第十六章 药物分析新技术PPT课件
合集下载
药物分析PPT课件PPT课件
15
第15页/共24页
第四节药品检验工作的基本程序
一、 药品检验工作的基本要求
1 确保公正 2 不断提高业务水平 3 履行法定职能
16
第16页/共24页
第四节药品检验工作的基本程序
二、 药品检验工作的基本程序
（一） 取样
取样的基本原则是均匀、合理 取样应具有科学性、真实性和代表性 1.取样量 2.取样方法 3.注意事项 4.药材取样
中 间 体 半 成 品 检 验
成 品 检 验
20
第20页/共24页
第五节 药品生产企业质量管理简介
二、 化验室的基本设施与管理 （一）化验室基本设施
天平室、标准溶液室、理化检验室、仪器室、无菌室、 无菌检查准备室 、洗刷室、留样观察室、高温加热室、 中药标本室、试剂室、包材检验室、资料室、更衣室、 办公室等。
1
第1页/共24页
2
第2页/共24页
3
第3页/共24页
第一章
绪论
学习目标
• 掌握药品质量标准的主要内容及《中国药典（现行版）的体例和结构，明确药 品检验工作基本程序及其内涵要求；药品质量标准的主要内容，能够正确熟练 使用药典。
• 熟悉我国药品质量标准体系及药品检验工作的基本要求，对本课程在药学领域 中的地位和作用有初步认识；我国药品质量标准体系。
检查：包括有效性、均一性、纯度要求及安全性四 个方面
含量测定：测定药物中主要有效成分含量
18
第18页/共24页
第四节药品检验工作的基本程序
二、 药品检验工作的基本程序
（三） 检验记录及检验报告
1.检验记录 2.检验报告
（四） 结果判定与复检
19
第19页/共24页
第15页/共24页
第四节药品检验工作的基本程序
一、 药品检验工作的基本要求
1 确保公正 2 不断提高业务水平 3 履行法定职能
16
第16页/共24页
第四节药品检验工作的基本程序
二、 药品检验工作的基本程序
（一） 取样
取样的基本原则是均匀、合理 取样应具有科学性、真实性和代表性 1.取样量 2.取样方法 3.注意事项 4.药材取样
中 间 体 半 成 品 检 验
成 品 检 验
20
第20页/共24页
第五节 药品生产企业质量管理简介
二、 化验室的基本设施与管理 （一）化验室基本设施
天平室、标准溶液室、理化检验室、仪器室、无菌室、 无菌检查准备室 、洗刷室、留样观察室、高温加热室、 中药标本室、试剂室、包材检验室、资料室、更衣室、 办公室等。
1
第1页/共24页
2
第2页/共24页
3
第3页/共24页
第一章
绪论
学习目标
• 掌握药品质量标准的主要内容及《中国药典（现行版）的体例和结构，明确药 品检验工作基本程序及其内涵要求；药品质量标准的主要内容，能够正确熟练 使用药典。
• 熟悉我国药品质量标准体系及药品检验工作的基本要求，对本课程在药学领域 中的地位和作用有初步认识；我国药品质量标准体系。
检查：包括有效性、均一性、纯度要求及安全性四 个方面
含量测定：测定药物中主要有效成分含量
18
第18页/共24页
第四节药品检验工作的基本程序
二、 药品检验工作的基本程序
（三） 检验记录及检验报告
1.检验记录 2.检验报告
（四） 结果判定与复检
19
第19页/共24页
第十六章药物分析中的新技术新方法课件
快速检测和鉴定药物
对于一些复杂样品，如生物体液、组织等，传统方法难以进行分析，而新技术新方法能够更好地应对这些挑战。
应对复杂样品的分析挑战
新型色谱技术
总结词
高效液相色谱法是一种常用的分离分析技术，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点。
详细描述
高效液相色谱法使用高压泵将流动相泵入色谱柱，通过不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异实现分离。该方法可用于多种类型化合物的分离分析，如离子、极性分子、手性分子等。
一种基于分子光学散射效应的检测方法
拉曼光谱法是利用拉曼散射现象测量分子振动和转动能级的变化，从而推断出分子的结构和组成。在药物分析中，拉曼光谱法可用于快速鉴别药物的化学结构和成分，以及监测药物在生物体内的代谢过程。
一种基于原子核磁性质的检测方法
核磁共振法是利用原子核的磁性质，测量原子核自旋磁矩的变化，从而推断出分子的结构和组成。在药物分析中，核磁共振法可用于深入研究药物的化学结构和组成，以及监测药物在生物体内的动态变化。
