实验样品采集运输保存方法
样品的运输及保存
样品的运输及保存1采样结束后应尽快将样品检验或送往留样室,需要复检的应送往实验室。
2疑似急性细菌性食物中毒样品应无菌采样后立即送检,一般不超过四小时;气温高时应将备检样品置冷藏设备内冷藏运送,不得加入防腐剂。
3需要冷藏的食品,应采用冷藏设备在0℃~5℃冷藏运输和保存,不具备冷藏条件时,食品可放在常温冷暗处,样品保存一般不超过36h。
(微生物项目常温不得超过4h)4采集的冷冻和易腐食品,应置冰箱或在包装容器内加适量的冷却剂或冷冻剂保存和运送,为保证途中样品不升温或不融化,必要时可于途中补加冷却剂或冷冻剂。
5食品标签标明存放、运输条件的食品,采集的样品存放、运输条件要与之相符,如酸奶标识说明要冷藏,样品的运送及复检样品的保存都要做到冷藏。
6需做微生物检测的样品,保存和运送的原则是应保证样品中微生物状态不发生变化。
微生物检测用的样本及不能冷藏保存的样本原则上不复检、不留样。
采用快速检测方法检测出的超标样品,应随即采用国标方法进行确认。
检测不合格的样品,要及时通知被采样单位和生产企业。
处理样品时,禁止将有毒有害液体样本直接倒入下水道。
7采集的样品注意应在保质期内,尽量抽取保质期于3个月以上的产品(保质期限不足3个月的除外)。
留样和需要确证的样品,按产品说明书要求存放,期限为检测结果出示后三个月。
对餐饮业要求凉菜48h留样。
8样本保存要保持样本原有状态,样本应尽量从原包装中采集,不要从已开启的包装内采集。
从散装或大包装内采集的样本如果是干燥的,应保存在干燥清洁的容器内,不要同有异味的样本一同保存。
9根据检验样本的性状及检验的目的不同而选择不同的容器保存样本,一个容器装量不可过多,尤其液态样本不可超过容量的80%,以防冻结时容器破裂。
装入样本后必须加盖,然后用胶布或封箱胶带固封,如是液态样本,在胶布或封箱胶带外还须用融化的石蜡加封,以防液体外泄。
如果选用塑料袋,则应用两层袋,分别封口,防止液体流出。
10特殊样本要在现场进行处理,如作霉菌检验的样本,要保持湿润,可放在1%甲醛溶液中保存,也可储存在5%乙醇溶液或稀乙酸溶液里。
水样采集、运输和保存方法及注意事项
水样采集、运输和保存方法及注意事项一、水样的采集(一)盛水容器的选择1、容器不能是新的污染源。
2、对测金属的水样多选用聚乙烯瓶,测有机物的水样一般只能用玻璃瓶。
3、容器壁不应吸收或吸附某些待测组分。
4、容器不应与待测组分发生反应。
5、微生物采样瓶能耐高温,无菌采样袋除外。
(二)盛水容器的清洗按水样待测定组分的要求来确定清洗容器的方法。
1、一般理化指标采样容器的洗涤:洗净后-10%硝酸或(盐酸)浸泡-自来水-蒸馏水(纯水)2、有机物指标采样容器的洗涤:洗净后-蒸馏水-180烘干。
3、微生物学采样容器的洗涤和灭菌:洗净后-10%盐酸浸泡-自来水-蒸馏水-热力灭菌和高压灭菌。
灭菌后2周内使用。
(三)采集水样体积:1、水样的体积取决于分析项目的多少以及选用的测定方法。
2、采集的水样量应满足分析的需要并应该考虑重复测试所需的水样量和留作备份测试的水样用量。
3、现场采样的质量保证除规范采样步骤外,还需采集空白样和平行样。
占总采样量的10%--20%。
(四)采集水样注意事项1、各类监测点水样采样位置:• 出厂水应当位于水处理完成后进入输送管道前的取水口处;• 末梢水一般应当为用户水龙头处;• 二次供水的采集应为蓄水池或水箱出水口处等;• 学校自建设施供水应当为用户取水口处;•分散式供水应为家庭储水器内。
2、采样前放水3-5分钟,消毒后先采微生物,后化学性指标,采样时水流速平稳。
3、微生物指标,用灭菌瓶直接采集,不能用水样涮洗已灭菌的采样瓶,并避免手指和其他物品对瓶口的玷污。
4、理化指标采样前,先用水样荡洗2~3次采样器、容器、塞子。
5、测定有机污染物等项目的水样必须充满容器。
6、测定pH、余氯、放射性、微生物等项目需要单独采样;其中, pH、电导率等项目宜在现场测定。
7、采样时必须认真填写采样登记表;每个水样瓶都应贴上标签;要塞紧瓶塞,必要时还要密封。
8、水样尽快送达实验室。
9、水样采集应保持手的清洁、工作时严禁吸烟。
实验样品采集运输保存方法
实验样品采集运输保存方法1. RNA实验样品采集、保存方法1.1 使用范围及样品量类别:Microarray Service;Sequencing Service; PCR Array& PCR Service样本量:样本样本量动物组织样品50-100mg哺乳动物培养细胞样品(悬浮细胞)1*107个哺乳动物培养细胞样品(贴壁细胞)15cm2植物组织样品100mg-1g,根据植物不同部位的组织决定组织需要量,尽可能多些,但不必超过1g1.2 动物组织样品1.2.1 新鲜组织样品A. 使用RNAlater试剂取新鲜组织(注:动物死亡后尽快在10min内取材),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,所用组织必须切至厚度在0.5cm一下,然后放入装有5倍体积RNAlater的离心管(或冻存管)中。
4度孵育过夜,此时样品管需要横臵以便组织块充分接触到RNAlater,然后转入-20中保存,样品在-20不会冻结,但溶液中可能会有一些晶体出现,这并不影响后续的RNA抽提。
