BD淋巴细胞亚群分型
淋巴细胞亚群的临床及科研应用
NK细胞(CD3-CD16+和/或CD56+)能够介导 对某些肿瘤细胞和病毒感染细胞的细胞毒性 作用。
下表为常见疾病的T 淋巴细胞的变化：
疾病
T 细胞亚群 CD4+/CD8+
类风关
CD4+ （活动期）
CD8+
SLE
- 或 （活动期）
Sjogren综合症
多发性硬化症
重症肌无力
膜型肾小球肾炎
胰岛素依赖性糖尿病
乙型肝炎
自身溶血性贫血
上呼吸道感染
传染性单核细胞增多症
（急性期）
巨细胞病毒感染
乙肝
（急性期/慢性肝炎）
结核
（胸水/重症外周血）
麻风
疟疾
血吸虫病
43;
Reversed CD4/CD8 Ratios of Tumor-Infiltrating Lymphocytes Are Correlated with the Progression of Human Cervical Carcinoma Received February 11, 1999; revision received May 21, 1999; accepted May 21, 1999. © 1999 American Cancer Society
CD4/CD8比值与肿瘤
恶性肿瘤患者术前CD4/CD8比值低与术后比 值恢复正常。
当发生癌转移时,CD3 、CD4 细胞数明显减 少的同时CD8 细胞数明显增多,CD4/ CD8 比 值明显降低,提示恶性肿瘤患者晚期细胞免疫 功能更低,预后更差。
BD流式全面介绍
Creation of a Voltage Pulse - Analog Signal
研究的微粒特性包括多种物理及生物学特征，并加以 定量
流式细胞仪系统
简介 —通过流式细胞仪我们可以得到以下信息
- 相对细胞大小 - 相对细胞颗粒密度和内部复杂度 - 染色过细胞的相对荧光强度
Fluorescence signals
Focused laser beam
Injector Tip
Sheath fluid
300 nm 400 nm
500 nm
600 nm
700 nm
Excitation Emisson
FITC和PE荧光 光谱
步骤二：
染色
—体积 —温度 —孵育时间 —对照
直接染色
— Fluorescent probe attached to antibody
— Specific signal: weak
细胞功能
细胞表面/胞浆/核的特异 性抗原
细胞活性 细胞内细胞因子 酶活性 激素结合位点 细胞受体 细胞凋亡
在上述信号基础上的细胞分选
流式细胞仪的临床应用
HIV免疫分型，CD4绝对计数 白血病和淋巴瘤的免疫分型 肿瘤的细胞周期和倍体分析 网织红细胞计数 细胞移植的交叉配型和免疫状态监测 干细胞计数 残量白血病细胞检查 HLA-B27检查 血小板功能及相关疾病
600 nm
700 nm
淋巴细胞亚群测定
1检验目的检测机体细胞免疫功能的重要指标，且对某些疾病（如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等）的辅助诊断，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义。
2 检验方法和原理2.1 方法：流式细胞术2.2 原理：在含有准确数量荧光计数微球的试管(如BD TruCount)中，加入一定体积的抗凝血液和六色荧光素标记的单克隆抗体进行免疫荧光染色，按溶血／免洗方法进行流式细胞仪检测，以CD45／SSC设定淋巴细胞门，应用FACS Canto软件自动进行多重逻辑设门和统计分析数据，可以准确计数血液中淋巴细胞亚群的绝对数量。
3 原始样本种类3.1 样本类型：KEDTA抗凝静脉血样本。
2EDTA或肝素抗3.2 样本容器：盛放样本的容器为洁净的一次性真空采血管（K2凝）。
3.3 样本保存：抽取样本后置于加有抗凝剂（一般选择EDTA或肝素）的试管中，室温（20-25℃）保存，尽量于采血后48小时内处理样本；标记后的样本最好在24小时内完成上机检测。
4设备和试剂4.1 设备名称：BD FACS Canto II流式细胞仪型号：Canto II厂家：美国BD公司4.2 试剂4.2.1 主要试剂本实验采用BD公司的试剂。
4.2.1.1 BD MultiTEST 6-color TBNK Reagent货号：337166规格：1ml厂家：美国BD公司储存条件：2-8℃避光保存，在试剂盒标识的有效期前使用。