除了药物分析，质谱法还被广泛应用于食品安全、环境监测、生物医学等领域。
质谱法的优点在于其高灵敏度、高分辨率和高通量，可以同时对多种化合物进行定性和定量分析，且分析速度快、准确度高。此外，质谱法还可以提供化合物的结构信息和分子量信息，有助于化合物的鉴定和分离。
质谱法的缺点在于其仪器设备昂贵、操作复杂和维护成本高。此外，对于某些复杂基质中的低浓度样品，质谱法的干扰和基质效应可能会影响分析结果的准确性和可靠性。
代谢组学技术概述：代谢组学技术是一种研究生物体内代谢产物的组成、变化和调控的技术。它通过对代谢产物的全面分析和鉴定，揭示生物体的代谢过程和功能机制。
新型药物分析方法展望
利用人工智能和机器学习技术，实现药物分析过程的自动化和智能化，提高分析效率和准确性。
对于一些复杂样品，如生物体液、组织等，传统方法难以进行分析，而新技术新方法能够更好地应对这些挑战。
应对复杂样品的分析挑战
新型色谱技术
总结词
高效液相色谱法是一种常用的分离分析技术，具有高分离效能、高灵敏度、高选择性等优点。
详细描述
高效液相色谱法使用高压泵将流动相泵入色谱柱，通过不同物质在固定相和流动相之间的分配系数差异实现分离。该方法可用于多种类型化合物的分离分析，如离子、极性分子、手性分子等。
一种基于分子光学散射效应的检测方法
拉曼光谱法是利用拉曼散射现象测量分子振动和转动能级的变化，从而推断出分子的结构和组成。在药物分析中，拉曼光谱法可用于快速鉴别药物的化学结构和成分，以及监测药物在生物体内的代谢过程。
一种基于原子核磁性质的检测方法
核磁共振法是利用原子核的磁性质，测量原子核自旋磁矩的变化，从而推断出分子的结构和组成。在药物分析中，核磁共振法可用于深入研究药物的化学结构和组成，以及监测药物在生物体内的动态变化。
除了药物分析，质谱法还被广泛应用于食品安全、环境监测、生物医学等领域。
质谱法的优点在于其高灵敏度、高分辨率和高通量，可以同时对多种化合物进行定性和定量分析，且分析速度快、准确度高。此外，质谱法还可以提供化合物的结构信息和分子量信息，有助于化合物的鉴定和分离。
质谱法的缺点在于其仪器设备昂贵、操作复杂和维护成本高。此外，对于某些复杂基质中的低浓度样品，质谱法的干扰和基质效应可能会影响分析结果的准确性和可靠性。
代谢组学技术概述：代谢组学技术是一种研究生物体内代谢产物的组成、变化和调控的技术。它通过对代谢产物的全面分析和鉴定，揭示生物体的代谢过程和功能机制。
新型药物分析方法展望
利用人工智能和机器学习技术，实现药物分析过程的自动化和智能化，提高分析效率和准确性。
药物分析课件
药物分析
广东医学院药学院
精选可编辑ppt
1
药物分析概论
绪论
药品质量标准与药典概况——药品质量研究的主 要内容与药典概况，药物分析工作的基本程序 药物的鉴别试验 ——鉴别试验项目及常用的鉴别 方法 药物的杂质检查——杂质的概念、来源和一般检 查方法 药物定量分析——定量分析样品前处理、各种定 量分析方法特点及验证 制剂分析——制剂分析的特点和一般方法
GCP是临床试验全过程的标准规定，包括 方案设计、组织实施、监查、稽查、记录、 分析总结和报告。
凡进行各期临床试验、人体生物利用度或生 物等效性试验，均须按本规范执行。
精选可编辑ppt
30
3.《药品生产质量管理规范》 GMP (Good Manufacture Practice)
/WS01/CL0053/58500.html
1.药品质量 Q 2.药品安全性 S 3.药品有效性 E 4.综合技术要求 M
精选可编辑ppt
41
三、药物分析的发展概略 实践经验
经典化学分析方法 色谱、光谱等传统仪器分析方法
色谱光谱联用、生物分析方法、 基因分析法等现代分析方法
精选可编辑ppt
42
四、药物分析课程的学习要求
1.药典的基本组成与正确使用及其在药物分
/WS01/CL0053/24466.html
为规范中药材生产，保证中药材质量， 促进中药标准化、现代化， 自2002年6 月1日起制订施行本规范。
本规范是中药材生产和质量管理的基本准
则，适用于中药材生产企业生产中药材(含
植物、动物药)的全精选过可编辑程ppt 。
35
GAP对中药材生产的产地生态环境、 种质和繁殖材料、 栽培与养殖管理、 采收与初加工、 包装、运输与贮藏、 人员和设备等提出明确的质量管理要 求。
广东医学院药学院