B. 使用Trizol试剂取新鲜组织(1min以内),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,每50-100mg组织加入1ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品,最好冰上进行操作。
匀浆的裂解液4度短期保存(1month),-20或者-70度长期保存。
1.2.2 冻存组织生物体死亡后尽快(10min以内)切取新鲜组织,并以PBS或生理盐水清洗干净切成小块;培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞,弃去上清液。
细胞沉淀(1*107个)中加入1ml Trizol裂解液反复吸打几次后,目视可见细胞层溶液完全-70保存1.3 贴壁细胞从培养容器中吸出并弃去培养液培养瓶直接加入Trizol试剂,Trizol用量与细胞贴壁面积有关,15cm2细胞贴壁面积加入1mlTrizol。
反复吸打几次后,目视可见细胞层溶解完全。
-70度保存。
1.4 植物组织样品准确取得所需新鲜组织后,如有必要可用PBS清洗干净,将所用组织切碎,装入冻存管中或者用锡箔包裹好。
土壤样品的运输和贮存
土壤微生物研究规范——II. 土壤样品的运输和贮存1. 土壤微生物样品的运输土样从采集点到实验室往往需要经历一定时间的运输,土样运输过程中难免影响土壤的温度、水分、氧气等环境条件,所以要尽快置于黑暗、低温(4℃)的密闭环境,尽量维持土壤含水量稳定不变,黑暗环境是为了避免光照下藻类在土壤表明的生长,低温是为了减少细菌繁殖,维持微生物区系稳定。
一般装于聚乙烯袋子,并松扎。
另外,储存时尽可能避免物理压实,样品袋不要堆叠过多,以免破坏土壤原有的团粒结构,并导致底层样品处于厌氧环境。
微生物取样的土壤样品需要在0-4℃的条件下保存,所以土壤样品应及时保存在保温箱或冰箱中(设置0-4℃),并最好在一周内完成前期处理。
如果采集地有冰箱、熏蒸所需的真空干燥器和通风橱等设施,建议将微生物土壤样品熏蒸浸提后,以冷冻的浸提液保存在塑料小瓶中,以方便运送。
如果采集地没有通风橱等设施,建议将所取的土壤样品过筛后冷藏在保温箱中,以方便运送。
具体的流程如下:(1)提前准备好保温箱及冷冻好的冰板。
冰板需要提前1-2 d冷冻,可以再用自封袋装一定量水分放平冷冻为规则的冰块备用。
(2)按照微生物取样规范进行取样,及时过筛去除根系、土壤动物等杂质,放置在0-4℃保鲜冰箱中保存。
用于DNA或RNA分析的土壤样品应用干冰速冻。
用于RNA分析的土壤样品在运输过程中应用干冰保持低温。
用于DNA分析的土壤样品应用冰盒运输,也可用干冰。
(3)运输当天将土壤样品密封好,放入保温箱中,保温箱底部、四周及顶部均放置冰板和用自封袋密封的冰块,保证样品四周均可接触冰板或冰块。
注意保证土壤样品和冰块分别密封,以防路途中融化的水分进入土壤样品造成污染。
(4)到达目的地后,迅速将样品放入保鲜冰箱(0-4℃)保存待测。
如果采样地条件允许,可以根据规范上的实验方法,将样品熏蒸、浸提后保存在塑料小方瓶中,-20℃冷冻,然后再按照上述流程放置保温箱中运送到目的地,迅速放置在冷冻冰箱中(-20℃)保存待测。
实验室标本采集、处置和管理操作程序【精】
实验室标本采集、处置和管理操作程序1.目的:规范实验标本的采集、运输、接收及保存,以保证原始标本在采集、运输、接收及保存过程中方法适当,原始标本中的待测成分不受影响。
2.范围:适用于科室所有标本的采集、运输、接收及保存。
3.职责:3.1 质量管理小组负责标本管理的指导和监督。
3.2 检验人员负责各自检测标本的管理和标本采集手册的编制。
4.工作程序:4.1标本采集4.1.1 由各专业实验室负责人组织实验室成员编制各自实验室的标本采集手册,标本采集手册应至少包括以下内容:患者准备;标本收集容器;标本的类型;所需标本量。
标本采集的注意事项:4.1.2 质量管理小组对标本采集手册的内容进行审查,经科主任批准后,由医院计算机中心负责将标本采集手册添加入医院系统,以便标本采集部门和各临床科室随时参阅。
4.1.3质量管理小组每年对标本采集手册进行审查,如发现不合格内容可要求实验室负责人修改。
4.1.4检验标本包括从门急诊,住院部患者和体检中心的体检人员等处采集的标本,标本由有以下资格人员采集:注册护士、执业医生、检验技术人员。
4.1.5检验申请单包括以下信息:患者姓名、性别、年龄、科室、住院号、病床号、申请医生、申请检验项目、采集标本的日期和时间、标本类型、是否需优先处理。
4.2 标本的运输4.2.1 标本应放在有盖、内有固定架的标本运输箱中运输,盒外贴上生物危害的标识,标本和检验申请单分开放置。
4.2.2 若标本运输箱被标本污染,应立即用消毒液消毒,用2000mg/L 有效氯消毒液倾入标本运输箱内,浸泡30-60分钟,再用流水冲洗。
4.3住院部标本采集和运送程序4.3.1临床医生出具检验项目申请,急诊医嘱立即通知责任护士。
4.3.2当班护士写上检验标签条码并贴于标本容器上。
4.3.3采集者在标本采集前仔细核对患者姓名、床号、检验项目、标本类型及特殊要求。
4.3.4当班护士与标本运送人员当面清点标本数量,并在登记本上签名,由后者将标本送至相关检验部门签收。