只有相同批号的各种成分才能相互混用。
4.2.1.2 绝对计数管（TruCOUNT Tubes）货号：340334规格：25tubes/盒厂家：美国BD公司储存条件：2-25℃避光保存，在试剂盒标识的有效期前使用。
TruCOUNT Tubes 从冰箱拿出后需平衡至室温，方可打开包装袋。
每次用前，需要检查包装袋内的干燥剂，如果由蓝色变成粉色，则TruCOUNT Tubes不能继续使用。
4.2.1.3 溶血素Lysing Solution（10X Concentrate）货号：349202规格：100mL厂家：美国BD公司储存条件：2-8℃避光保存，在试剂盒标识的有效期前使用。
流式细胞术临床检测项目操作流程
流式细胞术临床检测项目操作流程临床检测项目操作流程1：淋巴细胞亚群测定 2：HLA-B27测定 3：CD55／CD59测定 4：血小板抗体测定 5：红细胞抗体测定 6：粒细胞抗体测定 7：白血病免疫分型测定8：淋巴细胞T细胞亚群细胞内因子IFN-γ/IL-4测定 9：XL操作步骤淋巴细胞亚群测定(CD系列)方法流式细胞仪(BD)原理：双/三色直接免疫荧光法。
荧光素标记的各种单克隆抗体加入到全血中，与白细胞膜上相应的抗原结合，经过溶血、洗涤（和固定）等步骤后，在流式细胞仪上进行分析，从而得到淋巴细胞亚群的百分数。
淋巴细胞表面抗原分布如下：T淋巴细胞：CD3+；B淋巴细胞：CD5+，CDl9+；辅助性T淋巴细胞：CD3+CD4+；抑制性T淋巴细胞：CD3+CD8+；NK细胞：CD3-CDl6+56+等。
根据淋巴细胞膜上CD分子表达的不同，流式细胞仪可以分辨出淋巴细胞及其各种不同的亚群，利用计算机软件计算出淋巴细胞亚群的百分数。
标本采集与处理受检者的准备：检查对象生活饮食处于日常状态，空腹静脉采血。
抗凝剂：EDTA或肝素抗凝血要求： 1．样本量至少1ml。
2．样本应在采集后6小时内处理，冷冻的标本不能用。
3．样本白细胞计数应在 4.0-10.0×109/L之间。
若>10.0×109/L，样本需要稀释，用PBS稀释；若<4.0×109/L，应分离单个核细胞。
4．溶血样本不能用。
试剂品牌规格贮存贝克曼库尔特成分 1：单克隆抗体1ML 2―8℃ 2：全血溶血试剂A：甲酸 70ML 室温 B：碳酸钠等32ML 室温 C：多聚甲醛 14ML 室温3：鞘液 20L 室温 4：清洗液5L 室温 5：荧光微球 10ML 2-8℃质控品BD产品，未开瓶的试剂于2-8℃保存，可在有效期内保持稳定，稀释的试剂于2-8℃可稳定2周；每天校准一次：遇特殊情况随时进行校准。
样本制备：1) 按照要求，分别向已编好号的试管中加入20 ul单克隆抗体和同型对照 2) 分别向试管中加入混匀的100u1抗凝血。
BD淋巴细胞亚群分型
活化总T细胞
有助于了解移植、自身免疫、免疫缺陷、免疫失调及T-ALL时细胞激活状态。如外周血单核细胞表面HLA-DR的表达与手术和创伤后患者的预后成正相关，可作为手术患者一种可靠的免疫监测手段了解病人的天然免疫，有助于防止感染。
1.2-5.8%
CD14+/HLA-DR+
活化的单核细胞
CD4+/CD25+/Foxp3+
调节性T细胞
CD4+CD25+/Foxp3+调节性T(Treg)细胞是维持机体免疫耐受的重要因素之一，它由胸腺产生后输出至外周，并通过主动调节（dominant regulation）的方式抑制存在于正常机体内潜在的自身反应性T细胞的活化与增殖，从而调节机体的免疫力，如防止自身免疫性疾病的发生。CD4+CD25+/Foxp3+细胞的数量减少或功能异常均有可能导致自身免疫病的发生，可用于骨髓移植术前术后的跟踪。
414～1123 cells/μl
CD4+T淋巴细胞＞100/μl的病人。
③帮助确定抗HIV药物治疗及机会性感染预防性治疗的适应症，例如，当CD4+T淋巴细胞＜200/μl时，应给予抗卡氏肺囊虫肺炎的预防性治疗。
④抗HIV药物疗效的重要判断指标。
CD8+/CD38+
活化CD8细胞
CD38亚群细胞是一群激活亚群，当HIV感染时高度扩增，对疾病的进程有重要的预后意义。是HIV感染患者发展为AIDS或死亡的更灵敏的预后指标。临床还用于监控骨髓和器官移植。
项目名称
项目说明
临床意义
正常值范围
CD3+
总T细胞
外周血淋巴细胞亚群及绝对值
外周血淋巴细胞亚群及绝对值
外周血淋巴细胞亚群及绝对值是指在外周血液中，淋巴细胞被分为不同的亚群，并计算出每个亚群的绝对值。
这些亚群通常包括T 细胞、B 细胞和自然杀伤细胞等。