精选可编辑ppt
1
药物分析概论
绪论
药品质量标准与药典概况——药品质量研究的主 要内容与药典概况，药物分析工作的基本程序 药物的鉴别试验 ——鉴别试验项目及常用的鉴别 方法 药物的杂质检查——杂质的概念、来源和一般检 查方法 药物定量分析——定量分析样品前处理、各种定 量分析方法特点及验证 制剂分析——制剂分析的特点和一般方法
GCP是临床试验全过程的标准规定，包括 方案设计、组织实施、监查、稽查、记录、 分析总结和报告。
凡进行各期临床试验、人体生物利用度或生 物等效性试验，均须按本规范执行。
精选可编辑ppt
30
3.《药品生产质量管理规范》 GMP (Good Manufacture Practice)
/WS01/CL0053/58500.html
1.药品质量 Q 2.药品安全性 S 3.药品有效性 E 4.综合技术要求 M
精选可编辑ppt
41
三、药物分析的发展概略 实践经验
经典化学分析方法 色谱、光谱等传统仪器分析方法
色谱光谱联用、生物分析方法、 基因分析法等现代分析方法
精选可编辑ppt
42
四、药物分析课程的学习要求
1.药典的基本组成与正确使用及其在药物分
/WS01/CL0053/24466.html
为规范中药材生产，保证中药材质量， 促进中药标准化、现代化， 自2002年6 月1日起制订施行本规范。
本规范是中药材生产和质量管理的基本准
则，适用于中药材生产企业生产中药材(含
植物、动物药)的全精选过可编辑程ppt 。
35
GAP对中药材生产的产地生态环境、 种质和繁殖材料、 栽培与养殖管理、 采收与初加工、 包装、运输与贮藏、 人员和设备等提出明确的质量管理要 求。
药物分析全部课件PPT课件
分光光度法
总结词：应用广泛
详细描述：分光光度法在药物分析中应用广泛，可用于多种药物成分的分析，如 有机碱、有机酸、金属离子等。
电化学法
总结词
基于电化学反应的原理
详细描述
电化学法是基于电化学反应的原理进行药物 分析的方法，通过测量电化学反应过程中产 生的电流、电位等参数来进行分析。
电化学法
01
总结词：高灵敏度
药物制剂分析涉及到药物制剂的制备、质量控制和储存等过程，需要运 用多种药物分析的方法和技术，如化学分析、光谱分析、色谱分析等。
药物制剂分析有助于保证药物制剂的质量和稳定性，提高药物制剂的安 全性和有效性，促进药物制剂产业的发展。
中药质量控制
中药质量控制是药物分析的重要应用之一，通过中药质量控制可 以对中药的成分、安全性、有效性等进行检测和评估，确保中药 的质量符合规定标准。
药物分析新技术
液相色谱-质谱联用技术
该技术结合了液相色谱的高分离能力和质谱的鉴定能力，广泛应用 于药物成分的分离、鉴定和定量分析。
微流控芯片技术
通过在微小芯片上集成反应、分离和检测等功能，实现快速、高效 的药物分析，尤其适用于生物样品和临床诊断。
拉曼光谱技术
利用拉曼散射效应对物质进行无损检测，具有高灵敏度、高分辨率 和高通量的特点，适用于药物成分的结构分析和鉴别。
02
详细描述：电化学法具有高灵敏度，可检测痕量药 物成分。
03
总结词：快速分析
电化学法
• 详细描述：电化学法通常具有较快的分析 速度，适用于药物制剂中有关物质的快速 检查。
电化学法
总结词：仪器简单
详细描述：电化学法的仪器结构简单，操作方便，适 用于现场快速分析。
药物分析第十六章药品质量控制中的现代分析方法与技术优秀课件
➢应用示例
＊利巴韦林及各中间体的定量分析
电泳条件 石英毛细管（未涂层） 57cm×50µm，优化选择25mmol/L磷酸 二氢钠-12.5mmol/L硼砂-25mmol/L SDS （pH7.8）为电泳介质，操作电压20kV， 柱温23℃，测定波长205nm
本文建立的优选方法可在11min内测定 利巴韦林及中间体含量，与HPLC测定 需1h相比，更快速。本方法也可用于利 巴韦林制剂中中间体的控制
-
+
Flow, EOF
+-
EOP + -
-
+
Electrophoresic
------------------+++++++++++++++++++
Flow,EPF
a. 毛细管中电渗流呈“塞式流”流
型
b. HPLC柱中压力驱动呈抛物线流型
阳
3
阴
5
4
2
6
1
7
+ 30kV -
毛细管电泳装置示意图
➢ 1.高压电源 2.光电倍增管 3.液冷温控毛 细管 4.光源 5.数据采集 6.缓冲液/样品 7.缓