土壤样品采集流转制备及保存技术与要求
土壤样品采集流转制备及保存技术与要求一、土壤样品采集的方法1.采集位置的选择:根据研究目的,选择代表性的样点进行采集。
应注意选择多样性和代表性好的样点,避免不具代表性的采集点。
2.采集工具的选择:根据采集目的和土壤性质,选择合适的采集工具。
常用的采集工具包括铁锹、一次性土壤钻头和铲子等。
3. 采集深度的选择:根据研究需求和土壤类型,选择合适的采集深度。
常用的采集深度一般为0-20cm、0-30cm和0-60cm等。
4.采集数量的确定:根据研究需求和土壤类型,确定采集的土壤样品数量,通常为3-5个样点取样混合成一份复合样品。
5.采集方法:采集过程中要避免因外来因素造成的污染。
采集样品时要佩戴手套,并避免与其他物质接触,以免影响样品的准确性。
二、土壤样品的流转1.样品尽快送到分析实验室进行分析,以避免因样品长时间保存而导致分析结果的偏差。
2.样品运输途中应注意防止样品的破坏和污染,避免晃动和直接暴露在阳光下。
可以放置在冷藏箱或保温箱中进行运输,以保持样品的原始性质。
3.在样品被分析的过程中,需注意避免样品的交叉污染,尽量避免样品与其他化学品或污染物接触。
三、土壤样品制备1.样品制备前应根据研究需求,对采集到的土壤样品进行必要的预处理,如除杂、晾干等。
具体的制备方法需根据研究目的和实验要求进行确定。
2.样品制备过程中要注意避免样品的污染和受到外来因素的影响。
使用干净的工具和容器进行样品的制备,并及时清洗并消毒。
四、土壤样品的保存1.样品保存前应将土壤样品干燥,移除多余的杂质并立即分装密封。
样品装入干燥的容器中,并在容器上标明采集时间、地点和深度等重要信息。
2.样品保存时应避免阳光直射、高温及潮湿等有害因素的影响,选择干燥、通风、阴凉处进行保存。
3.样品保存的时间一般应根据研究需求确定,建议尽快进行分析,以保证分析结果的准确性。
4.样品保存期限到期前,应定期对保存的样品进行检查,并注意保持样品的原始性质。
样品采集运输保存的管理
病原微生物标本采集中的要求
一)、样本种类 按照病原微生物种类分:病毒、细菌、真菌 寄生虫等; 按照检测项目分:血清学抗体检测、病原学 检测、核酸检测等。 不同的病原微生物或检测项目对样本的采 集都有不同的要求。
病原微生物标本采集中的要求
(一)、病毒性疾病样本的采集原则 早、准、冷、快、足、护 1、宜早不宜迟: 要求在发热期采集,一般在一周以内,最 好3天以内,可提高病毒分离成功率及检 出率。(病毒血症期)பைடு நூலகம்2、从富集病毒的组织或体液中采集。如呼吸 道或消化道分泌物或血液或尿液等
病原微生物标本采集中的依据
1.《中华人民共和国传染病防治法》 2.《病原微生物实验室生物安全管理条例》 3.《可感染人类的高致病性病原微生物菌 (毒)种或样本运输管理规定》 4.人禽流感疫情预防控制技术指南(试行) 附件7:禽流感实验室检测技术方案
病原微生物标本采集中的依据
5.非典型肺炎病例实验室检测样本采集技术指南 (试行)(卫生部) 6.卫生部关于建立传染性非典型肺炎相关样品资源 库和病毒毒株库的通知(卫科教发[2003]234号 7.关于印发《传染性非典型肺炎病毒研究实验室暂 行管理办法》和《传染性非典型肺炎病毒的毒种 保存、使用和感染动物模型的暂行管理办法》的 通知(科技部、卫生部、国家药监局、国家环保 局联合下发的国科发农社字[2003]129号)
一、样本采集
样本采集的时间、数量和质量得当与否都直接关 系到实验室检测结果的可靠性和准确性,可见样 本采集是实验室检测的基础。 样本采集是一项技术性和专业性很强的工作,样 本采集的人员,需要通过必要的培训。 样本采集需要与患者或具有感染性的个体直接接 触,存在被感染的潜在风险。 可见,样本的采集无论对实验室检测结果或 样本采集人员均至关重要。
样品采集保存和运输
基因芯片样品的采集、保存和运输基因芯片实验、microRNA芯片实验、PCR芯片实验和实时定量PCR实验的样品准备一、动物组织样品保存与运输(每张芯片需50-100mg组织)1、新鲜组织样品的保存与运输A、使用RNA later试剂→取新鲜组织(注:生物体死亡后尽快在10分钟内取材),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,所用组织必须切至厚度在0.5 cm以下(长宽不限),然后放入装有5倍体积RNA later的离心管(或冻存管)中。
→4℃孵育过夜,此时样品管需要横置以便组织块充分接触到RNA later,然后转入- 20℃中保存。
样品在- 20℃不会冻结,但是溶液中可能有一些晶体出现,这并不影响后续的RNA抽提。
冻存样品也可以反复冻溶,其RNA含量和完整性不受影响。
→RNAlater处理的标本可用常规冰袋4℃低温运输(无需使用干冰- 70℃运输)。
B、使用Trizol试剂Trizol试剂可抑制RNA酶活性,破坏细胞膜结构以裂解细胞释放出RNA。
→取新鲜组织(注:生物体死亡后1分钟内取材料并保存好),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,每50~100 mg组织加1 ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品,操作最好在冰上进行。