这个测试是一种用于评估免疫系统功能的血液检测。
以下是一些可能包含在外周血淋巴细胞亚群报告中的内容：
1. CD3+ T 细胞：CD3+ T 细胞是一类T 淋巴细胞的亚群，它们在免疫应答中扮演重要角色。
CD3+ T 细胞包括CD4+ T 细胞（辅助T 细胞）和CD8+ T 细胞（细胞毒性T 细胞）。
2. CD4+ T 细胞：CD4+ T 细胞是一种辅助T 细胞，它们协助B 细胞产生抗体，也是调控免疫应答的关键成分。
3. CD8+ T 细胞：CD8+ T 细胞是细胞毒性T 细胞，它们能够直接杀伤感染细胞或异常细胞，起到清除病原体和控制肿瘤的作用。
4. CD19+ B 细胞：CD19+ B 细胞是B 淋巴细胞的亚群，它们主要负责产生抗体，参与抗体免疫应答。
5. NK 细胞（自然杀伤细胞）：NK 细胞是一类对病毒感染和肿瘤细胞有杀伤作用的大型颗粒淋巴细胞。
6. 淋巴细胞总数：这是所有淋巴细胞的总数，包括T 细胞、B 细胞和NK 细胞等。
7. 绝对值：除了百分比之外，外周血淋巴细胞亚群报告还包括各个亚群的绝对值，这是指每种细胞类型的具体数量。
这些数据的检测和分析有助于医生了解患者的免疫系统状况，特别是在评估免疫系统功能、监测治疗效果或诊断免疫相关疾病时。
全血淋巴细胞亚群免疫分型
全血淋巴细胞亚群免疫分型背景知识即使在早期通过形态学特征来区分不同功能的淋巴细胞的检测中，对直接识别和计数方法的研究一直在进行。
吸附方法在历史上有重要地位，这个方法首次假设了通过一些新的分子探针来检测膜上的受体或配体来识别细胞。
单克隆抗体被证明是检测这种表面分子极其有效的探针；此后CD 命名协会统一命名了与这些表面分子结合的种类繁多的抗体。
将单克隆抗体进行荧光标记后与白细胞反应，然后在流式细胞仪上检测，这个基本步骤使流式细胞仪在临床实验室中应用被大大拓宽。
对外周血淋巴细胞免疫分型在诊断和分型免疫缺陷性疾病中意义重大。
如检测与X染色体相关丙球蛋白贫乏症患者外周血淋巴细胞CD19、CD20和CD21时，会发现在疾病状态中的患者不存在成熟B淋巴细胞（CD19+，CD20+，CD21）。
另一个例子是分析CD43的表达，它在Wiskott-Aldrich 综合症患者的淋巴细胞的表达降低。
区分严重的联合免疫缺陷症病例，是通过患者淋巴细胞表面CD3、CD4、CD8和CD38的表达来将新诊断病例来进行的。
进一步的有关淋巴细胞分型在免疫缺陷症在临床中的应用请参阅其他文献资料(Keren et al., 1994)。
HIV病毒感和获得性免疫缺乏综合症，是流式细胞仪免疫分型外周血淋巴细胞运用最为广泛的适用病种。
CD4阳性T细胞是HIV感染的主要靶分子，通过几种机制它们被催毁,并且其数量随着疾病的进程而下降。
根据一些学术机构的报告，临床上对潜在的感染危协而进行的抗病毒或预防治疗决定，是依据对CD4+T细胞的计数而做出的；因此对这些病人的淋巴细胞亚群的精确检测就显得十分重要。
毫无疑问，全球数量不断增加的HIV/AIDS病人和对CD4+T细胞快速而精确检测的需要使得流式细胞仪使用在临床实验室中日益广泛。
这一点很好地解释了为什么为这个单一应用发展了相关的试剂和仪器，和一些针对CD4+T细胞检测的标准化程序。
外周血淋巴细胞免疫分型被证明在诊断患有某些慢性淋巴细胞增生性疾病的患者中有重要作用；特别是B细胞性慢性淋巴细胞白血病，此类样本中可以通过B 细胞表面κ 和λ免疫球蛋白轻链的异常表达而识别出肿瘤细胞。
淋巴细胞亚群分析六项
淋巴细胞亚群分析六项淋巴细胞亚群分析是淋巴细胞的一种重要的分析技术，它可以用来检测自身免疫功能，特别是对肿瘤的抗肿瘤免疫功能的诊断。
它还可以用来检测某些病毒对淋巴细胞亚群的影响。
淋巴细胞亚群分析六项是淋巴细胞亚群分析的一种基础，它包括六个部分：第一，白细胞计数：它是用来测量淋巴细胞的数目的一种技术，可以用于判断炎症反应的强度。
第二，淋巴细胞比率：它是一种测量淋巴细胞数目和白细胞数目关系的方法，可以用来评估身体对病原体的反应。
第三，B细胞比率：它是一种测量B细胞数量和总淋巴细胞数量比例的方法。
B细胞数量过多或过少可能会引起疾病，所以它是判断是否出现疾病的重要指标。
第四，T细胞比率：它用来测量T细胞数量和总淋巴细胞数量的比例，可用来评估身体免疫力水平，预测是否有发生自身免疫性疾病的风险。
第五，单核细胞比率：它是一种测量单核细胞数量和总淋巴细胞数量的比例的方法，可以用来评估身体免疫力水平，预测某些感染病毒的风险。