pharmaceutical analysis
⊙Near infrared spectrometry,NIRS
⊙Nuclear magnetic resonance spectrometry,NMRS
⊙X-ray diffraction method
HTC (Hyphenated Techniques in Chromatography) GC-FTIR
《药物分析》课件
微纳药物分析技术
微纳药物分析技术是一种将微纳 米科学与药物分析相结合的技术 ，具有高灵敏度、高选择性和高
分辨率的特点。
该技术利用微纳尺度上的物理、 化学和生物效应，实现对药物分 子和生物分子的快速、准确分析
。
微纳药物分析技术为药物分析和 生物医学研究提供了新的工具和 方法，有助于推动相关领域的发
展。
03
02
酸碱滴定法
通过酸碱反应测定药物的酸碱度， 从而推算其含量。
氧化还原滴定法
利用氧化还原反应对药物进行定量 分析。
04
仪器分析法
总结词
利用各种仪器对药物进行分析的方法。
紫外可见分光光度法
利用紫外可见光谱技术对药物进行定量和定性分析。
高效液相色谱法
利用高效液相色谱仪对药物进行分离和定量分析。
气相色谱法
THANKS
THANK YOU FOR YOUR WATCHING
药品质量控制中的药物分析
原料药的检验
对原料药进行严格的质量控制是保证 药品质量的关键，通过药物分析技术 可以对原料药的成分、纯度等进行检 测。
生产过程的监控
药品稳定性的评估
通过药物分析技术可以评估药品在不 同环境条件下的稳定性，为药品的储 存、运输和使用提供科学依据。
在药品生产过程中，通过药物分析技 术可以对生产过程进行实时监控，确 保生产出的药品符合质量标准。
利用气相色谱仪对挥发性药物进行分离和定量分析。
生物分析法
总结词
利用生物体对药物进行分析的方法。
微生物法
利用微生物对药物的代谢产物进行分析，以 测定药物的含量。
酶联免疫法
利用酶联免疫技术对药物进行定量和定性分 析。
生物芯片技术
药物分析 ppt课件
静
态 的
动态的分析监控
常
工艺流程、反应历程、生物
规
体内代谢过程和综合评价等
检
验
PPT课件
22
第二节 药品的质量标准
一、中国现行药品质量标准体系
中国药典
药 品 标 准
国家
标准 局标准
（新药研发）
临床研究用标准(临床研究) 暂行标准(试生产) 试行标准(正式生产初期) 地方标准整理提高后的品种
企业 标准
生物技术药物
药物制剂：药物的临床使用品
• 按制药工艺分类
化学合成类、提取类、中药类、发酵类、 生物工程类、制剂类
PPT课件
4
3.药品是特殊商品
• 民生之本
• 病者所用
• 需医生或药师指导
• 全方位的质量管理
பைடு நூலகம்
PPT课件
5
4.医药产业链的构成
• 新药研究与开发: GLP GCP • 药品生产: GMP GAP • 药品流通: GSP • 药品使用（终端）: 处方药与OTC
使用非成熟(非法定)方法 标准规格高于法定标准
PPT课件
23
二、中华人民共和国药典
(Chinese Pharmacopoeia, Ch.P)
药典是国家监督管理药品质量的法定技术 标准,是药品生产、经营、使用和管理时应共 同遵循的法定技术依据。
药典是国家药品标准体系的核心，同时也在
一定程度上反映出一个国家医药发展水平。
PPT课件
11
第一节 药物分析的性质和任务
一.基本概念
药品 指用于预防、治疗、诊断人的疾病，
有目的地调节人的生理机能并规定有适应证、 用法和用量的物质，包括药材、中药饮片、 中成药、化学原料及其制剂，抗生素、生化 药品、放射性药品、血清制品和诊断药品等。
药物分析精品课件PPT课件
2. 贮藏过程中产生 水解、氧化、分解、异构化、晶形转变、聚
合、潮解和发霉等
易发生水解反应的结构：
酯、内酯、酰胺、卤代烃、苷类等
易发生氧化反应的结构：
醚、醛、酚羟基、巯基、亚硝基、双键等
例．在药物生产过程中引入杂质的途径为
A. 原料不纯或部分未反应完全的原料造成 B. 合成过程中产生的中间体或副产物分离不净造 成
溶液的浓度主要指被鉴别物质的浓度，其大小影响结果的判断。 （如化学法中要观察沉淀、颜色；UV法中λmax)
（二）溶液的温度
温度过高可使产物分解，导致颜色变浅，甚至观察不到结果。
（三）溶液的酸碱度
试反应物处于活化状态、反应产物处于稳定和以观察状态。
