期诊断无意义。虽然方法简单， 但敏感性差。
2、内生肌酐清除率 反映肾小球滤过功能的试验，通 过本实验可粗略估计有效肾单位数量就，其敏感性较 尿素高，方法简单，试验干扰因素较少，为临床常用 测定肾功能损害较好的定量试验之一。
许多药物进入机体后可由肾小管分泌排泄，如酚红 （PSP），对氨基马尿酸（PAH）、青霉素等除小部 分经过肾小球滤过外，大部分是由肾小管细胞分泌 排泄的，所以，酚红、对氨基马尿酸清除试验可用 于检测肾小管的分泌功能。
第一节 概述
二、肾脏的排泄功能试验
（一）肾小球滤过功能试验
肾小球滤过指血液流经肾小球毛细血管网时，血浆中的水、 电解质、及一些小分子物质（如低分子量蛋白）以及蛋白质、 核酸、糖等物质的代谢产物通过滤过膜进入肾球囊形成原尿 的过程。单位时间内两肾生成原尿的量称为肾小球滤过率 （GFR），临床上只能用一些合适的内源性或外源性物质从 肾脏清除的速率，简称清除率（ Cr）来间接反映GFR。肾小 球清除率（Gcr）是指肾脏清除某种物质的能力，即肾脏在 单位时间（一般为每分钟）内能将多少毫升血浆中的某种物 质完全清除的能力。C=(U×V)/P，计算公式中U为尿中某种 物质的浓度，P为血浆中某种物质的浓度，V为每分钟的尿量 （ml/min）。但由于人体个体差异，以标准体表面积1.73m2 校正后公式为： C=(U×V)/P × 1.73/A。A为受试者的体表面 积。
3、本法亦能测定尿液中的尿素氮，但须将尿液稀释并 去除尿中的游离铵盐。具体方法是：1.0ml尿标本，加 入人造沸石(需预处理)0.5g，加去氨蒸馏水至25ml，反 复振摇数次，吸附尿中游离铵盐，静置后吸取稀释尿 液1.0ml，按上述操作方法进行测定，结果乘以稀释倍 数25。
第二节 血清尿素测定
2、外源性物质：不在体内代谢或转化。如菊糖、 硫代硫酸钠、甘露醇、山梨醇等。它们能被肾小球 自由滤过，而不被肾小管重吸收和分泌。这类试验 操作繁琐，一般只用于研究。
第一节 概述
二、肾脏的排泄功能试验
（二）、肾小管功能试验
肾小管功能主要是重吸收和排泌。肾小管的重吸收 作用主要在近端肾小管进行，包括葡萄糖，氨基酸， 乳酸，肌酸等几乎全部重吸收；HCO3—，K＋，Na＋， 水的大部分被重吸收；而其他盐类，尿素，尿酸部 分重吸收，仅肌酐不被重吸收。重吸收的过程就是 对原尿的浓缩功能。肾小管的排泌功能是指肾小管 上皮皮细胞将其代谢产物分泌到肾小管管腔和将血 液中的某些物质转运到管腔的过程，其中包括泌H+， 泌NH3+和H+-Na+交换等功能。肾小管试验分远曲肾 小管试验和近曲肾小管试验两部分。
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
肾单位是肾脏结构和 功能的基本单位。
每侧肾脏约100万个肾 单位。
肾单位组成：
➢肾小体：由肾小球 和肾小囊组成。
➢肾小管：分近曲小 管、髓袢、远曲小 管。
肾单位汇集于集合管， 再汇入乳头管，开口 于肾盂。
百度文库 第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
肾脏的主要功能是排泄水分、代谢产物和废物，保 留体内所需物质（如蛋白质、氨基酸、葡萄糖等）， 调节水、电解质、渗透压和酸碱平衡，以维持内环 境稳定。此外，肾脏还可以分泌一些重要的生物学 活性物质，如肾素、促红细胞生成素和维生素D等， 用来调节血压、内分泌、钙磷代谢和生成红细胞。 肾脏的这些功能重要依赖于肾小球的滤过功能、肾 小管的重吸收与分泌功能来完成。
第二节 血清尿素测定
【计算】
血清尿素（mol/L）=A测/A标×C标 【参考范围】

1.78~7.14mol/L
第二节 血清尿素测定
【注意事项】
1、若用血浆测定尿素氮时应避免用高浓度氟化物、草 酸盐作抗凝剂，因其能抑制尿素酶活性，引起结果假 性偏低。
2、空气中氨对试剂或玻璃器皿的污染可使结果偏高， 使用铵盐抗凝剂也可使结果偏高。
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
（三）、肾小管的分泌作用
主要在远曲小管进行，指肾小管上皮细胞将代谢产 物或血液中的某些物质排入小管液的过程。肾小管 细们胞均可可分以泌与KN+a、+进H行+和交NH换3，， NNHa+3与与HHC+结O3合一为起N被H重4+，吸它 收以保留机体所需要的碱，故肾脏有很强的排酸保 碱能力，以维持机体酸碱平衡。
成人每日经过肾小球滤过的原 尿量约180L，经肾小管重吸收 后只有1%左右（1.5L）以终尿 的形式排出体外。
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