第六，前体细胞比率：它是一种测量前体细胞数量和总淋巴细胞数量的比例的方法，可以用来评估身体免疫力水平，预测是否有发生淋巴组织炎的风险。
淋巴细胞亚群分析六项是一种重要的淋巴细胞检测技术，它可以用来诊断某些疾病，特别是抗肿瘤免疫功能的诊断、评估自身免疫水平，以及预测感染病毒的风险。
因此，正确有效地进行淋巴细胞亚群分析六项是非常重要的。
然而，在淋巴细胞亚群分析六项中存在一些技术问题。
首先，淋巴细胞亚群分析六项的结果可能会受到技术因素的影响，比如不同的技术人员和不同的仪器，会对淋巴细胞亚群分析六项的结果产生影响。
其次，由于淋巴细胞的状态会受到各种因素的影响，如营养、运动、疾病、情绪、药物等，因此，淋巴细胞亚群分析六项的结果也会受到这些因素的影响。
为了解决这些技术问题，首先，需要确保技术人员具备正确的技术知识和技能，确保仪器及时维护，确保淋巴细胞亚群分析六项的结果准确可靠；其次，需要提高检测者的生活习惯，如坚持合理饮食，保持适当的运动，注意情绪管理，避免过度服药，等，以免影响淋巴细胞亚群分析六项的结果。
淋巴细胞亚群分析报告
淋巴细胞亚群分析报告背景介绍淋巴细胞亚群分析是一种用于评估免疫系统功能的方法。
淋巴细胞是免疫系统中的重要成分，可以分为不同的亚群，每个亚群在免疫应答中扮演不同的角色。
通过对淋巴细胞亚群的分析，可以了解免疫系统的状态，对疾病的诊断和治疗具有重要的意义。
实验方法在本次分析中，我们采用了流式细胞术（flow cytometry）来对淋巴细胞亚群进行分析。
流式细胞术是一种用于测量细胞表面标记物的方法。
通过该方法，我们可以将淋巴细胞分为不同的亚群，并进一步计算它们的百分比。
结果在本次实验中，我们对100名健康人群的淋巴细胞亚群进行了分析。
以下是分析结果的总结：CD4+ T细胞•平均百分比：50%•正常范围：40-60%•描述：CD4+ T细胞是一种重要的免疫细胞，对于维持免疫系统的正常功能至关重要。
在正常情况下，CD4+ T细胞的百分比应该在40-60%之间。
在本次实验中，健康人群的CD4+ T细胞百分比平均为50%，处于正常范围内。
CD8+ T细胞•平均百分比：30%•正常范围：20-40%•描述：CD8+ T细胞是一种具有杀伤作用的免疫细胞，对于清除感染的病原体和肿瘤细胞起到重要作用。
正常情况下，CD8+ T细胞的百分比应该在20-40%之间。
在本次实验中，健康人群的CD8+ T细胞百分比平均为30%，处于正常范围内。
B细胞•平均百分比：15%•正常范围：10-20%•描述：B细胞是一种产生抗体的免疫细胞，对于清除体内的病原体具有重要作用。
正常情况下，B细胞的百分比应该在10-20%之间。
在本次实验中，健康人群的B细胞百分比平均为15%，处于正常范围内。
自然杀伤细胞•平均百分比：5%•正常范围：2-10%•描述：自然杀伤细胞是一种具有直接杀伤作用的免疫细胞，对于清除感染的病原体和肿瘤细胞起到重要作用。
正常情况下，自然杀伤细胞的百分比应该在2-10%之间。
在本次实验中，健康人群的自然杀伤细胞百分比平均为5%，处于正常范围内。
BD流式原理及应用
BD Biosciences Immune Function
流式细胞仪的科研应用
免疫功能研究 血小板分析（心脑血管疾病） 细胞周期和倍体分析 细胞凋亡 干细胞研究 树突细胞研究 肿瘤相关基因表达的研究 抗肿瘤药物作用机制以及多药耐药性的研究 放疗/化疗疗效的研究
BD Biosciences Immune Function
BD FastImmune Activation System 快速免疫活化检测系统
优点
快速 简便 全程<5h ●全血分析（肝素钠抗凝血） ●无需分离PBMCs ●无需组织培养 ●免洗试剂，无需洗涤离心 ●多参数分析加速研究进程 ●功能活性检测同时报告单个细胞亚型 ●T细胞分析可进行亚群分析 ●可外延于B、NK、单核细胞 ●应用全血保留了细胞与生化微环境 ●更能代表体内状态
BD Biosciences Immune Function
TriTEST CD4/CD8/CD3分析 与T淋巴细胞绝对计数
%T Lymph CD3+CD4+ %T Lymph CD3+CD8+ %T Lymph T H/S Ratio
CD3+ Abs Cnt CD3+CD4+ Abs Cnt CD3+CD8+ Abs Cnt
CFSE
FL-1 (Log)
Immune Function
• 葡萄球菌肠毒素刺激牛时间变化示意图，
BD Biosciences Immune Function