→匀浆的裂解液4℃短期保存(1个月),-20度或- 70℃长期保存。
干冰运输,短期(5天以内)冷藏(4℃)运输亦可。
2、冻存组织的保存与运输生物体死亡后尽快(最好在10分钟内)切取新鲜组织,以PBS或生理盐水清洗干净切为小块,立刻放入液氮中冷冻2-3小时后可转入-70℃冰箱保存或着一直保存在液氮中。
冻存组织可放入干冰中直接运输,或者以Trizol 4℃下匀浆:冻存的组织块以液氮研磨后加Trizol或直接加Trizol以电动匀浆器匀浆,匀浆的裂解液干冰运输或短期(5天以内)冷藏(4℃)运输。
二、哺乳动物培养细胞样品采集、保存与运输——使用Trizol试剂(不建议使用RNAlater)1、悬浮细胞→悬浮细胞培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞,弃去上清液。
样品采样的保存方法
样品采样的保存方法引言在科学研究、实验室工作等领域中,样品采样是一个非常重要的环节。
正确的样品采样及其保存方法可以确保样品的完整性和可靠性,从而保证实验结果的准确性。
本文将介绍一些常用的样品采样的保存方法,并说明其重要性和操作注意事项。
样品采样的重要性样品采样是一个关键的环节,对于后续实验的结果具有直接影响。
正确的样品采样可以尽可能减少误差,保证实验数据的可靠性和真实性。
样品采样的不当可能导致样品污染、氧化、变质等问题,影响实验结果的准确性。
因此,科研工作者在进行样品采样时需要遵循一定的规范和方法。
样品采样的保存方法1. 现场采样现场采样是指在样品来源地点进行采样的方法。
具体操作步骤如下:- 准备采样设备:根据不同的样品类型和要求,选择合适的采样容器(如玻璃瓶、塑料袋等)、采样工具、标签等。
- 现场处理:根据采样目的和样品特性,进行现场处理。
例如,对于水样品,可以在采样前用滤膜过滤或添加适量的抑制剂。
- 采样过程:进行样品采集,并严格控制样品的接触和受到外界污染的可能性。
避免样品接触到空气、降落灰尘等污染物。
- 样品封存:将采样容器密封,并在标签上清晰地注明样品的采样时间、地点、采样人员等信息。
2. 传统保存方法传统保存方法主要适用于一些较为稳定的样品,如不易变质的固体样品。
具体操作如下:- 清洁容器:使用干净、无残留物的容器进行样品储存。
对于液体样品,可以选择玻璃瓶或塑料瓶;对于固体样品,可以选择密封塑料袋或玻璃瓶。
- 干燥保存:将样品保存在阴凉、干燥的环境中,避免暴露在阳光直射下。
对于一些易吸湿的样品,可以在容器中放置干燥剂。
- 标签记录:每个样品容器都需要贴上清晰的标签,标明样品名称、采样时间、保存人员等信息。
3. 低温保存方法低温保存方法适用于一些需要冷藏或冷冻的样品,如食品、血液等。
具体操作如下:- 冷藏保存:将样品保存在2-8摄氏度的冰箱中。
保持冷藏设备的干净和温度稳定。
- 冰冻保存:对于需要长时间保存或需要快速冷冻的样品,可以使用-20摄氏度或更低的冰箱或冰柜进行冷冻保存。
HIV实验室样品的采集登记处理保存和运输程序
HIV实验室样品的采集、登记、处理、保存和运输程序1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
1.1 血清样品采集和处理1.1.1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1~2h,待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min,吸出血清备用。
1.1.2 如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
1.2 抗凝血样品采集和处理1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
1.2.2 应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3·EDTA、肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3·EDTA或枸橼酸钠。
1.2.3 用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在4~8h 内分离PBMC和血浆,否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。
1.3 采集样品注意事项1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
1.3.2 采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具,以避免直接接触血液;直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应戴双层手套。
2 样品的保存2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20℃以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2~8℃。