（四）试验时间
有机化合物的化学反应较慢，需要一定的反应时间和条件。
溶解使成25ml（溶液如显碱性，可滴加硝酸使成中性）， 再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，应滤过；置50ml纳氏比 色管中，加水使成约40m1，摇匀，即得供试溶液。另取各 药品项下规定量的标准氯化钠溶液，置50ml纳氏比色管中， 加稀硝酸10m1，加水使成40m1，摇匀，即得对照溶液。于 供试溶液与对照溶液中，分别加入硝酸银试液1.0m1，用水 稀释使成50m1，摇匀，在暗处放置5分钟，同置黑色背景上， 从比色管上方向下观察，比较，即得
1489
713
776Biblioteka 19901751784
967
1995
2375
920
1455
2000
2691
992
1699
建国后出版了七版；药典现行中国药典为2000年版。
2. 主要国外药典
美国药典 The United States Pharmacopoeia [USP（24）] 美国国家处方集 The National Formulary [NF （19）] USP(24)与NF(19)合并出版, 常以USP(24)表示 欧洲药典 European Pharmacopoeia [ Ph Eup] 第3版 国际药典 The International Pharmacopoeia [Ph Int]第3版 英国药典 British Pharmacopoeia [BP（2000）] 日本药局方 [JP（14）]
药物分析PPT参考幻灯片
判断已知药物及其制剂的真伪
➢ 检查 Limit Test
有效性、均一性、纯度要求及安全性
➢ 含量测定（Assay）
准确测定有效成分的含量
三者的检验结果，判断样品是否合格
31
四、药品检验工作的基本程序
➢ 写出报告 Reporting
1、原始记录 完整、真实、具体 2、检验报告书 完整、简洁、结论明确
药物分析是一门研究和发展药品全面质量 控制的“方法学科”。
5
一、药物分析的性质和任务
3. 药物分析中常用的分析方法
经典化学分析
容重 量量 分分 析析 法法
现代仪器分析技术
光色电
谱谱化
分 析 法
分 析 法
学 分 析 法
6
一、药物分析的性质和任务
3. 药物分析中常用的分析方法
容量分析法 （滴定分析）
除无操作步骤外其它内容同原始记录。
32
包括中药材、中药饮片、中成药、化学原料药及其 制剂、抗生素、生化药品、放射性药品、血清制品和诊 断药品等。
4
一、药物分析的性质和任务
2、药物分析的性质 运用化学、物理化学或生物化学的方法和
技术来研究化学结构已经明确的合成药物或天 然药物及其制剂的质量控制方法,也研究有代表 性的中药材及中药制剂和生化药物及制剂的质 量控制方法.
3、日本药局方： JP（Japanese Pharmacopoeia） 现行版为十四改正版
4、欧洲药典：Ph.Eup （European Pharmacopoeia） 现行版为第五版
27
四、药品检验工作的基本程序
➢取样
Sampling
➢性状
Description
➢鉴别
Identification
➢ 检查 Limit Test
有效性、均一性、纯度要求及安全性
➢ 含量测定（Assay）
准确测定有效成分的含量
三者的检验结果，判断样品是否合格
31
四、药品检验工作的基本程序
➢ 写出报告 Reporting
1、原始记录 完整、真实、具体 2、检验报告书 完整、简洁、结论明确
药物分析是一门研究和发展药品全面质量 控制的“方法学科”。
5
一、药物分析的性质和任务
3. 药物分析中常用的分析方法
经典化学分析
容重 量量 分分 析析 法法
现代仪器分析技术
光色电
谱谱化
分 析 法
分 析 法
学 分 析 法
6
一、药物分析的性质和任务
3. 药物分析中常用的分析方法
容量分析法 （滴定分析）
除无操作步骤外其它内容同原始记录。
32
包括中药材、中药饮片、中成药、化学原料药及其 制剂、抗生素、生化药品、放射性药品、血清制品和诊 断药品等。
4
一、药物分析的性质和任务
2、药物分析的性质 运用化学、物理化学或生物化学的方法和
技术来研究化学结构已经明确的合成药物或天 然药物及其制剂的质量控制方法,也研究有代表 性的中药材及中药制剂和生化药物及制剂的质 量控制方法.