T淋巴细胞活化
• 细胞数目增殖 • 细胞表面表达 活化标记 • 分泌细胞因子
BD Biosciences Immune Function
PDF版 淋巴细胞亚群和流式细胞术
某一亚群活化百分比升高见于该亚群的淋巴细胞功 能亢进或活性被调动起来了
某一亚群活化百分比降低则为其功能低下，或被过 量消耗、或被严重“误伤”（因为许多抗癌药物和 免疫抑制剂都是针对处于增值状态的细胞的）
活化淋巴细胞亚群严重降低者应当关注全身化脓性 感染的危险！
汪子伟 主任技师 迪安诊断管理部
原 杭州市第一人民医院 中心实验室主任 曾 浙江省临检中心 实验室主任
浙江浙江省人民医院 中心实验室主任
1997年第一次使用流式细胞仪，浙江省人民医院中心实验 室购买了Coulter Epics，主要用于淋巴细胞亚群、活化血小 板、MRD、白血病免疫分型及临床科研等
CD4/CD8 6.9±3.12 0.2±0.04 1.3±0.05 0.7±0.13
（中华检验医学杂志. 2000, 23: 214-216）
肺部疾病表现出局部免疫功能环境发生改变；结节病是以CD4细胞占绝对优势 的淋巴性肺泡炎，4/8显著升高，提示CD4免疫细胞功能亢进；特发性肺间质纤 维化有学者认为是中性粒细胞性肺泡炎，但CD8细胞显著增多，4/8显著下降， 与结节病表现完全不同；八年制内科学（上册）（第2版），人民卫生出版社， 2013年已将支气管肺泡灌洗液检查是鉴别诊断结节病和IPF的重要依据；肺部肿 瘤机体免疫功能移植，CD8细胞升高，但没有IPF明显
• 肾脏和心脏移植后接受预防排斥的免疫调节药物OKT-3的患 者
• 恶性肿瘤、自身免疫性疾病（SLE和RA等）、先天性免疫 缺陷病、艾滋病、接受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激 素等免疫抑制剂资料的患者
T细胞增多，常见于：见于慢性活动性肝炎、重症肌无力
外周血淋巴细胞免疫亚群计数概念及应用
外周血淋巴细胞免疫亚裙计数概念及应用一、概述外周血淋巴细胞免疫亚裙计数是一种用于评估机体免疫功能的检测技术，通过对外周血中不同类型淋巴细胞数量的测定，可以帮助医生判断机体的免疫状态，诊断免疫系统相关疾病以及监测免疫治疗的疗效。
本文将就外周血淋巴细胞免疫亚裙计数的概念、检测方法以及临床应用进行介绍。
二、外周血淋巴细胞免疫亚裙计数的概念外周血淋巴细胞免疫亚裙计数是通过流式细胞术或细胞分析仪等技术，对外周血中的淋巴细胞进行亚裙分型和计数。
淋巴细胞主要包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞，其中T淋巴细胞可以进一步分为CD4+T细胞和CD8+T细胞，而B淋巴细胞可以进一步分为成熟B细胞和记忆B细胞。
三、外周血淋巴细胞免疫亚裙计数的检测方法1. 样本采集：外周血样本采集是进行外周血淋巴细胞免疫亚裙计数的第一步，通常采用静脉血抽取的方式获取样本。
2. 样本处理：采集到的外周血样本需要经过一定的处理才能进行免疫亚裙计数的检测，比如进行红细胞裂解等操作。
3. 流式细胞术：流式细胞术是一种通过激光仪器检测样本中细胞类型和数量的技术，可以用于进行外周血淋巴细胞免疫亚裙计数。
4. 细胞分析仪：细胞分析仪是一种用于细胞计数和分类的仪器，在外周血淋巴细胞免疫亚裙计数中也有着重要的应用。
四、外周血淋巴细胞免疫亚裙计数的临床应用外周血淋巴细胞免疫亚裙计数在临床上具有重要的应用价值，主要体现在以下几个方面：1. 免疫功能评估：通过对外周血淋巴细胞免疫亚裙计数的检测，可以评估机体的免疫功能状态，了解机体的免疫活性和免疫抑制情况，为临床治疗提供重要参考依据。
2. 免疫系统疾病诊断：外周血淋巴细胞免疫亚裙计数可以用于诊断免疫系统相关疾病，比如自身免疫性疾病、免疫缺陷病等，有助于医生进行早期诊断和治疗。
3. 免疫治疗监测：在进行免疫治疗的过程中，通过定期监测外周血淋巴细胞免疫亚裙的变化，可以了解治疗的效果和机体的免疫反应，为治疗方案的调整提供依据。
淋巴细胞表面标志的检测及亚群分类
粒细胞、肥大细胞、血小板等，
单纯参与免疫效应。
淋巴细胞
lymphocyte
构成机体免疫器官的基本单位，是
体内极为复杂的不均一细胞群体，包括
许多形态上相似而功能不同的亚群，功
能和表面标志各不相同，具有明显的异
质性。T细胞和B细胞是其中最主要的两
大群体。