2.2 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下,进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80℃。
2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存,样品采集时间超过48h则不可检测。
3 样品的运送3.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。
HIV实验室样品的采集登记处理保存和运输程序
HIV实验室样品的采集、登记、处理、保存和运输程序1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
1.1 血清样品采集和处理1.1.1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1~2h,待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min,吸出血清备用。
1.1.2 如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
1.2 抗凝血样品采集和处理1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
1.2.2 应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3·EDTA、肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3·EDTA或枸橼酸钠。
1.2.3 用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在4~8h 内分离PBMC和血浆,否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。
1.3 采集样品注意事项1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
1.3.2 采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具,以避免直接接触血液;直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应戴双层手套。
2 样品的保存2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20℃以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2~8℃。
2.2 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下,进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80℃。
2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存,样品采集时间超过48h则不可检测。
3 样品的运送3.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。
样品采集、运送和保存
二、样品的采集和处理
艾滋病检测最常用的样品:血液,包括血清、
血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
1. 血清样品采集:
用一次性注射器(或真空采血管) 抽出一定量静脉血,一般为5mL,放入 一次性塑料试管,室温下自然放置1-2 小时,待血液凝固和血块收缩后再用 3000rpm离心15分钟,吸出血清备用。
首选EDTA。 肝素是PCR反应的一个潜在的抑制剂,会使核 酸检测出现假阴性结果。且HIV-RNA降解的速 率显著高于EDTA和枸橼酸钠处理的血浆 。 采集样品应避免微生物和核酸污染。
病毒载量测定对样品的要求
血清和血浆的测定结果具有高度的相关性。 血清的检测结果大约是血浆的50%( 3080% )。因为部分HIV病毒颗粒被包裹在纤 维蛋白网络中。 首选血浆标本,血清标本也可。但每位病人 每次检测使用的标本类型应始终保持一致。
样品管应为螺旋口的塑料管(1.5ml),检 查有无破损,将螺旋盖旋紧,防止样品渗漏。 血清样品量至少应大于600μ l 。 禁止使用扳盖式样品管。 建议第一层:螺旋口的塑料管(1.5ml) 第二层:血清盒。5份或5份以下可以使 用一次性乳胶手套(每个手指放一个) 第三层:冰瓶(内置冰块) 禁止第二层使用封口塑料袋
普遍性防护原则(WHO推荐)
2.对所有器具严格消毒 为保证消毒效果,器具必须用热水和清洁剂洗干净 后再消毒,所有符合消毒规范的消毒程序都足以杀 灭HIV、乙型肝炎病毒和丙型肝炎病毒。 常用的灭菌方法足以使HIV灭活。常用的两种灭菌 方法是煮沸和化学灭菌。煮沸是有效的灭菌方法, 已清洗过的器具应煮沸20分钟。 医务人员的手常常带有病原微生物,这也是造成病 原体在病人中传播和主要原因之一。医务人员手上 沾着的体液,可以很容易地用肥皂和水清除干净。