3、日本药局方： JP（Japanese Pharmacopoeia） 现行版为十四改正版
4、欧洲药典：Ph.Eup （European Pharmacopoeia） 现行版为第五版
27
四、药品检验工作的基本程序
➢取样
Sampling
➢性状
Description
➢鉴别
Identification
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
体，就要提供一种手性源，使待拆分的对映异构体（样 品）、手性作用物（如固定相）和手性源之间形成一个 非对映异构分子的络合物。在对映体拆分理论中颇为流 行的是“三点手性识别模式”。
15
16
（二）手性HPLC拆分法的类型
直接法：柱前手性衍生化法 间接法：手性流动相拆分法、手性固定相拆分法 1．柱前手性衍生化法：对映体混合物以手性试剂作柱 前衍生化，形成非对映体，然后以常规（偶见手性）固 定相分离。 对手性衍生化试剂的要求：高光学纯度。 常用的手性衍生化试剂：羧酸衍生物类、胺类、异硫氰 酸酯类、异氰酸酯类、萘衍生物类、光学活性氨基酸类、 固相衍生化试剂。
9
2.色谱条件：HP-5毛细管柱(30ｍ×0.32mm ,膜厚 0.1μ ｍ ) 。 氮 磷 检 测 器 , 不 分 流 进 样 ( 阀 关 闭 时 间 0.75min), 进 样 口 温 度 :280℃, 柱 温:200℃(1min)20℃/min280℃ (15min),载气为高 纯氮(2.2ｍml/min),尾吹气为高纯氮(10ml/min)。
第十六章 药品质量控制中的现 代分析方法与技术
1
一、高分辨气相色谱法
毛细管气相色谱法使用的色谱柱是空心的 毛细管柱，叫开管柱：固定液涂渍或固定化在 柱管内壁上，而载气和其中的样品从中心的通 道上通过。柱材料主要是熔融石英（FSOT）。
2
（一）色谱柱
1．毛细管柱的类型：
柱类型
柱内径
柱长
普通开管柱 0.2～0.53mm
8
（三）应用示例----人尿中劳拉西泮的检测
1.测定意义：劳拉西泮(简称LRZ)上用为催眠、镇静 和抗癫痫药物 ,常被犯罪分子作为麻醉药物用于麻醉 抢劫等麻醉后犯罪。为了确证这类案件的性质 ,经常 需要对受害人的血、尿等体液中麻醉药物或其代谢物 进行检测。人体摄入该药后其血液中药物浓度较低 , 且犯罪分子所用药量一般不使受害人死亡,而且此类 案件一般报案较迟，因此血中药物浓度较低 ,对其检 测较为困难。该药主要以葡萄糖醛酸苷的形式由尿液 排泄。
壁涂开管柱
多孔层开管柱ຫໍສະໝຸດ 担体涂渍开管柱微内径开管柱 ﹤100μm
大内径开管柱 0.32mm
液膜厚度 5～60m 0.1～1.0μm
1μm或5μm
3
2．毛细管柱的选择 常用的固定液有：SE-31、OV-1、SE-54、SE52、OV-1701、Carbowax 20M。 柱的选择：根据样品组分的沸点，一般地，相差 2℃或2℃以上的组分，采用非极性毛细管柱分离； 若沸点相差在2℃以内的组分，则需在极性较大
的毛细管柱上分离。
4
3．毛细管柱的性能评价
评价指标：分离效率、表面惰性、热稳定性。 评价方法：在一定的色谱条件下，分离各种测试物质， 获得的特征性数据和峰对称性，以此来评价柱效和表 面活性。在测定了柱效和表面活性之后，用流失速率 试验来评价热稳定性。
5
（二）进样方式 分流进样：使用方便，对分流比、进样温度 样品和载气的情况、进样体积和 浓度、进样重复性需要注意。 不适于痕量分析和宽沸程样。 适合大多数类型的样品，样品浓 浓高、各组分的浓度相近
12
（3)萃取液的选择及萃取率:作者进行了多种溶剂萃取 LRZ的研究 ,由经萃取与未经萃取所得色谱峰面积 比计算LRZ的萃取率 ,得(mean±SD)为(83.4±3.1)%。
（4）检出限:以3倍信噪比计算检出限 ,得本法的检出 限为5μg/L。
（5)回收率:由工作曲线计算LRZ的质量浓度及其回收 率 ,得(mean±SD)为(103.3±5.1)%。
17
2．手性流动相拆分法（手性洗脱法或手性流动相添 加剂法）：将手性试剂加入流动相中，手性添加剂与 样品形成手性络合物。 常用的手性添加剂：配基交换型手性添加剂、环糊精 类添加剂、手性离子对络合剂
18
3．手性固定相拆分法：将手性选择器（如手性流动相 添加剂）固着于多种基质上而制成手性固定相。迄今 为止，尚没有一种通用型的手性柱，需要根据化合物 的分子结构来选择合适的手性柱。 常用的手性固定相：Pirkle型手性固定相、蛋白质类手 性固定相、环糊精类手性固定相。
10
3.样品预处理----酶解及萃取 取检尿1ml,加10mg/L的羟乙基氟西泮(HEF)标准工
作液10μl,再加pH4.8的乙酸盐缓冲液 50μl及β-葡萄糖 醛酸苷酶溶液0.1μl,置于55℃水浴中水解4ｈ冷至室温 后加 pH10.8的碳酸盐缓冲液0.5ml及乙醚5ml,涡旋 2min,离心,分取上层有机相4ml置于经硅烷化处理的带 尾管的鸡心瓶中,加甲醇0.4ml,于40℃水浴中挥发至约 0.1ml,进样1μl进行GC分析
11
4.方法学评价 （1)选择性: 空白尿1ml及空白尿1ml加LRZ和HEF 标准液,经酶解、萃取后进样分析所得色谱图表明 尿中杂质不干扰检测. （2)线性试验: 用空白尿配制不同浓度的LRZ标准 液进行酶解、萃取、进样分析,将LRZ与HEF色谱峰 面积的比值与LRZ在尿液中的质量浓度进行线性回 归,得到工作曲线方程 :Y=3.1×10-3X –3.0×10 -3 , ｒ =0.998。LRZ在尿中的浓度为50～500μg/L范 围内呈良好的线性.