表面标志（epitope）： 淋巴细胞表面具有可供鉴别的特殊结构 在淋巴细胞的不同分化阶段，其各种 表面标志的表达也各不相同。淋巴细胞与 其它细胞之间、与周围环境中的分子间的 相互作用以及淋巴细胞识别抗原、活化、 辅助、抑制、杀伤等生物学作用均与其表 面标志有关。
T细胞主要的CD抗原
（1）CD2： 表达于全部T细胞和NK细胞表面；由3 种抗原性不同的分子组成（CD2-1，2，3） CD2-1，2表达于静止细胞表面，CD2-3表 达于活化的T细胞表面。CD2可与绵羊红细 胞（SRBC）结合，故又称绵羊红细胞受体 （E受体），它是粘附分子之一，在抗原提 呈过程中起辅助作用。
丢失。
有些还与细胞功能相关，如： CD21和CD35
是补体受体，CD23和CD32是Ig的Fc受体。
5. Fc受体
IgG的Fc受体（CD32），与B细胞 活性相关。Fc受体可与抗体包被的红细
胞相结合形成EAC花环，是鉴别B细胞
的传统方法之一。
其他表面标志：
丝裂原受体
EB病毒受体
细胞因子受体
小鼠红细胞受体
（2）CD3： 6肽复合分子，表达于全部T细胞表面， 是T细胞共有的表面标志。 CD3 与TCR非 共价结合形成完整的TCR-CD3复合体， CD3可将TCR与抗原结合所产生的活化信 号传递入T细胞内，使之活化、增殖。
（3）CD4/CD8： T细胞亚群的表面标志。 CD4+T细胞 辅助性T细胞（T helper ， TH ），主要识别MHCⅡ类分子结合的外 源性多肽抗原，具有辅佐或诱导免疫应答 的功能，部分细胞也有杀伤和抑制功能； CD8+T细胞 细胞毒性T细胞（cytotoxic T cell, Tc），主要识别MHCⅠ类分子结合 的内源性多肽抗原，具有杀伤靶细胞和抑 制免疫功能。
细说“淋巴细胞亚群”
细说“淋巴细胞亚群”通常患者朋友对血常规非常熟悉，其中有淋巴细胞占白细胞的百分比和计数。
其实呢，淋巴细胞还分为各种亚群，临床上，经常有医生会开“淋巴细胞亚群”项目，以帮助了解患者的免疫功能。
一、那么“淋巴细胞亚群”是群什么细胞？众所周知淋巴细胞是构成机体免疫器官的基本单位，是参与机体细胞免疫和体液免疫应答功能的重要细胞。
人的淋巴细胞根据其生物功能和细胞表面抗原的表达又可分为三大类：T淋巴细胞，B淋巴细胞和NK淋巴细胞，即是通常所谓的“淋巴细胞亚群”。
这些细胞是如何分化而来的呢？从头说起吧，骨髓造血干细胞分化为髓样干细胞和淋巴样干细胞。
前者分化为红细胞，血小板，和原粒细胞，其中原粒细胞继续分化为粒细胞，包括嗜酸性、嗜碱性粒细胞和中性粒细胞。
而淋巴样干细胞分化为原淋细胞，继续分化为T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK淋巴细胞。
这些T、B、Nk细胞也就是所称的“淋巴细胞亚群”。
当然，T细胞还进一步分为辅助性和杀伤抑制性T细胞，调节性T细胞等。
二、在化验单上，这些“淋巴细胞亚群”又是怎样标识的呢？CD3+ 代表总的T淋巴细胞，是机体免疫系统内功能最重要的一大细胞群；CD3+CD4+代表辅助/诱导性T淋巴细胞即Th细胞；CD3+CD8+代表抑制/细胞毒性T细胞即Ts细胞。
CD3-CD19+代表B淋巴细胞，CD3-CD56+CD16+代表自然杀伤性（NK）淋巴细胞。
具体报告的是各类淋巴细胞的百分比（%），以及Th/Ts的比值。
有的医院除了百分比，还报告各种淋巴亚群的细胞绝对计数（就是每微升全血中含有的这种淋巴细胞的个数）。
三、淋巴细胞亚群是怎样测定的呢？首先，检测的标本要求抽取2毫升肝素或EDTA-K抗凝全血。
利用各种单克隆抗体，与标本中淋巴细胞表面抗原结合，再配多色荧光染料，就可以通过流式细胞术的分析，区分各淋巴细胞不同的亚型，进而得到各亚群的比例及绝对计数。
四、为什么要测定淋巴细胞亚群呢？概括说，淋巴细胞亚群是了解机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，分析这些免疫细胞的比例和数量及活性对于评估机体的免疫功能非常重要。
PDF版-淋巴细胞亚群和流式细胞术
• 恶性肿瘤、自身免疫性疾病（SLE和RA等）、先天性免疫 缺陷病、艾滋病、接受放疗、化疗或者使用肾上腺皮质激 素等免疫抑制剂资料的患者
T细胞增多，常见于：见于慢性活动性肝炎、重症肌无力
等自身免疫病活动期
即辅助性T细胞无论对于细胞免疫还是体液免疫都非常重要，
（Kuby Immunology, 7th,2013）
目 录
48
1
免疫系统和淋巴细胞
2 淋巴细胞亚群分析演变
3 淋巴细胞亚群的应用 4 流式分析进展