分析样品运输和保存方法及评价采样效率
采样效率评价方法
❖ 相对比较法 配制一个恒定的但不要求知道待测污染物准确浓度的气体样品, 用2 ~ 3个采样管串联起来采集所配制的样品。采样结束后,分
别测定各采样管中污染物的浓度,其采样效率K 为:
K
c1
100 %
c1 c2 c3
式中:c1、c2 、c3 —— 分别为第一、第二和第三个采样管中污
0.0005
查表, t0.05,4=2.776。因t< t0.05,4, 故平均值与标 准值之间无显著性差异,测定不存在系统误差。
质量控制
• ② 两组平均值间显著性差异检验 对同一试样,不同的人或采用不同的方法或采用不同的仪器分析时,所得的 均值一般不会相同,两组平均值间是否存在显著性差异可通过如下方法进行 判断。
• 4、用类似毛细管或限流的临界孔稳流器来稳定和测量采样的 流量。
• 根据理想气体状态方程,将现场采样体积V换算成标准状况下 的采样体积V0。
V0
Vt
T0 T
p p0
Vt
273 273 t
p 101 .325
采样体积的计算
• 三)被动式采样法
❖ 空气采样体积 = 采样速率K 采样时间
污染物浓度表示方法
• 质量浓度 每立方米空气中含有物质的毫克数表示,单位为mg/m3
• 体积分数 每立方米空气中含有检测物的毫升数,单位为mL/m3(百万分之一,ppm)。
C(mg/m3)=C’(ppm)M/22.4
采样效率的评价方法
• 1、影响采样效率的因素
根据污染物的存在状态选择合适的采样方法和仪器 根据污染物的理化性质选择吸收液、填充剂和各种滤料 确定合适的抽气速度 确定适当的采气量和采样时间
样品的采集保存及运输及实验室质量控制
1Байду номын сангаас
样本的管理
样本的采集 样本的递送 样本的处理 样本的移交 样本的保存 样本的销毁
样品的种类(HIV实验室检测)
血液:血清、血浆、全血 其他体液:唾液、尿液
样品的采集——需准备的器材
真空采血管、蝶形针、 持针器 碘酒、酒精(或碘伏) 止血带、采血枕 试管架、样品接收盘 棉签、创可贴 污物桶、锐气盒 消毒液 等
感染性物质的包装说明
吸附性材料
必须放置在一级容器和二级包装之间。当多个一 级容器装入一个二级包装时,必须对一级容器逐 个进行包裹,使其不能互相接触。 棉絮等吸着性填充材料,这些填充物必须足以吸 附第一层容器内的全部内容物。 固体样品不需要上述填充材料 大的身体部分和完整器官需要特殊的包装
样本的接收
防护措施:工作服、口罩、眼镜、手套等 核对:与运输人员核对样品及样品运输单 ——包装检查:破损、溢漏、缺失 填写样品运输单 样品入库
样本的移交
记录: 移交的检测项目/样本名称 移交日期 移交检测者的姓名 监控/追踪并记录: 周期 结果的发放 (从受委托的实验室到检测申 请者) 移交中出现的问题
样本的驳回标准:
未标记的样本 患者信息不足 样本发生溶血 使用的采血管不正确 递交了错误、其他的样本 保存液/剂的体积不足 样本量不足 运输过程过长
样品库的管理
样品登记 温度记录 紧急预案 双门双锁
样品的保存
用于抗体检测的的血清或血浆,一周内检测 可于4℃存放;一周以上存放于-20℃以下冰 箱内 用于核酸检测的血浆样品,四天之内检测可 于4℃存放;三个月内和三个月以上分别于20℃和-70℃保存
检验标本的采集储存转运和处理制度
检验标本的采集储存转运和处理制度1.采集标本:(1)标本采集室与检验科室之间要有明确的分工和责任,采集人员必须接受专业培训,并持有相应的资格证书。
(2)采集人员应穿戴干净整洁的工作服,佩戴帽子、口罩和手套,以防止污染标本和感染疾病。
(3)标本采集前,采集人员应核对患者的个人信息,确保采集的标本与患者信息一致。
(4)标本采集应使用专用的采集器具,包括采血针、尿采集容器等,以减少污染和损伤标本的可能性。
(5)采集人员在标本采集时应注意采集的时间和量,及时记录并告知相关人员。
2.储存标本:(1)标本应储存在经过专门设计的贮存设施中,保持适宜的温度和湿度,以防止标本的腐坏和变质。
(2)不同类型的标本应分开储存,避免交叉污染和混淆。
(3)标本要进行全面的标识,包括患者信息、采集时间、采集者等重要信息,确保标本的可追溯性。
(4)对于特殊标本,如生物危险品等,要有专门的处理和贮存方案,并按照规定的程序进行储存,以确保工作人员和环境的安全。
3.转运标本:(1)标本应根据不同的要求进行分装和包装,以防止标本的泄漏和损坏。
(2)标本转运前应及时通知收件人,并按照规定的时间和方式进行转运。
(3)在标本转运过程中,要避免长时间的震动和高温,以保证标本的稳定性和准确性。
(4)转运过程中要保持标本的完整性,防止标本以外的数据和信息的泄漏。
4.处理标本:(1)标本到达检验科室后,应及时进行接收和登记,确保标本的准确性和完整性。
(2)标本处理前,应核对标本的相关信息,以确保操作的正确性。
(3)标本处理要按照相应的检验方法和程序进行,避免操作上的差错和污染。
(4)处理完标本后,要及时进行储存和保存,并根据需要留样,以备追溯和复查。
以上是一套较为完整的检验标本的采集储存转运和处理制度,它涵盖了从标本采集到结果处理的全过程,旨在确保检验结果的准确性和可靠性。