13
5.尿液检测:志愿者口服LRZ 2ｍｇ后,于32小时
, 内收集其排泄的尿液进行检测 LRZ于9h达尿
中最高浓度为444μｇ/L,检测结果表明 ,本方法 适合于麻醉后犯罪案件中ＬＲＺ的检测要求。
14
二、手性药物的高效液相色谱法
（一）手性药物拆分机理 为了使对映体转化为化学和物理性质不同的非对映
6
不分流进样：须利用溶剂效应或冷阱，操作较难 特别适用于痕量分析和宽沸程样品
柱头进样：必须使用外径为0. 17 ～ 0.23mm的 细针，柱内径必须大于0.32 mm , 不能通过隔垫进样，缓慢进样
对热不稳定、稀的和宽沸程样品较 理想；能给出定量结果
非挥发物在柱的中积累导致柱变性 和柱效损失
7
直接进样：样品无须事先浓缩，进样器温度可较 低，载气消耗量小，分析所需样量小 适用于浓度范围要比不分流进样宽一个 数量级以上的样品，有利于对热不稳定 的样品；当样品中含有挥发性低的组分 时，难于定量分析
15
16
（二）手性HPLC拆分法的类型
直接法：柱前手性衍生化法 间接法：手性流动相拆分法、手性固定相拆分法 1．柱前手性衍生化法：对映体混合物以手性试剂作柱 前衍生化，形成非对映体，然后以常规（偶见手性）固 定相分离。 对手性衍生化试剂的要求：高光学纯度。 常用的手性衍生化试剂：羧酸衍生物类、胺类、异硫氰 酸酯类、异氰酸酯类、萘衍生物类、光学活性氨基酸类、 固相衍生化试剂。
9
2.色谱条件：HP-5毛细管柱(30ｍ×0.32mm ,膜厚 0.1μ ｍ ) 。 氮 磷 检 测 器 , 不 分 流 进 样 ( 阀 关 闭 时 间 0.75min), 进 样 口 温 度 :280℃, 柱 温:200℃(1min)20℃/min280℃ (15min),载气为高 纯氮(2.2ｍml/min),尾吹气为高纯氮(10ml/min)。
第十六章 药品质量控制中的现 代分析方法与技术
1
一、高分辨气相色谱法
毛细管气相色谱法使用的色谱柱是空心的 毛细管柱，叫开管柱：固定液涂渍或固定化在 柱管内壁上，而载气和其中的样品从中心的通 道上通过。柱材料主要是熔融石英（FSOT）。
2
（一）色谱柱
1．毛细管柱的类型：
柱类型
柱内径
柱长
普通开管柱 0.2～0.53mm
8
（三）应用示例----人尿中劳拉西泮的检测
1.测定意义：劳拉西泮(简称LRZ)上用为催眠、镇静 和抗癫痫药物 ,常被犯罪分子作为麻醉药物用于麻醉 抢劫等麻醉后犯罪。为了确证这类案件的性质 ,经常 需要对受害人的血、尿等体液中麻醉药物或其代谢物 进行检测。人体摄入该药后其血液中药物浓度较低 , 且犯罪分子所用药量一般不使受害人死亡,而且此类 案件一般报案较迟，因此血中药物浓度较低 ,对其检 测较为困难。该药主要以葡萄糖醛酸苷的形式由尿液 排泄。
壁涂开管柱
多孔层开管柱ຫໍສະໝຸດ 担体涂渍开管柱微内径开管柱 ﹤100μm
大内径开管柱 0.32mm
液膜厚度 5～60m 0.1～1.0μm
1μm或5μm
3
2．毛细管柱的选择 常用的固定液有：SE-31、OV-1、SE-54、SE52、OV-1701、Carbowax 20M。 柱的选择：根据样品组分的沸点，一般地，相差 2℃或2℃以上的组分，采用非极性毛细管柱分离； 若沸点相差在2℃以内的组分，则需在极性较大
的毛细管柱上分离。
4
3．毛细管柱的性能评价