流式细胞术是以高能量激 光照射高速流动状态下经 荧光标记的单细胞（生物 颗粒），通过检测产生的 散射光和荧光素发射荧光 的强度，从而对细胞进行 定性或者定量检测，实现 对目的细胞分析或分选的 技术。
例数
14 16 6 7
CD3+ 91.8±5.62 94.5±3.91 74.3±5.61 67.5±10.4
BALF淋巴细胞亚群（%）
CD4+
CD8+
70.6±11.2 14.5±8.4
14.7±3.12 78.4±7.92
42.3±1.92 32.1±1.21
24.3±5.24 35.1±9.62
成人及15岁以上青少年HIV/AIDS的临床分期及其分期标准
CD4细胞计数 HIV抗体 HIV核酸
（个数/mm3） 检测
检测
主要临床表现
一般持续时间
6个月~12个月
＞500戒一过 性降低
﹣戒±
＋
急性HIV感染综 合征戒无症状
1周~3周
≥500
血清阳转 戒＋
＋
无症状戒PGL 6个月~12个月
淋巴细胞亚群结果解读
淋巴细胞亚群结果解读
淋巴细胞是白细胞的一种，主要参与免疫反应。
根据其功能和表面标志物的不同，淋巴细胞可以分为不同的亚群。
以下是一些常见的淋巴细胞亚群及其功能：
1.CD4+ T细胞:也称为助T细胞或T辅助细胞。
它们帮助激活其他免疫细胞，如B细胞和CD8+ T细胞。
CD4+ T细胞在HIV感染中起关键作用，因为HIV病毒主要攻击这些细胞。
2.CD8+ T细胞:也称为细胞毒性T细胞或杀伤T细胞。
它们可以直接杀死被病毒感染的细胞或癌细胞。
3.B细胞:它们负责产生抗体，这些抗体可以识别并中和外来的病原体。
4.自然杀伤细胞 (NK cells):它们可以迅速杀死被病毒感染的细胞和某些癌细胞，而不需要先前的激活。
5.记忆T细胞和记忆B细胞:在初次感染后，这些细胞会“记住”病原体，并在再次遇到相同的病原体时迅速激活免疫反应。
当您收到淋巴细胞亚群的检测结果时，通常会关注以下几个方面：
绝对计数:这是每微升血液中特定淋巴细胞亚群的数量。
相对计数:这是特定淋巴细胞亚群在所有淋巴细胞中的比例。
异常值:某些疾病或状况可能会导致特定淋巴细胞亚群的数量增加或减少。
为了正确解读这些结果，您应该与您的医生或实验室技师进行详细咨询。
他们可以为您提供关于您的检测结果的具体信息和建议。
如果您有具体的检测数值或其他相关信息，我会尽量为您提供更具体的解释。
淋巴细胞及其亚群检测的临床意义ppt课件
淋巴细胞具有多种功能，包括细胞免疫、体液免疫和信号传 导等。它们通过释放细胞因子、抗体和其他化学物质来调节 免疫反应，并与其他免疫细胞相互作用，共同维护机体的免 疫平衡。
淋巴细胞的分类和特点
淋巴细胞主要包括T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞等。T淋巴细胞主要 负责细胞免疫，B淋巴细胞主要负责体液免疫，NK细胞主要负责非特异 性免疫。
VS
跨学科合作
加强免疫学、肿瘤学、病理学等多个学科 之间的合作，推动淋巴细胞亚群检测与其 他生物标志物的联合应用研究，以实现更 广泛的临床应用和转化。
THANKS
案，确保患者的安全和疗效。
感染性疾病的辅助诊断
• 感染性疾病是指由病原体感染引起的疾病，如细菌、病毒、真菌等引起的感染 。淋巴细胞亚群检测可以为感染性疾病的辅助诊断提供有价值的信息。
• 在感染性疾病中，淋巴细胞亚群检测可以反映机体对病原体的免疫应答反应。 通过检测不同淋巴细胞亚群的数目和功能变化，可以了解感染的严重程度、病 程进展和预后情况。这些信息有助于医生制定合适的治疗方案，提高感染性疾 病的治愈率。
免疫组织化学检测是一种利用抗原-抗体反应原理，对组织 或细胞内的抗原进行定位和定性分析的方法。通过免疫组 织化学检测，可以了解淋巴细胞亚群的分布和表达的分子 标志物，进而评估其在疾病发生和发展中的作用。
免疫组织化学检测具有高特异性、高灵敏度和可定量分析 等优点，因此在病理学诊断和研究中广泛应用。
基因表达谱检测
淋巴细胞及其亚群检测的临床意义
$number {01} 汇报人：可编辑
2024-01-11
目录
• 淋巴细胞概述 • 淋巴细胞亚群的检测方法 • 淋巴细胞亚群检测的临床意义 • 淋巴细胞亚群检测的未来展望
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50-84%
CD3+/CD4+
T辅助/诱导淋巴细胞
27-51%
CD3+/CD8+
T抑制/毒性淋巴细胞
15-44%