配合专业的人员培训和严格的质量管理体系,可以有效提高医学检验工作的质量和效率。
疾控中心HIV实验室样品的采集登记处理保存和运输程序
疾控中心HIV实验室样品的采集登记处理保存和运输程序1 样品的采集和处理艾滋病检测最常用的样品是血液,包括血清、血浆和全血。
唾液或尿液有时也可作为测试样品。
1.1 血清样品采集和处理1.1.1 用一次性注射器(或真空采血管)抽取一定量静脉血,室温下自然放置1~2h,待血液凝固、血块收缩后再用3000r/min离心15min,吸出血清备用。
1.1.2 如用滤纸片采样,则手指或耳垂局部严格按常规进行消毒,在刺破皮肤后,迅速把滤纸片沾上,切勿让血液滴落在其它物体表面造成污染。
采血后要待血样干燥后再包装送检。
1.2 抗凝血样品采集和处理1.2.1 用加有抗凝剂的真空采血管(或一次性注射器抽取静脉血,转移至加有抗凝剂的试管),反复轻摇,分离血浆和血细胞备用。
1.2.2 应根据实验要求选用适当的抗凝剂,如CD4+/CD8+T淋巴细胞测定可选用K3·EDTA、肝素或枸橼酸钠,HIV病毒分离、核酸定性/定量检测可选用K3·EDTA或枸橼酸钠。
1.2.3 用于核酸定性检测时,采集的抗凝全血应在4~8h内分离PBMC和血浆,否则应在24~48h内分离血浆和血细胞。
1.3 采集样品注意事项1.3.1 采集样品原则上应按临床采血技术规范操作(试剂盒说明书有特殊要求除外)。
1.3.2 采集样品时应注意安全,建议采用真空采血管及蝶形针具,以避免直接接触血液;直接接触HIV感染者/艾滋病(AIDS)病人血液/体液的操作,应戴双层手套。
2 样品的保存2.1 用于抗体检测的血清或血浆样品,应存放于-20℃以下,短期(1周)内进行检测的样品可存放于2~8℃。
2.2 用于抗原和核酸检测的血浆和血细胞样品应冻存于-20℃以下,进行病毒RNA检测的样品如需保存3个月以上应置于-80℃。
2.3 用于CD4+/CD8+T淋巴细胞测定的样品不能长期保存,样品采集时间超过48h则不可检测。
3 样品的运送3.1 实验室间传递的样品应为血清或血浆,除特殊情况外一般不运送全血。
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1.R N A实验样品采集、保存方法
使用范围及样品量
类别:Microarray Service;Sequencing Service; PCR Array& PCR Service 样本量:
样本样本量
1*107个
哺乳动物培养细胞样品(悬浮
细胞)
15cm2
哺乳动物培养细胞样品(贴壁
细胞)
植物组织样品100mg-1g,根据植物不同部位的组
织决定组织需要量,尽可能多些,但不必
超过1g
动物组织样品
新鲜组织样品
A. 使用RNAlater试剂
取新鲜组织(注:动物死亡后尽快在10min内取材),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,所用组织必须切至厚度在一下,然后放入装有5倍体积RNAlater的离心管(或冻存管)中。
4度孵育过夜,此时样品管需要横置以便组织块充分接触到RNAlater,然后转入-20中保存,样品在-20不会冻结,但溶液中可能会有一些晶体出现,这并不影响后续的RNA抽提。
B. 使用Trizol试剂
取新鲜组织(1min以内),组织块以PBS或生理盐水清洗干净,每50-100mg 组织加入1ml Trizol溶液匀浆裂解组织样品,最好冰上进行操作。
匀浆的裂解液4度短期保存(1month),-20或者-70度长期保存。
冻存组织
生物体死亡后尽快(10min以内)切取新鲜组织,并以PBS或生理盐水清洗干净切成小块;培养液倒入离心管中,离心沉淀细胞,弃去上清液。
细胞沉淀(1*107个)中加入1ml Trizol裂解液
反复吸打几次后,目视可见细胞层溶液完全
-70保存
贴壁细胞
从培养容器中吸出并弃去培养液
培养瓶直接加入Trizol试剂,Trizol用量与细胞贴壁面积有关,15cm2细胞贴壁面积加入1mlTrizol。
反复吸打几次后,目视可见细胞层溶解完全。
-70度保存。
植物组织样品
准确取得所需新鲜组织后,如有必要可用PBS清洗干净,将所用组织切碎,装入冻存管中或者用锡箔包裹好。
立即投入液氮中保存。
2.血液类样品采集、保存方法
适用范围及样品量
全血/血细胞:Microarray Service;Sequencing Service; PCR Array& PCR Service
血清/血浆:Microarray Service;PCR Array& PCR Service
样本量
样本样本量
全血1-2ml (即每份样品2-4
管)
血浆1-2ml (即每份样品2-4
管)
血清1-2ml (即每份样品2-4
管)
在样品保存及转移过程中,应避免反复冻融样品
一般建议用新鲜的血液标本进行试验,如果标本已经保存较长时间,请先联系技术部门确认样本是否适合进行实验。
全血
采集好全血,转移至单独的冻存管中,按照每400-500ul/管分装。
短期保存可以再-20度或者-70度冰箱;长期保存放入液氮。
血浆
使用抗凝管采集全血,并尽快进行血浆分离:1000g 离心10min,分离血浆和细胞组分(抗凝剂一定不能是肝素)