近曲小管是原尿重吸收的主要场所，原尿中几乎全部葡萄糖、 氨基酸和蛋白质以及大部分水、离子和尿素等均在此重吸收。 此外，近端小管还向腔内分泌氢离子、氨、肌酐和马尿酸等， 还能转运和排出血液中的酚红和青霉素等药物。
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
滤过屏障只允许分 肾
子量小于69KD的
小
物质通过，在膜上 球
还含有糖蛋白等带 滤
负电荷的物质，形 过
成滤过的电荷屏障。 膜
正常生理情况下， 示
滤过膜可以有效阻 意
止血浆蛋白质，使 之很少滤出。
图
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
2、有效滤过压 是肾小球产生 滤
尿素氮的测定方法很多，归纳起来有以下两大类： 1、直接法：即用某种特殊试剂与尿素直接作用，产生显色
反应再进行测定，如二乙酰一肟法； 2、间接法：先用脲酶将尿素分解产生氨，然后用不同方法
测定氨的量再换算成尿素，如脲酶比色法、酶偶联法、电导 法、离子选择电极法和指示染料法等。 二乙酰一肟法灵敏度高，精密度较好，操作简便，目前该法 仍为大多数基层医院所采用，其主要问题是显色后有褪色现 象。酶偶联法具有特异性高、灵敏度高、精度好、不受其他 含氮化合物干扰等特点，且既可手工操作也可用于自动化分 析，是当今实验室广泛应用的方法。
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
（一）、肾小球的滤过作用
肾小球的滤过作用的结构基础是滤过膜（即滤过屏 障），肾小球滤过的动力是肾小球有效滤过压。肾 小球滤过率（GFR）与肾小球滤过膜的通透性、有 效滤过压和肾小球血流量有关。
1、肾小球滤过膜的通透性
肾小球滤过膜的结构类似滤过器，具有通透性高和 滤过面积大的特点。血液中的物质是否能够通过滤 过膜，取决于分子的大小和所带电荷情况。
过作用的动力。
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
3、肾小球血流量
正常情况下，在肾血流量自身调节的基础上， 肾血流量可保持相对恒定。
当动脉压在10.64~13.3kPa时，肾血流量可保 持恒定，肾小球滤过率也维持恒定。
第一节 概述
一、肾脏的排泄功能
（二）、肾小管的重吸收作用
肾小管分为近曲小管、髓袢和 远曲小管三部分，近端小管与 肾小囊相连，远端小管连接集 合小管。肾小管有重吸收原尿 中的某些成分和排泌等作用。
二、二乙酰一肟法
略
第二节 血清尿素测定
【临床意义】
血清尿素浓度受多种因素的影响，可分为生理性因素和病理性因素两个方面。
1、生理性因素 血清尿素的浓度与摄人的蛋白质量密切相关。 2、病理性因素 血清尿素增加的原因可分为肾前性、肾性和肾后性三个方面。
无论何种肾功能测定，均需要在肾血流量充足的前提 下才能充分表示它们的意义，因此，为了全面了解肾 功能状态，必须测定肾血流量（RBF）和肾血浆流量 （RPF）。
肾血流量常用碘锐特或对氨基马尿酸（PAH）清除值来 推算。如果该物质经肾脏被完全清除，则其在肾静脉 内的浓度为零，那么在肾动脉血浆中的量就等于在尿 中的排出量
反应式如下：
第二节 血清尿素测定
【试剂与器材】
试剂：
1、 酚显色剂（由苯酚、亚硝基铁氰化钠组成)
2、 碱性次氯酸钠溶液（由氢氧化钠、次氯酸钠组成）
3、脲酶应用液
4、尿素氮标准液
器材：

略
第二节 血清尿素测定
【实践步骤】按表操作
混匀，置37℃水浴20分钟，使呈色反应完全。然后， 用分光光度计比色，波长620nm，空白管调零，读 取各管吸光度。
A（m2）=[身高（cm）×0.0060]+[体重（Kg）×0.01280.1529]
第一节 概述
二、肾脏的排泄功能试验
用于反应肾脏清除值的物质有两类：
1、内源性物质：完全由机体自身产生，生成量较 为恒定，很少或不受外界因素的干扰。如内生肌酐 和尿素。内生肌酐清除率是目前临床应用最多的肾 功能试验之一。
髓袢分为降支和升支，降支对水的通透性很高，在降支内水 的重吸收大与NaCl，使小管液渗透压zhujian升高，形成 渗透 梯度。而升支对水的通透性低，对NaCl的通透性高，使小管 液的渗透压逐渐降低，形成逆向渗透梯度。
远曲小管是离子交换的重要部位，细胞有吸收水、Na+和排 出K+、H+、NH3等作用，对维持体液的酸碱平衡起重要作用。 肾上腺皮质分泌的醛固酮能促进此段重吸收Na+，排出K+， 垂体后叶抗利尿激素能促进此段对水的重吸收，使尿液浓缩， 尿量减少。
即：RPF=UV/P
RBF=RPF/(1-Ht)
式中，V为尿量；U和P分别为尿中和血浆中该物质的浓 度；Ht为红细胞压积；RPF为肾血浆流量；RBF为肾血 流量。
第一节 概述
三、肾脏功能试验的选择与评价
（一）、肾功能试验方法的选择 常用的肾功能试验方法及选择
第一节 概述
三、肾脏功能试验的选择与评价