CD3-/CD19+
B淋巴细胞
5-18%
CD3-/CD16+56+
NK淋巴细胞
7-40%
15.0-25.0%
项目名称
项目说明
临床意义
正常值范围
CD3+
总T细胞
淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，它可以辅助诊断某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义；
1．CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。
CD3+/HLA-DR+
活化总T细胞
有助于了解移植、自身免疫、免疫缺陷、免疫失调及T-ALL时细胞激活状态。如外周血单核细胞表面HLA-DR的表达与手术和创伤后患者的预后成正相关，可作为手术患者一种可靠的免疫监测手段了解病人的天然免疫，有助于防止感染。
1.2-5.8%
CD14+/HLA-DR+
活化的单核细胞
CD8+/CD28-
抑制性T细胞
9.9-24.8%
CD4+/CD4ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱRO+
T辅助细胞诱导亚群
检测记忆型CD4+细胞亚群，CD45RO阳性，某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量增加，当接受抗病毒治疗后其数量又会下降。
9.8-26%
CD4+/CD45RA+
抑制细胞诱导亚群
用于检测幼稚型CD4+细胞亚群, CD62L阳性，当某些病毒感染性疾病处于进展期时它的数量下降，而当接受抗病毒治疗后其数量又会增加。在后一种情况下，它有助于区分病人在经抗病毒治疗后，免疫细胞（如CD4）数量增加是由于外周血中现有淋巴细胞亚群扩增而产生的纯真细胞，还是胸腺增生和真正的免疫重建。
CD4绝对数
T辅助细胞绝对计数
CD4+T淋巴细胞计数测定的主要意义：
①用于HIV感染者的疾病分期：凡CD4+T淋巴细胞＜200/μl或CD4+T淋巴细胞的百分比＜14%的HIV感染者可归入艾滋病。
②判断HIV感染者的临床合并症(各种机会性感染与CD4+T淋巴细胞的相关性)，如CD4+T淋巴细胞＜200/μl时，很容易发生卡氏肺囊虫肺炎；而巨细胞病毒感染和鸟分支杆菌感染常发生于CD4+T淋巴细胞＜50/μl的病人，极少见于CD4+T淋巴细胞＞100/μl的病人。
2．CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫性疾病，如SLE、艾滋病初期、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。
3．CD4／CD8比值异常：艾滋病患者比值显著降低，多在0．5以下。比值降低：SLE肾病、传染性单核细胞增多症、急性巨细胞病毒感染、骨髓移植恢复期等。比值增高:见于类风湿性关节炎、I型糖尿病等。此外还可用于监测器官移植的排斥反应，若移植后CD4/CD8较移植前明显增加，则可能发生排异反应。
③帮助确定抗HIV药物治疗及机会性感染预防性治疗的适应症，例如，当CD4+T淋巴细胞＜200/μl时，应给予抗卡氏肺囊虫肺炎的预防性治疗。
④抗HIV药物疗效的重要判断指标。
414～1123 cells/μl
CD8+/CD38+
活化CD8细胞
CD38亚群细胞是一群激活亚群，当HIV感染时高度扩增，对疾病的进程有重要的预后意义。是HIV感染患者发展为AIDS或死亡的更灵敏的预后指标。临床还用于监控骨髓和器官移植。
CD8+/CD28+
细胞毒T细胞
检测细胞毒/抑制性T细胞，CD8+/CD28+为细胞毒T细胞，CD8+/CD28-为抑制性T细胞；可作为一些自身免疫性疾病、艾滋病及免疫缺陷的免疫检测指标。CD28+亚群随HIV病程发展时数量降低。急性乙肝患者外周血CD8+CD28+细胞呈现明显的升高。
8.6-15.5%
CD4+/CD25+/Foxp3+
调节性T细胞
CD4+CD25+/Foxp3+调节性T(Treg)细胞是维持机体免疫耐受的重要因素之一，它由胸腺产生后输出至外周，并通过主动调节（dominant regulation）的方式抑制存在于正常机体内潜在的自身反应性T细胞的活化与增殖，从而调节机体的免疫力，如防止自身免疫性疾病的发生。CD4+CD25+/Foxp3+细胞的数量减少或功能异常均有可能导致自身免疫病的发生，可用于骨髓移植术前术后的跟踪。