评价指标：分离效率、表面惰性、热稳定性。 评价方法：在一定的色谱条件下，分离各种测试物质， 获得的特征性数据和峰对称性，以此来评价柱效和表 面活性。在测定了柱效和表面活性之后，用流失速率 试验来评价热稳定性。
5
（二）进样方式 分流进样：使用方便，对分流比、进样温度 样品和载气的情况、进样体积和 浓度、进样重复性需要注意。 不适于痕量分析和宽沸程样。 适合大多数类型的样品，样品浓 浓高、各组分的浓度相近
12
（3)萃取液的选择及萃取率:作者进行了多种溶剂萃取 LRZ的研究 ,由经萃取与未经萃取所得色谱峰面积 比计算LRZ的萃取率 ,得(mean±SD)为(83.4±3.1)%。
（4）检出限:以3倍信噪比计算检出限 ,得本法的检出 限为5μg/L。
（5)回收率:由工作曲线计算LRZ的质量浓度及其回收 率 ,得(mean±SD)为(103.3±5.1)%。
17
2．手性流动相拆分法（手性洗脱法或手性流动相添 加剂法）：将手性试剂加入流动相中，手性添加剂与 样品形成手性络合物。 常用的手性添加剂：配基交换型手性添加剂、环糊精 类添加剂、手性离子对络合剂
18
3．手性固定相拆分法：将手性选择器（如手性流动相 添加剂）固着于多种基质上而制成手性固定相。迄今 为止，尚没有一种通用型的手性柱，需要根据化合物 的分子结构来选择合适的手性柱。 常用的手性固定相：Pirkle型手性固定相、蛋白质类手 性固定相、环糊精类手性固定相。
10
3.样品预处理----酶解及萃取 取检尿1ml,加10mg/L的羟乙基氟西泮(HEF)标准工
作液10μl,再加pH4.8的乙酸盐缓冲液 50μl及β-葡萄糖 醛酸苷酶溶液0.1μl,置于55℃水浴中水解4ｈ冷至室温 后加 pH10.8的碳酸盐缓冲液0.5ml及乙醚5ml,涡旋 2min,离心,分取上层有机相4ml置于经硅烷化处理的带 尾管的鸡心瓶中,加甲醇0.4ml,于40℃水浴中挥发至约 0.1ml,进样1μl进行GC分析
11
4.方法学评价 （1)选择性: 空白尿1ml及空白尿1ml加LRZ和HEF 标准液,经酶解、萃取后进样分析所得色谱图表明 尿中杂质不干扰检测. （2)线性试验: 用空白尿配制不同浓度的LRZ标准 液进行酶解、萃取、进样分析,将LRZ与HEF色谱峰 面积的比值与LRZ在尿液中的质量浓度进行线性回 归,得到工作曲线方程 :Y=3.1×10-3X –3.0×10 -3 , ｒ =0.998。LRZ在尿中的浓度为50～500μg/L范 围内呈良好的线性.
13
5.尿液检测:志愿者口服LRZ 2ｍｇ后,于32小时
, 内收集其排泄的尿液进行检测 LRZ于9h达尿
中最高浓度为444μｇ/L,检测结果表明 ,本方法 适合于麻醉后犯罪案件中ＬＲＺ的检测要求。
14
二、手性药物的高效液相色谱法
（一）手性药物拆分机理 为了使对映体转化为化学和物理性质不同的非对映
6
不分流进样：须利用溶剂效应或冷阱，操作较难 特别适用于痕量分析和宽沸程样品
柱头进样：必须使用外径为0. 17 ～ 0.23mm的 细针，柱内径必须大于0.32 mm , 不能通过隔垫进样，缓慢进样
对热不稳定、稀的和宽沸程样品较 理想；能给出定量结果
非挥发物在柱的中积累导致柱变性 和柱效损失
7
直接进样：样品无须事先浓缩，进样器温度可较 低，载气消耗量小，分析所需样量小 适用于浓度范围要比不分流进样宽一个 数量级以上的样品，有利于对热不稳定 的样品；当样品中含有挥发性低的组分 时，难于定量分析