将采集好的血浆转移至单独的冻存管中,按照每400-500ul/管分装。
短期保存可以再-20度或者-70度冰箱;长期保存放入液氮。
血清
使用凝血管采集全血,采血后两小时内分离血清;
采血后轻轻倒转采血管混合4-5次,直立置于室温待血液完全凝固,1000g 离心10min,分离血清。
将采集好的血清转移至单独的冻存管,按照每400-500ul/管分装。
短期保存可以再-20度或者-70度冰箱;长期保存放入液氮。
从全血中提取白细胞
抗凝血收集
取无菌的15ml离心管一只,首先用EDTA或者柠檬酸钠溶液充分吹打管壁,使离心管壁完全接触到该溶液,而后在管底留下少许该溶液(200ul左右)收集5ml全血后迅速用枪混匀或用手指拨动离心管底部混匀。
防止部分血液凝固。
全血白细胞分离(以3ml抗凝血为例说明)
向一只15ml离心管中加入3ml抗凝血,而后加入9ml红细胞裂解液。
盖紧管盖,温柔的颠倒混匀数下,不要剧烈震荡
将离心管置于室温放置10min
将离心管以2500g 离心5min
弃上清,尽可能将上清吸净,勿吸到管底白色斑块细胞
弃去上清后在管底出现可见的白色斑块,此斑块为富集的白细胞。
如果裂解不完全加入1mlPBS缓冲液重悬,然后重复第一步
充分裂解后,加入1mlPBS缓冲液清洗一次 2500g离心5min
弃上清,可获得血液样品中全部白细胞的80%以上,而后可加入适量的Trizol,用移液枪充分吹打,混匀,直至出现清亮不粘稠的液体。
而后可以将以上的Trizol试剂存在生物冰(0-4度)寄送,或者直接干冰寄送。
实验样品采集、保存方法
适用范围及样品量
适用范围:Microarray Service;Sequencing Service; PCR Service
样品量
样本样本量
组织50-100mg
悬浮细胞
约1*107个细胞,低速离心收集,弃去培养液;
加入2-5ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中;
低速离心沉淀细胞,弃去PBS;
放入-70度冰箱保存。
对于ChIP-chip实验为了获得理想结果,建议根据下述方法处理及保存悬浮细胞样品
取107个悬浮细胞低速离心,用10ml培养基将细胞沉淀重悬于50ml离心管中;
加入270ul 37%的甲醛,轻轻混匀,室温孵育10min;该步骤最好在通风橱完成
加入1ml 的甘氨酸,轻轻混匀,室温孵育5min,中和甲醛;
2000g离心5min,弃上清,用预冷的 PBS/EDTA 洗细胞两遍
2000g 离心5min,弃上清;
收集到的样品-80度冻存。
贴壁细胞
约1*107个贴壁细胞,胰酶消化;
加入PBS悬浮细胞,低速离心收集,弃去液体;
加入2-5 ml PBS 悬浮细胞,转入小离心管中;
低速离心沉淀细胞,弃去PBS
放入-70度冰箱保存。
对于ChIP-chip实验为了获得理想结果,建议根据下述方法处理及保存贴壁细胞样品
组织
采集新鲜组织(生物体死亡后10min内取材并保存好)
组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块
放入液氮或-70度冰箱保存
4.蛋白实验样品采集、保存方法
适用范围及样品量
适用范围:Microarray Service Other Service
样本量:
样本样本量
血清和血浆100-200ul
细胞107个
血清和血浆
采集新鲜血液,分离血清或血浆,放入-20度或者-70度冰箱保存
悬浮细胞
约1*107个细胞,低速离心收集,弃去培养液;
加入2-5ml PBS悬浮细胞,转入小离心管中;
低速离心沉淀细胞,弃去PBS;
放入-70度冰箱保存。
贴壁细胞
约1*107个贴壁细胞,胰酶消化;
加入PBS悬浮细胞,低速离心收集,弃去液体;
加入2-5 ml PBS 悬浮细胞,转入小离心管中;
低速离心沉淀细胞,弃去PBS
放入-70度冰箱保存。
组织
采集新鲜组织(生物体死亡后10min内取材并保存好)
组织块以PBS或生理盐水清洗干净,切为小块
放入液氮或-70度冰箱保存
5. 样品保存和运输
注意事项
将收集的各类样品用冻存管或离心管装好,保存在低温冰箱或者液氮中。
所使用的冻存管或离心管、枪头等必须高温灭菌处理,装好样品后管口需要以封口膜封好。
注意已保存的样品不要反复冻融。
干冰运输
根据干冰量准备大小适当的泡沫盒,在其中放入干冰(需要10公斤,至少为8公斤)和标本(用塑料袋或者塑胶手套装好),盒子内的空隙用旧报纸塞满,以防干冰挥发后有液体流出。
泡沫盒须选择较厚的,以免在运输过程中破碎导致样品丢失,分别用封箱带密封。
最后在外面套上一个纸盒子,也要用胶带密封。
冰袋运输
保存在RNAlater中的组织样本;
保存于Trizol中的细胞样本或经过匀浆的组织样本在短期(5 day)可使用冰袋运输。
液氮运输
冻存组织需要干冰或液氮运输。
液氮无法快递,适合市内运输。
常温运输
本市内细胞样品也可以直接常温运送,运送时在培养瓶中装满培养液并以封口膜封口,然而某些实验条件中包含时间限制,建议冻存后运输。
样品运输注意事项
打包好的样品交于快递公司,不提及干冰等字样
快递寄出,将快递单号告知销售,以便跟踪快递进程
务必在周日、周一、周二寄出快递,以免到达上海的时间是周末,公司无法查收。